專利名稱：沖洗液及其使用方法
本申請是2002年1月23日提交的美國連續(xù)申請No.10/055,075的部分繼續(xù)申請，其在此被全部引入作為參考。
本申請涉及在牙科操作過程中從牙齒表面去除不需要的物質(zhì)的方法和溶液。本發(fā)明在例如根管治療、修復(fù)、牙重建和牙周手術(shù)等操作過程中去除在牙齒表面預(yù)備過程中形成的碎屑和細(xì)菌的集結(jié)，也適用于用于重建或修復(fù)的骨的準(zhǔn)備。
由于牙髓病理改變的緣故，根管系統(tǒng)獲得了藏匿數(shù)種細(xì)菌、它們的毒素和它們的副產(chǎn)品的能力。在被感染的根管中存在的微生物主要是革蘭氏陰性厭氧菌，它們從直接暴露的牙髓(齲齒或創(chuàng)傷性損傷)或冠面微漏侵入根管。根管的形態(tài)學(xué)是很復(fù)雜的，并機械地構(gòu)成了根管包含區(qū)域，牙髓病學(xué)器械到達不了該區(qū)域。根管中存在的微生物不僅僅侵襲根管系統(tǒng)的解剖學(xué)不規(guī)則處，也侵襲牙本質(zhì)小管。
在根部中，牙本質(zhì)小管從正好位于牙骨質(zhì)-牙本質(zhì)界里面的中間牙質(zhì)延伸到牙髓-原牙質(zhì)界。在牙骨質(zhì)-牙本質(zhì)界附近的小管直徑大約是1μm，牙髓-原牙質(zhì)界附近的大約是2.5μm。每平方毫米牙本質(zhì)小管的數(shù)量是8000到57000個。在牙骨質(zhì)-釉質(zhì)界處的牙根周圍，這一數(shù)量估計是每平方毫米大約15000個。
很多研究已經(jīng)顯示，目前使用的清潔和成形方法產(chǎn)生了覆蓋根管壁的玷污層(smear layer)。這種玷污層是使用器械后產(chǎn)生的，它的內(nèi)容被迫入牙本質(zhì)小管從而改變其間隔。Moodnik，R.M.，Dorn，S.O.，F(xiàn)eldman，M.J.，Levey，M.，和Borden，B.G.，J.Endodon.，1976，2，261-266；Cengiz，T.，Aktener，B.O.，和Piskin，B.，Int′l.Endodon.J.，1990，23，163-171。Cengiz等人提出，玷污物質(zhì)滲透到牙本質(zhì)小管中有可能是由牙本質(zhì)小管和玷污物質(zhì)之間產(chǎn)生的毛細(xì)管作用引起的。
1975年，McComb和Smith在牙髓病學(xué)中描述了玷污層。McComb，D.，和Smith，D.C.，J.Endodon.，1975，1，238-242。它后來是以由管壁表面平均1-2μm厚的表面層、和塞到牙本質(zhì)小管中最多40μm深的較深層一起組成為特征的。Cameron，J.A.，J.Endodon.，1983，9，289-292；Mader，C.L.，Baumgartner，J.C.，和Peters，D.D.，J.Endodon.，1984，10，477-483。玷污層是由有機物和無機物組成的，它包括成牙質(zhì)過程的碎片、微生物和壞死的物質(zhì)。大量的研究已經(jīng)表明，玷污層的存在會阻止根管藥物和封閉劑滲透到牙本質(zhì)小管中。另外，它們還表明，玷污層的去除會導(dǎo)致根管填充物和牙本質(zhì)壁之間更好的適應(yīng)。
在被感染的根管中存在的細(xì)菌通常會侵襲牙本質(zhì)小管，如果它們在根管治療后還繼續(xù)存活，還會使根管再感染。據(jù)報道，能活的細(xì)菌在被感染的牙齒的牙本質(zhì)小管中位于根管壁和牙骨質(zhì)牙本質(zhì)界之間大約一半距離的位置。在被感染的根管的牙本質(zhì)壁中也已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了內(nèi)毒素。關(guān)注明顯集中于這些細(xì)菌的命運，尤其是它們能否找到生長和繁殖的營養(yǎng)。
根管和牙本質(zhì)小管中存在的細(xì)菌的完全根除，三維地密封根管以及已密封根管再污染的避免是牙髓病學(xué)治療的理想目標(biāo)。因為根管系統(tǒng)的復(fù)雜性，且器械無法接觸根管的所有表面，不可能在所有根管被感染了的牙齒中創(chuàng)造一個無菌的空間。Bystrom，A.，和Sundqvist，G.，Sc和，J.Dent.Res.，1981，89，321-328；Bystrom，A.，Claesson，R.，和Sundqvist，G.，Endod.Dent.Traumatol.，1985，1，170-175。事實上，在經(jīng)器械預(yù)備后和未被填充的根管中殘留的細(xì)菌可以在2-4天內(nèi)繁殖到它們原來的數(shù)量那么多。為了避免有殘留細(xì)菌的根管被細(xì)菌重新占據(jù)，管內(nèi)藥物的使用和被感染根管的徹底治療被不止一次地推薦。Bystrom，A.，Claesson，R.，和Sundqvist，G.，Endod.Dent.Traumatol.，1985，1，170-175；Chong，B.S.，和Pitt Ford，T.R.，Int′l.Endodon.J.，1992，25，97-106。
傳統(tǒng)認(rèn)為管內(nèi)藥物對于根管治療的成功是很重要的。事實上，有一個普通的假定，就是無論是短期的還是長期的成功都依賴于預(yù)定位置之間根管內(nèi)放置的化學(xué)藥。然而，對于已經(jīng)被用作管內(nèi)藥物的藥物例如含樟腦的單氯酚(CMCP)、formocresol、醋酸間甲酚酯或氫氧化鈣(Ca(OH)2)的有效性，還沒有嚴(yán)格的科學(xué)根據(jù)。管內(nèi)藥物已經(jīng)被特別提議在髓和尖周中用于抗菌，根管殘余物的中和作用以使它們失活，并且控制或預(yù)防治療后疼痛。
一項有關(guān)細(xì)菌對于根管治療的長期成功的影響和存在的研究顯示，大約40％的根管經(jīng)器械預(yù)備后被感染。Sjogren，U.，F(xiàn)igdor，D.，Persson，S.，和Sundqvist，G.，Int′l；Endodon.J.，1997，30，297-306。另外，經(jīng)器械預(yù)備后未施用含Ca(OH)2的管內(nèi)藥物的根管會比用Ca(OH)2治療了一個星期的那些更經(jīng)常遭受顯著失敗(68％比94％)。這項研究的結(jié)果驗證了一項1987年的研究根管有效抗感染之后會提高臨床成功率。Bystrom，A.，Happonen，R.，Sjogren，U.，和Sundqvist，G.，Endod.Dent.Traumatol.，1987，3，58-63。
根據(jù)大量的著作，玷污層的存在會抑制抗微生物劑例如管內(nèi)沖洗液和藥物滲透到牙本質(zhì)小管中。Haapasalo，M.，和φrstavik，D.，J.Dent.Res.，1987，66，1375-1379；Czonstkowsky，M.，Wilson，E.，和Holstein，F(xiàn).，Dental Clinics of N.Am.，1990，34，13-24。幾個調(diào)查者已經(jīng)報道了去除玷污層后封閉材料可以更好的粘附于根管壁。Goldberg，F(xiàn).，和Abramovich，A.，J.Endodon.，1977，3，101-105；White，R.R.，Goldman，M.，和Lin，P.S.，J.Endodon.，1984，10，558-562。幾項研究也報道了具有完整玷污層的小管內(nèi)密封劑很難或根本不滲透。這些研究已經(jīng)顯示，去除玷污層以后密封劑如Tubliseal(滲透到15μm)、AH26(滲透到10-60μm)、Sealpex、Roth′s 811和CRCS(都有35-80μm的滲透)的滲透增加。Gutierrez，J.H.，Herrera，V.R.，Berg，E.H.，Villena，F(xiàn).，和Jofre，A.，Oral Surg.Oral Med.Oral Path.，1990.70，96-108；Pallares，A.，和Faus，V.，Int′l.Endodon.J.，1995，28，266-269；Kouvas，V.，Liolios，E.，Vassiliadis，L.，Parissis-Messismeris，S.，和Boutsioukis，A.，Endod.Dent.Traumatol.，1998，14，191-195。
另外，玷污層的存在與否被認(rèn)為在密封劑粘附到牙本質(zhì)壁的粘附強度中起到了重要的作用。一項研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)去除了玷污層時，AH26密封劑的粘附強度有了顯著的增加。Gettleman，B.H.，Messer，H.H.，和ElDeeb，M.E.，J.Endodon.，1991，17，15-20。這些發(fā)現(xiàn)與另一項研究的結(jié)果相互關(guān)聯(lián)，證明了當(dāng)去除了玷污層時，AH26抵抗微漏的增強。Economides，N.，Liolios，E.，Kolokuris，I.，和Beltes，P.，J.Endodon.，1999，25，123-125。
與這些發(fā)現(xiàn)相反，一些研究顯示，玷污層的存在與否對于根尖滲漏沒有顯著的影響。Evans，J.T.和Simon，J.H.S.，J.Endodon.，1986，12，101-107.Kennedy，W.A.，Walker，W.A.，和Gough，R.W.，J.Endodon.，1986，12，21-27；Economides，N.，Liolios，E.，Kolokuris，I.，和Beltes，P.，J.Endodon.，1999，25，123-125；Timpawat，S.，和Sripanaratanakul，S.，J.Endodon.，1998，24，343-345。
已經(jīng)顯示，在密封根管系統(tǒng)之前去除玷污層可以使封閉材料與根管壁之間更好的適應(yīng)。Yamada，R.S.，Armas，A.，Goldman，M.，和Lin，P.S.，J.Endodon.，1983，9，137-142；Czonstkowsky，M.，Wilson，E.，和Holstein，F(xiàn).，Dental Clinics of N.Am.，1990，34，13-24。一項研究調(diào)察了機械軟化了的古塔膠對牙本質(zhì)壁的適應(yīng)，并報道說去除玷污層可使古塔膠進入牙本質(zhì)小管。Pallares，A.，和Faus，V.，Int′l.Endodon.J.，1995，28，266-269。這些作者報道，在具有完整玷污層的管中，沒有古塔膠滲透到牙本質(zhì)小管中。另一項研究報道了當(dāng)熱填充、超聲填充和側(cè)冷凝技術(shù)被用作封閉方法時，所有的技術(shù)都能顯著的抵抗玷污層去除后的微漏。Gencoglu，N.，Samani，S.，和Gunday，M.，J.Endodon.，1993，19，558-562。古塔膠縱冷凝填充、熱填充以及超聲填充的側(cè)壓填充技術(shù)也已經(jīng)被報道可以減小玷污層去除后的微漏。Taylor，J.K.，Jeansonne，B.G.，和Lemon，R.R.，J.Endodon.，1997，23，508-512；Karagoz-Kucukay，I.，和Bayirli，G.，Int′l.Endod.J.，1994，27，87-93。與這些發(fā)現(xiàn)相反，一些研究報道了玷污層的去除對于填充了側(cè)冷凝古塔膠或熱填充以及系統(tǒng)B(熱縱壓)填充技術(shù)的根管的微漏沒有顯著的影響。Saunders，W.P.，和Saunders，E.M.，J.Endodon.，1994，20，155-158；Kytridou，V.，Gutmann，J.L.，和Nunn，M.H.，Int′l.Endodon.J.，1999，32，464-474。即使玷污層不能被完全去除，本領(lǐng)域的技術(shù)人員也承認(rèn)，在進行填充、重建、修復(fù)或最終治療之前，需要盡可能多的去除玷污層，同時給殘余的部分滅菌。
玷污層的組成是具有很大表面/質(zhì)量比的很細(xì)小的顆粒，這使得他們在酸中很易溶解。由于這種特性，某些酸已經(jīng)被試圖用于去除玷污層。不同配方的乙二胺四乙酸(EDTA)、包括REDTA(Roth EDTA)已經(jīng)被用于從經(jīng)器械治療后的根管表面去除玷污層。McComb，D.，和Smith，D.C.，J.Endodon.，1975，1，238-242。然而一些調(diào)查者卻質(zhì)疑REDTA的有效性，因為當(dāng)單獨使用時，REDTA去除了玷污層的無機部分，卻在小管中留下了完整的有機層。Goldman，M.，Goldman，L.B.，Cavaleri，R.，Bogis，J.，和Lin，P.S.，J.Endodon.，1982，8，487-492。次氯酸鈉(NaOCl)對抗這種有機層已經(jīng)顯得十分有效。當(dāng)單獨使用的時候，NaOCl可以溶解牙髓的剩余物，以及原牙質(zhì)，但對于去除玷污層卻無效。然而EDTA和NaOCl的交互使用已經(jīng)被報道是去除玷污層的有效方法。Goldman，M.，Goldman，L.B.，Cavaleri，R.，Bogis，J.，和Lin，P.S.，J.Endodon.，1982，8，487-492；Yamada，R.S.，Armas，A.，Goldman，M.，和Lin，P.S.，J.Endodon.，1983，9，137-142；Baumgartner，J.C.，和Mader，C.L.，J.Endodon.，1987，13，147-157。一項研究推薦在器械預(yù)備的過程中使用NaOCl，連同EDTA一起沖洗，接著用NaOCl最后清洗。Baumgartner，J.C.，和Mader，C.L.，J.Endodon.，1987，13，147-157。另一項研究比較了EDTA的各種鹽去除玷污層的能力，得出結(jié)論是EDTA的所有的鹽都能從根管三分之二的冠部去除玷污層。另外，相同的研究報道了四鈉鹽(用HCl調(diào)節(jié)pH)比較便宜，和通常使用的EDTA二鈉一樣有效。O′Connell，M.S.，Morgan，L.A.，Beeler，W.J.，和Baumgartner，J.C.，J.Endodon.，2000，26，739-743。
在1993年，EDTA和乙二胺的溶液被發(fā)展用于雙重作用。Aktener，B.O.，和Bilkay，U.，J.Endodon.，1993，19，228-231。其目標(biāo)是觀察單一的沖洗液是否可以被發(fā)展用于去除玷污層的無機成分以及有機成分。發(fā)現(xiàn)了很多明顯的小根管，但還需要更多的研究來證實這一聯(lián)合的有效性。其它的研究把季銨溴化物加到了EDTA中，以減小它的表面張力。Goldberg，F(xiàn).，和Abramovich，A.，J.Endodon.，1977，3，101-105；Ciucchi，B.，Khettabi，M.，和Holz，J.，Int′l.Endod.J.，1989，22，21-28。這些添加劑增大了管壁的濕潤效果，并允許溶液更深的滲透到不規(guī)則(irregularities)中。EDTAC(就象被命名的那樣)在玷污層去除方面顯得十分有效，在15分鐘就達到了它的最高效果，并增大了開放的牙本質(zhì)小管的直徑。Goldberg，F(xiàn).，和Spielberg，C.，Oral.Surg.，1982，53，74-77。另一項研究報道了使用EDTA、過氧化脲(carbamide peroxide)和丙二醇的溶液能有效去除玷污層。Tam，A.，和Yu，D.C.，Compendium Cont.Ed.Dent.，2000，21，967-972。近來，乙二醇-雙-(b-氨基乙基醚-NNNN-四乙酸)、EGTA被報道在去除玷污層而不導(dǎo)致通常由EDTA引起的腐蝕方面有一些效果。Calt，S.，和Serper，A.，J.Endodon.，2000，26，459-461。
被酸去除的玷污層的量與酸的濃度(pH)和暴露的時間直接相關(guān)。Morgan，L.A.，和Baumgartner，J.C.，Oral Surg.Oral Med.OralPath.，1997，84，74-78。多項研究在器械預(yù)備后使用了50％的檸檬酸溶液來處理根管壁，發(fā)現(xiàn)樹脂密封劑更好的滲透到了壁里，并提高了古塔膠的適應(yīng)性(與未經(jīng)處理的根管相比)。Loel，D.，J.A.D.A.，1975，90，148-151；Tidmarsh，B.，J.Endodon.，1978，4，117-121；Baumgartner，J.C.，Brown，C.M.，Mader，C.L.，Peters，D.D.，和Shulman，J.D.，J.Endodon.，1984，10，525-531。當(dāng)檸檬酸被用作去除玷污層的唯一藥劑時，濃度低于50％的溶液是無效的。Yamada，R.S.，Armas，A.，Goldman，M.，和Lin，P.S.，J.Endodon.，1983，9，137-142；Takeda，F(xiàn).H.，Harashima，T.，Kimura，Y.，和Matsumoto，K.，Int′l.Endodon.J.，1999，32，32-39。濃度50％的乳酸比50％的檸檬酸去除玷污層的效果差。Wayman，B.E.，Kopp，W.M.，Pinero，G.J.，和Lazzari，E.P.，J.Endodon.，1979，5，258-265。這可能與乳酸的粘度有關(guān)。另外，10％檸檬酸和2.5％NaOCl的交互使用也已經(jīng)被報道是去除玷污層的十分有效的方法。Wayman，B.E.，Kopp，W.M.，Pinero，G.J.，和Lazzari，E.P.，J.Endodon.，1979，5，258-265。
1989年，一項研究報道了25％的鞣酸在去除玷污層中是有效的，但另一項研究卻反駁這些發(fā)現(xiàn)，并解釋說鞣酸增加了玷污層內(nèi)以及牙質(zhì)下的基質(zhì)內(nèi)暴露的膠原的交聯(lián)，因此增加了其與小管的有機附著。Bitter，N.C.，Oral Surg.Oral Med.Oral Path.，1989，67，333-337；Sabbak，S.A.，和Hassanin，M.B.，J.Prosthet.Dent.，1998，79，169-174。
40％的聚丙烯酸(Durelon liquid和Fuji II liquid)已經(jīng)被報道對于玷污層的去除非常有效。Berry，B.A.，von der Lehr，W.N.，和Herrin，B.K.，J.A.D.A.，1987，115，65-67。然而由于它的效能，聚丙烯酸的應(yīng)用被推薦不應(yīng)該超過30秒鐘。
早在1895年，喔星(8-羥基-喹啉)衍生物就已知具有抗菌性質(zhì)。屬于這一類的地喹氯銨(dequalinium)化合物已經(jīng)被廣泛用作抗細(xì)菌、霉菌和真菌感染的藥物。二-地喹氯銨-乙酸酯(BDA)已經(jīng)顯示能去除遍布根管的玷污層，即使在第三根尖(apical third)。Kaufman，A.Y.，Binderman，I.，Tal，M.，Gedalia，I.，和Peretz，G.，Oral Surg.，1978，46，283-295；Kaufman，A.Y.，Oral Surg.，1981，51，434-441。BDA在牙周組織中能被組織很好的相容，并具有較低的表面張力，這使得它能滲透到器械達不到的間隙里。也認(rèn)為BDA的毒性比NaOCl低，可以交互地用作為根管敷料。一項研究比較了Salvizol(一種0.5％BDA的商標(biāo))和5.25％的NaOCl，發(fā)現(xiàn)兩者在去除有機碎屑的能力方面是可比的，但只有Salvizol可以開放牙本質(zhì)小管。Kaufman，A.Y.，和Greenberg，I.，Oral Surg.，1986，62，191-196。另一項研究報道了Salvizol相對于REDTA在開放牙本質(zhì)小管方面效果較差。Berg，M.S.，Jacobsen，E.L.，BeGole，E.A.，和Remeikis，N.A.，J.Endodon.，1986，12，192-197。
四環(huán)素族抗生素去除玷污層的效果也已經(jīng)被研究到了一定程度。這些物質(zhì)已經(jīng)被用于去除牙本質(zhì)表面的礦物質(zhì)，暴露和擴寬牙本質(zhì)小管孔和暴露牙本質(zhì)的膠原基質(zhì)。這些效果提供了一種基質(zhì)，其刺激成纖維細(xì)胞的粘附和生長。研究顯示，鹽酸強力霉素(100mg/ml)是一種從經(jīng)器械預(yù)備后的根管表面和那些制備好了用于填充根尖末端的物質(zhì)上去除玷污層的有效物質(zhì)。Barkhordar，R.A.，Watanbe，L.G.，Marshall，G.W.，和Hussain，M.Z.，Oral Surg.Oral Med.Oral Path.，1997，84，420-423；Barkhordar，R.A.，和Russel，T.，Cal.Dent.Assn.J.，1998，26，841-844；Haznedaroglu，F(xiàn).和Ersev，H.，J.Endodon.，2001，27，738-740。這些研究推測，可能會產(chǎn)生活性抗菌劑的儲器，因為強力霉素很容易粘附到牙本質(zhì)，之后又可以很容易地釋放。另一項研究已經(jīng)報道了當(dāng)5％四環(huán)素/33％檸檬酸凝膠被用于處理有中度牙周疾病的牙齒時，去除礦物質(zhì)的效果增加。Jeong，S.，Han，S.，Lee，S.，和Magnusson，I.，J.Periodontol.，1994，65，840-847。
除了化學(xué)溶液之外，機械方法(包括超聲波器械預(yù)備)已經(jīng)廣泛地報道能有效地從預(yù)備后的牙齒表面去除玷污層。玷污層的激光去除已經(jīng)顯示是成功的，主根管中蒸發(fā)組織、去除玷污層以及去除根管尖部的殘留組織也同樣。然而由于激光是直線傳播的，激光在彎曲根管中的應(yīng)用是有限的。
和根管的情況一樣，當(dāng)預(yù)備修復(fù)或其它牙科手術(shù)時去除了牙齒材料，玷污層也會形成。而且，在骨的修復(fù)例如矯形外科修復(fù)中，在很多方面與牙髓病學(xué)的玷污層相似的碎屑層也會形成。現(xiàn)在認(rèn)為，它們的去除也是十分需要的。
因此認(rèn)為，十分需要在填充根管之前從預(yù)備后的根管間隙去除玷污層。然而，玷污層物質(zhì)的去除很難完成。而且，沒有現(xiàn)成的方法可以充分地完成玷污層的去除。先前的嘗試已經(jīng)使用了多種化學(xué)物質(zhì)來去除玷污層并給牙根表面滅菌，但得到的結(jié)果一般。希望用單一溶液去除玷污層物質(zhì)，產(chǎn)生有效的、方便的和快速的玷污層去除效果。所有的這些必須在沒有干擾的情況下、按根管預(yù)備或間隙最終修復(fù)的目的來完成。從牙齒修復(fù)部位、牙周部位和其它預(yù)備后的用于牙齒和牙周手術(shù)的位置去除玷污層是進一步的目標(biāo)。實際上，也認(rèn)為需要從口腔內(nèi)外的矯形外科和骨修復(fù)的部位去除玷污層。
發(fā)明概要本發(fā)明提供了用包含消毒劑、去垢劑和酸(尤其是有機酸)的混合物沖洗來從滅菌的牙髓陷凹和其它預(yù)備后的牙齒表面去除玷污層的方法。另一個方面，本發(fā)明涉及用于沖洗預(yù)備后的牙齒表面以去除玷污層的溶液以及使用這種方法進行的修復(fù)。用于骨陷凹也是可以預(yù)期的。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，結(jié)合了消毒劑、去垢劑和酸的溶液對于去除預(yù)備后的牙齒表面和牙本質(zhì)小管上的玷污層是非常有效的。這樣的溶液在多種牙科應(yīng)用(包括但并不限于根管治療，洞的預(yù)備，美容及重建牙科如髓蓋、牙冠、齒橋、鑲蓋等，其它根管手術(shù)，牙周病手術(shù)和骨預(yù)備或骨修復(fù))中是有用的。這樣的溶液在改善矯形外科的修復(fù)部位也是有用的。
此處所用的術(shù)語“玷污層”對于牙科領(lǐng)域的技術(shù)人員是熟知的，指的是由牙齒表面的機械預(yù)備產(chǎn)生的有機和無機碎屑的復(fù)雜堆積物。玷污層包括切削碎屑、牙齒微粒、微生物、壞死物質(zhì)和其它由預(yù)備產(chǎn)生的物質(zhì)，它典型地包括預(yù)備后的牙齒表面上的表面層連同填充到相鄰牙本質(zhì)小管里的大約40μm深的層。在矯形外科學(xué)術(shù)語中，“玷污層”指的是預(yù)備后的骨部位中相類似的層。
此處所用的術(shù)語“消毒劑”全部指的是能夠抑制或消滅在牙髓或牙周部位發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌或其它微生物的組合物。術(shù)語“消毒劑”包括抗生素，該術(shù)語在藥物學(xué)中是已知的。
本發(fā)明的組分包括消毒劑、去垢劑和酸。在一個優(yōu)選的實施方案中，消毒劑是抗生素。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，抗生素在酸性溶液中應(yīng)當(dāng)是穩(wěn)定的、應(yīng)當(dāng)與溶液的其它組分是相容的、應(yīng)當(dāng)至少在溶液制備期間和在預(yù)備后的牙齒或骨表面施用和保留期間保持它的有效性。這樣的抗生素的實施方案包括但并不限于安沙霉素，包括利福霉素；頭孢菌素；大環(huán)內(nèi)酯，如克拉霉素、交沙霉素和竹桃霉素；大部分多肽，如桿菌肽、卷曲霉素、恩多霉素、恩維霉素、短桿菌肽、米卡霉素、利托菌素、硫鏈絲菌肽、短桿菌酪肽、紫霉素以及維吉霉素；所有的四環(huán)素類化合物，如阿哌環(huán)素、氯四環(huán)素、氯莫環(huán)素、地美環(huán)素、強力霉素、胍甲環(huán)素、賴甲環(huán)素、mecleocycline、美他環(huán)素、米諾環(huán)素、土霉素、青哌環(huán)素、匹哌環(huán)素、羅利環(huán)素、山環(huán)素、莫匹羅星以及鹽酸四環(huán)素；以及抗結(jié)核菌素。大部分喹諾酮類，如環(huán)丙沙星、蓋替氟沙星以及莫西沙星都不是優(yōu)選的，因為它們是弱堿，在酸性溶液中效果會降低。另外，大多數(shù)β-內(nèi)酰胺類抗生素，尤其是青霉素，也不是優(yōu)選的，因為它們在酸性溶液中通常不穩(wěn)定。然而例外的是阿莫西林，它是青霉素家族及相似化合物中酸穩(wěn)定的一個。
四環(huán)素是廣譜抗生素，它們對于大范圍的微生物是有效的。它們包括鹽酸四環(huán)素、米諾環(huán)素以及強力霉素。四環(huán)素的性質(zhì)是抑制細(xì)菌的，相對于革蘭氏陰性細(xì)菌，它們對革蘭氏陽性細(xì)菌通常更有效。四環(huán)素涉及的應(yīng)當(dāng)包括四環(huán)素家族的所有成員。大量的研究顯示，外科牙周治療后，四環(huán)素顯著地提高了愈合。四環(huán)素家族的成員在此被優(yōu)選使用。四環(huán)素被優(yōu)選是由于幾個原因。一個原因是因為它們除了抗菌作用外還有很多獨特的性質(zhì)。例如，鹽酸四環(huán)素在濃縮的溶液中具有低pH值，因此可以用作鈣螯合劑，導(dǎo)致牙釉質(zhì)和牙根表面去除礦物質(zhì)。鹽酸四環(huán)素在牙本質(zhì)表面去除礦物質(zhì)可以比得上使用檸檬酸的結(jié)果。另外，還顯示，鹽酸四環(huán)素是支持藥物，它能從牙齒結(jié)構(gòu)如牙本質(zhì)和牙骨質(zhì)中吸收并釋放。由于極少部分普通人對四環(huán)素表現(xiàn)出變應(yīng)性或其它敏感性，因此四環(huán)素的應(yīng)用也是優(yōu)選的。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，消毒劑是抗菌劑化合物。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，抗菌劑化合物在酸性溶液中應(yīng)當(dāng)是穩(wěn)定的、應(yīng)當(dāng)與溶液的其它組分是相容的、應(yīng)當(dāng)至少在溶液制備期間和在預(yù)備后的牙齒或骨表面施用和保留期間保持它的有效性。這樣的抗菌劑化合物的實施方案包括但并不限于洗必泰化合物。葡萄糖酸洗必泰是優(yōu)選的。合適的葡萄糖酸洗必泰溶液的一個實施方案是商業(yè)可提供的以″peridex″命名的0.12％的溶液。另外，葡萄糖酸洗必泰的應(yīng)用對于那些對四環(huán)素類化合物敏感或過敏的患者來說是尤其需要的。
本領(lǐng)域技術(shù)人員也應(yīng)當(dāng)意識到，所用的去垢劑在含抗生素化合物的酸性溶液中應(yīng)當(dāng)是穩(wěn)定的。更優(yōu)選的是那些去垢劑，其能減小溶液的表面張力，因此提供增加的潤濕效果，并能提高沖洗溶液滲透到牙本質(zhì)小管和很難到達的不規(guī)則間隙的滲透力。此外，去垢劑應(yīng)當(dāng)是本身適用于牙科應(yīng)用而對被給藥的人或動物無害的。
在一個優(yōu)選的實施方案中，去垢劑是非離子表面活性劑或類似化合物，優(yōu)選通常用在食品和藥品工業(yè)中或被食品和藥品監(jiān)督管理局許可使用的那些。這樣的化合物的實施方案包括但并不限于單-和二-甘油酯；蔗糖酯；脫水山梨糖醇酯(也稱為SPANs)，尤其是脫水山梨糖醇單硬脂酸酯；山梨糖醇；聚山梨醇酯(聚氧乙烯脫水山梨糖醇酯，在工業(yè)上也稱為TWEENs)，尤其是聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯65和聚山梨醇酯80；stearoly lactylates；卵磷脂及其衍生物；聚乙二醇脂肪酸酯；p-甲基異丙基苯；季銨化合物；烷基磺酸鈉；三乙醇胺以及烷基多糖。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，所用的去垢劑選自脫水山梨糖醇酯或聚山梨醇酯。優(yōu)選的種類中的一個典型例子是聚山梨醇酯80(聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯)。
對于牙科領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，所用的酸應(yīng)當(dāng)適合于牙科應(yīng)用也是顯然的。因此，酸的施用濃度和沖洗過程中所用的量應(yīng)當(dāng)是無毒的，也應(yīng)當(dāng)與所選用的作為溶液其它組分的去垢劑和消毒劑之間是相容的。優(yōu)選的酸在所選的暴露時間內(nèi)也必須能夠溶解玷污層的有機和無機組分，而不導(dǎo)致牙齒及周圍表面的不希望的腐蝕。
在其它優(yōu)選的實施方案中，酸是有機酸，尤其是pKa值介于1.5和5之間的那些。更優(yōu)選的是羧酸或其它極性的pKa值介于2和5之間的酸。本發(fā)明中最優(yōu)選的是pKa值介于2.75和3.75之間的酸。優(yōu)選種類中的典型例子是檸檬酸。當(dāng)四環(huán)素被選作消毒劑時，檸檬酸尤其適合，因為檸檬酸不會降低或改變四環(huán)素的抗菌效果。
然而對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，較強的酸也可能被優(yōu)選用在本發(fā)明中，從而使溶液的施用時間相應(yīng)地縮短是顯而易見的。同樣地，較強的酸包括但并不限于pKa值介于大約0.5到大約3.0之間的氯乙酸、馬來酸、琥珀酸、酒石酸和聚丙烯酸。也可使用混合物。在一些實施方案中，無機酸、尤其是磷酸可能是有用的，只要溶液的基本性質(zhì)能被保持。
本發(fā)明溶液中存在的消毒劑按重量百分比計占溶液的大約1％到大約5％，優(yōu)選大約2％到4％重量百分?jǐn)?shù)，尤其當(dāng)消毒劑是四環(huán)素時，更優(yōu)選的量是大約3％。
在本發(fā)明溶液中存在的去垢劑按重量百分比計優(yōu)選占溶液的大約0.1％到大約1.5％，更優(yōu)選大約0.25％到大約1.0％。根據(jù)去垢劑，尤其當(dāng)去垢劑是聚山梨醇酯時，通常最優(yōu)選的是按重量百分比計大約是0.5％。
本發(fā)明溶液中存在的酸的量占溶液重量的大約0.5％到大約10％，優(yōu)選大約3％到大約6％。最優(yōu)選的是含有重量百分大約4％到大約5％的酸(尤其是有機酸)的溶液。
一般而言，本發(fā)明的溶液是水溶液，水占了組合物的大部分。然而，本發(fā)明的溶液也可能包括其它化合物，只要它們不干擾主要組分的基本功能，不導(dǎo)致它們降解，并且不干擾其便利和使用。這種其它添加劑可以包括著色劑、食用香料、穩(wěn)定劑和通常加入牙科或矯形外科溶液中的其它物質(zhì)。一種特別有用的佐劑可以是能夠螯合物質(zhì)、尤其是溶解的金屬的螯合劑。確實，多功能的酸可能實現(xiàn)這一目的。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將會意識到，不管溶液中的組分或添加劑，最終溶液應(yīng)當(dāng)是無菌的，以實現(xiàn)本發(fā)明的目的。在所有的例子中，這樣的物質(zhì)都以有效量存在以實現(xiàn)它們的目的。
在本發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，包含按重量計3％強力霉素、0.5％聚山梨醇酯80和4.25％檸檬酸的水溶液。雖然這些組分之前已經(jīng)被分別地并且高濃度地用于去除玷污層，如上所述，這三個組分還從未象本發(fā)明那樣被聯(lián)合應(yīng)用過。另外，當(dāng)和所有的漂白用途相比時(其以前曾被用于消毒牙齒預(yù)備)，用本發(fā)明的3％強力霉素、0.5％聚山梨醇酯80和4.25％檸檬酸的溶液進行的研究顯示其細(xì)胞毒很低，而且沒有誘變性。
其它用強力霉素、聚山梨醇酯80和檸檬酸的溶液進行的研究顯示了其它優(yōu)異的性質(zhì)。例如，該溶液比丁子香酚、3％H2O2、Ca(OH)2糊劑、戊四硝酯(peridex)和EDTA毒性低，比5.25％NaOCl抗菌性質(zhì)好，即使只給被感染的根管施用很短的時間，例如2分鐘和5分鐘的時間間隔。對于本領(lǐng)域(尤其是衛(wèi)生保健領(lǐng)域)的技術(shù)人員來說，顯然非常需要一種溶液例如此處所描述的溶液(也就是一種具有改善的生物適應(yīng)性，并比原來已知的療法在更短的時間內(nèi)起效的溶液)。研究也顯示，不象其它以前已知的牙科沖洗劑，本發(fā)明的溶液在稀釋至1∶200時還保持所需的抗菌效果。相反，大約稀釋到1∶32時，NaOCl就不具備抗菌性質(zhì)了，而EDTA無論怎樣都無效，除非不稀釋。其它的研究致力于評價目前所描述的溶液的抗菌性質(zhì)，人的根管被全唾液感染，然后用5.25％NaOCl或強力霉素、聚山梨醇酯80和檸檬酸的溶液進行治療。當(dāng)60顆牙齒中只有37顆被NaOCl有效地抗感染的時候，60顆牙齒中的59顆被本發(fā)明的溶液抵抗了感染。這種改良的抗菌性質(zhì)的重要性和需求是很容易被賞識的，尤其被本領(lǐng)域的技術(shù)人員所賞識。
本發(fā)明致力于殺菌和從預(yù)備后的牙齒或根管表面去除玷污層的方法，包括用包含消毒劑、去垢劑和酸的溶液沖洗表面。在本發(fā)明的優(yōu)選方式中，消毒劑是在酸性環(huán)境中足夠穩(wěn)定的抗生素。優(yōu)選的抗生素是四環(huán)素化合物。在更優(yōu)選的實施方案中，四環(huán)素化合物是強力霉素。在本發(fā)明其它優(yōu)選的方式中，去垢劑是FDA批準(zhǔn)的添加劑，尤其是聚山梨醇酯或脫水山梨糖醇酯化合物。本發(fā)明的另一個優(yōu)選方式是，去垢劑是聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯(聚山梨醇酯80)。
本發(fā)明的其它優(yōu)選方面是，酸是有機酸，優(yōu)選pKa介于1.5和5之間的有機酸。在其它優(yōu)選的實施方案中，有機酸的pKa介于2到4之間，優(yōu)選介于2.75到3.75之間，例如檸檬酸。在另一實施方案中，酸是磷酸。
本發(fā)明的方法可以用在經(jīng)器械預(yù)備后的根管的表面，預(yù)備進行牙周手術(shù)的部位，預(yù)備進行牙齒修復(fù)或重建的部位以及預(yù)備進行骨修骨或重建的部位。本發(fā)明優(yōu)選的模式是，沖洗預(yù)備后的牙齒表面1分鐘到1小時，優(yōu)選1分鐘到30分鐘，最優(yōu)選大約1分鐘到大約10分鐘。
盡管上述應(yīng)用是本發(fā)明的實施方案，還存在其它可能被本領(lǐng)域技術(shù)人員所預(yù)見的實施方案。本發(fā)明的溶液也可以用于預(yù)備動物體內(nèi)的植入體。這些可以預(yù)見的預(yù)備包括耳蝸、顱、胸骨、其它定制的植入體或為身體制備的功能性形狀的使用。其它實施方案可以用于給矯形外科使用的普通板、骨螺絲釘、給矯形外科使用的棒和釘(IM釘、股骨棒或塞子、長骨骨折等)、腱錨、縫合錨和釘、移植固位體和骨髓取樣口的插入的預(yù)備。
對于與從骨預(yù)備(口腔中或骨骼上)去除玷污層有關(guān)的應(yīng)用，預(yù)備后的部位被沖洗1分鐘到1小時，優(yōu)選1分鐘到大約30分鐘，最優(yōu)選大約1到10分鐘。術(shù)語“沖洗”指的是用溶液接觸某部位。優(yōu)選在部位的表面提供這種溶液流，然而，這不需要連續(xù)地進行。溶液流可能伴隨有空氣卷吸，通過繼發(fā)泡沫的作用來輔助玷污層的去除。其它輔助玷污層去除的物理方法可能伴隨有沖洗，所有的這些方法都因此而被包含在內(nèi)。
在沖洗之后，部位被干燥，并被用于進一步的修復(fù)。
還發(fā)現(xiàn)當(dāng)使用了包含NaOCl的最初溶液沖洗之后再用本發(fā)明的溶液會特別有效。在這種應(yīng)用中，NaOCl可能被用作與表面器械預(yù)備有關(guān)的沖洗液。在器械預(yù)備和用NaOCl沖洗之后，消毒劑/去垢劑/酸溶液的最后沖洗可能被用于表面。這種方法被認(rèn)為在玷污層去除方面具有改良的效果，因為最初的NaOCl沖洗從玷污層上去除了一些有機物，而消毒劑/去垢劑/酸溶液去除了無機物和殘留的有機物。當(dāng)NaOCl與本發(fā)明的溶液聯(lián)用時，優(yōu)選NaOCl的濃度按重量計算介于大約1％和大約6％之間，該濃度按重量計算優(yōu)選介于大約1.3％和大約5.25％之間。由于試驗顯示，在這個濃度范圍內(nèi)沒有顯著的差異，而且已知高濃度的NaOCl比低濃度的毒性大，因此推薦使用NaOCl的給定濃度范圍中的較低端濃度。尤其希望的是，先使用按重量計算1.3％的NaOCl溶液作最初的沖洗，再用包含強力霉素、聚山梨醇酯80和檸檬酸的溶液作最后的沖洗。
在一個優(yōu)選的實施方案中，采取措施延長制備好的溶液的保存期限是有益的。例如在一個優(yōu)選的實施方案中，制備好的溶液被脫水，然后在使用前用適量的蒸餾水將最終的粉末再水合。本領(lǐng)域的技術(shù)人員知道有很多方法可以使溶液有效地脫水，例如，干燥、凍干、噴霧干燥或任何其它可以使溶液呈貨架穩(wěn)定的粉末形式的方法。按照這種方法，溶液的保存期限被顯著地增加了。而且，粉末化的溶液可能很容易地用適量的蒸餾水再水合，然后按照上述方法用于沖洗預(yù)備后的表面。
實施例本發(fā)明通過下列實施例進行舉例說明，這不是試圖作任何限制。
實施例1根管壁玷污層的去除離體的上頜骨和下頜骨人牙被用于這項研究。這些牙齒的工作長度介于21-25毫米之間。使用手刮器刮去任何結(jié)石和其它表面碎屑(軟組織和/或牙槽骨)。經(jīng)由試驗牙齒的切面或咬合面進行常規(guī)的介入預(yù)備以后，通過刺入根尖孔并向后拉至臨床的根尖孔，K型銼(10號)被用于確定每一牙齒的工作長度。被動作用(passive step back)技術(shù)和旋轉(zhuǎn)銼(Rivera和Walton 2002)被聯(lián)合用于根管的清潔和成形。每一根管都使用被動作用和旋轉(zhuǎn)0.04錐度NITI銼(Rivera和Walton，2002)的聯(lián)合來進行清潔和成形。每一齒尖被擴大到30號銼。
牙齒被隨機地分配到兩組之一第1組使用5.25％的次氯酸鈉作為沖洗液進行非手術(shù)牙髓病學(xué)治療(NSET)。清潔和成形完成以后，用1ml NaOCl沖洗根管，包裹了棉線的倒鉤拔髓針被放在根管的末端，并保持5分鐘以確保沖洗液與整個根管均一直接的接觸。去掉倒鉤拔髓針后，用4ml NaOCl和10ml蒸餾水沖洗根管。第2組用1％次氯酸鈉作為根管沖洗液進行NSET。這組牙齒的清潔和成形完成以后，用3％強力霉素、0.5％聚山梨醇酯80和4.25％檸檬酸(以下稱為″ADD″酸、消毒劑和去垢劑)的1ml的混合物沖洗根管，包裹了棉線的倒鉤拔髓針被放在根管的末端，并保持5分鐘以確保沖洗液與整個根管均一直接的接觸。去掉倒鉤拔髓針后，用4ml ADD和10ml蒸餾水沖洗根管。沖洗以后，用金鋼石鋸和不斷的注水將牙齒劈成兩半。每顆牙齒的一半被放到戊二醛溶液中24小時。然后用鈉緩沖溶液(pH7.2)沖洗固定好的標(biāo)本兩次，用四氧化鋨處理1小時，用30％-100％濃度的乙醇梯度漂洗，然后放在干燥器中24小時。最后，每個標(biāo)本都被封藏在專用的容器中，并用25μm的金-鈀(Au-Pd)鍍膜(Wakabayashi等人，1995)。評價每一根管的冠、中和根尖區(qū)域的玷污層存在與否。每個根管不同水平的牙本質(zhì)小管的腐蝕度也被評價。
標(biāo)本檢查顯示，第1組中預(yù)備的所有牙齒的整個根管壁上的玷污層都還存在。相反，第2組的任何樣品中的根管壁都不存在可察覺的玷污層。兩組之間存在顯著差別。用ADD處理過的每個根管的各級水平的牙本質(zhì)小管中都沒有任何程度的腐蝕。
實施例2冠孔預(yù)備的玷污層的去除收集健康的第三磨牙并儲存在去離子水中，在通?？山邮艿奶幚碇笤谘例X的咬合面中進行I類預(yù)備。牙齒被隨機地分成兩組。
第1組5.25％NaOCl溶液被放在腔內(nèi)5分鐘。這樣處理以后，每一預(yù)備都用大量水沖洗以除去次氯酸鈉的剩余效果。
第2組ADD溶液被放在腔內(nèi)5分鐘。這樣處理以后，每一預(yù)備都用大量蒸餾水沖洗以除去ADD的剩余效果。
沖洗以后，使用金鋼石鋸和不斷的注水把冠面劈成兩半。樣品的一半被放在戊二醛溶液中24小時。然后用鈉緩沖溶液(pH7.2)沖洗固定好的標(biāo)本兩次，用四氧化鋨處理1小時，用30％-100％濃度的乙醇梯度漂洗，然后放在干燥器中24小時。最后，每一標(biāo)本都被封藏在專用的容器中，并用25μm的金-鈀(Au-Pd)鍍膜(Wakabayashi等人，1995)。評價每一腔壁上的的玷污層存在與否。也評價牙本質(zhì)小管的腐蝕。
標(biāo)本的檢查顯示，第1組中預(yù)備的所有牙齒的壁上都有玷污層存在。相反，第2組中所有樣品的腔壁上都沒有玷污層，都具有顯著的牙本質(zhì)小管。這兩組之間存在著顯著的差別。
用ADD處理的第2組腔的牙本質(zhì)小管中沒有觀察到腐蝕。
實施例3冠面預(yù)備后玷污層的去除收集健康的第三磨牙并儲存在去離子水中，在通?？山邮艿奶幚碇筮M行冠面預(yù)備。樣品被隨機地分成兩組。
第1組被5.25％NaOCl溶液飽和的棉球被放在冠面預(yù)備5分鐘。這樣處理以后，每一預(yù)備都用大量蒸餾水沖洗以除去次氯酸鈉的剩余效果。
第2組被ADD溶液飽和的棉球被放在冠面預(yù)備5分鐘。這樣處理以后，每一預(yù)備用大量的蒸餾水沖洗以除去ADD的剩余效果。
沖洗以后，用金鋼石鋸和不斷的注水將整顆牙齒劈成兩半。樣品的一半被放在戊二醛溶液中24小時。然后用鈉緩沖溶液(pH7.2)沖洗固定好的標(biāo)本兩次，用四氧化鋨處理1小時，用30％-100％濃度的乙醇梯度漂洗，然后放在干燥器中24小時。最后，每一標(biāo)本都被封藏在專用的容器中，并用25μm的金-鈀(Au-Pd)鍍膜(Wakabayashi等人，1995)。評價每一腔壁上的玷污層存在與否。牙本質(zhì)小管的腐蝕也被評價。
標(biāo)本的檢查顯示，第1組預(yù)備后的所有冠面上都有玷污層存在。相反，第2組預(yù)備后的冠面上都沒有玷污層，都具有顯著的牙本質(zhì)小管。這兩組之間存在著顯著的差別。第2組的冠面預(yù)備的牙本質(zhì)小管中沒有觀察到腐蝕。
實施例4牙根表面玷污層的去除健康離體牙被用在本實驗中。這些牙齒表面的三分之一冠面在常規(guī)可接受的處理之后被刮除。樣品被隨機地分成兩組。
第1組被5.25％NaOCl溶液飽和的棉球被放在牙根表面預(yù)備5分鐘。這樣處理以后，每一標(biāo)本用大量的蒸餾水沖洗以除去次氯酸鈉的剩余效果。
第2組將用ADD溶液飽和的棉球放置在牙根表面預(yù)備5分鐘。這樣處理以后，每一標(biāo)本用大量的蒸餾水沖洗以除去ADD的剩余效果。
沖洗以后，用金鋼石鋸和不斷的注水將整個牙齒劈成兩半。標(biāo)本的一半被放在戊二醛溶液中24小時。然后用鈉緩沖溶液(pH7.2)沖洗固定好的標(biāo)本兩次，用四氧化鋨處理1小時，用30％-100％濃度的乙醇梯度漂洗，然后放在干燥器中24小時。最后，每一標(biāo)本都被封藏在專用的容器中，并用25μm的金-鈀(Au-Pd)鍍膜(Wakabayashi等人，1995)。評價每一牙根表面的玷污層存在與否。牙本質(zhì)小管的腐蝕也被評價。
標(biāo)本的檢查顯示，第1組預(yù)備后的所有牙根表面上都有玷污層存在。相反，第2組預(yù)備后的牙根表面都沒有玷污層，都具有顯著的牙本質(zhì)小管。這兩組之間存在著顯著的差別。第2組的牙根預(yù)備的牙本質(zhì)小管中沒有觀察到腐蝕。
實施例5牙根末端腔預(yù)備的玷污層的去除離體的人單根牙被用在這部分的實驗中。使用帶高速機頭的#701裂鉆和注水去除牙骨質(zhì)一釉質(zhì)界的每顆牙齒的臨床冠面。
通過在根管中頂點地放置并移動#15K銼直到它從根尖孔退出來測量每個根管的工作長度。擴大根尖孔到#40K銼后，使用被動作用技術(shù)和旋轉(zhuǎn)器械(Rivera和Walton，2002)的聯(lián)合來清潔和修整剩余的根管，同時，5.25％NaOCl溶液被用作根管內(nèi)沖洗液。
經(jīng)器械預(yù)備后的根管用紙捻干燥，并用側(cè)冷凝的古塔膠和Roth 811密封劑封閉。介入腔用Cavit封閉。然后將牙根包裝在潮濕的紗布中并在室溫下、100％濕度下儲存在封閉的玻璃容器中一個星期。
在每一牙根的外表面涂兩層指甲油。在牙根長軸的90°角處，用帶高速機頭的#701裂鉆伴隨水冷進行根尖切除術(shù)以切除頂點的3-4mm。
在每一牙根中進行根尖孔預(yù)備。用帶高速機頭的#1圓鉆伴隨水冷在gutta-percha填充物中制造細(xì)小的開口。使用帶高速機頭的#701裂鉆伴隨注水將這個腔擴大并加深至大約3mm。然后使用帶高速機頭的#541med 108/010HIDI菱形鉆伴隨著注水使預(yù)備標(biāo)準(zhǔn)化至1.5mm直徑、3mm深。
然后牙根被隨機地分成兩組。在第1組中，用5.25％NaOCl沖洗根尖孔預(yù)備。溶液被保留在孔中5分鐘，然后用10ml蒸餾水沖洗。在第2組中，用5ml ADD沖洗預(yù)備。該溶液也被保留在牙根末端孔中5分鐘，然后用5ml蒸餾水沖洗。用紙捻干燥以后，使用低速金鋼石鋸(LabcutAgar Scientific，劍橋、英格蘭)將牙根劈成兩半。
樣品的一半都被放在戊二醛溶液中24小時。然后用鈉緩沖溶液(pH7.2)沖洗固定好的標(biāo)本兩次，用四氧化鋨處理1小時，用30％-100％濃度的乙醇梯度漂洗，然后放在干燥器中24小時。最后，每一標(biāo)本都被封藏在專用的容器中，并用25μm的金-鈀(Au-Pd)鍍膜(Wakabayashi等人，1995)。評價牙根末端孔預(yù)備的玷污層存在與否。牙本質(zhì)小管的腐蝕也被評價。
標(biāo)本的檢查顯示，第1組預(yù)備后的所有孔表面預(yù)備上都有玷污層存在。相反，第2組預(yù)備后的孔表面都沒有玷污層，都具有顯著的牙本質(zhì)小管。這兩組之間存在著顯著的差別。第2組的牙根末端孔預(yù)備的牙本質(zhì)小管中沒有觀察到腐蝕。
實施例6從準(zhǔn)備好的骨部位去除玷污層0.5mm的牙科鉆被用來在成熟雄鼠的取下的脛骨段上鉆孔。在鉆孔過程中用5ml蒸餾水作為沖洗液。最終的孔的直徑為0.6到1.0mm。
鉆孔之后，每一準(zhǔn)備好的孔都用3％的四環(huán)素、0.5％的聚山梨醇酯80和4.25％檸檬酸沖洗。沖洗以后，溶液被放在骨孔中5分鐘。然后用金鋼石鋸和不斷的注水將骨劈成兩半。然后將每一骨段的一半放在戊二醛溶液中24小時。然后在一系列濃度的乙醇中脫水，并被包埋于聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)中。樣品用金鈀膜包衣用于SEM檢查。
可視SEM檢查顯示，所有樣品上都充分地去除了玷污層。
實施例7與NaOCl協(xié)同沖洗去除玷污層八十顆離體的上頜骨和下頜骨的單根、多根人牙被用于這項研究。在多根牙中，具有最大根管的牙齒被包括在這項研究中。之前進行過根管治療的牙齒被排除。牙齒被隨機地分成7個實驗組，每組10顆牙，和2個對照組，每組5顆牙。根據(jù)沖洗液的類型和器械預(yù)備的過程中和之后所作的最終沖洗來將牙齒分組。
對每一牙齒進行常規(guī)的介入預(yù)備以后，通過將K型銼(10號或15號)穿入根尖孔然后向后拉回到臨床根尖孔來確定工作長度。每顆牙齒的工作長度介于21到25毫米之間。每個根管都使用被動作用和旋轉(zhuǎn)0.04 Taper NITI銼(Millefer ProFlie，瑞士)聯(lián)合進行器械預(yù)備。每顆牙齒的根尖孔都被擴大到30號銼。蒸餾水、各種濃度的NaOCl(0.65％，1.3％，2.6％和5.25％)和ADD溶液被用作根管內(nèi)沖洗液。1毫升沖洗溶液用于沖洗介于每個手動和旋轉(zhuǎn)器械之間的根管。在每個根管中使用總量為10ml的沖洗液。沖洗液用27-口徑的塑料針(Ultra dentProducts South Jordan，Utah，USA)來輸送，在每個根管中它可以插入到工作長度中1-2mm。在器械預(yù)備過程中每個根管都被沖洗液填滿。每個根管的器械預(yù)備時間大約是18-20分鐘。為了確定對照溶液和實驗溶液用在經(jīng)器械預(yù)備后的根管表面作最終沖洗的效果，根管隨后被5ml的下列每種溶液處理2分鐘滅菌蒸餾水(陽性對照)、17％EDTA(陰性對照)、5.25％NaOCl以及ADD溶液。
器械預(yù)備以后，每個根管都用1ml的上述每種溶液作最初的沖洗。2分鐘以后，每個根管都用4ml的對照溶液或?qū)嶒炄芤褐蛔髯詈蟮臎_洗。這些沖洗液也用27-口徑的塑料針(Ultra dent Products SouthJordan，Utah，USA)來輸送，在每個根管中它可以插入到工作長度中1-2mm。最終沖洗的總暴露時間大約2分鐘。根管隨后用10ml滅菌蒸餾水來沖洗并用紙捻干燥。然后牙齒被縱向劈開，每顆牙齒的一半被放在2％的戊二醛(glutaraldehyde)溶液中24小時。用二甲基胂酸鈉緩沖溶液(0.1M，pH7.2)沖洗固定好的標(biāo)本3次，用四氧化鋨孵育1小時，用30％-100％濃度的乙醇梯度脫水，然后放在干燥器中至少24小時。最后，每個標(biāo)本都被封藏在專用的短鋁管中，并用25μm的金-鈀鍍膜，然后在掃描電子顯微鏡下檢查。
檢查標(biāo)本以確定玷污層去除的范圍和牙本質(zhì)小管腐蝕的范圍。去除玷污層同時腐蝕最小的最有效的組合是5.25％NaOCl-ADD(表示成“最初沖洗溶液-最終沖洗溶液”)、接著是2.6％NaOCl-ADD、1.3％NaOCl-ADD、ADD-ADD、蒸餾水-ADD、5.25％NaOCl-5.25％NaOCl以及蒸餾水-蒸餾水(效果最差的組合)。5.25％NaOCl-17％EDTA的組合能有效除去玷污層，但導(dǎo)致中度至重度的牙本質(zhì)小管的腐蝕。據(jù)統(tǒng)計，1.3％、2.6％和5.25％NaOCl的最初沖洗聯(lián)合ADD的最終沖洗之間沒有顯著區(qū)別。
實施例8不同稀釋度的ADD溶液的抗菌效果有兩種方法被用來確定ADD相對于NaOCl和EDTA在不同稀釋度下的抗菌活性。在第1個試驗中，在接種了糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)的平皿上測定抑制區(qū)域。糞腸球菌(ATCC 4082)的過夜培養(yǎng)物被標(biāo)準(zhǔn)化至0.11光密度(O.D.)(在570nm下測量)。使用滅菌的L-型玻璃棒將100微升微生物播種到胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)平皿上。四分之一英寸的滅菌S&S濾紙(Schleicher&Schuell)被放在TSA平皿的四個象限中的每一象限上。20微升滅菌鹽水、5.25％NaOCl、ADD或17％EDTA被加到濾紙上。每個樣品溶液被復(fù)制八份。平皿在37℃通宵孵育24小時，按毫米測量抑制區(qū)域。
在第2個試驗中測量最小抑制濃度(MIC)。糞腸球菌被過夜培養(yǎng)，于570nm將濃度調(diào)節(jié)為0.11 O.D.。從1∶2到1∶2048的稀釋度連續(xù)稀釋試驗溶液。1ml 2X胰蛋白酶大豆肉湯(TSB)和相同量的試驗溶液在不同的試管中混合。100ml標(biāo)準(zhǔn)化的糞腸球被加入到每一試管中，并于37℃通宵孵育。第2天檢查有沒有混濁。
為了確定試驗溶液是否有抑菌或殺菌效果，高濃度的細(xì)菌(1×108c.f.u.的糞腸球菌)被播種到2ml未稀釋的以及1∶2稀釋的ADD或NaOCl中2分鐘或5分鐘。樣品被放在TSA基質(zhì)上以確定殘余細(xì)菌的生存能力。
對于所有的溶液來說，雖然稀釋比率不同，但溶液的稀釋都減小了抑制的區(qū)域。NaOCl和ADD不稀釋時都比1∶5或1∶10稀釋度要更有效，但經(jīng)過稀釋后兩者仍有一定的殺菌效果。然而當(dāng)稀釋5倍或10倍時，EDTA被證明沒有殺菌性質(zhì)。至于最小抑制濃度試驗，任何稀釋水平的EDTA都沒有顯示出抗菌效果，而NaOCl直至1∶32稀釋度、ADD直至1∶200稀釋度都還有效。另外，在未稀釋和1∶2稀釋度中暴露2分鐘和5分鐘以后，ADD得到了完全陰性的培養(yǎng)物，而NaOCl沒有。
在本說明書中提到或引用過的每篇專利、出版物和其他文獻在此都被全文引入作為參考。本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚，本發(fā)明優(yōu)選的實施方案可能會作很多改變和改進，這些改變和改進在不偏離本發(fā)明精神的情況下是可以進行的。因此，附加的權(quán)利要求由于落在本發(fā)明的真實精神和范圍之內(nèi)而涵蓋了所有相等的變化。
權(quán)利要求
1.一種從經(jīng)預(yù)備后的牙齒表面去除玷污層的方法，包括用包含消毒劑、去垢劑和有機酸的無菌溶液沖洗表面。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述消毒劑是抗生素。
3.權(quán)利要求2的方法，其中所述抗生素在酸性溶液中充分地穩(wěn)定。
4.權(quán)利要求3的方法，其中所述抗生素是四環(huán)素。
5.權(quán)利要求4的方法，其中所述抗生素是強力霉素。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述去垢劑是經(jīng)食品和藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的添加劑。
7.權(quán)利要求6的方法，其中所述去垢劑是脫水山梨糖醇酯。
8.權(quán)利要求6的方法，其中所述去垢劑是聚山梨醇酯.
9.權(quán)利要求8的方法，其中所述去垢劑是聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述有機酸的pKa介于1.5和5之間。
11.權(quán)利要求1的方法，其中所述有機酸的pKa介于2和5之間。
12.權(quán)利要求1的方法，其中所述有機酸的pKa介于2.75和3.75之間。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述有機酸是檸檬酸。
14.權(quán)利要求1的方法，其中所述表面是牙髓病學(xué)部位。
15.權(quán)利要求1的方法，其中所述表面是經(jīng)器械預(yù)備后的根管。
16.權(quán)利要求1的方法，其中所述表面是經(jīng)預(yù)備用于牙周病手術(shù)的表面。
17.權(quán)利要求1的方法，其中所述表面是經(jīng)預(yù)備用于牙齒修復(fù)的部位。
18.權(quán)利要求1的方法，其中所述表面已經(jīng)預(yù)備用于牙齒的重建。
19.權(quán)利要求1的方法，其中所述牙齒表面被沖洗1分鐘到1小時。
20.權(quán)利要求1的方法，其中所述牙齒表面被沖洗大約1分鐘到30分鐘。
21.權(quán)利要求1的方法，其中所述牙齒表面被沖洗大約1分鐘到10分鐘。
22.權(quán)利要求1的方法，其中所述消毒劑占溶液重量的大約1％到5％。
23.權(quán)利要求1的方法，其中所述消毒劑占溶液重量的大約2％到4％。
24.權(quán)利要求1的方法，其中所述消毒劑占溶液重量的大約3％。
25.權(quán)利要求1的方法，其中所述去垢劑占溶液重量的大約0.1％到1.5％。
26.權(quán)利要求1的方法，其中所述去垢劑占溶液重量的大約0.25％到1％。
27.權(quán)利要求1的方法，其中所述去垢劑占溶液重量的大約0.5％。
28.權(quán)利要求1的方法，其中所述酸占溶液重量的大約0.5％到10％。
29.權(quán)利要求1的方法，其中所述酸占溶液重量的大約3％到6％。
30.權(quán)利要求1的方法，其中所述酸占溶液重量的大約4％到5％。
31.權(quán)利要求1的方法，其中所述溶液組合物按重量計算是大約3％消毒劑、0.5％去垢劑和4.25％酸。
32.權(quán)利要求1的方法，其中所述溶液包含強力霉素、聚山梨醇酯80和檸檬酸。
33.權(quán)利要求1的方法，其中所述溶液組合物按重量計算是大約3％強力霉素、大約0.5％聚山梨醇酯80和大約4.25％檸檬酸。
34.一種從經(jīng)預(yù)備后的表面去除玷污層的無菌溶液，包括消毒劑、去垢劑和有機酸。
35.權(quán)利要求34的溶液，其中所述消毒劑是抗生素。
36.權(quán)利要求35的溶液，其中所述抗生素在酸性溶液中是充分穩(wěn)定的。
37.權(quán)利要求36的溶液，其中所述抗生素是四環(huán)素。
38.權(quán)利要求37的溶液，其中所述抗生素是強力霉素。
39.權(quán)利要求34的溶液，其中所述去垢劑是經(jīng)食品和藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的添加劑。
40.權(quán)利要求39的溶液，其中所述去垢劑是脫水山梨糖醇酯化合物。
41.權(quán)利要求39的溶液，其中所述去垢劑是聚山梨醇酯化合物。
42.權(quán)利要求41的溶液，其中所述聚山梨醇酯化合物是聚山梨醇酯80。
43.權(quán)利要求34的溶液，其中所述有機酸的pKa介于1.5和5之間。
44.權(quán)利要求43的溶液，其中所述有機酸的pKa介于2和5之間。
45.權(quán)利要求44的溶液，其中所述有機酸的pKa介于2.75和3.75之間。
46.權(quán)利要求34的溶液，其中所述有機酸是檸檬酸。
47.權(quán)利要求34的溶液，其中所述消毒劑占溶液重量的大約1％到5％。
48.權(quán)利要求34的溶液，其中所述消毒劑占溶液重量的大約2％到4％。
49.權(quán)利要求34的溶液，其中所述消毒劑占溶液重量的大約3％。
50.權(quán)利要求34的溶液，其中所述去垢劑占溶液重量的大約0.1％到1.5％。
51.權(quán)利要求34的溶液，其中所述去垢劑占溶液重量的大約0.25％到1％。
52.權(quán)利要求34的溶液，其中所述去垢劑占溶液重量的大約0.5％。
53.權(quán)利要求34的溶液，其中所述酸占溶液重量的大約0.5％到10％。
54.權(quán)利要求34的溶液，其中所述酸占溶液重量的大約3％到6％。
55.權(quán)利要求34的溶液，其中所述酸占溶液重量的大約4％到5％。
56.權(quán)利要求34的溶液，其中所述溶液組合物按重量計算是大約3％消毒劑、0.5％去垢劑和4.25％酸。
57.權(quán)利要求34的溶液，其中所述溶液包含強力霉素、聚山梨醇酯80和檸檬酸。
58.權(quán)利要求57的溶液，其中所述溶液組合物按重量計算是大約3％強力霉素、大約0.5％聚山梨醇酯80和占溶液重量的大約4.25％檸檬酸。
59.一種從經(jīng)預(yù)備后的骨表面去除玷污層的方法，包括用包含消毒劑、去垢劑和有機酸的無菌溶液沖洗表面。
60.權(quán)利要求1的方法，其中所述牙齒表面被沖洗大約2分鐘到大約5分鐘。
61.權(quán)利要求1的方法，其中所述溶液被稀釋到大約1∶200。
62.權(quán)利要求34的溶液，其中所述溶液被稀釋到大約1∶200。
63.權(quán)利要求59的方法，其中所述骨表面被沖洗大約2分鐘到大約5分鐘。
64.權(quán)利要求59的方法，其中所述溶液被稀釋到大約1∶200。
65.一種從經(jīng)預(yù)備后的牙齒或骨表面去除玷污層的方法，包括下列步驟(a)用NaOCl溶液沖洗表面；以及(b)用包含消毒劑、去垢劑和有機酸的無菌溶液進一步?jīng)_洗表面。
66.權(quán)利要求65的方法，其中所述NaOCl溶液的濃度按重量計算是大約1％到大約6％。
67.權(quán)利要求65的方法，其中所述NaOCl溶液的濃度按重量計算是大約1.3％到大約5.25％。
68.權(quán)利要求65的方法，其中所述NaOCl溶液的濃度按重量計算是大約1.3％。
69.權(quán)利要求65的方法，其中所述步驟(b)的溶液被稀釋到大約1∶200。
70.權(quán)利要求65的方法，其中所述步驟(b)的溶液被施用到經(jīng)預(yù)備后的表面最多大約5分鐘。
71.權(quán)利要求65的方法，其中所述步驟(b)的溶液被施用到經(jīng)預(yù)備后的表面大約2分鐘。
72.一種從經(jīng)預(yù)備后的牙齒或骨表面去除玷污層的方法，包括下列步驟(a)用按重量計算1.3％的NaOCl溶液沖洗表面；以及(b)用按重量計算包含大約3％強力霉素、大約0.5％聚山梨醇酯80和大約4.25％檸檬酸的無菌溶液進一步?jīng)_洗表面大約2分鐘到大約5分鐘。
73.權(quán)利要求72的方法，其中所述步驟(b)的溶液被稀釋到大約1∶200。
74.權(quán)利要求1的方法，其中所述消毒劑是抗菌劑化合物。
75.權(quán)利要求74的方法，其中所述抗菌劑化合物是洗必泰化合物。
76.權(quán)利要求75的方法，其中所述洗必泰化合物是葡萄糖酸洗必泰。
77.權(quán)利要求1的方法，其中所述溶液包含葡萄糖酸洗必泰、聚山梨醇酯80和檸檬酸。
78.權(quán)利要求1的方法，其中所述溶液以粉末化的形式提供，還包含在沖洗之前用蒸餾水使粉末化溶液再水合的步驟。
79.權(quán)利要求34的方法，其中所述消毒劑是抗菌劑化合物。
80.權(quán)利要求79的方法，其中所述抗菌劑化合物是洗必泰化合物。
81.權(quán)利要求80的方法，其中所述洗必泰化合物是葡萄糖酸洗必泰。
82.權(quán)利要求34的方法，其中所述溶液包含葡萄糖酸洗必泰、聚山梨醇酯80和檸檬酸。
83.權(quán)利要求34的方法，其中所述溶液是粉末化的形式。
84.權(quán)利要求59的方法，其中所述溶液以粉末化的形式提供，還包含在沖洗之前用蒸餾水使粉末化溶液再水合的步驟。
85.權(quán)利要求65的方法，其中所述步驟(b)的溶液以粉末化的形式提供，還包含在沖洗之前用蒸餾水使粉末化溶液再水合的步驟。
86.權(quán)利要求72的方法，其中所述步驟(b)的溶液以粉末化的形式提供，還包含在沖洗之前用蒸餾水使粉末化溶液再水合的步驟。
87.一種從經(jīng)預(yù)備后的牙齒或骨表面去除玷污層的方法，包括下列步驟(a)用按重量計算1.3％的NaOCl溶液沖洗表面；以及(b)用包含葡萄糖酸洗必泰、聚山梨醇酯80和檸檬酸的無菌溶液進一步?jīng)_洗表面大約2分鐘到大約5分鐘。
88.權(quán)利要求87的方法，其中所述步驟(b)的溶液被稀釋到大約1∶200。
89.權(quán)利要求87的方法，其中所述步驟(b)的溶液以粉末化的形式提供，還包含在沖洗之前用蒸餾水使粉末化溶液再水合的步驟。
全文摘要
用于從經(jīng)預(yù)備后的牙齒和骨表面、尤其是在牙髓病學(xué)環(huán)境中去除玷污層的方法及溶液。
文檔編號A61C15/00GK1633261SQ03804055
公開日2005年6月29日 申請日期2003年1月22日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月21日
發(fā)明者M·托拉拜尼雅德, W·B·詹森 申請人:鄧特斯普里國際公司