專利名稱：基于(3r,4r)－△8－四氫大麻酚－11－酸的減少細(xì)胞增殖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及癌癥的治療方法及有機(jī)化學(xué)。
背景技術(shù)：
大麻植物中對(duì)精神起顯著作用的藥劑是四氫大麻酚(THC)。因?yàn)橐阎藢?duì)精神的顯著作用外，THC還可引起各種生理作用(例如，可作為抗炎劑或止痛劑)，因此THC的各種衍生物也是有益的，且已經(jīng)作為有效藥物而被合成出來(lái)，其中所述THC的各種衍生物保留了THC有利的生物化學(xué)或藥理學(xué)活性，且沒有任何濫用或?qū)衿痫@著作用的可能性。
與THC及其若干衍生物有關(guān)的其中一個(gè)活性是抑制細(xì)胞增殖。然而，此活性，就像對(duì)精神起顯著作用一樣，取決于與cannabinoid受體CB1的結(jié)合(Galve-Roperh等，Nat.Med.6313-319，2000；De Petrocellis等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 958375-8380，1998；和Bisogno等，Eur.J.Biochem.254634-642，1998)。因此，人們預(yù)期THC不對(duì)精神起顯著作用的衍生物，其不與CB1受體結(jié)合(Burstein，Pharmacol.Ther.8287-96，1999)，不能抑制細(xì)胞增殖。
發(fā)明概述本發(fā)明是以不對(duì)精神起顯著作用的THC衍生物，如THC酸可減少細(xì)胞增殖的發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)的。此外，該作用不依賴于細(xì)胞程序死亡速率的增加，其已經(jīng)被確定為THC的一種CB1-受體介導(dǎo)的活性(Sanchez等，F(xiàn)EBS Lett.4366-10，1998)。
因此，本發(fā)明涉及一種減少哺乳動(dòng)物(例如，人)細(xì)胞增殖的方法，該方法包括確定希望減少細(xì)胞增殖的哺乳動(dòng)物；并給予哺乳動(dòng)物可有效減少哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖量的通式I化合物， 其中R1是氫原子，-COCH3，或-COCH2CH3；R2是支鏈的C5-C12烷基。R1可以是氫，R2可以是C9烷基，其可以是支鏈烷基，如1，1-二甲基庚基。
本發(fā)明還涉及減少哺乳動(dòng)物(例如，人)細(xì)胞增殖的方法，該方法包括確定希望減少細(xì)胞增殖的哺乳動(dòng)物；并給予哺乳動(dòng)物可有效減少哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖量的通式II化合物， 其中R1是氫，-COCH3，或-COCH2CH3；R2是具有末端芳環(huán)的支鏈C5-12烷基化合物，或具有末端芳環(huán)的支鏈-OCHCH3(CH2)m烷基化合物，其中m為0-7；R3是氫，C1-8烷基化合物，或C1-8鏈烷醇化合物；Y什么也沒有或是NH或氧橋連基；假如Y是氧，那么R2是支鏈的C5-12烷基，R3不是-CHCH3。
優(yōu)選的通式II化合物是當(dāng)R1為氫，R2為1’，1’-二甲基庚基，Y什么也沒有時(shí)得到的。因此，在此優(yōu)選形式中，所述化合物具有下列通式III
在這些化合物中，R包括氫，支鏈或直鏈的C1-8烷基化合物，支鏈或直鏈的C1-8鏈烷醇化合物。在其它優(yōu)選形式中，R是甲基或甲醇，或支鏈或直鏈的乙基，丙基，乙醇，或丙醇。
所述化合物可口服(例如，作為食品強(qiáng)化劑)，全身，靜脈內(nèi)，或經(jīng)由植入物給藥，其中所述植入物可緩慢釋放該化合物。此外，給予所述化合物可治療預(yù)-存在的，特征在于細(xì)胞增殖的疾病或病癥，或預(yù)防這種疾病或病癥。所述化合物可以0.1-20mg/kg體重(例如，大約0.2-2mg/kg體重)的劑量給予哺乳動(dòng)物，從而有效減少細(xì)胞增殖。該方法特別適于治療患癌癥的哺乳動(dòng)物。
此外，在體外，細(xì)胞可與所述化合物接觸，減少或消除細(xì)胞的增殖能力。
此處所用“細(xì)胞增殖”是指細(xì)胞數(shù)增加?！皽p少細(xì)胞增殖”是指細(xì)胞增殖的減少，其不僅是由于細(xì)胞程序死亡的增加。
此處所用“烷基”是指含碳原子的直鏈或支鏈烴鏈或環(huán)烴部分。這些烷基還可含有一個(gè)或多個(gè)雙鍵或三鍵?！叭〈榛笔侵钙渲械耐榛颖辉?，例如硫，氧，或鹵原子取代的烷基。
本發(fā)明方法提供了不對(duì)精神起顯著作用的cannabinoids作為藥物治療或預(yù)防特征在于細(xì)胞增殖的病癥或疾病(例如，癌癥)的新用途。由于這種cannabinoids的低毒性，不對(duì)精神起顯著作用的性質(zhì)和低濫用的可能性，所述化合物可被用作食品強(qiáng)化劑(例如，像每日的維生素丸劑)，從而預(yù)防癌癥。此外，所述化合物還可局部涂在特征在于不良細(xì)胞增殖，如牛皮癬的皮膚損害處。
除非另有說(shuō)明，此處所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本領(lǐng)域技術(shù)人員通常所理解相同的含義，其屬于本發(fā)明。雖然下面描述了實(shí)踐或試驗(yàn)本發(fā)明的適宜方法和材料，但也可使用本領(lǐng)域已知的，與此處所述那些相似或相同的其它方法和材料。所有出版物，專利申請(qǐng)及其它參考文獻(xiàn)的全部均引入此處作為參考。在有分歧的情況下，可對(duì)照本發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明，包括定義。此外，材料，方法，和實(shí)施例僅僅是舉例說(shuō)明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制。
從下列詳細(xì)描述及權(quán)利要求可很明顯理解本發(fā)明的其它特征和有益之處。


圖1是各種化合物濃度對(duì)細(xì)胞數(shù)的線狀圖表。
圖2是ajulemic酸濃度對(duì)細(xì)胞數(shù)的柱狀圖。
圖3是各種化合物濃度對(duì)中性脂質(zhì)/百萬(wàn)細(xì)胞的線狀圖表。
圖4是接種后的天數(shù)對(duì)腫瘤直徑的線狀圖表。
詳細(xì)描述本發(fā)明涉及通過(guò)給予哺乳動(dòng)物THC衍生物而減少哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖(例如，癌癥的治療)的方法。這些THC衍生物(例如，通式I，II和III定義的化合物)已經(jīng)減少或不對(duì)精神起顯著作用，且不結(jié)合CB1受體。這種THC衍生物是已知的，可被合成出來(lái)(見，例如美國(guó)專利No.5,338,753Burstein等，J.Medicinal.Chem.353185-3141，1992；和Burstein，Pharmacol.Ther.8287-96，1999)。
所述THC衍生物可經(jīng)由任何適宜的途徑，例如靜脈內(nèi)，動(dòng)脈內(nèi)，局部，通過(guò)注射，腹膜內(nèi)，胸膜內(nèi)，口服，皮下，肌肉內(nèi)，舌下，表皮內(nèi)，或直腸給藥。它可被配制成溶液，混懸液，栓劑，片劑，顆粒劑，散劑，膠囊劑，軟膏劑或乳膏。在制備這些藥物時(shí)，可加入溶劑(例如，水或生理鹽水)，加溶劑(例如，乙醇，聚山梨醇酯或Cremophor EL7)，使等滲的制劑，防腐劑，抗氧化劑，賦形劑(例如，乳糖，淀粉，結(jié)晶纖維素，甘露糖醇，麥芽糖，磷酸氫鈣，輕硅酸酐，或碳酸鈣)，粘合劑(例如，淀粉，聚乙烯吡咯烷酮，羥丙基纖維素，乙基纖維素，羧甲基纖維素或阿拉伯樹膠)，潤(rùn)滑劑(例如，硬脂酸鎂，滑石粉或硬化油)，或穩(wěn)定劑(例如，乳糖，甘露糖醇，麥芽糖，聚山梨醇酯，macrogols，或聚氧化乙烯硬化蓖麻油)。如果需要可加入甘油，二甲基乙酰胺，70％乳酸鈉，表面活性劑，或堿性物質(zhì)如氫氧化鈉，乙二胺，乙醇胺，碳酸氫鈉，精氨酸，葡甲胺，或三氨基甲烷。藥物制劑如溶液，片劑，顆粒劑或膠囊劑可用這些成分形成。緩慢釋放該化合物的組合物可按照美國(guó)專利No.4,880,830所述形成。
本發(fā)明化合物的給藥劑量是在考慮到動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果和各種情況的條件下確定的。很明顯，更具體的給藥劑量是根據(jù)給藥方法，受治療者的情況，如年齡，體重，性別，敏感性，所吃的事物，給藥間隔，聯(lián)合給予的藥物，及疾病的來(lái)源，嚴(yán)重性和程度而改變的。一定條件下的最佳給藥劑量和給藥頻率必須在前述指導(dǎo)的基礎(chǔ)上，通過(guò)醫(yī)學(xué)專家的適宜給藥試驗(yàn)確定。
給予人之前，可在體內(nèi)或體外測(cè)試THC衍生物的生物活性(即，減少細(xì)胞增殖的能力)。體外試驗(yàn)可按照下面的實(shí)施例及Marshall等在Growth Reg.569-84，1995中所述進(jìn)行。腫瘤生長(zhǎng)的體內(nèi)動(dòng)物模型是已知的，如Nagane等在Cancer Res.60847-53，2000；和Price等在Clin.CancerRes.5845-54，1999中所述。
下面，在下列實(shí)施例中進(jìn)一步描述本發(fā)明，實(shí)施例不是對(duì)本發(fā)明范圍的限制，本發(fā)明的范圍是由權(quán)利要求限定。下面的實(shí)施例舉例說(shuō)明了1’，1’-二甲基庚基-Δ8-THC-11-酸(也稱為CT3和ajulemic酸)在減少細(xì)胞增殖中的用途。
實(shí)施例材料和方法細(xì)胞和材料C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞和U87神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞是從ATCC(Manassas，VA)獲得的。采集其它人類的細(xì)胞系，并在Cancer CenterTumor Bank中保存。WI38細(xì)胞是從Tissue Culture Facility of theUniversity of Massachusetts Medical Center(Worcester，MA)獲得的。除非另有說(shuō)明，所有化學(xué)品和溶劑均從Sigma-Aldrich(St.Louis，MO)獲得。THC和THC-11-酸由NIDA提供。Ajulemic酸是按照Burstein等，在J.Medicinal Chem.353185-3141，1992中所述合成的。
細(xì)胞增殖試驗(yàn) 按照Marshall等在Growth Reg.569-84，1995中所述，利用MTT試驗(yàn)測(cè)量體外細(xì)胞數(shù)的改變。
流式細(xì)胞術(shù)/細(xì)胞周期的分析 對(duì)于流式細(xì)胞術(shù)而言，細(xì)胞在低濃度血清(0.5％)中生長(zhǎng)兩天，從而使細(xì)胞在G0/G1中同步，之后將其置于高濃度血清(10％)中兩天。然后用碘化丙錠標(biāo)記該細(xì)胞，并在4％低聚甲醛中固定。使用MoFlo Facs分選儀檢驗(yàn)細(xì)胞的DNA含量。
脂質(zhì)摻入試驗(yàn) 如下處理細(xì)胞。如上所述在24孔培養(yǎng)皿中制備單層C-6細(xì)胞。把從ARC，St.Louis.MO(55mCi/mmol的比活性)得到的羧基標(biāo)記的14C-花生四烯酸(150,000dpm/孔)加入到各單層中，培養(yǎng)2小時(shí)。用cannabinoid進(jìn)行的處理是通過(guò)將10μl藥物的DMSO溶液加入到1ml覆蓋各單層的培養(yǎng)基中引起的。除非另有說(shuō)明，處理持續(xù)48小時(shí)。培養(yǎng)之后，除去并丟棄所述培養(yǎng)基。每次用1ml PBS洗兩次后，室溫用0.5ml無(wú)水乙醇提取細(xì)胞脂質(zhì)1小時(shí)。所有處理均是一式四份進(jìn)行的。除沒有cannabinoid存在外，同樣處理對(duì)照組的細(xì)胞。
為了對(duì)所提取的脂質(zhì)進(jìn)行組群分析，冷凍干燥該脂質(zhì)樣品。在真空蒸發(fā)之前，將14C-膽固醇(50,000dpm)作為恢復(fù)標(biāo)記物(ARC，St.LouisMO；50 mCi/mmol的比活性)加入。然后將樣品殘余物溶解在所含steroyl-arachidonoyl甘油二酯，甘油三油酸酯和卵磷脂各為10μg的30μl甲醇中，并將其涂在0.25mm硅膠薄層板上。第一次洗脫是使用二氯甲烷∶丙酮＝9∶1的混合物進(jìn)行的，用于分析中性脂質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)Rf值為卵磷脂＝0，膽固醇＝0.38，甘油二酯＝0.64，甘油三酯＝0.81。測(cè)定中性脂質(zhì)的量后，用氯仿∶甲醇∶乙酸∶水＝50∶25∶8∶4的混合物作為洗脫劑進(jìn)行第二次洗脫，用于分析磷脂。卵磷脂的Rf值為0.33。DG和TG移動(dòng)到溶劑前沿。所有標(biāo)準(zhǔn)均是通過(guò)暴露于碘蒸汽檢測(cè)的。
如下測(cè)定所標(biāo)記脂質(zhì)的量。放射性區(qū)是通過(guò)平板暴露于X-射線膜48小時(shí)檢測(cè)的。該膜的TIFF計(jì)算機(jī)文件是使用Fluor-S系統(tǒng)(Biorad)產(chǎn)生的。利用NIH Image軟件測(cè)量色譜圖。使用所顯示的峰高值，這是因?yàn)樗斜Ａ舻臉?biāo)記成分在色譜圖上均顯示狹窄的尖峰。使用每個(gè)區(qū)單獨(dú)的膽固醇標(biāo)準(zhǔn)值校準(zhǔn)各成分的值。然后用所得的值除以各孔中的細(xì)胞數(shù)，結(jié)果以指數(shù)/百萬(wàn)細(xì)胞表示。
蛋白激酶C(PKC)的試驗(yàn) 將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到MEM培養(yǎng)基(0.5％血清)中，過(guò)夜培養(yǎng)。第二天，用DMSO或25μM ajulemic酸處理細(xì)胞達(dá)一段規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間，之后使平板經(jīng)過(guò)胰蛋白酶消化作用。利用試劑盒(Calbiochem，cat.no.53984)測(cè)試5×106個(gè)經(jīng)過(guò)胰蛋白酶消化作用的細(xì)胞的PKC活性。
體內(nèi)皮下模型 將106個(gè)U87細(xì)胞注射到雄性nu/nu BALBc小鼠(Charles River)右脅腹的肌肉中。接種兩天后，小鼠以0.1mg/kg的劑量接受溶解在0.05ml紅花油中的ajulemic酸溶液，或口服給予0.05ml紅花油。此后，在每周一，周三，和周五進(jìn)行相同的給藥。當(dāng)出現(xiàn)肉眼可見的腫瘤時(shí)，通過(guò)求兩次約略垂直的直徑測(cè)量值的平均數(shù)而評(píng)估腫瘤的大小。在給藥后測(cè)量肉眼可見的腫瘤。
結(jié)果使用MTT試驗(yàn)評(píng)估生長(zhǎng)的可能性，值得注意的是Δ9-THC，THC 11-酸和ajulemic酸均以依賴給藥劑量的形式抑制C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞，其分別具有10，20和55μM的IC50值(圖1)。連續(xù)48小時(shí)測(cè)試來(lái)源于各種癌癥類型(腦，胸，膀胱，肺，和前列腺)的大多數(shù)人類細(xì)胞系的增殖對(duì)25μM各藥劑的敏感性。在此給藥劑量下，ajulemic酸可比THC或THC-11-酸更好地抑制細(xì)胞增殖。(此處所用“THC”是指Δ8-或Δ9-THC)。如表1所示，ajulemic酸，THC和THC-11-酸的抑制水平分別為61.3±12.1，39.4±22.0，和13.1±18.5％(平均值±SD)，在單向ANOVA，成對(duì)多重比較(Student-Newman-Keuls法)中p＜0.001。

在此給藥劑量下，所測(cè)十個(gè)細(xì)胞系中的六個(gè)均顯示出ajulemic酸明顯比THC更有效(p＜0.05)。
所述三種cannabinoids還可抑制正常大鼠的成纖維細(xì)胞WI38。然而，值得注意的是，與THC不同，ajulemic酸對(duì)WI38細(xì)胞增殖的抑制要少于對(duì)C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制。例如，在25μM給藥劑量的三個(gè)不同試驗(yàn)中，Δ9-THC抑制WI38細(xì)胞增殖66％，抑制C6細(xì)胞增殖50％。與之相比，用ajulemic酸培養(yǎng)兩天可產(chǎn)生相反的結(jié)果。如此，可抑制C6細(xì)胞65％，抑制WI38細(xì)胞44％。該數(shù)據(jù)表明ajulemic酸對(duì)腫瘤的毒性要大于對(duì)正常細(xì)胞的毒性。
為了評(píng)估ajulemic酸的作用是否是受體-介導(dǎo)的，使用95％富含ajulemic酸D-異構(gòu)體的制劑檢測(cè)上面所觀察效果的立體專一性。與ajulemic酸的L-異構(gòu)體相比，25μM給藥劑量的D-異構(gòu)體具有顯著減少的能力(p＜0.001，t-實(shí)驗(yàn))(圖2)。此結(jié)果支持了ajulemic酸的活性是立體有擇性的觀點(diǎn)，且因此很可能是受體介導(dǎo)的。
Ajulemic酸對(duì)腫瘤細(xì)胞作用的三個(gè)特征表明此作用是由不同于Δ9-THC的機(jī)理介導(dǎo)的。首先，化合物對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用不能用CB1拮抗劑逆轉(zhuǎn)。與ajulemic酸作用的輕微加強(qiáng)作用相比，C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞與3.2μM特異拮抗劑的共-培養(yǎng)導(dǎo)致THC的效能減少150％(圖3)。此結(jié)果表明，THC的抗腫瘤作用主要是CB1受體介導(dǎo)的，而ajulemic酸則不是。
第二，ajulemic酸的抗腫瘤活性與暴露于化合物中48小時(shí)后，細(xì)胞大小的顯著增加有關(guān)。為了進(jìn)一步研究此作用，評(píng)估了ajulemic酸對(duì)細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)的作用。在含0.5％血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞24小時(shí)，使它們?cè)贕1/G0中同步。然后使該細(xì)胞暴露于含10％血清的培養(yǎng)基中2天，該培養(yǎng)基含有或不含25μM ajulemic酸。如表2所示，在細(xì)胞周期的S(4.4％-13.0％，p＝0.003，t-試驗(yàn))和G2/M(21.9％-32.3％，p＝0.005，t-試驗(yàn))階段見到所處理細(xì)胞數(shù)的增加，表明處理過(guò)的細(xì)胞可合成DNA，但不能完成有絲分裂。重要地是，細(xì)胞程序死亡的速率沒有增加(是通過(guò)對(duì)照組細(xì)胞與處理過(guò)的細(xì)胞中，亞-G0細(xì)胞的缺乏評(píng)估的)。

*p＜0.02，**p＝0.003，***p＝0.005，所有均是通過(guò)t-試驗(yàn)測(cè)定的。
第三，ajulemic酸抗腫瘤作用的另一個(gè)特征是折射體的出現(xiàn)，用相顯微鏡可很容易地看見折射體。具有折射體的細(xì)胞數(shù)及折射體/細(xì)胞數(shù)均隨時(shí)間而增加。48小時(shí)后，與27％用THC-處理過(guò)的細(xì)胞相比，83％用ajulemic酸-處理過(guò)的C6細(xì)胞具有一個(gè)或多個(gè)折射體(p＜0.001，卡方分析)。與用THC-處理過(guò)的細(xì)胞相比，對(duì)于用ajulemic酸-處理過(guò)的細(xì)胞而言，其每個(gè)細(xì)胞的折射體平均數(shù)更高(1.78±1.6對(duì)0.22±0.5/細(xì)胞，p＜0.001，t-試驗(yàn))。有趣的是，在用量和處理時(shí)間相同的情況下，用ajulemic處理過(guò)的WI38細(xì)胞，或用25μM THC-11-酸處理過(guò)的C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中均沒有折射體。
為了進(jìn)一步探究折射體和細(xì)胞增大的性質(zhì)，在電子顯微鏡下檢測(cè)細(xì)胞。用ajulemic酸處理過(guò)的細(xì)胞既不是細(xì)胞程序死亡的又不是壞死的。事實(shí)上，這些細(xì)胞顯示出代謝活性。這一點(diǎn)與其它的觀察一致，即雖然細(xì)胞增殖可被ajulemic酸顯著抑制，但所述處理過(guò)的細(xì)胞具有較高的(＞95％)生存率，其是通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)排除評(píng)估的，并在藥物除去后迅速恢復(fù)。此外，用ajulemic酸處理過(guò)的細(xì)胞擴(kuò)大，并含有較大的脂質(zhì)滴，其特性是通過(guò)用四氯化鋨漂白加以證實(shí)的。
為了研究所增加脂質(zhì)的來(lái)源，使C6細(xì)胞生長(zhǎng)，并在有14C-標(biāo)記的花生四烯酸存在的情況下，用25μM劑量的cannabinoid處理該細(xì)胞。比較用賦形劑(沒有cannabinoid)，THC，或THC-11-酸處理過(guò)的細(xì)胞，培養(yǎng)48小時(shí)后，只有ajulemic酸顯著增加并高于基本水平(p＜0.05，多重比較的Durmett′s試驗(yàn)對(duì)對(duì)照組)(圖3)。在ajulemic酸的此劑量水平，甘油三酯和甘油二酯的含量比對(duì)照組高三倍。相反，對(duì)于任何cannabinoid處理而言，沒有檢測(cè)到磷脂酰膽堿水平的顯著增加。用14C-油酸標(biāo)記物培養(yǎng)后可見到相似的結(jié)果。
因?yàn)槎；视?DAG)是蛋白激酶C一種重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物，因而檢測(cè)C6細(xì)胞中ajulemic酸處理對(duì)PKC活性的作用。暴露于ajulemic酸之后，PKC活性在5分鐘內(nèi)增加，并以高于對(duì)照組約兩倍的水平保持1小時(shí)，表明PKC在ajulemic酸介導(dǎo)的細(xì)胞增殖抑制中起著重要的作用。對(duì)于此觀察而言，至少存在兩個(gè)可供選擇的解釋(1)受激的PKC同工酶是緩慢生長(zhǎng)的那些，如PKC5；(2)增加的DAG0在很大程度上正在調(diào)制一些其它的下游介質(zhì)，如β-chimaerin這樣平衡可向著抗-增殖一邊。
Ajulemic酸是否具有體內(nèi)抗腫瘤活性是使用裸鼠腫瘤模型測(cè)定的。在給予或不給予ajulemic酸的情況下，評(píng)估在裸鼠皮下注射的人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87的生長(zhǎng)。對(duì)于這些實(shí)驗(yàn)而言，在小鼠中接種106個(gè)腫瘤細(xì)胞后，開始ajulemic酸處理。每周三次接受0.1mg/kg ajulemic酸的組可見到腫瘤大小和外觀的延遲(圖4)。在接種后的第25天，5只對(duì)照小鼠中的5只具有16.3±3.2mm平均直徑的腫瘤，而治療組的平均直徑為3.8±8.5mm(n＝5，p-0.015，t-試驗(yàn))。這些體內(nèi)結(jié)果證實(shí)了ajulemic酸抑制腫瘤細(xì)胞增殖的能力。
權(quán)利要求
1.一種減少哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的方法，該方法包括下列步驟確定希望減少細(xì)胞增殖的哺乳動(dòng)物；并給予哺乳動(dòng)物可有效減少哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖量的通式化合物， 其中R1是氫，-COCH3，或-COCH2CH3；R2是可具有末端芳環(huán)的支鏈C5-12烷基化合物，或可具有末端芳環(huán)的支鏈-OCHCH3(CH2)m烷基化合物，其中m為0-7；R3是氫，C1-8烷基化合物，或C1-8鏈烷醇化合物；Y什么也沒有或是NH或氧橋連基；假如Y是氧，那么R2是支鏈的C5-12烷基，R3不是-CHCH3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有下列通式
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中R包括氫，支鏈或直鏈的C1-8烷基化合物，及支鏈或直鏈的C1-8鏈烷醇化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中R是甲基或甲醇，或支鏈或直鏈的乙基，丙基，乙醇或丙醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物是口服給藥的。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物是全身給藥的。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物是經(jīng)由植入物給藥的。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述植入物緩慢釋放該化合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物是靜脈內(nèi)給藥的。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物是局部給藥的。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述細(xì)胞增殖與癌癥有關(guān)。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所給予化合物的量約為0.1-20mg/kg哺乳動(dòng)物體重。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所給予化合物的量約為0.2-2mg/kg哺乳動(dòng)物體重。
全文摘要
本發(fā)明涉及cannabinoid(四氫大麻酚的衍生物)化合物減少哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的用途。
文檔編號(hào)A61K31/353GK1447685SQ01813010
公開日2003年10月8日 申請(qǐng)日期2001年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2000年5月17日
發(fā)明者薩姆納·伯斯坦 申請(qǐng)人:薩姆納·伯斯坦, 勞倫斯·雷徹, 羅伯特B·朱利爾