專(zhuān)利名稱(chēng)：治療病毒性心肌炎藥物的制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種虎杖總蒽醌的提取方法及其在治療病毒性心肌炎藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
虎杖為蓼科植物虎杖的干燥根和根莖。性味微苦寒。功能利濕退黃，清熱解毒。以往以治療肝炎和燒燙傷為主，后開(kāi)發(fā)為降血脂藥。
病毒性心肌炎(VMC)是由嗜心肌病毒引起的以心肌病變和心肌間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)為主的一種疾病。該病日漸成為一種內(nèi)科臨床的常見(jiàn)病。目前西醫(yī)對(duì)該病尚沒(méi)有特異性的治療，化藥如病毒唑和免疫調(diào)節(jié)性抗病毒治療劑如干擾素療效不如人意。而中醫(yī)藥治療顯示出一定的優(yōu)勢(shì)。中醫(yī)普遍認(rèn)為外邪是本病病因的直接因素?？滤_奇病毒是臨床上病毒性心肌炎的常見(jiàn)病原體。藥理實(shí)驗(yàn)證明虎杖抑制柯薩奇病毒的作用很明顯。
技術(shù)內(nèi)容本發(fā)明提供一種虎杖總蒽醌的新提取方法，及其在治療病毒性心肌炎藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的方法是將虎杖飲片或藥材粉碎，用乙醇溶液提取，合并提取液，減壓回收乙醇；加入氯仿提取，合并氯仿提取液；用堿溶液萃取，合并堿液；用酸調(diào)pH值；離心，反復(fù)水洗至pH值為中性；真空干燥，粉碎即得。
所述的堿溶液是NaHCO3溶液、Na2CO3溶液、NaOH(或KOH)溶液中的一種，或者是其中的兩種，或者是三種。
采用上述方法所得到的粉末與片劑常用輔料如崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑等混合、制粒、干燥，制成一種抗病毒的片劑。
采用上述方法所得到的粉末與顆粒劑常用輔料如淀粉等混合、制粒、干燥，制成一種抗病毒的顆粒劑。
采用上述方法所得到的粉末與硬膠囊劑常用輔料如潤(rùn)滑助流劑等混勻，分裝于硬膠囊中，制成一種抗病毒的硬膠囊劑。
采用上述方法所得到的粉末與口服液常用輔料如甜菊甙等混合，制成一種抗病毒口服液。
采用上述方法所得到的粉末與滴丸劑常用輔料如聚乙二醇等混合，滴入不相混溶的冷凝液中，制成一種抗病毒的滴丸。
采用上述方法所得到的粉末與軟膠囊常用輔料如植物油、助懸劑等混合，密封于明膠等制成的軟質(zhì)囊材中，制成一種抗病毒的軟膠囊。
采用上述方法所得到的粉末在抗病毒性心肌炎藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提取虎杖有效部位，提取后的粉末總蒽醌含量在50％以上?？缮a(chǎn)出科技含量高，質(zhì)量可控的較高類(lèi)別的中藥。與以往的中藥相比，有效部位具有成分較純，用量較小，加工制劑時(shí)投料較精確，質(zhì)量指標(biāo)客觀可控，療效穩(wěn)定，量效關(guān)系明確等優(yōu)點(diǎn)。按藥劑學(xué)方法，可將虎杖總蒽醌提取物加入輔料制備成多種藥物制劑，包括片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液、注射劑、栓劑、氣霧劑中的任一種藥物制劑。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的方法是將虎杖飲片或藥材粉碎，用70～90％乙醇溶液提取1～3次，每次加5～12倍乙醇溶液，回流提取0.5～2.5小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇；加入氯仿提取1～5次，每次氯仿加入量為濃縮液的0.3～2倍，合并氯仿提取液；用堿溶液萃取1～5次，合并堿液；用酸調(diào)至pH1～3；離心，反復(fù)水洗至pH中性；60～90℃真空干燥，粉碎即得。該粉末總蒽醌含量在50％以上。
所述的堿溶液是NaHCO3溶液、Na2CO3溶液、NaOH(或KOH)溶液中的一種，或者是其中的兩種，或者是三種。
采用上述方法所得到的粉末與片劑常用輔料如崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑等混合、制粒、干燥，制成一種抗病毒的片劑。
采用上述方法所得到的粉末與顆粒劑常用輔料如淀粉等混合、制粒、干燥，制成一種抗病毒的顆粒劑。
采用上述方法所得到的粉末與硬膠囊劑常用輔料如潤(rùn)滑助流劑等混勻，分裝于硬膠囊中，制成一種抗病毒的硬膠囊劑。
采用上述方法所得到的粉末與口服液常用輔料如甜菊甙等混合，制成一種抗病毒口服液。
采用上述方法所得到的粉末與滴丸劑常用輔料如聚乙二醇等混合，滴入不相混溶的冷凝液中，制成一種抗病毒的滴丸。
采用上述方法所得到的粉末與軟膠囊常用輔料如植物油、助懸劑等混合，密封于明膠等制成的軟質(zhì)囊材中，制成一種抗病毒的軟膠囊。
采用上述方法所得到的粉末在抗病毒性心肌炎藥物中的應(yīng)用。
實(shí)施例1本發(fā)明的方法是將虎杖飲片或藥材粉碎，用70～90％乙醇溶液提取1～3次，每次加5～12倍乙醇溶液，回流提取0.5～2.5小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇；加入氯仿提取1～5次，每次氯仿加入量為濃縮液的0.3～2倍，合并氯仿提取液；先后用2～6％NaHCO3溶液、2～6％Na2CO3溶液、0.5～5％NaOH溶液萃取1～5次，合并堿液；用酸調(diào)至pH1～3；離心，反復(fù)水洗至pH中性；60～90℃真空干燥，粉碎即得。該粉末總蒽醌含量在50％以上。
一、虎杖提取物體內(nèi)抗病毒作用1材料與方法1.1材料病毒含柯薩奇病毒B3 TCID50為10-5的MEM Eagle氏液，由吉林大學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物室提供。
動(dòng)物昆明種小鼠，雄性，共90只，體重14-16g，購(gòu)自長(zhǎng)春高新醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心，動(dòng)物合格證號(hào)SCXK-(吉)2003-0004。
1.2方法1.2.1動(dòng)物模型建立動(dòng)物適應(yīng)飼養(yǎng)后，隨機(jī)分組，分空白組，模型組，受試藥物組，陽(yáng)性藥對(duì)照組?？瞻捉Mip不含病毒的MEM Eagle氏液，其余動(dòng)物腹腔注射接種病毒，0.2ml/只連續(xù)3日。
1.2.2給藥方法動(dòng)物接種病毒后，ig給藥，受試藥物組分別ig200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg虎杖提取物，空白組和模型組ig同體積生理鹽水，陽(yáng)性藥組ig 0.04g/kg病毒唑。連續(xù)給藥9天，于第10日眶靜脈取血，分離血清，測(cè)心肌酶。摘取心臟，作組織病理檢查。
2結(jié)果2.1對(duì)心肌酶的影響動(dòng)物感染病毒后，血清中LDH、AST、CK含量明顯升高，各受試藥給藥組對(duì)血清中LDH、AST、CK的升高有顯著抑制作用，優(yōu)于病毒唑。結(jié)果見(jiàn)表1。
表1虎杖提取物對(duì)心肌酶的影響(X±S)組別 N AST(U/L)CK(U/L) LDH(U/L)空白組15205.0±48.1 842.4±270.8 889.3±433.2模型組6 344.3±194.92486.4±1390.2 1177.2±369.3陽(yáng)性藥組 10205.8±37.5*764.6±266.6*1002.9±256.4受試藥組200mg/kg 11187.9±26.6*611.7±219.2*721.5±257.9**受試藥組100mg/kg 10183.5±22.9*667.1±152.2*△ 758.8±260.2*受試藥組50mg/kg 11212.9±60.1*607.1±135.7*749.3±243.5***P＜0.05(與模型組比)，**P＜0.01(與模型組比)，△P＜0.05(與陽(yáng)性藥組比)。
2.2對(duì)體重增長(zhǎng)的影響動(dòng)物感染病毒后，體重增長(zhǎng)明顯減慢，在第3天，感染病毒小鼠體重明顯低于正常組，于給藥第6天，小鼠體重增長(zhǎng)高于模型組，但沒(méi)有顯著差異，于給藥第9天，小鼠體重增長(zhǎng)高于模型組，且有顯著差異。見(jiàn)表2。
表2虎杖提取物對(duì)小鼠體重增長(zhǎng)的影響(X±S)組別 N 3d 6d 9d空白組1522.1±1.625.8±2.826.0±3.8模型組6 18.5±2.420.2±4.917.5±5.5陽(yáng)性藥組 1017.1±2.116.5±3.916.5±3.7受試藥組200mg/kg 1119.5±2.122.8±5.423.0±3.4*受試藥組100mg/kg 1018.5±2.521.5±4.919.1±5.8*受試藥組50mg/kg 1119.2±1.822.6±3.521.9±3.8**P＜0.05(與模型組比)2.3對(duì)死亡率的影響 結(jié)果見(jiàn)表3。
表3對(duì)死亡率的影響組別 存活鼠數(shù) 死亡率(％)空白組 15
模型組 6 60陽(yáng)性藥組10 33.3*受試藥組200mg/kg11 26.7*受試藥組100mg/kg10 33.3*受試藥組50mg/kg 11 26.7**P＜0.05(與模型組比)2.4病理檢查結(jié)果空白組心肌纖維結(jié)構(gòu)清楚，未見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，無(wú)明顯病變。
模型組心肌出現(xiàn)不同程度變性壞死，炎性細(xì)胞呈灶性或散在分布，并可見(jiàn)組織細(xì)胞增生。
給受試藥組低、中、高劑量組心肌組織形態(tài)較模型組有所改善，心肌變性壞死程度減輕，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減輕，水腫現(xiàn)象減輕。
二、虎杖提取物體外抗病毒作用1材料與方法1.1材料細(xì)胞Hella細(xì)胞，由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物室培養(yǎng)。
病毒CVB3Nancy株為吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物室保存，病毒滴度為5×10-2。
1.2方法1.2.1藥物細(xì)胞毒性測(cè)定于24孔板上加Hella細(xì)胞1ml/孔，培養(yǎng)24h，棄上清，加虎杖提取物，濃度分別為10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml、400μg/ml、500μg/ml、600μg/ml、700μg/ml、800μg/ml，37℃，5％CO2孵箱中培養(yǎng)33h，MTT法檢測(cè)細(xì)胞毒活性，同時(shí)設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照。
1.2.2藥物體外抗病毒實(shí)驗(yàn)于24孔板上，加100TCID50的CVB30.1ml/孔，37℃，5％CO2孵箱中吸附90min，棄上清，加藥物，藥物濃度分別為10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml，37℃，5％CO2孵箱中培養(yǎng)33h，MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性，同時(shí)設(shè)正常對(duì)照和病毒對(duì)照。
2結(jié)果2.1藥物對(duì)Hella細(xì)胞的毒性藥物對(duì)細(xì)胞毒性表現(xiàn)為細(xì)胞形態(tài)改變，本實(shí)驗(yàn)測(cè)得TD50為400μg/ml。
2.2藥物對(duì)CVB3的抑制作用本實(shí)驗(yàn)測(cè)得細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)結(jié)果如下表。
藥物對(duì)細(xì)胞CPE的影響

權(quán)利要求
1.一種治療病毒性心肌炎藥物的制備方法，其特征在于將虎杖飲片或藥材粉碎，用乙醇溶液提取，合并提取液，減壓回收乙醇；加入氯仿提取，合并氯仿提取液；用堿溶液萃取，合并堿液；用酸調(diào)pH值；離心，反復(fù)水洗至pH值為中性；真空干燥，粉碎即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療病毒性心肌炎藥物的制備方法，其特征在于所述的堿溶液是NaHCO3溶液、Na2CO3溶液、NaOH(或KOH)溶液中的一種，或者是其中的兩種，或者是三種。
3.權(quán)利要求1所得到的粉末與片劑常用輔料如崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑等混合、制粒、干燥，制成一種抗病毒的片劑。
4.權(quán)利要求1所得到的粉末與顆粒劑常用輔料如淀粉等混合、制粒、干燥，制成一種抗病毒的顆粒劑。
5.權(quán)利要求1所得到的粉末與硬膠囊劑常用輔料如潤(rùn)滑助流劑等混勻，分裝于硬膠囊中，制成一種抗病毒的硬膠囊劑。
6.權(quán)利要求1所得到的粉末與口服液常用輔料如甜菊甙等混合，制成一種抗病毒口服液。
7.權(quán)利要求1所得到的粉末與滴丸劑常用輔料如聚乙二醇等混合，滴入不相混溶的冷凝液中，制成一種抗病毒的滴丸。
8.權(quán)利要求1所得到的粉末與軟膠囊常用輔料如植物油、助懸劑等混合，密封于明膠等制成的軟質(zhì)囊材中，制成一種抗病毒的軟膠囊。
9.權(quán)利要求1所得到的粉末在抗病毒性心肌炎藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
一種治療病毒性心肌炎藥物的制備方法及用途，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域?；⒄冉?jīng)乙醇溶液、氯仿、堿溶液提取分離，水洗、干燥；再將干粉制成各種制劑。本發(fā)明與以往的中藥相比，有效部位具有成分較純，用量小，加工制劑時(shí)投料較精確，質(zhì)量指標(biāo)客觀可控，藥物的有效成分和療效穩(wěn)定，量效關(guān)系明確，藥物體積小，服用與攜帶方便。本品為純中藥制劑，無(wú)毒副作用。
文檔編號(hào)A61P31/12GK1640447SQ20041001062
公開(kāi)日2005年7月20日 申請(qǐng)日期2004年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月12日
發(fā)明者蘇紅, 于清華, 李國(guó)勛, 李鳳新, 王雅麗, 齊勇, 劉琪 申請(qǐng)人:吉林省藥物研究所