專利名稱：：采用rhPDGF-BB和生物相容性基質(zhì)的頜面骨增高的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明包括用于頜面骨增高的組合物和方法，所述方法采用了含有PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)的組合物，所述組合物任選地包含生物相容性粘合劑。
背景技術(shù)：
：在許多情況下需要頜面骨增高，包括牙槽嵴增高(包括在牙槽骨中，在上頜竇的骨壁中的骨臼和缺損的修復(fù)中的水平和垂直嵴增高)。受引導(dǎo)的骨再生(GBR)是源自于受引導(dǎo)的組織再生的圍繞天然牙的再生過程，其可用于骨融合種植體植入前或者與骨融合種植體植入聯(lián)合使用的嵴增高。最初，受引導(dǎo)的組織再生的生物原理由Nyman和Karring于1980年代早期所發(fā)現(xiàn)。該外科技術(shù)涉及細(xì)胞閉合屏障膜的植入以保護(hù)血凝塊并包圍骨缺損形成隔離空間，以允許骨再生而沒有來自于其它組織的竟?fàn)帯chenk等(/"f.Oa/A^力〃o/ac/w//a""1994;9(l);13-29)描迷了在通過非常類似于正常骨骼生長(zhǎng)發(fā)育方式的一系列生物步驟的程序性步驟中，新再生的骨是如何發(fā)展的。這些發(fā)現(xiàn)已由Simion等利用使用了聚四氟乙烯(ePTFE)肽強(qiáng)化膜的相同犬類模型進(jìn)行證實(shí)(C//".O"http://wp/a""尺仏1999;10(2):73-84)。獲得自臨床研究的證據(jù)也表明再生骨能夠經(jīng)受住功能矯形力所施加的咬合面荷載，并因此長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定(Mayfield等(C/Z".Oa〃w;/aw"A仏1998;9(5)297-302))。GBR已被很好地記錄，研究闡迷了其在水平和垂直嵴增高過程中的高效性和可預(yù)見性。被認(rèn)為是所有GBR技術(shù)中技術(shù)要求最高的該最終過程首先由Simion等于1994年提出(/"f.尸enodo"〃cAeWom〃veDe"f.1994;14(6):496:511)。它指出當(dāng)骨高度對(duì)于種植體植入而言不足時(shí)，長(zhǎng)期穩(wěn)定性，或者當(dāng)修復(fù)時(shí)將導(dǎo)致過長(zhǎng)的牙冠和不利的種植體/牙冠比。當(dāng)應(yīng)用GBR原理時(shí)，多種材料可供用于骨替代物和膜。人類臨床研究已顯示了采用e-PTFE膜和填充材料(自生骨(Tinti等，丄尸e"odo""cs尺e^o^mve1996;16(3):220-9，Tinti等，/"f.尸en'odow"cs尺eWora〃'veDe耽1998;18(5):434-43))和脫4丐凍干骨移植物(DFDBA)的成功垂直骨增高的可能性(Simion等，/"f./尸enodo""w尺eW畫〃veD緩1998;18(1):8曙23))。關(guān)于牙槽嵴增高過程的主要問題之一是由于軟組織開裂造成的過早膜暴露，從而導(dǎo)致局部感染和不完全的骨再生，危及最終結(jié)果。為了克服這些問題，在GBR中使用的材料和采用的外科技術(shù)經(jīng)常被修改和適應(yīng)寸生改變(Simion等，尸enoc/ow〃c^/eWora〃veDewf.1994;14(2):166-80，Simionetal，/C//".尸e"o^"M/.1995;22(4);321-31).對(duì)于上下頜骨均需要垂直嵴增高。因此，人們需要沒有與現(xiàn)有技術(shù)方法相關(guān)的這些問題，并能有效地增高骨骼，尤其是增高頜面骨，并尤其是牙槽脊的新型方法和材料，從而可以獲得穩(wěn)定的骨融合種植體
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了用于在所希望的領(lǐng)面位置增高骨骼的組合物的用途。本發(fā)明提供了用于骨增高(boneaugmentation),尤其是頜面骨增高的有效新型方法和組合物，所述有效新型方法和組合物沒有現(xiàn)有技術(shù)方法相關(guān)的那些問題。這些方法包括但不局限于在上頜骨或下頜骨上的骨增高。這些骨增高位點(diǎn)可包括但不局限于牙槽嵴增高，牙槽骨修復(fù)，竇內(nèi)提升和與上頜竇相鄰的上頜骨中的缺損。牙槽嵴增高是本發(fā)明的一種實(shí)施方式，其包括水平(橫向)和垂直嵴增高。在這些方法中使用的組合物包含血小板源生長(zhǎng)因子(PDGF),諸如重組人類血小板源生長(zhǎng)因子(rhPDGF)，生物相容性基質(zhì)以及任選的(optionally)可再吸收的膜。在本發(fā)明中使用這些組合物可有效地再生骨骼并有助于形成穩(wěn)定的骨融合種植體。盡管可以利用本發(fā)明增高任何骨骼，但下頜骨和上頜骨是優(yōu)選的用于增高的骨骼。下頜骨和/或上頜骨中的牙槽嵴的增高是本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式。在一方面，由本發(fā)明提供的用于促進(jìn)骨增高的組合物包含含有PDGF的溶液和生物相容性基質(zhì)，其中溶液分散在生物相容性基質(zhì)中。在一些實(shí)施方式中，PDGF以約0.01mg/ml-約10mg/ml，約0.05mg/ml~約5mg/ml，約0.1mg/ml~約1.0mg/ml的濃度存在于溶液中。在所述溶液中的PDGF的濃度可以在上迷的任意濃度范圍里。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，PDGF包4舌PDGF同二聚體和異二聚體，包括PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC、PDGF-DD及其混合物和衍生物。在一種實(shí)施方式中，PDGF包括PDGF-BB。在另一種實(shí)施方式中，PDGF包括重組人類(rh)PDGF諸如rhPDGF-BB。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，PDGF包括PDGF片段。在一種實(shí)施方式中，rhPDGF-B包括以下片段整個(gè)B鏈的氨基酸序列1~31、1~32、33~108、33-109和/或1~108。PDGF的B鏈的完整氨基酸序列(1~109)在美國(guó)專利5,516,896的圖15中提供。應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的rhPDGF組合物可包括完整的rhPDGF-B(l~109)及其片段的組合?？梢圆捎闷渌黀DGF片段，諸如在美國(guó)專利5,516,896中所公開的那些。根據(jù)一種優(yōu)選實(shí)施方式，rhPDGF-BB包括rhPDGF-B(1~109)的整個(gè)氨基酸序列的至少65%。根椐本發(fā)明的一些實(shí)施方式，生物相容性基質(zhì)包含骨棚架(scaffolding)材料，諸如骨塊(boneblock)。在一些實(shí)施方式中，骨塊可以是脫鈣的。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料包括磷酸鉀(calciumphosphate)。在一種實(shí)施方式中，磷酸鈣包括J3-磷酸三鉀((3-tricalciumphosphate》在另一方面，本發(fā)明提供了用于促進(jìn)骨增高的組合物，所述組合物包含分散在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液，其中生物相容性基質(zhì)包含骨塊和生物相容性粘合劑。PDGF溶液可具有如以上所迷的PDGF濃度。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料包括磷酸鈣。在一種實(shí)施方式中，磷酸4丐包括(3-磷酸三4丐。此外，根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式，生物相容性粘合劑包括蛋白質(zhì)、多糖、核酸、烴類、合成聚合物或其混合物。在一種實(shí)施方式中，生物相容性粘合劑包括膠原質(zhì)。在另一種實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)包括透明質(zhì)酸。在另一方面，本發(fā)明提供了試劑盒，所述試劑盒包括在第一包裝中的生物相容性基質(zhì)和在第二包裝中的含有PDGF的溶液。在一些實(shí)施方式中，所述溶液含有預(yù)定濃度的PDGF。PDGF的濃度可根據(jù)進(jìn)行的外科過程而預(yù)先確定。此外，在一些實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可以以預(yù)定量存在于試劑盒中。由試劑盒提供的生物相容性基質(zhì)的量取決于所進(jìn)行的外科過程。在一些實(shí)施方式中，裝有PDGF溶液的第二包裝包括注射器。注射器能有助于將PDGF溶液分散在生物相容性基質(zhì)中以施用在外科位點(diǎn)，諸如在骨增高過程中的骨融合位點(diǎn)。在一些實(shí)施方式中，試劑盒裝有可用在本發(fā)明的方法中的可再吸收膜。本發(fā)明另外提供了制備用在骨增高過程中的組合物的方法，以及進(jìn)行骨增高過程的方法。在一種實(shí)施方式中，制備組合物的方法包括提供含有PDGF的溶液，提供生物相容性基質(zhì)，并將所迷溶液分散在生物相容性基質(zhì)中。在另一實(shí)施方式中，進(jìn)行骨增高過程的方法包括提供含有分散在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物，并將所迷組合物施用于希望骨增高的至少一個(gè)位點(diǎn)。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括下頜骨或上頜骨的牙槽嵴的增高。隨后將增高的牙槽脊準(zhǔn)備好以接受骨融合種植體。因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供含有處于生物相容性基質(zhì)中的PDGF的組合物的用途，所述組合物可用于促進(jìn)骨增高，尤其是頜面骨增高。本發(fā)明的一個(gè)目的是提供含有在生物相容性基質(zhì)中的PDGF的組合物在藥物制備中的用途，所述藥物可用于促進(jìn)骨增高，尤其是頜面骨增高。本發(fā)明的一個(gè)目的是提供含有在生物相容性基質(zhì)中的PDGF的組合物，所述組合物可用于促進(jìn)骨增高。本發(fā)明的一個(gè)目的是提供含有在生物相容性基質(zhì)中的PDGF的組合物，所述組合物可用于促進(jìn)頜面骨增高。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有在生物相容性基質(zhì)中的PDGF的組合物，所述組合物可用于促進(jìn)在上頜骨或下頜骨中的骨增高。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供含有在生物相容性基質(zhì)中的PDGF的組合物，所迷組合物可用于促進(jìn)在上頜骨或下頜骨中的骨增高從而可以將種植體插入到上頜骨或下頜骨中。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有在生物相容性基質(zhì)中的PDGF的組合物，所述組合物可用于促進(jìn)在上頜骨或下頜骨中的牙槽嵴增高從而可以將種植體穩(wěn)定地插入上頜骨或下頜骨。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供垂直或者水平的骨增高，尤其是在上頜骨和/或下頜骨中。本發(fā)明的再另一個(gè)目標(biāo)是提供用于增高上頜骨或下頜骨中牙槽嵴的方法。本發(fā)明另一個(gè)目標(biāo)是提供裝有PDGF和生物相容性基質(zhì)，任選地包括可再吸收膜的試劑盒。以下詳細(xì)描迷將對(duì)本發(fā)明的這些以及其它實(shí)施方式進(jìn)行更詳細(xì)的描述。在審讀以下所公開的實(shí)施方式和權(quán)利要求的詳細(xì)描述之后可清楚地看到本發(fā)明的這些以及其它目的、特征和優(yōu)勢(shì)。圖1顯示了在接受不含PDGF的去蛋白牛骨塊的3只對(duì)照動(dòng)物中的X-光結(jié)果(radiographicresults),其中骨塊覆蓋有可再吸收膠原質(zhì)膜。白色的射線密集的肽種植體(10)放置在下頜骨(20)中。肽種植體之間的區(qū)域(30)是射線透明的并顯示出很少或者沒有骨生長(zhǎng)。附近的牙(40)被示出。圖2顯示了在接受含有PDGF的去蛋白牛骨塊的4只試驗(yàn)動(dòng)物中的X-光結(jié)果。白色的射線密集的肽種植體(10)放置在下頜骨(20)中。肽種植體之間的區(qū)域(30)是相對(duì)射線密集的并顯示出骨生長(zhǎng)。附近的牙(40)凈皮示出。圖3顯示了在接受含有PDGF的去蛋白牛骨塊的4只試驗(yàn)動(dòng)物中的X-光結(jié)果，其中骨塊覆蓋有可再吸收膠原質(zhì)膜。白色的射線密集的肽種植體(10)放置在下頜骨(20)中。肽種植體之間的區(qū)域(30)是相對(duì)射線密集的并顯示出骨生長(zhǎng)。附近的牙(40)被示出。具體
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了含有分散于生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物在所希望的頜面骨位置增高骨骼中的用途。任選地，采用可生物再吸收膜與本發(fā)明聯(lián)合使用。本發(fā)明的這些用途進(jìn)一步包括含有生物相容性粘合劑諸如膠原質(zhì)的組合物。本發(fā)明的這些用途包括含有分散在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物，進(jìn)一步包括生物活性劑。本發(fā)明的這些用途包括但不限于在所希望的位置諸如牙槽嵴、骨缺損、上頜竇壁或牙槽骨的頜面骨增高。本發(fā)明的組合物可用在用于在所希望的位置的頜面骨增高的藥物制備中。本發(fā)明提供了用于骨增高，尤其是頜面骨增高的有效新型方法和組合物，所述有效新型方法和組合物沒有與現(xiàn)有技術(shù)方法相關(guān)的那些問題。這些方法包括但不局限于在上頜骨或下頜骨上的骨增高。這些骨增高位點(diǎn)可包括但不局限于牙槽峰增高，牙槽骨修復(fù)，竇內(nèi)提升和與上頜竇相鄰的上頜骨中的缺損。牙槽嵴增高是本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，其包括水平(橫向)和垂直嵴增高。術(shù)語水平嵴等同于橫向嵴，其包括頰嵴、舌峰和顎峰。術(shù)語垂直嵴包括下頜和上頜垂直牙槽嵴。在一種實(shí)施方式中，用于骨增高的組合物包含含有PDGF的溶液和生物相容性基質(zhì)，其中溶液分散在生物相容性基質(zhì)中。在另一實(shí)施方式中，組合物含有分散在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液，其中生物相容性基質(zhì)包含骨棚架材料和生物相容性粘合劑。在一種實(shí)施方式中，PDGF是在乙酸鹽溶液中的rhPDGF-BB。本發(fā)明也提供了試劑盒，所迷試劑盒包括在第一包裝中的生物相容性基質(zhì)和在可用作分散手段的第二包裝中的含有PDGF的溶液。在一些實(shí)施方式中，溶液含有預(yù)定濃度的PDGF。在一些實(shí)施方式中，PDGF的濃度與本文提供的值一致。PDGF的濃度可根據(jù)進(jìn)行的外科過程而預(yù)先確定。此外，在一些實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可以以預(yù)定量存在于試劑盒中。由試劑盒提供的生物相容性基質(zhì)的量取決于所進(jìn)行的外科過程。在具體實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)是骨塊或p-磷酸三鈣。在一些實(shí)施方式中，裝有PDGF溶液的第二包裝包括分散手段，諸如注射器。注射器能有助于將PDGF溶液分散在生物相容性基質(zhì)中以施用在外科位點(diǎn)，諸如所希望的骨增高位置。在另一實(shí)施方式中，試劑盒在另一容器中還裝有可再吸收膜。現(xiàn)在開始介紹可被包括進(jìn)本發(fā)明的各種實(shí)施方式中的組成部分，本發(fā)明的組合物包含含有PDGF的溶液。PDGFPDGF在調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂方面扮演著重要角色。PDGF，如同其它生長(zhǎng)因子一樣，其可操作地與受體酪氨酸激酶的細(xì)胞外區(qū)域相結(jié)合。PDGF與這些跨膜蛋白的結(jié)合激活了它們位于所迷膜的細(xì)胞質(zhì)一側(cè)的催化區(qū)域的激酶活性。通過磷酸化目標(biāo)蛋白的酪氨酸殘基，所述激酶誘發(fā)多種細(xì)胞過程，包括細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞外基質(zhì)形成。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供的組合物包含含有PDGF的溶液和生物相容性基質(zhì)，其中溶液分散在生物相容性基質(zhì)中。在一些實(shí)施方式中，PDGF以約0.01mg/ml~約10mg/ml，約0.05mg/ml~約5mg/ml，約0.1mg/m卜約1.0mg/ml的濃度存在于溶液中。在溶液中的PDGF的濃度可以在上述的任意濃度范圍里。在其它一些實(shí)施方式中，PDGF以任何以下濃度存在于溶液中約0.05mg/ml;約0.1mg/ml;約0.15mg/ml;約0.2mg/ml;約0.25mg/ml;約0.3mg/ml;約0.35mg/ml;約0.4mg/ml;約0.45mg/ml;約0.5mg/ml;約0.55mg/ml;約0.6mg/ml;約0.65mg/ml;約0.7mg/ml;約0.75mg/ml;約0.8mg/ml;約0.85mg/ml;約0.9mg/ml;約0.95mg/ml;或約1.0mg/ml。應(yīng)當(dāng)理解這些濃度是具體實(shí)施方式的簡(jiǎn)單例子，而PDGF的濃度可在上述的任意濃度范圍里。在本發(fā)明的組合物中可以使用不同量的PDGF。能采用的PDGF的量包括在如下范圍內(nèi)的量lpg約50mg，約10ng約25mg,約100Hg約10mg和約250w約5mg。應(yīng)當(dāng)理解可聯(lián)合使用PDGF和其它骨骼刺激因子和/或藥物，例如用于破骨細(xì)胞活性抑制的二膦酸鹽。域技術(shù)人員已知、的方^進(jìn)行測(cè)定Z例如通過在美國(guó)專利6:221,625,、5,747，273和5,290,708中描述的酶聯(lián)免疫檢測(cè)。在本領(lǐng)域中已知的其它檢測(cè)也可用于測(cè)定PDGF濃度。當(dāng)此處提供時(shí)，PDGF的摩爾濃度根據(jù)PDGF二聚體(例如PDGF-BB,MW約25kDa)的分子量(MW)測(cè)定。在本發(fā)明的實(shí)施方式中，PDGF包括PDGF同二聚體和異二聚體，包括PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC、PDGF-DD，及其混合物和衍生物。在一種實(shí)施方式中，PDGF包括PDGF-BB。在另一種實(shí)施方式中，PDGF包括重組人類(rh)PDGF諸如rhPDGF-BB。在一些實(shí)施方式中，PDGF可獲得自天然來源。在其它一些實(shí)施方式中，PDGF可由重組DNA技術(shù)制得。在其它一些實(shí)施方式中，PDGF或其片段可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的肽合成技術(shù)制得，諸如固相肽合成。當(dāng)獲得自天然來源時(shí)，PDGF可源自于生物體液。根據(jù)一些實(shí)施方式，生物體液包括與活體組織包括血相關(guān)的經(jīng)處理或未經(jīng)處理的體液。在其它一些實(shí)施方式中，生物體液也可以包括血液成分包括濃縮血小板(PC)、經(jīng)成分分離的(apheresed)血小板、富含血小板的血漿(PRP)、血漿、血清、新鮮冰凍血漿(FFP)和血沉棕黃層(BC)。在更多其它實(shí)施方式中，體液可以包括分離自血漿并再懸浮于生理液中的血小板。當(dāng)通過重組DNA技術(shù)制造時(shí)，在一些實(shí)施方式中，編碼單一單體(例如PDGFB-鏈或A-鏈)的DNA序列可插入到培養(yǎng)的原核或真核細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，以隨后制造同二聚體(例如PDGF-BB或PDGF-AA)。在其它一些實(shí)施方式中，PDGF異二聚體可通過以下過程制造，即，將編碼異二聚體的兩個(gè)單元的DNA序列插入到培養(yǎng)的原核或真核細(xì)胞中，并允許翻譯的單體單元經(jīng)細(xì)胞處理從而制造異二聚體(例如PDGF-AB)。商售可得的GMP重組PDGF-BB可通過商業(yè)途徑獲得自ChironCorporation(Emeryville,CA)?？蒲屑?jí)rhPDGF-BB可從多種來源獲得，包括R&DSystems,Inc.(Minneapolis,MN)，BDBiosciences(SanJose,CA)和Chemicon，International(Temecula,CA)。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，PDGF包括PDGF片段。在一種實(shí)施方式中，rhPDGF-B包括以下片段整個(gè)B鏈的氨基酸序列1~31、1~32、33~108、33~109和/或1~108。PDGF的B鏈的完整氨基酸序列(1~109)在美國(guó)專利5,516,896的圖15中提供。應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的rhPDGF組合物可包括完整的rhPDGF-B(1~109)及其片段的組合?？梢圆捎闷渌黀DGF片段，諸如在美國(guó)專利5,516,896中所公開的那些。根據(jù)優(yōu)選實(shí)施方式，rhPDGF-BB包括rhPDGF-B(1~109)的整個(gè)氨基酸序列的至少65%。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，PDGF可被純化。在加入到本發(fā)明的溶液中之前，在此使用時(shí)，經(jīng)純化的PDGF包括含有超過約95重量％的PDGF的組合物。溶液可以是任何可藥用的溶液。在其它一些實(shí)施方式中，PDGF可基本上經(jīng)純化。在加入到本發(fā)明的溶液中之前，基本上經(jīng)純化的PDGF,如本文所使用的，包括含有約5重量％~約95重量％的PDGF的組合物。在一種實(shí)施方式中，在加入到本發(fā)明的溶液中之前，基本上經(jīng)純化的PDGF包括含有約65重量％~約95重量％的PDGF。在其它實(shí)施方式中，在加入到本發(fā)明的溶液中之前，基本上經(jīng)純化的PDGF包括含有約70重量％~約95重量％，約75%~約95%，約80%~約95%,約85%~約95%,或約90%~約95%的PDGF。經(jīng)純化的PDGF和基本上經(jīng)純化的PDGF可加入到棚架和粘合劑中。在另一實(shí)施方式中，PDGF可經(jīng)部分純化。經(jīng)部分純化的PDGF,如本文所使用的，包括在富含血小板的血漿(PRP)、新鮮冷凍血漿(FFP)，或者任何其它需要收集和分離以制造PDGF的血產(chǎn)品的內(nèi)容物中含有PDGF的組合物。本發(fā)明的實(shí)施方式包括本文提供的任何PDGF亞型(包括同二聚體和異二聚體)可以是被純化的或部分純化的。含有PDGF混合物的本發(fā)明的組合物可含有占部分純化比例的PDGF亞型或PDGF片段。在一些實(shí)施方式中，可按照美國(guó)專利申請(qǐng)10/965,319和11/159,533(公開號(hào)20060084602)中的描述，來制備部分純化的和純化的PDGF。在一些實(shí)施方式中，通過將PDGF溶解在一種或多種緩沖液中，來形成含有PDGF的溶液。適用于本發(fā)明的PDGF溶液的緩沖劑包括但不限于碳酸鹽、磷酸鹽(例如磷酸鹽緩沖鹽水)、組氨酸、乙酸鹽(例如乙酸鈉)、酸性緩沖劑諸如乙酸和HC1和有機(jī)緩沖劑諸如賴氨酸、Tris緩沖劑(例如三(羥曱基)氨基乙烷)、N-2-羥乙基哌"秦-N，-2-乙磺酸(HEPES)和3-(N-嗎啉)丙磺酸(M0PS)。根據(jù)與PDGF的生物相容性和緩沖劑的阻止不希望的蛋白修飾的能力來選擇緩沖劑。另外可根據(jù)與宿主組織的相容性選擇緩沖劑。在一種優(yōu)選實(shí)施方式中，使用了乙酸鈉緩沖劑。緩沖液可以以不同摩爾濃度使用，例如約0.1mM~約100mM,約lmM約50mM,約5mM約40mM，約10mM約30mM，或約15mM約25mM，或者在這些范圍內(nèi)的任何摩爾濃度。在一種實(shí)施方式中，使用摩爾濃度約20mM的乙酸鹽緩沖液。在另一實(shí)施方式中，通過將凍千的PDGF溶解在水中形成含有PDGF的溶液，其中在溶解前，PDGF凍千自合適的緩沖液。根椐本發(fā)明的實(shí)施方式，含有PDGF的溶液可具有約3.0~約8.0的pH。在一種實(shí)施方式中，含有PDGF的溶液具有約5.0約8.0的pH，更優(yōu)選為約5.5~約7.0，最優(yōu)選為約5.5~約6.5,或者在這些范圍內(nèi)的任意值。在一些實(shí)施方式中，含有PDGF的溶液的pH能相容于PDGF或任何其它生物活性劑的延長(zhǎng)的穩(wěn)定性和效率。PDGF通常在酸性環(huán)境中更穩(wěn)定。因此，根據(jù)一種實(shí)施方式，本發(fā)明包括PDGF溶液的酸性保存制劑。根據(jù)該實(shí)施方式，PDGF溶液優(yōu)選具有約3.0~約7.0的pH,并更優(yōu)選為約4.0~約6.5。然而，PDGF的生物活性在具有中性pH范圍的溶液中最適宜。因此，在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明包括PDGF溶液的中性pH制劑。根據(jù)該實(shí)施方式，PDGF溶液優(yōu)選具有約5.0~約8.0的pH,更優(yōu)選為約5.5~約7.0，最優(yōu)選為約5.5~約6.5。根椐本發(fā)明的方法，酸性PDGF溶液重新配制為中性pH組合物，其中該組合物隨后用于處理骨骼以促進(jìn)生長(zhǎng)。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，在溶液中使用的PDGF是rhPDGF-BB。在一些實(shí)施方式中，含有PDGF的溶液的pH可通過此處敘述的緩沖液進(jìn)行控制。不同蛋白質(zhì)顯示出不同的它們?cè)谄渲心芊€(wěn)定的pH范圍。蛋白質(zhì)穩(wěn)定性主要通過等電點(diǎn)和蛋白質(zhì)上的電荷來反映。pH范圍能影響蛋白質(zhì)的構(gòu)象結(jié)構(gòu)和蛋白質(zhì)對(duì)蛋白水解降解、水解、氧化和其它能導(dǎo)致蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和/或生物活性發(fā)生變化的過程的易感性(susceptibility)。在一些實(shí)施方式中，含有PDGF的溶液能進(jìn)一步包含其它成分。在其它一些實(shí)施方式中，含有PDGF的溶液可進(jìn)一步含有細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)、其它穩(wěn)定蛋白諸如白蛋白、抗菌劑、蛋白酶抑制劑(例如EDTA、EGTA、抑肽酶、EACA等)和/或其它生長(zhǎng)因子諸如FGF、EGF、TGF、KGF、IGF、BMP，或其它PDGF包括PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC和/或PDGF-DD。除含有PDGF的溶液之外，本發(fā)明的組合物也包含生物相容性基質(zhì)，其中分散有PDGF溶液，并且也可包含生物相容性粘合劑加入或者不加入生物相容性基質(zhì)。生物相容性基質(zhì)做緒存根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式，生物相容性材料包括骨棚架材料。骨棚架材料提供了新骨和組織出現(xiàn)生長(zhǎng)時(shí)的框架或棚架。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料包括骨塊。骨塊可從不同來源獲得。在一種實(shí)施方式中，使用去蛋白牛骨塊(Bio-OssBlock,Geistlichbiomaterials)。去蛋白牛骨是經(jīng)處理去除有機(jī)成分的異種材料。其在長(zhǎng)期穩(wěn)定性方面的功效已在牙周和植入文獻(xiàn)中得以很好的描述(Sarton等,C//"Oa/,'w//"""/仏2003Jun:14(3):369-72)。去蛋白骨也可獲得自其它物種，包括但不局限于人，并用在本發(fā)明中。其它基質(zhì)材料也可以使用在本發(fā)明中，諸如具有O.lmm~100mm平均直徑的自源皮層、多孔和皮層多孔骨塊和顆粒移植物(particulategraft)。此外，具有O.lmm~100mm的平均直徑的異源、異種、皮層、多孔和皮層多孔骨塊和骨片也可以用在本發(fā)明中。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料包括多孔結(jié)構(gòu)。根據(jù)一些實(shí)施方式，多孔骨棚架材料可包括直徑為約1jLim約1mm的孔。在一種實(shí)施方式中，骨棚架材料包括直徑為約100pm約1mm的大孔。在另一實(shí)施方式中，骨棚架材料包括直徑為約10inm約100pm的中孔。在另一實(shí)施方式中，骨棚架材料包括直徑小于約10nm的小孔。本發(fā)明的實(shí)施方式設(shè)想了包括大孔、中孔和小孔或其任意組合的骨棚架材料。在一種實(shí)施方式中，多孔骨棚架材料具有超過約25%的孔隙率。在另一實(shí)施方式中，多孔骨棚架材料具有超過約50%的孔隙率。在另一實(shí)施方式中，多孔骨棚架材料具有超過約90%的孔隙率。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料包括至少一種磷酸鉀。在其它實(shí)施方式中，骨棚架材料包括多種磷酸鈣。在本發(fā)明的實(shí)施方式中，適用作骨棚架材料的磷酸鉀具有0.5~2.0的鉤磷原子比。適用作骨棚架材料的磷酸鈣的非限制性例子包括無定形磷酸鈣、一水合磷酸一鉤(MCPM)、無水磷酸一鈣(MCPA)、二水合磷酸二鈣(DCPD)、無水磷酸二鉤(DCPA)、磷酸八鈣(OCP)、a-磷酸三鈣、P-磷酸三4丐、羥基磷灰石(OHAp)、較差結(jié)晶羥基磷灰石、磷酸四鈣(TTCP)、十磷酸七4丐、偏磷酸鉤、二水合焦磷酸鈣、焦磷酸鈣、碳酸化磷酸鈣或其混合物。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料包括多種顆粒。例如，骨棚架材料可包括多種磷酸鈣顆粒。在一種實(shí)施方式中，骨棚架顆粒具有約1約5mm的平均直徑。在一種實(shí)施方式中，骨棚架顆粒具有約1nm約2mm的平均直徑。在其它實(shí)施方式中，顆粒具有約250vim~約1000pm的平均直徑。在其它實(shí)施方式中，顆粒具有約250nm約750iam的平均直徑。在另一實(shí)施方式中，骨棚架顆粒具有約100iLim-約300iLim的平均直徑。在另一實(shí)施方式中，骨棚架顆粒具有約100pm約400nm的平均直徑。在其它一種實(shí)施方式中，所迷顆粒具有約75pm約300ILim的平均直徑。在更多實(shí)施方式中，骨棚架顆粒具有約1nm的平均直徑以及在一些情況下，小于約lmm的平均直徑。根據(jù)一些實(shí)施方式，骨棚架材料能以適用于植入的形狀提供(例如，球形、柱形或塊狀)。在其它一些實(shí)施方式中，骨棚架材料是可模壓的?？赡汗桥锛懿牧夏苡兄趯⒈景l(fā)明的組合物有效地放置在骨骼中的目標(biāo)位點(diǎn)及其附近。在一些實(shí)施方式中，可用刮刀或類同的設(shè)備將可模壓骨棚架材料施用到所希望的骨增高位點(diǎn)。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料是可流動(dòng)的。在一些實(shí)施方式中，可通過注射器和針頭或者套管將可流動(dòng)骨棚架材料施用在骨融合位點(diǎn)。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料在體內(nèi)硬化。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料是可生物再吸收的。在一種實(shí)施方式中，骨棚架材料可體內(nèi)植入一年內(nèi)被再吸收。在另一實(shí)施方式中，骨棚架材料可體內(nèi)植入l、3、6或9個(gè)月內(nèi)被再吸收?？缮镌傥招匀Q于(1)基質(zhì)材料的性質(zhì)(即，其化學(xué)組成，物理結(jié)構(gòu)和尺寸)；(2)基質(zhì)在體內(nèi)放置的位置；(3)基質(zhì)材料的使用量；(4)患者的代謝狀態(tài)(糖尿病/非糖尿病、骨質(zhì)疏松、吸煙者、老齡、服用類固醇等)；(5)所治療的損傷的程度和/或類型；和(6)除基質(zhì)之外其它材料的使用，諸如其它骨合成代謝、分解代謝和抗分解代謝因子。辨的#~^頭。用作生物相容性基質(zhì)的骨棚架材料可包含l3-磷酸三鈣(p-TCP)。根椐一些實(shí)施方式，(3-TCP包括具有不同直徑的多方向的相互連通的孔的多孔結(jié)構(gòu)。在一種實(shí)施方式中，(3-TCP的多孔結(jié)構(gòu)包括直徑為約1001im約1mm的大孔、直徑為約10jum約100的中孔和直徑小于約10)Lim的小孔。(3-TCP的大孔和小孔可有助于骨誘導(dǎo)和骨傳導(dǎo)，同時(shí)大孔、中孔和小孔能允許穿透過(3-TCP生物相容性基質(zhì)的流體交流和營(yíng)養(yǎng)運(yùn)輸以支持骨再生長(zhǎng)。在一些實(shí)施方式中，包括多孔結(jié)構(gòu)的j3-TCP能具有超過25%的孔隙率。在其它一些實(shí)施方式中，(3-TCP能具有超過50。/o的孔隙率。在另一實(shí)施方式中，P-TCP能具有超過90%的孔隙率。在一些實(shí)施方式中，骨棚架材料包括(3-TCP顆粒。在一種實(shí)施方式中，(3-TCP顆粒具有約1pm~約5mm的平均直徑。在一種實(shí)施方式中，P-TCP顆粒具有約1^m約2mm的平均直徑。在一種實(shí)施方式中，P-TCP顆粒具有約1mm~約2mm的平均直徑。在其它一些實(shí)施方式中，P-TCP顆粒具有約250nni約1000pm的平均直徑。在其它一些實(shí)施方式中，p-TCP顆粒具有約250pm約750iLini的平均直徑。在另一實(shí)施方式中，(3-TCP顆粒具有約100lam約400pm的平均直徑。在另一實(shí)施方式中，(3-TCP顆粒具有約100nm約300nm的平均直徑。在另一實(shí)施方式中，(3-TCP顆粒具有約75nm-約300iuni的平均直徑。在更多的實(shí)施方式中，P-TCP顆粒具有小于25pm的平均直徑，以及在一些情況下，小于lmm的平均直徑。在更多的實(shí)施方式中，(3-TCP顆粒具有小于1nm的平均直徑，以及在一些情況下，小于1mm的平均直徑。在一些實(shí)施方式中，含有P-TCP骨棚架材料的生物相容性基質(zhì)可以以適用于植入的形狀提供(例如，球形、柱形或塊狀)。在其它一些實(shí)施方式中，骨棚架材料可以是可模壓的，因此有助于將本發(fā)明的組合物放置在所希望的骨增高位點(diǎn)諸如上頜骨或下頜骨。可通過注射器、管子或刮刀施用可流動(dòng)的基質(zhì)。根據(jù)一些實(shí)施方式，P-TCP骨棚架材料是可生物再吸收的。在一種實(shí)施方式中，(3-TCP骨棚架材料可在體內(nèi)植入后一年內(nèi)被再吸收至少75%。在另一實(shí)施方式中，(3-TCP骨棚架材料可在體內(nèi)植入后一年內(nèi)被再吸收超過90°/0。游^^容'^^合身在另一實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)包含骨棚架材料和生物相容性粘合劑。在進(jìn)一步包含生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)的實(shí)施方式中的骨棚架材料與以上提供的那些相一致。根據(jù)一些實(shí)施方式，生物相容性粘合劑可包括能可操作地促進(jìn)相結(jié)合的物質(zhì)之間的結(jié)合的材料。例如，生物相容性粘合劑可促進(jìn)在生物相容性基質(zhì)形成中骨棚架材料顆粒之間的粘合。在某些實(shí)施方式中，如果相同材料能發(fā)揮作用促進(jìn)相結(jié)合的物質(zhì)之間的結(jié)合并且提供發(fā)生新骨生長(zhǎng)所需的框架，則該材料可同時(shí)用作棚架材料和粘合劑。在一些實(shí)施方式中，生物相容性粘合劑可包括膠原質(zhì)、不同交聯(lián)程度的膠原質(zhì)、多糖、核酸、烴類、蛋白質(zhì)、多肽、聚(a-羥基酸)、聚(內(nèi)酯)、聚(氨基酸)、聚(酸酐)、聚(原酸酯)、聚(酸酐-共-亞胺)、聚(原碳酸酯)、聚(a-羥基鏈烷酸酯)、聚(對(duì)二氧環(huán)己酮)、聚(磷酸酯)、聚乳酸、聚(L-丙交酯)(PLLA)、聚(D,L-丙交酯)(PDLLA)、聚乙交酯(PGA)、聚(丙交酉旨-共-乙交酯)(PLGA)、聚(L-丙交酯-共-D,L-丙交酯)、聚(D,L-丙交酯-共-三亞曱基碳酸酯)、聚羥基乙酸、聚羥基丁酸酯(PHB)、聚(e-己內(nèi)酯)、聚(5-戊內(nèi)酯)、聚(，丁內(nèi)酯)、聚(己內(nèi)酯)、聚丙烯酸、聚羧酸、聚(烯丙基氯化銨)、聚(二彿丙基二甲基氯化銨)、聚(乙撐亞胺)、聚富馬酸丙二醇酯、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯、聚氨酯、聚甲基丙烯酸甲酯、碳纖維、聚(乙二醇)、聚(氧乙烯)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯吡咯烷酮)、聚(乙基唑啉)、聚(氧乙烯)-共-聚(氧丙烯)嵌段共聚物、聚(對(duì)苯二甲酸二乙酯)聚酰胺及其共聚物和混合物。在其它一些實(shí)施方式中，生物相容性粘合劑可包括褐藻酸、阿拉伯膠、瓜爾膠、黃原膠、白明膠、殼質(zhì)、殼聚糖、殼聚糖乙酸酯、殼聚糖乳酸酯、殼聚糖疏酸酯、卵磷脂、N，O-羧基曱基殼聚糖、磷脂酰膽堿衍生物、右旋糖酐(例如，a-環(huán)糊精、卩-環(huán)糊精、y-環(huán)糊精或硫酸葡聚糖鈉)、纖維蛋白膠、甘油、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸鈉、纖維素(例如，甲基纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羥乙基纖維素)、葡糖胺、蛋白聚糖、淀粉(例如，輕乙基淀粉或可溶性淀粉)、乳酸、普羅尼克酸(pluronicacid)、甘油磷酸鈉、肝糖、角蛋白、絲，及其衍生物和混合物以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的用于整形外科用途的粘合劑。在一些實(shí)施方式中，生物相容性粘合劑是水溶性的。在生物相容性基質(zhì)植入后的短時(shí)間內(nèi)，水溶性粘合劑可從中溶解，從而使生物相容性基質(zhì)具有大孔性。本文所討論的大孔性能通過改善通過性而提高植入材料的骨傳導(dǎo)性，因此提高植入位點(diǎn)處的破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞的重塑活性。在一些實(shí)施方式中，在生物相容性基質(zhì)中，生物相容性粘合劑能以基質(zhì)的約5重量％~約50重量。/。的量存在。在其它一些實(shí)施方式中，生物相容性粘合劑能以生物相容性基質(zhì)的約IO重量％~約40重量°/0的量存在。在另一實(shí)施方式中，生物相容性粘合劑能以生物相容性基質(zhì)的約15重量％~約35重量％的量存在。在另一實(shí)施方式中，生物相容性粘合劑能以生物相容性基質(zhì)的約20重量％的量存在。根據(jù)一些實(shí)施方式，含有骨棚架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)可以是可流動(dòng)的、可模壓的和/或可擠出的。在這樣的實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可以為糊狀或膩?zhàn)訝钚问?。在一種實(shí)施方式中，為糊狀或膩?zhàn)訝钚问降纳锵嗳菪曰|(zhì)可以包含通過生物相容性粘合劑相互粘合的骨棚架材料。為糊狀或膩?zhàn)訝钚问降纳锵嗳菪曰|(zhì)可成型為所希望的種植體形狀或者成型為植入位點(diǎn)的輪廓。在一種實(shí)施方式中，為糊狀或膩?zhàn)訝钚问降纳锵嗳菪曰|(zhì)可用注射器或套管注入到植入位點(diǎn)。在一些實(shí)施方式中，為糊狀或膩?zhàn)訝钚问降纳锵嗳菪曰|(zhì)在植入后不硬化并保持可流動(dòng)和可模壓形式。在另一實(shí)施方式中，糊狀物或戚子狀物在植入后硬化，因此降低基質(zhì)的可流動(dòng)性和可模壓性。在一些實(shí)施方式中，包含骨棚架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)也可以以預(yù)定形狀提供，包括塊狀、球狀或圓柱狀或任何所希望的形狀，例如由模具或施用位點(diǎn)所確定的形狀。在一些實(shí)施方式中，包含骨棚架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)是可生物再吸收的。在這些實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可在體內(nèi)植入一年內(nèi)被再吸收。在另一實(shí)施方式中，包含骨棚架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)可在體內(nèi)植入1、3、6或9個(gè)月內(nèi)被再吸收?？缮镌傥招匀Q于(1)基質(zhì)材料的性質(zhì)(即，其化學(xué)組成，物理結(jié)構(gòu)和尺寸)；(2)基質(zhì)在體內(nèi)放置的位置；(3)基質(zhì)材料的使用量；(4)患者的代謝狀態(tài)(糖尿病/非糖尿病、骨質(zhì)疏松、吸煙者、老齡、服用類固醇等)；(5)所治療的損傷的程度和/或類型；和(6)除基質(zhì)之外其它材料的使用，所迷材料例如其它骨合成代謝、分解代謝和抗分解代謝因子。襯jg-7U尸#録#^^儲(chǔ)儲(chǔ)名^在一些實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可包含I3-TCP骨棚架材料和生物相容性膠原質(zhì)粘合劑。適于與膠原質(zhì)粘合劑相結(jié)合的(3-TCP骨棚架材料與上文提供的相一致。在一些實(shí)施方式中，膠原質(zhì)粘合劑包括任何類型的膠原質(zhì)，包括I型、n型和m型膠原質(zhì)。所使用的膠原質(zhì)也可不同程度的交聯(lián)。在一種實(shí)施方式中，膠原質(zhì)粘合劑包括膠原質(zhì)混合物，諸如I型和II型膠原質(zhì)的混合物。在其它實(shí)施方式中，膠原質(zhì)粘合劑在生理?xiàng)l件下可溶?？梢圆捎迷诠趋阑蚣」趋澜M織中存在的其它膠原質(zhì)。在本發(fā)明中也可以使用重組、合成和天然形式的膠原質(zhì)。根椐一些實(shí)施方式，生物相容性基質(zhì)可包含利用膠原質(zhì)粘合劑相互粘合的大量(3-TCP顆粒。在一種實(shí)施方式中，適于與膠原質(zhì)粘合劑相結(jié)合的(3-TCP顆粒具有以上所述的平均直徑。在一些實(shí)施方式中，(3-TCP顆?？赏ㄟ^膠原質(zhì)粘合劑相互粘合以制得具有多孔結(jié)構(gòu)的生物相容性基質(zhì)。在一些實(shí)施方式中，包含P-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)可包括直徑為約l^im~約1mm的孔。包括P-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)可包括直徑為約100約1mm的大孔，直徑為約10|um~100的中孔和直徑小于約10jam的直徑的小孔。包含(3-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)可具有大于約25%的孔隙率。在另一實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可具有大于約50%的孔隙率。在另一實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可具有大于約卯％的孔隙率。在一些實(shí)施方式中，包含(3-TCP顆粒的生物相容性基質(zhì)可含有占基質(zhì)的約5重量％~約50重量％的量的膠原質(zhì)粘合劑。在另一實(shí)施方式中，膠原質(zhì)粘合劑可以以生物相容性基質(zhì)的約10重量°/。~約40重量%的量存在。在另一實(shí)施方式中，膠原質(zhì)粘合劑可以以生物相容性基質(zhì)的約15重量％~約35重量％的量存在。在另一實(shí)施方式中，膠原質(zhì)粘合劑可以以生物相容性基質(zhì)的約20重量°/。的量存在。根據(jù)一些實(shí)施方式，包含(3-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)可以是可流動(dòng)的、可模壓的和/或可擠出的。在這樣的實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可以為糊狀或膩?zhàn)訝钚问健：隣钗锘蚰佔(zhàn)訝钗锟杀怀尚蜑樗Ｍ姆N植體形狀或者成型為植入位點(diǎn)的輪廓。在一種實(shí)施方式中，為糊狀或膩?zhàn)訝钚问降陌?3-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)可以用注射器或套管注入到植入位點(diǎn)。在一些實(shí)施方式中，為糊狀或膩?zhàn)訝钚问降陌?3-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)在植入時(shí)保持可流動(dòng)和可模壓形式。在另一實(shí)施方式中，所述糊狀物或賦子狀物在植入后硬化，因此降低基質(zhì)的可流動(dòng)性和可模壓性。在一些實(shí)施方式中，包含j3-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)也可以以預(yù)定形狀提供，諸如塊狀、球狀或圓柱狀。的。在一種實(shí)施方式中，包含(3-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)在活體內(nèi)植入后一年可被再吸收至少75%。在另一種實(shí)施方式中，包含(3-TCP顆粒和膠原質(zhì)粘合劑的生物相容性基質(zhì)在活體內(nèi)植入后一年可坤皮再吸收超過90%。根據(jù)本發(fā)明，含有PDGF的溶液可分散在生物相容性基質(zhì)中制得組合物用以促進(jìn)骨增高，尤其是垂直牙槽嵴的骨增高。^T存戎炎糜為提高GBR過程的治療結(jié)果和可預(yù)測(cè)性，應(yīng)減少或消除在此過程中遇到的復(fù)雜因素?？沙霈F(xiàn)的能觀察到的最危險(xiǎn)的負(fù)面結(jié)果之一是早期膜暴露細(xì)菌感染導(dǎo)致GBR過程的失敗或不完全的成功(Simion等，Int.J.PeriodonticsRestorativeDent1994;14(2):166-80,Simion等，J.ClinPeriodentol.1995;22(4):321-31，Simion等，Clin.OralImplantsRes.1997;8(1):23-31)。當(dāng)使用非可再吸收膜例如GORE-TEX⑧時(shí)，這尤其明顯。使用這些膜的主要優(yōu)勢(shì)在于可以在所需要的時(shí)間段里將其在保持在原處以使治療過程進(jìn)行。例如，也可以使用由天然或合成聚合物諸如膠原質(zhì)或聚丙交酯和/或聚乙交酯制成的可再吸收膜。這些膜具有能隨時(shí)間逐漸吸收并因此不需要外科手術(shù)將其移除的優(yōu)點(diǎn)。在實(shí)施例1中所描述的研究中，使用了膠原質(zhì)膜。這些膜必須被潤(rùn)濕以準(zhǔn)確地貼合所述外科手術(shù)位點(diǎn)。在實(shí)施例1中的結(jié)果顯示接受含有PDGF的牛骨塊的動(dòng)物和接受含有PDGF的牛骨塊和所述膠原質(zhì)可再吸收膜的動(dòng)物之間，圍繞所述鈦種植體的骨增高沒有差別。因此，在本發(fā)明的實(shí)踐中可以任選地采用可再吸收膜。本發(fā)明提供了制備用于增高過程中的組合物的方法。在一種實(shí)施方式中，制備用于促進(jìn)骨融合的組合物的方法包括提供含有PDGF的溶液，提供生物相容性基質(zhì)，并將所述溶液分散在生物相容性基質(zhì)中。適用于組合物的PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)與以上描迷的那些相一致。在一種實(shí)施方式中，通過將生物相容性基質(zhì)浸在PDGF溶液中從而將PDGF溶液分散在生物相容性基質(zhì)中。在另一實(shí)施方式中，可通過將PDGF溶液注射入生物相容性基質(zhì)，從而將PDGF溶液分散在生物相容性基質(zhì)中。在一些實(shí)施方式中，注射PDGF溶液可包括將PDGF溶液裝入注射器并將PDGF溶液推入生物相容性基質(zhì)，直至使生物相容性基質(zhì)飽和。根椐一些實(shí)施方式，在接收PDGF溶液之前，生物相容性基質(zhì)可以為預(yù)定形狀，諸如塊狀或圓柱形。在接收PDGF溶液之后，生物相容性基質(zhì)可以具有可流動(dòng)的、可擠出的和/或可注射的糊狀或膩?zhàn)訝钚问?。在其它?shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)在接收含有PDGF的溶液之前已經(jīng)表現(xiàn)為可流動(dòng)的糊狀或膩?zhàn)訝钚问健＿€^舍蘭樹活'^浙的逸合樹根據(jù)一些實(shí)施方式，用于促進(jìn)和/或有助于骨增高的組合物除PDGF之外可進(jìn)一步含有一種或多種生物活性劑。除PDGF之外可以加入到本發(fā)明的組合物中的生物活性劑包括有機(jī)分子、無機(jī)材料、蛋白質(zhì)、多肽、核酸(例如，基因、基因片段、基因調(diào)控序列和反義分子)、核蛋白質(zhì)、多糖(或肝磷脂)、糖蛋白和脂蛋白。能加入到本發(fā)明的組合物中的生物活性化合物的非限制性例子包括例如，抗癌劑、抗生素、止痛劑、消炎劑、免疫抑制劑、酶抑制刑、抗組胺刑、激素、肌肉松弛劑、前列腺素、營(yíng)養(yǎng)因子、骨誘導(dǎo)蛋白、生長(zhǎng)因子和疫苗，均在美國(guó)專利申請(qǐng)10/965,319和11/159,533(公開號(hào):20060084602)中得以描迷。能加入到本發(fā)明的組合物中的優(yōu)選生物活性化合物包括骨誘導(dǎo)因子諸如胰島素類生長(zhǎng)因子、纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子或其它PDGF。根據(jù)其它實(shí)施方式，激因子諸如骨形態(tài)生成蛋白(BMP)、BMP模擬物、降血4丐素、降血鈣素模擬物、他汀、他汀衍生物，或副曱狀腺激素。優(yōu)選的因子也包括蛋白酶抑制劑，以及能降低骨骼再吸收的骨質(zhì)疏松治療包括二膦酸鹽，和NF-kB配體(RANK)配體的受體激活劑的抑制劑。輸送其它生物活性劑的標(biāo)準(zhǔn)方案和療法是本領(lǐng)域內(nèi)已知的。其它生物活性劑可以以能允許輸送合適劑量的試劑至植入位點(diǎn)的量加入到本發(fā)明的組合物中。在大多數(shù)情況下，根據(jù)從業(yè)者所已知的準(zhǔn)則確定劑量，并可適用于正在討論中的具體試劑。在本發(fā)明的組合物中所包括的其它生物活性劑的量取決于以下變數(shù)諸如病癥的類型和程度，具體患者的整體健康狀況，生物活性劑的制劑，釋放機(jī)制和生物相容性基質(zhì)的可生物再吸收性?？梢圆捎脴?biāo)準(zhǔn)臨床試驗(yàn)以對(duì)任何具體的其它生物活性劑的劑量和用藥頻率進(jìn)行最優(yōu)化。根椐一些實(shí)施方式，用于促進(jìn)骨增高的組合物可進(jìn)一步包括加入其它含有PDGF的骨移植材料包括自體骨髓、自體血小板提取物和合成骨基質(zhì)材料。遽/:f矛增劣i^裎W才法本發(fā)明也提供了進(jìn)行骨增高過程的方法。在一種實(shí)施方式中，進(jìn)行骨增高過程的方法包括提供含有分散在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液和任選地含有生物相容性粘合劑的組合物，并將組合物施用在至少一個(gè)希望骨增高的位點(diǎn)。在一些實(shí)施方式中，進(jìn)行骨增高過程的方法包括將組合物施用至上頜骨或下頜骨中的至少一個(gè)希望骨增高的位點(diǎn)。例上頜骨或下頜骨中至少一個(gè)^望骨增高的位點(diǎn)。在另一實(shí):方式中，在將含有分散在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物放置入種植位點(diǎn)之前，以及任選地之后，將PDGF溶液施用于種植位點(diǎn)。通過增強(qiáng)在上頜骨和下頜骨中的骨沉積，可提高牙槽嵴從而隨后能接受種植體。這樣的種植體可用于各種目的，包括牙齒或其它牙裝置的支撐體，以及可用于各種口腔和頜面骨用途，包括牙槽骨、竇內(nèi)提升和嵴增高。試，盆本發(fā)明也提供了試劑盒，所述試劑盒包括在第一包裝中的生物相容性基質(zhì)和在可用作分散手段的第二包裝中的含有PDGF的溶液。在一些實(shí)施方式中，溶液含有預(yù)定濃度的PDGF。在一些實(shí)施方式中，PDGF的濃度與此處提供的值相一致。PDGF的濃度可根據(jù)進(jìn)行的外科過程而預(yù)先確定。此外，在一些實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)可以以預(yù)定量存在于試劑盒中。在試劑盒中提供的生物相容性基質(zhì)的量取決于所進(jìn)行的外科過程。在一些實(shí)施方式中，裝有PDGF溶液的第二包裝包括分散手段，諸如注射器。注射器能有助于將PDGF溶液分散在生物相容性基質(zhì)中以施用在外科位點(diǎn)，諸如所希望的骨增高位置。在另一實(shí)施方式中，試劑盒在另一容器中還裝有可再吸收膜。在一種實(shí)施方式中，可生物再吸收膜包括膠原質(zhì)可生物再吸收膜。在一種實(shí)施方式中，所述試劑盒包含裝有生物相容性基質(zhì)的第一容器。在一種實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)是磷酸鈣。在優(yōu)選實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)是P-磷酸三鈣。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，生物相容性基質(zhì)是骨塊，例如異種、自體、皮層、多孔和皮層多孔骨塊。可以如同先前在本申請(qǐng)中所描述的那樣對(duì)這些骨塊進(jìn)行去鈣化。放置在第一容器中的異源、異種、皮層、多孔和皮層多孔骨塊和骨片可具有O.lmm~100mm的平均直徑。在試劑盒中的骨塊的具體尺寸其具有具體用途。所述試劑盒包含裝有PDGF的第二容器。在一種實(shí)施方式中，PDGF可以以干燥形式存在，例如以所選定的適宜用于增高骨骼的量的粉末或凍干形式。當(dāng)PDGF以千燥形式存在時(shí)，在試劑盒中可存在另一容器裝有用于在施用至生物相容性基質(zhì)之前溶解PDGF的溶液。在另一實(shí)施方式中，PDGF可存在于如同先前在本申請(qǐng)中所描迷的溶液。該第二容器可采用分散容器的形式，諸如注射器或可壓縮管，以助于將溶液中的PDGF輸送至生物相容性基質(zhì)。雖然PDGF可以是任何PDGF,如先前在本申請(qǐng)中所描述，在優(yōu)選實(shí)施方式中，PDGF是PDGF-BB。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，PDGF-BB是rhPDGF-BB。在優(yōu)選實(shí)施方式中，第二容器裝有在約15mM約25mM，優(yōu)選為約20mM的乙酸鹽溶液中的rhPDGF-BB，pH為約5.56.5。在第二容器中的PDGF的量可根據(jù)預(yù)期的用途而變化。在笫二容器中的PDGF的總量可以為約1ng~約50mg,約10|ng~約25mg，約100pg約10mg,和約250網(wǎng)~約5mg,或者在這些范圍內(nèi)的任意具體量。在一些實(shí)施方式中，PDGF以約0.01mg/ml約10mg/ml，約0.05mg/ml~約5mg/ml，或約0.1mg/ml~約1.0mg/ml的濃度范圍，或者在這些范圍內(nèi)的任意具體濃度存在于溶液中。在其它一些實(shí)施方式中，PDGF以任一以下濃度存在于溶液中約0.05mg/ml;約0.1mg/ml;約0.15mg/ml;約0.2mg/ml;約0.25mg/ml;約0.3mg/ml;約0.35mg/ml;約0.4mg/ml;約0.45mg/ml;約0.5mg/ml;約0.55mg/ml;約0.6mg/ml;約0.65mg/ml;約0.7mg/ml;約0.75mg/ml;約0.8mg/ml;約0.85mg/ml;約0.9mg/ml;約0.95mg/ml;或約1.0mg/ml。以下實(shí)施例將用于進(jìn)一步描述本發(fā)明，然而同時(shí)并不構(gòu)成任何限制。相反，應(yīng)當(dāng)清楚地理解在閱讀此處的描述之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可設(shè)想出各種實(shí)施方式及其修改和等同物，而不背離本發(fā)明的精神。實(shí)施例1描述了在狗的下頜骨中垂直嵴增高的研究。實(shí)施例2描迷了在人類上頜骨中垂直嵴增高的研究。實(shí)施例實(shí)施例1M尸DGF-5S和^蛋^爭(zhēng)矛塊成者農(nóng)合炎^T存戎炎if4^體力遽/f垂J:碌眷專W才法該研究的主要目的是l)從臨床角度和放射學(xué)角度來評(píng)價(jià)采用rhPDGF-BB和去蛋白牛骨塊聯(lián)合可再吸收膜在垂直峰增高中的作用潛力；2)從臨床角度和組織學(xué)角度評(píng)價(jià)可再吸收膜在由rhPDGF-BB介導(dǎo)的骨再生中的角色；3)從臨床角度、放射學(xué)角度和組織學(xué)角度來評(píng)價(jià)在沒有膜的情況下使用rhPDGF和骨塊治療垂直骨缺損在生物相容性、骨傳導(dǎo)性、降解性和替代性方面的安全性和療效；4)從組織學(xué)角度分析在測(cè)試位置的愈合方式；和5)評(píng)價(jià)在不同種植表面上再生骨的骨與種植體的接觸(BIC)。這是采用左右半口方法的開放的、前瞻性的、可控的研究，在相同動(dòng)物中，比較了在人工造成的骨槽缺損嵴上垂直嵴增高的臨床的、放射學(xué)的和組織學(xué)的結(jié)果。測(cè)試位置分為不同的三組，相互進(jìn)行比較。組l:接受去蛋白牛骨塊(Bio-OssBlock,Geistlichbiomaterials)、rhPDGF-BB(BioMimeticTherapeutics)和可再吸收膜(Bio-Gide,Geistlichbiomaterials)組合的4個(gè)位置(圖1)組2:接受去蛋白牛骨塊和rhPDGF-BB的4個(gè)位置(圖2)。組3:接受去蛋白牛骨塊和可再吸收膜的組合的4個(gè)位置(圖3)。此外，在所有位置中的基線(baseline)插入(向中線地和遠(yuǎn)端地)兩個(gè)鈦種植體(NobelBiocare,MKHI，3.3x10mm)。兩個(gè)種植體的表面特征不同，為經(jīng)加工的和Ti-Unite。在手術(shù)后4個(gè)月，插入的4直入體以及周圍組織的活組織切片經(jīng)提取用于檢測(cè)。在預(yù)備過程、基線(baseline)和再入手術(shù)(re-entrysurgery)時(shí)通過放射學(xué)評(píng)價(jià)的方式對(duì)測(cè)試位置進(jìn)行監(jiān)測(cè)。動(dòng)物隨機(jī)化法為了使對(duì)每個(gè)測(cè)試組進(jìn)行評(píng)價(jià)的次數(shù)與其它組相同，應(yīng)用了以下組合。在每種條件下對(duì)兩條狗進(jìn)行評(píng)價(jià)。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>兩條狗接受T1對(duì)比T2，兩條狗接受Tl對(duì)比T3，和兩條狗接受T2只于比T3。動(dòng)物包括標(biāo)準(zhǔn)在本研究中包括總共6條滿足以下包括標(biāo)準(zhǔn)的狗1)最小8~9個(gè)月的年齡以達(dá)到正確的骨成熟度；2)無乳牙和3)在基線(baseline)時(shí)體重>25kg。試馬t過程預(yù)備過程。在基線(baseline)之前兩個(gè)星期和在試驗(yàn)過程之前兩個(gè)星期進(jìn)行采用手動(dòng)和超聲儀器的口腔預(yù)防。在麻醉之后進(jìn)行以下基線(baseline)測(cè)量1.缺損區(qū)域的口腔內(nèi)照片(任選的)；2.骨缺損的近-遠(yuǎn)、頰-舌和apico-冠尺寸；和3.在插入時(shí)，種植體肩部至骨嵴的距離。外科過程(Bl)基線(Baseline)過程；拔牙和缺損的形成在完成全身和局部麻醉之后，進(jìn)行放射學(xué)評(píng)價(jià)。沿著第一雙尖牙至第一磨牙，在左右兩側(cè)的下頜后部區(qū)域切出齦溝內(nèi)(intrasulcular)切口。從中部至第一雙尖牙切出中部釋放切口。從中部至第一磨牙切出末端釋放切口。提起全厚度的組織瓣(flap)并取出四顆前磨牙。在相同區(qū)域，通過金剛砂鉆針沿著下頜骨的后部區(qū)域人工形成垂直缺損以模擬有缺損的牙槽峰。所述缺損具有以下在遠(yuǎn)-近(disto-mesial)方向?yàn)?0mm和在apico-冠方向?yàn)?mm。高度取決于下牙槽神經(jīng)的形貌。寬度(頰-舌)為下頜的全寬，并因此某種程度上根據(jù)動(dòng)物的下頜的天生寬度而變化。用斷續(xù)4/0縫合絲線將組織瓣覆蓋在牙槽嵴上進(jìn)行縫合。向動(dòng)物施用標(biāo)準(zhǔn)術(shù)后感染控制劑(阿莫維酸鉀2gm/天，以及尼美舒利每12小時(shí)100mg,持續(xù)三天)。在第二次外科手術(shù)前需要三個(gè)月的康復(fù)期。第二外科過程/測(cè)試過程；Tl(4個(gè)位置)在完成全身和局部麻醉之后，進(jìn)行放射學(xué)評(píng)價(jià)。由中部向末端切出頂部切口，延伸末端至第一磨牙。面頰和舌/上顎組織瓣被全厚度地提起以暴露出牙槽嵴。多余的軟連接組織棄去。用2mm直徑的金剛砂圓形鉆針進(jìn)行皮層穿孔以暴露髄腔并使之流血。然后進(jìn)行術(shù)中測(cè)量。加入rhPDGF-BB(以液體形式提供)，抽吸至牛骨塊從而使骨塊因?yàn)槠涠嗫滋匦远唤?。這是如下進(jìn)行的，將牛骨塊放置在50ml的塑料無菌注射器中，在壓力下含有液體rhPDGF-BB使能被浸透的的骨塊被浸濕。骨塊留在充滿rhPDGF的注射器中大約1O分鐘。在本研究中，在使用大孔注射器進(jìn)行抽吸下，將尺寸2cmxlcmxlcm的骨塊浸在濃度為0.3mg/ml的rhPDGF溶液中。骨塊的理論空體積經(jīng)計(jì)算為1.56ml。使用染料時(shí)骨塊的實(shí)際飽和為1.67ml。因此，在骨塊中的rhPDGF總量為約(0.3mg/ml)(1.67ml)=0.501mg。在外科手術(shù)中，這些骨塊經(jīng)修整，以適應(yīng)放在骨缺損里，因此在與最初尺寸相比較時(shí)，最終尺寸可變化多至約30%。在本研究中，使用膠原質(zhì)膜。這些膜必須被潤(rùn)濕，以準(zhǔn)確地貼合外科位置。在該研究中，種植入外科手術(shù)位置之前，用含有0.3mg/ml的rhPDGF溶液飽和膠原質(zhì)膜。在殘留骨缺損的區(qū)域，將骨放置在牙槽骨上，并通過兩個(gè)鈦種植體的方式進(jìn)行穩(wěn)定，種植體首先在骨塊上穿孔，其次在皮層下頜骨上穿孔。兩個(gè)鈥種植體(NobelBiocare,MKIII3.3x10mm,machinedandTiUnite)依照標(biāo)準(zhǔn)Branemark方案插入在末端和中部位置使得二者之間最小距離10mm。其次，加入浸在rhPDGF溶液中的可再吸收膜(BioGide，30x40mm)覆蓋填充材料和種植體。應(yīng)當(dāng)理解也可以采用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員普遍已知的其它附著手段。在另一實(shí)施方式中，當(dāng)骨塊擠壓裝入容納空間時(shí)不需要附著手段。在斷續(xù)縫合之前用內(nèi)水平褥式縫合將組織瓣封閉以確保組織的主要被動(dòng)封閉。如果沒有完成封閉，沒有面頰組織瓣的進(jìn)一步活動(dòng)，則面頰組織瓣將進(jìn)一步通過骨膜切口在頂部方向上延伸。使用5-0Gore-Tex縫合線。除放射學(xué)評(píng)價(jià)之外，隨著組織瓣封閉的完成拍攝面頰和舌的照片。測(cè)試過程T2(4個(gè)位置)除了省略可再吸收膜之外，所采用的外科技術(shù)與以上所描述(T1)的相同測(cè)試過程；T3(4個(gè)位置)除了省略rhPDGF-BB之外，所采用的外科技術(shù)與以上所描迷(T1)相同。處死動(dòng)物(B2)在測(cè)試(第二)外科過程后允許進(jìn)行康復(fù)過程4個(gè)月后，六只動(dòng)物被殺掉。拍攝口腔和舌部照片。再入過程；測(cè)試和對(duì)照位置的近-遠(yuǎn)活組織切片；(6只狗)。在完成全身和局部麻醉之后，進(jìn)行放射學(xué)評(píng)價(jià)。取出一整塊部分的下頜骨，放入盛有10%福爾馬林的無菌容器中并進(jìn)行組織學(xué)評(píng)價(jià)。時(shí)間線<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>結(jié)杲當(dāng)與沒有rhPDGF的其它測(cè)試組相比較時(shí)，接受rhPDGF的兩組均表現(xiàn)出更好的軟組織和硬組織愈合。在接受PDGF的8個(gè)位置中有7處出現(xiàn)臨床上和放射學(xué)上的明顯量的垂直嵴增高，然而，在沒有PDGF的情況下，4個(gè)位置中僅有1處具有明顯的骨再生。(圖1~3提供了由三組治療組獲得的放射學(xué)結(jié)果的總結(jié)。)在接受PDGF的位置中除一個(gè)位置之外所有其它位置中軟組織順利地愈合。相反，在沒有PDGF的情況下，除一個(gè)位置之外所有其它位置均出現(xiàn)軟組織開裂和感染。膜的存在似乎未能改善該結(jié)果。即，即使在沒有膜的情況下，PDGF仍能表現(xiàn)出有益作用。因此，使用PDGF似乎排除了進(jìn)行GBR的需求。rhPDGF和去蛋白骨塊的組合，以及存在或者不存在可再吸收膜可用于治療骨骼中尤其是下頜骨或上頜骨中的缺損，并且提供了增高垂直峰的方法以插入金屬種植體。實(shí)施例2茅^炎并"冉凌J:哞W#44'本研究的目的是評(píng)價(jià)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)臨床實(shí)踐(包括輔助骨增高材料的使用)，rhPDGF-BB聯(lián)合卩-TCP或其它經(jīng)批準(zhǔn)的骨空隙填充基質(zhì)對(duì)于在上頜骨或下頜骨中的空隙或縫隙(對(duì)于骨結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性而言并非固有的)的臨床效用。施用劑量和方法所有治療試劑盒裝有0.25gm的(3-TCP(250~1000微米顆粒尺寸)和或者含有0.3mg/mLrhPDGF-BB(組I)或者含有1.0mg/mLrhPDGF-BB(組II)的0.5mL乙酸鈉緩沖溶液。在對(duì)手術(shù)位置進(jìn)行合適的準(zhǔn)備之后，為接受PDGF增強(qiáng)基質(zhì)，在無菌容器中溶液與P-TCP或其它經(jīng)批準(zhǔn)的骨空隙填充物混合，因此移植材料完全飽和。含水的移植物小心地填裝入骨缺損。在一些情況下，所被填充的缺損用可再吸收膠原質(zhì)隔離膜，正如在牙周手術(shù)中通常進(jìn)行的。然后替換組織瓣并用齒間縫合固定以實(shí)現(xiàn)手術(shù)位置的完全覆蓋。安全結(jié)果總結(jié)在研究中沒有出現(xiàn)與裝置相關(guān)的不利事件或嚴(yán)重的不利事件。由于不依從，一個(gè)受試對(duì)象在研究中中止。沒有受試對(duì)象因?yàn)椴焕录兄箙⑴c。對(duì)于任何濃度的rhPDGF-BB和任何經(jīng)批準(zhǔn)的基質(zhì)，安全分析沒有發(fā)現(xiàn)任何增加的安全風(fēng)險(xiǎn)。性能結(jié)果總結(jié)GEM療法的有效性和安全結(jié)果由研究者的臨床效用評(píng)估所確認(rèn)。牙周手術(shù)6月后，在兩組治療組中均觀察到臨床結(jié)合水平、牙周探診深度(PD)和骨填充(〉3mm)的改善。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在兩組rhPDGF-BB治療組中100%的患者均表現(xiàn)出"優(yōu)異"的結(jié)果?？偠灾?，rhPDGF-BB聯(lián)合經(jīng)批準(zhǔn)的骨空隙填充基質(zhì)已表現(xiàn)出，在用于治療所有類型的缺損包括牙周骨缺損、上頜牙槽嵴高度不足、與種植體和牙槽骨相關(guān)的骨缺損的外科手術(shù)之后六個(gè)月，患者中實(shí)現(xiàn)臨床和放射學(xué)有效性。輔助骨移植材料的使用并不改變r(jià)hPDGF+(3-TCP(也稱為GEM21S(BiomimeticTherapeutics,Inc.,Franklin,TN))裝置的益處。結(jié)論從該研究可以得出下述結(jié)論對(duì)于在上頜骨或下頜骨中的空隙或縫隙(對(duì)于骨結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性而言并非固有的)，rhPDGF-BB與(3-TCP或其它經(jīng)批準(zhǔn)的骨空隙填充基質(zhì)聯(lián)合使用是對(duì)于各種口腔和頜面骨應(yīng)用，包括牙槽骨、竇內(nèi)提升和嵴增高而言安全和臨床有效的治療形式。討論和總體結(jié)論rhPDGF-BB(0.3或1.0mg/ml)與(3-TCP的聯(lián)合在患有普通骨缺損的受試對(duì)象的盲法橋連臨床試驗(yàn)(病例系列)中顯示出是安全的和臨床有用的。所述治療形式的臨床益處在所有類型的缺損中觀察到，包括一個(gè)、兩個(gè)和三個(gè)壁缺損，以及周向缺損。此外，在所述研究中使用的材料經(jīng)描述為在牙槽骨、竇內(nèi)提升、嵴增高和種植體周圍缺損中是臨床有用的。研究結(jié)果描述rhPDGF-BB(0.3或1.0mg/ml)與(3-TCP的聯(lián)合在牙周骨缺損、竇內(nèi)提升、種植體和牙槽骨的治療中再生骨骼和軟組織。沒有與所述研究裝置相關(guān)的不利事件，并且所述裝置是安全的。從該研究可以得出下述結(jié)論對(duì)于寬泛的口腔和頜面骨應(yīng)用，包括牙槽骨、竇內(nèi)提升和嵴增高來說，rhPDGF-BB(0.3或1.0mg/ml)與卩-TCP的聯(lián)合是安全的臨床有益的治療形式。此外，rhPDGF-BB(0.3或1.0mg/ml)顯示出與移植材料諸如異種移植物、同種異體移植物和/或可生物再吸收引導(dǎo)組織再生(GTR)膜的的相容性。竇內(nèi)提升研究使用左后上頜骨中的竇內(nèi)增高過程對(duì)受試對(duì)象10-06進(jìn)行牙槽嵴高度不足的治療。采用側(cè)窗法放置在冷凍干燥的骨同種異體移植物(FDBA)和異種移植物(BioOss顆粒材料)中的0.3mg/mlrhPDGF-BB的移植物。在移植物的放置后，將膠原質(zhì)隔離膜放置在側(cè)面窗上。主要用縫合線將軟組織瓣封閉，在治療位置內(nèi)的研究藥物包容和軟組織封閉由研究人評(píng)價(jià)為優(yōu)異。在所有后續(xù)追蹤訪問中軟組織愈合被評(píng)價(jià)為優(yōu)異。在外科手術(shù)后拆除縫合。在外科手術(shù)后2個(gè)月和6個(gè)月的X-光片描述了正常愈合而沒有病理跡象。此外，在外科手術(shù)后6個(gè)月，在種植手術(shù)時(shí)獲得骨核'"樣品的組織學(xué)評(píng)價(jià)描迷了新骨中的移植顆粒具有與移植顆粒橋連的外延骨樣的新骨。在外科手術(shù)后6個(gè)月，在效用、安全和整體評(píng)價(jià)方面，研究人對(duì)治療結(jié)果的臨床效果評(píng)估為優(yōu)異；患者依從和患者接受度評(píng)價(jià)為良好。在后上頜骨對(duì)受試對(duì)象10-09進(jìn)行牙槽嵴高度(兩面)不足的治療。治療由使用在FDBA和異種移植物中的0.3mg/mlrhPDGF-BB的竇底增高構(gòu)成。在組織瓣封閉之前，膠原質(zhì)隔離膜經(jīng)放置覆蓋所述竇"窗口"。研究人將切口內(nèi)的研究藥物包容和軟組織封閉評(píng)價(jià)為優(yōu)異。在6個(gè)月的觀察期內(nèi)，軟組織愈合起初被評(píng)價(jià)為良好，并在外科手術(shù)后一個(gè)月被評(píng)價(jià)為優(yōu)異。在手術(shù)后2周拆除縫合。對(duì)于左側(cè)，在外科手術(shù)后立即獲得X-光片，以及在外科手術(shù)后3個(gè)月獲得X-光片，所述X-光片描述了竇底的提高的垂直骨高度。該受試對(duì)象未能進(jìn)行后續(xù)追蹤訪問6和7(手術(shù)后18周和24周)，并且未能完成該研究；因此，治療結(jié)果的臨床效果評(píng)估未被評(píng)價(jià)。在后上頜骨對(duì)受試對(duì)象10-05進(jìn)行垂直牙高度不足(靠近所述竇的氣腔)的治療。治療由采用側(cè)面竇方法的竇內(nèi)提升過程構(gòu)成。用在FDBA和異種移植物中的1.0mg/mlrhPDGF-BB對(duì)缺損的嵴進(jìn)行增高。在組織瓣封閉之前，用膠原質(zhì)隔離膜覆蓋側(cè)面窗。研究人將切口內(nèi)的研究藥物包容評(píng)價(jià)為優(yōu)異，軟組織封閉評(píng)價(jià)為良好。在后續(xù)追蹤訪問中軟組織愈合被評(píng)價(jià)為優(yōu)異，只有第3次就診被評(píng)價(jià)為良好。在外科手術(shù)后1周和3周拆除縫合。在外科手術(shù)后3、4和6個(gè)月得到的X-光片描迷了增高的竇底的垂直高度而沒有病理跡象,，此外，觀察到在移植位置內(nèi)的增高的骨皺褶，并且是移植區(qū)域內(nèi)的骨成熟的指示。在種植手術(shù)時(shí)獲得自移植位置的骨核顯示出遍及位置的新骨形成，移植的顆粒被新骨和骨樣所包圍。在增高位置中也觀察到骨骼和/或骨樣對(duì)顆粒的橋連。外科手術(shù)后六個(gè)月，在效用、安全、患者接受度和整體評(píng)估方面，治療結(jié)果的臨床效果評(píng)估被評(píng)價(jià)為優(yōu)異；患者依從評(píng)價(jià)為良好。以上引用的所有專利、公報(bào)和摘要以引用的方式整體并入本文。應(yīng)當(dāng)理解前述內(nèi)容僅僅涉及本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，可以做出大量的改進(jìn)和變化，而不背離在以下權(quán)利要求中所界定的本發(fā)明的精神和范圍。權(quán)利要求1.包含PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)的組合物的用途，用于在所希望的位置進(jìn)行頜面骨增高。2.如權(quán)利要求1所述的用途，其中所希望的位置包括牙槽嵴、骨缺損、上頜竇壁或牙槽骨。3.如權(quán)利要求1所述的用途，其中所希望的位置是下頜骨或上頜骨。4.如權(quán)利要求1所述的用途，其中所述組合物進(jìn)一步包含生物相容性粘合劑。5.如權(quán)利要求4所迷的用途，其中所迷生物相容性粘合劑是膠原質(zhì)。6.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述生物相容性基質(zhì)包含磷酸朽或骨塊。7.如權(quán)利要求1~5中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述PDGF是PDGF的同二聚體、PDGF的異二聚體、PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC、PDGF-DD,或其片段，或其重組形式及其混合物和衍生物。8.如權(quán)利要求7所述的用途，其中所迷PDGF片段選自由PDGF的整個(gè)B鏈的氨基酸序列1~31、1~32、33~108、33~109和1~108所組成的組。9.如權(quán)利要求1所述的用途，其中所述PDGF是重組人類PDGF-BB。10.如權(quán)利要求l所迷的用途，其中所述PDGF以約0.01mg/ml~約10mg/ml的濃度存在于溶液之中。11.如權(quán)利要求1所述的用途，其中所述PDGF以約0.3mg/ml~約1.0mg/ml的濃度存在于溶液之中。12.試劑盒，所迷試劑盒包括含有生物相容性基質(zhì)的第一容器；和，含有PDGF的第二容器。13.如權(quán)利要求12所述的試劑盒，進(jìn)一步包括含有可生物再吸收膜的第三容器。14.如權(quán)利要求12所述的試劑盒，其中所述第二容器含有處于緩沖溶液中的PDGF。15.如權(quán)利要求14所述的試劑盒，其中所述PDGF是rhPDGF-BB，所述緩沖劑是乙酸鹽緩沖劑。16.如權(quán)利要求12所述的試劑盒，其中所迷生物相容性基質(zhì)進(jìn)一步包含生物相容性粘合劑。17.如權(quán)利要求12所述的試劑盒，其中所述生物相容性粘合劑包含膠原質(zhì)。18.如權(quán)利要求12所迷的試劑盒，其中所迷生物相容性基質(zhì)包含磷酸4丐或骨塊。19.包含分散于生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物，其中所述生物相容性基質(zhì)包含磷酸鉀或骨塊。20.如權(quán)利要求19所述的組合物，進(jìn)一步包含生物相容性粘合劑。21.如權(quán)利要求20所述的組合物，其中所述生物相容性粘合劑包含膠原質(zhì)。22.如權(quán)利要求19所迷的組合物，其中所述PDGF是PDGF-BB。23.如權(quán)利要求22所迷的組合物，其中所述PDGF-BB是重組人類PDGF-BB。24.如權(quán)利要求19所迷的組合物，其中在所述溶液中的PDGF的濃度為約0.01mg/ml-約10.0mg/ml。全文摘要本發(fā)明提供了用于頜面骨增高，尤其是牙槽嵴增高的組合物的有效新型方法和用途，其沒有與現(xiàn)有技術(shù)方法相關(guān)的那些問題。在一種實(shí)施方式中，這些材料包含人類重組血小板源生長(zhǎng)因子(rhPDGF-BB)和生物相容性基質(zhì)。在另一實(shí)施方式中，這些材料包含rhPDGF-BB、去蛋白骨塊或磷酸鈣和可生物再吸收膜。這些材料在本發(fā)明方法中的使用可有效地再生頜面骨并有助于實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的骨整合種植體。下頜骨和上頜骨是優(yōu)選的用于增高的骨骼，并且對(duì)牙槽嵴的改善是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式。文檔編號(hào)A61L27/12GK101370531SQ200680051154公開日2009年2月18日申請(qǐng)日期2006年11月17日優(yōu)先權(quán)日2005年11月17日發(fā)明者M(jìn)·內(nèi)文斯,M·西米安,S·林奇申請(qǐng)人:生物模擬治療公司