專利名稱：一種復(fù)方半枝蓮抗腫瘤藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由半枝蓮和半邊蓮，或者由半枝蓮、半邊蓮和苦參素制成的復(fù)方藥物組合物，并提供其制備方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
2、背景技術(shù)腫瘤，尤其是惡性腫瘤(癌癥)，是一類嚴(yán)重威脅人類生命和健康的疾病，是病患者死亡率極高的惡性疾病。根據(jù)統(tǒng)計(jì)資料報(bào)道，我國每年新發(fā)現(xiàn)的癌癥病人約100萬左右，在全球癌癥每年奪去大約600萬人的生命，并把1000萬人置于死亡的邊緣。隨著人類生存環(huán)境的日益惡化，癌癥的發(fā)生率呈逐年上升趨勢。世界衛(wèi)生組織預(yù)測21世紀(jì)癌癥將成為人類的“第一殺手”。腫瘤的常規(guī)治療方法包括化學(xué)療法(化療)、手術(shù)切除以及物理療法如放射療法(放療)等。目前，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對癌癥的治療，主要是手術(shù)治療配合放療、化療。手術(shù)雖能去除原發(fā)病灶，但不能從根本上杜絕癌細(xì)胞的再生與繁殖，而這正是日后癌癥復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的根源；放療、化療雖能殺滅癌細(xì)胞，但同時(shí)也使大量的正常組織細(xì)胞受到損害，誘發(fā)胃腸反應(yīng)、骨髓抑制和肝臟、腎臟、心臟功能損害，使病人的身體更加虛弱，難以接受進(jìn)一步治療。中醫(yī)中藥治療癌癥有悠久的歷史，其最重要的優(yōu)勢在于中藥不良副作用通常較少或較輕微。不僅如此，還有許多抗腫瘤中藥可以與化學(xué)合成藥聯(lián)用并顯著減輕化學(xué)合成藥的不良副作用。經(jīng)過數(shù)十年的基礎(chǔ)與臨床研究，中醫(yī)學(xué)在腫瘤治療方面已經(jīng)積累了相當(dāng)豐富的知識和經(jīng)驗(yàn)。已證實(shí)中醫(yī)藥治療癌癥具有抗癌抑瘤，提高機(jī)體免疫功能，降低放化療毒副反應(yīng)，調(diào)節(jié)機(jī)體陰陽平衡，提高帶癌生存率及生存質(zhì)量的突出作用，特別是對癌癥手術(shù)后的康復(fù)，以及對放化療的增效減毒方面有良好的作用，深受患者的歡迎。
半枝蓮為唇形科植物半枝蓮Scutellaria barbata D.Don的干燥全草，味辛、苦、寒，歸肺、肝、腎經(jīng)，《中華人民共和國藥典》2000年版(一部)收載其作為法定藥材使用，具有清熱解毒、化瘀利尿的作用?，F(xiàn)代藥理研究表明具有半枝蓮還有一定的抗腫瘤作用，我國常把半枝蓮與其他中草藥制成配方，治療各種癌癥如胃癌、直腸癌、肺癌、淋巴癌和婦科腫瘤等。
半邊蓮又名急解索、蛇舌草，為桔梗科植物半邊蓮Lobelia chinensis Lour.的干燥全草，味辛、平，歸心、小腸、肺經(jīng)，《中華人民共和國藥典》2000年版(一部)收載其作為法定藥材使用，具有利尿消腫、清熱解毒的作用?，F(xiàn)代藥理研究表明，半邊蓮還有一定的抗腫瘤作用，常見用于肝癌合并腹水、肺癌、大腸癌、鼻咽癌、骨髓癌、腦瘤等惡性腫瘤。
苦參素為氧化苦參堿與極少量氧化槐果堿的混合堿，是從豆科槐屬植物苦參(sophora flarescen Ait.)的干燥根中提取分離而得到的白色粉末，已收載入國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第16冊363頁(國家藥典委員會編)，其中規(guī)定含氧化苦參堿(C15H24N2O2)不得少于98.0％。
苦參素為腫瘤及肝病輔助用藥，對多種腫瘤細(xì)胞有抑制或殺傷作用，且毒副作用小，并能提高免疫力，是理想的抗癌藥物。目前苦參素原料國內(nèi)已有10家上市?？鄥⑺氐慕Y(jié)構(gòu)式如下 苦參素化學(xué)結(jié)構(gòu)式3、發(fā)明內(nèi)容為了滿足臨床需要，更好的治療癌癥疾病，提高人民健康水平，本發(fā)明提供了一種半枝蓮復(fù)方藥物組合物及其制備方法，主要由半枝蓮或其提取物與半邊蓮或其提取物制備而成，還可加入苦參素制成，既能顯著抑制腫瘤生長，又能顯著增強(qiáng)放化療療效及降低毒副反應(yīng)，提高帶瘤生存率及生存質(zhì)量，產(chǎn)生了意想不到的效果。
本發(fā)明藥物組合物，主要由半枝蓮與半邊蓮制備而成，藥材重量份數(shù)比為半枝蓮200～4000份、半邊蓮200～4000份；優(yōu)選為半枝蓮500～2000份、半邊蓮500～2000份；最優(yōu)為半枝蓮1000份、半邊蓮1000份。
為提高治療效果，本發(fā)明藥物組合物的原料藥中還可以再加入苦參素制成，組合物中各原料藥的重量份數(shù)比為半枝蓮200～4000份、半邊蓮200～4000份、苦參素100～2400份；優(yōu)選為半枝蓮500～2000份、半邊蓮500～2000份、苦參素300～1200份；最優(yōu)為半枝蓮1000份、半邊蓮1000份、苦參素600份。
上述藥物組合物中的原料藥可以用適宜的溶劑和方法單提或混提制備得到提取物，總提取物再與藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一制劑。
上文所述的半枝蓮可以用適宜的溶劑經(jīng)過提取加工得到半枝蓮提取物，其中的溶劑優(yōu)選水或乙醇，半枝蓮的提取方法可以為浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法或連續(xù)提取法。如可通過醇提制備得到半枝蓮提取物。
本發(fā)明提供了一種半枝蓮的優(yōu)選制備工藝，具體如下取半枝蓮藥材，加75％乙醇提取二次，每次2h，加醇10倍量，合并煎液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加于已處理好的聚酰胺柱(100g，30～60目，柱內(nèi)徑3mm，乙醇濕法裝柱，乙醇適量預(yù)洗，再用水洗至無醇味，備用)上，先用2倍柱體積的水沖洗，再用2倍柱體積的10％乙醇沖洗，棄去沖洗液，再用3倍柱體積的70％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度1.05～1.11的濃縮液，噴霧干燥，即得。
通過本工藝制得的半枝蓮提取物得率為1～3％，提取物中總黃酮以野黃芩苷計(jì)的含量不低于50％，野黃芩苷的含量不低于4.5％。
半枝蓮提取物還可由如下工藝制備，但不僅限于下述方法工藝一取半枝蓮藥材，加75％乙醇提取二次，每次2h，加醇10倍量，合并煎液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.08～1.13，噴霧干燥即得。通過本工藝制得的半枝蓮提取物得率為10～15％，提取物中總黃酮以野黃芩苷計(jì)的含量不低于40％，野黃芩苷的含量不低于4％。
工藝二取半枝蓮藥材，加70％乙醇提取三次，每次1.5h，加醇10倍量，合并煎液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.09～1.15，噴霧干燥即得。通過本工藝制得的半枝蓮提取物得率為10～12％，提取物中總黃酮以野黃芩苷計(jì)的含量不低于35％，野黃芩苷的含量不低于3％。
上文所述的半邊蓮可以用適宜的溶劑經(jīng)過提取加工得到半邊蓮提取物，提取溶劑優(yōu)選水或乙醇，提取方法可以為浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法或連續(xù)提取法。
本發(fā)明提供了一種半邊蓮的優(yōu)選制備工藝，具體如下取半邊蓮藥材，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)加水12倍量，第二次1小時(shí)加水10倍量，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.14～1.19(55～60℃)的清膏，加乙醇使其含醇量達(dá)60％，靜置24小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，加乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置24小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.10～1.12，噴霧干燥即得。
通過本工藝制得的半邊蓮提取物得率為3～5％，水溶性浸出物的含量不低于47％。
半邊蓮提取物還可由如下工藝制備，但不僅限于下述方法方法一取半邊蓮藥材，加水煎煮三次，每次2小時(shí)，加水10倍量，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.14～1.19(55～60℃)的清膏，加乙醇使其含醇量達(dá)60％，靜置24小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.19～1.25，噴霧干燥即得。通過本工藝制備的半邊蓮提取物得率為8～10％，水溶性浸出物的含量不低于40％。
方法二取半邊蓮藥材，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)加水12倍量，第二次1小時(shí)加水10倍量，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.14～1.19(55～60℃)的清膏，加乙醇使其含醇量達(dá)70％，靜置12小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.20～1.24，真空干燥即得。通過本工藝制備的半邊蓮提取物得率為7～9％，水溶性浸出物的含量不低于40％。
本發(fā)明還提供了一種半枝蓮和半邊蓮混合提取的優(yōu)選制備工藝，具體如下取半邊蓮和半枝蓮藥材，加水提取三次，第一次2小時(shí)，加水12倍量，第二、三次1小時(shí)，加水10倍量，合并煎液濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.08，加乙醇使含醇量為65％，靜置24小時(shí)，濾過，濾液調(diào)節(jié)pH值至8.0～8.5，靜置1小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加乙醇使含醇量為85％，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.09～1.12，噴霧干燥，即得。
通過本工藝制備的提取物得率為2～3％，提取物中總黃酮的含量不低于50％，野黃芩苷的含量不低于3％。
半邊蓮和半枝蓮的混提物還可通過下述工藝制備，但不僅限于下述工藝工藝一取半邊蓮和半枝蓮藥材，加水提取二次，第一次2小時(shí)，加水12倍量，第二1小時(shí)，加水10倍量，合并煎液濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.08，加乙醇使含醇量為65％，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加乙醇使含醇量為85％，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.09～1.12的稠膏，噴霧干燥，即得。通過本工藝制備的提取物得率為3～5％，提取物中總黃酮的含量不低于40％，野黃芩苷的含量不低于2％。
工藝二取半邊蓮和半枝蓮藥材，加水提取三次，第一次2小時(shí)，加水12倍量，第二、三次1小時(shí)，加水10倍量，合并煎液濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.08，加乙醇使含醇量為65％，靜置24小時(shí)，濾過，濾液調(diào)節(jié)pH值至8.0～8.5，靜置1小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.09～1.12的稠膏，噴霧干燥，即得。通過本工藝制備的提取物得率為6～8％，提取物中總黃酮的含量不低于25％，野黃芩苷的含量不低于1％。
本發(fā)明藥物組合物除可用上述藥材投料制得外，還可直接以中藥材的提取物投料制成，有以下2種配比配比1由半枝蓮、半邊蓮的提取物投料制成，按照提取物相對于藥材的得率計(jì)算，其重量份數(shù)比為半枝蓮提取物4～100份、半邊蓮提取物5～150份；優(yōu)選為半枝蓮提取物10～50份、半邊蓮提取物15～60份；最優(yōu)為半枝蓮提取物20份、半邊蓮提取物30份。
配比2由半枝蓮提取物、半邊蓮提取物和苦參素直接投料制備而成，按照提取物相對于藥材的得率計(jì)算，提取物的重量份數(shù)比為半枝蓮提取物4～100份、半邊蓮提取物5～150份、苦參素100～2400份；優(yōu)選為半枝蓮提取物10～50份、半邊蓮提取物15～60份、苦參素300～1200份；最優(yōu)為半枝蓮提取物20份、半邊蓮提取物30份、苦參素600份。
上述2種配比的組合物中，半枝蓮和半邊蓮的提取物均可參照前述方法制備，半枝蓮含總黃酮最好不低于30％，半邊蓮提取物的主要有效成分為生物堿類。按比例混合后的總提取物可按藥學(xué)常規(guī)方法與藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一制劑。
以上組成是按重量份作為配比的，在生產(chǎn)時(shí)可按照相應(yīng)比例增大或減小，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以千克為原料，或以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位，重量可以增大或者減小，但各組成之間重量配比的比例不變。
以上組成，若以克為單位，可以制成100～10000次用量的制劑，如作為注射劑，可制成100～10000支，每次用量1～10支。如作為片劑，可制成100～10000片，每次服用1～10片。
以上重量配比的比例是經(jīng)過科學(xué)篩選得到的，對于特殊病人，可以相應(yīng)調(diào)整組成的比例，增加或者減少不超過100％。
本發(fā)明藥物組分的用量是經(jīng)過發(fā)明人進(jìn)行大量摸索總結(jié)得出的，各組分用量在上述重量份范圍內(nèi)都具有較好療效。
本發(fā)明提供了一種用于制備治療腫瘤等方面疾病的藥物。本發(fā)明藥物組合物具有抗腫瘤作用，半枝蓮的提取物具有明顯的抗癌作用，半邊蓮也具有一定的抗癌作用，能提高抗癌活性，苦參素對多種腫瘤有抑制作用。三藥配伍組方主要用于治療肺癌、肝癌合并腹水、消化系統(tǒng)癌、乳腺癌、胃癌、鼻咽癌、絨膜上皮癌等惡性腫瘤。
該組合物可以加一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，以口服、鼻吸入或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊、軟膠囊、分散片、口服液、顆粒、咀嚼片、口崩片、滴丸、緩釋片、緩釋膠囊、控釋片、控釋膠囊，制成液體制劑如水或油懸浮劑或其它液體制劑如糖漿等；用于腸胃外給藥時(shí)，可將其制成注射用的溶液、水或油懸浮劑等，如水針、凍干粉針、無菌粉針、輸液等。本組合物的優(yōu)選的劑型是注射劑或口服制劑。
本發(fā)明的藥物組合物可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，需要的時(shí)候可以添加各種藥學(xué)上可接受的載體。所述的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。
本發(fā)明的藥物組合物在制成注射劑時(shí)，為了增加其溶解度，可以加入聚山梨酯80等增溶劑。輸液中可以加入用于調(diào)節(jié)滲透壓的等滲調(diào)節(jié)劑，例如，氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、乳酸鈉、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖。粉針中可加入賦形劑，例如，甘露醇、葡萄糖等。
本發(fā)明經(jīng)過藥理學(xué)研究和藥效動物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，由半枝蓮或其提取物、半邊蓮或其提取物、苦參素制成的藥物，對S180肉瘤有一定的抑制作用對HePA實(shí)體瘤亦有一定的抑制作用，但對實(shí)驗(yàn)動物的脾臟器官重量沒有影響；此外還對EAC小鼠的生存時(shí)間有明顯的延長作用；與化療藥(CTX)和放療(60Co照射)合用可增加抗腫瘤(S180肉瘤)作用并降低毒性，延長帶瘤生存時(shí)間。本發(fā)明實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果證明，半枝蓮、半邊蓮、苦參素合并用藥呈協(xié)同作用，藥效明顯增強(qiáng)。
本發(fā)明組合物具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)提供了一種用于治療腫瘤疾病的藥物組合物及其制備方法和用途，滿足了臨床急需；(2)首次對本發(fā)明組合物的相互作用和配伍組方進(jìn)行了藥效學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)了組合物具有明顯的抗腫瘤作用和放療、化療增效作用，對S180肉瘤的抑瘤率超過了50％，對HePA實(shí)體瘤的抑瘤率超過了50％，對EAC小鼠的生命延長率超過45％，對化療的抑瘤增效率超過35％，對放療的抑瘤增效率超過30％；上述各實(shí)驗(yàn)組中，組合物實(shí)驗(yàn)組與單用半枝蓮提取物組或半邊蓮提取物組或苦參素組相比，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異均極其顯著(p＜0.01)，表明半枝蓮、半邊蓮和苦參素三藥合用抗腫瘤效果顯著，其結(jié)果是本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所意想不到的；(3)對本發(fā)明組合物各配比進(jìn)行了藥效學(xué)研究，得出了本發(fā)明組合物的最優(yōu)配比；(4)本發(fā)明可以以原料或提取物直接投料，制備工藝簡單，可以使不同批次藥品間質(zhì)量差異小，藥品質(zhì)量更均勻穩(wěn)定；(5)進(jìn)行的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明藥物組合物注射液各項(xiàng)指標(biāo)均比較穩(wěn)定，保證了臨床用藥的安全；(6)半枝蓮具有抗腫瘤作用，半邊蓮也有一定的抗癌作用，能提高抗癌活性，苦參素對多種腫瘤有抑制作用，三藥合并用藥療效確切，且減小了相對用藥劑量，具有廣泛的應(yīng)用前景。
以下通過實(shí)驗(yàn)例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果。下列實(shí)驗(yàn)例中半枝蓮提取物、半邊蓮提取物的組合物以下簡稱BB組合物，半枝蓮提取物、半邊蓮提物和苦參素的組合物以下簡稱BBK組合物。實(shí)驗(yàn)例中所用的半枝蓮提取物取自實(shí)施例1的第2批，半邊蓮提取物取自實(shí)施例2的第2批。
實(shí)驗(yàn)例1BB組合物合并用藥藥效研究供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；陽性對照組環(huán)磷酰胺注射液，自制；半枝蓮提取物組半枝蓮提取物注射液，自制；半邊蓮提取物組半邊蓮提取物注射液，自制；BB組合物注射液組，自制(制備方法參見實(shí)施例5)。
受試動物ICR種小鼠，體重18～22g，雄性，130只，隨機(jī)分為13組。
瘤種S180瘤液。
實(shí)驗(yàn)方法取ICR小鼠130只，均皮下接種S180瘤液(2×107/ml)0.2ml/只，次日隨機(jī)分為13組，稱體重。腹腔注射給藥，給藥劑量見表1，共10天，停藥次日稱體重，處死小鼠并剝離皮下瘤塊，稱瘤重，并計(jì)算抑瘤率。結(jié)果見表1。
表1BB組合物注射液對S180實(shí)體瘤生長的影響(X±SD)
注*P＜0.05，**P＜0.01與空白對照組相比；#P＜0.01，與半枝蓮提取物組相比；&P＜0.01，與半邊蓮提取物組相比。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果各給藥組都具有明顯的抑制S180腫瘤生長作用(*P＜0.05和**P＜0.01)。其中BB組合物注射液組的作用都明顯強(qiáng)于單用半枝蓮提取物或半邊蓮提取物(#P＜0.01和&P＜0.01)，抑瘤率為51.81％～60.62％。證明半枝蓮和半邊蓮配伍有很好的抑制腫瘤生長的作用，且與組合物的劑量配比有關(guān)，BB組合物注射液中半枝蓮提取物+半邊蓮提取物＝20mg+30mg時(shí)作用最好。
實(shí)驗(yàn)例2BBK組合物對小鼠肝癌(HePA)生長的影響供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；陽性對照組環(huán)磷酰胺注射液，自制；半枝蓮提取物組半枝蓮提取物注射液，自制；半邊蓮提取物組半邊蓮提取物注射液，自制；苦參素組苦參素注射液，自制；BBK組合物注射液組(半枝蓮提取物+半邊蓮提取物+苦參素＝20mg+30mg+600mg)分為低、中、高三個劑量組，自制(制備方法參見實(shí)施例5)。
受試動物ICR種小鼠，體重18～22g，雄性，80只，隨機(jī)分為8組。
瘤種HePA瘤液。
實(shí)驗(yàn)方法取ICR小鼠80只，均皮下接種HePA瘤液(2×107/ml)0.2ml/只，次日隨機(jī)分為8組，分別為空白對照組、陽性對照組、半枝蓮提取物組、半邊蓮提取物組、苦參素組、BBK組合物注射液低、中、高三個劑量組，稱體重。腹腔注射給藥，給藥劑量見表2，共10天，停藥次日稱體重，處死小鼠并剝離皮下瘤塊及脾臟，稱取瘤重及脾臟重量，并計(jì)算抑瘤率。結(jié)果見表2。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果各給藥組都具有明顯的抑制腫瘤生長作用(*P＜0.05和**P＜0.01)且對小鼠脾臟器官的重量沒有影響。其中BBK組合物注射液組的作用都明顯強(qiáng)于單用半枝蓮提取物或半邊蓮提取物或苦參素(#P＜0.01、&P＜0.01和$p＜0.01)，抑瘤率分別為54.65％～58.14％。證明半枝蓮、半邊蓮和苦參素配伍有很好的抑制腫瘤生長的作用，且與組合物的給藥劑量有關(guān)，給藥劑量為60m/kg時(shí)作用最好。
表2 BBK組合物對HePA實(shí)體瘤生長的影響及小鼠免疫器官的影響(X±SD)
注*P＜0.05，**P＜0.01與空白對照組相比；#P＜0.01與半枝蓮提取物組相比；&P＜0.01，與半邊蓮提取物組相比；$P＜0.01，與苦參素組相比。
實(shí)驗(yàn)例3BBK組合物對艾氏腹水癌(EAC)小鼠生命延長率的影響供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；陽性對照組環(huán)磷酰胺注射液，自制；半枝蓮提取物組半枝蓮提取物注射液，自制；半邊蓮提取物組半邊蓮提取物注射液，自制；苦參素組苦參素注射液，自制；BBK組合物注射液組(半枝蓮提取物+半邊蓮提取物+苦參素＝20mg+30mg+600mg)分為低、中、高三個劑量組，自制(制備方法參見實(shí)施例5)。
受試動物ICR種小鼠，體重18～22g，雄性，80只，隨機(jī)分為8組。
瘤種EAC腹水。
實(shí)驗(yàn)方法取ICR小鼠80只，無菌抽取EAC腹水，以生理鹽水1∶2倍稀釋，每鼠腹腔接種0.2ml，24小時(shí)隨機(jī)分為8組，分別為空白對照組、陽性對照組、半枝蓮提取物組、半邊蓮提取物組、苦參素組、BBK組合物注射液低、中、高三個劑量組，稱體重。腹腔注射給藥，給藥劑量見表3，共10天，此后觀察小鼠的死亡時(shí)間，結(jié)果用平均存活天數(shù)和生命延長率表示。結(jié)果見表3。
表3BBK組合物對EAC腹水癌小鼠生命延長率的影響(X±SD)
注*P＜0.05，**P＜0.01，與空白對照組相比；#P＜0.01，與半枝蓮提取物組相比；&P＜0.01，與半邊蓮提取物組相比；$P＜0.01，與苦參素組相比。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果各給藥組都具有明顯使EAC小鼠的生命延長率提高(*P＜0.05和**P＜0.01)。其中BBK組合物注射液組的作用都明顯強(qiáng)于單用半枝蓮提取物或半邊蓮提取物或苦參素(#P＜0.01、&P＜0.01和$p＜0.01)，生命延長率為48.00％～56.00％。證明半枝蓮、半邊蓮和苦參素配伍有很好的抑制腫瘤生長，延長小鼠生命的作用，且與組合物的給藥劑量有關(guān)，給藥劑量為60mg/kg時(shí)作用最好。
實(shí)驗(yàn)例4BB組合物對化療的增效作用供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；陽性對照組環(huán)磷酰胺注射液，自制；CTX+半枝蓮提取物組CTX+半枝蓮提取物注射液，自制；CTX+半邊蓮提取物組CTX+半邊蓮提取物注射液，自制；CTX+BB組合物注射液組(半枝蓮提取物+半邊蓮提取物＝20mg+30mg)分為低、中、高三個劑量組，自制(制備方法參見實(shí)施例5)。
受試動物ICR種小鼠，體重18～22g，雄性，70只，隨機(jī)分為7組。
瘤種S180瘤液。
實(shí)驗(yàn)方法取ICR小鼠70只，均皮下接種S180瘤液(2×107/ml)0.2ml/只，次日隨機(jī)分為7組，分別為空白對照組、陽性對照組、CTX+半枝蓮提取物組、CTX+半邊蓮提取物組、CTX+BB組合物注射液低、中、高三個劑量組，稱體重。除空白對照組外，其余各組均在接種后第2、第6天腹腔注射環(huán)磷酰胺(CTX)30mg/kg，給藥組次日灌胃給藥，給藥劑量見表4，共10天，停藥次日稱體重，處死動物，剝離皮下瘤塊，稱瘤重，并計(jì)算抑瘤率和增效率。結(jié)果見表4。增效率(％)＝(化療藥加水組平均瘤重-化療藥加給藥組平均瘤重)/化療藥加水組平均瘤重×100％。
表4BB組合物對化療的增效作用(X±SD)
注*P＜0.05，**P＜0.01，與空白對照組相比；#P＜0.01，與CTX+半枝蓮組相比；&P＜0.01，與CTX+半邊蓮提取物組相比。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果各給藥組與環(huán)磷酰胺合用都有明顯的化療增效作用(*P＜0.05和**P＜0.01)。其中BB組合物注射液組的作用都明顯強(qiáng)于單用CTX+半枝蓮或CTX+半邊蓮提取物(#P＜0.01和&P＜0.01)，抑瘤增效率為38.83％～47.57％。證明半枝蓮和半邊蓮配伍與化療藥環(huán)磷酰胺合用有很好的化療增效作用，且與組合物的給藥劑量有關(guān)，高劑量時(shí)作用最好。
實(shí)驗(yàn)例5BBK組合物對放療的增效作用供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；陽性對照組60Co照射60Co+半枝蓮提取物組60Co+半枝蓮提取物注射液，自制；60Co+半邊蓮提取物組60Co+半邊蓮提取物注射液，自制；60Co+苦參素組60Co+苦參素注射液，自制；60Co+BBK組合物注射液組(半枝蓮提取物+半邊蓮提取物+苦參素＝20mg+30mg+600mg)分為低、中、高三個劑量組，自制(制備方法參見實(shí)施例5)。
受試動物ICR種小鼠，體重18～22g，雄性，80只，隨機(jī)分為8組。
瘤種S180瘤液。
實(shí)驗(yàn)方法取ICR小鼠80只，均皮下接種S180瘤液(2×107/ml)0.2ml/只，次日隨機(jī)分為8組，分別為空白對照組、陽性對照組、60Co+半枝蓮提取物組、60Co+半邊蓮提取物組、60Co+苦參素組、60Co+BBK組合物注射液低、中、高三個劑量組，稱體重。除空白對照組外，其余各組均在接種后第3、第6天用60Co全身照射，照射劑量為0.05Gy/min。給藥組次日灌胃給藥，給藥劑量見表5，共10天，停藥次日稱體重，處死動物，剝離皮下瘤塊，稱瘤重，并計(jì)算抑瘤率和增效率。結(jié)果見表5。
表5BBK組合物對放療的增效作用(X±SD)
注*P＜0.05，**P＜0.01，與空白對照組相比；#P＜0.01，與60Co+半枝蓮提取物組相比；&P＜0.01，與60Co+半邊蓮提取物組相比；$P＜0.01，與60Co+苦參素組相比。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果各給藥組與放療60Co照射合用都有明顯的放療增效作用(*P＜0.05和**P＜0.01)。其中BBK組合物注射液組的作用都明顯強(qiáng)于單用60Co+半枝蓮提取物、60Co+半邊蓮提取物和60Co+苦參素(#P＜0.01、&P＜0.01和$P＜0.01)，其抑瘤增效率為33.88％～36.73％。證明半枝蓮、半邊蓮和苦參配伍與放療60Co照射合用有很好的放療增效作用，且與組合物的給藥劑量有關(guān)，給藥劑量為60mg/kg時(shí)作用最好。
實(shí)驗(yàn)例6小鼠注射給藥急性毒性實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)方法供試品BB組合物注射液組自制，規(guī)格2ml，樣品來源于本發(fā)明實(shí)施例5 BB組合物處方1；BBK組合物注射液組自制，規(guī)格2ml，樣品來源于本發(fā)明實(shí)施例5 BBK組合物處方1；受試動物小鼠，每組雌雄各5只，雄性體重25～28g，雌性體重21～24g。
給藥途徑靜脈注射、腹腔注射。
觀察項(xiàng)目死亡數(shù)、一般狀態(tài)、體重、剖檢、半數(shù)致死量。
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果按照急性毒性實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行預(yù)試，腹腔注射及靜脈注射兩給藥途徑皆無法測出藥物的半數(shù)致死量，也未見明顯的毒性反應(yīng)，故進(jìn)行一日內(nèi)最大給藥量實(shí)驗(yàn)。給藥劑量尾靜脈注射0.2ml/10g，腹腔注射0.2ml/10g，一日2次。
死亡數(shù)未出現(xiàn)死亡。
一般狀態(tài)未見異常變化。
體重于給藥前1天，給藥日，給藥后1、3、7、14天測量；未見異常變化。
剖檢心、肝、肺、腎等組織未見異常變化。
(3)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)中未出現(xiàn)死亡，推測BB組合物注射液、BBK組合物注射液對雌雄小鼠靜脈和腹腔注射給藥的最大耐受量均為0.4ml/10g，相當(dāng)于50kg體重人日最大用量20ml的100倍。表明本品低毒，安全性高。
實(shí)驗(yàn)例7 BB組合物、BBK組合物注射液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)供試品BB組合物注射液組自制，規(guī)格2ml，樣品來源于本發(fā)明實(shí)施例5 BB組合物處方1；BBK組合物注射液組自制，規(guī)格2ml，樣品來源于本發(fā)明實(shí)施例5 BBK組合物處方1；考察項(xiàng)目性狀、PH值、澄明度長期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果將本品各組合物置溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置6個月、12個月，各項(xiàng)指標(biāo)均無明顯變化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本品各組合物注射液長期放置基本穩(wěn)定。
具體實(shí)施方式
以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實(shí)施例中各劑型的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。實(shí)施例4～13中的實(shí)驗(yàn)例中所用的半枝蓮提取物取自實(shí)施例1的第2批，半邊蓮提取物取自實(shí)施例2的第2批，半枝蓮半邊蓮混提物取自實(shí)施例3的第2批。
實(shí)施例1半枝蓮提取物的制備半枝蓮提取物的制備方法取半枝蓮藥材，加75％乙醇提取二次，每次2h，加醇10倍量，合并煎液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加于已處理好的聚酰胺柱(100g，30～60目，柱內(nèi)徑3mm，乙醇濕法裝柱，乙醇適量預(yù)洗，再用水洗至無醇味，備用)上，先用2倍柱體積的水沖洗，再用2倍柱體積的10％乙醇沖洗，棄去沖洗液，再用3倍柱體積的70％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度1.05～1.11的濃縮液，噴霧干燥，即得。
半枝蓮提取物含量測定總黃酮的含量測定對照品溶液的制備精密稱取在105℃干燥至恒重得野黃芩苷對照品10mg，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得(每1ml含野黃芩苷0.2mg)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對照品溶液0.4ml、0.8ml、1.2ml、1.6ml、2.0ml，分別置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。以甲醇為空白，照紫外一可見分光光度法，在335nm的波長處分別測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
測定法精密量取野黃芩苷項(xiàng)下的續(xù)濾液1ml置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“以甲醇為空白”起，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中野黃芩苷的重量(mg)，計(jì)算，即得。
野黃芩苷的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-醋酸(35∶61∶4)為流動相；檢測波長為335nm。理論板數(shù)按野黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。
對照品溶液的制備精密稱取野黃芩苷對照品8mg，置100ml容量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含野黃芩苷80ug)。
供試品溶液的制備取本品50mg，精密稱定，加20％甲醇超聲25ml處理30分鐘，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。
根據(jù)上述工藝，制得三批半枝蓮提取物，其得率和總黃酮含量、野黃芩苷含量如下表所示。通過本工藝制得的半枝蓮提取物得率為1～3％，提取物中總黃酮以野黃芩苷計(jì)的含量不低于50％，野黃芩苷的含量不低于4.5％。
半枝蓮提取物得率和總黃酮含量、野黃芩苷含量
實(shí)施例2半邊蓮提取物的制備半邊蓮提取物制備工藝取半邊蓮藥材，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)加水12倍量，第二次1小時(shí)加水10倍量，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.14～1.19(55～60℃)的清膏，加乙醇使其含醇量達(dá)60％，靜置24小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，加乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置24小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.09～1.12，噴霧干燥即得。
半邊蓮提取物的鑒別取本品100mg，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取半邊蓮對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
按照上述優(yōu)選制備工藝制得三批半邊蓮提取物，提取物得率和水溶性浸出物的含量見下表。通過本工藝制得的半邊蓮提取物得率為3～5％，水溶性浸出物的含量不低于47％。
半邊蓮提取物得率和水溶性浸出物含量
實(shí)施例3半邊蓮和半枝蓮混提物的制備半邊蓮和半枝蓮混提物制備工藝取半邊蓮藥材和半枝蓮藥材各25kg，加水提取三次，第一次2小時(shí)，加水12倍量，第二、三次1小時(shí)，加水10倍量，合并煎液濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.08，加乙醇使含醇量為65％，靜置24小時(shí)，濾過，濾液調(diào)節(jié)pH值至8.0～8.5，靜置1小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加乙醇使含醇量為85％，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至相對密度為1.19～1.26的稠膏，噴霧干燥，即得。
半邊蓮和半枝蓮混提物的鑒別取本品100mg，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取半邊蓮對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
半邊蓮和半枝蓮混提物的含量測定總黃酮的含量測定對照品溶液的制備精密稱取在105℃干燥至恒重得野黃芩苷對照品10mg，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得(每1ml含野黃芩苷0.2mg)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對照品溶液0.4ml、0.8ml、1.2ml、1.6ml、2.0ml，分別置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。以甲醇為空白，照紫外-可見分光光度法，在335nm的波長處分別測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
測定法精密量取野黃芩苷項(xiàng)下的續(xù)濾液1ml置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“以甲醇為空白”起，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中野黃芩苷的重量(mg)，計(jì)算，即得。
野黃芩苷的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-醋酸(35∶61∶4)為流動相；檢測波長為335nm。理論板數(shù)按野黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。
對照品溶液的制備精密稱取野黃芩苷對照品8mg，置100ml容量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得(每1ml中含野黃芩苷80μg)。
供試品溶液的制備取本品50mg，精密稱定，加20％甲醇超聲25ml處理30分鐘，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。
通過本工藝制得三批提取物，提取物得率和總黃酮、野黃芩苷含量見下表。通過本工藝制備的提取物得率為0.5～3％，提取物中總黃酮的含量不低于50％，野黃芩苷的含量不低于3％。
半邊蓮和半枝蓮混提物得率和總黃酮、野黃芩苷含量
實(shí)施例4BB組合物、BBK組合物粉針劑的制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物30g半邊蓮提取物20g聚山梨酯80 30g甘露醇 150g無菌注射用水加至2000ml共制備 1000支BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g聚山梨酯80 30g甘露醇 150g無菌注射用水加至2000ml共制備 1000支BBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g聚山梨酯80 50g甘露醇 300g無菌注射用水加至3000ml共制備 1000支
BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g聚山梨酯80 50g甘露醇 300g無菌注射用水加至3000ml共制備 1000支2、具體步驟1)首先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進(jìn)行無菌處理。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)取配液量70％的無菌注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，攪拌溶解完全，然后加入甘露醇加熱攪拌溶解完全，補(bǔ)加無菌注射用水至全量；或者取配液量60％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，加熱攪拌溶解完全。苦參素加配液量20％注射用水?dāng)嚢枞芙狻：喜⑸鲜鋈芤?，再加入甘露醇加熱攪拌溶解完全，補(bǔ)加無菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.22um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)。
8)分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞。將樣品放入凍干機(jī)中冷凍干燥。預(yù)凍-45℃5小時(shí)，低溫真空干燥-45℃～0℃20小時(shí)，然后升溫至25℃真空干燥3小時(shí)。
9)凍干結(jié)束，壓塞，軋蓋。
10)成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例5BB組合物、BBK組合物水針劑的制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g聚山梨酯80 30g注射用水加至2000ml共制備 1000支
BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g聚山梨酯80 30g注射用水加至2000ml共制備 1000支BBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g聚山梨酯80 100g注射用水加至4000ml共制備 2000支BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g聚山梨酯80 100g注射用水加至4000ml共制備 2000支2、具體步驟1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量70％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，攪拌溶解完全，補(bǔ)加注射用水至全量；或者取配液量60％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，加熱攪拌溶解完全?？鄥⑺丶优湟毫?0％注射用水?dāng)嚢枞芙猓喜⑷芤?，補(bǔ)加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
4)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
5)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
6)檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)。
7)將溶液熔封于玻璃安瓿中。
8)100℃流通蒸汽滅菌30分鐘。
9)趁熱將樣品放入0.01％的亞甲藍(lán)溶液中檢漏。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例6BB組合物、BBK組合物氯化鈉輸液的制備
1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g聚山梨酯80 50g氯化鈉 900g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g聚山梨酯80 50g氯化鈉 900g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶BBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g聚山梨酯80 50g氯化鈉 900g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g聚山梨酯80 50g氯化鈉 900g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶2、具體步驟1)前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量70％的無菌注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，攪拌溶解完全。然后加入氯化鈉攪拌溶解，補(bǔ)加注射用水至全量；或者取配液量60％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，加熱攪拌溶解完全?？鄥⑺丶优湟毫?0％注射用水?dāng)嚢枞芙?。合并上述溶液，加入氯化鈉溶解完全，補(bǔ)加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
4)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
5)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
6)檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)。
7)灌裝于100ml的輸液瓶中。
8)115℃熱壓滅菌30分鐘。
9)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例7BB組合物、BBK組合物葡萄糖輸液的制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g聚山梨酯80 50g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g聚山梨酯80 50g氫氧化鈉適量葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶BBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g聚山梨酯80 50g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g聚山梨酯80 50g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶2、具體步驟1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量70％的無菌注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，攪拌溶解完全。然后加入葡萄糖攪拌溶解，補(bǔ)加注射用水至全量；
或者取配液量60％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，加熱攪拌溶解完全?？鄥⑺丶优湟毫?0％注射用水?dāng)嚢枞芙?。合并上述溶液，加入葡萄糖溶解完全，補(bǔ)加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
4)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
5)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
6)檢查溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)。
7)灌裝于100ml的輸液瓶中。
8)115℃熱壓滅菌30分鐘。
9)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例8BB組合物、BBK組合物片劑的制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g淀粉100.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂1.5g羧甲淀粉鈉 2.0g共制備 1000片BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g淀粉100.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂1.5g羧甲淀粉鈉 2.0g共制備 1000片BBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g淀粉150.0g微晶纖維素 50.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂8.0g羧甲淀粉鈉 10.0g共制備 2000片
BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g淀粉150.0g微晶纖維素 50.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂8.0g羧甲淀粉鈉 10.0g共制備 2000片2、具體步驟1)將中藥提取物粉碎過100目篩備用；或者將中藥提取物和苦參素粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將中藥提取物、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材或者將中藥提取物、苦參素、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗(yàn)。
9)按照化驗(yàn)確定的片重壓片。
10)成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例9BB組合物、BBK組合物膠囊劑的制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物 20g半邊蓮提取物 30g淀粉 60.0g微晶纖維素 20.0g2％HPMC水溶液適量硬脂酸鎂 2.0g共制備 1000粒
BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g淀粉60.0g微晶纖維素 20.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂2.0g共制備 1000粒BBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g淀粉80.0g微品纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂8.0g共制備 2000粒BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g淀粉80.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂8.0g共制備 2000粒2、具體步驟1)將中藥提取物粉碎過100目篩備用或者將中藥提取物和苦參素粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將中藥提取物、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；或者將中藥提取物、苦參素、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗(yàn)。
9)按照化驗(yàn)確定的裝量裝入膠囊。
10)成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例10BB組合物、BBK組合物軟膠囊劑的制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g大豆油 500.0g大豆磷脂50g蜂蠟50g共制備 1000粒BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g大豆油 500.0g大豆磷脂50g蜂蠟50g共制備 1000粒BBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g大豆油 500.0g大豆磷脂50g蜂蠟50g共制備 2000粒BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g大豆油 500.0g大豆磷脂50g蜂蠟50g共制備 2000粒2、具體步驟將中藥提取物分別粉碎過100目篩，將處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷，加入中藥提取物研勻，壓制成軟膠囊即可；或者將中藥提取物、苦參素分別粉碎過100目篩，將處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷，加入中藥提取物、苦參素研勻，壓制成軟膠囊即可。
實(shí)施例11BB組合物、BBK組合物顆粒劑的制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物 20g半邊蓮提取物 30g糖粉 1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g糖粉 1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包BBK組合物處方1半枝蓮提取物 20g半邊蓮提取物 30g苦參素 600g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包2、具體步驟1)將蔗糖粉碎過100目篩備用。將中藥提取物粉碎過100目篩備用；或者將蔗糖粉碎過100目篩備用。將中藥提取物、苦參素粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將中藥提取物與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入2％HPMC50％乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；或者將中藥提取物、苦參素與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入2％HPMC50％乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
4)過20目篩制顆粒。
5)顆粒在60℃的條件下烘干。
6)干顆粒過18目篩整粒。
7)取樣，半成品化驗(yàn)顆粒中主藥的含量，確定裝量。
8)包裝，成品全檢，包裝入庫。
實(shí)施例12BB組合物、BBK組合物滴丸劑的制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g聚乙二醇6000600gBB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g聚乙二醇6000600gBBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g聚乙二醇6000600gBBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g聚乙二醇6000600g2、具體步驟將聚乙二醇6000在水浴中加熱熔融，待全部熔融后加入中藥提取物，攪拌溶解，60目篩過濾，保持60℃滴入冷至10℃以下的液體石蠟中制成丸；或者將聚乙二醇6000在水浴中加熱熔融，待全部熔融后加入中藥提取物、苦參素，攪拌溶解，60目篩過濾，保持60℃滴入冷至10℃以下的液體石蠟中制成丸。
實(shí)施例13BB組合物、BBK組合物口服液制備1、處方BB組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g聚山梨酯80 40g苯甲酸鈉15g甜菊甙 10g水 加至10000ml共制備 1000支
BB組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g聚山梨酯80 40g苯甲酸鈉15g甜菊甙 10g水 加至10000ml共制備 1000支BBK組合物處方1半枝蓮提取物20g半邊蓮提取物30g苦參素 600g聚山梨酯80 50g苯甲酸鈉15g甜菊甙 10g水 加至10000ml共制備 1000支BBK組合物處方2半枝蓮半邊蓮混提物 40g苦參素 600g聚山梨酯80 50g苯甲酸鈉15g甜菊甙 10g水 加至10000ml共制備 1000支2、具體步驟1)先將聚山梨酯80用配液量60％的水溶解完全，再將中藥提取物加入加熱攪拌溶解完全；或者先將聚山梨酯80用配液量50％的水溶解完全，再將中藥提取物加入加熱攪拌溶解完全?？鄥⑺丶优湟毫?0％水加熱后溶解完全。
2)將苯甲酸鈉和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全。
3)合并上述溶液，補(bǔ)加水至全量。
4)過0.8um的微孔濾膜過濾。
5)半成品化驗(yàn)。
6)灌裝。成品全檢，包裝入庫。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，主要由下列重量份的原料藥制成半枝蓮200～4000份或其提取物4～100份、半邊蓮200～4000份或其提取物5～150份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物主要由下列重量份的原料藥制成半枝蓮500～2000份或其提取物10～50份、半邊蓮500～2000份或其提取物15～60份。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物主要由下列重量份的原料藥制成半枝蓮1000份或其提取物20份、半邊蓮1000份或其提取物30份。
4.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，其原料藥還有苦參素100～2400份。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物是由下列重量份的原料藥制成半枝蓮500～2000份或其提取物10～50份、半邊蓮500～2000份或其提取物15～60份、苦參素300～1200份。
6.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物是由下列重量份的原料藥制成半枝蓮1000份或其提取物20份、半邊蓮1000份或其提取物30份、苦參素600份。
7.如權(quán)利要求1-6所述的任一藥物組合物，其特征在于，其中的半枝蓮提取物含總黃酮不低于30％；其中的半邊蓮提取物的主要有效成分為生物堿類。
8.如權(quán)利要求1-6所述的任一藥物組合物的制備方法，其特征在于，所述的藥材可以用適宜的溶劑分別提取或混合提取得到提取物，總提取物再與其他原料藥以及藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型。
9.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，所述的總提取物中所含的主要有效成分為半枝蓮總黃酮類、半邊蓮生物堿類。
10.如權(quán)利要求1-6所述的任一藥物組合物，其特征在于，該組合物可與藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種主要用于抗腫瘤作用的藥物組合物及其制備方法和用途，該組合物主要由半枝蓮、半邊蓮或其提取物制成，其重量份為半枝蓮200～4000份、半邊蓮200～4000份或相應(yīng)重量份的提取物，該組合物還可以加入苦參素100～2400份，可制成各種藥學(xué)上可接受的劑型。該組合物具有協(xié)同增效作用，穩(wěn)定性好，比單用同劑量的半枝蓮、半邊蓮或苦參素的效果大大提高，產(chǎn)生了意想不到的效果，具有廣泛的應(yīng)用前景。
文檔編號A61K36/75GK1961898SQ200510045070
公開日2007年5月16日 申請日期2005年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月10日
發(fā)明者黃振華 申請人:黃振華