專利名稱：仙蟾膠囊及其制備方法、質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥新藥，具體涉及中藥仙蟾膠囊的制備方法及其質(zhì)量控制技術(shù)。
背景技術(shù)：
“仙蟾片”是國(guó)家藥品監(jiān)督管理局局頒標(biāo)準(zhǔn)國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編兒科口腔科腫瘤科分冊(cè)(中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)部分)收載品種，原片劑崩解時(shí)間長(zhǎng)、生物利用度較差，本發(fā)明是以新劑型、新制備工藝、新質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)該品種進(jìn)行二次開發(fā)研究，選擇劑型為膠囊劑，膠囊劑更易于崩解，美觀，容易吞服，增加了患者的選擇性與依從性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是對(duì)中藥仙蟾片進(jìn)行新劑型與新工藝研究及其提出新的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提供仙蟾膠囊及其制備方法、質(zhì)量控制技術(shù)。本發(fā)明研究的仙蟾膠囊，具有化瘀散結(jié)，益氣止痛之功效。用于食道癌、胃癌、肺癌的治療。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下仙蟾膠囊，原料藥由馬錢子粉、蟾酥、補(bǔ)骨脂、半夏(制)、郁金、人參、黃芪、當(dāng)歸、仙鶴草組成，其特征在于(1)配方重量份為馬錢子粉50蟾酥10補(bǔ)骨脂165半夏(制)50郁金50人參30黃芪20當(dāng)歸20仙鶴草50(2)輔料包括預(yù)膠化淀粉、滑石粉、微晶纖維素等。
所述的仙蟾膠囊的制備方法，其特征在于制備方法①以上九味藥材，取半夏、蟾酥及50％-80％左右的補(bǔ)骨脂分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；將剩余的補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉與馬錢子粉混勻，用50-80％乙醇溶液作溶劑，浸漬36～72小時(shí)，緩緩滲漉，收集漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金、人參、黃芪、當(dāng)歸、仙鶴草等五味混合，加水煎煮(仙鶴草后下)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮成清膏，加入上述細(xì)粉及預(yù)膠化淀粉、滑石粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法②以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；將補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸碎成粗粉，用50-80％乙醇作溶劑，浸漬36～72小時(shí)，緩緩滲漉，收集初漉液，繼續(xù)滲漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和續(xù)漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與郁金、黃芪二味混合，加水煎煮，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至成清膏，加入上述細(xì)粉及馬錢子粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法③以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸、馬錢子粉加乙醇回流提取，加熱回流1～3小時(shí)，合并醇提液，濾過，濾液濃縮成清膏；其余郁金、黃芪二味藥，加水煎煮，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮成清膏，與上述清膏合并，加入上述細(xì)粉混勻，干燥成干膏，粉碎，加入微晶纖維素、滑石粉，混勻，制粒，加入硬脂酸鎂，裝膠囊，即得。
所述的制備方法，其特征在于制備方法①具體步驟為以上九味藥材，取半夏、蟾酥、補(bǔ)骨脂130份分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；將剩余的補(bǔ)骨脂粉35份碎成粗粉與馬錢子粉混勻，用70％乙醇溶液作溶劑，浸漬48小時(shí)，以每分鐘3ml的速度(每1000g藥材)緩緩滲漉，收集初漉液，繼續(xù)滲漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和續(xù)漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金、人參、黃芪、當(dāng)歸、仙鶴草等五味混合，分別加8倍量水煎煮三次(仙鶴草后下)，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，加入上述細(xì)粉及預(yù)膠化淀粉、滑石粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法②具體步驟為以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；將補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸碎成粗粉，用70％乙醇溶液作溶劑，浸漬48小時(shí)，以每分鐘3ml的速度(每1000g藥材)緩緩滲漉，收集初漉液，繼續(xù)滲漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和續(xù)漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金、黃芪二味藥混合，分別加8倍量水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，加入上述細(xì)粉及馬錢子粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法③具體步驟為以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸、馬錢子粉加70％乙醇溶液回流提取三次，每次加70％乙醇溶液6倍量，加熱回流1小時(shí)，合并醇提液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.13(60℃)的清膏；其余郁金等二味藥，分別加8倍量水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，與上述清膏合并，加入上述細(xì)粉混勻，干燥成干膏，粉碎，加入微晶纖維素、滑石粉，混勻，制粒，加入硬脂酸鎂，裝膠囊，即得。
仙蟾膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于通過以下步驟進(jìn)行鑒別與測(cè)定(1)定性鑒別a、取仙蟾膠囊內(nèi)容物7g，研細(xì)，加三氯甲烷50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾渣、濾紙備用；濾液置水浴上蒸至近干，加中性氧化鋁(100～200目)1g，于60～70℃水浴上拌勻至干，加于中性氧化鋁柱(100～200目，3g，柱內(nèi)徑12cm，干法裝柱)上，加三氯甲烷40ml洗脫，收集洗脫液，置水浴上揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取酯蟾毒配基對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲烷-丙酮(4∶3∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b、取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取a項(xiàng)下的供試品溶液及上述對(duì)照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％氫氧化鉀甲醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c、取a項(xiàng)下備用的濾渣、濾紙，置水浴上揮干溶劑，加水1ml拌勻濕潤(rùn)后，加水飽和的正丁醇40ml加熱回流40分鐘，吸取上清液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌3次，每次20ml，再加正丁醇飽和的水20ml洗滌，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，殘?jiān)铀?ml加熱使溶解，加于已處理好的D101大孔樹脂柱(柱內(nèi)徑18cm，50ml)上，加水100ml洗脫，棄去水洗液，繼用30％乙醇100ml洗脫，棄去30％乙醇洗脫液，再以70％乙醇100ml洗脫，收集70％乙醇洗脫液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rg1、Re對(duì)照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)定量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸鈉與0.02mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液(用10％磷酸調(diào)節(jié)pH值2.8)(18∶82)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm；理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取士的寧對(duì)照品7mg、馬錢子堿對(duì)照品4mg，分別置10ml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取1ml，置同一10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含士的寧70ug、馬錢子堿40ug)；供試品溶液的制備取仙蟾膠囊裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加三氯甲烷30ml與濃氨試液1.5ml，輕輕搖勻，于室溫密閉放置24小時(shí)，濾過，用三氯甲烷10ml分次(5，5ml)洗滌容器、濾渣(通過同一濾紙)，洗液并入濾液，用硫酸溶液(3→100)振搖提取5次，每次15ml，合并硫酸提取液，用濃氨試液調(diào)pH值至9～10，用三氯甲烷振搖提取6次，每次15ml，合并三氯甲烷液，置水浴上揮干，殘?jiān)蛹状?0ml分次(4，3，3ml)使溶解，定量移入10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，密塞，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；仙蟾膠囊每粒含馬錢子以士的寧(C21H22N2O2)計(jì)，應(yīng)為0.20～0.40mg；以馬錢子堿(C23H26N2O4)計(jì)，不得少于0.10mg。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1(1)處方馬錢子粉50g蟾酥10g補(bǔ)骨脂165g半夏(制)50g郁金50g人參30g黃芪20g當(dāng)歸20g仙鶴草50g預(yù)膠化淀粉100g 滑石粉20g以上制成1000粒(2)制法以上九味藥材，取半夏、蟾酥、補(bǔ)骨脂130g分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用。將剩余的補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉與馬錢子粉混勻，照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲濾法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄IO)，用70％乙醇溶液作溶劑，浸漬48小時(shí)，以每分鐘3ml的速度緩緩滲漉，收集初漉液約225ml，繼續(xù)滲漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和續(xù)漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金等五味混合，分別加8倍量水煎煮三次(仙鶴草后下)，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，加入上述細(xì)粉及預(yù)膠化淀粉100g、滑石粉20g，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
本發(fā)明中“倍量”一詞的定義為中藥材重量與提取用液體的體積比，單位為g/ml。
(3)滲漉溶媒用量的考察①考察指標(biāo)的確定參考相關(guān)文獻(xiàn)及原片劑制法項(xiàng)，選擇馬錢子粉中馬錢子堿、士的寧，補(bǔ)骨脂中補(bǔ)骨脂素為有效指標(biāo)成分，選取5個(gè)水平，即于收集4、6、8、10、12倍量70％乙醇溶液滲漉液時(shí)段，以薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，考察其滲漉溶媒的用量。具體方法為稱取1/2處方量藥材，即馬錢子粉25g、補(bǔ)骨脂粗粉17.5g，混勻，照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IO)，用70％乙醇溶液作溶劑，浸漬48小時(shí)，以每分鐘3ml的速度緩緩滲漉，先后于收集滲漉液120ml(4倍量170ml)、200ml(6倍量255ml)、290ml(8倍量340ml)、370ml(10倍量425ml)、460ml(12倍量510ml)后，分別分開收集滲漉液50ml，備用。
②馬錢子堿、士的寧檢測(cè)方法及結(jié)果供試品溶液制備取上述各滲漉倍數(shù)時(shí)段后分開收集的50ml滲漉液，分別置水浴上揮去乙醇至無(wú)醇味，加水稀釋至20ml，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，加乙酸乙酯提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。
對(duì)照品溶液制備取士的寧對(duì)照品、馬錢子堿對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml各含1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。
照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液(4∶5∶0.6∶0.4)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。結(jié)果見

圖1。
由圖1可知，以4、6、8、10倍量70％乙醇滲漉，以薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，均能檢出馬錢子堿、士的寧斑點(diǎn)，且其斑點(diǎn)大小依次減小，同時(shí)以12倍量70％乙醇滲漉時(shí)已基本檢測(cè)不到馬錢子堿、士的寧斑點(diǎn)。
③補(bǔ)骨脂素的檢測(cè)方法及結(jié)果供試品溶液制備同上述②項(xiàng)下供試品溶液。
對(duì)照品溶液制備取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％氫氧化鉀甲醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果見圖2。
由圖2可知，以4、6、8、10倍量70％乙醇滲漉，以薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，均能檢出補(bǔ)骨脂素斑點(diǎn)，且其斑點(diǎn)大小依次減小，同時(shí)以12倍量70％乙醇滲漉時(shí)已基本檢測(cè)不到補(bǔ)骨脂素斑點(diǎn)。
綜上所述，以10倍量70乙醇滲漉，其馬錢子堿、士的寧、補(bǔ)骨脂素已基本滲漉完全，又考慮到滲漉容器差異及人員操作誤差，以12倍量的70乙醇滲漉做放大驗(yàn)證試驗(yàn)。
④放大驗(yàn)證試驗(yàn)稱取1個(gè)處方量藥材，即馬錢子粉50g、補(bǔ)骨脂粗粉35g，混勻，按上述確定的工藝進(jìn)行放大驗(yàn)證，并于收集6、8、10、12倍量70％乙醇滲漉液時(shí)段，即先后于收集滲漉液460ml(6倍量510ml)、630ml(8倍量680ml)、800ml(10倍量850ml)、970ml(12倍量1020ml)后，分別分開收集滲漉液50ml，同上法以TLC跟蹤檢測(cè)，結(jié)果見圖3～4。
由圖3～4可知，以10倍量70乙醇滲漉，其馬錢子粉中馬錢子堿、士的寧，補(bǔ)骨脂中補(bǔ)骨脂素已基本漉出。另考慮到制劑設(shè)備、生產(chǎn)成本等各種因素，故初步選定以10倍量的70乙醇滲漉，同時(shí)輔以薄層色譜法跟蹤檢測(cè)。
實(shí)施例2(1)處方馬錢子粉50g蟾酥10g補(bǔ)骨脂165g半夏(制)50g郁金50g人參30g黃芪20g當(dāng)歸20g仙鶴草50g以上制成1000粒
(2)制法以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用。將補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸碎成粗粉，照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲濾法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄IO)，用70％乙醇溶液作溶劑，浸漬48小時(shí)，以每分鐘3ml的速度緩緩滲漉，收集初漉液約225ml，繼續(xù)滲漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和續(xù)漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金等二味混合，分別加8倍量水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，加入上述細(xì)粉及馬錢子粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得。
實(shí)施例3(1)處方馬錢子粉50g蟾酥10g補(bǔ)骨脂165g半夏(制)50g郁金50g人參30g黃芪20g當(dāng)歸20g仙鶴草50g微晶纖維素50g 滑石粉25g以上制成1000粒(2)制法以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸、馬錢子粉加70％乙醇回流提取三次，每次加70％乙醇6倍量，加熱回流1小時(shí)，合并醇提液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.13(60℃)的清膏；其余郁金等二味藥，分別加8倍量水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，與上述清膏合并，加入上述細(xì)粉混勻，干燥成干膏，粉碎，加入微晶纖維素、滑石粉，混勻，制粒，加入硬脂酸鎂，裝膠囊，制成1000粒，即得。
質(zhì)量控制性狀仙蟾膠囊為硬膠囊劑，內(nèi)容物為棕黃色至棕色的顆粒和粉末；氣微香，味苦。
鑒別(1)取仙蟾膠囊內(nèi)容物7g，研細(xì)，加三氯甲烷50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾渣、濾紙備用。濾液置水浴上蒸至近干，加中性氧化鋁(100～200目)1g，于60～70℃水浴上拌勻至干，加于中性氧化鋁柱(100～200目，3g，柱內(nèi)徑12cm，干法裝柱)上，加三氯甲烷40ml洗脫，收集洗脫液，置水浴上揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。另取蟾酥毒配基對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲烷-丙酮(4∶3∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(2)取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取鑒別(1)項(xiàng)下的供試品溶液及上述對(duì)照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％氫氧化鉀甲醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(3)取鑒別(1)項(xiàng)下備用的濾渣、濾紙，置水浴上揮干溶劑，加水1ml拌勻濕潤(rùn)后，加水飽和的正丁醇40ml加熱回流40分鐘，吸取上清液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌3次，每次20ml，再加正丁醇飽和的水20ml洗滌，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，殘?jiān)铀?ml加熱使溶解，加于已處理好的D101大孔樹脂柱(柱內(nèi)徑18cm，50ml)上，加水100ml洗脫，棄去水洗液，繼用30％乙醇100ml洗脫，棄去30％乙醇洗脫液，再以70％乙醇100ml洗脫，收集70％乙醇洗脫液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rg1、Re對(duì)照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國(guó)藥典2005年版一部附錄IL)。
含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸鈉與0.02mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液(用10％磷酸調(diào)節(jié)pH值2.8)(18∶82)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取士的寧對(duì)照品7mg、馬錢子堿對(duì)照品4mg，分別置10ml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取1ml，置同一10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含士的寧70ug、馬錢子堿40ug)。
供試品溶液的制備取仙蟾膠囊裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加三氯甲烷30ml與濃氨試液1.5ml，輕輕搖勻，于室溫密閉放置24小時(shí)，濾過，用三氯甲烷10ml分次(5，5ml)洗滌容器、濾渣(通過同一濾紙)，洗液并入濾液，用硫酸溶液(3→100)振搖提取5次，每次15ml，合并硫酸提取液，用濃氨試液調(diào)pH值至9～10，用三氯甲烷振搖提取6次，每次15ml，合并三氯甲烷液，置水浴上揮干，殘?jiān)蛹状?0ml分次(4，3，3ml)使溶解，定量移入10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，密塞，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
仙蟾膠囊每粒含馬錢子以士的寧(C21H22N2O2)計(jì)，應(yīng)為0.20～0.40mg；以馬錢子堿(C23H26N2O4)計(jì)，不得少于0.10mg。
功能主治化瘀散結(jié)，益氣止痛。用于食道癌、胃癌、肺癌。
權(quán)利要求
1.仙蟾膠囊，原料藥由馬錢子粉、蟾酥、補(bǔ)骨脂、半夏(制)、郁金、人參、黃芪、當(dāng)歸、仙鶴草組成，其特征在于(1)配方重量份為馬錢子粉50蟾酥10補(bǔ)骨脂165半夏(制)50郁金50人參30黃芪20當(dāng)歸20仙鶴草50(2)輔料包括預(yù)膠化淀粉、滑石粉、微晶纖維素等。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仙蟾膠囊的制備方法，其特征在于制備方法①以上九味藥材，取半夏、蟾酥及50％-80％左右的補(bǔ)骨脂分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；將剩余的補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉與馬錢子粉混勻，用50-80％乙醇溶液作溶劑，浸漬36～72小時(shí)，緩緩滲漉，收集漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金、人參、黃芪、當(dāng)歸、仙鶴草等五味混合，加水煎煮(仙鶴草后下)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮成清膏，加入上述細(xì)粉及預(yù)膠化淀粉、滑石粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法②以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；將補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸碎成粗粉，用50-80％乙醇作溶劑，浸漬36～72小時(shí)，緩緩滲漉，收集初漉液，繼續(xù)滲漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和續(xù)漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與郁金、黃芪二味混合，加水煎煮，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至成清膏，加入上述細(xì)粉及馬錢子粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法③以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸、馬錢子粉加乙醇回流提取，加熱回流1～3小時(shí)，合并醇提液，濾過，濾液濃縮成清膏；其余郁金、黃芪二味藥，加水煎煮，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮成清膏，與上述清膏合并，加入上述細(xì)粉混勻，干燥成干膏，粉碎，加入微晶纖維素、滑石粉，混勻，制粒，加入硬脂酸鎂，裝膠囊，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于制備方法①具體步驟為以上九味藥材，取半夏、蟾酥、補(bǔ)骨脂130份分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；將剩余的補(bǔ)骨脂粉35份碎成粗粉與馬錢子粉混勻，用70％乙醇溶液作溶劑，浸漬48小時(shí)，以每分鐘3ml的速度(每1000g藥材)緩緩滲漉，收集初漉液，繼續(xù)滲漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和續(xù)漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金、人參、黃芪、當(dāng)歸、仙鶴草等五味混合，分別加8倍量水煎煮三次(仙鶴草后下)，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，加入上述細(xì)粉及預(yù)膠化淀粉、滑石粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法②具體步驟為以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；將補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸碎成粗粉，用70％乙醇溶液作溶劑，浸漬48小時(shí)，以每分鐘3ml的速度(每1000g藥材)緩緩滲漉，收集初漉液，繼續(xù)滲漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和續(xù)漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金、黃芪二味藥混合，分別加8倍量水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，加入上述細(xì)粉及馬錢子粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法③具體步驟為以上九味藥材，取半夏、蟾酥、人參分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用；補(bǔ)骨脂粉、仙鶴草、當(dāng)歸、馬錢子粉加70％乙醇溶液回流提取三次，每次加70％乙醇溶液6倍量，加熱回流1小時(shí)，合并醇提液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.13(60℃)的清膏；其余郁金等二味藥，分別加8倍量水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.20(60℃)的清膏，與上述清膏合并，加入上述細(xì)粉混勻，干燥成干膏，粉碎，加入微晶纖維素、滑石粉，混勻，制粒，加入硬脂酸鎂，裝膠囊，即得。
4.仙蟾膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于通過以下步驟進(jìn)行鑒別與測(cè)定(1)定性鑒別a、取仙蟾膠囊內(nèi)容物7g，研細(xì)，加三氯甲烷50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾渣、濾紙備用；濾液置水浴上蒸至近干，加中性氧化鋁(100～200目)1g，于60～70℃水浴上拌勻至干，加于中性氧化鋁柱(100～200目，3g，柱內(nèi)徑12cm，干法裝柱)上，加三氯甲烷40ml洗脫，收集洗脫液，置水浴上揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取酯蟾毒配基對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲烷-丙酮(4∶3∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b、取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取a項(xiàng)下的供試品溶液及上述對(duì)照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％氫氧化鉀甲醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c、取a項(xiàng)下備用的濾渣、濾紙，置水浴上揮干溶劑，加水1ml拌勻濕潤(rùn)后，加水飽和的正丁醇40ml加熱回流40分鐘，吸取上清液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌3次，每次20ml，再加正丁醇飽和的水20ml洗滌，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，殘?jiān)铀?ml加熱使溶解，加于已處理好的D101大孔樹脂柱(柱內(nèi)徑18cm，50ml)上，加水100ml洗脫，棄去水洗液，繼用30％乙醇100ml洗脫，棄去30％乙醇洗脫液，再以70％乙醇100ml洗脫，收集70％乙醇洗脫液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rg1、Re對(duì)照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)定量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸鈉與0.02mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液(用10％磷酸調(diào)節(jié)pH值2.8)(18∶82)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm；理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取士的寧對(duì)照品7mg、馬錢子堿對(duì)照品4mg，分別置10ml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取1ml，置同一10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含士的寧70ug、馬錢子堿40ug)；供試品溶液的制備取仙蟾膠囊裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加三氯甲烷30ml與濃氨試液1.5ml，輕輕搖勻，于室溫密閉放置24小時(shí)，濾過，用三氯甲烷10ml分次(5，5ml)洗滌容器、濾渣(通過同一濾紙)，洗液并入濾液，用硫酸溶液(3→100)振搖提取5次，每次15ml，合并硫酸提取液，用濃氨試液調(diào)pH值至9～10，用三氯甲烷振搖提取6次，每次15ml，合并三氯甲烷液，置水浴上揮干，殘?jiān)蛹状?0ml分次(4，3，3ml)使溶解，定量移入10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，密塞，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；仙蟾膠囊每粒含馬錢子以士的寧(C21H22 N2O2)計(jì)，應(yīng)為0.20～0.40mg；以馬錢子堿(C23H26N2O4)計(jì)，不得少于0.10mg。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種仙蟾膠囊及其制備方法、質(zhì)量控制方法，原料藥由馬錢子粉、蟾酥、補(bǔ)骨脂、半夏(制)、郁金、人參、黃芪、當(dāng)歸、仙鶴草組成，半夏、蟾酥及50％－80％左右的補(bǔ)骨脂分別粉碎成細(xì)粉，混勻，備用。將剩余的補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉與馬錢子粉混勻，用乙醇作溶劑，浸漬后滲漉，收集漉液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏，藥渣與其余郁金等五味混合，分別加水煎煮，濾過，濾液加入上述清膏，混勻，減壓濃縮成清膏，加入上述細(xì)粉及預(yù)膠化淀粉、滑石粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得仙蟾膠囊。發(fā)明還公開了仙蟾膠囊的質(zhì)量控制方法，以及該膠囊劑型另外2種制備工藝。本發(fā)明研究的仙蟾膠囊具有化瘀散結(jié)，益氣止痛之功效。用于食道癌、胃癌、肺癌的治療。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1879850SQ20061004040
公開日2006年12月20日 申請(qǐng)日期2006年5月6日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月6日
發(fā)明者余世春 申請(qǐng)人:安徽科創(chuàng)中藥天然藥物研究所有限責(zé)任公司