專利名稱：與5－fu和5－fu前藥組合施用dpd抑制劑的方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明總體涉及癌癥治療，更具體地講，涉及使用DPD抑制劑聯(lián)合5-FU和/或5-FU前藥的癌癥治療。
相關(guān)技術(shù)的說明5-氟尿嘧啶(5-FU)業(yè)已在臨床上被用于治療癌癥患者的實(shí)體瘤超過30年時(shí)間(Ansfield等，Cancer 3934-40，1977；Grem等，Cancer Treat Rep 711249-1264，1987；Chabner等，Cancer，Principles and Practice of Oncology，2ndEd，pp 287-328Philadelphia，PAJ B Lippincott Co，1985)。5-FU必須通過代謝轉(zhuǎn)化成偽尿苷核苷酸(例如，F(xiàn)UMP，F(xiàn)UDP，F(xiàn)UTP)和偽脫氧尿苷核苷酸(例如，F(xiàn)dUMP，F(xiàn)dUDP，F(xiàn)dUTP)而被激活，所述偽核苷酸能干擾DNA合成和RNA功能(參見Meyers，Pharmacol Rev，331-15，1981；Dasher等，Pharmac Ther 48189-222，1990)。由于5-FU與它的天然對應(yīng)物尿嘧啶的不同僅在于5位的氟取代，它在癌癥患者體內(nèi)能夠容易地被激活。不幸的是，它與尿嘧啶的結(jié)構(gòu)相似性也導(dǎo)致它被快速和廣泛轉(zhuǎn)化成沒有抗腫瘤活性的降解產(chǎn)物。所述代謝過程被稱作失活。5-FU迅速地被酶二氫嘧啶脫氫酶(DPDEC 1312，尿嘧啶還原酶)失活(Meyers，Pharmacol Rev，331-15，1981；Dasher等，PharmacTher 48189-222，1990)。因此，5-FU用于治療癌癥的抗腫瘤功效取決于代謝轉(zhuǎn)化成抗腫瘤核苷酸(激活)和代謝轉(zhuǎn)化成無用的代謝物(失活)之間的微妙的平衡。
另外，由于5-FU的代謝失活產(chǎn)生了若干臨床問題。首先，由于DPD水平在個(gè)體之間不同(Fleming等，Cancer Res 522899-2902，1992；Grem等，Cancer Chemother Pharmacol 40117-125，1997)以及在一天中在個(gè)體體內(nèi)波動(dòng)(Grem等，Cancer ChemotherPharmacol 40117-125，1997；Harris等，Cancer Res 50197-201，1990；Petit等，Cancer Res 481676-1679，1988)，由給予的劑量產(chǎn)生的5-FU的系統(tǒng)水平有很大變化，并因此使得功效和毒性高度不可預(yù)測。在極端情況下，當(dāng)用‘標(biāo)準(zhǔn)’治療劑量的5-FU治療時(shí)，DPD遺傳缺陷型患者會(huì)經(jīng)歷嚴(yán)重的且有時(shí)候是致命的毒性(參見Morrison等，Oncol Nurs Forum 2483-88，1997綜述)。其次，胃腸道DPD的可變水平(Ho等，Anticancer Res 6781-784，1986；Naguib等，Cancer Res 455405-5412，1985；Spector等，Biochem Pharmacol462243-2248，1993)導(dǎo)致了口服5-FU的高度變化的吸收(Christophidis等，Clin Pharmacokinetics 3330-336，1978；Cohen等，Cancer Chemother Rep 58723-731，1974；Finch等，Br J Clin Pharmacol 7613-617，1979)，并因此可導(dǎo)致藥物的不可預(yù)測的血漿水平，并且產(chǎn)生不希望的毒性或不充分的功效。第三，含有高水平DPD的腫瘤不太可能對5-FU治療產(chǎn)生反應(yīng)(Etienne等，J Clin Oncol 131663-1670，1995；Fischel等，Clin Cancer Res1991-996，1995)。最后，5-FU的降解產(chǎn)物可能產(chǎn)生神經(jīng)毒性(Okeda等，Acta Neuropathol 8166-73，1990；Koenig等Arch Neurol 23155-160，1970)，心臟毒性(等，Lancet 337560，1991；Lemaire等，Br J Cancer 66119-127，1992)，手掌-足底赤型感覺遲鈍(手-足綜合征)(Hohneker，Oncology 1252-56，1998)，和GI毒性(Spector等，Cancer Res 551239-1241，1995)，并且表現(xiàn)出干擾抗腫瘤活性(Spector等，Cancer Res 551239-1241，1995；Cao，等，Pharmacol 59953-960，2000)。
DPD是普遍存在的酶，它是5-FU降解(失活)的第1個(gè)和限速的步驟。研究表明，抑制DPD，能延長5-FU在血漿中的半衰期。業(yè)已研究了若干種DPD抑制劑，包括不可逆地使DPD失活的抑制劑，以及可逆地抑制DPD的抑制劑。
5-乙炔基尿嘧啶，又被稱作恩尿嘧啶，是DPD抑制劑的一種例子，它是DPD的不可逆的滅活劑，能減少或消除5-FU的代謝失活(綜述見Spector等，Drugs of The Future 19565-571，1994；Paff等，Invest.New Drugs18，365-371(2000))。隨著恩尿嘧啶和5-FU之間的結(jié)構(gòu)相似性，恩尿嘧啶是DPD的底物。由于DPD試圖降解恩尿嘧啶，后者被轉(zhuǎn)化成高度反應(yīng)性的化合物，它不可逆地與DPD結(jié)合，并因此使所述酶失活。因此，在存在極低量恩尿嘧啶的情況下，DPD被破壞，并且不再能夠使5-FU失活。只是由于經(jīng)幾天時(shí)間DPD酶從頭合成才使得活性DPD重新出現(xiàn)在所述患者體內(nèi)。
恩尿嘧啶業(yè)已在癌癥患者的I期臨床試驗(yàn)中測試(綜述見Levin等，Invest New Drugs 18383-90，2000；Baker等，J Clin Oncol18915-926 2000；Schilsky等，J Clin Oncol 41450-7，1998)。它非常有效地消除DPD活性，而不導(dǎo)致毒性。0.74mg/m2的劑量(總共大約1mg)長時(shí)間消除所有DPD的90％以上。實(shí)際上，在一劑恩尿嘧啶之后24小時(shí)，DPD的水平僅為給藥前水平的3％。通過施用一個(gè)劑量的恩尿嘧啶，5-FU的消除半衰期從大約10分鐘增加到3.5小時(shí)。劑量為3.7mg/m2的恩尿嘧啶將5-FU的半衰期延長到4.5小時(shí)。更高的劑量不增加明顯的益處。
恩尿嘧啶也已在II期和III期臨床試驗(yàn)中經(jīng)口施用(綜述見Levin等，Invest New Drugs 18383-90，2000；Schilsky等，J ClinOncol201519-26，2002)。在上述試驗(yàn)中采用了兩種給藥的方案。在′5-日方案′中，恩尿嘧啶是以每天50mg的固定劑量施用的，在第1天到第7天施用。5-FU是以大約20mg/m2在第2天至第6天在給藥恩尿嘧啶之后給藥的。在′28-日方案′中，恩尿嘧啶和5-FU是以10∶1恩尿嘧啶5-FU b.i.d.(1天2次)的固定比例共同施用28天。5-FU的劑量大約為1mg/m2。恩尿嘧啶消除所述5-FU-相關(guān)的手足綜合征毒性，使得5-FU能夠安全地口服，并且產(chǎn)生高度可預(yù)測的5-FU血漿水平。不過，不幸的是，所述方案的抗腫瘤活性是令人失望的。在將28-日恩尿嘧啶方案用于結(jié)直腸癌治療的兩項(xiàng)多中心III期研究中，接受恩尿嘧啶和5-FU的患者傾向于比用標(biāo)準(zhǔn)5-FU方案而不使用恩尿嘧啶治療的患者具有更低的抗腫瘤活性(Schilsky等，J Clin Oncol201519-26，2002)。
因此，本領(lǐng)域仍然存在對鑒定與5-FU和5-FU前藥組合使用DPD抑制劑的最佳給藥和施用方案的重要的和尚未滿足的需求，以便使5-FU和5-FU前藥的抗腫瘤功效和治療指數(shù)最大化，以改善給藥的可預(yù)測性，并且使得5-FU和5-FU前藥能夠通過口服有效地給藥。本發(fā)明滿足了這些需求，并且提供了其他相關(guān)優(yōu)點(diǎn)。
發(fā)明概述本發(fā)明總體涉及與5-FU和5-FU前藥組合施用DPD抑制劑如恩尿嘧啶的改進(jìn)的方法。因此，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了治療患者癌癥的方法，包括首先施用DPD抑制劑，它能大體上消除這種酶，然后施用5-FU或5-FU前藥，其中，所述5-FU或5-FU前藥是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU或5-FU前藥在患者體內(nèi)的存在量明顯超過所述游離DPD抑制劑。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的一種實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥是在施用DPD抑制劑之后至少大約4小時(shí)，至少大約6小時(shí)，至少大約8小時(shí)，至少大約10小時(shí)，至少大約12小時(shí)，至少大約14小時(shí)，至少大約24小時(shí)，或至少大約36小時(shí)施用的。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥是在施用DPD抑制劑之后大約4-72小時(shí)，4-36小時(shí)，4-24小時(shí)，4-14小時(shí)，6-14小時(shí)或8-14小時(shí)施用的。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥是在這樣的時(shí)間施用的從施用所述DPD抑制劑起，業(yè)已經(jīng)過了所述DPD抑制劑的至少大約0.1-4個(gè)消除半衰期，1-4個(gè)消除半衰期，2-4個(gè)消除半衰期或3-4個(gè)消除半衰期。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑的施用劑量足以將患者體內(nèi)的DPD活性降低到低于患者體內(nèi)基線DPD活性的大約10％，低于大約5％，低于大約3％或低于大約1％。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU或5-FU前藥在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少大約2倍，至少大約3倍，至少大約5倍或至少大約100倍。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是不可逆的DPD抑制劑。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是可逆的DPD抑制劑。在所述實(shí)施方案中，應(yīng)當(dāng)理解的是，某些優(yōu)選的可逆的DPD抑制劑包括緊密結(jié)合的抑制劑，它從DPD上解離的速度比多余的抑制劑從體內(nèi)消除的速度慢，因此在施用5-FU或所述5-FU前藥時(shí)不會(huì)以明顯過量存在。其他優(yōu)選的抑制劑包括能抑制DPD活性，但不能顯著抑制能激活氟尿嘧啶的其他酶(如尿苷磷酸化酶(UPase)，乳清酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶(OPRTase)和胸苷磷酸化酶(TP))的抑制劑。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥選自由以下化合物和它們的5′-酯、包括磷酸酯組成的組5-氟尿苷，5-氟胞苷，5-氟-2-脫氧尿苷，5-氟-2-脫氧胞苷，和5-氟阿糖尿嘧啶。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥選自下列一組5′-脫氧-4′，5-氟尿苷，5′-脫氧-5-氟尿苷，1-(2-四氫呋喃基)-5-氟尿嘧啶，1-C1-8烷基氨甲?；?5-氟尿嘧啶衍生物，1-(2-四氫呋喃基)-5-氟尿嘧啶，5′-脫氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]-胞苷(卡培他濱)，或能在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成5-FU的化合物。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶或其前藥。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，且其施用劑量為0.8-15，2-15，5-15或2.5-5mg/m2。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU，且其施用劑量為0.5-80，0.5-40，10-80，10-60，10-30或20-60mg/m2。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，所述恩尿嘧啶和5-FU或5-FU前藥的劑量比例為1∶3-1∶20，1∶5-1∶15，或1∶8-1∶12。
在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，首先以大約2.5-5mg/m2的劑量施用恩尿嘧啶，至少大約10-14小時(shí)后施用劑量為大約15-30mg/m2的5-FU或5-FU前藥或施用劑量為大約5-100mg/m2的卡培他濱。可選地，可在之后施用額外劑量的5-FU或卡培他濱，額外給藥或不給藥恩尿嘧啶。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是卡培他濱。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU或卡培他濱，并且，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約0.8-15，2.5-15，5-15或2.5-5mg/m2。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-5mg/m2，而所述5-FU的施用劑量為大約0.5-40mg/m2，取決于使用的給藥方案。
一種示例方案，例如，1天2次(b.i.d.)持續(xù)28天(28-日)方案，采用的5-FU劑量為約0.5-1.5mg/m2。另一種示例方案，例如，1天1次持續(xù)5天(5-日)方案，采用的5-FU劑量為大約10-60mg/m2。在更具體的實(shí)施方案中，5-FU劑量為大約10-30mg/m2。在另一種實(shí)施方案中，5-FU劑量為大約20-60mg/m2。
另一種示例方案，例如，1周1次(每周)方案，可采用的5-FU的劑量為大約10-80mg/m2。在更具體的實(shí)施方案中，5-FU的施用劑量為大約15-40或10-30mg/m2。在另一種實(shí)施方案中，5-FU的施用劑量為大約30-80mg/m2。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是卡培他濱，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約0.8-15，大約2-15，大約5-15或大約2.5-5mg/m2，所述卡培他濱的施用劑量為大約0.8-200mg/m2。在更具體的實(shí)施方案中，所述卡培他濱的施用劑量為大約0.8-10mg/m2或1.3-4mg/m2(例如，對某些示例性的延長的1天2次的每日方案而言)。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑包括5-取代的尿嘧啶類似物或其前藥。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑包括在5位由以下基團(tuán)取代的尿嘧啶類似物鹵原子，C2-4烯基，被鹵素取代的C2-4烯基，C2-6炔基，被鹵素取代的C2-6炔基，氰基或被鹵素取代的C1-4烷基。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑包括選自下列一組的尿嘧啶類似物恩尿嘧啶，5-丙炔基尿嘧啶，5-氰基尿嘧啶，5-丙炔基尿嘧啶，5-溴乙炔基尿嘧啶，5-(1-氯乙烯基)尿嘧啶，5-碘尿嘧啶，5-溴乙烯基尿嘧啶，(E)-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，5-己-1-炔基尿嘧啶，5-乙烯基尿嘧啶，5-三氟尿嘧啶，5-溴尿嘧啶，和5-(2-溴-1-氯乙烯基)尿嘧啶。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑選自下列一組5-(phenylselenenyl(苯硒基))尿嘧啶(PSU)，5-(苯硫基)尿嘧啶(PTU)，5-(苯硒基)巴比妥酸和5-(苯硫基)巴比妥酸。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用5-FU，其中，所述5-FU是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU在患者體內(nèi)的存在量明顯超過DPD抑制劑。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的一種實(shí)施方案中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約4小時(shí)，6小時(shí)，8小時(shí)，10小時(shí)，12小時(shí)，14小時(shí)，24小時(shí)或36小時(shí)施用的。在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約4小時(shí)，至少大約8小時(shí)或至少大約12小時(shí)施用的。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后大約4-72小時(shí)，4-36小時(shí)，4-24小時(shí)，4-14小時(shí)，6-14小時(shí)或8-14小時(shí)施用的。在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后大約4-14小時(shí)施用的。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU是在這樣的時(shí)間施用的從施用恩尿嘧啶起，業(yè)已經(jīng)過了恩尿嘧啶的大約0.1-4個(gè)消除半衰期，1-4個(gè)消除半衰期，2-4個(gè)消除半衰期或3-4個(gè)消除半衰期。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述恩尿嘧啶的施用劑量足以將患者體內(nèi)的DPD活性降低到低于基線DPD活性的大約10％，低于大約5％，低于大約3％或低于大約1％。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU在患者體內(nèi)的存在量超過恩尿嘧啶至少大約2倍，至少大約3倍，至少大約5倍或至少大約100倍。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約0.7-15mg/m2。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-5mg/m2。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約5-15mg/m2。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-5mg/m2，而所述5-FU的施用劑量為大約0.5-40mg/m2。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用5-FU，其中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-5mg/m2，并且其中，所述5-FU的施用時(shí)間是這樣的從施用恩尿嘧啶起，業(yè)已經(jīng)過了大約1-4，2-4或3-4個(gè)恩尿嘧啶的消除半衰期。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的一種實(shí)施方案中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約4小時(shí)，6小時(shí)，8小時(shí)，10小時(shí)，12小時(shí)或14小時(shí)施用的。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的一種實(shí)施方案中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后大約4-36小時(shí)，4-24小時(shí)，4-14小時(shí)，6-14小時(shí)或8-14小時(shí)施用的。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU在患者體內(nèi)的存在量超過恩尿嘧啶至少大約2倍，至少大約3倍，至少大約5倍或至少大約100倍。
在根據(jù)本發(fā)明該方面的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU的施用劑量為大約0.5-40mg/m2。
在更具體的實(shí)施方案中，首先施用恩尿嘧啶(或另一種DPD抑制劑)，然后在需要的時(shí)間點(diǎn)施用多個(gè)劑量的5-FU或5-FU前藥，然后可選地再次施用恩尿嘧啶(或另一種DPD抑制劑)。例如，在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，首先施用大約2.5-5mg/m2的恩尿嘧啶，至少大約10-14小時(shí)后施用所述5-FU或5-FU前藥，例如，在施用大約15-30mg/m2的5-FU或施用大約5-100mg/m2的卡培他濱的第1天前的傍晚如上所述施用恩尿嘧啶，然后施用類似的多個(gè)劑量的5-FU或卡培他濱。例如，在一種說明性實(shí)施方案中，首先施用恩尿嘧啶，然后每天施用多個(gè)5-FU或卡培他濱劑量，例如，每周施用三天時(shí)間，隨后可選地再次施用恩尿嘧啶，并且重復(fù)該循環(huán)。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用5-FU，其中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-5mg/m2，所述5-FU的施用時(shí)間是這樣的從施用恩尿嘧啶起，業(yè)已經(jīng)過了1-4，2-4或3-4個(gè)恩尿嘧啶的消除半衰期，且所述5-FU的施用劑量為大約0.5-40mg/m2。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了口服藥用延時(shí)釋放(time-release)制劑，其包含DPD抑制劑和5-FU或5-FU前藥，其中在給患者施用所述制劑后，5-FU或5-FU前藥是在業(yè)已釋放所述DPD抑制劑之后大約0.5-36，4-36，4-24或4-14小時(shí)才顯著釋放的。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了藥物制劑，其包含DPD抑制劑和用于將DPD抑制劑施用于患者的遞送載體。在另一種實(shí)施方案中，所述制劑包含DPD抑制劑和5-FU或5-FU前藥。在另一種實(shí)施方案中，所述制劑包含遞送載體，DPD抑制劑和5-FU或5-FU前藥。在具體實(shí)施方案中，所述遞送載體是微球體。在相關(guān)實(shí)施方案中，所述遞送載體是微球體，它能夠使所述DPD抑制劑優(yōu)先或選擇性地靶向癌細(xì)胞，采用本領(lǐng)域公知的配制和遞送技術(shù)。
通過參考以下詳細(xì)說明和附圖可以了解本發(fā)明的上述和其他方面。為了更詳細(xì)地說明本發(fā)明的各個(gè)方面而在本文中引用的專利和其他文獻(xiàn)以它們的全文形式收作本文參考。
附圖的簡要說明

圖1顯示恩尿嘧啶和5-FU的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
圖2顯示在小鼠中施用之后，恩尿嘧啶導(dǎo)致增加了的血漿尿苷水平。
圖3顯示片劑形式的包含恩尿嘧啶和5-FU的示例性口服延時(shí)釋放制劑。
發(fā)明的詳細(xì)說明如上所述，本發(fā)明總體上涉及治療癌癥的方法，該方法包括給患者施用至少一種DPD抑制劑與至少一種5-FU或5-FU前藥相組合，并且涉及可用于所述方法的組合物和制劑。因此，本文所披露的方法可應(yīng)用于治療其中5-FU和/或5-FU前藥具有活性的基本上任何癌癥類型，包括(例示但非限定)乳腺癌，肺癌，結(jié)腸癌，胰腺癌，胃癌，膀胱癌，腎癌，頭頸部癌，食道癌，肝細(xì)胞癌，和所有惡性白血病和淋巴瘤。另外，由于本發(fā)明改善了5-FU和5-FU前藥的抗腫瘤功效，在按照本文所披露的方法給藥時(shí)，先前可能表現(xiàn)出對5-FU不太理想的反應(yīng)性的癌癥類型可表現(xiàn)出改善的反應(yīng)性。
業(yè)已意外地發(fā)現(xiàn)，DPD抑制劑如恩尿嘧啶能夠抑制5-FU和5-FU前藥的代謝激活，并因此有損它們的抗腫瘤活性。因此，根據(jù)本發(fā)明的總的方面，通過確保在給患者施用5-FU或5-FU前藥時(shí)5-FU或5-FU前藥水平充分超過DPD抑制劑水平，有利地將所述DPD抑制劑可能干擾所述5-FU或5-FU前藥的代謝激活的程度降到最低，并因此改善這些藥劑的抗腫瘤功效。因此，在某些實(shí)施方案中，不可逆的DPD抑制劑如恩尿嘧啶應(yīng)當(dāng)以有效使DPD失活的最低劑量給藥，并且應(yīng)該優(yōu)選經(jīng)過足夠時(shí)間，以在施用5-FU之前從血流中清除多余的抑制劑。另外，由于在施用5-FU或5-FU前藥之前，DPD能夠有效從患者體內(nèi)顯著消除，獲得理想治療活性水平所需的5-FU或5-FU前藥的劑量可顯著降低，從而提供除本文所述治療優(yōu)點(diǎn)之外的經(jīng)濟(jì)優(yōu)點(diǎn)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員在閱讀本說明書之后可以理解，有多種施用和給藥方案可用于本文所披露的方法中，同時(shí)確保5-FU或5-FU前藥的水平在其施用時(shí)是治療有效量的，并且充分超過患者體內(nèi)的DPD抑制劑水平，以便最小化或消除對5-FU代謝激活的抑制作用。所有這樣的施用和給藥方案被認(rèn)為屬于本發(fā)明的范圍。
在本發(fā)明的一種說明性實(shí)施方案中，首先給有此需要的患者施用DPD抑制劑(即，預(yù)先給藥)，以便大體上消除患者體內(nèi)的DPD活性，然后施用5-FU或5-FU前藥?！宕篌w上消除″表示患者體內(nèi)的DPD活性水平被降低到至少低于在施用所述DPD抑制劑之前患者體內(nèi)DPD活性基線水平的20％，低于10％，低于5％，低于3％或低于1％?；颊叩腄PD活性的基線水平可以方便地確定，例如，在來自患者的PBMC中采用已知技術(shù)測定(例如，Baker等，J Clin Oncol 18915-926 2000；Schilsky等，J Clin Oncol 41450-7，1998)。
在首先施用至少一種DPD抑制劑，并因此大體上消除患者體內(nèi)的DPD之后，然后在經(jīng)過足夠的時(shí)間以便使得所述DPD抑制劑可以通過消除大體上從患者體內(nèi)清除之后，給患者施用5-FU或5-FU前藥，或其組合。施用所述DPD抑制劑和所述5-FU或5-FU前藥之間的時(shí)間延遲可以改變，只要在施用所述5-FU或5-FU前藥時(shí)，它在患者體內(nèi)的存在量相對于此時(shí)留在患者體內(nèi)的DPD抑制劑水平顯著過量就行。在一種說明性實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥是以這樣的劑量施用的存在于患者體內(nèi)的5-FU或5-FU前藥的水平至少摩爾過量于留在患者體內(nèi)的DPD抑制劑，例如，相對于施用所述5-FU或5-FU前藥時(shí)留在患者體內(nèi)的DPD抑制劑水平，至少大約2倍，至少大約3倍，至少大約5倍或至少大約100倍過量。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的是，按照本文所披露的實(shí)施方案，可以將多種已知的和可利用的技術(shù)中的任意一種用于計(jì)算和/或測定患者體內(nèi)5-FU或5-FU前藥相對于DPD抑制劑的過量的水平。例如，所述技術(shù)可以包括HPLC，LC-MS，ELISA，和其他方法。如上文所述，據(jù)信，通過確保所述5-FU或5-FU前藥的存在量相對于在施用所述5-FU或5-FU前藥時(shí)患者體內(nèi)的DPD抑制劑水平充分過量，可因此最小化所述DPD抑制劑對所述5-FU或5-FU前藥的代謝激活的干擾，并因此改善所述5-FU或5-FU前藥的功效。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥僅在從施用所述DPD抑制劑起業(yè)已經(jīng)過了至少0.1-4個(gè)所述DPD抑制劑的消除半衰期，1-4個(gè)消除半衰期，2-4個(gè)消除半衰期，或3-4個(gè)消除半衰期之后才給患者施用的。業(yè)已確定了某些DPD抑制劑的消除半衰期，而對于尚未測定的抑制劑來說，可以使用眾所周知的和建立的氣相色譜/質(zhì)譜和HPLC技術(shù)方便地測定其消除半衰期(參見Baker等，J ClinOncol 18915-926 2000；Schilsky等，J Clin Oncol 41450-7，1998)。據(jù)報(bào)導(dǎo)，恩尿嘧啶在人體內(nèi)的消除半衰期為大約3.5小時(shí)(例如，Baker等，J Clin Oncol 18915-926 2000；Ochoa等，Ann Oncol111313-22，2000)，不過，恩尿嘧啶和其他DPD抑制劑的半衰期可能是劑量依賴性的，并且這種劑量依賴性在確定施用DPD抑制劑和5-FU或5-FU前藥之間合適的時(shí)間延遲時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮。因此，對于本發(fā)明的將恩尿嘧啶用作所述DPD抑制劑的某些實(shí)施方案來說，為了使得恩尿嘧啶的水平在施用5-FU或5-FU前藥之前通過消除充分減少，所述5-FU或5-FU前藥是在施用恩尿嘧啶之后至少大約0.5小時(shí)，大約2小時(shí)，大約4小時(shí)，大約6小時(shí)，大約8小時(shí)，大約10小時(shí)，大約12小時(shí)，大約14小時(shí)，大約24小時(shí)或大約36小時(shí)施用的。在某些其他實(shí)施方案中，所述5-FU或5-FU前藥是在施用恩尿嘧啶之后大約4-72小時(shí)，4-36小時(shí)，大約4-24小時(shí)，大約4-14小時(shí)，大約6-14小時(shí)或大約8-14小時(shí)施用的。當(dāng)然，應(yīng)當(dāng)理解的是，上述范圍的性質(zhì)是說明性的，并且可以根據(jù)特定用藥方案所必需或期望的而改變，只要在施用5-FU時(shí)恩尿嘧啶的存在最小化或缺乏就行。
用于本發(fā)明的所述DPD抑制劑可以是DPD酶的可逆的或不可逆的抑制劑。DPD酶的可逆抑制劑的說明性例子包括尿嘧啶，CDHP和3-氰基-2，6-二羥基吡啶(CNDP)。其他示例性可逆DPD抑制劑包括披露于美國專利號(hào)5,476,855和WO 95/012400中的抑制劑，以上文獻(xiàn)的內(nèi)容被以全文形式收作本文參考，例如，5-(苯硒基)尿嘧啶(PSU)，5-(苯硫基)尿嘧啶(PTU)，5-(苯硒基)巴比妥酸和5-(苯硫基)巴比妥酸。應(yīng)當(dāng)理解的是，某些優(yōu)選的可逆的DPD抑制劑包括緊密結(jié)合的抑制劑，它從DPD解離的速度比多余的抑制劑從體內(nèi)消除的速度要慢；和/或能夠抑制DPD活性但不明顯抑制能激活氟尿嘧啶的其他酶(如尿苷磷酸化酶(UPase)，乳清酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶(OPRTase)和胸苷磷酸化酶(TP))的抑制劑。
在本發(fā)明的某些優(yōu)選實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是不可逆地使DPD酶失活的抑制劑。這方面的示例性DPD抑制劑包括但不局限于包含5-取代的尿嘧啶化合物的DPD抑制劑，或其前藥，特別是在5位由以下基團(tuán)取代的尿嘧啶化合物鹵原子，可選地被鹵素取代的C2-4烯基(例如，乙烯基)(例如，2-溴乙烯基，1-氯乙烯基或2-溴-1-氯乙烯基)，可選地被鹵原子取代的C2-6炔基，氰基，或被鹵素取代的C1-4烷基(例如，三氟甲基)。
在本發(fā)明更具體的實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑選自下列一組恩尿嘧啶，5-丙炔基尿嘧啶，5-氰基尿嘧啶，5-丙炔基尿嘧啶，5-溴乙炔基尿嘧啶，5-(1-氯乙烯基)尿嘧啶，5-碘尿嘧啶，5-溴乙烯基尿嘧啶，(E)-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，5-己-1-炔基尿嘧啶，5-乙烯基尿嘧啶，5-三氟尿嘧啶，5-溴尿嘧啶，和5-(2-溴-1-氯乙烯基)尿嘧啶，或其前藥。
在另一種實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是5-溴乙烯基尿嘧啶的前藥，一種示例性化合物是由化合物1-β-D-阿拉伯呋喃糖基-(E)-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶(又被稱作BV-araU或索立夫定)代表的。這方面的某些示例性前藥化合物在例如美國專利號(hào)4,386,076中描述，該專利的內(nèi)容被收作本文參考。
在本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶或恩尿嘧啶的前藥，如5-乙炔基-2(1H)-嘧啶酮(缺少4-氧的恩尿嘧啶)(Porter，等，Biochem.Pharmacol 471165-1171，1994)，恩尿嘧啶的核苷或脫氧核苷衍生物，能在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成恩尿嘧啶的化合物，和/或能在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成滅活劑的DPD滅活劑衍生物。舉例來說，所述化合物可以包括含有與上述5-取代的尿嘧啶化合物相對應(yīng)的核堿基的核苷衍生物，例如包含核糖，2′-脫氧核糖，2′，3′-二脫氧核糖，阿拉伯糖或其他可裂解的糖部分的核苷衍生物，其可能另外包含2′-或3′-取代基如鹵素或5′取代基如酯。所述核苷衍生物的更具體的例子包括1-(β-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-丙-1-炔基尿嘧啶和2′，3′-二脫氧-5-乙炔基-3′-氟尿苷。
已知眾多5-FU前藥也可用于本發(fā)明中。5-FU的前藥是能夠在體內(nèi)代謝成5-氟尿嘧啶的化合物，并且可以包括，例如，5-氟尿苷，5-氟胞苷，5-氟-2-脫氧尿苷，5-氟-2-脫氧胞苷，5-氟阿糖尿嘧啶，以及它們的5′-酯，包括磷酸酯。其他示例性化合物包括5′-脫氧-4′，5-氟尿苷，5′-脫氧-5-氟尿苷，1-(2-四氫呋喃基)-5-氟尿嘧啶，1-C1-8烷基氨甲酰基-5-氟尿嘧啶衍生物，1-(2-四氫呋喃基)-5-氟尿嘧啶，呋氟尿嘧啶(替加氟，一種口服5-FU前藥，它在亞洲國家被廣泛使用)，和5′-脫氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]-胞苷(卡培他濱，由RocheLaboratories Inc.以Xeloda出售)，或能在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成5-FU的化合物。
在本發(fā)明的特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，本文所披露的方法采用恩尿嘧啶與5-FU組合。正如上文所指出的，為了使5-FU的抗腫瘤活性最大化，恩尿嘧啶的施用劑量應(yīng)大體上消除患者體內(nèi)的DPD活性，同時(shí)還確保在施用5-FU時(shí)恩尿嘧啶不過量存在。由于恩尿嘧啶是DPD的非常有力的不可逆滅活劑，它優(yōu)選在5-FU之前給藥。恩尿嘧啶迅速使DPD失活，然后在施用5-FU之前優(yōu)選給予時(shí)間以通過消除大體上從患者體內(nèi)清除。因此，在給患者施用5-FU時(shí)，DPD活性將被大體上消除，并且恩尿嘧啶的水平有利地較低。
通過本說明書可以了解，本發(fā)明的方法還可以包括具有任何需要的持續(xù)時(shí)間和給藥特征的施用方案，前提是對給藥方案進(jìn)行適當(dāng)選擇，以便所述5-FU或5-FU前藥的存在量超過在施用所述5-FU或5-FU前藥時(shí)留在患者體內(nèi)的恩尿嘧啶的水平。在采用恩尿嘧啶和5-FU的特定組合的一種說明性實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法包括1天1次持續(xù)5天(5-日)方案或一周一次(每周)方案。對于5-日或每周方案來說，恩尿嘧啶的劑量范圍通常為大約0.8-10mg/m2，優(yōu)選大約2.5-5mg/m2。注意，可以使用甚至更高劑量的恩尿嘧啶，只要在施用5-FU之前經(jīng)過足夠的時(shí)間來清除多余量就行。
為了方便起見，在某些實(shí)施方案中，優(yōu)選簡單固定劑量的恩尿嘧啶。正如本文所披露的，大約2.5-15mg范圍的固定劑量一般適合大部分患者。在某些優(yōu)選實(shí)施方案中，所述固定劑量范圍為大約2.5-5mg。示例性的恩尿嘧啶固定劑量，在不同體形的患者中將消除DPD超過24小時(shí)，且在某些情況下超過3-5天，如以下表格中所示。
在一種說明性實(shí)施方案中，施用恩尿嘧啶和施用5-FU之間的時(shí)間延遲為大約4-72小時(shí)，4-36小時(shí)，4-24小時(shí)或4-14小時(shí)(或至少大約1-4個(gè)恩尿嘧啶的消除半衰期)。例如，恩尿嘧啶可以在施用5-FU之前的晚上施用，或可以在早晨施用，隨后在傍晚施用5-FU。例如，對于這些方案采用大約20-30mg/m2的5-FU示例劑量(Levin等，Invest New Drugs 18383-90，2000；Schilsky等，J Clin Oncol41450-7，1998；Guo等，Cancer Chemother Pharmacol 5279-85，2003)，5-FU應(yīng)當(dāng)總是相對于恩尿嘧啶明顯過量。
在另一種實(shí)施方案中，可以使用延長的給藥方案，例如，28-日給藥方案。一種示例性的28-日1天2次方案(例如，每天兩次持續(xù)28天)涉及以大約0.5-2mg/m2，優(yōu)選大約1mg/m2給藥5-FU(例如，Baker等，J Clin Oncol 18915-926 2000)。為了確保恩尿嘧啶的存在量不超過低的5-FU劑量，可以在開始1天2次方案之前以大約2.5-5mg/m2施用恩尿嘧啶至少大約12小時(shí)，例如，在施用5-FU的第一天之前的傍晚。然后可以在每天的第一個(gè)5-FU劑量之前約2-8小時(shí)、優(yōu)選約4-6小時(shí)，以大約0.5-2mg/m2例如1mg/m2施用單個(gè)每日的恩尿嘧啶劑量，持續(xù)28天。該策略能確保來自第一個(gè)劑量的5-FU水平充分超過恩尿嘧啶，且來自每天的第二個(gè)5-FU劑量的5-FU水平充分超過恩尿嘧啶。在隨后的處理日期間，例如，第2-28天，患者血液中的恩尿嘧啶的水平(例如，當(dāng)以1mg/m2給藥時(shí))應(yīng)當(dāng)在四小時(shí)內(nèi)(第一個(gè)每日的5-FU劑量)減少大約50％(到0.5mg/m2)，并且到當(dāng)天的第二個(gè)5-FU劑量時(shí)降低大約94％(到0.06mg/m2)。恩尿嘧啶的開始的2.5-5mg/m2的劑量以及隨后的1mg/m2的劑量應(yīng)用于有效消除患者體內(nèi)的DPD活性，持續(xù)5-FU給藥的28天。
在另一種說明性實(shí)施方案中，首先施用恩尿嘧啶(或另一種DPD抑制劑)，然后在理想的時(shí)間點(diǎn)施用多個(gè)劑量的5-FU或5-FU前藥，然后可選地再次施用恩尿嘧啶。例如，在說明性實(shí)施方案中，首先施用恩尿嘧啶，然后在之后大約12小時(shí)，36小時(shí)，甚至54小時(shí)的示例性的時(shí)間點(diǎn)施用多個(gè)5-FU劑量，如果需要的話，然后可選地再次施用恩尿嘧啶，并且重復(fù)該循環(huán)。
在具體實(shí)施方案中，恩尿嘧啶和5-FU的劑量比例為大約1∶5-1∶15或1∶8-1∶12。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，在施用恩尿嘧啶之后相對迅速地施用5-FU，例如，0-.5-1小時(shí)，條件是，根據(jù)本發(fā)明，5-FU在施用時(shí)相對于恩尿嘧啶摩爾過量。
對于本發(fā)明的實(shí)施方案披露的施用恩尿嘧啶的劑量和方案與用于先前的II期和III期人類試驗(yàn)(Levin等，Invest New Drugs 18383-90，2000；Schilsky等，J Clin Oncol201519-26，2002)中的不同。上述研究采用了更高劑量的恩尿嘧啶，并且與恩尿嘧啶同時(shí)或僅在施用恩尿嘧啶之后1小時(shí)給藥5-FU。盡管在III期試驗(yàn)中證實(shí)了某些抗腫瘤活性，總體結(jié)果低于預(yù)期，并且所述試驗(yàn)不被認(rèn)為是成功的。據(jù)信，通過使用本發(fā)明的方法，通過確保在施用5-FU或5-FU前藥時(shí)不存在過量的恩尿嘧啶并因此不能抑制5-FU激活，將獲得改善的功效。
本發(fā)明的其他特征包括藥用制劑，該制劑包含至少一種可以藥用的載體或賦形劑，并且還包含DPD抑制劑和/或5-FU或5-FU前藥，一起存在于單一制劑中或作為獨(dú)立的制劑存在，根據(jù)本發(fā)明在分開的時(shí)間點(diǎn)施用。在一種實(shí)施方案中，所述恩尿嘧啶和5-FU以大約1∶3-1∶20，1∶5-1∶15，或1∶8-1∶12的比例存在于一種或多種制劑中。載體或賦形劑是″可以藥用的″的含義是與所述制劑的其他成分相容，并且不會(huì)對患者有害。例如，所述制劑包括適合口服，直腸，鼻，局部(包括含服和舌下)，陰道和腸胃外(包括皮下，肌內(nèi)，靜脈內(nèi)和真皮內(nèi))施用的制劑。所述制劑可便利地以單位劑型呈現(xiàn)，并且可以通過制藥領(lǐng)域所公知的任何方法制備。所述方法包括使所述活性成分與載體結(jié)合的步驟，所述載體構(gòu)成了一種或多種輔助成分。一般而言，所述制劑是通過讓活性成分與液體載體或細(xì)碎的固體載體或這兩者均勻地和密切地結(jié)合而制備的，然后如果需要的話使所述產(chǎn)品成型。
本發(fā)明的制劑可以采用基本上任何可利用的技術(shù)制備和/或施用。例如，適合口服的本發(fā)明的制劑可以作為離散的單位呈現(xiàn)，如膠囊，扁囊劑或片劑，各自含有預(yù)定量的活性成分；作為粉末或顆粒物；作為在含水或非水液體中的溶液或懸浮液；或作為水包油液體乳劑或油包水液體乳劑?；钚猿煞诌€可以藥丸，藥糖劑或糊劑形式存在?？诜ǔＪ莾?yōu)選的施用途徑。
例如，片劑可以通過壓制或模制生產(chǎn)，可選地與一種或多種輔助成分一起制備。壓制的片劑可以通過在合適的機(jī)器中壓縮自由流動(dòng)形式的活性成分(如粉末或顆粒)而制備，可選地與黏合劑(例如，聚乙烯吡咯烷酮，明膠，羥丙基甲基纖維素)，潤滑劑，惰性稀釋劑，防腐劑，崩解劑(例如，羥乙酸淀粉鈉，交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)，表面活性劑或分散劑混合。模制的片劑可以通過在合適的機(jī)器中模制用惰性液體稀釋劑濕潤的粉末狀化合物的混合物制備。片劑可選地加包衣或刻痕，并且可配制成能提供其中活性成分的控釋，例如，使用不同比例的羥丙基甲基纖維素，以便提供需要的釋放曲線。
例如，用于在口腔中局部施用的制劑包括糖錠，其包含存在于香味底料(basis)中的活性成分，所述底料通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃芪膠；錠劑，其包含存在于諸如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠的惰性底料中的活性成分；以及漱口水，其包含存在于合適的液體載體中的活性成分。例如，用于直腸施用的制劑可以栓劑形式呈現(xiàn)，具有合適的基質(zhì)，包含例如可可脂或水楊酸鹽。例如，用于陰道施用的制劑可以陰道栓劑，棉塞，霜?jiǎng)?，凝膠，糊劑，泡沫或噴霧制劑的形式存在，除了所述活性成分之外，還含有本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的合適的載體。
例如，用于腸胃外施用的制劑包括含水和非水等滲無菌注射溶液，它可以含有抗氧化劑，緩沖劑，抑菌劑和使得所述制劑與預(yù)期受體的血液等滲的溶質(zhì)；以及水和非水無菌懸浮液，它可以包括助懸劑和增稠劑。所述制劑可以存在于單位劑量或多劑量密封容器中，例如，安瓿和小瓶，并且可以在冷凍干燥(凍干)條件下保存，在使用之前即刻只需要添加無菌液體載體，例如注射用水?？梢詮纳鲜鲱愋偷臒o菌粉末，顆粒和片劑制備臨時(shí)的注射溶液和懸浮液。
典型地，包括一種或多種活性劑的液體制劑優(yōu)選緩沖到pH 7-11，一般9.5-10.5。某些單位劑量制劑可以包括這樣的制劑，它含有活性成分的每日劑量或單位，每日亞劑量，正如上文所述的，或其合適的部分。
本文所披露的DPD抑制劑和5-FU前藥的制備方法是公知的，并且可以采用常規(guī)方法進(jìn)行。例如，上面所提到的DPD抑制劑可以通過披露于以下文獻(xiàn)中的方法制備Heterocycl.Chem.19(3)463-4(1982)，用于制備5-乙炔基尿嘧啶；J.Chem.Soc.Perkin Trans.1(16)，1665-70(1981)，用于制備5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，5-溴乙炔基尿嘧啶和5-(2-溴-1-氯乙烯基)尿嘧啶；Nucleic AcidChemistry，Vol.2，927-30(1978)，用于制備5-氰基-尿嘧啶；NucleicAcids Research，1(1)105-7(1974)，用于制備5-乙烯基尿嘧啶；Z.Chern 17(11)415-16(1977)，用于制備5-三氟甲基尿嘧啶；Nucleic Acids Research 3(10)，2845(1976)，用于制備5-(1-氯乙烯基)尿嘧啶。本發(fā)明的某些其他化合物可以按照披露于以下文獻(xiàn)中的方法制備歐洲專利說明書號(hào)356166，用于制備3′-氟-2′，3′-二脫氧5-炔基尿苷化合物，如2′，3′-二脫氧-5-乙炔基-3′-氟尿苷，和歐洲專利說明書號(hào)272065，用于制備5-炔基尿嘧啶阿拉伯糖苷，如1-(b-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-丙-1-炔基尿嘧啶。上述和其他合成技術(shù)是公知的，并且可用于制備用于本發(fā)明的化合物。
在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了聯(lián)合口服制劑，其中，DPD抑制劑和5-FU或5-FU前藥一起給藥，其方式使得所述制劑的成分能夠按期望時(shí)間釋放到患者體內(nèi)。兩種成分的有差別的延時(shí)釋放遞送可以使用已知的技術(shù)和材料實(shí)現(xiàn)。例如，在一種實(shí)施方案中，口服制劑，例如片劑形式，可以由三個(gè)不同的層組成，正如在圖3中示意性地描繪的。外層可以包含立即釋放制劑中的恩尿嘧啶。中間層可以是延時(shí)釋放成分(例如，延時(shí)釋放緩沖劑)，它能延遲5-FU或5-FU前藥的釋放至本發(fā)明的期望程度，5-FU或5-FU前藥位于核心層的立即釋放制劑中。所述DPD抑制劑和5-FU或5-FU前藥是以本文所披露的適當(dāng)?shù)膭┝亢捅壤渲频摹Ｔ谝环N優(yōu)選實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU或卡培他濱。
在另一種實(shí)施方案中，可選制劑可以包含已知的遞送載體，如包含5-FU或5-FU前藥的微球體。在一種實(shí)施方案中，例如，5-FU或5-FU前藥可以包封在延時(shí)釋放成分(例如，延時(shí)釋放崩解緩沖劑)的外殼中，并且由外層提供DPD抑制劑的立即釋放。在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU或卡培他濱?？梢栽O(shè)計(jì)并且采用已知技術(shù)制備示例性聯(lián)合制劑的上述和其他實(shí)例，使得在單一的口服制劑中所述DPD抑制劑與所述5-FU或5-FU前藥的遞送之間存在適當(dāng)?shù)难訒r(shí)。
在另一種實(shí)施方案中，DPD抑制劑可選擇性地或優(yōu)先地靶向癌細(xì)胞和腫瘤。DPD在癌細(xì)胞和腫瘤中的選擇性作用使得所述化合物相對它們的循環(huán)半衰期而言具有更長的半衰期，這將實(shí)現(xiàn)較高的激活的核苷酸的穩(wěn)態(tài)水平和改善的治療指數(shù)。在一種實(shí)施方案中，使DPD抑制劑如恩尿嘧啶選擇性地靶向腫瘤可以采用靶向微球體實(shí)現(xiàn)，所述微球體為本領(lǐng)域所熟知。在另一種實(shí)施方案中，靶向是使用組織特異性受體如脫唾液酸糖蛋白(asiolglycoprotein)受體實(shí)現(xiàn)的，以便使所述化合物靶向肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞。例如，所述靶向可以通過化學(xué)或其他方法修飾所述DPD抑制劑實(shí)現(xiàn)(例如，通過將3-6個(gè)半乳糖殘基置于恩尿嘧啶上)。
在另一種實(shí)施方案中，本文所披露的方法還包括施用甲酰四氫葉酸。甲酰四氫葉酸，或左亞葉酸(甲酰四氫葉酸的活性異構(gòu)體)，通常與5-FU聯(lián)合用于治療癌癥患者。還可以將它添加到上述恩尿嘧啶和5-FU的給藥方案中。業(yè)已顯示甲酰四氫葉酸在荷瘤大鼠和組織培養(yǎng)中能夠改善恩尿嘧啶和5-FU的抗腫瘤功效(Cao等，Cancer Res 901507-1510，1993；Fischel et αl，Biochem Pharmacol 531703-1709，1997)，并且業(yè)已給接受恩尿嘧啶和5-FU的患者施用(Schilsky等，J Clin Oncol 41450-7，1998；Guo等，Cancer Chemother Pharmacol5279-85，2003)。還可有利地獲得甲酰四氫葉酸的口服制劑。
通過考慮以下非限定實(shí)施例可以進(jìn)一步理解本發(fā)明。
實(shí)施例實(shí)施例1過量的恩尿嘧啶減弱恩尿嘧啶和5-FU的抗腫瘤活性將Ward癌瘤植入大鼠，并且在它們的腫瘤生長到3,000mg重量之后用下列方案之一治療，正如以前所披露的(Cao等，Cancer Res901507-1510，1993)。長有3,000mg腫瘤塊的大鼠在第0，第7和第14天進(jìn)行以下治療。
A組大鼠不接受治療。B組大鼠腹膜內(nèi)(ip)給藥1mg/kg恩尿嘧啶(時(shí)間(t)＝0)，然后在t＝60靜脈內(nèi)(iv)給藥5mg/kg5-FU。C組大鼠ip給藥1mg/kg恩尿嘧啶(t＝0)，然后在t＝55分鐘ip給藥25mg/kg恩尿嘧啶，并且在t＝60分鐘iv給藥5mg/kg 5-FU。每周1次給動(dòng)物用藥，持續(xù)三周。在每次每周治療的第2和第3天，對B & C組的大鼠還ip給藥1mg/kg的恩尿嘧啶。C組的治療模擬了臨床試驗(yàn)，其中在給藥5-FU時(shí)存在高水平的恩尿嘧啶。
A組中的腫瘤迅速生長到10,000mg，并且處死所述大鼠。B組中的腫瘤迅速消除，而C組中的腫瘤平均而言大小僅有輕微的下降。以上結(jié)果表明，C組中的過量的恩尿嘧啶大大減弱了5-FU的抗腫瘤活性，可能是由于恩尿嘧啶干擾了5-FU的代謝激活。
實(shí)施例2恩尿嘧啶抑制5-FU代謝激活成活性核苷酸最初用恩尿嘧啶(10μM)處理HEK 293細(xì)胞1小時(shí)。在4-48小時(shí)的洗出期之后，在37℃下用[6-14C]-5-FU(66μM)處理細(xì)胞2小時(shí)。對照是用單獨(dú)的[6-14C]-5-FU(66μM)或用一起共同施用(無預(yù)溫育)的恩尿嘧啶(10μM)和[6-14C]-5-FU(66μM)處理2小時(shí)的HEK 293細(xì)胞。將反相HPLC與放射性檢測用于定量存在于細(xì)胞裂解物中的[6-14C]-5-FU分解代謝產(chǎn)物/合成代謝產(chǎn)物。在分開的一組試驗(yàn)中，檢查了以不同恩尿嘧啶劑量方案的5-FU的細(xì)胞毒性。在37℃下用一系列5-FU濃度處理HEK 293細(xì)胞72小時(shí)在1小時(shí)恩尿嘧啶(5μM)預(yù)溫育后；沒有恩尿嘧啶；或無預(yù)溫育、共同施用的恩尿嘧啶(5μM)。通過MTS增殖測定評(píng)估細(xì)胞毒性并計(jì)算5-FU的EC50值。
用恩尿嘧啶預(yù)處理細(xì)胞1小時(shí)，然后是36小時(shí)或48小時(shí)的洗出，然后進(jìn)行[6-14C]-5-FU處理，與單獨(dú)[6-14C]-5-FU處理或恩尿嘧啶和[6-14C]-5-FU共同施用相比，導(dǎo)致了[6-14C]-FUMP合成代謝產(chǎn)物形成的顯著增加(p值＜0.05)。例如，與單獨(dú)[6-14C]-5-FU處理相比，48小時(shí)的洗出導(dǎo)致了[6-14C]-FUMP形成增加了70％，與恩尿嘧啶和[6-14C]-5-FU共同施用相比，導(dǎo)致[6-14C]-FUMP形成增加了41％。在細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中，用恩尿嘧啶預(yù)處理1小時(shí)提高了5-FU的細(xì)胞毒性，與所述單獨(dú)5-FU處理(311.4nM±1.1)或EU和5-FU共同施用而沒有預(yù)溫育(307.8nM±1.03)相比，EC50值降低了(264.0nM±1.7)(平均值±SE)(p＜0.05)。
以上結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了，除了它在抑制將5-FU降解成無活性形式的分解代謝途徑中的已知作用之外，恩尿嘧啶在抑制將5-FU轉(zhuǎn)化成活性抗腫瘤核苷酸的合成代謝途徑方面的作用。
實(shí)施例3恩尿嘧啶導(dǎo)致血漿尿苷水平增加盡管已知恩尿嘧啶抑制作用導(dǎo)致尿嘧啶水平的增加(這是由于DPD抑制作用)，預(yù)期對合成代謝氟嘧啶類的其他酶的抑制作用會(huì)定量改變其他合成代謝產(chǎn)物如尿苷的水平。以2mg/kg，25mg/kg和100mg/kg的劑量給小鼠施用恩尿嘧啶。在0分鐘，15分鐘，30分鐘，60分鐘，2小時(shí)，24小時(shí)和48小時(shí)取血漿樣品。使用已知技術(shù)通過LC-MS技術(shù)測定尿苷水平，并且將標(biāo)準(zhǔn)物用于驗(yàn)證該分析。
參見圖2，以上實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，在施用之后，恩尿嘧啶導(dǎo)致尿苷水平提高。這一發(fā)現(xiàn)與恩尿嘧啶對合成代謝酶如尿苷磷酸化酶具有抑制作用吻合，并且進(jìn)一步支持了恩尿嘧啶在抑制5-FU合成代謝轉(zhuǎn)化成活性核苷酸方面的作用。
通過以上說明可以了解，盡管為了說明目的而在此對本發(fā)明的具體實(shí)施方案進(jìn)行了說明，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和范圍的前提下可以進(jìn)行各種改進(jìn)。因此，除由所附權(quán)利要求書限定外，本發(fā)明并不局限于以上說明。
權(quán)利要求
1.治療患者癌癥的方法，包括首先施用DPD抑制劑，然后施用5-FU或5-FU前藥，其中，所述5-FU或5-FU前藥是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU或5-FU前藥在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑。
2.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述5-FU或5-FU前藥是在施用DPD抑制劑之后至少大約4小時(shí)施用的。
3.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述5-FU或5-FU前藥是在施用DPD抑制劑之后至少大約12小時(shí)施用的。
4.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述5-FU或5-FU前藥是在施用DPD抑制劑之后至少大約24小時(shí)施用的。
5.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述5-FU或5-FU前藥是在這樣的時(shí)間施用的從施用所述DPD抑制劑起，業(yè)已經(jīng)過了至少1-4個(gè)所述DPD抑制劑的消除半衰期。
6.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑的施用劑量足以將患者體內(nèi)的DPD活性降低到低于患者體內(nèi)基線DPD活性的5％。
7.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述5-FU或5-FU前藥是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU或5-FU前藥在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少2倍。
8.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述5-FU或5-FU前藥是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU或5-FU前藥在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少5倍。
9.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是不可逆的DPD抑制劑。
10.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是可逆的DPD抑制劑。
11.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述5-FU或5-FU前藥選自下列一組以及它們的5′-酯，包括磷酸酯5-氟尿苷，5-氟胞苷，5-氟-2-脫氧尿苷，5-氟-2-脫氧胞苷，5′-脫氧-4′，5-氟尿苷，和5-氟阿糖尿嘧啶，5′-脫氧-5-氟尿苷，1-(2-四氫呋喃基)-5-氟尿嘧啶，1-C1-8烷基氨甲?；?5-氟尿嘧啶衍生物，1-(2-四氫呋喃基)-5-氟尿嘧啶，5′-脫氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]-胞苷(卡培他濱)，或能在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成5-FU的化合物。
12.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU或卡培他濱。
13.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶或其前藥。
14.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU或卡培他濱。
15.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU，并且，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約0.8-15mg/m2。
16.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU，并且，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-5mg/m2。
17.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU，并且，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約5-15mg/m2。
18.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-15mg/m2，而所述5-FU的施用劑量為大約0.5-80mg/m2。
19.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-5mg/m2，而所述5-FU的施用劑量為大約0.5-40mg/m2。
20.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑包括5-取代的尿嘧啶化合物或其前藥。
21.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑包括在5位由以下基團(tuán)取代的尿嘧啶化合物鹵原子，C2-4烯基，被鹵素取代的C2-4烯基，C2-6炔基，被鹵素取代的C2-6炔基，氰基，C1-4烷基或被鹵素取代的C1-4烷基。
22.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑包括選自下列一組的尿嘧啶化合物恩尿嘧啶，5-丙炔基尿嘧啶，5-氰基尿嘧啶，5-丙炔基尿嘧啶，5-溴乙炔基尿嘧啶，5-(1-氯乙烯基)尿嘧啶，5-碘尿嘧啶，5-溴乙烯基尿嘧啶，(E)-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，5-己-1-炔基尿嘧啶，5-乙烯基尿嘧啶，5-三氟尿嘧啶，5-溴尿嘧啶和5-(2-溴-1-氯乙烯基)尿嘧啶。
23.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑選自下列一組5-(苯硒基)尿嘧啶(PSU)，5-(苯硫基)尿嘧啶(PTU)，5-(苯硒基)巴比妥酸和5-(苯硫基)巴比妥酸。
24.治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用5-FU，其中，所述5-FU是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，5-FU在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑。
25.如權(quán)利要求24的方法，其中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約4小時(shí)施用的。
26.如權(quán)利要求24的方法，其中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約12小時(shí)施用的。
27.如權(quán)利要求24的方法，其中，所述5-FU的施用時(shí)間是這樣的從施用恩尿嘧啶起，業(yè)已經(jīng)過了至少大約1-4個(gè)恩尿嘧啶的消除半衰期。
28.如權(quán)利要求24的方法，其中，所述恩尿嘧啶的施用劑量足以將患者體內(nèi)的DPD活性降低到低于患者體內(nèi)基線DPD活性的5％。
29.如權(quán)利要求24的方法，其中，所述5-FU是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少2倍。
30.如權(quán)利要求24的方法，其中，所述5-FU是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少5倍。
31.如權(quán)利要求24的方法，其中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-5mg/m2。
32.如權(quán)利要求24的方法，其中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-15mg/m2，而所述5-FU的施用劑量為大約0.5-40mg/m2。
33.治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用5-FU，其中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-15mg/m2，并且其中，所述5-FU是從施用恩尿嘧啶起業(yè)已經(jīng)過了至少1-4個(gè)恩尿嘧啶的消除半衰期之后施用的。
34.如權(quán)利要求33的方法，其中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約4小時(shí)施用的。
35.如權(quán)利要求33的方法，其中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約14小時(shí)施用的。
36.如權(quán)利要求33的方法，其中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約18小時(shí)施用的。
37.如權(quán)利要求33的方法，其中，所述5-FU是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少2倍。
38.如權(quán)利要求33的方法，其中，所述5-FU是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少5倍。
39.如權(quán)利要求33的方法，其中，所述5-FU的施用劑量為大約0.5-40mg/m2。
40.治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用5-FU，其中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-15mg/m2，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約4小時(shí)施用的，且所述5-FU的施用劑量為大約0.5-40mg/m2。
41.如權(quán)利要求40的方法，其中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約14小時(shí)施用的。
42.如權(quán)利要求40的方法，其中，所述5-FU是在施用恩尿嘧啶之后至少大約18小時(shí)施用的。
43.治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用卡培他濱，其中，所述恩尿嘧啶的施用劑量為大約2.5-15mg/m2，并且其中，所述5-FU是從施用恩尿嘧啶起業(yè)已經(jīng)過了至少1-4個(gè)恩尿嘧啶的消除半衰期之后施用的。
44.如權(quán)利要求43的方法，其中，所述卡培他濱是在施用恩尿嘧啶之后至少大約4小時(shí)施用的。
45.如權(quán)利要求43的方法，其中，所述卡培他濱是在施用恩尿嘧啶之后至少大約14小時(shí)施用的。
46.如權(quán)利要求43的方法，其中，所述卡培他濱是在施用恩尿嘧啶之后至少大約24小時(shí)施用的。
47.如權(quán)利要求43的方法，其中，所述卡培他濱是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述卡培他濱在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少2倍。
48.如權(quán)利要求43的方法，其中，所述卡培他濱是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述卡培他濱在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑至少5倍。
49.如權(quán)利要求43的方法，其中，所述卡培他濱的施用劑量為大約1.5-4mg/m2。
50.口服藥用延時(shí)釋放制劑，其包含DPD抑制劑和5-FU或5-FU前藥，其中，在給患者施用所述制劑之后，在業(yè)已釋放所述DPD抑制劑之后至少大約4小時(shí)才顯著釋放5-FU或5-FU前藥。
51.如權(quán)利要求50的制劑，其中，所述5-FU或5-FU前藥是在業(yè)已釋放所述DPD抑制劑之后至少大約12小時(shí)才顯著釋放的。
52.如權(quán)利要求50的制劑，其中，所述5-FU或5-FU前藥是5-FU或卡培他濱。
53.如權(quán)利要求50的制劑，其中，所述DPD抑制劑是恩尿嘧啶。
54.口服藥用延時(shí)釋放制劑，其包含DPD抑制劑和遞送載體，其中，所述遞送載體有利于所述DPD抑制劑選擇性地靶向患者體內(nèi)的癌細(xì)胞。
55.如權(quán)利要求54的制劑，其中，所述遞送載體是微球體。
56.治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用5-FU，其中，恩尿嘧啶是在施用5-FU之前至少大約0.5小時(shí)施用的，并且其中，所述5-FU或5-FU前藥是以這樣的劑量施用的在其施用時(shí)，所述5-FU或5-FU前藥在患者體內(nèi)的存在量超過DPD抑制劑。
57.治療患者癌癥的方法，包括首先施用恩尿嘧啶，然后施用5-FU，其中，在開始長時(shí)間的1天2次方案之前至少大約12小時(shí)，以大約2.5-15mg/m2的劑量施用恩尿嘧啶，之后，在每一天的第1個(gè)1天2次5-FU劑量之前大約4-6小時(shí)以大約0.5-2mg/m2的劑量施用恩尿嘧啶。
58.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑和所述5-FU或5-FU前藥的劑量的比例為1∶3-1∶20。
59.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑和所述5-FU或5-FU前藥的劑量的比例為1∶5-1∶15。
60.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述DPD抑制劑和所述5-FU或5-FU前藥的劑量的比例為1∶8-1∶12。
全文摘要
提供了用于與5－FU和/或5－FU前藥組合改善DPD抑制劑的施用和給藥的方法，包括首先給有此需要的患者施用DPD抑制劑，其顯著消除所述酶的活性，然后施用5－FU或5－FU前藥，其中，在患者體內(nèi)5－FU或5－FU前藥的水平大大超過DPD抑制劑。
文檔編號(hào)A61K31/505GK101068549SQ200580041405
公開日2007年11月7日 申請日期2005年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月3日
發(fā)明者T·斯佩爾特, W·P·彼得斯, D·W·庫菲, B·休伯 申請人:阿迪赫里克斯技術(shù)公司