專利名稱：取代的1－氧代－和1,3－二氧代異吲哚啉及其在用于減少炎性細(xì)胞因子含量的藥物組合 ...的制作方法
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本發(fā)明要求US臨時(shí)申請(qǐng)序列號(hào)60/124,942(1999.3.18申請(qǐng))的優(yōu)先權(quán)。
寄生蟲(chóng)傳染會(huì)受到TNFα控制，如瘧疾和軍團(tuán)菌傳染。大腦瘧疾是一種與TNFα高血液含量有關(guān)的致死超急性神經(jīng)病學(xué)綜合癥并且大部分嚴(yán)重的并發(fā)癥出現(xiàn)在瘧疾患者中。血清TNFα含量與急性瘧疾患者的疾病嚴(yán)重程度和預(yù)測(cè)有直接關(guān)系{Grau等，N.Engl.J.Med.320(24)，1586-1591(1989)}。
血管生成，是新血管發(fā)育和形成的過(guò)程，其在很多正常和病理性的生理事件中起重要作用。血管生成的發(fā)生響應(yīng)于特定的信號(hào)并且牽扯復(fù)雜的過(guò)程，這個(gè)復(fù)雜過(guò)程的特征是血管內(nèi)皮細(xì)胞響應(yīng)血管生成生長(zhǎng)信號(hào)而滲入基片，內(nèi)皮細(xì)胞向信號(hào)源遷移并且接下來(lái)增生和形成毛細(xì)管。待內(nèi)皮細(xì)胞接觸和與先前存在的毛細(xì)管相連之后，血液開(kāi)始流經(jīng)新形成的毛細(xì)管。
巨噬細(xì)胞引發(fā)的血管生成已知是由TNFα引起的。Leibovich等{Nature，329，630-632(1987)}描述了TNFα體內(nèi)誘導(dǎo)大鼠角膜中毛細(xì)血管的形成和以非常低劑量使小雞尿囊絨膜發(fā)展并且提出TNFα是引發(fā)炎癥、傷口恢復(fù)和腫瘤生長(zhǎng)中血管生成的選擇物。TNFα的產(chǎn)生還與癌癥性疾病如腫瘤溶解綜合癥、膀胱癌再現(xiàn)有關(guān)，特別是誘發(fā)性腫瘤{Ching等，Brit.J.癌癥，(1955)72，339-343和Koch，藥用化學(xué)進(jìn)程(Progress in Medicinal Chemistry)，22，166-242(1985)}。
血管生成內(nèi)源刺激物和抑制物之間天然存在的平衡是其中抑制影響占主導(dǎo)地位。Rastinejad等，1989，Cell 56345-355。在稀罕的事件中，其中新血管化在正常生理?xiàng)l件下產(chǎn)生如在傷口愈合、器官再生、胚胎發(fā)育和女性生殖過(guò)程條件下，血管生成會(huì)受到約束調(diào)節(jié)和空間及臨時(shí)限定。在病理性血管生成如表征化實(shí)體瘤生長(zhǎng)時(shí)，這些調(diào)節(jié)控制失效。
未經(jīng)調(diào)節(jié)的血管生成成為許多致瘤性和非致瘤性疾病的病理和持續(xù)進(jìn)程。很多嚴(yán)重疾病主要是因?yàn)楫惓５男卵芑▽?shí)體瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移瘤、關(guān)節(jié)炎、某些類型的眼病和牛皮癬。例如參見(jiàn)Moses等的評(píng)論，1991，Biotech.9630-634；Folkman等，1995，N.Engl.J.Med.，3331757-1763；Auerbach等，1985，J.Microvasc.Res.29401-411；Folkman，1985，癌癥研究發(fā)展(Advances in Cancer Research)Klein和Weinhouse編，Academic Press，New York，pp.175-203；Patz，1982，Am.J.Opthalmol.94715-743；以及Folkman等，1983，Science 221719-725。在很多病理?xiàng)l件中，血管生成的過(guò)程促進(jìn)了疾病狀態(tài)。例如，累積了提出實(shí)體瘤生長(zhǎng)取決于血管生成的有效數(shù)據(jù)。Folkman和Klagsbrun，1987，Science 235442-447。
維持角膜、晶狀體和小梁網(wǎng)的無(wú)血管性對(duì)視覺(jué)以及眼睛生理學(xué)來(lái)說(shuō)是決定性的。例如參見(jiàn)Waltman等的評(píng)論，1978，Am.J.Ophthal.85704-710和Gartner等，1978，Surv.Ophthal.22291-312。目前這些疾病的治療，尤其是當(dāng)新血管化出現(xiàn)后，是不足的而且經(jīng)常是盲目性的。
血管生成的抑制劑具有重要的治療性作用，可以限制這個(gè)過(guò)程對(duì)基本疾病之病理進(jìn)程的促進(jìn)以及提供研究它們病因?qū)W的有價(jià)值途徑。例如，抑制腫瘤新血管化的抑制劑在抑制轉(zhuǎn)移性腫瘤的生長(zhǎng)中可以起重要作用。
據(jù)發(fā)現(xiàn)，涉及血管內(nèi)皮細(xì)胞增生、遷移和侵入的血管生成的組分部分地受多肽生長(zhǎng)因子的調(diào)節(jié)。培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明與含適宜生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基接觸的內(nèi)皮細(xì)胞可以被誘發(fā)引起一些或全部的生成血管響應(yīng)。很多具有體外內(nèi)皮生長(zhǎng)促進(jìn)活性的多肽已被得到鑒別。其實(shí)例包括酸性和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、變性生長(zhǎng)因子α和β、得自血小板的內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、粒細(xì)胞菌落刺激因子、白介素-8、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、增殖蛋白、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和胎盤(pán)生長(zhǎng)因子。例如參見(jiàn)，F(xiàn)olkman等的評(píng)論，1995，N.Engl.J.Med.，3331757-1763。
很多類化合物已被用來(lái)預(yù)防血管生成。Taylor等使用了魚(yú)精蛋白來(lái)抑制血管生成，參見(jiàn)Taylor等，Nature 297307(1982)。魚(yú)精蛋白的毒性限制了其在實(shí)際中用作治療劑。Folkman等公開(kāi)了使用肝素和類固醇來(lái)控制血管生成。參見(jiàn)Folkman等，Science 221719(1983)及US專利5,001,116和4,994,443。類固醇，如缺乏葡萄糖基和礦質(zhì)皮質(zhì)激素類活性的四氫可的松，據(jù)發(fā)現(xiàn)是生成血管的抑制劑。干擾素β也是由同種異體脾細(xì)胞誘發(fā)的血管生成的有效抑制劑。參見(jiàn)Sidky等，癌癥研究(Cancer Research)475155-5161(1987)。據(jù)報(bào)導(dǎo)，人重組α干擾素-a被成功地用于治療肺多發(fā)性血管瘤，一種血管生成誘發(fā)疾病。參見(jiàn)White等，New England J.Med.3201197-1200(1989)。
被用于抑制血管生成的其它試劑包括抗壞血酸醚及相關(guān)的化合物。參見(jiàn)日本公開(kāi)特許公報(bào)號(hào)58-131978。硫酸化多糖DS 4152也顯出血管生成抑制性。參見(jiàn)日本公開(kāi)特許公報(bào)號(hào)63-119500。一種真菌產(chǎn)物，煙曲霉素，是有效的體外血管靜止劑。該化合物呈體內(nèi)毒性，但合成衍生物AGM 12470被用于體內(nèi)治療膠原II關(guān)節(jié)炎。煙曲霉素和氧-取代的煙曲霉素衍生物公開(kāi)于EPO公開(kāi)號(hào)0325199A2和0357061A1中。
在US 5,874,081中，Parish講述了使用單克隆抗體抑制血管生成。在WO 92/12717中，Brem等教導(dǎo)了一些四環(huán)素，特別是米諾環(huán)素、金霉素、脫甲金霉素和賴甲環(huán)素可用作血管生成的抑制劑。在《癌癥研究》51，672-675(1991.1.15)中，Brem等講述了米諾環(huán)素抑制血管生成的程度相當(dāng)于肝素和可的松的聯(lián)合治療。在《癌癥研究》52，6702-6704(1992.12.1)中，Teicher等教導(dǎo)了當(dāng)抗血管生成劑米諾環(huán)素與癌癥化學(xué)治療或放射治療聯(lián)合使用時(shí)轉(zhuǎn)移瘤的抗血管生成劑被減少時(shí)，腫瘤生長(zhǎng)得到降低并且轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)量被減少。
體內(nèi)所有各種類型的細(xì)胞都可以轉(zhuǎn)變成良性或惡性腫瘤細(xì)胞。最頻繁的腫瘤位置是肺，接下來(lái)是結(jié)腸直腸、乳房、前列腺、膀胱、胰腺，然后是卵巢。其它流行的癌癥類型包括白血病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥包括腦癌癥、黑素瘤、淋巴瘤、紅白血病、子宮癌以及頭和頸癌。
目前，癌癥的治療主要分三種類型的治療或其聯(lián)合治療手術(shù)、放射和化學(xué)治療。手術(shù)涉及大塊去除病變組織。盡管手術(shù)有時(shí)可有效地除去位于某些位置處的腫瘤，例如乳房、結(jié)腸和皮膚處的腫瘤，但它不能用于治療位于其它位置如脊柱處的腫瘤，也不能治療散播的致瘤性疾病如白血病?；瘜W(xué)療法涉及瓦解細(xì)胞復(fù)制或細(xì)胞代謝。它最常用于治療白血病以及乳腺、肺和睪丸癌。
目前用于治療癌癥的化學(xué)治療劑分五大類天然產(chǎn)物及其衍生物；蒽環(huán)霉素；烷基化劑；抗增生劑(也稱作抗代謝物)以及激素劑。
化學(xué)治療劑經(jīng)常被稱作抗腫瘤劑。據(jù)信，烷基化劑通過(guò)烷基化和交聯(lián)DNA中的鳥(niǎo)嘌呤和可能的其它堿基，阻止細(xì)胞分裂。典型的烷基化劑包括氮芥、乙烯亞胺化合物、烷基硫酸酯、順鉑和各種亞硝基脲。這種化合物的缺陷是它們不僅攻擊惡性細(xì)胞，還攻擊自然分裂的其它細(xì)胞，如骨髓、皮膚、胃腸粘膜、胎兒組織的細(xì)胞。抗代謝物一般是可逆的或不可逆的酶抑制劑，或干擾核酸復(fù)制、翻譯或轉(zhuǎn)錄的化合物。
很多合成核苷被鑒定具有抗癌活性。公知的具有強(qiáng)抗癌活性的核苷衍生物是5-氟尿嘧啶。5-氟尿嘧啶已被臨床用于治療惡性腫瘤，例如包括癌、肉瘤、皮癌、消化器官癌癥和乳腺癌。然而，5-氟尿嘧啶導(dǎo)致嚴(yán)重的不利反應(yīng)如惡心、脫發(fā)、腹瀉、口炎、白細(xì)胞血小板減少、厭食、色素沉著和浮腫。具有抗癌活性的5-氟尿嘧啶衍生物在US專利4,336,381和JP專利申請(qǐng)50-50383、50-50384、50-64281、51-146482和53-84981中有所描述。US專利4,000,137中公開(kāi)了肌苷、腺苷、或胞苷與甲醇或乙醇的過(guò)氧化物氧化產(chǎn)物具有抗淋巴細(xì)胞白血病活性。
阿糖胞苷(也稱作胞核嘧啶阿拉伯糖苷、araC和Cytosar是脫氧胞苷的核苷類似物，其在1950年被第一次合成并且1963年被引入臨床醫(yī)學(xué)。目前是治療急性骨髓白血病的重要藥物。它還可活性對(duì)抗急性淋巴細(xì)胞的白血病，并且可較小程度地用于慢性髓細(xì)胞白血病和非何杰金氏淋巴瘤。araC的主要作用是抑制核DNA合成。Handschumacher，R.和Cheng，Y.，＂嘌呤和嘧啶抗代謝物＂，《癌癥醫(yī)藥(Cancer Medicine)》第XV-1章，第3版，J.Holland等編，Lea和Febigol出版者。5-氮胞苷是主要用于治療急性髓細(xì)胞白血病和脊髓發(fā)育不良綜合癥的胞苷類似物。
2-氟腺苷-5′-磷酸(Fludara，也稱作FaraA)是一種治療慢性淋巴細(xì)胞白血病的最有效試劑之一。該化合物通過(guò)抑制DNA合成而起作用。用F-araA治療細(xì)胞與細(xì)胞在G1/S相邊界和在S相中的累積有關(guān)；因此，這是一個(gè)細(xì)胞周期S-相特異藥物。摻加活性代謝物，F(xiàn)-araATP，延緩了DNA鏈的伸長(zhǎng)。F-araA還是一種核糖核苷酸還原酶的有效抑制劑，這是一種引起dATP形成的關(guān)鍵酶。2-氯脫氧腺苷可用于治療低級(jí)別的B-細(xì)胞瘤，如慢性淋巴細(xì)胞白血病、非何杰金氏淋巴瘤和毛狀細(xì)胞白血病。活性光譜類似于Fludara。該化合物抑制生長(zhǎng)細(xì)胞的DNA合成和抑制靜止細(xì)胞的DNA修補(bǔ)。
盡管已鑒定出很多化學(xué)治療劑并且目前用于治療癌癥，但人們?nèi)栽趯で笥行覍?duì)健康細(xì)胞顯示低毒性的新試劑。
TNFα在哮喘和其它慢性肺部炎性疾病領(lǐng)域中也能起作用。二氧化硅顆粒的沉積導(dǎo)致硅肺，纖維變性反應(yīng)引起的漸進(jìn)性呼吸衰竭疾病。用TNFα抗體進(jìn)行預(yù)治療幾乎可完全阻斷小鼠中二氧化硅誘導(dǎo)的肺纖維變性{Pignet等，Nature，344，245-247(1990)}。據(jù)證實(shí)，在二氧化硅和石棉誘導(dǎo)型纖維變性動(dòng)物模型中產(chǎn)生了高含量的TNFα(在血清和分離的巨噬細(xì)胞中){Bissonnette等，Inflammation 13(3)，329-339(1989)}。與來(lái)自正常供體的巨噬細(xì)胞相比，在來(lái)自肺肉樣瘤病患者的肺泡巨噬細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了自發(fā)釋放大量的TNFα{Baughman等，J.Lab.Clin.Med.115(1)，36-42(1990)}。
TNFα還涉及再灌注的炎性響應(yīng)，稱作再灌注損傷，并且是血流損失后組織受損的主要原因{Vedder等，PNAS 87，2643-2646(1990)}。組織受損還包括手術(shù)損傷和發(fā)炎、心臟移植后問(wèn)題、系統(tǒng)炎性響應(yīng)綜合癥和多器官機(jī)能障礙綜合癥。TNFα還改變內(nèi)皮細(xì)胞的性能并且具有各種促凝血活性，如產(chǎn)生組織因子促凝血活性增加和抑制抗凝劑蛋白C通道以及下調(diào)凝血調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá){Sherry等，J.Cell Biol.107，1269-1277(1988)}。TNFα具有促炎活性，連同其早期產(chǎn)生(炎性事件的開(kāi)始階段)使其可能是很多重要疾病中的組織損傷的傳遞介質(zhì)，這些包括但不限于心肌梗死、中風(fēng)、循環(huán)性休克。特別重要的是TNFα誘導(dǎo)了粘著分子的表達(dá)，如細(xì)胞間的粘著分子(ICAM)或內(nèi)皮細(xì)胞上的內(nèi)皮白細(xì)胞粘著分子(ELAM){Munro等，Am.J.Path.135(1)，121-132(1989)}。
用單克隆抗TNFα抗體對(duì)TNFα進(jìn)行阻斷據(jù)顯示對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是有益的{Elliot等，Int.J.Pharmac.1995 17(2)，141-145}。高含量的TNFα與克羅恩氏病有關(guān){Von Dullemen等，Gastroenterology，1995 109(1)，129-135}并且用TNFα抗體治療已達(dá)到了臨床效果。
Moeller在US 5,231,024中描述了雜交瘤細(xì)胞系，其可合成抗人腫瘤壞死因子(TNF)的高特異性單克隆抗體(mAb)。Rubin在US4,870,163中描述了可產(chǎn)生人腫瘤壞死因子單克隆抗體的雜交瘤。Barbanti在US 5,436,154中提出了抗TNFα的抗體，該抗體也可能是抗TNFβ的抗體，其可以治療其中多肽產(chǎn)生致病效應(yīng)的疾病。為了治療性用途，抗TNFα抗體應(yīng)當(dāng)能夠中和TNFα的體內(nèi)毒性效果。由超免疫化動(dòng)物的血清中可容易獲得多克隆抗體。然而，這些多克隆抗體制劑體內(nèi)使用不是最佳的，因?yàn)樗鼈兪呛荒苤泻蚑NFα的抗體的抗體混合物，它們是含對(duì)相同表位具有不同親合力的不同抗體的抗體混合物，并且由于它們批與批之間的差異因而其效能難以被標(biāo)準(zhǔn)化。
此外，已知TNFα是一種逆轉(zhuǎn)錄酶病毒復(fù)制的有效活化劑，包括活化HIV-1{Duh等，Proc.Nat.Acad.Sci.86，5974-5978(1989)；Poll等，Proc.Nat.Acad.Sci.87，782-785(1990)；Monto等，Blood 79，2670(1990)；Clouse等，J.Immunol.142，431-438(1989)；Poll等，AIDS Res.Hum.Retrovirus，191-197(1992)}。AIDS是由攜帶人免疫缺損病毒(HIV)的T淋巴細(xì)胞傳染引起的。至少三種類型或菌株的HIV已得到鑒定，即HIV-1，HIV-2和HIV-3。HIV傳染的結(jié)果，由T-細(xì)胞介導(dǎo)的免疫性受到損害并且受染的個(gè)體表現(xiàn)出嚴(yán)重的機(jī)會(huì)性感染和/或不尋常的瘤。HIV進(jìn)入T淋巴細(xì)胞需要T淋巴細(xì)胞的活化。在T細(xì)胞活化后，其它病毒，諸如HIV-1，HIV-2會(huì)傳染T淋巴細(xì)胞并且這種病毒蛋白的表達(dá)和/或復(fù)制受到這種T細(xì)胞活化的介導(dǎo)或維持。一旦活化的T淋巴細(xì)胞被HIV感染，則T淋巴細(xì)胞必須繼續(xù)保持活化狀態(tài)以允許HIV基因表達(dá)和/或HIV復(fù)制。細(xì)胞因子，特別是TNFα，通過(guò)起維持T淋巴細(xì)胞活化作用而參與了活化T-細(xì)胞介導(dǎo)的HIV蛋白表達(dá)和/或病毒復(fù)制。因此，干擾細(xì)胞因子活性，例如通過(guò)防止或抑制HIV-傳染個(gè)體中的細(xì)胞因子產(chǎn)生、特別是TNFα的產(chǎn)生，將有助于限制因HIV傳染引起的T淋巴細(xì)胞的維持。
單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和相關(guān)的細(xì)胞，諸如枯否氏細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，也參與維持HIV傳染。這些細(xì)胞，與T-細(xì)胞一樣，是病毒性復(fù)制的靶子并且病毒性復(fù)制的程度取決于這些細(xì)胞的活化狀態(tài){Rosenberg等，HIV傳染的免疫發(fā)病機(jī)理，Advances in Immunology，57(1989)}。據(jù)顯示，細(xì)胞因子如TNFα，可活化單核細(xì)胞和/或巨噬細(xì)胞中的HIV復(fù)制{Poli等，Proc.Natl.Acad.Sci.，87，782-784(1990)}，因此防止或抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生或活性有助于限制T-細(xì)胞的HIV進(jìn)程。其它研究確認(rèn)了TNFα為HIV體外活化的公共因子并且通過(guò)在細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的核調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)獲得了清楚的作用機(jī)理(Osborn，等，PNAS 86 2336-2340)。這些證據(jù)表明降低TNFα合成可以通過(guò)減少轉(zhuǎn)錄和病毒產(chǎn)生而對(duì)HIV傳染產(chǎn)生抗病毒性效果。
TNFα可以誘導(dǎo)T-細(xì)胞和巨噬細(xì)胞系中潛在HIV的AIDS病毒性復(fù)制{Folks等，PNAS 86，2365-2368(1989)}。病毒誘導(dǎo)活性的分子機(jī)理是TNFα能夠活化細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的基因調(diào)節(jié)蛋白(NFkB)，其通過(guò)與病毒性調(diào)節(jié)基因序列(LTR)結(jié)合而促進(jìn)HIV的復(fù)制{Osborn等，PNAS 86，2336-2340(1989)}。AIDS相關(guān)惡病質(zhì)中的TNFα是高血清TNFα和患者外周血液?jiǎn)魏思?xì)胞中產(chǎn)生高含量的自生TNFα{Wright等，J.Immunol.141(1)，99-104(1988)}。TNFα影響微孢子蟲(chóng)病(HIV患者中慢性腹瀉的原因)和HIV患者中口瘡潰瘍。出于與所提及的原因類似的原因，TNFα以各種角色參與了病毒性傳染，諸如巨細(xì)胞病毒(CMV)、流感病毒、腺病毒和皰疹類的病毒。一些病毒諸如仙臺(tái)病毒和流感病毒可誘發(fā)TNFα。
核因子κB(NFκB)是一種多向性轉(zhuǎn)錄活化劑(Lenardo，等，Cell1989，58，227-29)。NFκB作為轉(zhuǎn)錄活化劑參與了各種疾病和炎癥并且被認(rèn)為調(diào)節(jié)細(xì)胞因子含量包括但不限于TNFα并且還被認(rèn)為是HIV轉(zhuǎn)錄的活化劑(Dbaibo等，J.Biol.Chem.1993，17762-66；Duh等，Proc.Natl.Acad.Sci.1989，86，5974-78；Bachelerie等，Nature 1991，350，709-12；Boswas等，J.Acquired Immune Deficiency syndrome 1993，6，778-786；Suzuki等，Biochem.And Biophys.Res.Comm.1993，193，277-83；Suzuki等，Biochem.And Biophys.Res Comm.1992，189，1709-15；Suzuki等，Biochem.Mol.Bio.Int.1993，31(4)，693-700；Shakhov等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1990，171，35-47以及Staal等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA1990，87，9943-47)。因此，抑制NFκB結(jié)合可以調(diào)節(jié)細(xì)胞因子基因的轉(zhuǎn)錄并且通過(guò)這種調(diào)節(jié)和其它機(jī)理可用于抑制多種疾病。本文所述的化合物可以抑制NFκB在核中的作用并且由此可用于治療各種疾病，包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、其它關(guān)節(jié)炎病、膿毒休克、膿毒癥、內(nèi)毒素休克、移植物抗宿主病、消瘦、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、多發(fā)性硬化癥、全身性紅斑狼瘡、麻風(fēng)中的ENL、HIV、AIDS和AIDS的機(jī)會(huì)性感染。TNFα和NFκB含量受交互式反饋循環(huán)的影響。如上所述，本發(fā)明的化合物影響TNFα和NFκB的含量。當(dāng)然，含量指的是活性含量以及濃度含量或絕對(duì)含量。
很多細(xì)胞功能是由腺苷3′，5′-環(huán)狀一磷酸(cAMP)的含量介導(dǎo)的。這些細(xì)胞功能可以促發(fā)炎性病癥和疾病，包括哮喘、發(fā)炎和其它癥狀(Lowe和Cheng，未來(lái)的藥物，17(9)，799-807，1992)。據(jù)顯示，炎性白細(xì)胞中cAMP的升高可抑制它們的活化進(jìn)而釋放炎性介導(dǎo)子，包括TNFα和NFκB。增加的cAMP含量還會(huì)導(dǎo)致導(dǎo)氣管平滑肌松弛。磷酸二酯酶通過(guò)水解控制cAMP含量，并且磷酸二酯酶的抑制劑據(jù)顯示可增加cAMP含量。
由此，減少TNFα含量和/或增加cAMP含量為很多炎性、傳染性、免疫性或惡性疾病提供了具價(jià)值的治療策略。這些疾病包括但不限于膿毒休克、膿毒癥、內(nèi)毒素休克、血液動(dòng)力休克和膿毒癥綜合癥、局部缺血性再灌注損傷、瘧疾、分支桿菌傳染、腦膜炎、牛皮癬、充血性心力衰竭、纖維變性疾病、惡病質(zhì)、移植物排斥、癌癥、自身免疫疾病、AIDS的機(jī)會(huì)感染、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、其它關(guān)節(jié)炎病、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、多發(fā)性硬化癥、全身性紅斑狼瘡、麻風(fēng)中的ENL、放射受損和肺泡損傷。現(xiàn)有技術(shù)中針對(duì)抑制TNFα效果的努力包括從利用類固醇如地塞米松和潑尼松龍到使用多克隆和單克隆抗體{Beutler等，Science 234，470-474(1985)；WO 92/11383}。
發(fā)明詳述本發(fā)明基于發(fā)現(xiàn)了某類非多肽化合物(本發(fā)明將更完整地描述)可以減少TNFα含量、增加cAMP含量、抑制血管生成、抑制腫瘤生長(zhǎng)和抑制炎性細(xì)胞因子。因此，本發(fā)明涉及在異吲哚啉環(huán)第4位或第5位上被取代的1-氧代吲哚啉和1，3-二氧代吲哚啉，通過(guò)施用這種衍生物來(lái)減少哺乳動(dòng)物中腫瘤壞死因子-α和其它炎性細(xì)胞因子含量的方法，本發(fā)明還涉及含這種衍生物的藥物組合物。體內(nèi)、體外或以可飲介質(zhì)的形式減少TNFα含量和/或增加cAMP含量和/或抑制血管生成也構(gòu)成有價(jià)值的治療策略。
具體說(shuō)，本發(fā)明涉及(a)下式的1，3-二氧代吲哚啉 其中當(dāng)n不是0并且R1與R2不相同時(shí)，C*表示的碳原子構(gòu)成手性的中心；X1和X2之一是氨基、硝基、1-6個(gè)碳原子的烷基或NH-Z并且X1或X2中的另一個(gè)是氫；R1和R2各自獨(dú)立地是羥基或NH-Z；R3是氫、1-6個(gè)碳原子的烷基、鹵素或鹵代烷基；Z是氫、芳基、1-6個(gè)碳原子的烷基、甲?；?-6個(gè)碳原子的酰基并且n的值是0、1或2；前提條件是如果X1是氨基，并且n是1或2，則R1與R2不都是羥基；(b)式I的鹽；
(c)下式的1-氧代吲哚啉 其中當(dāng)n不是0并且R1與R2不相同時(shí)，C*表示的碳原子構(gòu)成手性的中心；X1和X2之一是氨基、硝基、1-6個(gè)碳原子的烷基或NH-Z并且X1或X2中的另一個(gè)是氫；R1和R2各自獨(dú)立地是羥基或NH-Z；R3是1-6個(gè)碳原子的烷基、鹵素或氫；Z是氫、芳基或1-6個(gè)碳原子的烷基或酰基并且n的值是0、1或2；(d)式II的鹽。
除非另有定義，術(shù)語(yǔ)烷基表示含有1-6個(gè)碳原子的一價(jià)飽和支鏈或直鏈烴鏈。烷基的代表基團(tuán)是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基，仲-丁基和叔丁基。烷氧基指烷基通過(guò)醚式氧原子與分子其余部分連接的烷基。烷氧基的代表基團(tuán)是甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲-丁氧基和叔-丁氧基。鹵素包括溴、氯、氟和碘。
式I和式II的鹽包括含有能夠被質(zhì)子化的氮原子的帶有取代基的1-氧代異吲哚啉和帶有取代基的1，3-二氧代吲哚啉的羧酸鹽和酸加成鹽。
使用式I和II的化合物在專業(yè)人員的監(jiān)督下來(lái)抑制TNFα和其它炎性細(xì)胞因子包括IL-1、IL-6和IL-12的不期望效果和/或治療不期望的血管生成和腫瘤生長(zhǎng)?；衔锟梢钥诜?、直腸或腸胃外給藥，單獨(dú)給藥或者與其它治療劑包括抗生素、類固醇、化學(xué)治療劑等聯(lián)合給藥于需要治療的哺乳動(dòng)物；例如用于治療癌癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腸炎性疾病、肌肉營(yíng)養(yǎng)不良、克羅恩氏病等。
本發(fā)明的化合物還可以局部使用用于治療或預(yù)防因過(guò)量TNFα產(chǎn)生或發(fā)炎如病毒傳染而分別引起或加劇的疾病，諸如由皰疹病毒的疾病、病毒性結(jié)膜炎、牛皮癬，遺傳過(guò)敏性皮炎等。
本發(fā)明的化合物還可以用于獸醫(yī)性治療除人類以外的需要防止和抑制TNFα產(chǎn)生的哺乳動(dòng)物。動(dòng)物中用于治療性或預(yù)防性處理的TNFα引起的疾病包括如上所述的疾病，特別是病毒性傳染。其實(shí)例包括貓免疫缺損病毒、馬傳染性貧血病毒、山羊關(guān)節(jié)炎病毒、綿羊腦膜腦炎病毒和呼吸困難病毒以及其它慢性病毒。
式I的化合物通過(guò)很多路徑都可以容易制得。在一個(gè)實(shí)施方案，讓谷氨酸、谷氨酰胺、異谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺或異天冬酰胺與帶有取代基的鄰苯二甲酸酐如1，3-二氧代異苯并呋喃反應(yīng)，所說(shuō)的1，3-二氧代異苯并呋喃的第4或5位上也被取代 其中當(dāng)n不是0并且R1與R2不相同時(shí)，C*表示的碳原子構(gòu)成手性的中心；X1和X2之一是氨基、硝基、1-6個(gè)碳原子的烷基或NH-Z并且X1或X2中的另一個(gè)是氫；R1和R2各自獨(dú)立地是羥基或NH-Z；R3是1-6個(gè)碳原子的烷基、鹵素或氫；Z是氫、芳基或1-6個(gè)碳原子的烷基并且n的值是0、1或2；前提條件是如果X1是氨基并且n是1或2，則R1和R2不是羥基?？梢允褂萌〈腘-乙氧羰基鄰苯二甲酰亞胺來(lái)代替酸酐(參見(jiàn)實(shí)施例1)。
在第二個(gè)實(shí)施方案中，使用以下反應(yīng)來(lái)制備式I的化合物 式II的化合物通過(guò)很多路徑都可以容易制得。在一個(gè)實(shí)施方案中，讓谷氨酸、谷氨酰胺、異谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺或異天冬酰胺與四取代的苯基反應(yīng) 其中當(dāng)n是0并且R1＝R2的情況除外，C*表示的碳原子構(gòu)成手性的中心；X2是氨基、硝基、1-6個(gè)碳原子的烷基或NH-Z；X3是鹵素；R1和R2各自獨(dú)立地是羥基或NH-Z；R3是1-6個(gè)碳原子的烷基或?；?、鹵素或氫；Z是氫、芳基或1-6個(gè)碳原子的烷基并且n的值是0、1或2；前提條件是如果X1是氨基并且n是1或2，則R1和R2不都是羥基。
在制備式II的第二個(gè)實(shí)施方案中，讓谷氨酸、谷氨酰胺、異谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺或異天冬酰胺與第3或第4位被取代的鄰苯二醛反應(yīng) 其中當(dāng)n不是0并且R1與R2不相同時(shí)，C*表示的碳原子構(gòu)成手性的中心；X1和X2之一是氨基、硝基、1-6個(gè)碳原子的烷基或NH-Z并且X1或X2中的另一個(gè)是氫；R1和R2各自獨(dú)立地是羥基或NH-Z；R3是1-6個(gè)碳原子的烷基、鹵素或氫；Z是氫、芳基或1-6個(gè)碳原子的烷基或?；⑶襫的值是0、1或2；前提條件是如果X1是氨基并且n是1或2，則R1和R2不是羥基。
當(dāng)n不是0并且R1與R2不相同時(shí)，式I化合物中R3所連接的碳原子構(gòu)成手性的中心，由此得到光學(xué)異構(gòu)體。這些異構(gòu)體的混合物和分離出的單個(gè)異構(gòu)體本身，以及當(dāng)存在第二手性中心如4-6個(gè)碳原子的支鏈烷基取代基時(shí)的非對(duì)映異構(gòu)體，均屬于本發(fā)明的范圍。消旋體可以就此使用，或者可以使用手性吸收劑通過(guò)色譜法物理性分成它們各自的異構(gòu)體。或者，通過(guò)與手性酸或堿形成鹽，從混合物中立體選擇性制備或化學(xué)分離各個(gè)異構(gòu)體，例如10-樟腦磺酸、樟腦酸、α-溴樟腦酸、甲氧基乙酸、酒石酸、二乙酰酒石酸、蘋(píng)果酸、吡咯烷酮-5-羧酸等的各個(gè)旋光對(duì)映體，然后使一個(gè)或兩個(gè)再溶解的堿游離出來(lái)，選擇性重復(fù)該過(guò)程，以便一種或兩種對(duì)映體中都基本上不含彼此；即具有光學(xué)純度＞95％的形式。
本發(fā)明還涉及含有能夠被質(zhì)子化的基團(tuán)如氨基的式I化合物的生理學(xué)可接受的非毒性酸加成鹽。所說(shuō)的鹽包括得自有機(jī)和無(wú)機(jī)酸的鹽，所說(shuō)的酸諸如但不限于鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸、甲磺酸、乙酸、酒石酸、乳酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸、馬來(lái)酸、山梨酸、烏頭酸、水楊酸、鄰苯二甲酸、雙羥萘酸、庚酸等等。
本發(fā)明中化合物的代表性實(shí)例包括2-(n-X-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(n-X-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(n-X-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(n-X-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(n-X-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(n-X-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(n-X-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(n-X-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(n-X-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(n-X-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(n-X-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；岷?-(n-X-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸，其中n是3或4且X是硝基、氨基、N-甲基氨基、甲基、乙基、丙基、異丙基或丁基。
具體實(shí)例包括2-(3-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(3-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(3-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(3-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(3-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)己二酸(odipic acid)；2-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(3-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；2-(3-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；3-(3-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(3-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；4-(3-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；2-(3-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(3-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(4-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)己二酸；2-(4-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(4-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；2-(4-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(4-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(4-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(4-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(4-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(3-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；4-(3-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；3-(3-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(3-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(3-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(3-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；3-(3-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(4-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)己二酸；2-(4-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(4-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(4-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-N-甲基氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(4-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(4-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；4-(4-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(4-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-N-甲基氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(3-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(3-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；3-(3-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(3-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(3-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(3-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(3-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)己二酸；2-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；4-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(4-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(4-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；4-(4-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?(4-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-甲基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(3-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；2-(3-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(3-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(3-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(3-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；3-(3-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(4-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)己二酸；2-(4-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(4-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(4-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-乙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(4-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(4-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(4-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；2-(4-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；3-(4-乙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(3-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；4-(3-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(3-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(3-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(3-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(3-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；3-(3-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(4-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)己二酸；2-(4-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(4-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(4-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(4-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(4-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(4-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2(4-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(3-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；4-(3-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(3-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(3-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(3-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(3-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；3-(3-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(4-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)己二酸；2-(4-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(4-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；2-(4-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(4-異丙基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；幔?-(4-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(4-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；4-(4-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(4-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-異丙基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；2-(3-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(3-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；2-(3-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(3-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(3-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(3-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(3-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(3-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(3-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(3-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(4-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)己二酸；2-(4-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?；4-(4-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸；2-(4-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?；3-(4-丁基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸；2-(4-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸；2-(4-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(4-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷幔?-(4-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸；2-(4-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸和3-(4-丁基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?。
這些化合物可以在癌癥治療、免疫調(diào)節(jié)藥物、血管生成抑制和其它這里所列的用途中使用?？诜┝啃问桨ㄆ瑒?、膠囊劑、糖衣丸和類似成型的壓縮藥劑形式，每單位劑量含1-100mg藥物?？梢允褂煤?0-100mg/mL的等滲鹽水溶液進(jìn)行腸胃外給藥，包括肌內(nèi)、鞘內(nèi)、靜脈內(nèi)和動(dòng)脈內(nèi)的給藥途徑。通過(guò)使用用常規(guī)載體如可可脂配制的栓劑進(jìn)行直腸給藥。
由此，藥物組合物中含有一種或多種式I和式II的化合物及至少一種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。在組合物的制備中，通常是將活性劑與賦形劑混合或者用賦形劑稀釋或者包含在膠囊或小藥囊形式的載體中。當(dāng)賦形劑可用作稀釋劑時(shí)，其可以是固體、半固體或液體材料起活性成分的媒介物、載體或介質(zhì)作用。因此，組合物的形式可以是片劑、丸劑、粉劑、酏劑、懸浮劑、乳劑、溶液、糖漿、軟和硬明膠膠囊劑、栓劑、無(wú)菌注射溶液和無(wú)菌包裝粉末。適宜的賦形劑的實(shí)例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯樹(shù)膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮、纖維素、水、糖漿和甲基纖維素，制劑中還可以另外含有潤(rùn)滑劑，如滑石、硬脂酸鎂和礦物油；潤(rùn)濕劑，乳化劑和懸浮劑；防腐劑，如甲基-和丙基羥基苯甲酸酯，增甜劑和調(diào)味劑。
優(yōu)選，將組合物配制成單位劑量的形式，即適合作為單一劑量的物理離散單元，或單一劑量的一部分預(yù)定量，以便以單劑量或多劑量方案施用給人和其它哺乳動(dòng)物，計(jì)算每個(gè)單位中所含的活性物料的預(yù)定量，并結(jié)合適宜的藥用賦形劑，來(lái)產(chǎn)生所需的治療效果?？梢酝ㄟ^(guò)使用本領(lǐng)域公知的工藝將組合物配制成在施用給患者之后產(chǎn)生速效、緩釋或延遲釋放活性成分的形式。
可以按常規(guī)方式進(jìn)行酶連接的免疫吸著劑試驗(yàn)(ELISA)來(lái)分析TNFα。通過(guò)Ficoll-Hypaque密度離心從正常供體中分離PBMC。將細(xì)胞培養(yǎng)在補(bǔ)充有10％AB+血清、2mM L-谷氨酰胺、100U/mL青霉素和100mg/mL鏈霉素的RPMI中。將藥物溶解于二甲基亞砜(SigmaChemical)并且進(jìn)一步用補(bǔ)充的RPMI稀釋。在藥物PBMC懸浮液的存在或不存在下的最終二甲基亞砜濃度為0.25wt％。在50mg/mL下開(kāi)始下以半對(duì)數(shù)稀釋方式分析藥物。使用1小時(shí)的時(shí)間將藥物添加到96孔平板的PBMC(106細(xì)胞/mL)中，然后添加LPS。通過(guò)用1mg/mL來(lái)自明尼蘇達(dá)沙門(mén)氏菌R595(List Biological Labs，Campbell，CA)的LPS處理，在藥物存在或不存在下刺激PBMC(106細(xì)胞/mL)。然后將細(xì)胞在37℃下培養(yǎng)18-20小時(shí)。收集上清液并且直接分析TNFα含量或保持冷凍在-70℃下(不超過(guò)4天)直至分析。通過(guò)人TNFα ELISA試劑盒(ENDOGEN，Boston，MA)根據(jù)制造商說(shuō)明測(cè)定上清液中TNFα的濃度。
以下的實(shí)施例將進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的典型特點(diǎn)，但不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是對(duì)本發(fā)明范圍的限定，本發(fā)明的范圍由所附的權(quán)利要求書(shū)來(lái)限定。
2-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷釋⒐劝滨０?10mmol)和4-甲基異苯并呋喃-1，3-二酮(10mmol)的存在于15mL乙酸中的混合物加熱回流。將冷卻的反應(yīng)混合物濃縮并且將殘余物色譜法純化，得到2-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸。
1-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)丙烷-1，3-二羧酸…………………… 50.0g乳糖……………………………………………………………………………………50.7g小麥淀粉………………………………………………………………………………7.5g聚乙二醇6000…………………………………………………………………………5.0g滑石……………………………………………………………………………………5.0g硬脂酸鎂………………………………………………………………………………1.8g脫礦質(zhì)水………………………………………………………………………………適量首先迫使固體配料通過(guò)0.6mm網(wǎng)眼寬的篩。然后，將活性成分、乳糖、滑石、硬脂酸鎂和一半的淀粉混合。將另一半淀粉懸浮于40mL水中并且將該懸浮液添加到沸騰的聚乙二醇的100mL水溶液中。將所得的糊狀物添加到粉狀物質(zhì)中并且將混合物?；绻匦鑴t可以添加水。將顆粒在35℃下干燥過(guò)夜，迫使其通過(guò)1.2mm網(wǎng)眼寬的篩并且壓縮成大約6mm直徑的片劑，其兩面都具有凹面。
權(quán)利要求
1.選自下式1，3-二氧代異吲哚啉的化合物及其鹽 其中當(dāng)n不是0并且R1與R2不相同時(shí)，C*表示的碳原子構(gòu)成手性的中心；X1和X2之一是硝基、1-6個(gè)碳原子的烷基或NH-Z并且X1或X2中的另一個(gè)是氫；R1和R2各自獨(dú)立地是羥基或NH-Z；R3是氫、1-6個(gè)碳原子的烷基或鹵素；Z是氫、芳基、1-6個(gè)碳原子的酰基或1-6個(gè)碳原子的烷基；并且n的值是0、1或2；前提條件是如果X1和X2之一是硝基并且n是1或2，則R1和R2不是羥基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是羥基；R2是氨基；R3是氫并且n是1或2。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是氨基；R2是羥基；R3是氫并且n是1或2。
4.權(quán)利要求1的化合物，其是1-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)丙烷-1，3-二羧酸。
5.權(quán)利要求1的化合物，其是1-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)丙烷-1，3-二羧酸。
6.權(quán)利要求1的化合物，其是4-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸。
7.權(quán)利要求1的化合物，其是2-(4-甲基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?。
8.權(quán)利要求1的化合物，其是2-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丁酸。
9.權(quán)利要求1的化合物，其是2-(4-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸。
10.權(quán)利要求1的化合物，其是2-(4-硝基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲酰基丁酸。
11.權(quán)利要求1的化合物，其是2-(4-氨基-1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷帷?br> 12.一種減少哺乳動(dòng)物中不期望炎性細(xì)胞因子含量的方法，包括施用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
13.一種藥物組合物，含有權(quán)利要求1的化合物和與之組合的載體，其中所說(shuō)的化合物的含量以單劑量或多劑量方案施用時(shí)可足夠減少哺乳動(dòng)物炎性細(xì)胞因子的含量。
14.選自下式1-氫代異吲哚啉的化合物及其鹽 其中當(dāng)n不是0并且R1與R2不相同時(shí)，C*表示的碳原子構(gòu)成手性的中心；X1和X2之一是氨基、硝基、1-6個(gè)碳原子的烷基或NH-Z并且X1或X2中的另一個(gè)是氫；R1和R2各自獨(dú)立地是羥基或NH-Z；R3是1-6個(gè)碳原子的烷基、鹵素或氫；Z是氫、芳基、1-6個(gè)碳原子的?；?-6個(gè)碳原子的烷基；n的值是0、1或2；前提條件是如果X1和X2之一是氨基或硝基，X1和X2之一是氫，并且n是1或2，則R1和R2不都是羥基。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中R1是羥基；R2是胺；R3是氫并且n是1或2。
16.權(quán)利要求14的化合物，其中R1是胺；R2是羥基；R3是氫并且n是1或2。
17.權(quán)利要求14的化合物，其是2-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸。
18.權(quán)利要求14的化合物，其是2-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷?。
19.權(quán)利要求14的化合物，其是4-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-4-氨基甲?；∷帷?br> 20.權(quán)利要求14的化合物，其中1-氧代異吲哚啉是2-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)琥珀酸。
21.權(quán)利要求14的化合物，其是2-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?。
22.權(quán)利要求14的化合物，其是3-(4-硝基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；?。
23.權(quán)利要求14的化合物，其是3-(4-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲酰基丙酸。
24.權(quán)利要求14的化合物，其是3-(3-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)-3-氨基甲?；帷?br> 25.權(quán)利要求14的化合物，其是2-(4-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸。
26.權(quán)利要求14的化合物，其是2-(3-氨基-1-氧代異吲哚啉-2-基)戊二酸。
27.一種減少哺乳動(dòng)物中不期望炎性細(xì)胞因子含量的方法，包括施用有效量的權(quán)利要求14的化合物。
28.一種藥物組合物，含有權(quán)利要求14的化合物和與之組合的載體，其中所說(shuō)的化合物的含量以單劑量或多劑量方案施用時(shí)可足夠減少哺乳動(dòng)物炎性細(xì)胞因子的含量。
29.一種抑制TNFα的方法，包括施用權(quán)利要求1的化合物，其中X1和X2之一是氨基。
30.使用權(quán)利要求1的化合物作為免疫調(diào)節(jié)藥物的方法，其中X1和X2之一是氨基。
31.使用權(quán)利要求1的化合物作為免疫調(diào)節(jié)藥物的方法。
32.使用權(quán)利要求1的化合物抑制不期望的血管生成的方法
33.使用權(quán)利要求14的化合物抑制不期望的血管生成的方法，
34.使用權(quán)利要求1的化合物抑制不期望的血管生成的方法，其中X1和X2之一是氨基。
35.使用權(quán)利要求14的化合物抑制不期望的血管生成的方法，其中X1和X2之一是氨基。
36.使用權(quán)利要求1的化合物治療癌癥的方法。
37.使用權(quán)利要求14的化合物治療癌癥的方法。
38.使用權(quán)利要求1的化合物治療癌癥的方法，其中X1和X2之一是氨基。
39.使用權(quán)利要求14的化合物治療癌癥的方法，其中X1和X2之一是氨基。
40.使用權(quán)利要求1的化合物抑制哺乳動(dòng)物中TNFα的方法，其中X1和X2之一是烷基。
41.使用權(quán)利要求1的化合物作為免疫調(diào)節(jié)藥物的方法，其中X1和X2之一是烷基。
42.使用權(quán)利要求1的化合物抑制不期望的血管生成的方法，其中X1和X2之一是烷基。
43.使用權(quán)利要求14的化合物抑制不期望的血管生成的方法，其中X1和X2之一是烷基。
44.使用權(quán)利要求1的化合物治療癌癥的方法，其中X1和X2之一是烷基。
45.使用權(quán)利要求14的化合物治療癌癥的方法，其中X1和X2之一是烷基。
46.權(quán)利要求1的化合物，其是基本上手性純的(R)-異構(gòu)體、基本上手性純的(S)-異構(gòu)體或其混合物.
47.權(quán)利要求14的化合物，其是基本上手性純的(R)-異構(gòu)體、基本上手性純的(S)-異構(gòu)體或其混合物。
全文摘要
在吲哚啉環(huán)第4－或第5－位上被取代的1－氧代和1,3－二氧代－異吲哚啉,其可以減少哺乳動(dòng)物中炎性細(xì)胞因子如TNFα的含量。一個(gè)典型的化合物是4－(4－氨基－1,3－二氧代異吲哚啉－2－基)－4－氨基甲酰基丁酸。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1342146SQ00804440
公開(kāi)日2002年3月27日 申請(qǐng)日期2000年3月17日 優(yōu)先權(quán)日1999年3月18日
發(fā)明者喬治·W·馬勒, 戴維·斯特林 申請(qǐng)人:塞爾基因公司