專利名稱：一種微生物菌肥及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所述的技術(shù)方案屬于農(nóng)業(yè)肥料領(lǐng)域，具體的講，是屬于生物肥料領(lǐng)域中的微生物肥料領(lǐng)域的土壤改良劑。
背景技術(shù)：
長(zhǎng)期以來不合理的使用化學(xué)肥料帶來了土壤板結(jié)、鹽堿化、肥力下降、生態(tài)破壞以及農(nóng)副產(chǎn)品質(zhì)量下降等問題，已將受到國(guó)家有關(guān)部門和農(nóng)業(yè)科技界的高度重視。我國(guó)一直在尋找克服大量使用化肥造成的土壤板結(jié)鹽堿化、土壤肥力下降和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本提高等弊端。農(nóng)業(yè)肥料包括化學(xué)肥料和微生物肥料。而微生物肥料(生物肥料的一種)作為農(nóng)業(yè)肥料中的一種重要的農(nóng)業(yè)技術(shù)措施在發(fā)展高產(chǎn)、高效、優(yōu)質(zhì)農(nóng)業(yè)中的作用越來越被人們 重視，這給開發(fā)、推廣、應(yīng)用提供相當(dāng)大的發(fā)展空間。微生物肥料是以微生物生命活動(dòng)的作用導(dǎo)致得到特定肥料效應(yīng)的一種制品，使農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用肥料的一種，與傳統(tǒng)化肥和有機(jī)肥在要領(lǐng)和內(nèi)涵上有所不同。微生物肥料由微生物菌種劑和微生物肥料配方混合而制成。微生物肥料生產(chǎn)成本低，使用方便，應(yīng)用效果好，改良土壤環(huán)境，不污染環(huán)境，施用后不僅增產(chǎn)，而且能提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和減少化肥施用量。微生物肥料是生產(chǎn)綠色食品的肥料，是保護(hù)綠色環(huán)境的肥料，是很有發(fā)展前途的肥料。目前該項(xiàng)目在我國(guó)正處于新的發(fā)展階段。在國(guó)家有關(guān)部門充分重視使用化肥帶來的土壤板結(jié)、肥力下降、土壤鹽潰化、生態(tài)破壞、環(huán)境污染以及農(nóng)副產(chǎn)品質(zhì)量下降問題后，生物肥料中的微生物肥料得到迅猛的發(fā)展。但是由于菌種和成分配比等原因，目前市場(chǎng)的產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，在生產(chǎn)應(yīng)用上出現(xiàn)了一些問題，但由于各種原因，目前市場(chǎng)的產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，生產(chǎn)應(yīng)用上出現(xiàn)了一些問題。國(guó)家有關(guān)部門統(tǒng)計(jì)情況看60%的產(chǎn)品質(zhì)量存在問題，主要是有效菌數(shù)不達(dá)標(biāo)，保質(zhì)期過短。微生物肥料中的有效活菌數(shù)是產(chǎn)品質(zhì)量的重要指標(biāo)，有效活菌數(shù)不達(dá)標(biāo)，產(chǎn)品質(zhì)量就得不到保證，反映出來的應(yīng)用效果不穩(wěn)定。但是菌種的原因并不是影響肥料效果的唯一原因，事實(shí)上肥料種微生物菌種以外的其它成分和相互配比也會(huì)影響肥料的效果。因?yàn)楦鞒煞种g存在相互協(xié)作、拮抗的關(guān)系，合適的成分配比對(duì)于微生物肥料中的微生物繁殖、活性以及作物的生長(zhǎng)都有密切的關(guān)系。如果能在解決菌種問題同時(shí)，通過肥料成分配比的創(chuàng)新，協(xié)調(diào)菌種與成分配比之間的關(guān)系而取得更好的效果，有效提高產(chǎn)量，會(huì)對(duì)微生物肥料領(lǐng)域的發(fā)展起到極大的創(chuàng)新作用。在這種情況下，本發(fā)明提供的技術(shù)方案通過使用新的菌種和對(duì)肥料中成分配比的創(chuàng)新，可以非常顯著的提高解鹽促生微生物肥料的效力，是的本發(fā)明十分重要和有意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供的技術(shù)方案生產(chǎn)出的解鹽促生微生物肥料可以有效的解決長(zhǎng)期使用化肥造成的一系列問題，改善土壤環(huán)境。
為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種新的微生物肥料，以解決長(zhǎng)期使用化肥造成的一系列問題，改善土壤環(huán)境，提高解鹽促生微生物肥的效力。具體地，本發(fā)明提供了一種新的微生物菌種，所述微生物菌種為萎縮芽孢桿菌(Bacillus atrophaeus), ”(已于2012年5月11日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏編號(hào)為CGMCC No :6105)，具體的該菌種被命名為“解鹽菌I號(hào)”，該微生物分離自重鹽堿土，并經(jīng)馴化，長(zhǎng)期以來性狀穩(wěn)定。該微生物是本課題組新發(fā)現(xiàn)的菌種，該菌種菌劑經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明單獨(dú)使用具有解鹽促生的效果，目前沒有公開的記載。該菌種生物學(xué)特性為營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞桿狀，單個(gè)或呈短鏈狀排列，細(xì)胞大小寬O. 5 I. O μ m，長(zhǎng)2. O
4.O μ m，革蘭氏染色陽性，芽孢橢圓形，中生，不膨大。在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上菌落為乳白色，表面光滑，透明，圓形，該菌株最顯著的標(biāo)志就是在含有機(jī)氮培養(yǎng)基上菌落呈褐色或棕紅色。能利用多種氮源、碳源，生長(zhǎng)溫度20-55°C最佳生長(zhǎng)溫度28°C最適PH值6. 8-7. O。在不良環(huán)境下，菌體轉(zhuǎn)化為芽孢，芽孢對(duì)不良環(huán)境抗逆性強(qiáng)。
本發(fā)明的再一目的在于提供一種含有本發(fā)明所述萎縮芽孢桿菌的組合物，所述組合物為一種微生物肥料，可用于改善土壤環(huán)境。具體地，本發(fā)明所述微生物肥料包括以下重量配比的原料萎縮芽孢桿菌微生物菌種菌劑50-200g/L，黃腐酸30_200g/L、磷酸二氫鉀10-15g/L、磷酸15-25g/L、硫酸鋅37_62g/L、硫酸亞鐵81_135g/L、鑰酸銨0_3g/L、硫酸銅8-18g/L、硫酸錳 3-llg/L、硼砂 83-125g/L。更具體地，所述微生物肥料的原料重量配比為萎縮芽孢桿菌微生物菌劑100g/L，黃腐酸110g/L、磷酸二氫鉀12g/L、磷酸20g/L、硫酸鋅40g/L、硫酸亞鐵95g/L、鑰酸銨2g/L、硫酸銅10g/L、硫酸錳5g/L、硼砂90g/L。本發(fā)明還提供了一種生產(chǎn)微生物肥料時(shí)使用的配方，命名為“通用微生物肥料配方”。本發(fā)明的還一目的，在于提供一種本發(fā)明所述萎縮芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)方法，以及所述微生物肥料配方的配置方法。具體的，這種為生物肥料的生產(chǎn)方式如下對(duì)解鹽促生菌進(jìn)行發(fā)酵并進(jìn)一步加工為微生物菌種劑。將該菌種劑按照本發(fā)明提供的“通用微生物肥料配方”制成微生物肥料。本發(fā)明所提供的微生物肥料配方，相對(duì)于常見的市售微生物肥料而言，能夠大幅度提高作物產(chǎn)量。本發(fā)明所述菌種的發(fā)酵培養(yǎng)菌種以劃線培養(yǎng)的方式在I號(hào)培養(yǎng)基(I號(hào)培養(yǎng)基蛋白胨10g/L牛肉膏5g/L氯化鈉3g/L瓊脂18-20g/L，PH調(diào)至6. 8-7. 0)上保藏短期保藏條件為4°C，每2個(gè)月活化一次；長(zhǎng)期保藏條件為-20°C，每6個(gè)月活化一次。培養(yǎng)方式為自保存斜面取種后，劃線接入斜面培養(yǎng)基(I號(hào)培養(yǎng)基)，28°C培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)24小時(shí)；用無菌水沖洗斜面形成懸液；將I體積的菌懸液接入約20體積的I號(hào)液體培養(yǎng)基(I號(hào)液體培養(yǎng)基該培養(yǎng)基不含瓊脂，其他成分和含量與I號(hào)培養(yǎng)基相同，PH調(diào)至6. 8-7. 0)中，280C _30°C有氧培養(yǎng)至菌體濃度為IO8個(gè)/ml數(shù)量級(jí)；將得到的菌懸液加入到20倍體積的2號(hào)培養(yǎng)基(2號(hào)培養(yǎng)基蔗糖5g/L，牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，NaCl 5g/L, MgSO4O. 2g/L, KH2PO4O. 5g/L, CaCO3O. 5g/L, PH 調(diào)至 6. 8-7. 0)中，28°C _30°C有氧培養(yǎng)至菌體濃度為IO8個(gè)/ml數(shù)量級(jí)；將得到的菌懸液加入到10倍體積的3號(hào)培養(yǎng)基(3號(hào)培養(yǎng)基蔗糖 5g/L，蛋白胨 O. 5g/L，酵母膏 O. 4g/L，豆餅粉 10g/L, NaCl 5g/L，MgSO4O. 2g/L，KH2PO4O. 5g/L，CaCO3O. 5g/L，PH 調(diào)至 6. 8-7. I)中，28°C _30°C有氧培養(yǎng)至菌體濃度為 IO9 個(gè)
/ml數(shù)量級(jí)。將最終發(fā)酵形成的微生物菌種劑與本發(fā)明提供的配方混合均勻得到通用微生物肥料。本發(fā)明提供的生物肥料配方(均為其成分和配比在最終的肥料中的含量)黃腐酸110g/L、磷酸二氫鉀12g/L、磷酸20g/L、硫酸鋅40g/L、硫酸亞鐵95g/L、鑰酸銨2g/L、硫酸銅10g/L、硫酸錳5g/L、硼砂90g/L，微生物菌種劑100g/L。 根據(jù)本發(fā)明提供的技術(shù)方案產(chǎn)生的微生物肥料具有對(duì)植物解鹽促生，調(diào)節(jié)土壤結(jié)構(gòu)及酸堿以及較高肥效和較長(zhǎng)保質(zhì)期，解決了鹽堿土危害和保質(zhì)期及肥效不好的問題。
具體實(shí)施方式
以下，從具體制備本發(fā)明微生物菌肥及其取得的效果，來進(jìn)一步說明本發(fā)明，需要指出的是，所列舉的實(shí)施方式，是為了更好地說明本發(fā)明的效果，而不是限制本發(fā)明，在本發(fā)明公開技術(shù)方案允許的范圍內(nèi)，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，可以容易地對(duì)其中的一些做出改變，并不會(huì)影響本發(fā)明的效果。實(shí)施例I :解鹽I號(hào)微生物發(fā)酵生產(chǎn)先對(duì)解鹽I號(hào)菌種進(jìn)行活化，再用5ml無菌水沖洗斜面，形成菌懸液，菌懸液接入500ml三角瓶，該三角瓶含IOOml I號(hào)液體培養(yǎng)基，使用搖床培養(yǎng)24小時(shí)，培養(yǎng)條件為28°C，180-200rpm，檢測(cè)菌體濃度，在濃度達(dá)到IO8數(shù)量級(jí)；將500ml三角瓶中的菌液按5%的接種量轉(zhuǎn)接至盛裝有250L 2號(hào)培養(yǎng)基的500L的發(fā)酵罐中，接入量為12. 5L，發(fā)酵條件為溫度 28-30°C，空氣流量 18m3/h，轉(zhuǎn)速為 0_6h 200rpm, 6_8h 300rpm, 8h 至發(fā)酵結(jié)束 400rpm，培養(yǎng)26小時(shí)，檢測(cè)菌體濃度，在濃度達(dá)到IO8數(shù)量級(jí)df500L發(fā)酵罐中的菌液接入4m3發(fā)酵罐接入量240L，該發(fā)酵罐含有2. 4m33號(hào)培養(yǎng)基，發(fā)酵條件為溫度28_30°C，空氣流量80m3/h,轉(zhuǎn)速為0_6h 200rpm,6_8h 300rpm, 8h至發(fā)酵結(jié)束400rpm,培養(yǎng)18小時(shí),檢測(cè)菌體濃度，在濃度達(dá)到IO9數(shù)量級(jí)，停止發(fā)酵。實(shí)施例2 :微生物肥料的制備將實(shí)施例I制得的微生物菌種劑按照本發(fā)明提供的配方進(jìn)一步加工為微生物肥料。具體的，最終制成的微生物肥料中，黃腐酸110g/L、磷酸二氫鉀12g/L、磷酸20g/L、硫酸鋅40g/L、硫酸亞鐵95g/L、鑰酸銨2g/L、硫酸銅10g/L、硫酸錳5g/L、硼砂90g/L，微生物菌種劑100g/L實(shí)施例3微生物菌肥的制備將實(shí)施例I制得的微生物菌種劑按照本發(fā)明提供的配方進(jìn)一步加工為微生物肥料。具體的，最終制成的微生物肥料中，微生物菌種劑50g/L，黃腐酸30g/L、磷酸二氫鉀10g/L、磷酸15g/L、硫酸鋅37g/L、硫酸亞鐵81g/L、硫酸銅8g/L、硫酸猛3g/L、硼砂83g/L。實(shí)施例4微生物菌肥的制備將實(shí)施例I制得的微生物菌種劑按照本發(fā)明提供的配方進(jìn)一步加工為微生物肥料。具體的，最終制成的微生物肥料中，微生物菌種劑200g/L、黃腐酸200g/L、磷酸二氫鉀15g/L、磷酸25g/L、硫酸鋅62g/L、硫酸亞鐵135g/L、鑰酸銨3g/L、硫酸銅18g/L、硫酸錳llg/L、硼砂 125g/L。實(shí)施案例5解鹽菌I號(hào)的解鹽促生效果解鹽菌I號(hào)菌劑的促生效果實(shí)驗(yàn)，使用了實(shí)施案例I方法生產(chǎn)出的微生物菌劑在以下條件下進(jìn)行效果實(shí)驗(yàn)。在不同作物上進(jìn)行本發(fā)明提供的微生物菌劑的解鹽促生效果實(shí)驗(yàn)。設(shè)三個(gè)處理分別無鹽土對(duì)照、有鹽土對(duì)照、有鹽土加菌劑處理，每個(gè)處理設(shè)三個(gè)重復(fù)，鹽土鹽分含量為20. 02g/kgo將實(shí)驗(yàn)用土分別于121°C下濕熱滅菌2-3h,冷卻后以每盆35g的量分裝,花盆提前用75%酒精擦拭。挑選飽滿、大小一致的棉種，用75%的酒精消毒5min，再用O. 1%升汞溶液對(duì)棉種浸泡消毒lOmin，用滅菌蒸餾水沖洗3次，之后將適量作物種子在菌劑中浸泡接種4h，對(duì)照作物種子浸于滅菌蒸餾水中。浸好的作物種子風(fēng)干后，均勻播種于花盆中。種好后，將花盆置于室內(nèi)窗臺(tái)培養(yǎng)(晝夜溫度30°C /25°C，相對(duì)濕度40% )。記錄發(fā)芽數(shù)量，對(duì)比處理和對(duì)照的發(fā)芽率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表一數(shù)據(jù)均為各處理的發(fā)芽率)
權(quán)利要求
1.一株萎縮芽孢桿菌，其保藏編號(hào)為CGMCC No 6105o
2.含有權(quán)利要求I所述萎縮芽孢桿菌的組合物。
3.權(quán)利要求2所述組合物，所述組合物為微生物肥料，所述微生物肥料包含如下重量 配比的原料萎縮芽孢桿菌微生物菌種菌劑50-200g/L，黃腐酸30-200g/L、磷酸二氫鉀10-15g/L、磷酸15-25g/L、硫酸鋅37_62g/L、硫酸亞鐵81_135g/L、鑰酸銨0_3g/L、硫酸銅8-18g/L、硫酸錳 3-llg/L、硼砂 83-125g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其特征在于所述微生物肥料的原料組成配比為萎縮芽孢桿菌微生物菌劑100g/L，黃腐酸110g/L、磷酸二氫鉀12g/L、磷酸20g/L、硫酸鋅40g/L、硫酸亞鐵95g/L、鑰酸銨2g/L、硫酸銅10g/L、硫酸錳5g/L、硼砂90g/L。
5.制備權(quán)利要求2-4中任意一權(quán)利要求所述微生物肥料的方法，其特征在于所述方法包括發(fā)酵制備所述萎縮芽孢桿菌微生物菌劑，將制備所得的微生物菌劑與處方中的其余原料混勻，既得。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述方法中，發(fā)酵配制所述微生物菌劑的菌體濃度為9-12個(gè)/ml數(shù)量級(jí)。
7.權(quán)利要求I所述萎縮芽孢桿菌在調(diào)節(jié)土壤板結(jié)鹽堿化、改良已下降的土壤肥力中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求I所述萎縮芽孢桿菌在促進(jìn)植物生長(zhǎng)中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求2-4中任意一權(quán)利要求所述組合物在調(diào)節(jié)土壤板結(jié)鹽堿化、改良已下降的土壤肥力中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求2-4中任意一權(quán)利要求所述組合物在促進(jìn)植物生長(zhǎng)中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種微生物菌種及含有所述微生物菌種的生物肥料，所述微生物肥料包括萎縮芽孢桿菌微生物菌種菌劑，黃腐酸、磷酸二氫鉀、磷酸、硫酸鋅、硫酸亞鐵、鉬酸銨、硫酸銅、硫酸錳等原料，經(jīng)合理組合配置得到，本發(fā)明所述生物肥料可改良鹽漬化土壤，具有對(duì)植物解鹽促生，調(diào)節(jié)土壤結(jié)構(gòu)及酸堿以及較高肥效和較長(zhǎng)保質(zhì)期，解決了鹽堿土危害和保質(zhì)期及肥效不好的問題。
文檔編號(hào)C12N1/20GK102899264SQ20121021038
公開日2013年1月30日 申請(qǐng)日期2012年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月25日
發(fā)明者張鳳華 申請(qǐng)人:石河子大學(xué)