專利名稱：：一種洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物及其制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種降血脂藥物，特別涉及一種洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
：洛伐他汀(Lovastatin)化學(xué)名稱為(5)-2-甲基丁酸-(l&3&7&8&8a/)—1,2,3,7,8,8a-六氫-3,7-二甲基-8-口-[(2R，4R)-4-羥基-6氧代-2-四氫吡喃基]-乙基卜l-萘酯)(US4231938)屬于3—羥基一3—甲基戊二酰輔酶A(HMG—CoA)還原酶抑制劑，是用于治療家族性高膽固醇癥的第一個(gè)他汀類調(diào)血脂藥物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如式l所示。用-CH3取代式I所示的洛伐他汀分子2"位上的H可以獲得辛伐他汀(Simvastatin)(US4444784)，其抑制膽固醇合成的生物活性強(qiáng)于洛伐他汀。目前，尋找進(jìn)一步開(kāi)發(fā)洛伐他汀衍生物的可行途徑，以獲得其有效替代物是研究的一個(gè)方向。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式l
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于制備一種新的洛伐他汀衍生物，以開(kāi)發(fā)具有藥用生物活性的物質(zhì)。在對(duì)洛伐他汀發(fā)酵代謝各產(chǎn)物結(jié)構(gòu)分析研究中，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)一種類似于洛伐他汀結(jié)構(gòu)的新化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)式A(圖l)。該化合物是以洛伐他汀為原料，將洛伐他汀經(jīng)堿水解、環(huán)化、上保護(hù)基、與2-甲基-2-丁烯酰氯進(jìn)行酯化反應(yīng)，再在酸性條件下脫保護(hù)后得到，分子式為(324113405，分子量為402.5，其化學(xué)名稱為(2Z)-(lS,2S,6R,8S,8aR)-l,2,6,7,8,8a誦六氫-l-(2-((2R，4R)-四氫-4-羥基-6-氧-2H-吡喃)乙基)-2，6-二甲基萘基-8-(2-甲基丁-2-烯酸)酯制備上述洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物的化學(xué)反應(yīng)過(guò)程具體如下(1)水解強(qiáng)堿條件下，在甲醇-水的溶液中回流反應(yīng)，使洛伐他汀分子中的兩個(gè)酯基都水解，內(nèi)酯環(huán)開(kāi)環(huán)，得到化合物B;HO.水解洛伐他汀化合物B其中，上述水解反應(yīng)所用堿如氫氧化鈉、氫氧化鉀等無(wú)機(jī)強(qiáng)堿。在回流過(guò)程中可通過(guò)TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)至反應(yīng)完畢，然后純化產(chǎn)物。(2)閉環(huán)化合物B在芳香族類溶劑里回流反應(yīng)，使水解打開(kāi)的內(nèi)酯環(huán)重新環(huán)合，得化合物C;關(guān)環(huán)化合物B化合物C其中，上述閉環(huán)反應(yīng)所用的芳香族溶劑如甲苯、苯、二甲苯。反應(yīng)時(shí)間以反應(yīng)完全為準(zhǔn)，可以通過(guò)TLC進(jìn)行檢測(cè)，一般為3—12小時(shí)。(3)上保護(hù)對(duì)化合物C內(nèi)酯環(huán)上的羥基進(jìn)行保護(hù)，得化合物D;化合物C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物D中的R表示羥基保護(hù)基。上述步驟(3)上保護(hù)反應(yīng)中可用硅垸化試劑(包括氯硅垸類化合物，如二甲基叔丁基氯硅垸)選擇性保護(hù)內(nèi)酯環(huán)上的羥基，在惰性有機(jī)溶劑(如二氯甲垸、四氫呋喃)中，在有機(jī)堿(如咪唑)存在的條件下進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)溫度15—35°C，反應(yīng)時(shí)間為9—18小時(shí)。(4)酯化化合物D在無(wú)水條件下，與2-甲基-2-丁烯酰氯進(jìn)行酯化反應(yīng)得化合物E;上述步驟(4)酯化反應(yīng)是在有機(jī)堿性催化劑存在的條件下，將反應(yīng)底物在有機(jī)溶劑中回流至反應(yīng)完成。所用的有機(jī)堿性催化劑如DMAP(4-二甲氨基吡啶)，有機(jī)溶劑可以是體積比為1:2的吡啶和甲苯，回流時(shí)間一般為5—12小時(shí)，可以通過(guò)TLC對(duì)反應(yīng)進(jìn)程進(jìn)行監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完成后，減壓蒸餾脫除溶劑，殘留物用乙酸乙酯溶解，分別用稀鹽酸溶液、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和食鹽水洗滌后，分離有機(jī)層，然后干燥得到化合物E。(5)脫保護(hù)脫除化合物E內(nèi)酯環(huán)上的羥基保護(hù)基，得到本發(fā)明的洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物化合物D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物E<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物A。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>上述步驟(5)脫保護(hù)反應(yīng)對(duì)于硅烷保護(hù)基是在有機(jī)溶液中，用無(wú)機(jī)酸溶液脫除，其中，所用的有機(jī)溶劑包括乙腈等，所用的無(wú)機(jī)酸如氫氟酸、鹽酸、硫酸、硝酸等。反應(yīng)完成后，加入飽和碳酸氫鈉溶液，等氣泡消失完后，用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相經(jīng)飽和食鹽水洗滌后用無(wú)水硫酸鎂干燥，除去溶劑，粗產(chǎn)物用石油醚和乙酸乙酯重結(jié)晶得白色固體產(chǎn)物化合物A。本發(fā)明通過(guò)對(duì)洛伐他汀的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造得到式A所示的洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物(見(jiàn)圖1)，實(shí)驗(yàn)鼠高血脂模型試驗(yàn)結(jié)果表明該化合物具有一定的降血膽固醇和低密度脂蛋白的作用，是一種具有藥用價(jià)值(如抑制膽固醇合成)的生物活性物質(zhì)，可作為洛伐他汀的替代物。而且，該化合物在相當(dāng)于洛伐他汀的2"-3"位之間是雙鍵，這樣的分子結(jié)構(gòu)可作為進(jìn)一步衍生合成其他洛伐他汀類似物的平臺(tái)，以開(kāi)發(fā)出更為有效的洛伐他汀替代物。圖1是本發(fā)明的洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物的分子結(jié)構(gòu)圖；圖2是本發(fā)明洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物的核磁共振碳譜；圖3是本發(fā)明洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物的質(zhì)譜。具體實(shí)施方式下面通過(guò)實(shí)施例，并結(jié)合附圖具體說(shuō)明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例l、化合物A的合成包括以下步驟(1)化合物B的制備在帶機(jī)械攪拌的250ml三口瓶中，加入70ml甲醇水溶液(6:1)，冰浴冷卻，將10.0g氫氧化鈉分批加入溶解后，控制溫度5'C，加入10.0g洛伐他汀，然后升溫回流24h,反應(yīng)完畢，減IE除太甲醇和水，殘留物40ml水溶解后，于15'C以下,用8M的鹽酸溶液酸化至pI^2左右，有大量黃色沉淀生成，劇烈攪拌沉淀完全后，過(guò)濾，以石油醚淋洗，然后干燥得8.1g，收率96%。(2)化合物C的制備將化合物B8.0g加入250ml燒瓶中，加入100ml干燥甲苯溶解，加熱回流脫水，5h后反應(yīng)完全，減壓脫除溶劑，得土黃色固體，加入30ml石油醚攪拌5min,過(guò)濾得微黃色固體6.7g，收率88.5%。(3)化合物D的制備將化合物C6.5g,置于150ml燒瓶中，加入60ml二氯甲垸溶解，加入4.0g咪唑，和4.1g二甲基叔丁基氯硅烷，于室溫反應(yīng)12h，反應(yīng)完成后，反應(yīng)液分別用水、稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和食鹽水洗滌后，分離有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鎂干燥后，減壓脫除溶劑得粗產(chǎn)品，用石油醚和乙酸乙酯重結(jié)晶得白色固體7.1g。(4)化合物E的制備在干燥好的150ml三口瓶中，力卩入0.2gDMAP(4-二甲氨基吡啶)，15ml干燥吡啶和30ml干燥甲苯，升溫回流2h，冷卻后加入化合物D2.0g，然后滴加1.8g2-甲基-2-丁烯酰氯，加完后升溫回流反應(yīng)6小時(shí)，反應(yīng)完成后，減壓脫除溶劑，殘留物用40ml乙酸乙酯溶解，分別用稀鹽酸溶液、飽和碳酸氫鈉溶液，飽和食鹽水洗滌后，分離有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鎂干燥后，脫除溶劑得紅褐色油狀物1.9g。(5)化合物A的制備將化合物E用25ml乙腈溶解后，加入0.3ml40%氫氟酸，室溫下攪拌反應(yīng)，TLC檢測(cè)反應(yīng)，2h后，反應(yīng)完成，加入飽和碳酸氫鈉溶液，等氣泡消失完后，用60ml乙酸乙酯分三次萃取，有機(jī)相經(jīng)飽和食鹽水洗滌后，用無(wú)水硫酸鎂干燥。除去溶劑，粗產(chǎn)物用石油醚和乙酸乙酯重結(jié)晶得白色固體1.4g，即為目的產(chǎn)物化合物A，其HPLC純度為97%以上，該產(chǎn)物的核磁共振碳譜和質(zhì)譜分析分別如圖2和圖3所示。實(shí)施例二、化合物A的急性毒性實(shí)驗(yàn)取小白鼠20只，雌雄各半，灌胃給化合物A,劑量為2000mg/kg。給藥后連續(xù)觀察14天，記錄小白鼠出現(xiàn)的反應(yīng)情況。試驗(yàn)結(jié)果為受試小鼠在給藥后連續(xù)觀察了14天，無(wú)一例死亡，其他指征如活動(dòng)度、步態(tài)、呼吸、進(jìn)食、毛色、大小便均正常。得出化合物A的LD5o大于2000mg/kg體重，其急性毒性比洛伐他汀(LD5()大于1000mg/kg體重)小。因此，可以認(rèn)為化合物A的急性毒性很小。實(shí)施例三、化合物A的調(diào)血脂作用取Wistar大鼠32只，雄性，體重180-210g，實(shí)驗(yàn)前先喂養(yǎng)3天適應(yīng)環(huán)境，實(shí)驗(yàn)時(shí)先稱重并隨機(jī)分為4組，然后分組喂養(yǎng)，艮P:m正m^M組甩普通飼料喂養(yǎng)；6-s,^m^i66g#a^^0.5。/。g/ml的羧甲基纖維素鈉(CMC)溶液0.5ml;(2)高脂模型組以下述高脂飼料配方建立高脂大鼠動(dòng)物模型按10kg普通飼料添加膽酸25g、膽固醇130g、甲基硫氧嘧啶20g、豬油500g、雞蛋500g;每天傍晚6-8點(diǎn)按大鼠每100g體重給予0.5%g/mlCMC溶液0.5ml;(3)高脂+化合物A低劑量組用上述高脂飼料喂養(yǎng)；每天傍晚6-8點(diǎn)按大鼠每100g體重給予含0.12%g/ml化合物A的0.5%CMC溶液0.5ml(化合物A的用量相當(dāng)于6mg/kg體重/天)；(4)高脂+化合物A高劑量組:用上述高脂飼料喂養(yǎng)；每天傍晚6-8點(diǎn)按大鼠每100g體重給予含0.24%g/ml化合物A的0.5%CMC溶液0.5ml(化合物A的用量相當(dāng)于12mg/kg體重/天)。連續(xù)喂養(yǎng)、給藥2月和3月后分別剪尾取血(取血前動(dòng)物禁食16小時(shí))，以市售試劑盒，用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定全血總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度膽固醇(LDL-C)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表l，顯示與普通飼料喂養(yǎng)的大鼠相比，以高脂飼料喂養(yǎng)大鼠2月，血中總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平均顯著升高，提示高脂血癥動(dòng)物模型建立成功?；衔顰6mg/kg/d和12mg/kg/d灌胃給予2月，均無(wú)明顯降低TC和LDL-C的作用。但連續(xù)給藥3月，可見(jiàn)該藥呈時(shí)間依賴性降低全血TC和LDL-C水平的作用。高劑量組明顯降低LDL-C水平。表1.化合物A對(duì)實(shí)驗(yàn)性高血脂大鼠調(diào)脂作用觀察<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>**與相應(yīng)正常對(duì)照組比,p0.01^與相應(yīng)高脂模型組比,pO.05;※與相應(yīng)2月處理組比,p<0.05;試驗(yàn)結(jié)果表明化合物A在使用適當(dāng)劑量時(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠高血脂模型有一定降血膽固醇和低密度脂蛋白作用。權(quán)利要求1.式A所示結(jié)構(gòu)的化合物，其分子式為C24H34O5，分子量為402.5。式A2.—種含有至少一根至少部分涂有含有下述物質(zhì)的組合物的纖維的須條a)至少一種松香，b)至少一種甲硅烷基化的聚胺，c)至少一種成膜物質(zhì)，d)至少一種有機(jī)硅烷偶聯(lián)劑。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的須條，其特征在于所述至少一種松香在組合物中的量以固體總量計(jì)為45-99wt%。4.根據(jù)權(quán)利要求3的須條，其特征在于所述至少一種松香在組合物中的量以固體總量計(jì)為60-90wt呢。5.根據(jù)權(quán)利要求4的須條，其特征在于所述至少一種松香在組合物中的量以固體總量計(jì)為70-85wt%。6.根據(jù)權(quán)利要求3的須條，其特征在于所述至少一種松香選自化學(xué)改性松香。7.根據(jù)權(quán)利要求6的須條、其特征在于所述至少一種松香含有至少一個(gè)縮水甘油醚基和至少一個(gè)聚乙二醇基。8.根據(jù)權(quán)利要求1或2的須條，其特征在于所述至少一種成膜物質(zhì)在組合物中的量以固體總量計(jì)為O.1-0.10wt%。9.根據(jù)權(quán)利要求8的須條，其特征在于所述至少一種成膜物質(zhì)在組合物中的量以固體總量計(jì)為O.l-5wt%。10.根據(jù)權(quán)利要求9的須條，其特征在于所述至少一種成膜物質(zhì)在組合物中的量以固體總量計(jì)為O.5-2wt%。11.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)8的須條，其特征在于所述至少一種成膜物質(zhì)選自聚亞烷基多元醇和聚亞氧烷基多元醇?；衔顳化合物E5)脫除化合物E內(nèi)酯環(huán)上的羥基保護(hù)基，得到式A所示的化合物?；衔顴式A3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中的芳香族溶劑選自甲本、本、一甲本。4.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)是用硅垸化試劑選擇性保護(hù)內(nèi)酯環(huán)上的羥基。5.如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述硅烷化試劑是二甲基叔丁基氯娃院o6.如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟5)是在有機(jī)溶劑中用無(wú)機(jī)酸溶液脫除硅垸保護(hù)基。7.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟5)所用的有機(jī)溶劑為乙腈，所用的無(wú)機(jī)酸選自氫氟酸、鹽酸、硫酸、硝酸。8.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟4)采用有機(jī)堿性催化劑，將化合物D與2-甲基-2-丁烯酰氯在有機(jī)溶劑中回流反應(yīng)。9.如權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述步驟4)中使用的有機(jī)堿性催化劑是4-二甲氨基吡啶，有機(jī)溶劑是體積比為l:2的吡卩定和甲苯。10.權(quán)利要求1所述的化合物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及一種洛伐他汀結(jié)構(gòu)類似物，其結(jié)構(gòu)如式A所示，分子式為C₂₄H₃₄O₅，分子量為402.5。該化合物的制備是以洛伐他汀為原料，將洛伐他汀經(jīng)堿水解、環(huán)化、上保護(hù)基、與2-甲基-2-丁烯酰氯進(jìn)行酯化反應(yīng)，再在酸性條件下脫保護(hù)后得到。通過(guò)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)大鼠高血脂模型試驗(yàn)，結(jié)果表明該化合物有一定的降血膽固醇和低密度脂蛋白的作用，可用于制備降血脂的藥物，而且，該化合物還可作為進(jìn)一步衍生合成其他洛伐他汀類似物的平臺(tái)。文檔編號(hào)A61P3/06GK101230055SQ200710195760公開(kāi)日2008年7月30日申請(qǐng)日期2007年12月14日優(yōu)先權(quán)日2006年12月26日發(fā)明者晶何,冉啟平,吳舉斌,明郭,珊陳申請(qǐng)人:重慶大新藥業(yè)股份有限公司;北大方正集團(tuán)有限公司