專利名稱：Hcv抑制性雙環(huán)嘧啶的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及雙環(huán)嘧啶作為HCV復制抑制劑的用途以及其在用于治療或對抗HCV感染的藥物組合物中的用途。另外，本發(fā)明涉及用于制備這些藥物組合物的方法。本發(fā)明還涉及本發(fā)明雙環(huán)嘧啶與其它抗HCV劑的組合。
自從1989年被發(fā)現(xiàn)為涉及大多數(shù)病毒非A，非B肝炎的試劑(Choo等人，Science 244，359-362，1989)，肝炎C病毒(HCV)已成為許多醫(yī)學研究的重點(Lauer，G.M和Walker，B.D.，New Eng.J Med.345，41-52，2001)。HCV是肝炎病毒類病毒的黃熱病毒屬，和與包括許多涉及人疾病的病毒，如登革病毒和黃熱病毒的黃熱病毒類，和與包括牛病毒腹瀉病毒(BVDV)的動物pestivirus屬密切相關。HCV是正向，單束RNA病毒，具有約9,600bp的基因組?；蚪M包含呈現(xiàn)RNA二級結構的5′和3′未翻譯區(qū)域，和編碼約3,010-3,030氨基酸的單個聚蛋白質的中心開放讀取架構。聚蛋白質編碼通過以宿主和病毒蛋白酶為媒介的或一系列被精心安排的同時和后翻譯內蛋白水解裂解而由前體聚蛋白質生成的十個基因產物。病毒結構蛋白質包括核殼包核酸蛋白質，和兩個被膜糖蛋白E1和E2。非結構(NS)蛋白質編碼一些基本病毒酶功能(解螺旋酶，聚合酶，蛋白酶)，以及未知功能的蛋白質。病毒基因組的復制以RNA依賴性RNA聚合酶為媒介，后者由非結構蛋白質5b(NS5B)編碼。除了聚合酶，都在雙功能NS3蛋白質中編碼的病毒解螺旋酶和蛋白酶功能已經(jīng)表現(xiàn)出對于黑猩猩感染模型中HCV RNA復制的必要性(Kolykhalov，A.A.，Mihalik，K.，F(xiàn)einstone，S.M.，和Rice，CM.J Virol.74，2046-2051，2000)。除了NS3絲氨酸蛋白酶，HCV還編碼NS2區(qū)域中的金屬蛋白質酶。
HCV優(yōu)先在肝細胞中復制但不是直接細胞變性的，導致持續(xù)感染。尤其是，劇烈T-淋巴細胞響應的缺乏和高病毒變異傾向似乎促進高比率的慢性感染。有6種主要的HCV基因型和超過50種的子型，地理上各異地分布。1型HCV在美國和歐洲是主要的基因型。例如，1型HCV占美國所有HCV感染的70至75％。HCV的廣泛遺傳性蛋白異質性具有重要的診斷和臨床意義，可解釋疫苗發(fā)展的困難和對治療響應的缺乏。世界上估計1.7億人被肝炎C病毒(HCV)感染。在起始急性感染之后，大多數(shù)感染的個體產生慢性肝炎，可發(fā)展成肝纖維化，導致肝硬化，晚期肝疾病，和HCC(肝蜂窩癌)(National Institutesof Health ConsensusDevelopment Conference StatementManagement of HeptitisC.Heptology，36，5 Suppl.S3-S20，2002)。由于HCV感染的肝硬化是僅美國每年死亡約10,000人的原因，而且是肝移植的主要原因。HCV的傳輸可通過與污染的血液或血液制品接觸而進行，例如在輸血或靜脈內藥物使用之后。用于血液篩選的診斷試驗的引入導致輸血后HCV發(fā)病率的下降趨勢。但如果緩慢發(fā)展成晚期肝疾病，現(xiàn)有感染數(shù)十年來仍表示一種嚴重的醫(yī)學和經(jīng)濟負擔(Kim，W.R.Heptology，36，5 Suppl.S30-S34，2002)。
對該慢性疾病的治療是一種未滿足的臨床需要，因為目前的治療僅部分有效且受不受歡迎的副作用的限制。
目前的HCV治療基于與利巴韋林相結合的(聚乙二醇化)干擾素-α(IFN-α)。該組合治療對于基因型1病毒所感染的40％以上的患者和基因型2和3所感染的約80％以上的病人產生持續(xù)的病毒響應。除了對HCV型1的局限效力，組合治療具有明顯副作用和對許多患者的耐受不好。例如，在聚乙二醇化干擾素和利巴韋林的登記試驗中，明顯副作用導致約10至14％患者的不連續(xù)治療。組合治療的主要副作用包括流感狀癥狀，血液異常，和神經(jīng)精神病癥狀。公共衛(wèi)生的一個主要目標是開發(fā)更有效的，適宜的和耐受的治療。因此，醫(yī)學上非常需要能夠抑制HCV復制的低分子量化合物。通過抑制HCV復制，可快速降低被肝炎C病毒感染的病人的病毒負荷。病毒負荷的下降證實了HCV抑制劑的臨床抗病毒活性的原理。通過保持病人的低至未可檢測水平的病毒負荷，疾病發(fā)展得到延遲或甚至停止，避免因此產生慢性肝炎，肝纖維化，肝硬化，晚期肝疾病，和HCC(肝蜂窩癌)。
病毒，和尤其是HCV病毒針對抑制劑的耐性也是治療失敗的一個原因。接受抗HCV治療的許多患者不完全對該治療作出反應，主要由于病毒對一種或多種所用藥物的耐性。另外有人指出，耐性病毒被傳送至新感染的個體，導致嚴重限制了這些新用藥患者的治療方案。因此本領域需要用于抗病毒治療，更尤其用于肝炎治療的新化合物。本領域尤其需要不僅對野生型HCV病毒，而且對越來越常見的耐性HCV病毒有活性的化合物。
用于本發(fā)明的化合物是嘧啶或三嗪的衍生物。PCT出版物WOO1/47921描述了嘧啶和三嗪化合物，它們是與各種炎癥癥狀相關的激酶活性的抑制劑。另外，PCT出版物WO00/12497和WO02/076976描述了喹唑啉衍生物，它們是TGFβR受體激酶和TGF-β為媒介的信號傳送的抑制劑。
WO04/087056涉及TGF-β的雙環(huán)嘧啶抑制劑，其中嘧啶核在(5)和(6)位被橋接和進一步在位(2)和(4)上被包含芳族部分的取代基取代。這些化合物可通過抑制TGFβ活性以緩和癥狀而治療被試者。
WO03/097615涉及治療與TGF-β信號傳送有關的增生病癥的方法，其中將TGF-β的非肽小分子抑制劑具體地結合至型I TGF-β受體(TGFβ-R1)上。抑制劑是喹唑啉衍生物。
WO04/065392涉及縮合吡啶和嘧啶和其作為ALK-5受體配體的用途。這些化合物是治療活性的，尤其用于治療或預防特征通過轉化生長因子β(TGF-β)的過度表達的病癥。公開了用于這些治療的藥物組合物。
WO03/078426公開作為蛋白質激酶抑制劑的唑基氨基吖嗪，包含所述化合物的藥物可接受組合物，和使用該組合物治療各種疾病，癥狀，或病癥的方法。
WO03/078427公開作為蛋白質激酶抑制劑的唑基氨基吖嗪，包含所述化合物的藥物可接受組合物，和使用該組合物治療各種疾病，癥狀，或病癥的方法。
WO2003077921公開作為蛋白質激酶抑制劑的吖嗪基氨基吡咯，包含所述化合物的藥物可接受組合物，和使用該組合物治療各種疾病，癥狀，或病癥的方法。
WO03/078423公開可用作蛋白質激酶抑制劑的化合物，包含所述化合物的藥物可接受組合物，和使用該組合物治療各種疾病，癥狀，或病癥的方法。
WO02/22601描述了用于治療疾病如癌，糖尿病和阿耳茨海默氏疾病的吡唑組合物，包含藥物可接受載體和可用作蛋白質激酶抑制劑，尤其aurora-2和GSK-3的抑制劑的化合物。
發(fā)明公開本發(fā)明化合物是包含稠環(huán)橋接位5和6的嘧啶衍生物。該化合物具有結構式 或其藥物可接受鹽，其中嘧啶環(huán)稠環(huán)橋接位5和6是飽和，不飽和或芳族的。稠環(huán)是視需要取代的環(huán)和包含4-7個環(huán)原子，其中每一環(huán)原子獨立地是C，N，O或S。但如果所述稠環(huán)包含6個環(huán)原子，它不是芳族的。每一Ar1和Ar2獨立地是視需要取代的芳族部分或視需要取代的雜芳族部分，其中所述雜芳族部分包含一個或多個O，S，和/或N；通常這些部分包含5-12個環(huán)原子。
R1是H，或視需要取代的烷基(1-10C)，鏈烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)。
可用于本發(fā)明的化合物是嘧啶的衍生物，包含在5-6位上的橋和在對應于嘧啶的2-和4-位的位置上的指定取代基。進一步，非干擾性取代基也可被包括。
本發(fā)明涉及下式化合物 或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6是包含4-7個環(huán)原子的視需要取代的飽和，不飽和或芳族環(huán)，其中X是選自N，O，或S的原子；n是0，1，2，或3；每一Ar1和Ar2獨立地是視需要取代的芳族部分或視需要取代的雜芳族部分，其中所述雜芳族部分包含一個或多個O，S，和/或N，和這些芳族或雜芳族部分包含5-12個環(huán)原子；
R1是H，或視需要取代的烷基(1-10C)，鏈烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)；前提是如果橋接嘧啶環(huán)的位5和6的所述稠環(huán)包含6個環(huán)原子，那么它不是芳族環(huán)；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性，防止或治療與HCV有關的癥狀。
在本發(fā)明的一個實施方案中，提供了具有結構式(1)的化合物用于制造藥物的用途，所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于防止趨向慢性肝炎，肝纖維化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窩癌)和類似疾病的疾病發(fā)展。
在本發(fā)明的一個實施方案中，提供了具有結構式(1)的化合物用于制造藥物的用途，所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于治療慢性肝炎，肝纖維化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窩癌)和類似疾病。
可用于本發(fā)明的化合物是嘧啶衍生物，包含在5-6位上的橋和在對應于嘧啶的2-和4-位的位置上的指定取代基。進一步，也可包括非干擾性取代基。
在本發(fā)明的一個實施方案中，Ar1和Ar2分別獨立地是視需要取代的芳族部分或視需要取代的雜芳族部分，其中所述雜芳族部分包含一個或兩個O，S，和/或N，和這些芳族或雜芳族部分包含5-12個環(huán)原子。
在一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式化合物 或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6是包含5或6個環(huán)原子的視需要取代的飽和，不飽和或芳族環(huán)，其中X是選自N或O的原子；n是0，1，或2；每一Ar1和Ar2獨立地是視需要取代的芳族部分或視需要取代的雜芳族部分，其中所述雜芳族部分包含一個或兩個N，和這些芳族或雜芳族部分包含5-7個環(huán)原子；R1是H，或視需要取代的烷基(1-10C)；前提是如果所述嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6包含6個環(huán)原子，那么它不是芳族環(huán)；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性，防止或治療與HCV有關的癥狀。
在一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式化合物 或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6是包含5或6個環(huán)原子的視需要取代的飽和，不飽和或芳族環(huán)，其中X是選自N或O的原子；n是0，1，或2；每一Ar1和Ar2獨立地是視需要取代的苯基或視需要取代的吡啶基；R1是H，或視需要取代的烷基(1-6C)；前提是如果所述嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6包含6個環(huán)原子，那么它不是芳族環(huán)；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性，防止或治療與HCV有關的癥狀。
在一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式化合物 或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6是包含5或6個環(huán)原子的視需要取代的飽和，不飽和或芳族環(huán)，其中X是選自N或O的原子；n是0，1，或2；R1是H，或視需要取代的烷基(1-6C)；每一R3獨立地是氫，鹵代，氰基，硝基，烷基(1-6C)，聚鹵代烷基(1-6C)，-COR，-CONR2，-COOR，-OR，-OCOR，-NR2，或-NRCOR；每一R4獨立地是氫，鹵代，氰基，硝基，聚鹵代烷基(1-6C)，或烷基(1-6C)；其中每一R獨立地是氫，羥基，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，環(huán)烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)視需要用一個或兩個選自羥基，環(huán)烷基(3-7C)，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是包含1至2個分別獨立地選自氮，氧和硫的雜原子的5或6元飽和，部分不飽和或完全不飽和雜環(huán)環(huán)，和其中基團Het總體上可視需要用一個，兩個或三個分別獨立地選自鹵代，烷基(1-6C)，羥基，和氧代的取代基取代；前提是如果所述嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6包含6個環(huán)原子，那么它不是芳族環(huán)；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性，防止或治療與HCV有關的癥狀。
在一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式化合物 或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6與嘧啶環(huán)一起形成選自以下的基團
其中任何這些基團可視需要用一個或兩個選自烷基(1-6C)，苯基，和芐基的取代基取代；R3是氫，鹵代，烷基(1-6C)，-CF3，-COR，-CONR2，或-COOR；每一R4aR4b獨立地是氫或鹵代；其中每一R獨立地是氫，羥基，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，環(huán)烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)，視需要用一個或兩個選自羥基，環(huán)烷基(3-7C)，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是選自以下的基團 其中基團Het可視需要用一個或兩個分別獨立地選自烷基(1-6C)，和氧代的取代基取代；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性，防止或治療與HCV有關的癥狀。
在一個實施方案中，本發(fā)明涉及使用下式化合物
或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6與嘧啶環(huán)一起形成選自以下的基團 其中任何這些基團可視需要用一個或兩個烷基(1-6C)取代；R3是氫，烷基(1-6C)，或-CONR2；每一R4aR4b獨立地是氫或鹵代；其中每一R獨立地是氫，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，或烷基(1-6C)，視需要用一個羥基取代；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性，防止或治療與HCV有關的癥狀。
本文所用的″非干擾性取代基″是定性上使具有結構式(1)的化合物抑制HCV活性的能力保持原樣的取代基。因此，該取代基可改變抑制度，但只要具有結構式(1)的化合物保持抑制活性的能力，該取代基被劃分為″非干擾性。″本文所用的術語″烷基，″″鏈烯基″和″炔基″包括直鏈，支化-鏈和環(huán)狀單價取代基，當它們未被取代時，包含僅C+H。例子包括甲基，乙基，異丁基，環(huán)己基，環(huán)戊基乙基，2-丙烯基，3-丁炔基，和類似物。通常，烷基，鏈烯基和炔基取代基包含1-10C(烷基)或2-10C(鏈烯基或炔基)。優(yōu)選它們包含1-6C(低級烷基)或2-6C(低級鏈烯基或低級炔基)。
雜烷基，雜鏈烯基和雜炔基被類似地定義但可在主鏈殘基內包含1或多個O，S或N雜原子或其組合。
本文所用的″酰基″包括烷基，鏈烯基，炔基的定義，和雜?；ǚ謩e通過羰基基團被偶聯(lián)至其它殘基上的相關雜原子。
″芳族″部分或″芳基″部分是指單環(huán)或稠合雙環(huán)部分如苯基或萘基；″雜芳族″還表示包含一個或多個選自O，S和N的雜原子的單環(huán)或稠合雙環(huán)環(huán)體系。雜原子的夾雜允許5-元環(huán)以及6-元環(huán)的夾雜。因此，典型的芳族/雜芳族體系包括吡啶基，嘧啶基，吲哚基，苯并咪唑基，苯并三唑基，異喹啉基，喹啉基，苯并噻唑基，苯并呋喃基，噻吩基，呋喃基，吡咯基，噻唑基，唑基，咪唑基和類似物。因為互變異構體是理論可能的，鄰苯二甲亞氨基也被認為是芳族的。在環(huán)體系的電子分布方面具有芳族性特性的任何單環(huán)或稠環(huán)雙環(huán)體系被包括在該定義中。通常，環(huán)體系包含5-12環(huán)成員原子。
類似地，″芳基烷基″和″雜芳基烷基″是指通過碳鏈(包括取代的或未取代的，飽和或不飽和碳鏈，通常1-8C，或其雜形式)偶聯(lián)至另一殘基上的芳族和雜芳族體系。這些碳鏈也可包括羰基基團，因此使得它們能夠提供取代基作為?；螂s?；糠?。
作為基團或基團一部分的術語″聚鹵代烷基(1-6C)″被定義為單-或多鹵代取代的烷基(1-6C)，尤其是用最高1，2，3，4，5，6，或更多個鹵代原子取代的烷基(1-6C)，如被一個或多個氟原子取代的甲基或乙基，例如，二氟甲基，三氟甲基，三氟乙基。優(yōu)選的是三氟甲基。還包括全氟烷基(1-6C)基團，它是其中所有的氫原子被替換為氟原子的烷基(1-6C)基團，如五氟乙基。如果一個以上的鹵素原子連接到在聚鹵代烷基(1-6C)定義內的烷基基團上，鹵素原子可相同或不同。
一般來說，包含在取代基中的任何烷基，鏈烯基，炔基，?；?，或芳基基團可自身視需要被其它的取代基取代。這些取代基的性質類似于對原取代基自身所述的那些。因此，如果取代基的實施方案是烷基，該烷基可視需要被作為使得化學上合理和不會損害烷基本身的尺寸限度的取代基列舉的剩余取代基取代；如，用于這些實施方案，被烷基或通過鏈烯基取代的烷基簡單地擴展碳原子的上限。但被芳基，氨基，烷氧基，和類似物取代的烷基被包括。本發(fā)明化合物的特點由結構式(1)，(2)，和(3)定義和取代基的性質不太重要，只要取代基不影響該堿性結構的所述生物活性。
術語鹵代是氟，氯，溴和碘的通稱。本文以前所用的術語氧代或(＝O)在連接到碳原子上時形成羰基部分。只要環(huán)或環(huán)體系用氧代基團取代，鍵接氧代的碳原子是飽和碳。
用于定義變量的基團包括所有的可能異構體，除非另有所指。例如吡啶基包括1-吡啶基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基；戊基包括1-戊基，2-戊基和3-戊基。
如果任何變量在任何成分中出現(xiàn)一次以上，每一定義是獨立的。
Ar1或Ar2上的非干擾性取代基，包括，但不限于，烷基，鏈烯基，炔基，鹵代，-OR，-NR2，-SR，-SOR，-SO2R，-OCOR，-NRCOR，-NRCONR2，-NRCOOR，-OCONR2，-RCO，-COOR，-NRSOR，-NRSO2R，-SO3R，-CONR2，SO2NR2，其中每一R獨立地是H或烷基(1-8C)，-CN，-CF3，和NO2，和類似取代基。Ar1或Ar2上的非干擾性取代基，包括，但不限于，烷基，鏈烯基，炔基，鹵代，-OR，-NR2，-SR，-SOR，-SO2R，-OCOR，-NRCOR，-NRCONR2，-NRCOOR，-OCONR2，-RCO，-COR，-COOR，-NRSOR，-NRSO2R，-SO3R，-CONR2，SO2NR2，其中每一R獨立地是H或烷基(1-8C)，-CN，-CF3，和NO2，和類似取代基。R的優(yōu)選實施方案是H，烷基(1-10C)或其含雜原子的形式，分別視需要取代，尤其(1-4C)烷基；烷氧基(1-8C)，?；０被蓟趸?，芳基烷基氧基，尤其其中芳基基團是鄰苯二甲亞氨基基團，和烷基或芳基烷基胺。
優(yōu)選Ar1和Ar2是視需要取代的苯基，2-，3-或4-吡啶基，吲哚基，2-或4-嘧啶基，噠嗪基，苯并三唑基或苯并咪唑基。更優(yōu)選Ar1和Ar2是苯基，吡啶基，或嘧啶基。優(yōu)選Ar1是吡啶基或嘧啶基和Ar2是苯基。這些實施方案分別可視需要被用基團如烷基，鏈烯基，炔基，芳基，-O-芳基，-O-烷基芳基，-O-芳?；?，-NR-芳基，-N-烷基芳基，-NR-芳酰基，鹵代，-OR，-NR2，-SR，-OOCR，-NROCR，-RCO，-COOR，-CONR2，和/或SO2NR2取代，其中每一R獨立地是H或烷基(1-8C)，和/或通過-CN，-CF3，和/或NO2。這些實施方案分別可視需要用一個或兩個基團如烷基，鏈烯基，炔基，芳基，-O-芳基，-O-烷基芳基，-O-芳?；?，-NR-芳基，-N-烷基芳基，-NR-芳?；?，鹵代，-OR，-NR2，-SR，-OOCR，-OCOR，-NROCR，-NRCOR，-RCO，-COR，-COOR，-CONR2，和/或SO2NR2取代，其中每一R獨立地是H或烷基(1-8C)，和/或通過-CN，-CF3，和/或NO2。烷基，鏈烯基，炔基和這些基團的芳基部分可進一步被類似取代基取代。Ar1或Ar2上的優(yōu)選的取代基包括烷基，鏈烯基，炔基，鹵代，-OR，-SR，-NR2其中R是H或烷基(1-4C)；和/或芳基氨基，芳基烷基氨基，包括被一個以上芳基取代的烷基氨基。如上所述，包括在取代基內的任何芳基或烷基基團可自身被類似地取代。這些取代基可占據(jù)該環(huán)的所有的可得位置，優(yōu)選1-2位，或更多優(yōu)選僅一個位。
任何芳基部分，包括結構式(1)，(2)，和(3)中描繪的那些，尤其苯基部分，也可包含兩個在預期形成5-7元碳環(huán)或雜環(huán)脂族環(huán)的取代基。嘧啶環(huán)的5和6位之間的橋形成稠環(huán)體系，其中，如果稠環(huán)包含6個環(huán)原子，那么它不是芳族的。但該橋可包含pi鍵和可包含一個或多個選自N，O，和S的雜原子。優(yōu)選的實施方案包括，其中該橋得到視需要包含一個或多個氮，氮和氧，氧，其它的雙鍵，飽和橋，或6-元環(huán)(由飽和的橋形成)的5-元環(huán)。在一個實施方案中，6-元飽和的生成橋的環(huán)包含一個或兩個氮。由橋形成的環(huán)本身可被取代。以上針對Ar1和Ar2所述的取代基也可作為稠環(huán)體系而存在。
以下無論何時使用術語″具有結構式(1)的化合物″，″具有結構式(2)的化合物″，″具有結構式(3)的化合物″，或″本化合物″或類似術語，它意味著包括具有結構式(1)，(2)，和(3)的化合物，其前藥，N-氧化物，加成鹽，季胺，金屬配合物，和立體化學異構體形式。一個實施方案包括具有結構式(1)的化合物或本文規(guī)定的具有結構式(1)的化合物的任何子組，包括具有結構式(2)和(3)的化合物，以及N-氧化物，鹽，作為其可能立體異構體形式。另一實施方案包括具有結構式(1)的化合物或本文規(guī)定的具有結構式(1)的化合物的任何子組，鹽以及其可能立體異構體形式。
對于治療用途，具有結構式(1)的化合物的鹽是其中抗衡離子是藥物可接受的那些。但非藥物可接受的酸和堿的鹽也可例如用于制備或純化藥物可接受化合物。所有的鹽(無論是否藥物可接受)被包括在本發(fā)明的范圍內。
以上提及的藥物可接受酸和堿加成鹽意味著包括具有結構式(1)的化合物所能夠形成的治療活性非毒性酸和堿加成鹽形式。藥物可接受酸加成鹽可適宜地通過將堿形式用這些合適的酸處理而得到。合適的酸包括，例如，無機酸如氫鹵酸，如氫氯酸或氫溴酸，硫酸，硝酸，磷酸和類似物酸；或有機酸如，例如，乙酸，丙酸，羥基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸(即乙二酸)，丙二酸，琥珀酸(即丁二酸)，苯甲酸，馬來酸，富馬酸，蘋果酸(即羥基丁二酸)，酒石酸，檸檬酸，甲烷磺酸，乙磺酸，苯磺酸，p-甲苯磺酸，環(huán)己氨磺酸，水楊酸，p-氨基水楊酸，撲酸和類似酸。
相反，所述鹽形式可通過用合適的堿處理而被轉化成游離堿形式。
包含酸性質子的具有結構式(1)的化合物也可通過用合適的有機和無機堿處理而被轉化成其非毒性金屬或胺加成鹽形式。因此，如果羧基部分存在于具有結構式(1)的化合物上，該化合物也可作為與藥物可接受陽離子的鹽而供給。合適的堿鹽形式包括，例如，銨鹽，堿和堿土金屬鹽，如鋰，鈉，鉀，鎂，鈣鹽和類似物，與有機堿的鹽，如benzathine，N-甲基-D-葡糖胺，卡巴胺鹽，和與氨基酸如，例如，精氨酸，賴氨酸和類似物的鹽。
本文所用的術語加成鹽還包括具有結構式(1)的化合物以及其鹽所能夠形成的鹽。這些溶劑合物是例如水合物，醇鹽和類似物。
具有結構式(1)的化合物也可以被設計成在向患者給藥時釋放具有結構式(1)的化合物的″前藥″。這里所用的術語″前藥″是指藥理可接受衍生物如酯，酰胺和磷酸鹽，使得該衍生物的所得體內生物轉化產物是在具有結構式(I)的化合物中所定義的活性藥物。Goodman和Gilman的參考文件(治療藥理基礎，第8版，McGraw-Hill，Int.Ed.1992，″藥物的生物轉化″，p13-15)在此并入本發(fā)明，其中一般地描述了前藥。前藥優(yōu)選具有優(yōu)異的含水溶解度，增加的生物可利用率和容易體內被代謝成活性抑制劑。本發(fā)明化合物的前藥可通過將存在于該化合物中的官能團改性使得改性物通過常規(guī)處理或體內被分裂成母化合物而制備。
前藥形式設計是本領域熟知的，和取決于包含在具有結構式(1)的化合物中的取代基。例如，包含巰基的取代基可被偶聯(lián)至載體上，使得該化合物生物惰性直至被內原性酶或，例如，被靶向患者特定受體或位置的酶去除。
優(yōu)選的是可體內水解和衍生自具有羥基或羧基基團的具有結構式(1)的那些化合物的藥物可接受酯前藥。體內可水解酯是在人或動物體內水解得到母酸或醇的酯。適用于羧基的藥物可接受酯包括烷氧基甲基酯例如甲氧基甲基，烷酰基氧基甲基酯例如戊叔酰氧基甲基，2-苯并[c]呋喃酮基酯，環(huán)烷氧基羰基氧基烷基酯例如1-環(huán)己基羰基氧基乙基；1，3-二氧戊烯-2-酮基甲基酯例如5-甲基-1，3-二氧戊烯-2-酮基甲基；和烷氧基羰基氧基乙基酯例如在本發(fā)明化合物的任何羧基基團上形成的1-甲氧基羰基氧基乙基。
包含羥基基團的具有結構式(1)的化合物的體內可水解酯包括無機酯如磷酸酯和α-?；趸榛押驮擋ンw內水解斷裂得到母羥基基團的相關化合物。α-酰基氧基烷基醚的例子包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙?；趸?甲氧基。對用于羥基的體內可水解成酯基團的選擇包括烷?；郊柞；交阴；腿〈谋郊柞；捅交阴；檠趸驶?得到烷基碳酸酯)，二烷基氨基甲?；蚇-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(以得到氨基甲酸酯)，二烷基氨基乙?；汪然阴；?。苯甲酰基上的取代基的例子包括由環(huán)氮原子通過亞甲基基團鍵接至苯甲?；h(huán)的3-或4-位上的嗎啉代和哌嗪基。
本文所用的術語″季胺″定義具有結構式(1)的化合物通過具有結構式(1)的化合物的堿性氮和合適的季化劑，如，例如，視需要取代的烷基鹵化物，芳基鹵化物或芳基烷基鹵化物，如甲基碘化物或芐基碘化物之間的反應而形成的季銨鹽。也可使用具有良好的離去基團的其它反應物，如三氟甲烷磺酸烷基酯，甲烷磺酸烷基酯，和p-甲苯磺酸烷基酯。季胺具有帶正電荷的氮。藥物可接受抗衡離子包括氯，溴，碘，三氟乙酸根和乙酸根。所選的抗衡離子可使用離子交換樹脂而引入。
本發(fā)明化合物的N-氧化物形式意味著包括其中一個或幾個氮原子被氧化成所謂N-氧化物的具有結構式(1)的化合物。
可以理解，具有結構式(1)的化合物可具有金屬結合，螯合，配合物形成性能和因此可作為金屬配合物或金屬螯合物而存在。具有結構式(1)的化合物的這些金屬化衍生物意味著被包括在本發(fā)明范圍內。
一些具有結構式(1)的化合物也可以其互變異構體形式存在。盡管在以上結構式中沒有被特意表示，但這些形式意味著被包括在本發(fā)明范圍內。
具有結構式(1)的化合物具有幾個手性中心和作為立體化學異構體形式存在。本文所用的術語″立體化學異構體形式″定義由具有結構式(1)的化合物可具有的相同原子組成的所有的可能化合物，所述原子由相同順序的鍵鍵接但具有不同的三維結構。
對于其中(R)或(S)用于表示取代基內的手性原子的絕對構型的情形，該名稱考慮到整個化合物和而非孤立的取代基。
如果結構式(1)的任何取代基包含手性中心，有些確實如此，具有結構式(1)的化合物包括其所有的立體異構體形式，作為分離的立體異構體和這些立體異構體形式的混合物。所述混合物可包含所述化合物的堿性分子結構的所有的非對映體和/或對映異構體。純形式或相互混合的本發(fā)明化合物的所有的立體化學異構體形式意味著被包括在本發(fā)明范圍內。
本文所提及的化合物和中間體的純立體異構體形式被定義為基本上沒有具有所述化合物或中間體的相同的堿性分子結構的其它對映異構體或非對映體形式的異構體。尤其是，術語″立體異構體純″涉及具有至少80％立體異構體過量(即最低90％的一種異構體和最大10％的其它可能異構體)至最高100％立體異構體過量(即100％一種異構體和沒有另一種)的化合物或中間體，更尤其是，具有90％至最高100％的立體異構體過量，甚至更尤其是具有94％至最高100％的立體異構體過量和最尤其是具有97％至最高100％的立體異構體過量的化合物或中間體。術語″對映異構體純″和″非對映體純″應該按照類似方式理解，不過分別看作所述混合物的對映異構體過量，和非對映體過量。
本發(fā)明化合物和中間體的純立體異構體形式通過應用本領域已知的步驟而得到。例如，對映異構體可通過與光學活性酸或堿的其非對映體鹽的選擇性結晶而相互分離。其例子是酒石酸，二苯甲?；剖?，二甲苯?；剖岷驼聊X磺酸。另外，對映異構體可通過使用手性固定相的色譜技術而分離。所述純立體化學異構體形式也可衍生自合適的起始原料的相應純立體化學異構體形式，前提是反應立體特異地出現(xiàn)。優(yōu)選，如果特定立體異構體是所需的，所述化合物通過立體特異性制備方法而合成。這些方法有利地采用對映異構體純起始原料。
具有結構式(1)的化合物的非對映體消旋體可通過常規(guī)方法而分開得到?？捎欣夭捎玫暮线m的物理分離方法是，例如，選擇性結晶和色譜，如柱色譜。
對于一些具有結構式(1)的化合物，其前藥，N-氧化物，鹽，溶劑合物，季胺，或金屬配合物，和用于其制備的中間體，絕對立體化學構型不實驗確定。所屬技術領域的專業(yè)人員能夠使用本領域已知的方法如，例如，X-射線衍射而確定這些化合物的絕對構型。
本發(fā)明還意味著包括存在于本發(fā)明化合物上的原子的所有的同位素。同位素包括具有相同的原子數(shù)但不同的質量數(shù)的那些原子。作為一般性例子，但不限于，氫的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。
本發(fā)明化合物的合成許多合成路徑可用于產生本發(fā)明化合物。一般來說，它們可使用本領域已知的反應而合成?？刹捎萌魏伪绢I域已知的用于合成的方法。但以下合成路徑適用于制備本發(fā)明化合物。典型的發(fā)明化合物顯示如下




方案A(化合物1和26的合成)該一般方案用于制備化合物1和16。
具有結構式(I)的化合物的制備2.53g 4-氨基-5-咪唑甲酰胺溶解在30mL氯仿和30mL二甲基甲酰胺中。在0攝氏度下向該溶液加入3.02mL 3-氯苯甲酰氯，隨后加入5.4mL二異丙基乙基胺。反應混合物暖至室溫和在室溫下保持過夜。反應混合物用氯仿稀釋和用水，10％含水碳酸鈉溶液和鹽水洗滌。有機層在無水硫酸鈉上干燥和過濾。在濃縮之后得到的粗殘余物被吸收在最低量的氯仿中并在硅膠上，使用乙酸乙酯，5％甲醇色譜處理，得到4.81g具有結構式(I)的化合物。
注為了合成化合物16，使用甲基-4-氨基-5-咪唑甲酰胺。
具有結構式(II)的化合物的制備2.74g具有結構式(I)的化合物懸浮在75mL乙醇中，將5mL 10N氫氧化鈉加入反應混合物和反應混合物回流小時。在冷卻至室溫之后，將反應混合物濃縮以去除乙醇并隨后用水稀釋。溶液隨后通過在0攝氏度下加入1N氫氯酸而酸化至pH6.5。將所形成的白色沉淀物通過過濾而收集，用水和醚洗滌和在高真空下干燥，得到0.84g具有結構式(II)的化合物。
具有結構式(III)的化合物的制備0.84g具有結構式(II)的化合物懸浮在60mL氯仿中，向該懸浮液中加入1.1mL亞硫酰氯和2mL二甲基甲酰胺。所得混合物在氮氣下回流3小時。反應混合物冷卻至室溫和濃縮成黃色殘余物。將該殘余物在氯仿中吸收并將冰加入反應混合物。將冷溶液用5％碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。有機層在無水硫酸鈉上干燥和過濾。在濃縮之后，將所得殘余物用冷乙酸乙酯處理。分離白色固體。將該固體過濾和用乙酸乙酯洗滌，得到0.46g具有結構式(III)的化合物。
具有結構式(1)的化合物的制備0.46g具有結構式(III)的化合物溶解在10mL干二甲基甲酰胺中，向其中加入加入0.67ml二異丙基乙基胺。將反應混合物加熱至60攝氏度，和向其中加入加入0.21g 4-氨基吡啶的溶液。反應混合物在回流下加熱1小時。在冷卻至室溫反應混合物是濃縮至最小體積和產物通過制備反相HPLC，使用C18 Vydac柱，使用梯度水，乙腈(都包含0.1％三氟乙酸)而純化。15mg具有結構式(1)的化合物在凍干包含所需產物的級分而得到。分析1H NMR d6DMSO，LCMS，M+323。
具有結構式(26)的化合物的制備化合物26根據(jù)在方案A中給出的步驟，使用N-1-苯基-2-氨基咪唑-3-甲酰胺和苯甲酰氯而制備。
方案B(化合物3，5-15和17的合成) 3-氨基-4-氰基-5-甲基異唑的制備羥基胺鹽酸鹽(12.78g，0.184毫摩爾)溶解在40ml水中，用氫氧化鈉(7.36g，0.184毫摩爾)處理。加入60ml乙醇(無水)并在攪拌的同時小心加入(1-乙氧基乙叉基)丙二腈(25g，0.184毫摩爾)。將反應混合物在50攝氏度下加熱30min，隨后在室溫下攪拌過夜。在真空下去除乙醇，將過濾的固體產物用水洗滌，在真空下干燥以得到21.93g(96.8％產率)。注為了合成7和11，使用相應乙基羥基胺，和為了合成9，使用相應苯基羥基胺。
N-(3-氯苯甲?；?-4-氰基-3-甲基-5-甲酰胺的制備3-氨基-4-氰基-5-甲基異唑(6.0g，0.0487毫摩爾)懸浮在乙腈/四氫呋喃(30ml/10ml)中。加入二異丙基乙基胺(8.26ml，0.0487毫摩爾)，隨后滴加3-氯苯甲酰氯?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜。將沉淀產物通過過濾而分離，用氯仿洗滌。得到1.31g產物(11％產率)。
注為了合成化合物3，5，6，8，10，12，13，14，15和17，使用相應酰氯。
3-甲基-6-(3-氯苯基)異唑[5，4d]嘧啶酮的制備N-(3-氯苯甲?；?-4-氰基-3-甲基-5-甲酰胺(1.0g，15毫摩爾)懸浮在20ml 1M氫氧化鈉中和用8ml 30％過氧化氫處理。混合物回流過夜。將冷卻的反應混合物放在冰批料上和用1M氫氯酸處理至pH6。將產物過濾得到白色沉淀物和在真空下干燥，得到537mg(53％產率)。
3-甲基-4-氯-6-(3-氯苯基)異唑[5，4d]嘧啶的制備3-甲基-6-(3-氯苯基)異唑[5，4d]嘧啶酮(535mg，2.04毫摩爾)懸浮在磷酰氯(6ml)中和加熱回流4小時。去除過量磷酰氯，加入冰和氯仿(10ml)，用飽和碳酸氫鈉堿化，將產物提取到氯仿中并將提取物在硫酸鈉(無水)上干燥。產物通過硅膠色譜用氯仿洗脫而純化。得到200mg產物。
3-甲基-4-(4-氨基吡啶基)-6-(3-氯苯基)異唑[5，4d]嘧啶(17)的制備4-氨基吡啶(80.6mg，0.859毫摩爾)溶解在N-甲基吡咯烷酮中，加入二異丙基乙基胺(149微升)，隨后加入3-甲基-4-氯-6-(3-氯苯基)異唑[5，4d]嘧啶(120mg，0.428毫摩爾)。將混合物在50攝氏度下攪拌1小時。產物通過制備HPLC在C18柱上純化。
方案C(化合物2和4所合成) 2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶酮的制備苯扎明鹽酸鹽(4.0g，0.25mol)溶解在64ml乙醇中。向其中加入8.0ml 25wt％甲醇鈉溶液。反應隨后在室溫下攪拌5小時，和過濾。將濾液隨后加入2-氰基-4，4-二乙氧基丁酸乙基酯(4.80g，0.21mol)。該溶液回流5小時。
一半溶劑在減壓下去除，隨后加入80ml冰水，并將pH用乙酸調節(jié)至7。將材料隨后冷卻6小時并將產物通過真空過濾而分離。注為了合成化合物4，使用3-氯苯并瞇。

4-氯-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶的制備2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶酮(1.0g 4.73mmol)用氯氧化磷(7ml，27.7mmol)處理和回流5小時。過量氯氧化磷在減壓下被去除并隨后用氯仿提取，用碳酸氫鈉洗滌。有機層在硫酸鈉(無水)上干燥，隨后濃縮至無水，得到產物。
4-(4-氨基吡啶基)-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶(2)的制備4-氯-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶(0.12g，1.27mmol)溶解在4ml NMP中。加入N，N′-二異丙基乙基胺(0.229ml)，隨后加入4-氨基-吡啶(0.15g，0.635mmol)。反應混合物加熱回流2小時，冷卻和通過制備HPLC而純化。
方案D(化合物18的合成) 乙?；谆?丙二酸二甲基酯的制備丙二酸二甲基酯(5g，0.189毫摩爾)用碳酸鉀(34.78g，0.25毫摩爾)，碘化鈉(1.00g，0.0067毫摩爾)處理并隨后在迅速分批加入氯丙酮(23.1g，0.25毫摩爾)的同時加溫。反應混合物在100攝氏度下加熱20min。向冷卻的反應混合物中加入50ml乙醇，并將過濾的固體材料用乙醇洗滌。乙醇在真空下從濾液中去除。產物通過真空蒸餾而分離。得到11.26g產物(32％產率)。
具有結構式(IV)的化合物的制備乙二醇(3.90g，0.0628毫摩爾)，丙二酸乙酰基甲基二甲基酯(11.26g，0.06毫摩爾)，和p-甲苯磺酸(0.21g，0.0011毫摩爾)在25ml苯中合并。將反應混合物加熱回流在DeanStark汽水分離器中收集的水過夜。反應混合物用10％碳酸氫鈉(2×10ml)洗滌并將苯在硫酸鈉上干燥。去除溶劑以得到產物作為油，14.1g。
具有結構式(V)的化合物的制備保護的丙二酸二甲基酯衍生物(5.0g，0.0215毫摩爾)溶解在甲醇(20ml)中，加入3-氯苯并瞇鹽酸鹽，隨后加入25％甲醇鈉(16ml，0.0646毫摩爾)。反應混合物在室溫下攪拌3天?；旌衔镉盟?50ml)稀釋并加入60ml1M HCl和在室溫下攪拌1小時，隨后加入4ml濃縮HCl和攪拌過夜，得到最終產物。甲醇在真空下去除，和產物通過過濾和真空干燥而得到。得到5g產物。
6-甲基-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶酮的制備
6-羥基-5-乙?；谆?2-(3-氯苯基)嘧啶酮(5.0g)用濃硫酸(80ml)處理。反應混合物在室溫下攪拌4小時，隨后用碳酸鈉中和和用氯仿提取，將氯仿提取物用水洗滌，在硫酸鈉(無水)上干燥并去除溶劑，得到產物(1.10g)。
6-甲基4-氯-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶的制備6-甲基-2-氯苯基-呋喃并[3，2-d]嘧啶酮(480mg，1.84毫摩爾)懸浮在二氯甲烷(4ml)中。加入亞硫酰氯(1.6ml，22.5毫摩爾)和二甲基甲酰胺(0.5ml)并加熱回流3小時。去除過量溶劑，并將殘余物用冰處理，提取到氯仿中，用10％碳酸氫鈉和水洗滌，在硫酸鈉(無水)上干燥并去除溶劑，得到480mg產物。
6-甲基4-(4-氨基吡啶基)-2-氯苯基呋喃并[3，2d]嘧啶(18)的制備6-甲基4-氯-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶(480mg，1.72毫摩爾，1eq)，BINAP(8mg，0.013毫摩爾，0.0075eq)，Pd2(dba)3(3.9mg，0.0043毫摩爾，0.0025eq)，叔丁醇鈉(231mg，2.4毫摩爾，1.4eq)，4-氨基吡啶(194mg，2.06毫摩爾，1.2eq)在5ml二烷中合并和在50攝氏度下加熱5小時。產物通過在C18柱上的制備HPLC而分離。
方案E(化合物19的合成) 2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸乙基酯的制備乙酰氨基丙二酸二乙基酯(15.0g，69.1mmol)溶解在60ml氯仿中，隨后用60g五氧化二磷處理。反應混合物回流6小時，隨后冷卻至室溫。該溶液用氫氧化鈉(1M)處理以中和反應混合物。有機層用水洗滌和在硫酸鈉(無水)上干燥。將粗品真空蒸餾以分離產物。得到8.26g產物(60％產率)。
2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸的制備2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸乙基酯(8.26g，41.5mmol)用74ml15％KOH溶液處理?；亓?5分鐘，隨后冷卻和使用10％HCl溶液酸化。產物通過真空過濾而收集。
2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯的制備2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸(2.56g，14.9mmol)溶解在二氯甲烷中。加入2滴二甲基甲酰胺并將反應在冰浴中冷卻。滴加草酰氯(12ml，22.3mmol)。去除冰浴并將反應體系在室溫下攪拌2小時。溶劑通過減壓而去除。
4-(3-氯芐脒酰胺)-2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯的制備3-氯苯并瞇(2.29g，14.8mmol)溶解在40ml DCM中和達到0攝氏度.隨后加入15ml 2.0M氫氧化鈉溶液。將溶解在30ml DCM中的2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯(2.8g，14.8mmol)滴加至反應混合物和在室溫下攪拌3小時。有機溶劑隨后用水洗滌，隨后碳酸氫鈉洗滌，隨后用硫酸鈉干燥和濃縮。
具有結構式(VI)的化合物的制備4-(3-氯芐脒酰胺)-2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯(2.0g，6.5mmol)溶解在30ml甲苯中和回流1.5小時。溶劑隨后通過減壓而去除。

7-甲基-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶酮的制備1.86g，5.93mmol，唑酯用在20升乙醇中的0.86g，15.4mmol KOH處理。在室溫下攪拌過夜。有機溶劑在減壓下蒸發(fā)并將該化合物溶解在水中和使用15％HCl溶液酸化。固體產物通過真空過濾而收集。
7-甲基-4-氯-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶的制備7-甲基-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶酮(1.32g，5.06mmol)用磷酰氯(13.2ml，141.7mmol)處理和回流3小時。將反應體系冷卻，溶劑通過減壓而去除并將殘余物吸收在氯仿中。將冰加入有機溶劑，隨后將有機溶劑用碳酸氫鈉洗滌，在硫酸鈉上干燥并隨后濃縮。粗品通過閃蒸柱色譜而純化。
7-甲基-4-(4-氨基吡啶基)-2-(3-氯苯基)唑并[2，3d]嘧啶(19)的制備將7-甲基-4-氯-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶(0.100g，0.358mmol)，4-氨基吡啶(0.040g，0.430mmol)，叔丁醇鈉(0.048g，0.501mmol)，二(二苯基膦基)-1，1′-聯(lián)萘(0.0009g，0.0014mmol)，和Pd2(dba)3(0.0004g，0.0043mmol)合并和溶解在2ml無水二烷中并回流3.5小時。將反應體系冷卻，隨后濾過Celite，并隨后通過HPLC而純化。
方案F 具有結構式(VI)的化合物的制備向2-氧代環(huán)戊烷羧酸甲基酯(4.10g，28.9mmol，1eq)在無水乙醇(20ml)中的溶液加入2-氟-5-氯苯并瞇(5.0g，28.9mmol，1eq)在乙醇(20ml)中的溶液并將反應混合物在80攝氏度下加熱過夜。將反應混合物冷卻至室溫(r.t.)并將白色沉淀物過濾和用冷卻乙酸乙酯(2×20ml)洗滌。粗殘余物在氯仿和水之間分配。將水層酸化至pH4并將產物用氯仿提取(3×50ml)提取。將有機層合并，用鹽水洗滌，在MgSO4上干燥上干燥，過濾和在真空中濃縮，得到粗白色固體(VI)(4.5g，60％)，沒有進一步純化。
具有結構式(VII)的化合物的制備具有結構式(VI)的化合物(200mg，0.757mmol)在POCl3(5ml)中的懸浮液在回流下攪拌1小時。將溶液隨后冷卻至室溫和在減壓下濃縮，得到白色固體，溶解在無水二氯甲烷中。將溶液冷卻至0攝氏度并加入冰，隨后加入sat.NaHCO3。將有機層分離，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和在真空中蒸發(fā)以提供粗白色固體，不進一步純化。
具有結構式(20)的化合物的制備(一般Buchwald反應步驟)具有結構式(VII)的粗亞氨基氯化合物(210mg，0.76mmol，1eq)溶解在二烷(5ml)中和向其中加入Pd(OAc)2(9mg，0.04mmol，0.05eq)，隨后加入BINAP(35mg，0.056mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(82mg，0.760mmol，1eq)和Cs2CO3(370mg，1.13mmol，1.5eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱15小時。將反應混合物冷卻至r.t.和濾過Celite并將粗品通過閃蒸柱色譜(3∶2/乙酸乙酯∶己烷)而純化，得到具有結構式(20)的化合物(110mg，41％)。
具有結構式(IX)的化合物的制備向具有結構式(VIII)的化合物(100mg，0.25mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的懸浮液加入1N NaOH(aq)溶液(500μl，0.50mmol，2eq)并將反應混合物回流2小時。將混合物冷卻至r.t.和在真空中濃縮。將水(10ml)加入粗品并將水層酸化至pH4。將固體過濾，用水(2×5ml)洗滌和連夜干燥，得到具有結構式(IX)的化合物(50mg，52％)作為米色固體。
具有結構式(21)的化合物的制備向具有結構式(IX)的化合物(50mg，0.13mmol，1eq)在無水DMF(2ml)中的懸浮液加入1，1′-羰基二咪唑(42mg，0.26mmol，2eq)并將反應混合物在70攝氏度下加溫2h。將混合物冷卻至r.t.和NH3(g)鼓泡10min。反應混合物在r.t.下攪拌另外1小時。反應體系在真空中濃縮。將水(10ml)加入粗品并將固體過濾，用水(2×5ml)洗滌和連夜干燥，得到具有結構式(21)的化合物(30mg，60％)作為米色固體。
根據(jù)方案F制備的其它化合物具有結構式(32)的化合物根據(jù)在方案F中給出的用于制備具有結構式(VIII)的化合物的方案，使用4-氨基oyrdine-3-羧酸乙基酯而制備。具有結構式(36)的化合物通過用于合成具有結構式(20)的化合物所述的方法采用4-氨基-3-三氟甲基-甲基吡啶替代4-氨基-3-甲基吡啶而制備。具有結構式(35)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用甲基胺替代氨而制備。具有結構式(37)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用吡咯烷替代氨而制備。具有結構式(41)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用環(huán)丙基胺替代氨而制備。具有結構式(42)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用環(huán)丙基甲基胺替代氨而制備。具有結構式(51)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用2-氨基-乙醇替代氨而制備。具有結構式(52)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用1-氨基-丙烷-2-(S)-醇替代氨而制備。具有結構式(53)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用3-氨基-丙烷1，2(S)-二醇替代氨而制備。具有結構式(54)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用HO-NH2替代氨而制備。具有結構式(55)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用1-氨基-丙烷-2-(R)-醇替代氨而制備。具有結構式(56)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用N-甲基亞乙基二胺替代氨而制備。具有結構式(58)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用肼替代氨而制備。具有結構式(67)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用苯并瞇而制備。具有結構式(68)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用甲基胺替代氨和苯并瞇替代2-F，3-Cl-苯并瞇而制備。具有結構式(69)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用N，N′-二甲基-1，3-丙烷二胺替代氨而制備。具有結構式(70)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用4-(3-氨基丙基)嗎啉替代氨而制備。具有結構式(71)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)咪唑替代氨而制備。具有結構式(72)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)-2-吡咯烷酮替代氨而制備。具有結構式(73)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用2-(2-氨基乙基)-1-甲基吡咯烷替代氨而制備。具有結構式(74)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)-2-2-甲基哌啶替代氨而制備。具有結構式(75)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用1-(2-氨基乙基)吡咯烷替代氨而制備。具有結構式(78)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用1-(2-氨基乙基)哌啶替代氨而制備。具有結構式(79)的化合物通過用于合成具有結構式(21)的化合物所述的方法采用N，N′-二乙基乙烯二胺替代氨而制備。
方案G(具有結構式(22)，(24)，(25)，和(30)的化合物的合成) 具有結構式(X)的化合物的制備向2-氟-5-氯苯并瞇(1.79g，10.4mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液加入固體NaOEt(705mg，10.4mmol，1eq)，隨后加入甲基-4-氧代-3-哌啶羧酸鹽酸鹽(2.0g，10.4mmol，1eq)。將反應混合物在70攝氏度下加熱2h，隨后冷卻至r.t.。將沉淀物過濾和用乙酸乙酯(2×20ml)洗滌，得到白色固體(2.2g，76％)，不進一步純化。
具有結構式(XI)的化合物的制備在r.t.下，向具有結構式(X)的化合物(300mg，1.08mmol，1eq)在無水THF(10ml)中的懸浮液加入BoC2O(258mg，1.18mmol，1.1eq)在無水THF(10ml)中的溶液。將反應混合物在r.t.下攪拌2小時并隨后將溶液在真空中濃縮，得到粗殘余物，然后通過閃蒸柱色譜而純化，得到具有結構式(XI)的化合物(320mg，79％)作為白色固體。
具有結構式(XII)的化合物的制備向PPh3(813mg，3.03mmol，5eq)在無水二烷(20ml)中的溶液一次加入NBS(540mg，3.03mmol，5eq)并將懸浮液在r.t.下攪拌30min。加入具有結構式(XI)的化合物(230mg，0.61mmol，1eq)在無水二烷(5ml)中的溶液并將反應混合物在80攝氏度下加熱45min。將反應混合物冷卻至r.t.和加入Et3N(160μl，1.21mmol，2eq)。將混合物真空濃縮并將粗殘余物通過閃蒸柱色譜(1∶9乙酸乙酯∶己烷)而純化，得到具有結構式(XII)的化合物(72mg，30％)。
具有結構式(XIII)的化合物的制備向具有結構式(XII)的化合物(72mg，0.16mmol，1eq)在無水二烷(2ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(2mg，0.008mmol，0.05eq)，隨后加入BINAP(8mg，0.001mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(18mg，0.16mmol，1eq)和Cs2CO3(80mg，0.24mmol，1.5eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱15小時。將反應混合物冷卻至r.t.和濾過Celite并將粗品通過閃蒸柱色譜(7∶3/乙酸乙酯∶己烷)而純化，得到具有結構式(XIII)的化合物(65mg，85％)。
具有結構式(22)的化合物的制備向具有結構式(XIII)的化合物(65mg，0.14mmol，1eq)在無水二烷(2ml)中的溶液加入在二烷中的4M HCl溶液(1ml)。所得懸浮液在r.t.下攪拌2小時。將沉淀物過濾并用氯仿(1×5ml)，乙酸乙酯(1×5ml)和冷甲醇(1×2ml)洗滌，得到具有結構式(22)的化合物(35mg，68％)作為白色固體。
具有結構式(24)的化合物的制備具有結構式(24)的化合物根據(jù)方案G中給出的步驟，使用1-芐基-4-氧代哌啶-3-羧酸乙基酯和苯并瞇而制備。
具有結構式(25)的化合物的制備具有結構式(25)的化合物根據(jù)在方案G中給出的步驟，使用苯并瞇而制備。
具有結構式(30)的化合物的制備具有結構式(30)的化合物根據(jù)在方案G中給出的步驟，使用1-芐基-4-氧代哌啶-3-羧酸乙基酯而制備。
方案H(具有結構式(23)的化合物的合成) 具有結構式(XIV)的化合物的制備向N-芐基-3-氧代-4-哌啶羧酸鹽酸乙基酯(2g，6.73mmol，1eq)在乙醇(60ml)中的溶液加入10％Pd/C。將空氣抽空并通過氣球替換為氫。反應混合物在r.t.下攪拌4小時。反應混合物濾過Celite的短墊，得到具有結構式(XIV)的化合物，不進一步純化。
具有結構式(XV)的化合物的制備向2-氟-5-氯苯并瞇(1.16g，6.71mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液加入固體NaOEt(457mg，6.71mmol，1eq)，隨后加入具有結構式(XIV)的化合物(1.39g，6.71mmol，1eq)。反應混合物在70攝氏度下加熱2小時并隨后冷卻至r.t.。將沉淀物過濾和用乙酸乙酯(2×20ml)洗滌，得到具有結構式(XV)的化合物(1.12g，60％)作為白色固體，不進一步純化。
具有結構式(XVI)的化合物的制備在r.t.下，向具有結構式(XV)的粗化合物(1.12mg，4.01mmol，1eq)在無水THF(10ml)中的懸浮液加入BoC2O(960mg，4.42mmol，1.1eq)在無水THF(10ml)中的溶液。將反應混合物在r.t.下攪拌2小時并隨后將溶液在真空中濃縮，得到粗殘余物，然后通過閃蒸柱色譜而純化，得到具有結構式(XVI)的化合物(750mg，50％)作為白色固體。
具有結構式(XVII)的化合物的制備向PPh3(2.28g，8.70mmol，5eq)在無水二烷(20ml)中的溶液一次加入NBS(1.55mg，8.71mmol，5eq)并將懸浮液在r.t.下攪拌30min。加入具有結構式(XVI)的化合物(660mg，1.74mmol，1eq)在無水二烷(5ml)中的溶液并將反應混合物在80攝氏度下加熱45min。將反應混合物冷卻至r.t.和加入2eq Et3N。將混合物真空濃縮并將粗殘余物通過閃蒸柱色譜(1∶9乙酸乙酯∶己烷)而純化，得到具有結構式(XVII)的化合物(230mg，30％)。
具有結構式(XVIII)的化合物的制備向具有結構式(XVII)的化合物(230mg，0.52mmol，1eq)在無水二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(6mg，0.03mmol，0.05eq)，隨后加入BINAP(8mg，0.004mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(67mg，0.62mmol，1.2eq)和Cs2CO3(271mg，0.83mmol，1.5eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱15小時。將反應混合物冷卻至r.t.和濾過Celite并將粗品通過閃蒸柱色譜(9∶1/乙酸乙酯∶己烷)而純化，得到具有結構式(XVIII)的化合物(38mg，16％)。
具有結構式(23)的化合物的制備向具有結構式(XVIII)的化合物(38mg，0.08mmol，1eq)在無水二烷(2ml)中的溶液加入在二烷中的4M HCl溶液(1ml)。所得懸浮液在r.t.下攪拌2小時。將沉淀物過濾和用氯仿(1×3ml)，乙酸乙酯(1×3ml)和冷甲醇(1×1ml)洗滌，得到具有結構式(23)的化合物(32mg，95％)作為白色固體。
方案I(具有結構式(27)的化合物的合成) 2-氨基-噻吩-3-羧酸酰胺1，4-二噻烷-2，5-二醇(4.56g，30mmole)和2-氰基乙酰胺(2.52g，30毫摩爾)在乙醇(50ml)中合并。加入三乙基胺(6ml)并在70攝氏度下加熱1小時。將溶劑體積在真空下減少，和產物通過過濾而分離。產物從乙醇中重結晶，得到2.71g產物(產率64％)。
2-(2-氟-苯甲?；被?-噻吩-3-羧酸酰胺2-氨基-噻吩-3-羧酸酰胺(8.73g，61.4毫摩爾)溶解在吡啶(100ml)中，冷卻至0攝氏度，和將2-氟苯甲酰氯在20min內滴加，隨后將反應在攪拌下暖至室溫過夜。吡啶在真空下去除，加入二氯甲烷和水。產物作為灰色固體而沉淀并用稀氫氯酸，水洗滌和風干。分離二氯甲烷層，用稀氫氯酸，和水洗滌，在硫酸鈉(anh.)上干燥并去除溶劑，得到總共12.45g產物(77％產率)。
2-(2-氟-苯基)-3H-噻吩并[2，3-d]嘧啶-4-酮2-(2-氟-苯甲?；被?-噻吩-3-羧酸酰胺(8.56g，32.4毫摩爾)溶解在20ml 1M氫氧化鈉和60ml乙醇的混合物中。混合物回流4小時。將反應混合物冷卻和倒到e上。將溶液用稀氫氯酸酸化并將產物通過過濾而分離。真空干燥得到5.42g產物(產率68％)。
4-氯-2-(2-氟-苯基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶2-(2-氟-苯基)-3H-噻吩并[2，3-d]嘧啶-4-酮(900mg，3.65毫摩爾)溶解在氯仿中并將亞硫酰氯(0.532ml，7.30毫摩爾)加入混合物，隨后加入1ml二甲基甲酰胺。將反應混合物加熱回流2.5小時，將冷卻的混合物用10％碳酸鈉洗滌，將氯仿溶液在硫酸鈉(無水)上干燥和去除溶劑。將粗品在硅膠上用氯仿洗脫而色譜處理。去除溶劑，得到438mg產物(產率45％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺將4-氯-2-(2-氟-苯基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶(110mg，0.41毫摩爾)和4-氨基吡啶(78mg，0.830毫摩爾)在異丙醇(3毫升)中合并，隨后加入4滴4MHCl/二烷并將反應混合物在80攝氏度下加熱7小時。將反應混合物冷卻并將產物通過過濾而分離，用最少的冷甲醇洗滌和在真空下干燥，得到116mg產物(產率86％)。
方案J(具有結構式(28)的化合物的合成) 5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-甲腈甲基肼(5g，108.5毫摩爾)滴加至(1-乙氧基-乙叉基)-丙二腈(14.7g，108.5毫摩爾)在250ml乙醇中的溶液?；旌衔镫S后加熱回流2.5小時。將反應混合物冷卻，體積減至約70ml并將產物通過過濾而分離，用冷乙醇洗滌和干燥以得到13.5g產物(產率91％)。
N-(4-氰基-2，5-二甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-甲腈(10g，73.4毫摩爾)懸浮在吡啶(90ml)中并在將反應混合物在冰浴上冷卻的同時滴加2-氟苯甲酰氯。反應混合物在室溫下攪拌過夜。去除大多數(shù)吡啶并加入100ml冷水以使產物沉淀。將產物通過過濾而分離，用冷水被和少量冷乙醇洗滌，和在真空下干燥以得到9.15g產物(產率50％)。
6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1，5-二氫-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮N-(4-氰基-2，5-二甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺(5.0g，19.36毫摩爾)懸浮在38ml 1M氫氧化鈉中和在90攝氏度下加熱3小時，隨后加入30％過氧化氫(10毫升)和進一步加熱過夜。將反應混合物冷卻至室溫和用稀氫氯酸酸化。產物通過過濾而分離，用水洗滌，和在真空下連夜干燥以得到3.39g產物。(產率67％)。
4-氯-6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1，5-二氫-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(2.0g，7.74毫摩爾)用40ml氯氧化磷處理和加熱回流過夜。過量氯氧化磷在真空下去除并將冰水加入殘余物。產物用乙酸乙酯提取，用10％碳酸鈉，水洗滌，在硫酸鈉(無水)上干燥和去除溶劑，得到粗品。粗品在硅膠柱上用氯仿洗脫而色譜處理，得到1.10g純產物(產率51％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺4-氯-6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(84mg，0.304毫摩爾)和4-氨基吡啶(57mg，0.608毫摩爾)在4毫升異丙醇中合并，加入3滴4M HCl/二烷并將反應混合物在80攝氏度下加熱5小時。將反應混合物冷卻并將產物過濾，在真空干燥之后得到83mg(產率81％)。
方案K(具有結構式(29)的化合物的合成) 5-氨基-1-丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-甲腈丁基肼草酸鹽(14.25g，80毫摩爾)和(1-乙氧基乙叉基)-丙二腈(10.82g，80毫摩爾)在乙醇(200ml)中合并，并將混合物用二異丙基乙基胺(10.39g，80毫摩爾)處理。將混合物回流2小時，隨后在室溫下攪拌過夜。大部分溶劑在真空下去除并用氯仿研磨，過濾一些固體，并保留氯仿濾液。氯仿濾液用水洗滌，在硫酸鈉(無水)上干燥和去除溶劑，得到產物作為固體，13.13g(產率74％)。
N-(2-丁基-4-氰基-5-甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺5-氨基-1-丁基-5-甲基-1H-吡唑-4-甲腈(10.0g，56毫摩爾)溶解在二氯甲烷/吡啶(45毫升/15毫升)的混合物中和冷卻至0攝氏度.滴加2-氟苯甲酰氯(8.87g，56毫摩爾)并將反應混合物在0攝氏度下攪拌1小時，和在室溫下攪拌過夜。溶劑在真空下去除。將殘余物吸收在乙酸乙酯中，用稀氫氯酸，0.1M氫氧化鈉，和水洗滌，和在硫酸鈉(無水)上干燥。去除溶劑并將固體在30％乙酸乙酯/己烷中研磨。過濾產物，以得到4.16g產物(產率24％)。
1-丁基-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1，5-二氫-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮N-(2-丁基-4-氰基-5-甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺(4.0g，13.3mmole)懸浮在26毫升IM氫氧化鈉中，和加入30％過氧化氫(10毫升)和乙醇(5毫升)。將反應混合物加熱回流4小時，隨后進一步加入30％過氧化氫(10毫升)和加熱回流過夜。將反應混合物冷卻和用稀氫氯酸酸化至pH6.0。產物通過過濾而收集和在真空下干燥以得到1.29g產物(產率32％)。
1-丁基-4-氯-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶1-丁基-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1，5-二氫-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(1.23g，4.1毫摩爾)溶解在氯氧化磷(15ml)中和加熱回流過夜。過量氯氧化磷在真空下去除，將殘余物用冰水處理，將產物提取到乙酸乙酯中，用水，飽和氯化鈉洗滌，隨后在硫酸鈉(anh.)上干燥和去除溶劑，得到粗品。產物在硅膠上用氯仿洗脫而色譜處理，得到723mg純化產物(產率55％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺1-丁基-4-氯-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(100mg，0.31毫摩爾)和4-氨基吡啶(58mg，0.626毫摩爾)在乙二醇二甲氧基醚中合并和加熱回流4小時。將反應混合物冷卻并將產物通過過濾而分離，用最少的冷溶劑洗滌和干燥，得到132mg產物。將50mg該材料在反相C18柱上使用水/乙腈/0.1％三氟乙酸的梯度洗脫而進行HPLC純化。
方案L(具有結構式(9)的化合物的合成) 2-(乙氧基-苯基-亞甲基)-丙二腈鄰苯甲酸三乙基酯(25g，0.112毫摩爾)，丙二腈(9.07g，0.137毫摩爾)和乙酸酐(50ml)回流過夜。過量乙酸酐在真空下去除和產物在硅膠上用30％乙酸乙酯/己烷洗脫而色譜處理，得到21.7g產物(產率97％)。
5-氨基-3-苯基-異唑-4-甲腈羥基胺鹽酸鹽懸浮在水(30ml)中和加入氫氧化鈉(4.4g，0.11毫摩爾)并隨后加入乙醇(40ml)，隨后簡寫加入2-(乙氧基-苯基-亞甲基)-丙二腈(21.7g，0.11毫摩爾)。反應混合物在50攝氏度下加熱2小時。乙醇在真空下去除并將沉淀物過濾。將沉淀物再溶解在50％乙酸乙酯/己烷中和在硅膠上色譜處理在去除溶劑之后得到8.2g產物(產率40％)。其余的順序類似于苯基類似物的甲基替代。
方案M(具有結構式(80)的化合物的合成) 1H-吡咯-2-甲腈吡咯-2-甲醛(3.00g，0.0316毫摩爾)與羥基胺-O-磺酸(12.5g，0.11毫摩爾)在100ml水中合并和在室溫下攪拌過夜。反應混合物冷卻至0攝氏度并將氫氧化鉀(12.06g，0.603毫摩爾)在80毫升水中的溶液在1小時時間內滴加。反應混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷(3×100ml)提取，將提取物在硫酸鈉(anh.)上干燥。去除溶劑，得到3.36g產物作為液體(產率100％)。
1-氨基-1H-吡咯-2-甲腈1H-吡咯-2-甲腈(3.36g，36.5毫摩爾)溶解在100ml二甲基-甲酰胺中，向其中加入碳酸鉀(7.51g，54.75毫摩爾)，隨后加入O-(4-硝基-2-三氟甲基-苯基)-羥基胺(12.15g，54.73毫摩爾)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜。加入80ml水并將沉淀物過濾。將濾液的pH調節(jié)至10，和用乙酸乙酯(3×100ml)提取。將提取物用水，飽和氯化鈉洗滌和在硫酸鈉上干燥。溶劑在真空下去除，得到6.31g包含殘余二甲基甲酰胺的產物。產率通過NMR而估計為64％。
1-氨基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺1-氨基-1H-吡咯-2-甲腈(2.52g，23.5毫摩爾)懸浮在75ml水中，用氫氧化鉀(32g，0.57毫摩爾)，30％過氧化氫(2ml)處理和在室溫下攪拌過夜。反應混合物在0攝氏度下冷卻30min并將產物通過過濾而分離，用冷水洗滌和在真空下干燥，得到2.55g產物(產率87％)。
1-(5-氯-2-氟-苯甲酰基氨基)-1H-吡咯-2-羧酸酰胺1-氨基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(1.25g，10毫摩爾)部分溶解在45ml乙腈中，加入三乙基胺(1.39ml，10毫摩爾)，隨后滴加在3ml氯仿中的5-氯-2-氟苯甲酰氯(1.93g，10毫摩爾)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜，溶劑在真空下去除并將殘余物吸收在氯仿中，用10％碳酸氫鈉，水洗滌，和在硫酸鈉(anh.)上干燥。通過放置，從溶液中結晶出固體。其它產物通過將濾液在硅膠上用3％甲醇/氯仿洗脫進行色譜處理而得到。得到600mg產物(產率21％)。
2-(5-氯-2-氟-苯基)-3H-吡咯并[2.1-f] [1.2.4]三嗪-4-酮1-(5-氯-2-氟-苯甲?；被?-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(200mg，0.71毫摩爾)在密封管中溶解在5ml 28％氫氧化銨中和在80攝氏度下加熱過夜。將溶液用氮沖洗以去除過量氨，和用1M氫氯酸酸化至pH2。產物通過過濾而分離，用水洗滌和真空干燥，得到90mg產物(產率48％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟-苯基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪將2-(5-氯-2-氟-苯基)-3H-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(60mg，0.228毫摩爾)加入氯氧化磷(1ml)中。加入57微升N，N-二甲基苯胺(催化劑)并在110攝氏度下加熱過夜。過量氯氧化磷在真空下去除，并將殘余物用冰處理，和產物用氯仿提取。氯仿提取物在硫酸鈉(anh.)上干燥和去除溶劑，得到粗品。產物通過硅膠色譜用氯仿洗脫而色譜處理，得到36mg產物(產率56％)。[1.2.4]三嗪-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺4-氯-2-(5-氯-2-氟-苯基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪(30mg，0.106毫摩爾)，碳酸銫(48.5mg，0.149毫摩爾)，乙酸鈀(II)(1.19mg，0.0053毫摩爾)，BINAP(4.96mg，0.0080毫摩爾)，和4-氨基-甲基吡啶(13.8mg，0.128毫摩爾)在4ml二烷(anh.)中合并和在90攝氏度下攪拌過夜。將反應混合物過濾以去除固體材料，將濾液蒸發(fā)至無水，將殘余物溶解在氯仿(8毫升)中，用0.5M氫氧化鈉(1ml)洗滌，在硫酸鈉(anh.)上干燥，蒸發(fā)至無水，并隨后將殘余物再溶解在二甲基甲酰胺中和通過反相HPLC而純化。分離產物。
方案N(具有結構式(81)和(82)的化合物的合成) 5-(2-氟-苯基)-4H-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-酮3-氨基-1，2，4-三唑(3.64g，43.25毫摩爾)和乙基2-氟苯甲?；宜狨?10g，47.57毫摩爾)在乙酸(45ml)中合并和加熱回流過夜。將反應混合物冷卻并將產物過濾，用二乙基醚洗滌，得到3.47g(產率35％)。
7-氯-5-(2-氟-苯基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶
5-(2-氟-苯基)-4H-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-酮(840mg，3.64毫摩爾)懸浮在氯氧化磷(5ml)中和加熱回流45min。過量氯氧化磷在真空下去除，將殘余物用冰處理，將產物用氯仿提取，隨后將氯仿用10％碳酸氫鈉洗滌，在硫酸鈉上干燥和溶劑在真空下去除，得到420mg產物(產率46％)。三唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-吡啶-4-基-胺7-氯-5-(2-氟-苯基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(124mg，0.5毫摩爾)懸浮在二烷(5ml)，4-氨基吡啶(56.4mg，0.6毫摩爾)中，加入叔丁醇鈉(67mg，0.7毫摩爾)，BINAP(2.3mg，0.00375毫摩爾)，和Pd2(dba)3(1.14mg，0.00125毫摩爾)并在90攝氏度下加熱過夜。二烷在真空下去除，將殘余物吸收在甲醇中，過濾和通過反相HPLC而純化，和將級分凍干以得到產物作為三氟乙酸鹽。
具有結構式(81)的化合物使用類似于上述的步驟類似，使用5-氯-2-氟苯甲?；宜嵋一ザ苽?。具有結構式(83)的化合物使用類似于上述的步驟，使用4-氨基-嘧啶而制備。
方案O(具有結構式(60)和(61)的化合物的合成) 制備4，4-二甲基環(huán)己酮
參考四面體通訊，1992，33(35)，5009。
4，4-二甲基環(huán)己烯-2-酮(10g，78.11mmol)和三乙基胺(10.89mL，78.11mmol)在100％乙醇(30mL)中的溶液在30psi下在Parr裝置中，在r.t.下進行氫化過夜。將內容物過濾通過Celite和蒸發(fā)濾液，得到清潔產物作為無色油(10.08g，99％產率)。
制備3，3-二甲基己烷二酸參考J.Med.Chem.1970，13(3)，531。
向4，4-二甲基環(huán)己酮(2g，15.85mmol)在冰AcOH(100mL)中的溶液加入CrO3(4.75g，47.54mmol)在冰AcOH(20mL)和水(20mL)中的溶液?；旌衔镌?0攝氏度下攪拌過夜，隨后冷卻和用40％aq.NaOH稀釋至pH14。將混合物用二乙基醚(4×100mL)洗滌，并將水層用cone.HCl(aq.)再酸化至pH1。溶液用二乙基醚(4×100mL)提??；將有機提取物干燥(鹽水和MgSO4)和蒸發(fā)，得到粗二酸，直捷酯化。
制備3，3-二甲基己烷二酸二甲基酯粗3，3-二甲基己烷二酸溶解在甲醇(50mL)中和加入亞硫酰氯(1mL)并將溶液在60攝氏度下加熱6小時，隨后將它冷卻和蒸發(fā)，得到粗二酯，然后通過色譜(1∶1己烷/乙酸乙酯)而純化，得到純產物作為無色油(2.90g，91％產率在2步驟)。
制備4，4-二甲基-2-氧代-環(huán)戊烷羧酸甲基酯參考J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1984，799。
向3，3-二甲基己烷二酸二甲基酯(2.90g，14.36mmol)和甲醇(100μL)在干甲苯(10mL)中的溶液加入鈉金屬(0.66g，28.72mmol)?；旌衔锛訜峄亓鬟^夜，隨后冷卻和蒸發(fā)。
殘余物通過色譜(1∶1己烷/乙酸乙酯)而純化，得到所需環(huán)化產物作為無色油(2.08g，85％產率)。
制備2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-醇4，4-二甲基-2-氧代-環(huán)戊烷羧酸甲基酯(2.08g，12.21mmol)和5-氯-2-氟-苯并瞇(2.32g，13.44mmol)在100％乙醇(40mL)中的溶液加熱回流過夜，隨后冷卻和蒸發(fā)。將殘余物溶解在(aq.)NaOH(50mL)中和用二氯甲烷(2×50mL)洗滌。將水層隨后用冰乙酸酸化至pH4和用二氯甲烷(2×100mL)提取。將有機提取物干燥(鹽水和MgSO4)和蒸發(fā)，得到粗品，然后通過色譜(CH2Cl2，0-10％MeOH)而純化，得到所需產物作為膏固體(2.10g，59％產率)。
制備2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶將2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-醇(2.10g，7.16mmol)在磷酰氯(40mL)中的懸浮液加熱回流2小時，隨后冷卻和蒸發(fā)。將殘余物溶解在二氯甲烷中并將溶液濾過硅膠的短墊。將濾液蒸發(fā)，得到殘基，然后懸浮在氫碘酸(10mL)中和在90攝氏度下與碘化鈉(5.37g，35.82mmol)一起加熱3小時。將混合物冷卻和用水(50mL)稀釋。加入硫代硫酸鈉水溶液(50mL)并將混合物與二氯甲烷(3×100mL)振蕩。有機提取物在MgSO4上干燥上干燥和蒸發(fā)，得到粗品，然后通過閃蒸色譜(CH2Cl2)而純化，得到所需碘產物作為膏固體(1.75g，66％產率)。
制備[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺向2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶(100mg，0.25mmol)，3-甲基-吡啶-4-基胺(30mg，0.27mmol)，Pd(OAc)2(3mg，12.42μmol)和Rac-BINAP(12mg，18.63μmol)在無水二烷(3mL)中的溶液加入Cs2CO3(121mg，0.37mmol)。將混合物在85攝氏度下加熱48小時，冷卻和蒸發(fā)。HPLC純化，在凍干之后得到具有結構式(60)的所需產物作為TFA鹽，一種白色固體(6.4mg)。使用相同步驟制備具有結構式(61)的化合物。
方案P(具有結構式(62)至(66)的化合物的合成) 制備4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-煙酸甲基酯向2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶(500mg，1.24mmol)，4-氨基-煙酸甲基酯(208mg，1.37mmol)，Pd(OAc)2(14mg，62.09μmol)和Rac-BINAP(60mg，93.14μmol)在無水二烷(10mL)中的溶液加入Cs2CO3(607mg，1.86mmol)?；旌衔镌?5攝氏度下加熱12h，冷卻和蒸發(fā)。將殘余物通過色譜(CH2Cl2，0-10％MeOH)而純化，得到所需產物(178mg，34％產率)。
制備4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-煙酸向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)-五嘧啶-4-基氨基]-煙酸甲基酯(178mg，0.42mmol)在二烷(10mL)中的溶液加入NaOH(aq.)(451μL，0.44mmol，0.97N溶液)?；旌衔镌?0攝氏度下加熱1h，隨后冷卻，和加入HCl(aq.)(425μL，0.44mmol，1.03N溶液)。在加入時，酸從溶液中沉淀并過濾和在真空中干燥，得到137mg產物。
制備4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-煙酰胺
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-煙酸(25mg，60.56μmol)和羰基-二咪唑(20mg，121.11μmol)在無水DMF(3mL)中的懸浮液在70攝氏度下加熱1h并隨后冷卻至r.t.。將ONH3氣流經(jīng)過該溶液30min.，這樣完全轉化成酰胺產物。蒸發(fā)溶液，隨后HPLC純化，在凍干之后得到具有結構式(62)的純酰胺作為TFA鹽(20mg)。
具有結構式(63)至(66)的化合物使用相同的步驟制備。
方案Q(具有結構式(76)和(77)的化合物的合成) 4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-異唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸甲基酯4-氯-6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-異唑并[5，4-d]嘧啶(通過用于具有結構式(43)的化合物的方法而制備)(298mg，1毫摩爾)溶解在二烷(4ml)中，并將BINAP(4.67mg，0.0075毫摩爾)，4-氨基-煙酸甲基酯(182mg，1.2毫摩爾)，碳酸銫(456mg，1.4mmole)，和Pd2(dba)3(2.29mg，0.0025mmole)加入混合物和90攝氏度下加熱過夜。
二烷在真空下去除并將將殘余物用乙酸乙酯(5ml)研磨和產物通過過濾而分離。得到525mg固體，還包含碳酸銫作為副產物。
4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-異唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-異唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸甲基酯(525mg)懸浮在甲醇(4ml)中，加入1M氫氧化鈉溶液(4ml)，并隨后在70攝氏度下加熱30min。甲醇在真空下去除并將溶液用6M氫氯酸酸化至pH4。將固體過濾，用水洗滌和在爐中干燥，得到137mg產物。
4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-異唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-N-環(huán)丙基-煙酰胺4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-異唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸(130mg，0.325毫摩爾)與羰基二咪唑(105mg，0.650毫摩爾)在2ml二甲基甲酰胺中合并和在70攝氏度下加熱1小時。將混合物冷卻至室溫，加入環(huán)丙基胺(74mg，1.3毫摩爾)和在室溫下攪拌1小時。將溶液過濾和將濾液在反相HPLC上進行HPLC純化。凍干包含純產物的級分，得到13.7mg純產物。
具有結構式(77)的化合物使用上述步驟，使用甲基胺而制備。
方案R(具有結構式(33)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇向4-氧代-四氫呋喃-3-羧酸甲基酯(根據(jù)Dowd，P.；Choi，S-C.四面體，1991，47，4847-4860制備；800mg，5.55mmol，leq)在乙醇(20ml)中的懸浮液加入2-氟-5-氯-苯并瞇(961mg，5.55mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液。將反應混合物在80攝氏度下加熱過夜。將反應混合物冷卻至r.t.并將白色沉淀物過濾和用冷卻乙酸乙酯(2×20ml)洗滌。粗將殘余物在氯仿和水之間分配。將水層酸化至pH4并將產物用氯仿(3×50ml)提取。將有機層合并，用鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，過濾和真空濃縮，得到粗固體，然后通過閃蒸柱色譜(在EtOAc中的5％MeOH)而純化，得到白色固體2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇(440mg，30％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]嘧啶將2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇(100mg，0.36mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的懸浮液在回流下攪拌1h。將溶液隨后冷卻至室溫和在減壓下濃縮，得到白色固體，然后溶解在無水二氯甲烷中。將溶液冷卻至0攝氏度和加入冰，隨后加入sat.NaHCO3。分離有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮以提供粗白色固體，然后通過閃蒸柱色譜(1∶9 EtOAc∶己烷)而純化，得到4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]-嘧啶(78mg，73％)作為白色固體。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]嘧啶在r.t.下向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]-嘧啶(78mg，0.275mmol，1eq)在57％HI(aq)(2ml)中的懸浮液中加入NaI(206mg，1.37mmol，5eq)。將反應混合物在r.t.下攪拌過夜并隨后倒到冰上。產物用氯仿提取和水層用NaHCO3中和和用氯仿進一步提取。將有機層合并用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮以提供2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶的粗殘余物，不進一步純化。嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有結構式(33)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]嘧啶(80mg，0.21mmol，1eq)在無水二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(2mg，0.01mmol，0.05eq)，隨后加入BINAP(10mg，0.02mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(25mg，0.23mmol，1.2eq)和Cs2CO3(100mg，0.32mmol，1.5eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱15h。將反應混合物冷卻至r.t.和濾過Celite并將粗品通過閃蒸柱色譜(9∶1/乙酸乙酯∶己烷)而純化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有結構式(33)的化合物(20mg，26％)作為白色固體。
方案S(具有結構式(34)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯按照用于合成[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氫呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有結構式(33)的化合物的一般反應步驟，4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯以73％產率分離。
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯(60mg，0.14mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的懸浮液加入1NNaOH(aq)溶液(300μl，0.30mmol，2eq)并將反應混合物加熱回流2h。將溶液冷卻至r.t.和真空濃縮。將水(20ml)加入粗品并將水層酸化至pH4。將固體過濾，用水(2×5ml)洗滌和連夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸(50mg，90％)。
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙堿酰胺，具有結構式(34)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸(50mg，0.13mmol，1eq)在DMF(2ml)中的懸浮液加入1，1′-羰基二咪唑(50mg，0.31mmol，2.4eq)并將反應混合物在70攝氏度下加溫2h。將混合物冷卻至r.t.和NH3(g)鼓泡10min。反應混合物在r.t.用于下攪拌另外1h。反應真空濃縮和將殘余物用水(2×5ml)研磨。向粗將殘余物中加入1N NaOH(5ml)并將懸浮液在100攝氏度下加熱2h。將反應混合物冷卻至室溫和用1N HCl中和并將固體過濾，得到4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氫-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-煙堿酰胺，具有結構式(34)的化合物(25mg，50％)作為白色固體。
方案T(具有結構式(38)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-醇向2-氧代環(huán)戊烷羧酸甲基酯(2g，11.8mmol，1eq)，在無水乙醇(20ml)中的溶液加入2-氟-5-氯苯并瞇(2.04 g，11.8mmol，1eq)在乙醇(20ml)中的溶液并將反應混合物在80攝氏度下加熱過夜。將反應混合物冷卻至r.t.并將溶劑在真空中去除，得到粗殘余物，然后通過從熱乙酸乙酯中重結晶而純化，得到2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-醇(2.56g，78％)作為白色固體。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉將2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-醇(500mg，1.89mmol)在POCl3(6ml)中的懸浮液在回流下攪拌1h。將溶液隨后冷卻至室溫和在減壓下濃縮，得到白色固體，然后溶解在二氯甲烷中。將溶液冷卻至0攝氏度并加入冰，隨后加入sat.NaHCO3。分離有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮以提供粗白色固體4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉，不進一步純化。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氫喹唑啉在r.t.下，向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉(534mg，1.89mmol，1eq)在57％水(10ml)HI溶液中的懸浮液中加入NaI(1.42g，9.47mmol，5eq)。將反應混合物在r.t.下攪拌過夜并隨后倒到冰上。產物用氯仿提取和水層用NaHCO3中和和用更多的氯仿進一步提取。將有機層合并，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮以提供粗白色固體2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氫喹唑啉，不進一步純化。-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，具有結構式(38)的化合物粗2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氫喹唑啉(130mg，0.35mmol，1eq)溶解在二烷(5ml)中并向其中加入Pd(OAc)2(4mg，0.02mmol，0.05eq)，隨后加入BINAP(16mg，0.03mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(49mg，0.45mmol，1.3eq)和Cs2CO3(170mg，0.52mmol，1.5eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱15h。將反應混合物冷卻至r.t.和濾過Celite并將粗品通過閃蒸柱色譜(1∶1/乙酸乙酯∶己烷)而純化，得到[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基]-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，具有結構式(38)的化合物(110mg，86％)。
方案U(具有結構式(50)，(40)，(45)，(57)，(59)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基氨基]-煙酸乙基酯按照用于合成[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基]-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，即具有結構式(38)的化合物的一般反應步驟，4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫-喹唑啉-4-基氨基]-煙酸乙基酯以67％產率分離。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基氨基]-煙酸，50向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基-氨基]-煙酸乙基酯(150mg，0.35mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的懸浮液加入1N NaOH(aq)溶液(423μl，0.42mmol，1.2eq)并將反應混合物回流1h。將溶液冷卻至r.t.和真空濃縮。將水(20ml)加入粗品并將水層酸化至pH4。將固體過濾，用水(2×5ml)洗滌和連夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基氨基]-煙酸，具有結構式(50)的化合物(132mg，94％)，作為膏著色固體。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基氨基]-N-環(huán)丙基煙酰胺，具有結構式(45)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基-氨基]-煙酸(40mg，0.10mmol，1eq)在無水DMF(1ml)中的懸浮液加入三乙基胺(15μl，0.11mmol，1.1eq)，隨后加入環(huán)丙基胺(70μl，0.10mmol，10eq)。向懸浮液中滴加PyBrOP(56mg，0.21mmol，1.2eq)在DMF(500μl)中的溶液。反應混合物在室溫下攪拌16h。將反應體系真空濃縮和將殘余物用醚(2×20ml)研磨。粗將殘余物通過閃蒸柱色譜(在CHCl3中的0-5％MeOH)而純化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-基氨基]-N-環(huán)丙基煙酰胺，具有結構式(45)的化合物，(15mg，34％)作為白色固體。
具有結構式(40)的化合物通過用于合成具有結構式(45)的化合物所述的方法，采用甲基胺替代環(huán)丙基胺而制備。
具有結構式(57)的化合物通過用于合成具有結構式(45)的化合物所述的方法，采用1-氨基-丙烷-2-(S)-醇替代環(huán)丙基胺而制備。具有結構式(59)的化合物通過用于合成具有結構式(45)的化合物所述的方法，采用N，N′-二乙基乙烯二胺替代環(huán)丙基胺而制備。
方案V(具有結構式(39)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇向2-氟-5-氯苯并瞇(1.05g，6.08mmol，1.2eq)在EtOH(20ml)中的溶液加入在乙醇(5ml)中的3-氧代-四氫呋喃-2-羧酸乙基酯(根據(jù)Moyer，M.P；Feldman，P.L.；Rapoport，H.J.Org.Chem，1985，50，5223-5230制備；800mg，5.06mmol，1eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱過夜。將反應混合物冷卻至r.t.和粗將殘余物通過閃蒸柱色譜(在CHCl3中的5％MeOH)而純化，得到白色固體2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇(650mg，53％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶將2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇(100mg，0.36mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的懸浮液在回流下攪拌1h。溶液冷卻至r.t.和在減壓下濃縮，得到白色固體，然后溶解在二氯甲烷中。將溶液冷卻至0攝氏度并加入冰，隨后加入sat.NaHCO3。分離有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮以提供粗白色固體，然后通過閃蒸柱色譜(1∶9EtOAc∶己烷)而純化，得到4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶(78mg，73％)作為白色固體。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶在rt.下，向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]-嘧啶(80mg，0.28mmol，1eq)在57％水(2ml)HI溶液中的懸浮液加入NaI(206mg，1.41mmol，5eq)。將反應混合物在r.t.下攪拌過夜并隨后倒到冰上。產物用氯仿提取和水層用NaHCO3中和和用更多的氯仿進一步提取。將有機層合并用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮以提供粗殘余物2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶，不進一步純化。嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有結構式(39)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶(106mg，0.28mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(3mg，0.01mmol，0.05eq)，隨后加入BINAP(13mg，0.02mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(40mg，0.37mmol，1.3eq)和Cs2CO3(138mg，0.42mmol，1.5eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱15h。將反應混合物冷卻至r.t.和濾過Celite并將粗品通過閃蒸柱色譜(4∶1/乙酸乙酯∶己烷-100％乙酸乙酯)而純化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有結構式(39)的化合物(30mg，30％)作為白色固體。
方案W(具有結構式(44)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]-嘧啶(320mg，1.13mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(13mg，0.06mmol，0.05eq)，隨后加入BINAP(53mg，0.08mmol，0.075eq)，4-氨基-煙酸乙基酯(206mg，1.24mmol，1.1eq)和Cs2CO3(478mg，1.46mmol，1.5eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱15h。將反應混合物冷卻至r.t.和濾過Celite并將粗品通過閃蒸柱色譜(在CHCl3中的0-5％MeOH)而純化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯(100mg，21％)作為白色固體。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯(100mg，0.24mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的懸浮液加入1NNaOH(aq)溶液(290μl，0.29mmol，1.2eq)并將反應混合物回流5h。將溶液冷卻至r.t.和真空濃縮。將水(20ml)加入粗品并將水層酸化至pH4。將固體過濾，用水(2×5ml)洗滌和連夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫iur并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸(88mg，94％)作為膏著色固體。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-N-甲基煙酰胺，具有結構式(44)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-煙酸(75mg，0.19mmol，1eq)在DMF(2ml)中的懸浮液加入三乙基-胺(30μl，0.21mmol，1.1eq)，隨后加入甲基胺(1.17ml，3.89mmol，在THF中的2M溶液，20eq)。向o懸浮液中滴加PyBrOP(100mg，0.21mmol，1.2eq)在DMF(1ml)中的溶液。反應混合物在室溫下攪拌16h。反應真空濃縮和將殘余物用醚(2×20ml)研磨。粗將殘余物通過閃蒸柱色譜(在CHCl3中的5％MeOH)而純化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氫呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-N-甲基煙酰胺，即具有結構式(44)的化合物(20mg，26％)作為白色固體。
方案X(具有結構式(43)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-醇向2-氟-5-氯苯并瞇(1.95g，11.27mmol，1.1eq)在EtOH(20ml)中的溶液加入2-甲基-5-氧代環(huán)戊烷羧酸乙基酯(根據(jù)Wang，C；Gu，X.；Yu，M.S.；Curran，D.P.四面體，1998，29，8355-8370制備；1.60g，10.26mmol，1eq)在乙醇(5ml)中的溶液。反應混合物在80攝氏度下加熱過夜。將反應混合物冷卻至r.t.并將溶劑在真空中去除，得到粗殘余物，然后通過從熱乙酸乙酯中重結晶，得到2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-醇(1.0g，35％)作為白色結晶固體和濾液通過閃蒸柱色譜而進一步純化，得到另外850mg 2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-醇。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶將2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊-嘧啶-4-醇(200mg，0.72mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的懸浮液在回流下攪拌1h。將溶液隨后冷卻至室溫和在減壓下濃縮，得到白色固體。殘余POCl3通過與氯仿共沸而去除。在r.t.下，向粗亞氨基氯在57％水(5ml)HI溶液中的懸浮液加入NaI(540mg，3.60mmol，5eq)。將反應混合物在r.t.下攪拌過夜并隨后倒到冰上。產物用氯仿提取和水層用NaHCO3中和和用氯仿進一步提取。將有機層合并用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾和真空濃縮以提供粗殘余物2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶，不進一步純化。-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有結構式(43)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)-五嘧啶(275mg，0.71mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(8mg，0.04mmol，0.05eq)，隨后加入BINAP(33mg，0.05mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(84mg，0.78mmol，1.1eq)和Cs2CO3(347mg，1.06mmol，1.5eq)。反應混合物在80攝氏度下加熱15h。將反應混合物冷卻至r.t.和濾過Celite并將粗品通過閃蒸柱色譜(1∶1/乙酸乙酯∶己烷-100％乙酸乙酯)而純化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有結構式(43)的化合物(250mg，96％)。
方案Y(具有結構式(48)，(49)，(47)，(46)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯，化合物具有結構式(48)按照用于合成[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有結構式(43)的化合物的一般反應步驟，4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯，具有結構式(48)的化合物，以68％產率分離。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-煙酸，具有結構式(49)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)-五嘧啶-4-基氨基]-煙酸乙基酯(180mg，0.42mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的懸浮液加入1NNaOH(aq)溶液(634μl，0.63mmol，1.5eq)和反應混合物加熱回流1h。將溶液冷卻至r.t.和真空濃縮。將水(20ml)加入粗品和水層酸化至pH4。將固體過濾，用水(2×5ml)洗滌和連夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-煙酸，具有結構式(49)的化合物(160mg，95％)作為白色固體。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-N-甲基-煙酰胺，具有結構式(47)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)-五嘧啶-4-基氨基]-煙酸(20mg，0.05mmol，1eq)在DMF(2ml)中的懸浮液加入三乙基胺(8μl，0.05mmol，1.1eq)，隨后加入甲基胺(250μl，3.89mmol，在THF中的2M溶液，10eq)。向懸浮液中滴加PyBOP(40mg，0.08mmol，1.5eq)在DMF(1ml)中的溶液。反應混合物在室溫下攪拌16h。反應真空濃縮和將殘余物用醚(2×20ml)研磨。粗將殘余物通過閃蒸柱色譜(100％乙酸乙酯)而純化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊嘧啶-4-基氨基]-N-甲基-煙酰胺，即具有結構式(47)的化合物，(12mg，58％)作為白色固體。
具有結構式(46)的化合物的化合物通過用于合成具有結構式(47)的化合物所述的方法采用氨替代甲基胺而制備。
具有結構式(1)的化合物可在本領域已知的功能基團轉化反應(包括以下描述的那些)之后相互轉化。用于制備具有結構式(1)的化合物的許多中間體是已知的化合物或是已知的化合物的類似物(可按照熟練人員可容易取得的本領域已知的方法改性而制備)。
具有結構式(1)的化合物可按照本領域已知的用于將三價氮轉化成其N-氧化物形式的步驟而被轉化成相應N-氧化物形式。所述N-氧化反應可一般通過將具有結構式(1)的起始原料與合適的有機或無機過氧化物反應而進行。合適的無機過氧化物包括，例如，過氧化氫，堿金屬或堿土金屬過氧化物，如過氧化鈉，過氧化鉀；合適的有機過氧化物可包括過氧酸如，例如，苯過氧酸或鹵代取代的苯過氧酸，如3-氯苯過氧酸，過氧鏈烷酸，如過氧乙酸，氫過氧化烷基，如氫過氧化叔丁基。合適的溶劑是，例如，水，低級醇，如乙醇和類似物，烴，如甲苯，酮，如2-丁酮，鹵化烴，如二氯甲烷，和這些溶劑的混合物。
具有結構式(1)的化合物的純立體化學異構體形式可通過應用本領域已知的步驟而得到。非對映體可通過物理方法如選擇性結晶和色譜技術，如，逆流分布，液體色譜和類似方法而分離。具有結構式(1)的化合物可作為對映異構體的外消旋混合物而得到，所述對映異構體可按照本領域已知的拆分步驟相互分離。充分堿性或酸性的具有結構式(1)的外消旋化合物可通過與合適的手性酸，相應手性堿反應而被轉化成相應非對映體鹽形式。所述非對映體鹽形式隨后，例如，通過選擇性或分級結晶而分離和對映異構體通過堿或酸而從中釋放。分離具有結構式(1)的化合物的對映異構體形式的一種替代方法包括液體色譜，尤其是使用手性固定相的液體色譜。所述純立體化學異構體形式也可衍生自合適的起始原料的相應純立體化學異構體形式，前提是反應立體特異地出現(xiàn)。優(yōu)選，如果需要特定立體異構體，所述化合物可通過立體特異性制備方法而合成。這些方法可有利地采用對映異構體純起始原料。
可用于本發(fā)明的化合物和其相關化合物的給藥方式和配制取決于癥狀的性質，癥狀的嚴重性，所要治療的特定患者，和醫(yī)師的判斷；配方取決于給藥模式。本發(fā)明化合物或其任何子組可被轉化成各種藥物形式用于給藥目的。作為合適的組合物，可提及常用于全身給藥的所有的組合物。
為了制備本發(fā)明藥物組合物，治療有效量的特殊化合物，視需要加成鹽形式或金屬配合物，作為活性成分與藥物可接受載體緊密混合，所述載體可以是各種各樣的形式，取決于用于給藥的制劑的形式。本文中的治療有效量是針對感染患者或處于感染危險的患者足以預防性性地作用，穩(wěn)定或減少病毒感染，和尤其是HCV病毒感染，或防止疾病發(fā)展成慢性肝炎，肝纖維化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窩癌)和類似疾病的量。
藥物組合物最好是尤其適用于口服，直腸，經(jīng)皮，或通過不經(jīng)腸道注射給藥的單元劑型。在制備口服劑量形式的組合物時，可以使用任何常規(guī)的藥物介質如，例如，水，二醇，油，醇和類似物，在口服液體制劑如懸浮液，糖漿，酏劑，乳液和溶液的情況下；或固體載體如淀粉，糖，白陶土，潤滑劑，粘結劑，崩解劑和類似物，在粉末，丸劑，膠囊，和片劑的情況下。由于其容易給藥，片劑和膠囊代表最有利的口服劑量單元形式，其中顯然采用固體藥物載體。對于不經(jīng)腸道組合物，載體通常包含至少占大部分的無菌水，但可以包括其它成分，例如，以幫助溶解。例如可制備可注射溶液，其中載體包含鹽水溶液，葡萄糖溶液或鹽水和葡萄糖溶液的混合物。也可制備可注射懸浮液，其中可以采用合適的液體載體，懸浮劑和類似物。還包括預期在使用之前不久轉化成液體形式制劑的固體形式制劑。在適用于經(jīng)皮給藥的組合物中，載體視需要包含滲透增加劑和/或合適的潤濕劑，視需要與較小比例的任何性質的合適的添加劑相結合，所述添加劑不帶來對皮膚的明顯有害影響。
因為本發(fā)明化合物是小分子，它們適宜地通過口服給藥而給藥，其中將它們與合適的藥物賦形劑配混以提供片劑，膠囊，糖漿，和類似物。適用于口服給藥的配方也可包括次要組分如緩沖劑，香味劑和類似物。通常，活性成分在配方中的量是總配方的5％-95％，但可根據(jù)載體而允許寬的偏差。合適的載體包括蔗糖，果膠，硬脂酸鎂，乳糖，花生油，橄欖油，水，和類似物。
可用于本發(fā)明的化合物也可通過栓劑或其它透膜載體而給藥。通常，這些配方包括有助于該化合物通過粘膜的賦形劑如藥物可接受洗滌劑。
該化合物也可針對局部癥狀如牛皮癬，或在預期滲透皮膚的配方中局部地給藥。這些包括可通過已知的方法而配制的洗劑，膏，軟膏和類似物。該化合物也可通過注射而給藥，包括靜脈內，肌內，皮下或腹膜內注射。用于這些用途的典型的配方是在等滲載體如Hank′s溶液或Ringer′s溶液中的液體配方。
本發(fā)明化合物也可通過口服吸入或吸入利用本領域用于如此給藥的方法和配方而給藥。因此，一般來說本發(fā)明化合物可以溶液，懸浮液或干粉末的形式向肺給藥，其中溶液是優(yōu)選的。開發(fā)通過口服吸入或吸入用于傳輸溶液，懸浮液或干粉末的任何體系適用于本化合物的給藥。
因此，本發(fā)明還提供了一種適用于通過口而吸入或吸入給藥的藥物組合物，包含具有結構式(1)的化合物和藥物可接受載體。優(yōu)選，本發(fā)明化合物通過吸入噴霧或煙霧化劑量的溶液而給藥。
可選的配方包括鼻噴劑，脂質體配方，緩釋配方，和類似物，這是本領域已知的。
可以使用任何合適的配方。對本領域已知的配方的概述在Remington′s藥物科學(最新版，Mack出版公司，Easton，PA)中找到。對該手冊的參考是本領域常規(guī)的。
尤其有利地配制單元劑型的前述藥物組合物以便于給藥和劑量均勻性。這里所用的單元劑型是指適用作單元劑量的物理上離散的單元，每一單元包含預定量的計算用于產生所需治療作用的活性成分以及所需的藥物載體。這些單元劑型的例子是片劑(包括核或涂覆片劑)，膠囊，丸劑，栓劑，粉末小包，晶片，可注射溶液或懸浮液和類似物，和其分開的多倍形式。
本發(fā)明化合物的劑量取決于在許多對不同病人各異的因素。但據(jù)信，每日口服劑量一般采用0.001-100mg/kg總體重，優(yōu)選0.01-50mg/kg和更優(yōu)選約0.01mg/kg-10mg/kg。但劑量服法根據(jù)所要治療的癥狀和醫(yī)師的判斷而變化。
一般預期，抗病毒有效的每日量是0.01mg/kg至500mg/kg體重，更優(yōu)選0.1mg/kg至50mg/kg體重?？珊线m地將所需劑量作為兩個，三個，四個或更多個子劑量在整天的合適間隔內給藥。所述子劑量可被配制成單元劑型，例如，包含1至1000mg，和尤其是5至200mg活性成分/單元劑型。
給藥的準確劑量和頻率取決于所用的具有結構式(I)的特定化合物，所要治療的特定癥狀，所要治療的癥狀的嚴重性，特定病人的年齡，體重，性別，病癥程度和全身性脈象以及該個人可能正在攝入的其它藥物，這是本領域熟練技術人員熟知的。另外，所述有效的每日量顯然可增減，這取決于所要治療的患者的響應和/或取決于對本發(fā)明化合物開處方的醫(yī)師的評估。以上提及的有效的每日量因此僅是指導性的。
從實施例顯然看出，由于其有利的抗病毒性能，本發(fā)明化合物可用于治療被HCV感染的個體和用于這些個體的預防。一般來說，本發(fā)明化合物可用于治療被黃熱病毒感染的恒溫動物?？捎帽景l(fā)明化合物治療的癥狀，尤其與HCV和其它致病黃熱病毒，如黃熱病，登革熱(1-4型)，St.Louis大腦炎，列性乙型腦炎，墨累山谷腦炎，West Nile病毒和庫寧病毒有關的癥狀。與HCV有關的癥狀包括導致肝硬化，晚期肝疾病，和HCC的漸進性肝纖維化，炎癥和壞死；和其它致病黃熱病毒的癥狀，包括黃熱病，登革熱，出血發(fā)熱和腦炎。
本發(fā)明化合物或其任何子組可因此用作針對上述癥狀的醫(yī)學。所述作為醫(yī)學的用途或治療方法包括向HCV-感染的患者全身供給有效地抗擊與HCV有關的癥狀和其它致病黃熱病毒的量。因此，本發(fā)明化合物可用于制造可用于治療與HCV和其它致病黃熱病毒有關的癥狀的藥物。
在實施方案，本發(fā)明涉及本文所定義的具有結構式(1)的化合物或其任何子組在制造藥物中的用途，所述藥物針對哺乳動物用于治療或對抗與HCV感染有關的感染或疾病。本發(fā)明還涉及一種治療黃熱病毒感染，或與黃熱病毒感染有關的疾病的方法，包括向所需的哺乳動物供給有效量的本文所定義的具有結構式(1)的化合物或其子組。
在另一實施方案中，本發(fā)明涉及本文所定義的具有結構式(1)的化合物或其任何子組用于制造藥物的用途，所述藥物可用于抑制被黃熱病毒，尤其是HCV感染的哺乳動物的HCV活性。
在另一實施方案中，本發(fā)明涉及本文所定義的具有結構式(1)的化合物或其任何子組用于制造藥物的用途，所述藥物可用于抑制被黃熱病毒，尤其是HCV感染的哺乳動物的HCV活性，其中所述HCV在其復制中被抑制。
應該注意，具有結構式(1)的化合物可作為單個活性成分，或作為具有該結構式的幾種實施方案的混合物而給藥。本發(fā)明化合物可作為單個治療劑或與其它治療劑結合使用。
因此，以前已知的抗HCV化合物，如，例如，干擾素-α(IFN-α)，聚乙二醇化干擾素-α和/或利巴韋林，和本發(fā)明化合物的組合可作為醫(yī)學用于組合治療。術語″組合治療″涉及一種包含必須有的(a)a本發(fā)明化合物，和(b)視需要另一抗HCV化合物的產品，作為同時，分開或順序用于治療HCV感染，尤其是，用于治療1型HCV感染的組合制劑。因此，為了對抗或治療HCV感染，本發(fā)明化合物可與例如，干擾素-α(IFN-α)，聚乙二醇化干擾素-α和/或利巴韋林，以及基于靶向HCV表位的抗體，小干擾性RNA(SiRNA)，核糖酶，DNA酶，反義RNA，例如NS3蛋白酶的小分子拮抗劑，NS3解螺旋酶和NS5B聚合酶的治療劑相結合而共給藥。
因此，本發(fā)明涉及以上定義的具有結構式(1)的化合物或其任何子組用于制造藥物的用途，所述藥物可用于抑制被HCV病毒感染的哺乳動物的HCV活性，其中所述藥物用于組合治療，所述組合治療優(yōu)選包含具有結構式(1)的化合物和(聚乙二醇化)IFN-α和/或利巴韋林，和可能抗HIV化合物。
所屬技術領域的專業(yè)人員可以理解，具有結構式(1)的化合物可在基于Lohmann等人(1999)Science 285110-113的細胞HCV復制子體系中測試，其中包括由Krieger等人(2001)病毒學雜志754614-4624(在此作為參考并入本發(fā)明)所述的進一步改進，這進一步在實施例部分例證。盡管不是用于HCV的完全感染型號，該型號被廣泛接受為目前可得到的最可靠和有效的自主HCV RNA復制模型。在該細胞型號中具有抗HCV活性的化合物被認為是用于進一步開發(fā)對哺乳動物HCV感染的治療的代表?？梢岳斫?，重要的是將具體地影響HCV功能的化合物區(qū)別于在HCV復制子型號中產生細胞毒性或細胞靜電作用，和因此造成HCVRNA或鍵接通訊酶濃度下降的那些。本領域已知用于評估細胞細胞毒性的試驗，例如基于線粒體酶的活性使用熒光氧化還原染料如刃天青。另外，細胞反篩可用于評估鍵接報道基因活性，如熒光蟲熒光素酶的非選擇性抑制。合適的細胞類型可通過穩(wěn)定的轉染而配有其表達取決于基本活性基因啟動基因的螢花素酶報道基因，和這些細胞可用作反篩以消除非選擇性抑制劑。
以上和下提及的所有的專利，專利申請和文章在此引以參考。
實施例以下實施例用于說明本發(fā)明而非限定于此。
實施例1具有結構式(1)的化合物在HCV復制子分析中的活性穩(wěn)定的復制子細胞通訊子分析在細胞分析中，研究本發(fā)明化合物在抑制HCV RNA復制中的活性。該分析表明，本化合物具有針對在細胞培養(yǎng)物中起作用的HCV復制子的活性。該蜂窩分析基于在多目標篩選技術中的雙順反子表達構造，例如描述于Lohmann等人(1999)Science vol.285 pp.110-113并進行改進Krieger等人(2001)病毒學雜志754614-4624.實質上，該方法如下。
該分析采用穩(wěn)定地轉染的細胞系Huh-7 luc/neo(以下稱作Huh-Luc)。該細胞系隱藏一種編碼雙順反子表達結構的RNA，包含由腦心肌炎病毒(EMCV)的內核多糖體進入部位(IRES)轉譯的Ib型HCV的野生型NS3-NS5B區(qū)域，其前方是通訊部分(FfL-螢花素酶)，和可選標示部分(neoR，新霉素磷轉移酶)。該構造以來自Ib型HCV的5′和3′NTRs(非翻譯區(qū)域)為邊界。復制子細胞在G418(neoR)存在下的連續(xù)培養(yǎng)取決于HCVRNA的復制。自動復制至高水平，編碼尤其螢蟲素酶的表達HCV RNA的穩(wěn)定地轉染的復制子細胞用于篩選抗病毒化合物。
細胞分析實驗方法將復制子細胞在以各種濃度加入的試驗和對比化合物的存在下置于384井板中。在培養(yǎng)3天之后，HCV復制通過分析螢蟲素酶活性(使用標準螢蟲素酶分析底物和試劑和Perkin Elmer ViewLuxTMultraHTS微板成像儀)而測定。對比培養(yǎng)物中的復制子細胞在不存在任何抑制劑的情況下具有高螢蟲素酶表達。該化合物對螢蟲素酶活性的抑制性活性在Huh-Luc細胞上監(jiān)控，得到每一試驗化合物的劑量-響應曲線。隨后計算EC50值，該值表示該化合物降低所測螢蟲素酶活性，或更多具體地，基因鍵接HCV復制子RNA的復制能力的50％水平所需的量。在下表中，欄1提供了標識號，欄2給出了在上述Huh7-Luc分析中的結果。

權利要求
1.下式化合物 或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6是視需要取代的飽和，不飽和或芳族環(huán)包含4-7個環(huán)原子，其中X是選自N，O，或S的原子；n是0，1，2，或3；每一Ar1和Ar2獨立地是視需要取代的芳族部分或視需要取代的雜芳族部分，其中所述雜芳族部分包含一個或多個O，S，和/或N，和這些芳族或雜芳族部分包含5-12個環(huán)原子；R1是H，或視需要取代的烷基(1-10C)，鏈烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)；前提是如果所述嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6包含6個環(huán)原子，那么它不是芳族環(huán)；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性。
2.下式化合物 或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6是包含5或6個環(huán)原子的視需要取代的飽和，不飽和或芳族環(huán)，其中X是選自N或O的原子；n是0，1，或2；R1是H，或視需要取代的烷基(1-6C)；每一R3獨立地是氫，鹵代，氰基，硝基，烷基(1-6C)，聚鹵代烷基(1-6C)，-COR，-CONR2，-COOR，-OR，-OCOR，-NR2，或-NRCOR；每一R4獨立地是氫，鹵代，氰基，硝基，聚鹵代烷基(1-6C)，或烷基(1-6C)；其中每一R獨立地是氫，羥基，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，環(huán)烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)視需要用一個或兩個選自羥基，環(huán)烷基(3-7C)，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是包含1至2個分別獨立地選自氮，氧和硫的雜原子的5或6元飽和，部分不飽和或完全不飽和雜環(huán)環(huán)，和其中基團Het總體上可視需要用一個，兩個或三個分別獨立地選自鹵代，烷基(1-6C)，羥基，和氧代的取代基取代；前提是如果所述嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6包含6個環(huán)原子，那么它不是芳族環(huán)；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性，防止或治療與HCV有關的癥狀。
3.下式化合物 或其藥物可接受鹽用于制造藥物的用途；其中嘧啶環(huán)的稠環(huán)橋接位5和6與嘧啶環(huán)一起形成選自以下的基團 其中任何這些基團可視需要用一個或兩個選自烷基(1-6C)，苯基，和芐基的取代基取代；R3是氫，鹵代，烷基(1-6C)，-CF3，-COR，-CONR2，或-COOR；每一R4aR4b獨立地是氫或鹵代；其中每一R獨立地是氫，羥基，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，環(huán)烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)，視需要用一個或兩個選自羥基，環(huán)烷基(3-7C)，氨基，單-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是選自以下的基團 其中基團Het可視需要用一個或兩個分別獨立地選自烷基(1-6C)，和氧代的取代基取代；所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于抑制HCV活性，防止或治療與HCV有關的癥狀。
4.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中化合物是
5.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中化合物是
6.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中化合物是
7.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中化合物是
8.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中化合物是
9.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中化合物是
10.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中化合物是
11.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中化合物是
12.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中該藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于防止趨向慢性肝炎，肝纖維化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窩癌)和類似疾病的疾病發(fā)展。
13.根據(jù)任何一項權利要求1至3的用途，其中所述藥物針對被HCV感染的哺乳動物可用于治療慢性肝炎，肝纖維化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窩癌)和類似疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及雙環(huán)嘧啶作為HCV復制抑制劑的用途以及其在用于治療或對抗HCV感染的藥物組合物中的用途。另外，本發(fā)明涉及用于制備這些藥物組合物的方法。本發(fā)明還涉及本發(fā)明雙環(huán)嘧啶與其它抗HCV劑的組合。
文檔編號A61P1/00GK101031304SQ200580033106
公開日2007年9月5日 申請日期2005年9月29日 優(yōu)先權日2004年9月30日
發(fā)明者K·A·西門, T·-I·林, O·蘭茨, D·L·N·G·蘇勒羅克斯, P·J·-M·B·拉博伊森 申請人:泰博特克藥品有限公司