專利名稱::具有活血破瘀、通經(jīng)消癥的組合物及制法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明涉及一種中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法,特別是涉及一種具有活血破瘀、通經(jīng)消癥作用的中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù):
:中醫(yī)婦科是運用中醫(yī)學(xué)的理論研究婦女生理、病理特點和防治婦女特有疾病的一門臨床學(xué)科。人體臟腑經(jīng)絡(luò)氣血的活動規(guī)律,男女基本相同。但婦女在臟器方面有胞宮,在生理上有月經(jīng)、胎孕、產(chǎn)育和哺乳等特有的功能,必然在病理上就會發(fā)生經(jīng)、帶、胎、產(chǎn)、雜等特有的疾病。中醫(yī)婦科學(xué)傳統(tǒng)研究的具體疾病范圍,包括月經(jīng)不調(diào)、崩漏、帶下、子嗣、妊娠、臨產(chǎn)、產(chǎn)后、乳疾、癥瘕、前陰諸疾及雜病等項。對于一些西醫(yī)學(xué)無法解析的病癥,治療效果尤其明顯。本發(fā)明解決了上述婦女疾病的中藥組合物,具有活血破瘀,通經(jīng)消癥的作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供一種具有活血破瘀,通經(jīng)消癥作用的中藥組合物;本發(fā)明目的還在于提供一種具有活血破瘀,通經(jīng)消癥作用的中藥組合物制備方法;本發(fā)明目的還在于提供一種具有活血破瘀,通經(jīng)消癥作用的中藥組合物的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明所述的一種具有活血破瘀,通經(jīng)消癥作用的中藥組合物是由如下重量比的原料藥制成的熟大黃200-500重量份土鱉蟲(炒)20-50重量份水蛭(制)30-90重量份蠐螬(炒)干漆(煅)15-60重量份紅花苦杏仁(炒)60-260重量份黃芩地黃200-500重量份白芍30-90重量份60-260重量份30-100重量份60-260重量份本發(fā)明所述的一種具有活血破瘀,通經(jīng)消癥作用的中藥組合物可由如下重比的原料藥制成的土鱉蟲(炒)20-50重量份熟大黃水蛭(制)躋螬黃芩白芍200-500重量份30-90重量份30-90重量份60-260重量份30-100重量份60-260重量份虻蟲(去翅足,干漆(煅)苦杏仁地黃甘草上述原料優(yōu)選配比為:土鱉蟲、>乂虻蟲(去翅足,干漆(煅)苦杏仁(炒)地黃甘草熟大黃400-500重量份水蛭(制)30-50重量份躋螬(炒)30-40重量份桃仁180-240重量份黃零30-50重量份白芍60-100重量份本發(fā)明所述的中藥組合物丹劑的制備方法為選取原料藥熟大黃200-500重量份水蛭(制)30-90重量份干漆(煅)15-60重量份苦杏仁(炒)60-260重量份地黃200-500重量份炒)30-90重量份15-60重量份60-260重量份200-500重量份60-150重量份40-50重量份炒)60-90重量份40-60重量份60-100重量份200-270重量份100-150重量份;土鱉蟲(炒)20-50重量份蠐螬(炒)30-90重量份紅花60-260重量份黃苳30-100重量份白芍60-260重量份以上各味,粉碎成細粉,過篩,混勻;每100重量份粉末用煉蜜3045重量份加適量的水泛丸,干燥,制成水蜜丸,即得。本發(fā)明所述的組合物可按常規(guī)工藝加入輔料制成片劑、膠囊、口服液、滴丸、噴霧劑、顆粒劑等臨床可接受的劑型;所述輔料包括溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑、潤滑劑、基質(zhì)等。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種鑒別(1)取本發(fā)明組合物丸劑2.5g,研細,加乙醇30-50ml,超聲處理20-40分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水8-15ml使溶解,加鹽酸lml,置水浴上加熱水解25-35分鐘,立即冷卻,用乙醚振搖提取2-3次,每次IO-20ml,合并乙醚液,揮干,殘渣加醋酸乙酯lml使溶解,作為供試品溶液;另取大黃對照藥材50mg,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各12ul,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以石油醚(306(TC)—甲酯乙酯一甲酸(13-18:3-9:1-2)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙紅色斑點;(2)取本發(fā)明組合物丸劑2.5g,研細,加乙醇35-50ml,超聲處理25-40分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水40ml使溶解,用水飽和的正丁醇提取2-4次,每次15-25ml,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌2-4次,每次14-25ml,正丁醇液蒸干,殘渣加乙醇lml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每lml含1.5-2.5mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6U1,分別點于同一以含3-5%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成條狀,以醋酸乙酯一丁酮一甲酸-水(4-6:2-5:卜2:1-2)為展開劑,展開,取出,吹干,噴以l%三氯化鐵乙醇溶液;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的條斑;(3)取本發(fā)明組合物丸劑1.2g,研細,加稀乙醇70-90ml,超聲處理25-40分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水和乙醚各20-40ml使溶解,移至分液漏斗中,靜置分層,棄去乙醚液,水液再用乙醚提取2-4次,每次20-40ml,棄去乙醚液,水液加水飽和的正丁醇提取2-4次,每次20-40ml,合并正丁醇液,回收溶劑至干;殘渣加水5ml使溶解,通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑lcm,柱高12cm),以水50ml洗脫,棄去水液,再用30-50%乙醇40-60ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加丙酮lml使溶解,取上清夜作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品,加乙醇制成每lml含lmg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液10ul、對照品溶液5iU,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(7-9:1-2:3-5:1-3)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105'C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;(4)取本發(fā)明組合物丸劑10克,研細,加水30-50毫升,醋酸乙酯30-50ml,超聲振蕩20-40分鐘,離心分層,吸取上層液,蒸干,殘渣加無水乙醇2毫升使溶解,作為供試品溶液;另取甘草對照藥材l克,加水20ml,乙酸乙酯20毫升,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液、對照藥材溶液各5Ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-冰醋酸(6-8:1-2:1-2)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105。C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;含量測定照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗,用十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-磷酸(80-90:10-20:0.04-0.07)為流動相;檢測波長為289nm;理論板數(shù)按大黃素峰計算應(yīng)不低于4000;對照品溶液的制備精密稱取大黃素對照品10mg,置50ml量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取2ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每lml中含大黃素8l^g);供試品溶液的制備取本發(fā)明組合物丸劑約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇20-30ml,稱定重量,加熱回流0.5-1.5小時,取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補足堿失的重量,搖勻,濾過;精密量取續(xù)濾液5ml,置錐形瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L硫酸溶液20ml,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)8-20分鐘,置水浴中加熱l-2小時,立即冷卻,移置分液漏斗中,加乙醚提取2-4次,每次25ml,合并乙醚液,用水15ml洗滌,棄去水液,乙醚液通過鋪有適量無水硫酸鈉的漏斗濾過,用少量乙醚洗滌容器與濾器,濾液低溫回收溶劑至干,殘渣加甲醇適量使溶解,并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得;測定法,分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各101^1,注入液相色譜儀,測定,即得。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法優(yōu)選如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種鑒別(1)取本發(fā)明組合物丸劑2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水10ml使溶解,加鹽酸lml,置水浴上加熱水解30分鐘,立即冷卻,用乙醚振搖提取2次,每次15ml,合并乙醚液,揮干,殘渣加醋酸乙酯lml使溶解,作為供試品溶液;另取大黃對照藥材50mg,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各l2ul,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以石油醚(3060°C)一甲酯乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙紅色斑點;(2)取本發(fā)明組合物丸劑2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水40ml使溶解,用水飽和的正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌3次,每次20ml,正丁醇液蒸干,殘渣加乙醇lml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每lml含2mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6ul,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成條狀,以醋酸乙酯一丁酮一甲酸-水(5:3:1:1)為展開劑,展開,取出,吹干,噴以lQ^三氯化鐵乙醇溶液;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的條斑;(3)取本發(fā)明組合物丸劑1.2g,研細,加稀乙醇80ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水和乙醚各30ml使溶解,移至分液漏斗中,靜置分層,棄去乙醚液,水液再用乙醚提取3次,每次30ml,棄去乙醚液,水液加水飽和的正丁醇提取3次,每次30ml,合并正丁醇液,回收溶劑至干;殘渣加水5ml使溶解,通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑lcm,柱高12cm),以水50ml洗脫,棄去水液,再用4(F。乙醇50ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加丙酮lml使溶解,取上清夜作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品,加乙醇制成每lml含lmg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液10ul、對照品溶液5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:1:4:1)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105'C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;(4)取本發(fā)明組合物丸劑10克,研細,加水40毫升,醋酸乙酯40ml,超聲振蕩30分鐘,離心分層,吸取上層液,蒸干,殘渣加無水乙醇2毫升使溶解,作為供試品溶液;另取甘草對照藥材l克,加水20ml,乙酸乙酯20毫升,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液、對照藥材溶液各5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-冰醋酸(7:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105。C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;含量測定照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗,用十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-磷酸(85:15:0.05)為流動相;檢測波長為289nm;理論板數(shù)按大黃素峰計算應(yīng)不低于4000;對照品溶液的制備精密稱取大黃素對照品10mg,置50ml量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取2ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每lml中含大黃素8Pg);供試品溶液的制備取本發(fā)明組合物丸劑約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,稱定重量,加熱回流l小時,取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補足堿失的重量,搖勻,濾過;精密量取續(xù)濾液5ml,置錐形瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L硫酸溶液20ml,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)10分鐘,置水浴中加熱l小時,立即冷卻,移置分液漏斗中,加乙醚提取3次,每次25ml,合并乙醚液,用水15ml洗滌,棄去水液,乙醚液通過鋪有適量無水硫酸鈉的漏斗濾過,用少量乙醚洗滌容器與濾器,濾液低溫回收溶劑至干,殘渣加甲醇適量使溶解,并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得;測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10W,注入液相色譜儀,測定,即得。本發(fā)明組合物具有很好的藥效,相比現(xiàn)有制劑表現(xiàn)出很好的藥理效果,具有更好的活血破瘀,通經(jīng)消癥作用;并且本發(fā)明所述的范圍在可以實現(xiàn)本發(fā)明的藥理效果同時,經(jīng)過篩選,意外的發(fā)現(xiàn),在組合物的某些范圍內(nèi),有著更為突出的藥理效果。本發(fā)明所提供的中藥組合物的質(zhì)量控制方法,是通過大量具體創(chuàng)造性試驗篩選后得到,鑒別方法中通過對樣品處理方法的篩選,展開劑的選擇,使得鑒別專屬性很好,而且方法經(jīng)濟適用、結(jié)果快速,并且對不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測定方法中通過對樣品、供試品處理方法的篩選,展開劑的選擇,使得含量測定方法可以很有效的對產(chǎn)品進行質(zhì)量控制,并且用該方法測定的產(chǎn)品要相比其他方法測定的產(chǎn)品在藥理效果上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。下述實驗例和實施例用于進一步說明但不限于本發(fā)明。試驗例1活血化瘀作用實驗按照藥物組i、藥物組n與對照組的處方比例稱取原料藥材,按照實施例i水蛭(制)35g干漆(煅)45g黃芩35g甘草110g;水蛭(制)50g干漆(煅)50g黃芩40g甘草120g水蛭(制)60g干漆(煅)30g黃芩60g甘草90g工藝制備,與對照組比較活血化瘀作用組方I420g炒)70g200g220g熟大黃虻蟲(去翅足地黃組方II熟大黃虻蟲(去翅足,地黃對照組;熟大黃虻蟲(去翅足,桃仁地黃土鱉蟲、>,躋螬(炒)苦杏仁(炒)白芍450g炒)80g200g260g300g炒)45g120g300g土鱉蟲(炒)苦杏仁'(炒)白芍土鱉蟲(炒)躋螬(炒)苦杏仁白芍42g32g70g70g50g35g90g90g30g45g120g120g(1)對血瘀大鼠血液流變學(xué)指標的影響取Wistar大鼠80只,隨機分為8組生理鹽水(NS)對照組、模型組、本發(fā)明藥物I、II的高、低劑量組及對照組前2組每日灌胃生理鹽水10ml/kg,本發(fā)明藥物I、II組及對照組分別10ml/kg、20ml/kg灌胃給藥,'每日1次,連續(xù)7天。第5天,除生理鹽水組,其余各組大鼠以0.W。腎上腺素0.2ml皮下注射,共2次,間隔6小時,其間進行一次冰水冷浴剌激5分鐘,造成冷凝型血瘀模型。末次給藥后l小時,股靜脈取血5ml,抗凝,將部分全血置于壓積管中以3000rpm離心30分鐘,測紅細胞壓積,取上層血漿測定血漿粘度,用毛細管法測全血粘度、測纖維蛋白原含量,采用細胞電泳儀測定細胞電泳時間。結(jié)果見下表對大鼠血液流變學(xué)指標的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注*N.S組比較P〈0.05,**P<0.01;與模型組比較AP〈0.05,M3〈0.01#對照組與藥物組I、II相比P<0.01。結(jié)果表明本發(fā)明藥物組合物I、II與對照藥物組的臨床用量均可顯著改善血瘀大鼠的紅細胞壓積、血漿粘度、全血粘度、纖維蛋白原量及紅細胞電泳時間,并呈量效關(guān)系。本發(fā)明藥物組合物I、II與對照藥物組相比有顯著差異(P〈0.0D,且藥物II組優(yōu)于藥物I組。(2)對大鼠體外血栓形成及血小板粘附率的影響取大鼠70只,隨機分成生理鹽水組、本發(fā)明藥物I、II的高、低劑量組及陽性對照組,前2組每日灌胃生理鹽水10ml/kg,本發(fā)明藥物I、II組,對照組分別10ml/kg、20ml/kg灌胃給藥,每日1次,連續(xù)7天。末次給藥后1小時,股靜脈取血1.8ml注入硅化膠管內(nèi),于體外血栓形成儀的旋轉(zhuǎn)盤上以17rpm旋轉(zhuǎn)15分鐘,取下膠管,傾倒出血液及血栓于濾紙上,測定血栓長度及濕重,再置64。C干燥箱內(nèi),干燥20分鐘后稱干重.另將lml血液注入粘附球瓶內(nèi),同上旋轉(zhuǎn),室溫37。C下測旋轉(zhuǎn)前后血小板數(shù),計算粘附率(旋轉(zhuǎn)前血小板數(shù)旋轉(zhuǎn)后血小板數(shù)/旋轉(zhuǎn)前血小板數(shù))。結(jié)果見下表對大鼠體外血栓形成及血小板粘附率的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注*N.S組比較P〈0.05,**P<0.01;對照組與藥物組I、11相比#<0.05,##P<0.01。結(jié)果表明本發(fā)明藥物組合物I、n與對照藥物組的臨床用量均能夠減輕大鼠體外血栓濕重、干重,使血栓長度縮短,抑制血小板粘附,并呈量效關(guān)系。本發(fā)明藥物組合物i、n與對照藥物組相比有顯著差異(p<o.oi),且藥物n組優(yōu)于藥物i組。(3)本發(fā)明藥物對正常大鼠血清中雌激素(E2)和孕酮(P)含量的影響取健康未成年雌性SD大鼠70只,按體質(zhì)量隨機分為7組,每組10只??瞻讓φ战M以等量生理鹽水灌胃;本發(fā)明藥物I、II及對照藥物組分別給予低、高劑量IOg/kg、20g/kg的劑量;對照組及本發(fā)明藥物各組連續(xù)灌胃給藥14天。于第14天給藥1小時后,眼眶后靜脈叢取血,3000r/min離心15min取血清,測定血清中雌二醇(E2)和孕酮(P)的含量。結(jié)果見下表對正常大鼠血清中雌激素和孕酮含量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>注*N.S組比較P〈0.05,**P<0.01;對照組與藥物組I、11相比#<0.05,##P<0.01。結(jié)果表明本發(fā)明藥物I、n及對照藥物組高、低劑量組均能提高大鼠血清中的雌二醇及血清中孕酮含量,其中本發(fā)明藥物i、n組與對照組相同劑量組比較有顯著性差異(p〈o.oi);且本發(fā)明藥物n相同劑量組優(yōu)于本發(fā)明藥物i組。提示本發(fā)明藥物i、n組及對照組能增強垂體一腎上腺皮質(zhì)一卵巢功能軸系統(tǒng)活性,具有一定的改善神經(jīng)內(nèi)分泌的作用。(4)本發(fā)明藥物對小鼠子宮平滑肌興奮性的影響取健康無孕雌性昆明小白鼠70只,體質(zhì)量25-30g,隨機分為7組,每組10只。空白組給予等體積的生理鹽水;對照組及本發(fā)明藥物I、II組的低、高劑量組分別給予10g/kg、20g/kg劑量;對照組及本發(fā)明藥物各劑量組連續(xù)灌胃給藥7天,于實驗前連續(xù)2天,每天腹腔注射1次苯甲酸雌二醇0.2mL/只,用戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉,在下腹部切l(wèi)cm左右的切口,打開腹腔,找出一側(cè)子宮角,輕輕剝離周圍組織,在其中點用連有棉線的蛙心夾輕輕夾住,連在張力換能器上,用臺式平衡記錄儀描記曲線,待曲線穩(wěn)定后,在子宮上滴加縮宮素lml,觀察藥物對子宮平滑肌的影響。結(jié)果見下表:對小鼠催產(chǎn)素致子宮平滑肌收縮的作用<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注*N.S組比較P〈0.05,**P<0.01;對照組與藥物組I、11相比#<0.05,##P<0.01。結(jié)果表明本發(fā)明藥物I、II組及對照組的高、低劑量組均可增加子宮平滑肌收縮幅度,與縮宮素有協(xié)同作用,提示本發(fā)明藥物具有促進子宮平滑肌收縮的功效,且與空白組比較有顯著性差異;本發(fā)明藥物I、II組與相同劑量的對照組相比有顯著性差異,且相同劑量的本發(fā)明藥物II組優(yōu)于本發(fā)明藥物I組。實驗例3鑒別篩選實驗1、本發(fā)明藥物制劑中對熟大黃的薄層鑒別(1)上述鑒別方法中熟大黃的薄層鑒別展開劑配比的優(yōu)選標準品來源大黃購于中國藥品生物制品檢定所批號120984-200301分別吸取供試品溶液、對照品溶液各12W,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以不同比例的石油醚(3060°C)—甲酯乙酯一甲酸的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏。觀察薄層板上供試品主斑點展開的效果,結(jié)果見下表大黃的鑒別方法中展開劑配比優(yōu)選實驗結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>從上表可以看出展開劑配比為15:5:1時,在薄層板上展開效果好,主斑點清晰,無拖尾、與對照品的主斑點位置及顏色相同,適合試驗要求。(2)上述大黃鑒別方法中樣品溶液點樣量的優(yōu)選吸取供試品溶液0.5W、1W、1.5J4、2W分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以石油醚(306(TC)—甲酯乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏。觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果,結(jié)果見下表大黃的鑒別方法中樣品溶液點樣量優(yōu)選實驗結(jié)果表點樣量0.5u1lu11.5n12u1效果供試品在相應(yīng)對照品位置無斑點供試品在相應(yīng)對照品位置斑點顏色相同供試品在相應(yīng)對照品位置斑點顏色相同供試品在相應(yīng)對照品位置斑點顏色相同從上表可以看出供試品點樣量在12ul時,在薄層板上顯色效果好,適合試驗要求。(3)陰性對照試驗取缺大黃的陰性樣品,照上述大黃鑒別方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液,展開后在對照品溶液對應(yīng)位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)斑點,說明所選取的鑒別實驗專屬性強。2、本發(fā)明藥物制劑中對黃芩的薄層鑒別(1)上述鑒別方法中黃芩的薄層鑒別展開劑配比的優(yōu)選-標準品來源黃苳苷購于中國藥品生物制品檢定所批號715-200211分別吸取供試品溶液、對照品溶液各6W,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成條狀,以不同比例的醋酸乙酯一丁酮一甲酸-水的溶液為展開劑,展開,取出,吹干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液。觀察薄層板上供試品主斑點展開的效果,結(jié)果見下表黃芩的鑒別方法中展開劑配比優(yōu)選實驗結(jié)果表展開劑配比10:5:1:15:5:1:15:3:1:15:3:3:1主斑點展開效分離不好,干擾分離不好,有干分離效果好,無分離不好,干擾果大擾干擾大從上表可以看出展開劑配比為5:3:1:1時,在薄層板上展開效果好,主斑點清晰,無拖尾、與對照品的主斑點位置及顏色相同,適合試驗要求。(2)上述黃芩的鑒別方法中樣品溶液點樣量的優(yōu)選-吸取供試品溶液2W、4W、、8W分別點于分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成條狀,以醋酸乙酯一丁酮一甲酸-水(5:3:1:1)為展開劑,展開,取出,吹干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液。觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果,結(jié)果見下表黃苓的鑒別方法中樣品溶液點樣量優(yōu)選實驗結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>從上表可以看出供試品點樣量在6ul時,在薄層板上顯色效果最好好,適合試驗要求。(3)陰性對照試驗取缺黃芩的陰性樣品,照上述黃芩鑒別方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液,展開后在對照品溶液對應(yīng)位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)斑點,說明所選取的鑒別實驗專屬性強。3、本發(fā)明藥物制劑中對白芍的薄層鑒別(1)上述鑒別方法中白芍的薄層鑒別展開劑配比的優(yōu)選標準品來源芍藥苷購于中國藥品生物制品檢定所批號736-200217分別吸取供試品溶液、對照藥材溶液各5u1,分別點于同一硅膠G薄層板上,以不同比例的氯仿-甲醇-冰醋酸沉淪為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105'C加熱至斑點顯色清晰。觀察薄層板上供試品主斑點展開的效果,結(jié)果見下表白芍的鑒別方法中展開劑配比優(yōu)選實驗結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>從上表可以看出展開劑配比為8:1:4:1時,在薄層板上展開效果好,主斑點清晰,無拖尾、與對照品的主斑點位置及顏色相同,適合試驗要求。(2)上述白芍的鑒別方法中樣品溶液點樣量的優(yōu)選-吸取供試品溶液4、6、8、10ul、對照品溶液5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:1:4:1)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105。C加熱至斑點顯色清晰。觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果,結(jié)果見下表白芍的鑒別方法中樣品溶液點樣量優(yōu)選實驗結(jié)果表點樣量4ii16w18u110u1效果供試品在相應(yīng)對照品位置無斑點供試品在相應(yīng)對照品位置斑點顏色相同,但不清晰。供試品在相應(yīng)對照品位置斑點顏色相同,斑點較清晰。供試品在相應(yīng)對照品位置斑點顏色相同,但較深。從上表可以看出供試品點樣量在10ul時,在薄層板上顯色效果最好好,適合試驗要求。(3)陰性對照試驗取缺白芍的陰性樣品,照上述白芍鑒別方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液,展開后在對照品溶液對應(yīng)位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)斑點,說明所選取的鑒別實驗專屬性強。4、本發(fā)明藥物制劑中對甘草的薄層鑒別(1)上述鑒別方法中甘草的薄層鑒別展開劑配比的優(yōu)選標準品來源甘草購于中國藥品生物制品檢定所批號0904-200108分別吸取供試品溶液、對照藥材溶液各5u1,分別點于同一硅膠G薄層板上,以不同比例的氯仿-甲醇-冰醋酸溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105r加熱至斑點顯色清晰。觀察薄層板上供試品主斑點展開的效果,結(jié)果見下表甘草的鑒別方法中展開劑配比優(yōu)選實驗結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>從上表可以看出展開劑配比為7:1:1時,在薄層板上展開效果好,主斑點清晰,無拖尾、與對照品的主斑點位置及顏色相同,適合試驗要求。(2)上述甘草的鑒別方法中樣品溶液點樣量的優(yōu)選吸取供試品溶液5ul、對照品溶液5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:1:4:1)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105"C加熱至斑點顯色清晰。觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果,結(jié)果見下表甘草的鑒別方法中樣品溶液點樣量優(yōu)選實驗結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>從上表可以看出供試品點樣量在5ixl時,在薄層板上顯色效果最好好,適合試驗要求。(3)陰性對照試驗取缺甘草的陰性樣品,照上述甘草鑒別方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液,展開后在對照品溶液對應(yīng)位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)斑點,說明所選取的鑒別實驗專屬性強。實驗例4含量測定實驗檢測儀器島津公司SPD-10Avp型高效液相色譜儀色譜柱迪瑪公司(ZorbaxC184.6X150mm,5Mm)流動相甲醇-水-磷酸(85:15:0.05)檢測波長289nm流速1.000ml/min柱溫室溫對照品大黃素購于中國藥品生物制品檢定所批號756-200211測定方法按[含量測定]項下供試品溶液的制備方法制備樣品液;用微孔濾膜(0.45Wn)過濾。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各IOW,注入液相色譜儀,測定,即得。l.含量測定方法考察(1)穩(wěn)定性試驗對照品溶液,分別于配制后O、2、4、6、12、24小時,依法測定,結(jié)果表明,其在24小時內(nèi)基本穩(wěn)定,結(jié)果見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>(2)線性關(guān)系考察取對照品溶液(8.32Pg/ml)搖勻,分別精密吸取l、3、5、7、9、IIW注入高效液相色譜儀,測定峰面積,結(jié)果見下表,并繪制標準曲線,表明黃芩苷在0.0956Pg-1.0516Pg間呈線性關(guān)系,其回歸方程為Area=2.77394E-07*Amt-90275.86(r=0.999998)<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>(3)精密度試驗精密吸取供試品溶液,(批號05040101)IOW,重復(fù)進樣5次,求得相對標準偏差〈2%,結(jié)果見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>(4)重現(xiàn)性試驗按含量測定方法,取同一批號(批號05040202)樣品進行測定,求得相對標準偏差〈2%,結(jié)果見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>含量(mg/克)0.47560.48000.47980.46480.4723平均含量(mg/克)0.4745RSD(%)1.33(5)回收率試驗精密稱取已知含量的同一批號(批號05040202)的樣品1.0g,置100ml量瓶中,加10ml大黃素對照品溶液(41.6ug/ml),按正文供試品溶液的制備方法操作,測定其含量,并計算其回收率,測定結(jié)果見下表試驗取樣量樣品中加入大測出大回收率平均回RSD號(g)大黃素量(mg)黃素量(mg)黃素量(mg)(%)收率(%)(%)11.05600.50780.41600.920099.0921.00980.48030.41600.891298.7731.06120.50470.41600.919899.7898.870.6241.00740.47910.41600.887498.1551.03250.49110.41600.901298.58由以上方法學(xué)考查結(jié)果可以看出,本發(fā)明藥物所采用的含量測定方法其線性關(guān)系、穩(wěn)定性、精密度、重現(xiàn)性等均良好,能夠有效控制本發(fā)明藥物質(zhì)量。從以上質(zhì)量檢測方法的研究結(jié)果可以看出,本發(fā)明藥物制劑所采用的質(zhì)量檢測方法科學(xué)、合理、具有獨創(chuàng)性,能夠有效控制本發(fā)明藥物制劑質(zhì)量。具體實施方式下述實施例均能夠?qū)崿F(xiàn)上述實驗例所述的效果實施例l:口服液熟大黃300g土鱉蟲(炒)40g水蛭(制)90g蠐螬(炒)50g干漆(煅)30g紅花240g苦杏仁(炒)160g黃芩60g地黃300g白芍240g制法桃仁、苦杏仁提取揮發(fā)油,蒸餾后的水溶液另器收集;其余十味加水煎煮2次,合并煎液,濾過,濾液與上述水溶液合并,減壓濃縮至相對密度為1.051.25的清膏,加入上述揮發(fā)油,混勻,加7jC,調(diào)節(jié)PH值至5.56.5,靜置,濾過,灌裝,滅菌,即得。實施例2:軟膠囊熟大黃420g土鱉蟲(炒)42g水蛭(制)35g虻蟲(去翅足,炒)70g蠐螬(炒)32g干漆(煅)45g桃仁200g苦杏仁(炒)70g黃苳35g地黃220g白芍70g甘草110g;制法桃仁、苦杏仁提取揮發(fā)油,蒸餾后的水溶液另器收集;其余十味加水煎煮2次,合并煎液,濾過,濾液與上述水溶液合并,減壓濃縮至相對密度為1.151.35的稠膏,減壓干燥,粉碎成細粉,加入植物油及上述揮發(fā)油,混勻,制成軟膠囊,即得。實施例3:泡騰劑熟大黃460g土鱉蟲(炒)40g水蛭(制)50g虻蟲(去翅足,炒)85g蠐螬(炒)35g干漆(煅)50g桃仁230g苦杏仁(炒)90g黃芩40g地黃260g白芍90g甘草120g制法桃仁、苦杏仁提取揮發(fā)油,蒸餾后的水溶液另器收集;其余十味加水煎煮2次,合并煎液,濾過,濾液與上述水溶液合并,減壓濃縮至相對密度為1.151.35的稠膏,減壓干燥,粉碎成細粉,加入泡騰崩解劑,制粒,噴入揮發(fā)油,加入適量矯味劑、著色劑制成顆粒或壓片,即得。實施例4:顆粒劑熟大黃450g土鱉蟲(炒)50g水蛭(制)50g虻蟲(去翅足,炒)80g蠐螬(炒)35g干漆(煅)50g桃仁200g苦杏仁(炒)90g黃芩40g地黃260g白芍90g甘草120g本藥物組合物加入常規(guī)輔料,通過常規(guī)工藝制成顆粒劑。實施例5:膠囊劑熟大黃420g土鱉蟲(炒)42g水蛭(制)35g虻蟲(去翅足,炒)70g蠐螬(炒)32g干漆(煅)45g桃仁200g苦杏仁(炒)70g黃芩35g地黃220g白芍70g甘草110g;本藥物組合物加入常規(guī)輔料,通過常規(guī)工藝制成膠囊劑。實施例6:熟大黃300g土鱉蟲(炒)30g水蛭(制)60g虻蟲(去翅足,炒)45g蠐螬(炒)45g干漆(煅)30g桃仁120g苦杏仁(炒)120g黃芩60g地黃300g白芍120g甘草90g以上十二味,粉碎成細粉,過篩,混勻;每100g粉末用煉蜜3045g加適量的水泛丸,干燥,制成水蜜丸,即得。鑒別(1)取本品2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水10ml使溶解,加鹽酸lml,置水浴上加熱水解30分鐘,立即冷卻,用乙醚振搖提取2次,每次15ml,合并乙醚液,揮干,殘渣加醋酸乙酯lml使溶解,作為供試品溶液;另取大黃對照藥材50mg,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各l2ul,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以石油醚(3060°C)—甲酯乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙紅色斑點;(2)取本品2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水40ml使溶解,用水飽和的正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌3次,每次20ml,正丁醇液蒸干,殘渣加乙醇lml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每lml含2mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6ul,分別點于同一以含4X醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成出,吹干,噴以l%三氯化鐵乙醇溶液;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的條斑;(3)取本品1.2g,研細,加稀乙醇80ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水和乙醚各30ml使溶解,移至分液漏斗中,靜置分層,棄去乙醚液,水液再用乙醚提取3次,每次30ml,棄去乙醚液,水液加水飽和的正丁醇提取3次,每次30ml,合并正丁醇液,回收溶劑至干;殘渣加水5ml使溶解,通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑lcm,柱高12cm),以水50ml洗脫,棄去水液,再用40%乙醇50ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加丙酮lml使溶解,取上清夜作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品,加乙醇制成每lml含lmg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液10ul、對照品溶液5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:1:4:1)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105"C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;(4)取本品10克,研細,加水40毫升,醋酸乙酯40ml,超聲振蕩30分鐘,離心分層,吸取上層液,蒸干,殘渣加無水乙醇2毫升使溶解,作為供試品溶液;另取甘草對照藥材l克,加水20ml,乙酸乙酯20毫升,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液、對照藥材溶液各5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-冰醋酸(7:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105'C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;含量測定,照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗,用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-磷酸(85:15:0.05)為流動相;檢測波長為289nm;理論板數(shù)按大黃素峰計算應(yīng)不低于4000;對照品溶液的制備精密稱取大黃素對照品10mg,置50ml量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取2ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每lml中含大黃素8l^g);供試品溶液的制備取本品約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,稱定重量,加熱回流l小時,取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補足堿失的重量,搖勻,濾過;精密量取續(xù)濾液5ml,置錐形瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L硫酸溶液20ml,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)10分鐘,置水浴中加熱1小時,立即冷卻,移置分液漏斗中,加乙醚提取3次,每次25ml,合并乙醚液,用水15ml洗滌,棄去水液,乙醚液通過鋪有適量無水硫酸鈉的漏斗濾過,用少量乙醚洗滌容器與濾器,濾液低溫回收溶劑至干,殘渣加甲醇適量使溶解,并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得;測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10W,注入液相色譜儀,測定,即得。本品含大黃以大黃素(C15H1Q05)計,每lg不得少于0.40mg。實施例7:熟大黃300g土鱉蟲(炒)30g水蛭(制)60g虻蟲(去翅足,炒)45g蠐螬(炒)45g干漆(煅)30g桃仁120g苦杏仁(炒)120g黃芩60g地黃300g白芍120g甘草90g以上十二味,粉碎成細粉,過篩,混勻;每100g粉末用煉蜜3045g加適量的水泛丸,干燥,制成水蜜丸,即得。鑒別(1)取本品,置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶大,直徑60140um;草酸鈣簇晶直徑1832um,存在于薄壁細胞中,常排列成行,或一個細胞中含數(shù)個簇晶;薄壁組織灰棕色至黑棕色,細胞多皺縮,內(nèi)含棕色核狀物;纖維淡黃色,梭形,壁厚,孔溝細;纖維束周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶,形成晶纖維;體壁碎片黃色或棕紅色,有圓形毛窩,直徑824飽,有的具長短不一的剛毛;體壁碎片金黃色或棕色,毛窩雙圈狀,有時表面可見疣狀或針尖狀突起;體壁碎片淡黃色,毛窩邊緣為重疊圈狀;(2)取本品2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水10ml使溶解,加鹽酸lml,置水浴上加熱水解30分鐘,立即冷卻,用乙醚振搖提取2次,每次15ml,合并乙醚液,揮干,殘渣加醋酸乙酯lml使溶解,作為供試品溶液;另取大黃對照藥材50mg,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各l2ul,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以石油醚(3060°C)—甲酯乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙紅色斑點;(3)取[鑒別](2)項下的剩余濾液,蒸干,殘渣加水犯ml使溶解,用水飽和的正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌3次,每次20ml,正丁醇液蒸干,殘渣加乙醇lml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每lml含2mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6ul,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成條狀,以醋酸乙酯一丁酮一甲酸-水(5:3:1:1)為展開劑,展開,取出,吹干,噴以l%三氯化鐵乙醇溶液;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的條斑;(4)取本品1.2g,研細,加稀乙醇80ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水和乙醚各30ml使溶解,移至分液漏斗中,靜置分層,棄去乙醚液,水液再用乙醚提取3次,每次30ml,棄去乙醚液,水液加水飽和的正丁醇提取3次,每次30ml,合并正丁醇液,回收溶劑至干;殘渣加水5ml使溶解,通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑lcm,柱高12cm),以水50ml洗脫,棄去水液,再用40%乙醇50ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加丙酮lml使溶解,取上清夜作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品,加乙醇制成每lml含lmg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法(附錄VIB)試驗,取供試品溶液10ul、對照品溶液5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:1:4:1)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105。C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;(5)取本品10克,研細,加水40毫升,醋酸乙酯40ml,超聲振蕩30分鐘,離心分層,吸取上層液,蒸干,殘渣加無水乙醇2毫升使溶解,作為供試品溶液;另取甘草對照藥材l克,加水20ml,乙酸乙酯20毫升,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液、對照藥材溶液各5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-冰醋酸(7:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105'C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;含量測定,照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗,用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-磷酸(85:15:0.05)為流動相;檢測波長為289nm;理論板數(shù)按大黃素峰計算應(yīng)不低于4000;對照品溶液的制備精密稱取大黃素對照品10mg,置50ml量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取2ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每lml中含大黃素8Pg);供試品溶液的制備取本品約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,稱定重量,加熱回流l小時,取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補足堿失的重量,搖勻,濾過;精密量取續(xù)濾液5ml,置錐形瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L硫酸溶液20ml,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)10分鐘,置水浴中加熱1小時,立即冷卻,移置分液漏斗中,加乙醚提取3次,每次25ml,合并乙醚液,用水15ml洗滌,棄去水液,乙醚液通過鋪有適量無水硫酸鈉的漏斗濾過,用少量乙醚洗滌容器與濾器,濾液低溫回收溶劑至干,殘渣加甲醇適量使溶解,并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得;測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10W,注入液相色譜儀,測定,即得。本品含大黃以大黃素(d孔。0s)計,每lg不得少于0.40mg。功能與主治活血破瘀,通經(jīng)消癥。用于瘀血內(nèi)停所致的癥瘕、閉經(jīng),癥見腹部腫塊、肌膚甲錯、面色黯黑、潮熱羸瘦、經(jīng)閉不行。用法與用量口服,一次3g,一日12次。規(guī)格每60丸重3g。權(quán)利要求1.一種具有活血破瘀,通經(jīng)消癥作用的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為熟大黃200-500重量份土鱉蟲(炒)20-50重量份水蛭(制)30-90重量份蠐螬(炒)30-90重量份干漆(煅)15-60重量份紅花60-260重量份苦杏仁(炒)60-260重量份黃芩30-100重量份地黃200-500重量份白芍60-260重量份。1、一種具有活血破瘀,通經(jīng)消癥作用的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為-熟大黃200-500重量份土鱉蟲水蛭(制)30-90重量份躋膽干漆(煅)15-60重量份紅花苦杏仁(炒)60-260重量份黃芩地黃200-500重量份白芍2、如權(quán)利要求l所述的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物中的原料藥組成為熟大黃200-500重量份土鱉蟲(炒)20-50重量份水蛭(制)30-90重量份虻蟲(去翅足,炒)30-90重量份蠐螬(炒)30-90重量份干漆(煅)15-60重量份桃仁60-260重量份苦杏仁(炒)60-260重量份黃零30-100重量份地黃200-500重量份白芍60-260重量份甘草60-150重量份。3、如權(quán)利要求2所述的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為熟大黃400-500重量份土鱉蟲(炒)40-50重量份水蛭(制)30-50重量份虻蟲(去翅足,炒)60-90重量份蠐螬(炒)30-40重量份干漆(煅)40-60重量份桃仁180-240重量份苦杏仁(炒)60-100重量份黃苳30-50重量份地黃200-270重量份白芍60-100重量份甘草100-150重量份。4、如權(quán)利要求3所述的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為熟大黃420重量份土鱉蟲(炒)42重量份水蛭(制)35重量份虻蟲(去翅足,炒)70重量份躋螬(炒)32重量份干漆(煅)45重量份桃仁200重量份苦杏仁(炒)70重量份黃苳35重量份地黃220重量份白芍70重量份甘草IIO重量份。5、如權(quán)利要求3所述的藥物組合物,其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為熟大黃450重量份土鱉蟲(炒)50重量份水蛭(制)50重量份虻蟲(去翅足,炒)80重量份蠐螬(炒)35重量份干漆(煅)50重量份桃仁200重量份苦杏仁(炒)90重量份黃苳40重量份地黃260重量份白芍90重量份甘草120重量份。6、如權(quán)利要求1-5所述的藥物組合物的制備方法,其特征在于該方法為以上各味,粉碎成細粉,過篩,混勻;每100重量份粉末用煉蜜3045重量份加適量的水泛丸,干燥,制成水蜜丸,即得。7、如權(quán)利要求1-5所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法,其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種(1)取本發(fā)明組合物丸劑2.5g,研細,加乙醇30-50ml,超聲處理20-40分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水8-15ml使溶解,加鹽酸lml,置水浴上加熱水解25-35分鐘,立即冷卻,用乙醚振搖提取2-3次,每次10-20ml,合并乙醚液,揮干,殘渣加醋酸乙酯lml使溶解,作為供試品溶液;另取大黃對照藥材50mg,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各12ul,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以石油醚(3060°C)—甲酯乙酯一甲酸(13-18:3-9:1-2)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙紅色斑點;(2)取本發(fā)明組合物丸劑2.5g,研細,加乙醇35-50ml,超聲處理25-40分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水40ml使溶解,用水飽和的正丁醇提取2-4次,每次15-25ml,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌2-4次,每次14-25ml,正丁醇液蒸干,殘渣加乙醇lml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每lml含1.5-2.5mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6u1,分別點于同一以含3-5%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成條狀,以醋酸乙酯一丁酮一甲酸-水(4-6:2-5:l-2:l-2)為展開劑,展開,取出,吹干,噴以l%三氯化鐵乙醇溶液;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的條斑;(3)取本發(fā)明組合物丸劑1.2g,研細,加稀乙醇70-90ml,超聲處理25-40分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水和乙醚各20-40ml使溶解,移至分液漏斗中,靜置分層,棄去乙醚液,水液再用乙醚提取2-4次,每次20-40ml,棄去乙醚液,水液加水飽和的正丁醇提取2-4次,每次20-40ml,合并正丁醇液,回收溶劑至干;殘渣加水5ml使溶解,通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑lcm,柱高12cm),以水50ml洗脫,棄去水液,再用30-50%乙醇40-60ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加丙酮lml使溶解,取上清夜作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品,加乙醇制成每lml含lmg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液10ul、對照品溶液5iU,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(7-9:1-2:3-5:1-3)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105'C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;(4)取本發(fā)明組合物丸劑10克,研細,加水30-50毫升,醋酸乙酯30-50ml,超聲振蕩20-40分鐘,離心分層,吸取上層液,蒸干,殘渣加無水乙醇2毫升使溶解,作為供試品溶液;另取甘草對照藥材l克,加水20ml,乙酸乙酯20毫升,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液、對照藥材溶液各5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-冰醋酸(6-8:1-2:1-2)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105'C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;含量測定照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗,用十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-磷酸(80-90:10-20:0.04-0.07)為流動相;檢測波長為289nm;理論板數(shù)按大黃素峰計算應(yīng)不低于4000;對照品溶液的制備精密稱取大黃素對照品10mg,置50ml量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取2ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每lml中含大黃素8Pg);供試品溶液的制備取本發(fā)明組合物丸劑約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇20-30ml,稱定重量,加熱回流0.5-1.5小時,取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補足堿失的重量,搖勻,濾過;精密量取續(xù)濾液5ml,置錐形瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L硫酸溶液20ml,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)8-20分鐘,置水浴中加熱1-2小時,立即冷卻,移置分液漏斗中,加乙醚提取2-4次,每次25ml,合并乙醚液,用水15ml洗滌,棄去水液,乙醚液通過鋪有適量無水硫酸鈉的漏斗濾過,用少量乙醚洗滌容器與濾器,濾液低溫回收溶劑至干,殘渣加甲醇適量使溶解,并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得;測定法,分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各IOW,注入液相色譜儀,測定,即得。8、如權(quán)利要求7所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法,其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種鑒別(1)取本品2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水10ml使溶解,加鹽酸lml,置水浴上加熱水解30分鐘,立即冷卻,用乙醚振搖提取2次,每次15ml,合并乙醚液,揮干,殘渣加醋酸乙酯lml使溶解,作為供試品溶液;另取大黃對照藥材50mg,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各l2ul,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以石油醚(3060°C)—甲酯乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙紅色斑點;(2)取本品2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水40ml使溶解,用水飽和的正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌3次,每次20ml,正丁醇液蒸干,殘渣加乙醇lml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每lml含2mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6ul,分別點于同一以含4X醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成條狀,以醋酸乙酯一丁酮一甲酸-水(5:3:1:1)為展開劑,展開,取出,吹干,噴以l%三氯化鐵乙醇溶液;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的條斑;(3)取本品1.2g,研細,加稀乙醇80ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水和乙醚各30ml使溶解,移至分液漏斗中,靜置分層,棄去乙醚液,水液再用乙醚提取3次,每次30ml,棄去乙醚液,水液加水飽和的正丁醇提取3次,每次30ml,合并正丁醇液,回收溶劑至干;殘渣加水5ml使溶解,通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑lcm,柱高12cm),以水50ml洗脫,棄去水液,再用40%乙醇50ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加丙酮lml使溶解,取上清夜作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品,加乙醇制成每lml含lmg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液10ixl、對照品溶液5nl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:1:4:1)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105。C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;(4)取本品10克,研細,加水40毫升,醋酸乙酯40ml,超聲振蕩30分鐘,離心分層,吸取上層液,蒸干,殘渣加無水乙醇2毫升使溶解,作為供試品溶液;另取甘草對照藥材l克,加水20ml,乙酸乙酯20毫升,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液、對照藥材溶液各5u1,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-冰醋酸(7:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105'C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;含量測定照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗,用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-磷酸(85:15:0.05)為流動相;檢測波長為289nm;理論板數(shù)按大黃素峰計算應(yīng)不低于4000;對照品溶液的制備精密稱取大黃素對照品10mg,置50ml量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取2ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每lml中含大黃素8Pg);供試品溶液的制備取本品約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,稱定重量,加熱回流l小時,取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補足堿失的重量,搖勻,濾過;精密量取續(xù)濾液5ml,置錐形瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L硫酸溶液20ml,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)10分鐘,置水浴中加熱l小時,立即冷卻,移置分液漏斗中,加乙醚提取3次,每次25ml,合并乙醚液,用水15ml洗滌,棄去水液,乙醚液通過鋪有適量無水硫酸鈉的漏斗濾過,用少量乙醚洗滌容器與濾器,濾液低溫回收溶劑至干,殘渣加甲醇適量使溶解,并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得;測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10W,注入液相色譜儀,測定,即得。9、如權(quán)利要求8所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法,其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下方法選取如下原料藥物制成丸劑熟大黃300g土鱉蟲(炒)30g水蛭(制)60g虻蟲(去翅足,炒)45g蠐螬(炒)45g干漆(煅)30g桃仁120g苦杏仁(炒)120g黃芩60g地黃300g白芍120g甘草90g。以上十二味,粉碎成細粉,過篩,混勻;每100g粉末用煉蜜3045g加適量的水泛丸,干燥,制成水蜜丸,即得;質(zhì)量控制方法包括鑒別和含量測定鑒別(1)取本品2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水10ml使溶解,加鹽酸lml,置水浴上加熱水解30分鐘,立即冷卻,用乙醚振搖提取2次,每次15ml,合并乙醚液,揮干,殘渣加醋酸乙酯lml使溶解,作為供試品溶液;另取大黃對照藥材50mg,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各l2ul,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,以石油醚(3060°C)—甲酯乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙紅色斑點;(2)取本品2.5g,研細,加乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,取l/2的濾液,蒸干,殘渣加水40ml使溶解,用水飽和的正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用正丁醇飽和的水洗滌3次,每次20ml,正丁醇液蒸干,殘渣加乙醇lml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每lml含2mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6"1,分別點于同一以含4X醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上,使成條狀,以醋酸乙酯一丁酮—甲酸-水(5:3:l:l)為展開劑,展開,取出,吹干,噴以l%三氯化鐵乙醇溶液;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的條斑;(3)取本品1.2g,研細,加稀乙醇80ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水和乙醚各30ml使溶解,移至分液漏斗中,靜置分層,棄去乙醚液,水液再用乙醚提取3次,每次30ml,棄去乙醚液,水液加水飽和的正丁醇提取3次,每次30ml,合并正丁醇液,回收溶劑至干;殘渣加水5ml使溶解,通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑lcm,柱高12cm),以水50ml洗脫,棄去水液,再用40%乙醇50ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加丙酮lml使溶解,取上清夜作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品,加乙醇制成每lml含lmg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液10ul、對照品溶液5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:1:4:1)為展開劑,展開,取出,涼干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105"C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;(4)取本品10克,研細,加水40毫升,醋酸乙酯40ml,超聲振蕩30分鐘,離心分層,吸取上層液,蒸干,殘渣加無水乙醇2毫升使溶解,作為供試品溶液;另取甘草對照藥材l克,加水20ml,乙酸乙酯20毫升,同法制成對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,取供試品溶液、對照藥材溶液各5ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-冰醋酸(7:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105'C加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;含量測定照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗,用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-磷酸(85:15:0.05)為流動相;檢測波長為289nm;理論板數(shù)按大黃素峰計算應(yīng)不低于4000;對照品溶液的制備精密稱取大黃素對照品10mg,置50ml量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取2ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每lml中含大黃素8^);供試品溶液的制備取本品約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,稱定重量,加熱回流l小時,取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補足堿失的重量,搖勻,濾過;精密量取續(xù)濾液5ml,置錐形瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L硫酸溶液20ml,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)10分鐘,置水浴中加熱1小時,立即冷卻,移置分液漏斗中,加乙醚提取3次,每次25ml,合并乙醚液,用水15ml洗滌,棄去水液,乙醚液通過鋪有適量無水硫酸鈉的漏斗濾過,用少量乙醚洗滌容器與濾器,濾液低溫回收溶劑至干,殘渣加甲醇適量使溶解,并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得;測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各IOW,注入液相色譜儀,測定,即得。全文摘要本發(fā)明公開了一種具有活血破瘀,通經(jīng)消癥作用的藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法。本發(fā)明的藥物組合物原料藥組成為熟大黃、土鱉蟲(炒)、水蛭(制)、蠐螬(炒)、干漆(煅)、紅花、苦杏仁(炒)、黃芩、地黃、白芍組成,制備方法為以上各味,粉碎成細粉,過篩,混勻;每100重量份粉末用煉蜜30~45重量份加適量的水泛丸,干燥,制成水蜜丸,即得。本發(fā)明采用高效液相色譜法對大黃素進行含量測定。本發(fā)明藥物組合物具有很好活血破瘀,通經(jīng)消癥作用。文檔編號A61K35/64GK101274035SQ200710064800公開日2008年10月1日申請日期2007年3月27日優(yōu)先權(quán)日2007年3月27日發(fā)明者付建家,付立家申請人:北京亞東生物制藥有限公司