一種用于防治豬腹瀉的飼料添加劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及飼料領(lǐng)域，具體設(shè)及一種家畜飼料添加劑及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 畜類飼料添加劑是指在畜類飼料生產(chǎn)加工、使用過程中添加的少量或微量物質(zhì)， 在畜類飼料中用量很少但作用顯著。畜類飼料添加劑是現(xiàn)代畜類飼料工業(yè)必然使用的原 料，對強(qiáng)化基礎(chǔ)畜類飼料營養(yǎng)價(jià)值，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能，保證動(dòng)物健康，節(jié)省畜類飼料成本， 改善畜類產(chǎn)品品質(zhì)等方面有明顯的效果。
[0003] 豬腹瀉病是因豬感染病毒產(chǎn)生的，各種年齡的豬都能感染發(fā)病。哺乳豬、架子豬或 肥育豬的發(fā)病率很高，尤W哺乳豬受害最為嚴(yán)重，母豬發(fā)病率變動(dòng)很大，約為15-90%。病豬 是主要傳染源。病毒存在于腸絨毛上皮細(xì)胞和腸系膜淋己結(jié)，隨糞便排出后，污染環(huán)境、飼 料、飲水、交通工具及用具等而傳染。如果一個(gè)豬場陸續(xù)有不少窩仔豬出生或斷奶，病毒會 不斷感染失去母源抗體的斷奶仔豬，使本病呈地方流行性，在運(yùn)種繁殖場內(nèi)，豬流行性腹瀉 可造成5-8周齡仔豬的斷奶期頑固性腹瀉。豬腹瀉病潛伏期一般為5-8天，人工感染潛伏期 為8-24小時(shí)。主要的臨床癥狀為水樣腹瀉，或者在腹瀉之間有嘔吐。嘔吐多發(fā)生于吃食或吃 奶后。癥狀的輕重隨年齡的大小而有差異，年齡越小，癥狀越重。一周齡內(nèi)新生仔豬發(fā)生腹 瀉后3-4天，呈現(xiàn)嚴(yán)重脫水而死亡，死亡率可達(dá)50%，最高的死亡率達(dá)100%。病豬體溫正常 或稍高，精神沉郁，食欲減退或廢絕。斷奶豬、母豬常呈精神萎頓、厭食和持續(xù)性腹瀉大約一 周，并逐漸恢復(fù)正常。少數(shù)豬恢復(fù)后生長發(fā)育不良。肥育豬在同圈飼養(yǎng)感染后都發(fā)生腹瀉， 一周后康復(fù)，死亡率成年豬癥狀較輕，有的僅表現(xiàn)嘔吐，重者水樣腹瀉3-4天可自 愈。
[0004] 抗生素是治療豬腹瀉病的主要飼料添加劑，其在防病治病的同時(shí)，還具有促進(jìn)動(dòng) 物生長、提高飼料轉(zhuǎn)化率的功效。除此之外，還有提高動(dòng)物產(chǎn)品的品質(zhì)，減少動(dòng)物的糞臭，從 而改善飼養(yǎng)環(huán)境等功效。不同種類的抗生素用于飼料添加的劑量及所具有的促進(jìn)生長效果 不盡相同。但總體來說，用量一般在每噸飼料中添加10~50g抗生素之間。效果上一般來說 可提高豬雞生產(chǎn)速率和飼料利用率10%~15%，降低死亡率5%，其中對雞的作用要稍低于 對豬的作用。W鹽霉素為例，其對肉雞的育成率可提高37~76個(gè)百分點(diǎn)，平均增重可提高 5%~38%，飼料消耗降低2%~37%。在W鹽霉素進(jìn)行的產(chǎn)蛋雞飼料添加試驗(yàn)結(jié)果顯示，其 平均初產(chǎn)日齡增加13天，產(chǎn)卵重量提高8.1 %，產(chǎn)卵率提高3.5%。由此可見，抗生素作為飼 料添加劑應(yīng)用的效果是非常明顯的。
[0005] 隨著抗生素作為飼料添加劑使用的日益增加，也出現(xiàn)了反對將抗生素作為飼料添 加劑使用的意見，而且運(yùn)種反對意見在近年愈加強(qiáng)烈。持反對意見的主要是從事醫(yī)用抗生 素研究和應(yīng)用的人員。他們認(rèn)為對食用動(dòng)物長時(shí)間低劑量地使用抗生素，無論用作飼料添 加劑還是預(yù)防用藥，都比短時(shí)間大劑量治療用藥更會引起生態(tài)環(huán)境對耐藥菌的篩選，并且 細(xì)菌中耐藥基因可W在人群中細(xì)菌、動(dòng)物群中細(xì)菌和生態(tài)系統(tǒng)中細(xì)菌間互相傳遞，由此可 導(dǎo)致致病菌產(chǎn)生耐藥性，從而引起人類和動(dòng)物感染疾病治療的失敗。事實(shí)上，自從抗生素被 發(fā)現(xiàn)w來，其使用壽命確實(shí)變得越來越短。在青霉素剛進(jìn)入臨床應(yīng)用時(shí)，其使用劑量僅為 幾，十個(gè)單位，到60~70年代，青霉素在醫(yī)用臨床上的一般肌肉注射治療劑量為10萬單位， 隨著青霉素應(yīng)用的更加普及，其使用劑量不得不迅速增大。到目前，臨床上使用80萬單位的 肌肉注射劑量進(jìn)行治療，效果甚至還不如從前。在不斷出現(xiàn)的新抗生素中，臨床使用壽命均 變得越來越短。運(yùn)種現(xiàn)象的出現(xiàn)，使得臨床上對新抗生素的需求越來越大。由于發(fā)現(xiàn)一種新 抗生素所需的投入非常巨大，運(yùn)種現(xiàn)象造成了經(jīng)濟(jì)上的極大損失。況且，隨著新抗生素的增 加，發(fā)現(xiàn)新抗生素的難度已變得越來越大。
[0006] 為解決上述問題，科研人員不斷探索家畜飼料添加劑新品種W代替抗生素。一些 學(xué)者開始從免疫學(xué)角度對家畜病害防治進(jìn)行研究，認(rèn)為在飼料中添加免疫增強(qiáng)劑是增強(qiáng)家 畜免疫功能，抵抗腹瀉病的一種有效實(shí)用的方法。但是，動(dòng)物的免疫系統(tǒng)是相對穩(wěn)定的，在 正常情況下免疫系統(tǒng)會將機(jī)體的免疫功能整合在一個(gè)適宜的水平。免疫增強(qiáng)劑只可能較大 幅度地提高免疫功能低下的家畜的免疫水平，而對于免疫功能正常的家畜會因機(jī)體自身免 疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)阻止其免疫水平過高而影響免疫增強(qiáng)劑的真實(shí)效果，況且免疫水平也并非越 高越好，免疫水平過高會導(dǎo)致免疫亢進(jìn)，引起各種類型的超敏反應(yīng)、炎癥和自身免疫性疾 病。在眾多的免疫增強(qiáng)劑中，溶菌酶和多糖類成分因其低藥殘、生物毒性小的優(yōu)點(diǎn)而引起了 學(xué)者們重視。
[0007] 溶菌酶（lysozyme)又稱胞壁質(zhì)酶(muramidase)或N-乙酷基胞壁質(zhì)聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohy化lase)，是一種能破壞致病菌細(xì)胞壁中黏多糖的水溶性蛋白 酶。它是由Fleming在1922年在人唾液和眼淚中發(fā)現(xiàn)的存在溶解細(xì)菌細(xì)胞壁的酶，故命名為 溶菌酶。此后，在鳥類、家禽的蛋清和哺乳動(dòng)物淚液、唾液、血漿、乳汁、胎盤W及體液、組織 細(xì)胞內(nèi)等發(fā)現(xiàn)了溶菌酶，其中W蛋清中含量最豐富（約0.3%);在一些植物體如卷屯、菜、蘿 l·、無花果和微生物體內(nèi)也存在溶菌酶。研究發(fā)現(xiàn)枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)中的 溶解子就是溶菌酶的前身。
[0008] 溶菌酶本身是一種堿性蛋白質(zhì)，在酸性環(huán)境下，溶菌酶的熱穩(wěn)定性很強(qiáng):抑值3.0 時(shí)96°C加熱處理15min仍能保持87%的酶活性。在自然條件下，大多數(shù)溶菌酶化學(xué)性質(zhì)穩(wěn) 定，即使當(dāng)pH值在1.2-11.3范圍內(nèi)劇烈變化，溶菌酶的空間結(jié)構(gòu)仍可W保持不變，酶活性的 變化也不顯著。但堿性環(huán)境很容易使溶菌酶的空間結(jié)構(gòu)破壞，此時(shí)對熱的穩(wěn)定性較差，當(dāng)處 于堿性pH值范圍時(shí)，溫度會使酶活力損失非常快。
[0009] 溶菌酶能有效水解細(xì)菌細(xì)胞壁膚聚糖，其水解位點(diǎn)是N-乙酷氨基葡萄糖胺(NAM) 的1位碳原子和N-乙酷胞壁酸(NAG)的4位碳原子間的β-1，4糖巧鍵，可使細(xì)菌細(xì)胞壁變得松 弛，失去對細(xì)胞的保護(hù)作用，細(xì)菌內(nèi)容物溢出而使細(xì)胞壁溶解，最后細(xì)胞溶解死亡。溶菌酶 之所W會對革蘭陽性細(xì)菌有很強(qiáng)殺傷力，就是因?yàn)楦锾m陽性菌的細(xì)胞壁主要是由胞質(zhì)壁和 憐酸質(zhì)組成的，其主要成分胞質(zhì)壁又是雜多糖與多膚組成的糖蛋白，而雜多糖正是由ΝΑΜ和 NAGWi3-l，4糖巧鍵聯(lián)結(jié)的，溶菌酶催化水解該糖巧鍵使細(xì)菌細(xì)胞壁破裂而死亡。而革蘭陰 性菌內(nèi)壁層為膚聚糖，因此溶菌酶只能破壞革蘭陽性菌細(xì)胞壁，而對革蘭陰性菌作用不大。
[0010] 溶菌酶在中性體液環(huán)境下帶有大量正電荷，可與帶有負(fù)電荷的病毒蛋白直接作 用，與DNA、RNA、脫附基蛋白相結(jié)合形成復(fù)鹽，使病毒失活。在被瘤疹病毒感染的化la細(xì)胞培 養(yǎng)液中加溶菌酶后有抑制細(xì)胞變性作用。溶菌酶也可抑制腺病毒生長，可用于帶狀瘤疹、腮 腺炎、雞水痘、肝炎及流感等病毒性疾患治療。
[0011] 溶菌酶可保持機(jī)體生理平衡，參與體內(nèi)多種免疫反應(yīng)，是機(jī)體內(nèi)重要的非特異性 免疫因子之一。溶菌酶本身具有T細(xì)胞表位，能誘導(dǎo)2型(Th2)T輔助細(xì)胞反應(yīng)?？诜芫改?誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生全身性化1和化2免疫反應(yīng)，增強(qiáng)免疫功能，因此，口服溶菌酶具有控制上呼吸 道感染和治療頻疾的功能。此外，溶菌酶還具有激活血小板的功能，可改善組織局部血液循 環(huán)障礙，分解脈液，增強(qiáng)局部防衛(wèi)功能，從而體現(xiàn)其止血、消腫及加快機(jī)體損傷組織的修復(fù) 作用。它還可作為一種宿主抵抗因子，對組織局部起保護(hù)作用。
[0012] 溶菌酶還可與各種誘發(fā)炎癥的酸性物質(zhì)結(jié)合，減少細(xì)菌內(nèi)毒素釋放，從而減輕內(nèi) 毒素血癥發(fā)生，減緩炎癥發(fā)生過程，并對抗生素有一定增效作用，改善組織基質(zhì)的黏多糖代 謝，起到抗菌消炎、修復(fù)組織的作用。經(jīng)試驗(yàn)證明，用巧中纖維素共聚物將人溶菌酶和蛋白水 解酶偶聯(lián)，可顯著提高溶菌酶抗菌能力，加速傷口愈合。
[0013] 近年來，隨著研究的深入，人們不僅對溶菌酶的作用機(jī)制有更進(jìn)一步了解，且根據(jù) 其溶菌特性，已將其廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、食品