專利名稱：超氧化物歧化酶及其編碼基因的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酶及其編碼基因與應(yīng)用，特別涉及一種超氧化物歧化 酶及其編碼基因。
背景技術(shù)：
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，簡(jiǎn)稱SOD)，是唯一能夠特 異性清除自由基02-的抗氧化金屬酶，是生物體防御氧毒性的關(guān)鍵。該酶 廣泛存在于自然界的生物體內(nèi)，自1969年從牛紅細(xì)胞發(fā)現(xiàn)并正式命名以 來，科學(xué)家已從細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物、藻類、昆蟲、魚類、植物和哺乳 動(dòng)物等生物體內(nèi)都分離得到了 SOD。由于SOD的特殊功效，其在醫(yī)藥、 日用化工和食品諸領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。目前，SOD臨床應(yīng)用主要集 中在抗炎癥方面(以類風(fēng)濕以及放射治療后引起的炎癥病人為主)，此外 對(duì)某些自身免疫性疾病(如紅斑狼瘡、皮肌炎)、肺氣腫、抗癌和氧中毒 等都有一定療效;在食品工業(yè)主要用作食品添加劑和重要的功能性基料。基于金屬輔基不同，該酶可分為CuZn-SOD、 Mn-SOD、 Fe-SOD三種 類型。Mn-SOD與Fe-SOD主要存在于原核生物中，二者序列及結(jié)構(gòu)同源 性很高，進(jìn)化上相近；而Cu/Zn-SOD存在于真核生物中，屬于進(jìn)化上的 另一個(gè)分支。目前已開發(fā)的SOD產(chǎn)品絕大部分都是Cu/Zn-SOD，最早是 從動(dòng)物的血、肝中分離提取的，近年來植物來源的SOD也有了大量相關(guān) 報(bào)道。微生物來源的SOD，尤其嗜熱菌中分離的SOD由于具有耐高溫、 穩(wěn)定性好的特點(diǎn)，使其在化工應(yīng)用中比常溫酶具有更好的適用性，而越來 越受到更多關(guān)注。目前，已有一些嗜熱SOD基因相繼被識(shí)別
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種基因，能編碼一種超氧化物歧化酶。 本發(fā)明的另一目的是提供一種超氧化物歧化酶，其可在高溫條件下，催化超氧陰離子自由基(CV—)發(fā)生歧化反應(yīng)生成氧氣02和雙氧水H202。 本發(fā)明的另一目的是提供一種能表達(dá)上述超氧化物歧化酶的重組質(zhì)粒。本發(fā)明的再一目的是提供一種能產(chǎn)生上述超氧化物歧化酶的重組菌。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案本發(fā)明提出一種編碼超氧化物歧化酶的基因，所述基因具有選自于下 列a) 、 b)或C)的核苷酸序列a) SEQIDNO: 1所示的核苷酸序列；b) 不同于SEQ ID NO: 1但編碼的氨基酸序列與SEQ ID NO: 1所編碼的氨基酸序列相同的核苷酸序列；c) 在嚴(yán)格雜交條件下與上述a)或b)中的序列雜交，并且編碼具有 活性的超氧化物歧化酶的核苷酸序列。本發(fā)明還提供一種超氧化物歧化酶，其具有選自于下列d)、 e)或f) 的氨基酸序列d) 權(quán)利要求1中a)、 b)或c)所述的核苷酸序列編碼的氨基酸序列；e) SEQIDNO:2所示的氨基酸序列；f) 所述e)中缺失、替換或插入一個(gè)或多個(gè)氨基酸后的氨基酸序列， 并且具有該序列的蛋白質(zhì)有超氧化物歧化酶的活性。上述一種超氧化物歧化酶，其具有與SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序 列至少70%的同源性，同時(shí)具有該序列的蛋白質(zhì)有超氧化物歧化酶的活性。上述一種超氧化物歧化酶，其具有SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列 中缺失、替換、或插入的多個(gè)氨基酸序列為2-100個(gè)。
上述一種超氧化物歧化酶，其具有與SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序 列至少90%的同源性，同時(shí)具有該序列的蛋白質(zhì)有超氧化物歧化酶的活 性。上述一種超氧化物歧化酶，其具有SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列 中缺失、替換、或插入的多個(gè)氨基酸序列為2-10個(gè)。上述的超氧化物歧化酶，保持所述超氧化物歧化酶活性的溫度為 70°C。一種表達(dá)上述的超氧化物歧化酶的重組質(zhì)粒，該質(zhì)粒至少包括權(quán)利要 求l所述的基因。上述表達(dá)超氧化物歧化酶的重組質(zhì)粒的載體為pET-28a(+)。一種產(chǎn)生上述的超氧化物歧化酶的重組菌，該重組菌導(dǎo)入了超氧化物歧化酶。上述產(chǎn)生超氧化物歧化酶的重組菌為大腸桿菌。 上述產(chǎn)生超氧化物歧化酶的重組菌的大腸桿菌為大腸桿菌BL21菌株。上述的超氧化物歧化酶應(yīng)用于催化超氧陰離子自由基，發(fā)生歧化反應(yīng) 生成氧氣和雙氧水。上述的超氧化物歧化酶應(yīng)用于該酶用于醫(yī)藥、衛(wèi)生保健、食品或化妝 品加工。應(yīng)當(dāng)指出的是，上述提到的術(shù)語"嚴(yán)格雜交條件"在本說明書中的含義 是指在該條件下形成了所謂特異雜交而沒有形成非特異的雜交。例如，該 嚴(yán)格雜交條件可以是，相互之間的同源性不小于70%的DNA之間可以雜 交而低于上述數(shù)值的DNA之間不能雜交，優(yōu)選的是同源性不少于90%的 DNA之間可以雜交。相對(duì)于Southern雜交中普通洗滌條件而言，可以例 如為如下的雜交條件將雜交膜置于預(yù)雜交液(0.25mol/L磷酸鈉緩沖液， pH7.0, 7。/。SDS)中，5(TC預(yù)雜交30min;棄預(yù)雜交液，加入雜交液(0.25mol/L 磷酸鈉緩沖液，pH7.0， 7%SDS，同位素標(biāo)記的核苷酸片段)，50。C雜交12hr;
棄雜交液，加入洗膜液1(2xSSC和0.1%SDS)， 5(TC洗膜2次，每次30min; 加入洗膜液II (0.5xSSC和0.1%SDS )， 5(TC洗膜30min。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該知道，本發(fā)明的編碼超氧化物歧化酶的 DNA序列，還包括編碼對(duì)SEQ ID NO: 1所示核苷酸序列所表達(dá)的酶分子 的氨基酸序列進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)氨基酸替換、插入或缺失并仍具有該酶活性 的蛋白質(zhì)的核苷酸序列。另外，對(duì)本發(fā)明的超氧化物歧化酶基因所表達(dá)的酶分子的氨基酸進(jìn)行 一個(gè)或多個(gè)氨基酸替換、插入或缺失所得到的蛋白質(zhì)也能達(dá)到本發(fā)明的目 的。因而本發(fā)明還包括與SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列具有至少70% 的同源性，優(yōu)選具有至少卯％的同源性，但同時(shí)具有超氧化物歧化酶活性 的蛋白質(zhì)。上面使用的術(shù)語"多個(gè)"可以是小于100的數(shù)目，優(yōu)選為小于10 的數(shù)目。本發(fā)明提出的上述超氧化物歧化酶的性能不同于己知的超氧化物歧 化酶，比目前已經(jīng)公布的超氧化物歧化酶(200aa左右)大一倍左右，為 469aa，最適溫度約為7(TC，分子量約為51770道爾頓，可有效催化超氧 陰離子自由基(020發(fā)生歧化反應(yīng)生成氧氣02和雙氧水H202?；诒景l(fā)明的超氧化物歧化酶的上述特性和功能，該酶具有抗氧化、 抗衰老作用，并且具有高溫穩(wěn)定性?？蓮V泛用于醫(yī)藥、衛(wèi)生保健、食品和 化妝品加工等領(lǐng)域。為讓本發(fā)明的上述和其它目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能更明顯易懂，下面特舉 實(shí)施例，并配合說明書附圖，作詳細(xì)說明如下。


圖1超氧化物歧化酶基因重組質(zhì)粒pLW1296的構(gòu)建模式圖； 圖2為溫度對(duì)重組超氧化物歧化酶活性影響的曲線圖； 圖3為純化的超氧化物歧化酶SDS—PAGE電泳照片。
具體實(shí)施例方式
下面通過具體實(shí)施例并結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。以下 各實(shí)施例僅僅是用于說明而不是限制本發(fā)明。實(shí)施例一1. 嗜熱脫氮芽胞桿菌NG80-2 (CGMCC No. 1228)總DNA的提取在本實(shí)施例中，采用從中國(guó)天津大港油田官69-8區(qū)塊油井地層水分 離獲得的嗜熱脫氮芽胞桿菌NG80-2 (Geo^7d//^ Aww^fem'^/ ca/w該菌 株已保藏在中國(guó)微生物菌種保藏委員會(huì)普通微生物中心，其保藏號(hào)為 CGMCC No.1228)，取其過夜培養(yǎng)的新鮮培養(yǎng)物3ml，離心收集菌體，菌 體懸于250|il 50mMTris緩沖液中(pH8.0)，加入lO^il 0.4M EDTA(pH8.0)， 混勻后37。C保溫20min，之后加入30|il 20mg/ml溶菌酶，混勻后37。C再 保溫20min，再加入5^1 20mg/ml蛋白酶K,溫柔混勻后，再加入20(il 10%SDS， 5(TC保溫至溶液澄清，分別用等體積酚:氯仿:異戊醇抽提兩次， 氯仿:異戊醇抽提一次，最后一次的上清溶液，加入2.5倍體積預(yù)冷的無水 乙醇，回收DNA，用70%乙醇洗，沉淀溶于100|il TE緩沖液(pH8.0， 10mMTris， lmMEDTA)，加入10mg/ml RNase 2|il， 65。C保溫30min，分 別用酚:氯仿:異戊醇、氯仿:異戊醇各抽提一次，上清液加入2.5倍體積預(yù) 冷的無水乙醇，回收DNA，用70%乙醇洗，真空干燥，沉淀溶于50plTE 緩沖液。DNA溶液的紫外分光光度計(jì)測(cè)定結(jié)果為A260/A280=1.95， A260=0.73。2. 超氧化物歧化酶基因的克隆和篩選取前面所述的總DNA溶液0.5ul (約10ng)作為模板，以下列寡核苷 酸序列作為引物，并按下述設(shè)定的PCR循環(huán)參數(shù)進(jìn)行25個(gè)循環(huán)PCR。設(shè)定的PCR循環(huán)參數(shù)如下95°C， 3min; 95°C， 30s; 50°C， 45s; 72°C， 2min; 72°C， lOmin; 4°C，2hr上游引物5' -ggaattccatatggacgaccaaacgttgtttgc-3'
下游弓I物5 ，-cccaagcttttaaaatggttgccaacgca-3'上述PCR產(chǎn)物用Ndel和Hindlll雙酶切，經(jīng)0.8%的瓊脂糖凝膠電泳， 切膠回收1.35kb酶切產(chǎn)物片段。與經(jīng)同樣限制型內(nèi)切酶酶解并切膠回收的 質(zhì)粒pET-28a(+)連接，轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌DH5a后，涂于含50|ig/ml Kan (卡拉霉素)的LB固體培養(yǎng)基上。37。C培養(yǎng)16 18小時(shí)，挑取單克隆菌 落鑒定，插入有SEQIDNO: 1的DNA序列的pET-28a(+)質(zhì)粒為重組質(zhì)粒 pLW1296，含有該質(zhì)粒的重組大腸桿菌DH5a為H1565。采用Sanger雙脫 氧法對(duì)此DNA片段進(jìn)行了測(cè)序。測(cè)序結(jié)果顯示，該基因DNA片段全長(zhǎng) 1410bp，由ATG起始密碼開始，到TAA終止密碼子結(jié)尾，其核苷酸序列 如SEQ ID NO: 1所示。該完整的ORF編碼一個(gè)由469個(gè)氨基酸組成的蛋 白質(zhì)，該蛋白質(zhì)屬于超氧化物歧化酶家族，最高相似性同C^ok^7/^ HTA426的超氧化物歧化酶基因，同源性為70%。將重組質(zhì) 粒pLW1296轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21中，此大腸桿菌BL21為H1566。實(shí)施例二重組超氧化物歧化酶的純化和特性將上述重組菌E. Coli BL21 H1566單克隆接入20ml含50(ig/ml Kan 的LB培養(yǎng)基中，37°C ， 180rpm/min培養(yǎng)12小時(shí)，然后將培養(yǎng)物按1%( V/V) 接種量接入200ml含50嗎/ml Kan的LB培養(yǎng)基(共2個(gè)搖瓶)，37°C， 220rpm/min培養(yǎng)A600為0.6時(shí)，加入IPTG至終濃度為O.lmM, 37°C, 180rpm/min誘導(dǎo)3小時(shí)。離心收集菌體，懸于50mMTris-Cl (pH8.0)緩 沖液中，利用超聲波破碎細(xì)胞，離心上清液為重組超氧化物歧化酶的粗提 液。此上清液經(jīng)螯合瓊脂糖凝膠(Chelating Sepharose)鎳親合柱層析純化， 得到的酶制劑在SDS-PAGE上顯示一條帶。利用已知的蛋白質(zhì)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)方 法測(cè)定此重組超氧化物歧化酶的基本特性。用SDS-PAGE測(cè)得的重組酶的 分子量約為52000道爾頓，與理論上推算的分子量(51770道爾頓)相似。實(shí)施例三重組超氧化物歧化酶活性測(cè)定在0.5ml離心管中裝入200ul下列反應(yīng)體系lxlO'5M Cytochrome C, 5x10—5M Xanthine, lxl(T4M EDTA， 0.05M pH7.8 Potassium phosphate Buffer, 6xl0-9 M Xanthine Oxidase ,迅速反應(yīng)在2min內(nèi)有效，測(cè)定A550處 光吸收變化為0.025/min ; 1><10-5M Cytochrome C， 5xl(T5M Xanthine, lxl(T4M EDTA， 0.05M pH7.8 Potassium phosphate Buffer, 6x1 (T9M Xanthine Oxidase,加入適量實(shí)施例二中制得的重組超氧化物歧化酶制劑，使得A550 處光吸收變化為0.0125/min時(shí)所用的酶量為1U。最適酶活性溫度上述反應(yīng)條件下，實(shí)施例二中制得的重組超氧化物歧化酶制劑在 25-8(TC范圍內(nèi)水浴加熱處理5min后測(cè)定超氧化物歧化酶活性，結(jié)果表明 保持超氧化物歧化酶活性的最適溫度約為70°C (見圖2)。雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例披露如上，然其并非用以限定本發(fā)明，任 何所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，可做些許 的更動(dòng)與改進(jìn)，因此本發(fā)明的保護(hù)范圍當(dāng)視權(quán)利要求所界定者為準(zhǔn)。
序列表<110〉天津生物芯片技術(shù)有限責(zé)任公司<120〉超氧化物歧化酶及其編碼基因 〈130〉 7P13011-CN <160〉 2<170〉 Patentln version 3， 3 <210〉 1 <211〉 1350 <212〉 DNA<213>編碼超氧化物歧化酶的DNA序列 <400〉 1<formula>formula see original document page 11</formula>acaatttttt ggcataacat gcatccgcaa ggcggcggcg agccgcgcgg ggagctgcgg 1020gcgcaaattg aacgcgactt cggcagcttt gctgcattcc gacgccactt taccgaagcg 1080gcga腿gcg tcgaaggggt tggctgggcg ttgctcgttt gggtgccgcg ggctcatcgg 1140cttgaaattt tgcagacgga aaagcaccag ctcatgacgc aatgggatac gattccactt 1200cttgtgcttg atgtgtggga gcatgcgtac tacttgcaat ataaaaacga tcggggagcg 1260tatatcgaac attggtggaa cgtcgtcaac tggcgcaatg tcgaagcgcg cttcgccgag 1320gcacgaaagc tgcgttggca accattttaa 1350〈210〉 2 〈211〉 449 〈212〉 PRT<213〉編碼超氧化物歧化酶的氨基酸序列 <400〉 2Met Asp Asp Gin Thr Leu Phe Ala Gin Tyr Ala Ala Glu Val Asn Glu15 10 15T卬Gly Glu Gin Val Lys Gin Val Leu Glu Leu Arg Gly Ala Ser lie20 25 30Asp Gly Ala Ser Thr Leu Leu Gin Phe lie Ala Glu His Asp Gly Lys35 40 45Trp Thr Glu Glu Ala Val Arg Glu Leu Thr Arg Leu Val Asp Asp Val50 55 60Tyr Ala Ala Ala Leu Arg His Tyr Ala lie Glu Ala Ala Glu Trp Gly 65 70 75 80Lys Gin Val Glu His Ala Leu Ser Met Arg Gly Ala Ala Glu Asp lie85 90 95Gly Leu Ser Ser Leu Leu Ala Arg lie Glu Glu His Gly Asp Glu Trp100 105 110Thr Glu Glu Glu lie His Glu Leu Gin Leu Leu Val Asp A印Val Tyr115 120 125Ala Arg Ala lie Arg Leu Val Glu Pro Leu Ser Asp Gly Gin Glu Glu130 135 140Asp Leu Thr Arg Gin Glu Glu Val Ser Ala Leu Pro Glu Gin Glu Gly 145 150 155 160Gly Asn Arg Glu Gin Met Ser Lys Gly Thr Glu Arg Ser Gly Glu His 165 170 175LysProGluAsp 225 ArgTyrHisArgHis 305 ThrGlyPheTrpGin 385 LeuAspAsnPheGlyPheGly 210 LysAlaAspThrMet 290 TrplieGluArgAla 370 ThrValArgValAsplie 195 AspGluValAlaCys 275 MetGluPheLeuArg 355 LeuGluLeuGlyGlu 435Ser 180 AlaThrArgSerLeu 260 HisAlaArgTrpArg 340 HisLeuLysAspAla 420 AlaGluSerMetLeuPro 245 GluHisGluGluHis 325 AlaPheValHisVal 405 TyrArgGinSerAspPro 230 GlyProGinAlaAla 310 AsnGinThrTrpGin 390 TrpliePheGluThrGlu 215 GluCysHisSerArg 295 AlaMetlieGluVal 375 LeuGluGluAlaProAsp 200 GluGluHislieTyr 280 ArgPheHisGluAla 360 ProMetHisHisGlu 440Val 185 SerTrpGlyValSer 265 ValThrAsnProArg 345 AlaArgThrAlaTrp 425 AlaValProArgValLeu 250 GluAspAsnGlyGin 330 AspLysAlaGinTyr 410 TrpArgAlaAspHisThr 235 ProGluGlyAsnSer 315 GlyPheSerHisTrp 395 TyrAsnLysAlaGlyAsn 220 AspProlieLeuPhe 300 GlyGlyGlyValArg 380 AspLeuValLeuGluGlu 205 AlaGlyLeuMetAsn 285 GluHisGlySerGlu 365 LeuThrGinValArg 445Arg 190 GinAspGluProArg 270 LysLeuTyrGluPhe 350 GlyGlulieTyrAsn 430 TrpAlaLeuMetArgTyr 255 LeuAlaLeuLeuPro 335 AlaVallieProLys 415 TrpGinGluHisThrGin 240 SerHisGluLysHis 320 ArgAlaGlyLeuLeu 400 AsnArgPro
權(quán)利要求
1、一種編碼超氧化物歧化酶的基因，其特征在于，所述基因具有選自于下列a)、b)或c)的核苷酸序列a)SEQ ID NO1所示的核苷酸序列；b)不同于SEQ ID NO1但編碼的氨基酸序列與SEQ ID NO1所編碼的氨基酸序列相同的核苷酸序列；c)在嚴(yán)格雜交條件下與上述a)或b)中的序列雜交，并且編碼具有活性的超氧化物歧化酶的核苷酸序列。
2、 一種超氧化物歧化酶，其特征在于，其具有選自于下列d)、 e)或 f)的氨基酸序列d) 權(quán)利要求1中a)、 b)或c)所述的核苷酸序列編碼的氨基酸序列；e) SEQIDNO:2所示的氨基酸序列；f) 所述e)中缺失、替換或插入一個(gè)或多個(gè)氨基酸后的氨基酸序列， 并且具有該序列的蛋白質(zhì)有超氧化物歧化酶的活性。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種超氧化物歧化酶，其特征在于，所述 超氧化物歧化酶具有與SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列至少70%的同源 性，同時(shí)具有該序列的蛋白質(zhì)有超氧化物歧化酶的活性。
4、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種超氧化物歧化酶，其特征在于，所述 具有SEQIDNO: 2所示的氨基酸序列中缺失、替換、或插入的多個(gè)氨基 酸序列為2-100個(gè)。
5、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種超氧化物歧化酶，其特征在于，所述 超氧化物歧化酶具有與SEQ ID NO: 2所示的氮基酸序列至少90%的同源 性，同時(shí)具有該序列的蛋白質(zhì)有超氧化物歧化酶的活性。
6、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種超氧化物歧化酶，其特征在于，所述 具有SEQIDNO: 2所示的氨基酸序列中缺失、替換、或插入的多個(gè)氨基 酸序列為2-10個(gè)。
7、 根據(jù)利要求2至6中任一項(xiàng)所述的超氧化物歧化酶，其特征在于， 保持所述超氧化物歧化酶活性的溫度為70°C。
8、 一種表達(dá)權(quán)利要求2至6中任一項(xiàng)所述的超氧化物歧化酶的重組 質(zhì)粒，其特征在于，所述質(zhì)粒至少包括權(quán)利要求l所述的基因。
9、 根據(jù)權(quán)利要求8所述的表達(dá)超氧化物歧化酶的重組質(zhì)粒，其特征 在于，所述的質(zhì)粒的載體為pET-28a(+)。
10、 一種產(chǎn)生權(quán)利要求2至6中任一項(xiàng)所述的超氧化物歧化酶的重組 菌，其特征在于，所述的重組菌導(dǎo)入了超氧化物歧化酶。
11、 根據(jù)權(quán)利要求10所述的產(chǎn)生超氧化物歧化酶的重組菌，其特征 在于，所述重組菌為大腸桿菌。
12、 根據(jù)權(quán)利要求11所述的產(chǎn)生超氧化物歧化酶的重組菌，其特征 在于，所述大腸桿菌為大腸桿菌BL21菌株。
13、 權(quán)利要求2至6任一項(xiàng)所述的嗜熱超氧化物歧化酶的應(yīng)用，其特 征在于，該酶用于催化超氧陰離子自由基，發(fā)生歧化反應(yīng)生成氧氣和雙氧 水。
14、 權(quán)利要求2至6任一項(xiàng)所述的嗜熱超氧化物歧化酶的應(yīng)用，其特 征在于，該酶用于醫(yī)藥、衛(wèi)生保健、食品或化妝品加工。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種超氧化物歧化酶及其編碼基因，該超氧化物歧化酶的最適溫度約為70℃，分子量約為51770道爾頓，在25℃至80℃之間可有效催化超氧陰離子自由基(O₂·^-)發(fā)生歧化反應(yīng)生成O₂和H₂O₂。該酶可以作為添加劑和重要的功能性基料在食品和化妝品行業(yè)中具有廣泛的應(yīng)用，并且可作為醫(yī)藥原料在抗炎、抗輻射、抗腫瘤、抗衰老及自身免疫性疾病等由超氧陰離子自由基引發(fā)的疾病治療方面具有很高的臨床應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)A61K38/44GK101397566SQ20071015206
公開日2009年4月1日 申請(qǐng)日期2007年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月28日
發(fā)明者露 馮, 威 王, 磊 王 申請(qǐng)人:天津生物芯片技術(shù)有限責(zé)任公司