專利名稱：家蠶抗病毒型微生物添加劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是涉及一種家蠶抗病毒型微生物添加劑。本發(fā)明還涉及這種微生物添加劑的制備方法。
背景技術(shù)：
蠶絲生產(chǎn)，在我國(guó)已有5500多年歷史，是中國(guó)傳統(tǒng)的特色產(chǎn)業(yè)，也是我國(guó)對(duì)外出口貿(mào)易中能夠壟斷國(guó)際市場(chǎng)的一種特色商品。對(duì)蠶業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，各級(jí)政府均予以高度重視，科技界對(duì)科學(xué)養(yǎng)蠶也進(jìn)行了不斷研究和探討，并在桑、蠶品種選育，蠶病防治等方面取得了很大的進(jìn)展。但在養(yǎng)蠶過程中，家蠶經(jīng)消化道感染或經(jīng)外物傳染的病毒性、細(xì)菌性疾病以及腸道病等仍經(jīng)常爆發(fā)，且無(wú)防治良方，嚴(yán)重影響家蠶成活發(fā)育、上蔟、結(jié)繭以及蠶繭產(chǎn)量和繭絲質(zhì)量，也影響著蠶農(nóng)和絲綢加工出口企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。
從事蠶業(yè)研究或養(yǎng)蠶實(shí)踐都知道細(xì)菌性疾病易治，病毒性疾病難防。家蠶一旦發(fā)病，治療為時(shí)已晚，靠化學(xué)藥物治療，其收效甚微，特別是病毒性疾病如消化道疾病、血液疾病，根本無(wú)藥可治?？梢?，家蠶發(fā)病后的藥物治療是被動(dòng)的，也難于達(dá)到降低病亡率，增加蠶繭產(chǎn)量，提高繭絲質(zhì)量的目的。
因此，本領(lǐng)域中迫切需要有能夠主動(dòng)有效增強(qiáng)家蠶抗體，抗菌抗病毒，降低病亡率，增加產(chǎn)繭量，提高蠶絲質(zhì)量的蠶用復(fù)合微生物添加劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有背景技術(shù)的不足之處，而提供一種家蠶抗病毒型微生物添加劑。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供這種家蠶抗病毒型微生物添加劑的制備方法。
本發(fā)明的目的是通過如下措施來(lái)達(dá)到的家蠶抗病毒型微生物添加劑，它是由地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus licheniformis SHK3，經(jīng)發(fā)酵而成；保藏號(hào)為CCTCC NOM206115，保藏日期為2006年10月31日。
地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus licheniformis SHK3，保藏號(hào)為CCTCC NOM206115的菌種鑒定報(bào)告菌種來(lái)源武漢農(nóng)大生物科技有限公司檢測(cè)結(jié)果

定名Bacillus licheniformis SHK3，地衣芽孢桿菌SHK3微生物的特征區(qū)別菌落較扁平、圓形、邊緣整齊、皺紋、粗糙、中央出現(xiàn)小圓圈、淺褐色。
家蠶抗病毒型微生物添加劑的制備方法，它包括如下步驟①菌種培養(yǎng)將地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus lichenifomisSHK3菌種移植到營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置于36℃溫箱中，培養(yǎng)24小時(shí)，使地衣芽孢桿菌復(fù)壯；②搖床培養(yǎng)取上述斜面培養(yǎng)基菌種接種至5瓶500毫升三角燒瓶?jī)?nèi)，每瓶三角燒瓶?jī)?nèi)裝120毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，每瓶接種3環(huán)，接種后移至搖床培養(yǎng)18-24小時(shí)，溫度為36℃，然后接種至50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)，發(fā)酵罐內(nèi)裝35升培養(yǎng)液；③50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌30min，待冷至37℃時(shí)，在通氣比為0.4-2∶1，轉(zhuǎn)速為300-500r/min，溫度為35-37℃的條件下，發(fā)酵18-24小時(shí)；④1噸發(fā)酵罐培養(yǎng)內(nèi)裝700升培養(yǎng)液，用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌35min，待冷至37℃時(shí)，將上述50升發(fā)酵罐中培養(yǎng)的種子菌接種到1噸發(fā)酵罐中，進(jìn)行發(fā)酵；在通氣比為0.4-1∶1，轉(zhuǎn)速為100-350r/min，溫度為35-37℃的條件下，發(fā)酵時(shí)間36-48小時(shí)；調(diào)PH值3.5-5，即為家蠶抗病毒型微生物添加劑水劑。
在上這技術(shù)方案中，所述發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基成份為酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化鈣0.2％、磷酸氫二鈉0.1％、磷酸二氫鉀0.1％、其余為水。
在上這技術(shù)方案中，它還包括如下步驟在微生物添加劑水劑中加入載體，經(jīng)干燥后再經(jīng)混勻成固體粉狀物，即為抗病毒細(xì)菌組合物固體制劑。
在上這技術(shù)方案中，所述是用干燥淀粉為載體，以發(fā)酵液1重量份加干燥淀粉1.25重量份在不斷攪拌下加入，攪拌均勻成顆粒狀，再經(jīng)干燥至含水量在10-12％之間即可。
本發(fā)明是利用抗菌、抗病毒的微生物及其分泌的代謝產(chǎn)物等組成，可增強(qiáng)蠶體免疫力，阻止病毒吸入和病毒的復(fù)制，從而達(dá)到抗菌、抗病毒的目的。另外，微生物分泌的多種消化酶，為纖維素酶，半纖維素酶，蛋白酶和淀粉酶等，能促進(jìn)家蠶消化吸收，提高桑葉的利用效率，增加蠶繭的重量。同時(shí)，微生物添加劑是純天然的蠶絲改善劑，對(duì)家蠶和人無(wú)任何毒副作用。因此，本發(fā)明是集抗菌、抗病毒、增強(qiáng)家蠶免疫力，提高蠶繭品質(zhì)，為廣大蠶農(nóng)增產(chǎn)增收，為絲綢加工企業(yè)增效的一種純天然抗病型微生物添加劑。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1家蠶抗病毒型復(fù)合微生物添加劑(水劑)的制備方法，它包括如下步驟①菌種培養(yǎng)將地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus licheniformisSHK3菌種移植到營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置于36℃溫箱中，培養(yǎng)24小時(shí)，使地衣芽孢桿菌復(fù)壯；②搖床培養(yǎng)取上述斜面培養(yǎng)基菌種接種至5瓶500毫升三角燒瓶?jī)?nèi)，每瓶三角燒瓶?jī)?nèi)裝120毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，每瓶接種3環(huán)，接種后移至搖床培養(yǎng)18小時(shí)，溫度為36℃，然后接種至50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)，發(fā)酵罐內(nèi)裝35升培養(yǎng)液；③50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌30min，待冷至37℃時(shí)，在通氣比為0.4∶1，轉(zhuǎn)速為300r/min，溫度為35℃的條件下，發(fā)酵18小時(shí)；④1噸發(fā)酵罐培養(yǎng)內(nèi)裝700升培養(yǎng)液，用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌35min，待冷至37℃時(shí)，將上述50升發(fā)酵罐中培養(yǎng)的種子菌接種到1噸發(fā)酵罐中，進(jìn)行發(fā)酵；在通氣比為0.4∶1，轉(zhuǎn)速為100r/min，溫度為35℃的條件下，發(fā)酵時(shí)間36小時(shí)；調(diào)PH值3.5，即為家蠶抗病毒型微生物添加劑水劑。
所述發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基成份為酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化鈣0.2％、磷酸氫二鈉0.1％、磷酸二氫鉀0.1％、其余為水。
實(shí)施例2家蠶抗病毒型復(fù)合微生物添加劑(水劑)的制備方法，它包括如下步驟①菌種培養(yǎng)將地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus licheniformisSHK3菌種移植到營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置于36℃溫箱中，培養(yǎng)24小時(shí)，使地衣芽孢桿菌復(fù)壯；②搖床培養(yǎng)取上述斜面培養(yǎng)基菌種接種至5瓶500毫升三角燒瓶?jī)?nèi)，每瓶三角燒瓶?jī)?nèi)裝120毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，每瓶接種3環(huán)，接種后移至搖床培養(yǎng)24小時(shí)，溫度為36℃，然后接種至50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)，發(fā)酵罐內(nèi)裝35升培養(yǎng)液；③50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌30min，待冷至37℃時(shí)，在通氣比為2∶1，轉(zhuǎn)速為500r/min，溫度為37℃的條件下，發(fā)酵24小時(shí)；④1噸發(fā)酵罐培養(yǎng)內(nèi)裝700升培養(yǎng)液，用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌35min，待冷至37℃時(shí)，將上述50升發(fā)酵罐中培養(yǎng)的種子菌接種到1噸發(fā)酵罐中，進(jìn)行發(fā)酵；在通氣比為1∶1，轉(zhuǎn)速為350r/min，溫度為37℃的條件下，發(fā)酵時(shí)間48小時(shí)；調(diào)PH值5，即為家蠶抗病毒型微生物添加劑水劑。
所述發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基成份為酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化鈣0.2％、磷酸氫二鈉0.1％、磷酸二氫鉀0.1％、其余為水。
實(shí)施例3家蠶抗病毒型復(fù)合微生物添加劑(水劑)的制備方法，它包括如下步驟
①菌種培養(yǎng)將地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus licheniformisSHK3菌種移植到營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置于36℃溫箱中，培養(yǎng)24小時(shí)，使地衣芽孢桿菌復(fù)壯；②搖床培養(yǎng)取上述斜面培養(yǎng)基菌種接種至5瓶500毫升三角燒瓶?jī)?nèi)，每瓶三角燒瓶?jī)?nèi)裝120毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，每瓶接種3環(huán)，接種后移至搖床培養(yǎng)21小時(shí)，溫度為36℃，然后接種至50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)，發(fā)酵罐內(nèi)裝35升培養(yǎng)液；③50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌30min，待冷至37℃時(shí)，在通氣比為1.2∶1，轉(zhuǎn)速為400r/min，溫度為36℃的條件下，發(fā)酵21小時(shí)；④1噸發(fā)酵罐培養(yǎng)內(nèi)裝700升培養(yǎng)液，用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌35min，待冷至37℃時(shí)，將上述50升發(fā)酵罐中培養(yǎng)的種子菌接種到1噸發(fā)酵罐中，進(jìn)行發(fā)酵；在通氣比為0.4-1∶1，轉(zhuǎn)速為225r/min，溫度為36℃的條件下，發(fā)酵時(shí)間42小時(shí)；調(diào)PH值4，即為家蠶抗病毒型微生物添加劑水劑。
所述發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基成份為酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化鈣0.2％、磷酸氫二鈉0.1％、磷酸二氫鉀0.1％、其余為水。
實(shí)施例4將上述實(shí)施例1或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?中的水劑加入干燥淀粉，以發(fā)酵液1重量份加干燥淀粉1.25重量份在不斷攪拌下加入并攪拌均勻成顆粒狀，再經(jīng)干燥至含水量在10-12％之間，即為固體制劑。應(yīng)用實(shí)例及使用方法抗病型蠶用微生物添加劑用于家蠶添食，使用方法將1毫升本劑(水劑或粉劑)倒入清潔的瓶中，再加入8毫升至10毫升冷開水(或純凈水)，充分搖動(dòng)后放置浸泡5-8小時(shí)(一般情況下，32-34℃時(shí)，浸泡5小時(shí)，26-28℃時(shí)，浸泡8小時(shí)。若溫度過低，則浸泡延長(zhǎng)，溫度高，則浸泡時(shí)間相對(duì)縮短)，用小型噴霧器噴灑桑葉，邊噴邊抄動(dòng)，使桑葉西面沾上本劑溶液，以不滴水為宜喂蠶。從三齡期開始，隔天添食一次，至上蔟為止。一般1斤浸泡后的水劑可噴灑10斤桑葉，供一張蠶(22000-30000頭，一般為25000頭)食用一次。
本發(fā)明抗病型蠶用復(fù)合微生物添加劑水劑的保質(zhì)期為半年，固體粉劑的保質(zhì)期為1年。
應(yīng)用本劑對(duì)家蠶的生長(zhǎng)發(fā)育，預(yù)防蠶病，蠶繭產(chǎn)量的對(duì)比效果為表1、表2、表3。
本發(fā)明可預(yù)防家蠶細(xì)菌性和病毒性疾病，從而逐漸替代傳統(tǒng)化學(xué)藥物，達(dá)到預(yù)防家蠶細(xì)菌性和病毒性疾病，增加蠶繭重量，提高繭絲質(zhì)量，縮短飼養(yǎng)周期，節(jié)省桑葉，提高經(jīng)濟(jì)效益。
表1抗病毒型蠶用復(fù)合微生物添加劑對(duì)家蠶的病害預(yù)防效果


表2抗病毒型蠶用復(fù)合微生物添加劑對(duì)家蠶生長(zhǎng)發(fā)育及繭質(zhì)影響

表3抗病型復(fù)合微生物流回對(duì)家蠶的產(chǎn)量效果

經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析可知采用本發(fā)明抗病毒型蠶用微生物添加劑養(yǎng)蠶后有如下效果(1)添食本發(fā)明添加劑可節(jié)約桑葉15％；(2)增加蠶繭產(chǎn)量12.5％；(3)提高家蠶抗病率18％；(4)縮短飼養(yǎng)時(shí)間10小時(shí)；(5)提高蠶繭質(zhì)量1個(gè)等組級(jí)。從而提高養(yǎng)蠶戶的經(jīng)濟(jì)效益15％左右。
權(quán)利要求
1.家蠶抗病毒型微生物添加劑，其特征在于它是由地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus licheniformis SHK3，經(jīng)發(fā)酵而成；保藏號(hào)為CCTCCNOM206115。
2.家蠶抗病毒型微生物添加劑的制備方法，其特征在于它包括如下步驟①菌種培養(yǎng)將地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus licheniformisSHK3菌種移植到營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置于36℃溫箱中，培養(yǎng)24小時(shí)，使地衣芽孢桿菌復(fù)壯；②搖床培養(yǎng)取上述斜面培養(yǎng)基菌種接種至5瓶500毫升三角燒瓶?jī)?nèi)，每瓶三角燒瓶?jī)?nèi)裝120毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，每瓶接種3環(huán)，接種后移至搖床培養(yǎng)18-24小時(shí)，溫度為36℃，然后接種至50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)，發(fā)酵罐內(nèi)裝35升培養(yǎng)液；③50升種子發(fā)酵罐培養(yǎng)用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌30min，待冷至37℃時(shí)，在通氣比為0.4-2∶1，轉(zhuǎn)速為300-500r/min，溫度為35-37℃的條件下，發(fā)酵18-24小時(shí)；④1噸發(fā)酵罐培養(yǎng)內(nèi)裝700升培養(yǎng)液，用菜油或豆油作消泡劑，以121℃滅菌35min，待冷至37℃時(shí)，將上述50升發(fā)酵罐中培養(yǎng)的種子菌接種到1噸發(fā)酵罐中，進(jìn)行發(fā)酵；在通氣比為0.4-1∶1，轉(zhuǎn)速為100-350r/min，溫度為35-37℃的條件下，發(fā)酵時(shí)間36-48小時(shí)；調(diào)PH值3.5-5，即為家蠶抗病毒型微生物添加劑水劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種家蠶抗病毒型微生物添加劑的制備方法，其特征在于所述發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基成份為酵母膏0.2％、蛋白胨1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、氯化鈣0.2％、磷酸氫二鈉0.1％、磷酸二氫鉀0.1％、其余為水。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種家蠶抗病毒型微生物添加劑的制備方法，其特征在于它還包括如下步驟在微生物添加劑水劑中加入載體，經(jīng)干燥后再經(jīng)混勻成固體粉狀物，即為抗病毒細(xì)菌組合物固體制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種家蠶抗病毒型微生物添加劑的制備方法，其特征在于所述是用干燥淀粉為載體，以發(fā)酵液1重量份加干燥淀粉1.25重量份在不斷攪拌下加入，攪拌均勻成顆粒狀，再經(jīng)干燥至含水量在10-12％之間即可。
全文摘要
本發(fā)明家蠶抗病毒型微生物添加劑，它是由地衣芽孢桿菌SHK3、Bacillus licheniformis SHK3，經(jīng)發(fā)酵而成；保藏號(hào)為CCTCC NO206115。本發(fā)明克服了現(xiàn)有養(yǎng)蠶過程中，家蠶經(jīng)消化道感染或經(jīng)外物傳染的病毒性、細(xì)菌性疾病以及腸道病等仍經(jīng)常爆發(fā)，且無(wú)防治良方的不足。本發(fā)明是一種集抗菌、抗病毒、增強(qiáng)家蠶免疫力，提高蠶繭的一種純天然抗病型微生物添加劑。本發(fā)明還同時(shí)公開了這種家蠶抗病毒型微生物添加劑(水劑和粉劑)的制備方法。
文檔編號(hào)A61P31/00GK1969653SQ200610124979
公開日2007年5月30日 申請(qǐng)日期2006年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月9日
發(fā)明者汪夢(mèng)萍, 蘇雄, 湯錫予, 黃江紅, 向紀(jì)財(cái), 羅承桂 申請(qǐng)人:武漢農(nóng)大生物科技有限公司