一種推斷人體死后間隔時(shí)間的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種推斷人體死后間隔時(shí)間的方法，屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域。所述方法包括：提取不同死亡時(shí)間的人的膽囊粘膜上皮細(xì)胞作為樣本，并將所述樣本涂片；將涂片后的所述樣本進(jìn)行染色；對(duì)染色后的樣本進(jìn)行圖像分析，分析的參數(shù)包括：膽囊粘膜上皮細(xì)胞的細(xì)胞核的異形指數(shù)、灰度參數(shù)和幾何參數(shù)，灰度參數(shù)包括平均光密度、平均灰度和積分光密度；將參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，獲得參數(shù)的線性回歸方程，根據(jù)線性回歸方程中的一個(gè)或多個(gè)確定死后間隔時(shí)間。本發(fā)明提供的推斷人體死后間隔時(shí)間的方法，在人體死后5～36h內(nèi)，通過(guò)分析膽囊粘膜上皮細(xì)胞的細(xì)胞核的異形指數(shù)、灰度參數(shù)和幾何參數(shù)，得到異形指數(shù)、灰度參數(shù)和幾何參數(shù)與PMI關(guān)系，從而推斷人體死后間隔時(shí)間。
【專利說(shuō)明】一種推斷人體死后間隔時(shí)間的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域，特別涉及一種推斷人體死后間隔時(shí)間的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 人體死后間隔時(shí)間（postmortem interval，PMI)推斷一直是法醫(yī)病理學(xué)研究的重 點(diǎn)、難點(diǎn)和熱點(diǎn)之一，尤其早期PMI的推斷，在刑事偵查中排查犯罪嫌疑人、仲裁死亡醫(yī)療 糾紛等司法實(shí)踐中更具現(xiàn)實(shí)意義?？陀^、準(zhǔn)確的早期PMI推斷，可為公安機(jī)關(guān)刑事偵查提供 重要的客觀線索，有利于公安機(jī)關(guān)辨別犯罪嫌疑人是否有作案時(shí)間，確定或縮小偵查范圍， 提高偵查效率和準(zhǔn)確度。此外，死后間隔時(shí)間的推斷有時(shí)對(duì)自然災(zāi)害的評(píng)估分析、保險(xiǎn)和財(cái) 產(chǎn)繼承也至關(guān)重要。
[0003] DNA是具有顯著生化穩(wěn)定性的遺傳物質(zhì)，同物種不同組織的體細(xì)胞的DNA含量是 恒定的。在機(jī)體死亡后，細(xì)胞組織發(fā)生缺血、缺氧，隨著氧自由基生成增多，細(xì)胞自身消化， 其結(jié)構(gòu)進(jìn)行解體，DNA也逐漸發(fā)生降解，其DNA的含量及細(xì)胞核的形態(tài)變化亦具規(guī)律性，表 現(xiàn)為核凝固、邊集、碎裂、溶解等改變。研究人員在研究死后間隔時(shí)間時(shí)，其研究對(duì)象均為腦 細(xì)胞、脾細(xì)胞或肝細(xì)胞，且研究人員均認(rèn)為僅在腦細(xì)胞、脾細(xì)胞或肝細(xì)胞中的DNA能夠準(zhǔn)確 反映死后間隔時(shí)間。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)中沒(méi)有針對(duì)膽囊反映死后間隔時(shí)間的問(wèn)題，本發(fā)明實(shí)施例提供 了一種推斷人體死后間隔時(shí)間的方法。所述技術(shù)方案如下 ：
[0005] 本發(fā)明提供了一種推斷人體死后間隔時(shí)間的方法，所述方法包括：
[0006] 提取不同死亡時(shí)間的人的膽囊粘膜上皮細(xì)胞作為樣本，并將所述樣本涂片；
[0007] 將涂片后的所述樣本進(jìn)行染色；
[0008] 對(duì)染色后的所述樣本進(jìn)行圖像分析，所述分析的參數(shù)包括：所述膽囊粘膜上皮細(xì) 胞的細(xì)胞核的異形指數(shù)、灰度參數(shù)和幾何參數(shù)，所述灰度參數(shù)包括平均光密度、平均灰度和 積分光密度；
[0009] 將所述參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，獲得所述參數(shù)的線性回歸方程，所述線性回歸方程為：

【權(quán)利要求】
1. 一種推斷人體死后間隔時(shí)間的方法，其特征在于，所述方法包括： 提取不同死亡時(shí)間的人的膽囊粘膜上皮細(xì)胞作為樣本，并將所述樣本涂片； 將涂片后的所述樣本進(jìn)行染色； 對(duì)染色后的所述樣本進(jìn)行圖像分析，所述分析的參數(shù)包括：所述膽囊粘膜上皮細(xì)胞的 細(xì)胞核的異形指數(shù)、灰度參數(shù)和幾何參數(shù)，所述灰度參數(shù)包括平均光密度、平均灰度和積分 光密度； 將所述參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，獲得所述參數(shù)的線性回歸方程，所述線性回歸方程為：
其中，YID為推斷的死后間隔時(shí)間，X ID為對(duì)應(yīng)測(cè)量的異形指數(shù)；
其中，YAe為推斷的死后間隔時(shí)間，X Ae為對(duì)應(yīng)測(cè)量的平均灰度；
其中，YMD為推斷的死后間隔時(shí)間，x MD對(duì)應(yīng)測(cè)量的平均光 密度；
其中，Υια)為推斷的死后間隔時(shí)間，χ ια)為對(duì)應(yīng)測(cè)量的積分光 密度； 根據(jù)所述線性回歸方程中的一個(gè)或多個(gè)確定死后間隔時(shí)間。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述樣本剪取自所述人死后5?36h的所 述膽囊粘膜上皮細(xì)胞。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述涂片的方法為：將取出的所述樣本置 于含有400mg/L的慶大霉素的生理鹽水中，首次剪取所述樣本的時(shí)間在所述人死后5h完 成，在18°C恒溫箱中存放0. 5h，然后在保濕盒內(nèi)，剪取0. 5cmX0. 5cmX lcm所述樣本1份， 且每隔lh剪取一次，將剪取的所述樣本浸于清水中洗滌，取出所述樣本并用濾紙吸干，將 吸干后的所述樣本涂布。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，將涂布后的所述樣本采用孚爾根染色方 法進(jìn)行染色。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述孚爾根染色方法包括：將備染的所述 涂片浸入固定液中固定〇. 5h,取出后置于6N鹽酸溶液中水解30min,取出后置于蒸饋水中 洗滌，再浸入由副品紅配制的席夫氏試劑中放置30min，用濃度為0. 5 %的偏重亞硫酸鈉溶 液浸洗2min，重復(fù)浸洗三次，流水沖洗5min后，進(jìn)行封片。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述固定液為卡諾氏固定液。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述圖像分析采用彩色病理圖像分析系 統(tǒng)。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，在顯微鏡高倍物鏡下攝取染色后的所述 涂片的圖像視野，以"弓"字型的形狀作為采集線路，保證采集的圖像無(wú)重復(fù)、無(wú)交叉，且每 張所述涂片隨機(jī)取10個(gè)視野，每個(gè)視野采集一幅圖像。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述幾何參數(shù)包括面積、平均直徑、等效 直徑和周長(zhǎng)。
【文檔編號(hào)】C12Q1/68GK104087660SQ201410269524
【公開日】2014年10月8日 申請(qǐng)日期:2014年6月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月17日
【發(fā)明者】李長(zhǎng)雷, 楊友華, 易卉玲, 舒細(xì)記 申請(qǐng)人:江漢大學(xué)