相關(guān)的申請本申請要求于2014年7月29日提交的臨時申請ussn62/030,460和于2014年12月11日提交的臨時申請ussn62/090,756的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容通過引用以其整體并入本文。發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及動物飼料組合物和飼料添加劑，其包含益生元、益生菌和益生菌代謝物(post-biotic)材料的混合物，及其在促進動物生長、健康和營養(yǎng)中的應(yīng)用。技術(shù)實現(xiàn)要素：益生元、益生菌和益生菌代謝物是相對新的術(shù)語，其用于描述一系列已證實在動物健康和營養(yǎng)中的益處的材料。通常地，術(shù)語益生元是指刺激動物消化系統(tǒng)中的細菌的生長和/或活性的材料，其產(chǎn)生有益的健康效果。益生元可以是選擇性發(fā)酵的成分，其允許胃腸道微生物群落的組成和/或活性二者中的特異性變化，這賦予宿主健康益處。益生菌通常是指有助于腸道微生物平衡的微生物，其進而在維持健康中發(fā)揮作用。很多種類的乳酸菌(lab)例如乳桿菌屬(lactobacillus)和雙歧桿菌屬(bifidobacterium)通常被視為益生菌，但還發(fā)現(xiàn)一些芽孢桿菌屬(bacillus)的物種，以及一些酵母為適合的候選者。益生菌代謝物是指來自在宿主中具有生物活性的益生菌生物的非活細菌產(chǎn)物或代謝副產(chǎn)物。益生菌用于改善動物健康和營養(yǎng)的用途詳實記載于文獻中。此外，益生元和益生菌代謝物提供了活微生物應(yīng)用的潛在替代或輔助治療。人們愈發(fā)了解益生元、益生菌和益生菌代謝物對免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)的影響，更具體地，它們在調(diào)節(jié)細胞因子的表達中的作用，所述細胞因子調(diào)控在局部和全身水平上的炎癥反應(yīng)。益生菌的攝取，例如，可以潛在地通過減少局部促炎性細胞因子的生成而穩(wěn)定腸粘膜中的免疫屏障。通過益生菌治療改變固有微生物群落的性質(zhì)顯示逆轉(zhuǎn)人的克羅恩病，食物過敏和特應(yīng)性濕疹的特征中的一些免疫紊亂[4,7-10]。多種益生菌物種或其后益生產(chǎn)物在健康人類患者，具有炎性腸病的人類患者和小鼠模型中誘導保護性細胞因子，包括il-10和tgf-β，并且抑制促炎性細胞因子，例如tnf[1,2,11]。假設(shè)在動物中可實現(xiàn)相當?shù)囊嫣帯１M管對這些主張的每一條都有提示性證據(jù)，但這些機制后的分子細節(jié)仍幾乎完全未確定。不希望受到理論束縛，認為這些機制允許使用包含益生元、益生菌和益生菌代謝物的飼料飼養(yǎng)動物，以將用于保持強大的免疫系統(tǒng)的能量轉(zhuǎn)移，并將其重新導向用于生長和發(fā)育。因此，有相當大的興趣使動物飼料包含含益生元、益生菌和后益生材料。例如，俄羅斯專利2018313公開了粉狀噴霧干燥的動物飼料，其基于乳并且包含某些雙歧桿菌和鏈球菌。盡管其提及飼料可飼喂給寵物，但所述動物飼料的主要目標是牲畜。盡管對各種“益生”治療的益處的興趣不斷增長，組合的益生元、益生菌和后益生治療對動物健康和營養(yǎng)的有益作用并沒有多少記載。對于將這些治療組合以提供在商業(yè)牲畜和伴侶寵物護理行業(yè)二者中的一些列益處的組合物，仍有機會。
發(fā)明內(nèi)容包含益生元、益生菌和益生菌代謝物的混合物的動物飼料組合物，及其制備方法，如通過特定生化標記物(例如，血糖水平、脂質(zhì)化學、肝功能、全血計數(shù)、甲狀腺功能和炎癥標記物如esr和c反應(yīng)蛋白)，總生理指標(例如體重增加，死亡率百分比)和/或飼料轉(zhuǎn)化率所示，其在整體健康和營養(yǎng)中有用。在多個方面，本發(fā)明提供了動物飼料組合物，其包含可用于促進動物生長、健康和營養(yǎng)的微生物的混合物。所述動物飼料組合物包含益生元；益生菌(其包含由固相基質(zhì)和深層液體發(fā)酵生產(chǎn)的乳桿菌屬微生物的混合物)；芽孢桿菌屬益生菌（其通過深層液體發(fā)酵生產(chǎn)）；源自乳桿菌屬物種的液體發(fā)酵培養(yǎng)基的益生菌代謝物；和填料材料的混合物。所述益生元是菊粉、低聚果糖或低聚葡糖。所述乳桿菌屬的混合物包含乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)、戊糖片球菌(pediococcuspentosaceus)和植物乳桿菌(lactobacillusplantarum)。在一些方面，所述乳桿菌屬的混合物是通過將固相基質(zhì)發(fā)酵的乳酸片球菌、戊糖片球菌和植物乳桿菌混合制備；并且通過深層液體發(fā)酵生產(chǎn)單個乳桿菌屬物種，其中所述乳桿菌屬細菌的每一種單獨地厭氧發(fā)酵，收獲，干燥并研磨，以產(chǎn)生具有295微米的平均粒徑的粉末，所述混合物的60%的大小范圍在175-900微米之間。優(yōu)選地，將來自固相基質(zhì)和液體發(fā)酵的乳桿菌屬以相等的重量比例混合。在一些方面，枯草芽孢桿菌(bacillussubtilis)具有seqidno:l的16s核酸序列。通過從單獨厭氧發(fā)酵的乳酸片球菌、戊糖片球菌和植物乳桿菌的每一種的離心收集上清；將從步驟(a)獲得的上清組合；將混合的上清冷凍干燥至小于約5重量%的含水量；并將干燥的混合上清研磨至295微米的平均粒徑，并且所述混合物的60%的大小范圍在175-900微米之間，從而制備益生菌代謝物。所述填料是例如米糠、大豆麩或麥麩，米粉、大豆粉或小麥粉，玉米粉，黑麥，大麥，高粱，葡萄糖，蔗糖，果糖，麥芽糖糊精，淀粉，或其任意組合。將益生元，乳桿菌屬益生菌和益生菌代謝物組分以相等的重量比例組合。在其他方面，將芽孢桿菌屬益生菌與益生元、乳桿菌屬益生菌和益生菌代謝物混合物以1:1至1:20的比例混合。益生元、益生菌和益生菌代謝物組分與谷物顆粒填料的比例在約1:1至約3:1的范圍。最終細菌濃度在約106和1011菌落形成單位(cfu)/克之間。本發(fā)明還包括動物飼料組合物，其包被0.01至0.5%的本發(fā)明的組合物。在一些方面，使用蠟、脂肪、糖或多糖粘合劑將所述益生元、益生菌和益生菌代謝物混合物包被到飼料顆粒上?？蛇x地，將所述益生元、益生菌和益生菌代謝物混合物整合到飼料顆粒，漿飼料中，或溶解到動物的飲用水供應(yīng)中。例如，將所述益生元、益生菌和益生菌代謝物混合物以約0.1至1kg/1000升，供料到水供應(yīng)中。本發(fā)明進一步提供了通過向動物施用根據(jù)本發(fā)明的動物飼料、飼料添加劑或補充劑，改善動物的健康和疾病抗性的方法。所述方法通過提高增重、減少廢氣或增加飼料蛋白的利用，來改善動物的健康。所述動物是例如蝦、魚類（finfish）、家禽、豬、反芻動物或伴侶寵物。除非另有定義，本文使用的所有技術(shù)和科學術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的一位普通技術(shù)人員通常所理解的相同含義。盡管下文描述了適合的方法和材料，但與本文所述那些相似或等效的方法和材料也可以用于本發(fā)明的實踐。本文中提及的所有出版物、專利申請、專利和其他文獻均通過引用以其整體明確并入。在矛盾的情況下，以本說明書(包括定義)為準。此外，本文描述的材料、方法及實例僅為說明性的且無意限制。本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點將體現(xiàn)并涵蓋在以下具體說明和權(quán)利要求書中。附圖說明圖1顯示了每種處理的平均生長的結(jié)果。圖2顯示了每種處理的平均重量變化。圖3顯示了fcr改善%與劑量的比較。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了由特定益生元、益生菌和益生菌代謝物的混合物組成的組合物，其用作動物飼料、飼料添加劑或飼料補充劑。除非另有說明，否則本文中提及的所有百分比均為基于組合物的總重量的重量百分比。所述組合物的益生菌組分包含益生菌枯草芽孢桿菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌和植物乳桿菌的混合物。在優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的組合物包含10-20重量%之間的乳酸片球菌、戊糖片球菌和植物乳桿菌的每一種，和1至約5wt%的枯草芽孢桿菌。在優(yōu)選的實施方式中，所述枯草芽孢桿菌具有以下的16s序列：根據(jù)本發(fā)明，待使用的益生細菌的水平將取決于其類型。優(yōu)選本產(chǎn)品包含105至1011菌落形成單位(cfu)/克之間的量的益生細菌。在本發(fā)明的特別優(yōu)選的組合物中，乳桿菌屬和芽孢桿菌屬生物體以至少1x108cfu/g的水平存在。如本文使用的術(shù)語“益生細菌”或“益生菌”是指在以足夠的量施用時賦予健康或營養(yǎng)益處的微生物。根據(jù)本發(fā)明的益生菌可以是活的或非活的。在益生菌是非活的情況下，它們必須是在結(jié)構(gòu)上基本完整的，這意味著這些非活的微生物仍足夠完整以避免或延遲在遠端腸道中的分解，從而使得所述非活的微生物(的保守結(jié)構(gòu))能夠與免疫系統(tǒng)，特別是面膜免疫系統(tǒng)相互作用。所述非活的益生菌在代謝上是有活性的。所述“在代謝上是有活性的”是指它們展現(xiàn)出對該類型的益生菌為特征性的至少一些殘余酶活性。如本文使用的術(shù)語“非活的”是指在任何已知條件下不能復制的細菌的群體。然而應(yīng)理解，由于群體中正常的生物變化，小比例的群體(即5%或更少)可仍然是活的，并且因此能夠在其他情況下定義為非活的群體中，在適合的生長條件下復制。如本文使用的術(shù)語“活細菌”是在可以復制的適合條件下，能夠復制的細菌的群體。不滿足“非活的”定義(如上文給出的)細菌的群體被認為是“活的”。如本文使用的術(shù)語“生物活性組分”是指在以足夠的量服用時，具有對動物的生理作用的組分。在本發(fā)明的一些實施方式中，所采用的益生細菌是活益生細菌?；钜嫔毦膽?yīng)用提供了以下優(yōu)點，即這些益生細菌可成為腸道微生物群落的一部分，從而提供額外的健康益處。根據(jù)本發(fā)明的益生細菌可使用本領(lǐng)域中已知的任何標準發(fā)酵方法生產(chǎn)。例如，固態(tài)或深層液體發(fā)酵。發(fā)酵的培養(yǎng)物可以是混合的培養(yǎng)物或單獨的分離物。益生菌代謝物組分組分源自在乳桿菌屬生物體離心后剩余的發(fā)酵上清，并且包含5至約20重量%的所述組合物。所述益生元組分包含葡糖-和/或果糖-低聚糖(例如蔗果三糖、蔗果四糖、果糖基蔗果四糖、bifurcose、菊粉二糖、菊粉三糖、菊粉四糖)，包括來自菊粉代謝的發(fā)酵產(chǎn)物。在優(yōu)選的實施方式中，所述后益生組分占所述配方的0.1至10wt%。此外，所述制劑可包含高至約50重量%的谷物顆粒填料，例如nutri-sure?，葡萄糖，或其他適合的填料材料。本發(fā)明的組合物經(jīng)配制用于在動物飼料中施用，包括漿劑和顆粒，但也可送給飲用水供應(yīng)遞送。在一個優(yōu)選的實施方式中，將所述組合物配制到飼料漿中。在另一個優(yōu)選的實施方式中，將所述組合物配制到飼料顆粒中。在又另一個優(yōu)選的實施方式中，將所述組合物直接配制到動物的飲用水供應(yīng)中。這些組合物改善動物的健康，包括提高增重、減少廢氣或增加飼料蛋白的利用。在配制用于動物飼料時，所述組合物通常以0.1至1kg/公噸飼料之間供料。優(yōu)選地，所述飼料組合物以50、100、200、300、400、500、600、700、800、900或更多克/公噸飼料供料。在飲用水中供料時，所述組合物通常以0.1至1kg/1000升之間供料。對于水生應(yīng)用，即蝦或魚類，所述組合物通常以0.1至10ppm供料。例如，對于水生應(yīng)用，所述飼料組合物以0.1、0.2、0.25、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5ppm供料。優(yōu)選地，所述飼料組合物以0.25或2.5ppm供料。在一些方面，將所述飼料組合物以約0.05%至5%添加到飲食上面。優(yōu)選以0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、2.0、3.0、4.0或5.0%。所述組合物的益生元、益生菌和益生菌代謝物組分優(yōu)選為粉末、干燥形式，特別是對于形成孢子的那些益生菌微生物，為孢子形式。根據(jù)本發(fā)明的組合物已經(jīng)冷凍干燥至水分含量小于20%、15%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或1%。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的組合物已經(jīng)冷凍干燥至水分含量小于5%。在一些實施方式中，將冷干粉研磨以降低粒徑。例如，所述粒徑是小于1000、900、800、700、600、500、400、300、200微米或更小。優(yōu)選地，將所述冷干粉研磨以降低粒徑，從而使所述粒徑小于800微米。在各個實施方式中，將所述凍干粉均質(zhì)化。進一步地，如果需要，可將組合物包封或結(jié)塊以進一步提高存活的可能性；例如，在蠟基質(zhì)、糖基質(zhì)、脂肪基質(zhì)或多糖基質(zhì)中。本發(fā)明的組合物用于生產(chǎn)動物飼料產(chǎn)品和補充劑，或作為動物飼料添加劑使用。盡管可以通過將所述益生元、益生菌和后益生組合物與動物飼料簡單混合，或通過將所述組合物作為飼料補充劑使用，而達到本發(fā)明的益處，但本發(fā)明的目標是提供包含均衡飲食配給和本發(fā)明組合物二者的即食型飼料產(chǎn)品?？蓪⑺鲲暳涎a充劑作為干燥粉末或液體提供。或者，可將本發(fā)明的組合物配制成“舔塊”?？梢酝ㄟ^使用益生元、益生菌和后益生混合物包被預生產(chǎn)的即食型動物飼料產(chǎn)品，而生產(chǎn)所述飼料產(chǎn)品?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域中已知的方法完成動物飼料產(chǎn)品的包被。例如，可將本發(fā)明的干燥組合物分散在添加動物飼料產(chǎn)品的低熔點油脂或蠟中，或可選地，將包含益生元、益生菌和后益生混合物的熔融油脂或蠟噴到動物飼料產(chǎn)品上。此外，可通過將益生元、益生菌和后益生混合物與任何適合的成分，例如常用于動物飼料產(chǎn)物中的那些，來制備包含本發(fā)明組合物的飼料產(chǎn)物。隨后，根據(jù)需要，可以很多不同的方式生產(chǎn)動物飼料。然而，用于生產(chǎn)本發(fā)明的飼料產(chǎn)品的特別適合的方式是通過擠壓蒸煮。這可以通過本領(lǐng)域中熟知的方法完成。例如，在一個適合的方法中，將飼料混合物送入預處理器中。所述飼料混合物由淀粉源和其他成分，例如糖、鹽、香料、調(diào)味劑、維生素、礦物質(zhì)、調(diào)味劑、著色劑、抗氧化劑、蛋白質(zhì)源、酵母提取物、脂肪等構(gòu)成。適合的淀粉源是例如玉米、水稻、小麥、甜菜、大麥、藻類、大豆和燕麥。所述淀粉源可以是谷物、膳食、谷蛋白或面粉。適合的蛋白質(zhì)源可選自任何適合的動物或植物蛋白質(zhì)源；例如肉粉、骨粉、魚粉、大豆蛋白濃縮物、乳蛋白、谷蛋白、酵母提取物，乳清等。蛋白質(zhì)源的選擇可以在很大程度上由營養(yǎng)需求、適口性考慮以及所生產(chǎn)的飼料產(chǎn)品的類型決定。當然，淀粉源也可以是蛋白質(zhì)源。如果需要，也可包括不溶纖維源，例如麥麩、玉米糠、米糠、黑麥麩等。如果需要，也可包括可溶纖維源，例如菊苣纖維、燕麥麩濃縮物、瓜爾膠、角豆膠、黃原膠等。取決于飼料產(chǎn)品的期望形式，飼料混合物的淀粉含量可以改變。例如，對于膨化谷物產(chǎn)品，飼料混合物優(yōu)選包括高至約40重量%的淀粉。然而，對于片狀產(chǎn)品，不必在飼料混合物中使用大量的淀粉，誒，可以將非膨化產(chǎn)品壓片。在預處理器，將水或蒸汽或二者混合到飼料混合物中。將足夠的水或蒸汽混合到飼料混合物中，以潤濕所述飼料混合物。如果需要，可在預處理器中將飼料混合物的溫度提高至約60-90℃。不必對飼料混合物進行預處理，但進行預處理是有利的。隨后，將離開預處理器的潤濕飼料與益生元、益生菌和后益生組合物一起進料至擠出機。擠出機可以是任何適合的單螺桿或雙螺桿蒸煮擠出機。適合的擠出機可以得自wengermanufacturinginc,clextralsa,buhlerag等。在通過擠出機期間，潤濕的飼料通過蒸煮區(qū)，在此對其進行機械剪切和加熱，例如高達最高至約150℃的最高溫度，和成形區(qū)。根據(jù)需要，成形區(qū)的表壓為約300kpa至約10mpa。如果需要，可將水或蒸汽或二者引入到蒸煮區(qū)中。如果需要，可將少量的食用油與潤濕的飼料一起進料至擠出機中，以促進擠出過程或作為油溶性添加劑的載體?？梢允褂萌魏芜m合的油，例如植物油，如向日葵油、紅花油、玉米油等。如果使用油，則特別優(yōu)選單不飽和物高的油。還優(yōu)選氫化油或脂肪。優(yōu)選所使用的油的量保持低于約1重量%。用力使離開擠出機的食品基質(zhì)通過適合的模具。具有對應(yīng)于模具孔的橫截面形狀的成形的擠出物離開模具。如果要生產(chǎn)片狀產(chǎn)品，隨后可將小塊轉(zhuǎn)移到壓片裝置。適合的裝置是熟知的并且廣泛用于谷物工業(yè)中，并且可以購自例如瑞士的buhlerag。如果需要，可以在壓片前，將小塊部分干燥。隨后，將小塊干燥至低于約10重量%的含水量。如常規(guī)地，這在熱風干燥劑中方便地進行。干燥的即食型產(chǎn)品包含約105至約1011個菌落形成單位(cfu)/克(g)的干燥飼料產(chǎn)品；優(yōu)選約106至約109cfu/g。干燥的飼料產(chǎn)品可包含0.01至0.5重量%的益生元、益生菌和益生菌代謝物的混合物?？蓪ι鲜鰧嵤┓绞竭M行多種改變。例如，不必通過擠出蒸煮生產(chǎn)谷物產(chǎn)品。相反，谷物產(chǎn)品可以通過生產(chǎn)干燥的即食型谷物小塊的任何適合方法生產(chǎn)。例如，可以用水蒸煮飼料材料以提供蒸煮的糊。隨后，將所述糊輥式干燥以生產(chǎn)干燥的片，通常厚度為約0.6至約1mm。以下實施例給出了對本發(fā)明的更好的理解，所描述的實施例是用于說明性的但不應(yīng)被解釋為限定本發(fā)明。實施例實施例1：組合物的制備本發(fā)明的組合物通過深層液體發(fā)酵和固相基質(zhì)發(fā)酵的組合而制備。預混物a：乳桿菌屬的固相基質(zhì)發(fā)酵：使用標準厭氧深層液體發(fā)酵方案，在分離的發(fā)酵罐中培養(yǎng)乳酸片球菌、戊糖片球菌和植物乳桿菌的單獨的純化分離物。通過離心從發(fā)酵罐回收單獨的生物體，以基于重量的相等比例混合在一起，隨后添加至以下混合物：1份菊粉、2.2份分離的大豆蛋白、8份大米粉和0.25%w/w氯化鈉、0.045%w/w碳酸鈣、0.025%w/w硫酸鎂、0.025%w/w磷酸鈉、0.012%w/w硫酸亞鐵和29.6％水。允許這種混合在30oc下發(fā)酵達5天。在發(fā)酵完成后，將整個混合物冷凍干燥至含水量小于5%，研磨至295微米的平均粒徑，且60%的產(chǎn)物粒徑范圍在175-840微米之間，并均質(zhì)化。粉末化產(chǎn)品的最終微生物濃度在109和1011cfu/g之間。預混物b：乳桿菌屬的深層發(fā)酵：使用標準厭氧深層液體發(fā)酵方案，在菊粉的存在下，在分離的發(fā)酵罐中培養(yǎng)乳酸片球菌、戊糖片球菌和植物乳桿菌的單獨的純化分離物。發(fā)酵后，將單獨的培養(yǎng)物過濾、離心并冷凍干燥至含水水平小于約5%，隨后研磨至295微米的平均粒徑，且60%的產(chǎn)物粒徑范圍在175-840微米之間，并均質(zhì)化。粉末化產(chǎn)品的最終微生物濃度在109和1011cfu/g之間。預混物c：發(fā)酵上清：收集從上文預混物b的深層發(fā)酵物生產(chǎn)的，生物體離心后剩余的上清，混合在一起，冷凍干燥至含水水平小于約5%，隨后研磨至295微米的平均粒徑，且60%的產(chǎn)物粒徑范圍在175-840微米之間，并均質(zhì)化。預混物d：芽孢桿菌屬的深層發(fā)酵：將枯草芽孢桿菌(34klb)的樣品添加到250ml錐形燒瓶，其還包含100ml蒸餾的去離子水、2克營養(yǎng)肉湯、2克amberferm(酵母提取物)和4克麥芽糖糊精的無菌溶液。將燒瓶密封并放置在30oc的軌道搖床上。允許培養(yǎng)物生長3-5天。通過向具有900ml蒸餾的去離子水的1升燒瓶添加18克營養(yǎng)肉湯、18克amberferm和36克麥芽糖糊精制備更大的培養(yǎng)物。將燒瓶密封并滅菌，如上文所述。冷卻后，添加100ml的來自所述250ml錐形燒瓶的微生物培養(yǎng)物。將所述1升燒瓶密封，放置在定軌搖床上，并允許在30oc生長另外的3-5天。在引入到發(fā)酵罐之前的最終培養(yǎng)期中，將來自1升燒瓶的培養(yǎng)物在無菌條件下轉(zhuǎn)移到無菌的6升容器，并在30oc持續(xù)通氣發(fā)酵直到達到穩(wěn)定期。將所述6升培養(yǎng)燒瓶的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐中，其還裝有由1份酵母提取物和2份葡萄糖制成的無菌生長培養(yǎng)基。所述發(fā)酵罐在ph7.0和35oc的有氧條件下運行，直到細胞密度達到1011cfu/ml。對于干燥的產(chǎn)物，通過濾器清空所述發(fā)酵罐，離心并回收細胞團塊。將細胞團真空干燥直至含水水平降至低于約5%。干燥產(chǎn)品的最終微生物活性通常在約108和1011cfu/g之間。通過將預混物a、b和c以相同的重量比例組合，并混合至均勻，隨后在預混物d和填料中混合來制備最終的組合物。通常，最終的益生元、益生菌和后益生組合物包含50重量%的組合的預混物a、b和c，3.33重量%的預混物d，和46.67重量%的nutri-sure?。在此制劑中的乳桿菌屬的最終活性是6.9x109cfu/g，并且芽孢桿菌屬的最終活性是3.7x108cfu/g。實施例2：動物飼料產(chǎn)品的配制——包被通過以下方法，將來自實施例1的混合物配制到動物飼料顆粒(蝦、家禽、豬和牛)上：a.將1千克的低熔點油脂(例如，具有47-48oc熔點的氫化大豆油)加熱至稍高于所述熔點(50oc)。一旦所有的油脂都熔化，在快速攪拌下，將來自實施例1的1千克的干燥粉末化組合物分散至所述熔化物中。隨后，快速地向此熔化物添加999千克的動物飼料顆粒，并快速攪拌以獲得均勻的包衣。允許所述顆粒在室溫下風干過夜。包衣顆粒的最終微生物活性在107和109cfu/g之間。b.可選地，將低熔點油脂(例如，具有47-48oc熔點的氫化大豆油)添加至罐中，并在攪拌下加熱至50oc。將熔化的油脂噴到由增壓空氣加熱至約45oc的飼料顆粒的攪拌床上。油脂的最終重量在1至5%w/w的范圍。將來自實施例的干燥組合物以0.01和1%w/w的重量添加至包被飼料，關(guān)閉加熱氣流，并允許所述床混合和干燥，直到其達到室溫。c.在劇烈攪拌下，將來自實施例1的1千克的干燥粉末組合物分散到10千克的沙丁魚油中。在持續(xù)攪拌下，以1kg/分鐘的速率將此混合物噴灑到飼料顆粒的床上，在以60赫茲操作的帶式摻合器中混合，以達到1%w/w的最終裝載。實施例3：動物飼料產(chǎn)品的配制——擠出制備以下的干燥混合組合物：成分干燥混合物中的水平(%)經(jīng)研磨的玉米(200微米)64.0經(jīng)研磨的大豆粉(200微米)29.5與足夠的水混合，以制備100%組合物，并在高溫(120-150oc)下，混合20分鐘。在此過程期間，可向此混合物添加脂肪(2.6%w/w)。在蒸煮后，將混合物輸送到wengertx52雙螺桿擠出機中，并將螺桿設(shè)置在輸送配置(低剪切，低摩擦)中，并以23.5kg/hr的速率添加水。通過accurate螺桿進料器，以足以達到0.1wt%的最終組合物的速率，將來自實施例1的粉末組合物稱量到擠出機中。將所產(chǎn)生的糊料推過具有3mm開口的模具。使用四刃轉(zhuǎn)刀將擠出物切成3mm長度。收集所得的顆粒，并輸送通過35oc的加壓氣流，對流干燥爐，直到含水水平低于10%。最終組合物的微生物活性在106-108cfu/g之間。實施例4：蝦飼養(yǎng)試驗在德克薩斯州阿蘭薩斯港的texasa&magrilife海洋養(yǎng)殖實驗室進行53天的蝦飼養(yǎng)研究。將具有0.005克的平均初始重量的pl10動物平均分在三個處理罐中：?對照(僅蔗糖)?0.25ppm劑量的來自實施例1的組合物?2.5ppm劑量的來自實施例1的組合物。每個罐中的放養(yǎng)密度為3384只蝦/m2。對所有罐，經(jīng)過0-5天，以基于降低fcr的40%蛋白質(zhì)飲食進行飼養(yǎng)。在0-3天，除fcr中所需的飼料之外，每天添加9g的45%蛋白標準參考飲食(srd)?？紤]罐中的剩余飼料，水質(zhì)和生物絮凝水平，每天評估飼料蛋白率和fcr。每天在早晨喂養(yǎng)期間，添加作為液體(溶解在水中的干燥組合物)的實施例1組合物。使用軟水交換管道系統(tǒng)。在53天后，研究終止，并測定每個管中的平均蝦重量。(圖1和圖2)。實施例5：家禽飼養(yǎng)研究在環(huán)境受控的禽舍進行研究。鳥圈養(yǎng)在畜欄中(17只雞/m2)。將落地畜欄分配至6種處理：1.對照漿飼料2.對照顆粒飼料3.100g實施例1組合物/噸漿飼料4.1,000g實施例1組合物/噸漿飼料5.100g實施例1組合物/噸顆粒飼料6.1,000g實施例1組合物/噸顆粒飼料。安排實驗畜欄的分布以避免禽舍中位置的任何影響。所述畜欄在它們之間具有雙層絲網(wǎng)，以放置不同畜欄中的鳥之間的物理接觸，并且使芽孢桿菌屬孢子的交叉污染的風險最小化。鳥可自由獲得飼料和水。每個畜欄裝備將以每天手動填充的料斗進料器。使用新刨花作為墊物。在前三天，將初始孵化溫度保持在30oc，并且隨后到實驗結(jié)束時，逐漸降低至20oc。在生活的前兩天，提供24小時的光照，其在隨后的12天減少至22小時，并且在試驗的剩余時間降低至20小時。根據(jù)所提供的指示，在第一天進行艾美球蟲疫苗接種(通過在孵化所中噴灑球蟲活疫苗)。不對雞進行針對其他疾病的疫苗接種。在試驗的1至42天期間，使用沒有抗生素和球蟲抑制劑的基本飲食。成分(g/kg)為：玉米450、大豆粉48％185、全脂大豆135，小麥200和維生素-礦物質(zhì)起動預混物30。營養(yǎng)分析(g/kg)為：粗蛋白200；醚提取物72；粗纖維41；灰分64；賴氨酸11_5；甲硫氨酸4_6；胱氨酸4_4。以100g/t和1000g/t飼料向漿飼料和顆粒飼料添加實施例1的組合物。在從孵化場到達后，以及在7、14、21、28、35和42天，對所有鳥單獨稱重。以畜欄為基礎(chǔ)記錄飼料消耗，同時作為活重記錄。調(diào)整的飼料轉(zhuǎn)化率(fcr)結(jié)果顯示在圖3中。包含實施例1的組合物的顆粒飼料顯示相對于對照fcr的顯著改善。實施例6：家禽飼養(yǎng)研究在具有粘土底板的煤渣塊結(jié)構(gòu)中進行研究。提供持續(xù)的光照。將鳥圈養(yǎng)在畜欄(27只/畜欄)中，其提供0.74ft2/只鳥的放養(yǎng)密度。將落地畜欄分配至6種處理(每個處理10個重復畜欄)：1.對照漿飼料2.對照顆粒飼料3.50克的5%劑量的組合物1/mt漿飼料中4.500克的5%劑量的組合物1/mt漿飼料中5.500克的2%劑量的組合物1/mt顆粒飼料中6.500克的4%劑量的組合物1/mt顆粒飼料中。在第0天使用新刨花，并在第4天以每個畜欄相等的量(4lb./畜欄)引入使用過的墊物。在放置之前，將第4天添加的墊物均一化，并且包含足夠水平的大腸桿菌(e.coli)、沙門氏菌和梭菌，以允許對未經(jīng)治療的雞的適度攻擊。在試驗開始之前，對所有畜欄仔細檢查以確保沒有允許肉雞在畜欄之間移動的開口。鳥可自由獲得飼料和水。在第0天放置和稱重之前，使用coccivac?-b對鳥進行針對球蟲病的噴霧疫苗接種。在研究期間，每天檢查所有畜欄。觀察包括飼料和水的可得性，以及孵化器控制，以達到期望的溫度。以0-14、15-28和29-42天分別為起始、生長和終止飼料的方案投放漿形式的飼料。如附件a中所示，從大基礎(chǔ)飲食制備每種飼料類型，并分成等分試樣，并隨后與測試物混合，此后如上文所述將三份的飲食?；８郊–飼料配方如上文所述，向漿飲食和顆粒飲食添加實施例1的組合物。按照畜欄，在第0、35和42天對所有鳥稱重，并且在第14、28和42天稱量所有畜欄飼料。下文顯示了第42天的體重(bw)和調(diào)整的飼料轉(zhuǎn)化率(fcr)結(jié)果。包含實施例1的組合物的顆粒飼料顯示超過對照飲食的5.44%的增重改善，和3.2%的fcr改善。對飼料轉(zhuǎn)化率(fcr)進行重量調(diào)整。實施例7：豬飼養(yǎng)研究–美國方案從伊利諾伊大學進口豬研究實驗室獲得總計144只斷奶仔豬(72只閹公豬、72只小母豬；18-21日齡)。每個畜欄兩只閹公豬和兩只小母豬，并且在整個試驗中，豬隨意獲得飼料和水。根據(jù)隨機完全分隔設(shè)計，在斷奶時，根據(jù)體重和世系分隔豬。采用標準的三期飼養(yǎng)方案：項目，%1期2期3期經(jīng)研磨的玉米31.2647.3457.90干乳清25.0020.005.00大豆粉20.2423.6931.18乳糖10.00--appetein7.503.00-choicewhite油脂3.003.003.00石灰石1.141.090.90磷酸二鈣0.630.851.35氯化鈉0.100.10-礦物預混物0.350.350.35維生素預混物0.200.200.20l-賴氨酸hcl0.040.050.02d,l-甲硫氨酸0.140.070.02氧化鋅0.400.26-硫酸銅--0.08以0、0.05或0.5%將實施例1的組合物添加到各期飲食的上部，以產(chǎn)生三種實驗飲食處理。1期和2期各飼喂1周，并且在研究的最后兩周飼喂3期飲食。對3種處理的每一種有12個重復的畜欄，并且每個畜欄包含4只豬。配制飲食以滿足或超出基于nrc(2012)的生長期的營養(yǎng)需求。在4周的時期中每周記錄豬和飼料重量以測定體重(bw)、平均日增重(adg)和平均日采食量(adfi)，由此計算每周和整體的f:g。相對于對照腿的飼料轉(zhuǎn)化改善百分比顯示在圖3中。實施例8：豬飼養(yǎng)研究–泰國在90天的生長實驗中，使用養(yǎng)殖棚中的8個畜欄，每個畜欄安置45只豬(總計360只，8周齡，初始平均bw=19.5kg)。在試驗過程中，以典型的漿飲食飼養(yǎng)豬，其包含實施例1的組合物。根據(jù)完全隨機的設(shè)計分配豬，每個畜欄45只豬，并且有4個重復。處理為：1.對照(無添加的biology)2.實施例1的組合物，200克/噸漿飼料。在90天后，平均每天體重增重為15%，并且相對對照的飼料轉(zhuǎn)化改善百分比為6.3%。實施例9：奶牛飼養(yǎng)研究對1200頭奶牛，以5%的成品飼料配給的當量，向液體飼料添加劑添加實施例1的組合物。以這種飲食飼喂奶牛30天的時期。在這段時間記錄奶生產(chǎn)，并與前一月比較。觀察到與前一月相比奶生產(chǎn)增加1.9%且奶油含量提高3.8%。當前第1頁12