專利名稱：一種血復生藥物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種用于治療惡性貧血和癌癥放、化療后血象異常的血復生藥物及其制備方法，具體地說，本發(fā)明涉及一種中藥和動物臟器提取成分相結合的血液復生的藥物及其制備方法。
背景技術：
多年來，氣血兩虛、陰虛津虧、自汗盜汗、煩躁失眠、出血紫斑等惡性貧血，特別是腫瘤、癌癥患者在長期用化療或放療的治療過程中，大部分病人產(chǎn)生骨髓抑制，引起外周血液白細胞減少的副作用，減輕這種副作用，提高治療效果，是腫瘤患者治療中急待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述的惡性貧血和腫瘤、癌癥放、化療后血象異常的問題，本發(fā)明提出一種中藥和動物臟器提取成分相結合的血液復生的藥物及其制備方法。
本發(fā)明依照中醫(yī)益氣養(yǎng)血、滋陰涼血、化瘀解毒等治療原則，從歷代中醫(yī)名方(例如四物湯、二至丸、當歸補血湯、玉燭散、六味地黃湯等)為基礎，篩選上述方劑中出現(xiàn)頻率較高的藥物并加入動物臟器提取成分而成。
本發(fā)明的血液復生藥物的具體方案為它由下列重量份的原料制成蜜炙黃芪90-110、當歸25-35、白芍25-35、熟地黃45-55、川芎15-25、女貞子45-55、墨旱蓮45-55、茯苓25-35、山藥35-45、天花粉15-25、牡丹皮15-25、澤瀉15-25、川牛膝15-25、甘草5-15、酒炙大黃25-35、豬脾粉60-70。
本發(fā)明的血液復生藥物優(yōu)選由下列重量份的原料制成蜜炙黃芪100、當歸30、白芍30、熟地黃50、川芎20、女貞子50、墨旱蓮50、茯苓30、山藥40、天花粉20、牡丹皮20、澤瀉20、川牛膝20、甘草10、酒炙大黃30、豬脾粉66.7。
本發(fā)明的血液復生藥物的制備方法包括如下步驟(1)將山藥和茯苓粉碎過篩，將豬脾粉粉碎過篩；(2)將蜜炙黃芪、當歸、白芍、熟地黃、川芎、女貞子、墨旱蓮、天花粉、牡丹皮、澤瀉、川牛膝、甘草、酒炙大黃用它們重量和的4-6倍的水浸泡2-6小時，煎煮三次，每次10-60分鐘，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.2(50℃)的浸膏；(3)將步驟(1)得到的山藥粉、茯苓粉和豬脾粉加到步驟(2)得到的浸膏中，混勻，干燥得到所需的藥物干膏。干燥溫度優(yōu)選70-90℃。
根據(jù)實際生產(chǎn)和應用過程中的需要，可以向本發(fā)明得到的藥物中添加醫(yī)藥中常用的輔料，將本發(fā)明的藥物制成各種形式的產(chǎn)品，例如片狀，顆粒、膠囊等。
所述的蜜炙黃芪為常規(guī)方法制得的蜜炙黃芪，具體方法為將煉蜜加適量開水稀釋后，加入干凈的藥材中拌勻，悶透，放置鍋內(nèi)，用文火炒至不沾手，取出，放涼。
所述的酒炙大黃為常規(guī)方法制得的酒炙大黃，具體方法為取干凈的藥材加酒(一般用黃酒)拌勻，悶透，放置鍋內(nèi)，用文火炒至不沾手，取出，放涼。
所述的豬脾粉的制備方法為取檢疫合格的豬脾臟，去油，切段，烘干，粉碎制得均一的細粉。
本發(fā)明的血復生藥物的用法和用量為每片0.24克。口服，一次3-6片，一日3次。
本發(fā)明進行了血復生藥物的藥效學試驗、毒理學試驗、臨床試驗。
1.本發(fā)明的血復生藥物的藥效學試驗藥物血復生藥物，用蒸餾水配成25％、12.5％的懸液；鯊肝醇，用蒸餾水配成1.8％的懸液；環(huán)磷酰胺，用生理鹽水配成1％的溶液供腹腔注射用。
動物小白鼠味昆明種及瑞士雜種，由中醫(yī)研究院動物室提供。
(1)血復生藥物對60鈷所致小鼠白細胞癥的影響小白鼠尾部取血，常規(guī)檢查血象正常。用60鈷γ射線一次全身照射小鼠，劑量率為50r/分，總劑量為350r，照射當日開始服藥。
取體重20-25克的雄性小鼠50只隨機分組，分成(1)血復生2.5g/kg組、(2)血復生5.0g/kg組、(3)鯊肝醇360mg/kg組、(4)模型對照組和(5)正常對照組，每組10只，除正常對照組外其它各組均受照射并服藥，模型對照組服用蒸餾水0.4ml/只，每周檢查一次血象，連續(xù)觀察4周。
試驗結果模型對照組在反射的第二周白細胞總數(shù)下降到最低，四周內(nèi)維持在同樣的水平(p＜0.01)。血復生2.5g/kg組和血復生5.0g/kg組在放射后第1、2周未見白細胞數(shù)值有明顯回升，第3、4周有較明顯的回升(p＜0.01)。鯊肝醇360mg/kg組在4周內(nèi)也有所回升(p＜0.05)，在本試驗條件下不及血復生作用強。
(2)血復生藥物對環(huán)磷酰胺所致小鼠白細胞癥的影響取體重20-25克的雄性小鼠50只隨機分組，分成(1)血復生2.5g/kg組、(2)血復生5.0g/kg組、(3)鯊肝醇360mg/kg組、(4)模型對照組和(5)正常對照組，每組10只，均為灌胃給藥，模型對照組灌胃蒸餾水0.4ml/只。試驗共計12天，每天均給藥，在給藥的第8天給小鼠新鮮的配置的環(huán)磷酰胺100mg/kg腹腔注射，在第12天檢查血象變化。
試驗結果模型對照組在給環(huán)磷酰胺前后白細胞總數(shù)明顯下降65.86％(p＜0.01)，血復生2.5g/kg組和血復生5.0g/kg組分別下降37.5％(p＜0.01)、37.7％(p＜0.01)。與模型對照組相比，血復生升高白細胞的效果非常顯著。并且血復生5.0g/kg組對淋巴細胞和嗜中性粒細胞的提高效果非常顯著p＜0.01)。鯊肝醇未見到對白細胞減少有明顯的預防效果(p＞0.05)。
(3)血復生藥物對小鼠切除脾臟所致紅細胞增多癥的影響取體重20-25克的雄性小鼠50只隨機分組，分成(1)血復生2.5g/kg組、(2)血復生5.0g/kg組、(3)模型對照組和(4)正常對照組，每組10只，均為灌胃給藥，模型對照組灌胃蒸餾水0.4ml/只。給藥組提前5天給藥，在給藥第5天作脾臟切除術。
手術小鼠以戊巴比妥鈉40mg/kg，i.p麻醉，上腹部沿腹中線切開10毫米長的切口，取出脾臟，經(jīng)結扎動靜脈后切除，縫合傷口。
手術后每天給藥連續(xù)觀察3周，每周檢查血象1次。
試驗結果正常組脾臟切除后，血中紅細胞明顯增多，網(wǎng)織細胞輕度增多。模型對照組脾切除后，第1周紅細胞稍有下降，到第3周增多較明顯(p＜0.01)。血復生5.0g/kg對紅細胞的增多有降低的作用(p＜0.01)，而血復生2.5g/kg對降低紅細胞的增多作用不明顯(p＞0.05)。
(4)血復生藥物對小鼠亞急性毒性的影響取體重18-22克的小鼠60只，隨機分成3組，即血復生2.5g/kg組、血復生5.0g/kg組、正常對照組，每組20只(12只雄性，8只雌性)，各組動物一半觀察15天，另一半觀察30天，給藥前后進行外周血象檢查，動物處死后解剖觀察內(nèi)臟的形態(tài)學改變，另取心、肝、脾、肺和腎等臟器作標本，進行病理組織學檢查。
試驗結果表明，血復生動物血象無明顯影響，其波動在正常范圍內(nèi)。
(5)血復生藥物對小白鼠體液免疫的影響將北京動物中心提供的昆明種小白鼠隨機分成4組，每組10只，(1)正常對照組，喂自來水0.2ml/只/天，(2)血復生組，以4g/kg喂藥，(3)60鈷照射組，接受鈷照射并喂自來水，(4)鈷照射+血復生組，接收鈷照射，并喂和(2)組相同的血復生。
在鈷照射后14天，4組小鼠均用5％綿羊紅細胞0.2ml腹腔注射進行免疫，并繼續(xù)喂藥至免疫的第5天摘除眼球取血，分離血清進行血凝試驗(HT)，同時取出脾臟進行脾細胞介導羊細胞的分光光度計測定(QHS)。
試驗結果和分析表 血復生對小白鼠血凝滴度的影響

表 血復生對小白鼠QHS的影響


血復生對正常小鼠體液免疫沒有明顯的作用，統(tǒng)計學上沒有差異；鈷照射后，與正常對照組相比，小鼠體液免疫明顯下降，統(tǒng)計學上有明顯差異，說明鈷照射抑制了小鼠體液免疫；鈷照射組同時喂了血復生，小鼠體液免疫與鈷照射對照組相比，體液免疫明顯升高，接近正常對照組，統(tǒng)計學上有明顯差異，說明血復生確實恢復了鈷照射而抑制的體液免疫。
(6)血復生對小鼠網(wǎng)織紅細胞的增生作用將北京中醫(yī)學院同批小鼠隨機分成5組，除正常組外另外4組均受整體照射，劑量為350拉德。照射后如下法服藥，(1)大劑量血復生組，喂25％的血復生一次5g/kg體重，(2)小劑量血復生組，喂12.5％的血復生一次2.5g/kg體重，(3)鯊肝醇組，喂1.8％鯊肝醇一次0.36g/kg體重，(4)未治療組，喂蒸餾水20ml/kg體重，(5)正常組，喂蒸餾水20ml/kg體重。1個月后斷頭取血分別測定血紅蛋白和網(wǎng)織紅細胞等指標。1000個紅細胞中含有的網(wǎng)織紅細胞數(shù)，以百分數(shù)表示。
表 血復生對網(wǎng)織紅細胞的影響

試驗結果表明，小鼠經(jīng)整體照射1個月后，未治療組下降為1.87％，正常組為2.67％，說明反射損傷不僅抑制白細胞造血系統(tǒng)，而且抑制紅細胞生成系統(tǒng)，未治療組僅相當于正常組的70％，所有給藥組均有不同程度的增加，都高于正常組和對照組，其中大劑量血復生組最為顯著，為對照組的3.20倍，而小劑量血復生組為3.10％，為對照組的1.7倍。從血復生兩組比較看出，本發(fā)明的血復生藥物的生血作用有量效關系。結合血復生有升高白細胞和血小板等作用，證明血復生對肌體造血機能有明顯改善功效。
2.本發(fā)明的血復生藥物的毒理學試驗取小白鼠60只，體重18-22克，隨機分成(1)小劑量血復生組(2.5克/公斤/日)，(2)大劑量血復生組(5.0克/公斤/日)和(3)正常對照組(給蒸餾水0.4ml/只/日)。每組20只動物(雄12，雌8)灌胃給藥，各組動物在給藥15日和30日分別隨機抽樣5只，進行剖檢，取心、肝、脾、肺和腎，用20％福爾馬林固定，石蠟切片，HE染色，光鏡觀察。
試驗結果如下(1)小劑量血復生組給藥15日5只小白鼠的心、腎、肺、脾未見異常，3只肝未見病變，2只在肝匯管區(qū)可見中性白細胞浸潤。給藥30日5只小白鼠，除1只肺間有質(zhì)性炎癥改變外，其它各臟器均未見病理性改變。
(2)大劑量血復生組給藥15日5只小白鼠中2只肝臟有小灶性嗜酸性白細胞浸潤，其它各臟器未見異常。給藥30日5只小白鼠，除1只在肝匯管區(qū)可見慢性炎細胞浸潤外，其它各臟器均未見病理性改變。
(3)正常對照組給藥15日5只小白鼠的心、腎、肺和脾均未見病理性改變。2只肝切片正常，1只肝實質(zhì)有一大片的中性白細胞浸潤，2只肝內(nèi)可見小灶性嗜酸性白細胞浸潤，除此之外肝未見其它病變。給藥30日5只小白鼠的心、腎、肺、脾和肝未見病變。
因此可以得到結論血復生藥物無論是小劑量還是大劑量給藥15或延長給藥30日對小白鼠均未發(fā)現(xiàn)毒性作用。
3.本發(fā)明的血復生藥物的臨床試驗(1)病例來源腫瘤病人放、化療中血象下降者；血液病人(再生障礙貧血、原發(fā)性血小板減少、白血病)；膠原病長期服激素，血象下降。
(2)用藥劑量和用法1日3次，8片；減至1日3次，4片；服藥1個月。
(3)療效判斷有效臨床癥狀改善或消失，治療后檢查2次，外周血白細胞高于治療前0.5×109/L以上，血紅蛋白高于治療前10g/L以上，血小板高于治療前10×109/L以上。
無效臨床癥狀無明顯改善或加重，治療后檢查2次，外周血象無明顯改善或低于治療前。
根據(jù)以上標準統(tǒng)計出有效、無效例數(shù)和有效率。
(4)觀察結果統(tǒng)計學處理，選用t檢驗配對法，即病人自身血象治療前后的對比。
血色素n＝76，t＝3.8933，p＜0.001白細胞n＝115，t＝6.3397，p＜0.001血小板n＝119，t＝4.8594，p＜0.001(5)藥效學試驗結論統(tǒng)計白細胞下降115例，血小板下降119例，血色素下降76例，服用本發(fā)明的血復生藥物1個月后，具有非常明顯的升高血象作用。
其中白細胞下降115例，服藥后上升91例，占79.1％，達到正常值的74例，占64.3％。
血小板下降119例，服藥后上升78例，占65.5％，達到正常值的43例，占36.1％。
血色素下降76例，服藥后上升58例，占76％，達到正常值的33例，占43％。
(6)觀察血復生藥物和鯊肝醇利血生治療淋巴癌化療血象下降的對比效果。
隨機將20例分成2組，第一組服用血復生片，第二組服用鯊肝醇利血生。劑量，血復生片4#bid，鯊肝醇3#bid，利血生2#bid，分別服用1個月，統(tǒng)計血象變化。得到以下結論(1)服用血復生片的病例經(jīng)統(tǒng)計學處理，治療后白細胞有顯著性的升高作用(p＜0.05)。
(2)服用鯊肝醇利血生的病例經(jīng)統(tǒng)計學處理，治療后白細胞無顯著性的升高作用(p＞0.05)。
(3)比較兩組病例，血復生片和鯊肝醇利血生的升高白細胞的作用無顯著性變化。
本發(fā)明的一個重要特點是藥物中含有豐富的營養(yǎng)成分，總氨基酸的含量達到30.78mg/100mg(氨除外)。將樣品水解，色氨酸以4.2N的氫氧化鈉水解。脫氨酸用過甲酸氧化法處理。其余氨基酸用6N的鹽酸水解。將上述所得的水解物用氨基酸測定儀(日立835-50型)測定氨基酸的含量。測定結果列于下表。

本發(fā)明的血復生藥物的有益效果本發(fā)明的血復生藥物對氣血兩虛、陰虛津虧、自汗盜汗、煩躁失眠、出血紫斑等惡性貧血，特別是腫瘤、癌癥患者在長期用化療或放療的治療過程中血象異常有顯著的療效，尤其對白細胞減少癥有明顯的升高或調(diào)整血象的作用，具有恢復改善造血機能和提高體液免疫的作用。并且本發(fā)明的藥物具有豐富的營養(yǎng)成分。
具體實施例下面采用具體實施例的方式進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明不局限于這些實施例。
實施例1(1)取108kg蜜炙黃芪、21.6kg澤瀉、54kg熟地黃、32.4kg當歸、54kg墨旱蓮、21.6kg川芎、21.6kg天花粉、21.6kg牡丹皮、21.6kg川牛膝、10.8kg甘草、32.4kg白芍、32.4kg酒炙大黃和54kg女貞子，將上述13味中藥用2430kg水浸泡4小時，煎煮3次，每次30分鐘，合并煎液過濾，濃縮至相對密度1.2(50℃)，取出浸膏，實得浸膏248.5kg。
(2)將248.5kg浸膏加入粉碎的41.5kg山藥粉、30.5kg茯苓粉和72kg豬脾粉，裝入熱風循環(huán)干燥箱內(nèi)在70-90℃下干燥，得到247.9kg混合干膏。
(3)將干燥的247.9kg混合干膏粉碎成80目細粉，實得245kg配料后的混合粉，加入14.2kg干淀粉，混合均勻，過篩，實得258.9kg配料后的混合粉。
(4)向258.9kg配料后的混合粉中加入95kg 80℃的酒精，分5次加入，攪拌均勻，過16目篩，制粒，在70-80℃下干燥，16目篩整?？偦欤瑝浩?，得到1059480片素片，包衣得到血復生藥片。
實施例2(1)取108kg蜜炙黃芪、21.6kg澤瀉、54kg熟地黃、32.4kg當歸、54kg墨旱蓮、21.6kg川芎、21.6kg天花粉、21.6kg牡丹皮、21.6kg川牛膝、10.8kg甘草、32.4kg白芍、32.4kg酒炙大黃和54kg女貞子，將上述13味中藥用1944kg水浸泡4小時，煎煮3次，每次30分鐘，合并煎液過濾，濃縮至相對密度1.2(50℃)，取出浸膏，實得浸膏248kg。
(2)將248kg浸膏加入粉碎的41.2kg山藥粉、31kg茯苓粉和72kg豬脾粉，裝入熱風循環(huán)干燥箱內(nèi)在70-90℃下干燥，得到248kg混合干膏。
(3)將干燥的248kg混合干膏粉碎成80目細粉，實得244.6kg配料后的混合粉，加入14.6kg干淀粉，混合均勻，過篩，實得259kg配料后的混合粉。
(4)向259kg配料后的混合粉中加入95kg 80℃的酒精，分5次加入，攪拌均勻，過16目篩，制粒，在70-80℃下干燥，14目篩整?？偦欤瑝浩?，得到1060220片素片，包衣得到血復生藥片。
實施例3(1)取108kg蜜炙黃芪、21.6kg澤瀉、54kg熟地黃、32.4kg當歸、54kg墨旱蓮、21.6kg川芎、21.6kg天花粉、21.6kg牡丹皮、21.6kg川牛膝、10.8kg甘草、32.4kg白芍、32.4kg酒炙大黃和54kg女貞子，將上述13味中藥用2916kg水浸泡4小時，煎煮3次，每次30分鐘，合并煎液過濾，濃縮至相對密度1.2(50℃)，取出浸膏，實得浸膏249kg。
(2)將249kg浸膏加入粉碎的42kg山藥粉、30.9kg茯苓粉和72kg豬脾粉，裝入熱風循環(huán)干燥箱內(nèi)在70-90℃下干燥，得到248.5kg混合干膏。
(3)將干燥的248.5kg混合干膏粉碎成80目細粉，實得245.5kg配料后的混合粉，加入13.7kg干淀粉，混合均勻，過篩，實得258.7kg配料后的混合粉。
(4)向258.7kg配料后的混合粉中加入95kg 80℃的酒精，分5次加入，攪拌均勻，過16目篩，制粒，在70-80℃下干燥，14目篩整?？偦?，壓片，得到1059408片素片，包衣得到血復生藥片。
實施例4(1)取100kg蜜炙黃芪、20kg澤瀉、50kg熟地黃、30kg當歸、50kg墨旱蓮、20kg川芎、20kg天花粉、20kg牡丹皮、20kg川牛膝、10kg甘草、30kg白芍、30kg酒炙大黃和50kg女貞子，將上述13味中藥用2250kg水浸泡4小時，煎煮3次，每次30分鐘，合并煎液過濾，濃縮至相對密度1.2(50℃)，取出浸膏，實得浸膏230kg。
(2)將230kg浸膏加入粉碎的40kg山藥粉、30kg茯苓粉和66.7kg豬脾粉，裝入熱風循環(huán)干燥箱內(nèi)在70-90℃下干燥，得到229.5kg混合干膏。
(3)將干燥的229.5kg混合干膏粉碎成80目細粉，實得228kg配料后的混合粉，加入13.7kg干淀粉，混合均勻，過篩，實得241kg配料后的混合粉。
(4)向241kg配料后的混合粉中加入95kg80℃的酒精，分5次加入，攪拌均勻，過16目篩，制粒，在70-80℃下干燥，14目篩整粒總混，壓片，得到999815片素片，包衣得到血復生藥片。
權利要求
1.一種用于治療惡性貧血和癌癥放、化療后血象異常的血復生藥物，其特征在于它由下列重量份的原料制成蜜炙黃芪90-110、當歸25-35、白芍25-35、熟地黃45-55、川芎15-25、女貞子45-55、墨旱蓮45-55、茯苓25-35、山藥35-45、天花粉15-25、牡丹皮15-25、澤瀉15-25、川牛膝15-25、甘草5-15、酒炙大黃25-35、豬脾粉60-70。
2.根據(jù)權利要求1所述的血復生藥物，其特征在于它由下列重量份的原料制成蜜炙黃芪100、當歸30、白芍30、熟地黃50、川芎20、女貞子50、墨旱蓮50、茯苓30、山藥40、天花粉20、牡丹皮20、澤瀉20、川牛膝20、甘草10、酒炙大黃30、豬脾粉66.7。
3.根據(jù)權利要求1所述的血復生藥物，其特征在于它可以制成片劑、顆?；蚰z囊。
4.根據(jù)權利要求1所述的血復生藥物，其特征在于它由下述制備方法制成(1)將山藥和茯苓粉碎過篩，將豬脾粉粉碎過篩；(2)將蜜炙黃芪、當歸、白芍、熟地黃、川芎、女貞子、墨旱蓮、天花粉、牡丹皮、澤瀉、川牛膝、甘草、酒炙大黃用它們重量和的4-6倍的水浸泡2-6小時，煎煮三次，每次10-60分鐘，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.2(50℃)的浸膏；(3)將步驟(1)得到的山藥粉、茯苓粉和豬脾粉加到步驟(2)得到的浸膏中，混勻，干燥得到所需的藥物干膏。
5.根據(jù)權利要求4所述的血復生藥物，其特征在于它的制備步驟(3)中干燥溫度為70-90℃。
6.權利要求1所述的血復生藥物的制備方法，其特征在于它包括以下步驟(1)將山藥和茯苓粉碎過篩，將豬脾粉粉碎過篩；(2)將蜜炙黃芪、當歸、白芍、熟地黃、川芎、女貞子、墨旱蓮、天花粉、牡丹皮、澤瀉、川牛膝、甘草、酒炙大黃用它們重量和的4-6倍的水浸泡2-6小時，煎煮三次，每次10-60分鐘，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.2(50℃)的浸膏；(3)將步驟(1)得到的山藥粉、茯苓粉和豬脾粉加到步驟(2)得到的浸膏中，混勻，干燥得到所需的藥物干膏。
7.根據(jù)權利要求6所述血復生藥物的制備方法，其特征在于它的制備步驟(3)中干燥溫度為70-90℃。
全文摘要
本發(fā)明解決了氣血兩虛、陰虛津虧、自汗盜汗、煩躁失眠、出血紫斑等惡性貧血，腫瘤、癌癥患者在長期化療或放療過程中血象異常，尤其對白細胞減少癥的問題，公開了采用蜜炙黃芪、當歸、白芍、熟地黃、川芎、女貞子、墨旱蓮、茯苓、山藥、天花粉、牡丹皮、澤瀉、川牛膝、甘草、酒炙大黃、豬脾粉為原料制成的血復生藥物及其制備方法，治療上述病癥具有明顯的療效，并且本發(fā)明的藥物具有豐富的營養(yǎng)成分。
文檔編號A61P35/00GK1666752SQ20041000646
公開日2005年9月14日 申請日期2004年3月8日 優(yōu)先權日2004年3月8日
發(fā)明者馬建瑞 申請人:河北恒祥醫(yī)藥集團扁鵲制藥有限公司