專利名稱：胍丁胺硫酸鹽水合物及其用于戒毒,抗炎,降血糖以及胍丁胺代謝異常所致疾病的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及胍丁胺硫酸鹽水合物，其制備方法，含胍丁胺硫酸鹽水合物的藥用組合物及它們在戒毒，抗炎，降血糖以及預(yù)防和/或治療胍丁胺代謝異常所致病癥方面的用途。
背景技術(shù)：
胍丁胺是左旋精氨酸脫羧酶催化精氨酸脫羧的產(chǎn)物，是一種神經(jīng)遞質(zhì)，廣泛存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元內(nèi)，并集中于囊泡中。胍丁胺具有許多生物學(xué)作用，如增加原發(fā)性高血壓大鼠血漿中的腎上腺素含量，刺激下丘腦促黃體素釋放激素-垂體促黃體生成素軸，直接或間接刺激LHRH合成并調(diào)節(jié)其釋放；促進胰島素釋放；文獻報道胍丁胺還可通過與I2受體、α2受體和阿片受體的相關(guān)作用產(chǎn)生降血糖的作用；研究表明胍丁胺具有弱的鎮(zhèn)痛作用，并能增強嗎啡的鎮(zhèn)痛作用、抑制戒斷綜合癥的發(fā)生和抑制嗎啡所致小鼠耐受和依賴的形成過程。胍丁胺對酒精依賴的大鼠的戒斷表現(xiàn)也有抑制作用。此外，胍丁胺還具有抗炎作用。因此，胍丁胺作為一種內(nèi)源性的代謝產(chǎn)物，在生理，病理狀態(tài)下可能參與調(diào)節(jié)機體許多系統(tǒng)功能。本發(fā)明所述的胍丁胺硫酸鹽水合物及其藥物組合物在戒毒，抗炎，降血糖以及胍丁胺代謝異常所致病癥方面具有潛在的用途。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及式I胍丁胺硫酸鹽水合物，其制備方法以及胍丁胺硫酸鹽水合物及其藥用組合物在戒毒，抗炎，降血糖以及預(yù)防和/或治療胍丁胺代謝異常所致病癥方面的用途。
式I本發(fā)明的另一方面涉及胍丁胺硫酸鹽水合物的合成方法由甲基異硫尿和硫酸胍丁胺反應(yīng)制備胍丁胺硫酸鹽水合物，如下面的合成路線。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的藥用組合物包括有效劑量的胍丁胺硫酸鹽水合物和一種或多種適宜的可藥用載體，這里可藥用載體包括但不限于離子交換劑，氧化鋁，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白，如人血清蛋白，緩沖物質(zhì)，如磷酸鹽，甘油，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，鹽或電解質(zhì)，如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠態(tài)氧化硅，三硅酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，纖維素物質(zhì)，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，聚丙烯酸酯，蜂蠟，聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物和羊毛脂。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明化合物的藥用組合物可以下面的任意方式施用口服，噴霧吸入，直腸用藥，鼻腔用藥，頰部用藥，陰道用藥，局部用藥，非腸道用藥，如皮下，靜脈，肌內(nèi)，腹膜內(nèi)，鞘內(nèi)，心室內(nèi)，胸骨內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸入，或借助一種外植儲器用藥。其中優(yōu)選口服，腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)用藥方式。


圖1為腹腔注射胍丁胺硫酸鹽水合物對福爾馬林致炎性疼痛的影響實施例下面的實施例是本發(fā)明優(yōu)選的說明性優(yōu)選實施方案，對本發(fā)明不構(gòu)成任何限制。
化合物熔點由RY-1型熔點儀測定，溫度計未經(jīng)較正。1H NMR由ARX-400NMR儀測定。質(zhì)譜由VG-ZabSpec MS儀測定。所有反應(yīng)用溶劑未注明都經(jīng)標(biāo)準化預(yù)處理。
實施例1硫酸胍丁胺水合物將甲基異硫脲0.15mol和1，4-丁二胺0.3mol溶于70毫升水，室溫攪拌1.5小時，濾除產(chǎn)生的固體，濾液加硫酸調(diào)節(jié)Ph＜7，減壓濃縮，于10℃靜置4小時，析出晶體，小心干燥，得到硫酸胍丁胺水合物。元素分析實測值(％)C，23.06；H，7.63；N，21.20.理論值(％)forC，22.73；H，7.57；N，21.21.IR(KBr，n，cm-1)3369.4，3161.7，2953.3，2887.9，1664.6，1643.5，1122.6cm-1.1H NMR(400MHz，D2O)δH 3.25(t，2H，J＝4Hz)，3.04(t，2H，J＝4Hz)，1.74(m，2H)，1.68(m，2H).
實施例2胍丁胺硫酸鹽水合物及其用于戒毒、抗炎、降血糖以及胍丁胺代謝異常所致疾病的用途抗焦慮作用評價小鼠明暗穿箱(40cm×20cm×20cm)是由明箱和暗箱兩部分組成。明箱是用無色透明有機玻璃制成的敞箱，占箱體的3/4；暗箱用不透光的塑料板制成加有頂蓋的暗盒，占箱體1/4。在兩箱隔板中央下方開一門洞(5cm×5cm)。在明敞箱的上方用燈泡調(diào)節(jié)箱內(nèi)平均照度為7000lx，暗箱為0lx。
實驗為單次皮下注射給予胍丁胺硫酸鹽水合物。給藥體積為10ml.kg-1。在給藥(或最后1次給藥)后1h開始實驗。陽性對照組實驗前30min腹腔注射陽性對照藥安定。給藥后動物置于暗環(huán)境中。測試時，將小鼠放入明箱中央背向暗箱，觀察記錄10min內(nèi)小鼠的明暗穿箱行為，包括潛伏時間(小鼠放入明箱后至第一次進入暗箱的時間)；穿箱次數(shù)(10min內(nèi)進入暗箱后返回明箱的次數(shù))和明箱滯留時間(10min內(nèi)在明箱的累計滯留時間)。
在小鼠明暗穿箱模型上，一次性給予胍丁胺硫酸鹽水合物20-160mg.kg-1sc，與NS對照組相比較，80mg.kg-1組的穿箱次數(shù)有顯著增加；對明箱滯留時間有增加趨勢，潛伏時間無顯著改變。而陽性對照藥安定組小鼠穿箱次數(shù)和明箱滯留時間顯著性增加；潛伏時間有減少的趨勢，但無顯著性差異(表1)。
表1.小鼠單次皮下注射AG對明暗穿箱行為的影響(X±S)Tab1.Effects of agmatine at a single sc dose on the light-darkbox test in mice(X±S)

注對照組(NS，10mL.kg-1)或胍丁胺硫酸鹽水合物(AG)為實驗前60min皮下注射給藥，安定(DZP)為實驗前30min腹腔注射給藥；bP＜0.01，與對照組比較上述結(jié)果表明，在小鼠明暗穿箱模型上，小鼠皮下注射單次給予胍丁胺硫酸鹽水合物具有抗焦慮作用。
戒毒作用評價慢性嗎啡耐受模型的建立，取實驗?zāi)Ｐ偷拇笫?，皮下注射嗎?0mg/kg，3次/d，連續(xù)注射5d。每天在注射足量嗎啡(10mg/kg)前，用能引起疼痛反應(yīng)的嗎啡劑量測痛，藥后30min測定CCI側(cè)PWT，按下列公式計算其可能最大鎮(zhèn)痛百分率(PMAP)PMAP＝(藥后PWT值-藥前PWT值)/(26-藥前PWT值)×100％26g為PWT的封頂測量值。
取實驗?zāi)Ｐ痛笫?5只，隨機分為鹽水鹽水組(A)、鹽水嗎啡組(B)、胍丁胺硫酸鹽水合物不同劑量(5、10、20mg/kg)+嗎啡組(C、D、E，n＝7)。在實驗第1天，A、B組大鼠分別腹腔注射生理鹽水，C、D、E組大鼠分別腹腔注射不同劑量胍丁胺硫酸鹽水合物；30min后，分別皮下注射嗎啡3mg/kg，測量各組大鼠的PWT，計算PMAP。除A組外，各組分別用嗎啡10mg/kg或嗎啡+胍丁胺硫酸鹽水合物共同處理，3次/d，連續(xù)4d。第5天分別測量各組大鼠皮下注射嗎啡3mg/kg的PWT，計算PMAP，觀察不同劑量胍丁胺水合物對神經(jīng)病源性痛大鼠嗎啡耐受形成的影響。
實驗結(jié)果第一次給予嗎啡3mg/kg后，B、C、D、E組PMAP均達80％，四組問比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，但四組分別與A組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。各組連續(xù)用藥4d后，用嗎啡3mg/kg測痛，A組PMAP為85％，B組為20％，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。第5天注射嗎啡3mg/kg后，C、D、E組PMAP分別為62、70和90％，與B組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。表明胍丁胺硫酸鹽水合物能抑制嗎啡耐受形成。見表2。
表2 胍丁胺硫酸鹽水合物和嗎啡慢性處理后對3mg/kg嗎啡PMAP的影響(n＝7，x±s)

與A組比較，*p＜0.05，**p＜0.01與B組比較，#p＜0.05，##p＜0.01對炎性疼痛的緩解作用實驗前，大鼠在實驗場所飼養(yǎng)至少2天以上。致痛前大鼠在特制的透明觀察容器內(nèi)(40×30×25cm)適應(yīng)1h，使大鼠由好奇、探索狀態(tài)轉(zhuǎn)為適應(yīng)、安靜狀態(tài)。于大鼠右側(cè)足底皮下注射5％的福爾馬林溶液50μL致痛，立即放回透明觀察容器內(nèi)，按照疼痛分級，用三道計時器分別記錄大鼠不同疼痛行為反應(yīng)的持續(xù)時間(秒數(shù))，每5分鐘為一個時間段，共記錄60min，計算痛級均數(shù)。
用痛級均數(shù)來表示福爾馬林所致大鼠痛反應(yīng)的程度，將痛反應(yīng)分成4級0級兩后爪均勻?qū)ΨQ地置于地面，活動無異常。
I級注射爪輕微接觸地面，活動時明顯跛行。
II級注射下肢抬起，不接觸地面。
III級動物舔咬注射下肢。
根據(jù)下列公式計算痛級均數(shù)痛級均數(shù)＝(T1+2T2+3T3)/T
T1、T2、T3分別是每一時間段I、II、III級痛級的持續(xù)時間，T是每一時間段的總觀察時間。此外，再分別總合第1、2兩期大鼠舔咬注射后肢的總時間，進行統(tǒng)計學(xué)處理。
皮下注射20、40、80、160mg/kg胍丁胺硫酸鹽水合物20min或腹腔注射10、20、40、80、120、160mg/kg胍丁胺硫酸鹽水合物15min后，用福爾馬林致痛。
實驗結(jié)果胍丁胺硫酸鹽水合物經(jīng)腹腔給藥對福爾馬林注射引起的第一期行為反應(yīng)有輕度抑制作用，但是沒有統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，但對第二期疼痛反應(yīng)的鎮(zhèn)痛作用明顯優(yōu)于皮下給藥。40、80、120、160mg/kg胍丁胺硫酸鹽水合物組的鎮(zhèn)痛作用與對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，并呈劑量依賴性(r＝-0.95)(圖1)。結(jié)果表時胍丁胺硫酸鹽水合物對福爾馬林引起的痛覺過敏亦有抑制作用。
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權(quán)利要求
1.式I所示的硫酸胍丁胺水合物 式I
2.一種藥物組合物，其包括式I硫酸胍丁胺水合物及藥用載體或賦形劑。
3.制備硫酸胍丁胺水合物的方法，其包括如下式所示的由甲基異硫脲和丁二胺反應(yīng)、硫酸成鹽
4.硫酸胍丁胺水合物在制備用于戒毒，抗炎，降血糖以及預(yù)防和/或治療胍丁胺代謝異常所致病癥方面的藥物中用途。
全文摘要
本發(fā)明的涉及結(jié)構(gòu)式為式I所示胍丁胺硫酸鹽水合物及其藥用組合物及其藥用組合物在戒毒，抗炎，降血糖以及預(yù)防和/或治療胍丁胺代謝異常所致病癥方面的用途。
文檔編號A61P3/10GK101062906SQ200710102118
公開日2007年10月31日 申請日期2007年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月26日
發(fā)明者李松, 謝云德, 鄭志兵, 何洪夏, 李錦 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所