專利名稱：：抗生素的注射劑及其給予液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)具有優(yōu)異的抗菌作用的酯肽類抗生素即WAP-8294A2的臨用時制備型注射用制劑及其給予液、以及它們的制備方法。
背景技術(shù)：
：MRSA是甲氧西林等多種抗生素不起作用的耐藥性金黃色葡萄球菌。最早于1961年在英國報道了MRSA的出現(xiàn)，之后迅速在世界范圍蔓延。如今，據(jù)說在醫(yī)療設(shè)施中分離的金黃色葡萄球菌的57成為MRSA，認(rèn)為其在醫(yī)院內(nèi)廣泛蔓延。MRSA在醫(yī)療設(shè)施內(nèi)主要通過接觸感染來感染醫(yī)療從業(yè)人員和患者，MRSA本身是金黃色葡萄球菌的變異株，病原性弱，因此即使健康人感染了MRSA也大多只成為其帶菌者。另一方面，當(dāng)?shù)挚沽θ醯母啐g患者、免疫缺陷患者、術(shù)后患者、氣管"血管內(nèi)插有導(dǎo)管的患者等感染時，MRSA會在體內(nèi)增殖，引發(fā)肺炎、腸炎、壞血癥、心內(nèi)膜炎、腦膜炎等MASR感染癥。MRSA感染癥在醫(yī)療水平高度發(fā)達(dá)的歐美和日本，被列為最主要的感染癥之一，在醫(yī)院等醫(yī)療場所推進(jìn)各種感染癥防止對策。MRSA感染癥與其他的細(xì)菌感染癥之間在癥狀、過程上無明顯差異，因此很難根據(jù)普通的臨床觀察和檢查值結(jié)果進(jìn)行識別。確診則通過利用細(xì)菌檢查來鑒定MRSA而進(jìn)行。關(guān)于MRSA感染癥的治療，除對癥治療法以外，給予抗菌劑也是有效的，但MRSA由于對于普通的抗菌藥具有耐性，因此必須使用萬古霉素及替考拉寧等對MRSA有效的特殊抗菌劑。在其使用之際，為了防止出現(xiàn)新的耐性菌，給予受到所需最低量和期間的限制。現(xiàn)在，對MRSA有效的上述抗菌藥在給予后需要一定程度的時間才顯現(xiàn)出一定的效果，因此無法期待速效性。針對這樣的MRSA感染癥治療的現(xiàn)狀，作為次世代的抗菌藥候補(bǔ)，公開了酯肽類抗生素即WAP-8294A2(參照專利文獻(xiàn)1)。WAP-8294A2的抗菌譜雖然較窄，但對MRSA的抗菌作用很強(qiáng)，能利用殺菌作用在短時間內(nèi)殺滅MRSA。因此，認(rèn)為WAP-8294A2因其強(qiáng)抗菌作用而對MRSA感染癥的急性惡化期特別有效，期待作為能使感染癥發(fā)病后處于危險狀況的患者迅速康復(fù)的治療劑。專利文獻(xiàn)l:專利第3339235號如上所述，作為針對醫(yī)療場所的重大問題即MRSA感染癥的治療藥而被人們期待的酯肽類抗生素WAP-8294A2雖然具有強(qiáng)的抗菌作用，但很難制造適合實際應(yīng)用的高濃度且穩(wěn)定的注射液和給予液，因而存在無法實用的問題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供高濃度且穩(wěn)定的WAP-8294A2的臨用時制備型注射液和給予液。若能將該抗生素制成制劑，則對于有效治療方法有限的MRSA感染癥非常有用。WAP-8294A2是具有下式(1)所示結(jié)構(gòu)式的酯肽類抗生素，對MRSA具有優(yōu)異的抗菌作用。WAP-8294A2作為鹽酸鹽而得到，其溶液顯示強(qiáng)酸性。WAP-8294A2的水溶液的穩(wěn)定性取決于pH和濃度。在pH低的酸性側(cè)區(qū)域穩(wěn)定，在中性附近則粘性提高而易凝膠化，而濃度越低越穩(wěn)定。另外，當(dāng)在水溶液中存在鈉等離子時，在低pH下也易凝膠化，在中性附近則易產(chǎn)生沉淀。為了得到具有上述物理和化學(xué)特性的WAP-8294A2的注射液，一直在制劑學(xué)上下功夫，但仍然難以制備穩(wěn)定且含有高濃度WAP-8294A2的注射液。若用目前的方法來制備WAP-8294A2的注射液，則為低濃度水溶液，雖然其在穩(wěn)定性上優(yōu)異，但制備成制劑后給予患者的給予液的容量變大，作為注射劑而言，對患者的負(fù)擔(dān)大。另外，pH的變化也不穩(wěn)定，在給予前調(diào)節(jié)pH后的穩(wěn)定性差，必須在23小時以內(nèi)盡快使用。此外在中性附近的pH下還存在如下缺點容易產(chǎn)生微小的沉淀物，為了防止該沉淀物進(jìn)入血液中而必須使用過濾器。另外，在注射給藥后，由于與血液中存在的鈉離子以及血清蛋白的相互錯用，會引起分子間凝集，有可能引起血液學(xué)異常。為此，本發(fā)明者對WAP-8294A2的溶液穩(wěn)定性進(jìn)行了反復(fù)研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)能在注射用制劑中使用的溶液劑中的2-羥基丙基-6-環(huán)糊精及3-環(huán)糊精溶液在WAP-8294A2的穩(wěn)定性上特別優(yōu)異。進(jìn)一步潛心研究后發(fā)現(xiàn):通過使用這些溶解劑或穩(wěn)定劑，并且釆用與目前的制劑方法不同的不調(diào)節(jié)pH的方法來制備臨用時制備型注射用制劑，能得到穩(wěn)定的高濃度的WAP-8294A2溶液。而且，在臨用時將該注射用制劑進(jìn)行pH調(diào)節(jié)并稀釋而得到的注射給予液，與目前的制備方法相比，能實現(xiàn)高濃度化、小容量化，穩(wěn)定性好，(1)H7N冊，且如后述的使用動物模型的藥理試驗所示，在注射給藥后也不會引起血液學(xué)異常，對MRSA感染能發(fā)揮優(yōu)異的防御效果。因此，本發(fā)明涉及一種以下述結(jié)構(gòu)式(1)表示的抗生素WAP-8294A2為有效成分的注射用制劑，其特征在于，所述制劑含有2-羥基丙基-P-環(huán)糊精或P-環(huán)糊精作為溶解劑，pH未被調(diào)節(jié)。該注射用制劑在使用時與輸液或稀釋液及pH調(diào)節(jié)劑混合而使用，pH優(yōu)選為24。注射用制劑中的抗生素WAP-8294A2的濃度優(yōu)選為520mg/ml。另外，該制劑中的2-羥基丙基-P-環(huán)糊精的濃度優(yōu)選為2%50%。P-環(huán)糊精的濃度優(yōu)選為0.5%2.5%。本發(fā)明還涉及一種以下述結(jié)構(gòu)式(1)表示的抗生素WAP-8294A2為有效成分的臨用時制備型注射用制劑的制造方法，其特征在于，使用2-羥基丙基-e-環(huán)糊精或e-環(huán)糊精作為溶解劑，并且在未調(diào)節(jié)pH的情況下進(jìn)行制劑化。本發(fā)明還涉及在上述臨用時制備型注射用制劑中混合輸液或稀釋劑及pH調(diào)節(jié)劑而得到的抗生素WAP-8294A2的注射用給予液。該給予液中使用的pH調(diào)節(jié)劑優(yōu)選包含磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉以及氫氧化鈉溶液，輸液或稀釋液優(yōu)選右旋糖。此外，本發(fā)明還涉及一種抗生素WAP-8294A2的注射用給予液的制造方法，其包括在上述臨用時制備型注射用制劑中混合輸液或稀釋劑及pH調(diào)節(jié)劑的工序。本發(fā)明的臨用時制備型注射用制劑通過含有2-羥基丙基-P-環(huán)糊精或P-環(huán)糊精作為溶解劑或穩(wěn)定劑，并且在不調(diào)節(jié)pH的情況下進(jìn)行制劑化，能克服WAP-8294A2水溶液易凝膠化而穩(wěn)定性差的缺點，能含有高濃度的WAP-8294A2，且具有長期穩(wěn)定這一優(yōu)異效果。此外，臨用時在上述注射用制劑中混合輸液或稀釋液及pH調(diào)節(jié)劑而制得的本發(fā)明的注射用給予液，在高濃度下也很穩(wěn)定，且給藥時不會引起血液學(xué)異常，能對MRSA發(fā)揮優(yōu)異的抗菌作用。另外，由于本發(fā)明的WAP-8294A2的注射用制劑液能含有高濃度的WAP-8294A2，因而能將向患者給予時給予液的容量控制得較低，能減輕對患者的負(fù)擔(dān)。具體實施例方式本發(fā)明的注射用制劑通過如下的方式來制造，將具有上述結(jié)構(gòu)式(1)的抗生素WAP-8294A2溶于作為溶解劑或穩(wěn)定劑的2-羥基丙基-e-環(huán)糊精或e-環(huán)糊精溶液中，并且不調(diào)節(jié)pH。作為有效成分的抗生素WAP-8294A2具有上述式(1)所示的結(jié)構(gòu)，作為鹽酸鹽被分離。關(guān)于其制造方法，可以舉出例如專利第3339235號說明書所述的方法培養(yǎng)溶桿菌屬(Lysobactersp.)WAP-8294株(FERMBP-4990)等屬于溶桿菌屬的抗生素WAP-8294A生產(chǎn)菌，從其培養(yǎng)物分離采集抗生素WAP-8294A，然后進(jìn)行分離精制，得到抗生素WAP-8294A2。由于WAP-8294A2作為鹽酸鹽被分離，因此將其溶于2-羥基丙基-P-環(huán)糊精或6-環(huán)糊精溶液中，不經(jīng)過調(diào)節(jié)pH而得到pH24的注射液。如下述表1所示，作為溶解劑或穩(wěn)定劑的2-羥基丙基-e-環(huán)糊精或P-環(huán)糊精在WAP-8294A2穩(wěn)定化上優(yōu)異。[表1]WAP-8294A2的溶液穩(wěn)定性(室溫保存)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*將WAP-8294A2100mg溶于各溶解液lOml。〇澄清、有流動性、澄清、有粘性、X:白色渾濁、沉淀或凝集本發(fā)明的注射用制劑液中含有的2-羥基丙基-e-環(huán)糊精優(yōu)選在1%到50%、特別優(yōu)選在5%20%的范圍內(nèi)使用。P-環(huán)糊精的使用濃度優(yōu)選從0.5%到2.5%，特別優(yōu)選從1%2%。另外，在本發(fā)明注射用制劑中，WAP-8294A2能以5mg/mL到20mg/mL的范圍的濃度溶解。特別優(yōu)選以5mg/mL到15mg/mL的濃度含有。因此，與使用2-羥基丙基-P-環(huán)糊精、P-環(huán)糊精以外的溶解劑的情況以及添加pH調(diào)節(jié)劑進(jìn)行pH調(diào)節(jié)的目前的制劑化方法相比，能得到高濃度且穩(wěn)定的WAP-8294A2注射用制劑。此外，本發(fā)明的注射用給予液可以通過在臨用時在上述注射用制劑液中混合輸液或稀釋液并添加pH調(diào)節(jié)劑來制備。該給予液的pH優(yōu)選調(diào)至68。關(guān)于添加的輸液或稀釋液的量，可以根據(jù)注射用制劑中的WAP-8294A2濃度、作為給予液的合適的量、WAP-8294A2的給予量等來適當(dāng)決定。給予液能制備成7.5mg/mL左右的相當(dāng)高的濃度，優(yōu)選制成0Jmg/mL5mg/mL、特別優(yōu)選為0.1mg/mL3mg/mL的濃度。對于目前的制備方法，容易產(chǎn)生沉淀，即使在0.1mg/mL左右，穩(wěn)定性也很差。而且，給藥后有時會產(chǎn)生血液學(xué)異常。作為輸液或稀釋液，只要是常用的輸液或稀釋液即可無特殊限制地使用，從穩(wěn)定性的觀點出發(fā)，優(yōu)選右旋糖。另外，pH調(diào)節(jié)劑優(yōu)選使用磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉以及氫氧化鈉溶液。在本發(fā)明給予液中還可以含有保存劑等制劑中常用的添加劑。本發(fā)明的給予液可以作為點滴用注射劑給予，能用作細(xì)菌感染癥、特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染癥的治療劑。本發(fā)明制劑的給予量根據(jù)對象疾病、給藥途徑、給藥次數(shù)、患者癥狀的程度等而各異，作為抗生素WAP-8294A2的量，例如優(yōu)選對成人每天給予0.530mg/kg的量。以下示出實施例、藥理試驗例，更詳細(xì)地說明本發(fā)明。但本發(fā)明不限于這些實施例。實施例1在16%的2-羥基丙基-13-環(huán)糊精溶液中制備的WAP-8294A2的注射用制劑將WAP-8294A2原藥l.Og溶解于使用注射用蒸餾水制備的16%的2-羥基丙基-P-環(huán)糊精溶液200ml中，不調(diào)節(jié)pH，得到注射用WAP-8294A2制劑液。將得到的制劑液在室溫下穩(wěn)定6個月。實施例2在5%的2-羥基丙基-P-環(huán)糊精溶液中制備的WAP-8294A2的注射用制劑將WAP-8294A2原藥l.Og溶解在使用注射用蒸餾水而制備的5%的2-羥基丙基-P-環(huán)糊精溶液100ml中，不調(diào)節(jié)pH，得到注射用WAP-8294A2制劑液。將得到的制劑液在室溫下穩(wěn)定6個月。實施例3在2%的P-環(huán)糊精溶液中制備的WAP-8294A2的注射用制劑將WAP-8294A2原藥l.Og溶解在使用注射用蒸餾水而制備的2%P-環(huán)糊精溶液100ml中，不調(diào)節(jié)pH，得到注射用WAP-8294A2制劑液。將得到的制劑液在室溫下穩(wěn)定6個月。實施例4WAP-8294A2給予液的制備向含有5mg/ml按照實施例1得到的、在16%的2-羥基丙基-P-環(huán)糊精液中制備的WAP-8294A2的注射用制劑液20ml中，添加通過在由100mM磷酸氫二鈉39容積和100mM磷酸二氫鈉61容積形成的磷酸緩沖液中添加最終為0.02N的0.1N氫氧化鈉溶液而得到的pH調(diào)節(jié)液2ml進(jìn)行中和，然后加入5%注射用液78ml，制成總量100ml。制得的給予液的pH為6.9，滲透壓為2300sm/kg。另外，得到的給予液在室溫下24小時穩(wěn)定。[藥理試驗例l]小鼠的4天反復(fù)給藥毒性試驗針對用實施例4所示的方法制備的本發(fā)明的WAP-8294A2注射用給予液(含有2-羥基丙基-e-環(huán)糊精)和舊制劑(在5%右旋糖和0.45%氯化鈉液中制備的WAP-8294A2溶液)，以50mg/kg/日、10mg/kg/日、2mg/kg/日的3個劑量對小鼠進(jìn)行4天反復(fù)給藥，比較觀察到的毒性。這些劑量按WAP-8294八2濃度計分別為7.5mg/mL、1.5mg/mL、0.3mg/mL。其結(jié)果如表2所示，若是舊制劑，則在50mg/kg/日(WAP-8294A2濃度為7.5mg/mL)給藥組，在給藥第1天的給藥后所有小鼠均立刻呈現(xiàn)陣攣性痙攣，并死亡，與此相對，若是本發(fā)明給予液，則在50mg/kg/日給藥組未見死亡以及一般狀態(tài)的異常。關(guān)于血液學(xué)異常，若是舊制劑，則在10mg/kg/日(1.5mg/mL)給藥組可見紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白量、紅細(xì)胞壓積趨向低值，血小板數(shù)為低值。與此相對，若是本發(fā)明給予液，則在2mg/kg/日(0.3mg/mL)以及10mg/kg/日(1.5mg/mL)給藥組未見異常，與舊制劑在致死和血液學(xué)異常方面存在明顯差異。由此證實本發(fā)明WAP-8294A2注射用給予液在致死劑量的上升以及血液毒性的降低等毒性學(xué)方面得到顯著改善。[表2]小鼠4天反復(fù)給藥毒性試驗的結(jié)果(一般狀態(tài)和血液學(xué)異常)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>體內(nèi)抗MRSA感染試驗針對用實施例4所示的方法制備的本發(fā)明的WAP-8294A2給予液和注射用萬古霉素(5%右旋糖溶液)，使用MRSA小鼠全身感染模型，比較有效性。使小鼠靜脈內(nèi)感染MRSA(ATCC33591株)后，在1小時后向靜脈內(nèi)給予l次試驗液，觀察1周，觀察小鼠的生死。從各給予量下的存活率求出50%有效給予量(mg/kg)。由表3證實本發(fā)明的WAP-8294A2給予液的50%有效給予量為萬古霉素的52分之一，本發(fā)明WAP-8294A2給予液對MRSA感染小鼠顯示出優(yōu)異的有效性。[表3]MRSA小鼠全身感染模型的WAP-8294A2給予液和注射用萬古霉素的有效性比較給予物質(zhì)各給予量(mg/kg)下的存活率(％)50%有效給予量103.01.00.30.10.030.01WAP-8294A2-1001001006030100,06mg/kg萬古霉素100300----3.12mg/kg工業(yè)上利用的可能性本發(fā)明提供酯肽類抗生素即WAP-8294A2的穩(wěn)定且高濃度的臨用時制備型注射用制劑。該注射用制劑在使用時將輸液或稀釋液及PH調(diào)節(jié)劑混合制成注射用給予液，與用目前的方法制備的給予液相比，濃度高且穩(wěn)定，而且致死毒性降低，紅細(xì)胞減少、血小板數(shù)減少等血液毒性學(xué)變化減少。因此，能使充分發(fā)揮抗生素WAP-8294A2的優(yōu)異抗菌作用的制劑得到實際應(yīng)用，特別是能提供針對MRSA感染癥的安全性高且非常有效的治療方法。權(quán)利要求1.一種以下述結(jié)構(gòu)式(1)表示的抗生素WAP-8294A2為有效成分的臨用時制備型注射用制劑，其特征在于，所述注射用制劑含有2-羥基丙基-β-環(huán)糊精或β-環(huán)糊精作為溶解劑，并且pH未被調(diào)節(jié)，2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用制劑，用于在使用時與輸液或稀釋液及pH調(diào)節(jié)劑混合而使用。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的注射用制劑，其中，pH為24。4.根據(jù)權(quán)利要求13中任一項所述的注射用制劑，其含有5mg/ml20mg/ml的抗生素WAP-8294A2。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用制劑，其中，2-羥基丙基-P-環(huán)糊精的濃度為2%50%。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用制劑，其中，P-環(huán)糊精的濃度為0.5%2.5%。7.—種以下述結(jié)構(gòu)式(1)表示的抗生素WAP-8294A2為有效成分的臨用時制備型注射用制劑的制造方法，其特征在于，使用2-羥基丙基-3-(1)8.—種抗生素WAP-8294A2的注射用給予液，其通過在權(quán)利要求l6中任一項所述的注射用制劑中混合輸液或稀釋液及pH調(diào)節(jié)劑而得到。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的注射用給予液，其中，pH調(diào)節(jié)劑包含磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉以及氫氧化鈉溶液。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的注射用給予液，其中，輸液或稀釋液是右旋糖。11.一種抗生素WAP-8294A2的注射用給予液的制造方法，其包括在權(quán)利要求16中任一項所述的注射用制劑中混合輸液或稀釋液及pH調(diào)節(jié)劑的工序。環(huán)糊精或P-環(huán)糊精作為溶解劑，并且在未調(diào)節(jié)pH的情況下進(jìn)行制劑化，全文摘要本發(fā)明提供以酯肽類抗生素WAP-8294A₂為有效成分的、穩(wěn)定且含有高濃度WAP-8294A₂的注射用醫(yī)藥組合物。該注射用醫(yī)藥組合物以具有式(1)所示結(jié)構(gòu)式的WAP-8294A₂為有效成分，含有2-羥基丙基-β-環(huán)糊精或β-環(huán)糊精作為穩(wěn)定劑或溶解劑，并且未調(diào)節(jié)pH。在該醫(yī)藥組合物中，在臨用時混合由磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉以及氫氧化鈉溶液構(gòu)成的pH調(diào)節(jié)劑和右旋糖等輸液或稀釋液，制備WAP-8294A₂注射用給予液。文檔編號A61K38/00GK101578103SQ20078003226公開日2009年11月11日申請日期2007年6月28日優(yōu)先權(quán)日2006年6月29日發(fā)明者中島寬文,町田治彥申請人:阿利健制藥有限公司