專利名稱：：序貫聯(lián)合治療的制作方法序貫聯(lián)合治療相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)要求于2006年10月17日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/852,263號(hào)和于2006年11月19日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/875,736號(hào)的優(yōu)先權(quán)，其全部?jī)?nèi)容通過引用的方式并入。
背景技術(shù)：
：血管主要由內(nèi)皮細(xì)胞的內(nèi)層和周細(xì)胞或平滑肌細(xì)胞的外層組成。第一管狀結(jié)構(gòu)由內(nèi)皮細(xì)胞形成，其隨后動(dòng)員(recruit)周細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞以將它們納入管狀結(jié)構(gòu)中。由來源于中胚層的內(nèi)皮前體細(xì)胞的分散細(xì)胞群從頭wovo)形成血管稱為血管發(fā)生(vasculogenesis)。這種原始的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)發(fā)生連續(xù)的形態(tài)形成事件，包括出芽、分裂和重建(remodelling)以生成從大血管到分枝的小血管的分層血管網(wǎng)。這些連續(xù)的形態(tài)形成事件統(tǒng)稱為血管生成(angiogenesis)。以前的研究已經(jīng)確定了許多內(nèi)皮細(xì)胞特異性受體酪氨酸激酶(RTK)和其同源配體，其介導(dǎo)血管的血管發(fā)生和血管生成發(fā)育。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)家族的成員和其受體在原始胚胎血管叢的形成過程中起作用，而血管生成素(Ang)和其受體Tie2以及ephrin和其Eph受體參與到隨后的重建過程中。參見，例如Jones等人，(2001)Nat.Rev.Molec.CellBiol.2:257關(guān)于參與血管生成和淋巴管生成反應(yīng)的受體的綜述。Tiel和Tie2是幾乎專門在內(nèi)皮細(xì)胞和造血前體細(xì)胞中表達(dá)的RTK。在胚胎發(fā)生過程中血管結(jié)構(gòu)的正常發(fā)育需要這兩種受體。這兩種Tie受體形成一個(gè)RTK亞族，這是由于與其它RTK家族成員不同，它們包括細(xì)胞外EGF-同源結(jié)構(gòu)域。參見，如Partanen(1992)MoLCellBiol.12:1698和WO93/14124。小鼠中Tiel基因的靶向斷裂導(dǎo)致特征為廣泛出血和微血管完整性喪失的致死表型。參見，如Puri等人，(1995)EMBOJ.14:5884。Tie2不存在的胚胎在血管重建和成熟方面具有缺陷，這由內(nèi)皮周圍支持細(xì)胞的不適當(dāng)?shù)膭?dòng)員產(chǎn)生。血管生成素(Ang，例如Angl、Ang2、Ang3和Ang4)是與Tie2相互作用的蛋白質(zhì)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)也在正常和異常血管生成的調(diào)節(jié)中起重要的作用。單個(gè)VEGF等位基因的缺失導(dǎo)致胚胎致死現(xiàn)象，表明該因子在血管系統(tǒng)的發(fā)育和分化方面起到關(guān)鍵作用(Ferrara等人，1997,Endocr.Rev.18:4-25)。VEGF也表現(xiàn)為與胂瘤和眼內(nèi)疾病(Id.)相關(guān)的新血管生成的關(guān)鍵介體。VEGFmRNA被大多數(shù)檢查到的人類肺瘤過度表達(dá)(Berkman等人，1993，JClinInvest91:153-159;Brown等人，1995,HumanPathol.26:86-91;Brown等人，1993,CancerRes.53:4727-35;Mattern等人，1996,Brit.J.Cancer.73:931-34;以及Dvorak等人，1995,AmJ.Pathol.146:1029-39)?？?VEGF中和抗體抑制多種人類腫瘤細(xì)胞系在棵鼠中的生長(zhǎng)(Kim等人，1993,Nature362:841-44;Warren等人，1995,J.Clin.Invest.95:1789-97;Borgstrom等人，1996，CancerRes.56:4032-39;以及Melnyk等人，1996，CancerRes.56:921-24)。最近，單克隆抗體VEGF抑制劑，貝伐單抗(bevacizumab),已被批準(zhǔn)用于治療某些人類癌癥。
發(fā)明內(nèi)容一般而言，本發(fā)明的特征是施用Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑以獲得期望的治療效果的給藥方案。在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供血管生成相關(guān)疾病的治療方法，所述方法包括在向?qū)ο笫┯冒琕EGF拮抗劑的第二藥劑之前向?qū)ο笫┯冒琓iel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約1天至35天(如，1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、20、21、28、30或35天，或者其間的任何天數(shù))施用第一藥劑。在其它實(shí)施方式中，在施用第，3、4或5天)、大約6天(如，5、6或7天)、大約8天(如，7、8或9天)、大約10天(如，8、9、10、11或12天)、大約20天(如，19、20或21天)或大約2周(如，12、13、14、15或16天)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后繼續(xù)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后停止施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為本文中描述的Tiel胞外域-結(jié)合劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為DX-2240、DX-2220或其組合。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為本文中描述的VEGF拮抗劑。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為貝伐單抗。在其它實(shí)施方式中,VEGF拮抗劑為索拉非尼(somfenib)。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以單獨(dú)有效地治療血管生成相關(guān)疾病的量施用。在其它實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以小于單獨(dú)有效地治療血管生成相關(guān)疾病的量施用。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑各自以治療血管生成相關(guān)疾病協(xié)同有效的量施用。在一些實(shí)施方式中，血管生成相關(guān)疾病為癌癥或腫瘤，例如，本文描述的癌癥或胂瘤。在一些實(shí)施方式中，血管生成相關(guān)疾病為結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌、腎癌、肝癌、卵巢癌、前列腺癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，血管生成相關(guān)疾病為前列腺癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤脈管系統(tǒng)變化的步驟，且當(dāng)腫瘤月永管系統(tǒng)與施用第一藥劑之前相比表現(xiàn)出腫瘤脈管系統(tǒng)的變化時(shí)施用第二藥劑。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤尺寸變化的步驟。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括》文射治療或化學(xué)治療。放射和/或化學(xué)治療可以在施用Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑之前、期間或之后進(jìn)行。在其它方面中，本發(fā)明描述了提供手術(shù)后輔助治療的方法，該方法包括在施用包含VEGF拮抗劑的第二藥劑之前，在一段時(shí)間內(nèi)對(duì)已手術(shù)切除肺瘤的對(duì)象施用包含Tiel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約1天至35天(如，1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、20、21、28、30或35天，或者其間的任何天數(shù))施用第一藥劑。在其它實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約4天(如，3、4或5天)、大約6天(如，5、6或7天)、大約8天(如，7、8或9天)、大約10天(如，8、9、10、11或12天)、大約20天(如，19、20或21天)或大約2周(如，12、13、14、15或16天)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后繼續(xù)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后停止施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為本文中描述的Tiel胞外域-結(jié)合劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為DX-2240、DX-2220或其組合。在一些實(shí)施方式中，第一藥劑在手術(shù)的大約5、10、15、20、24、35、40或48小時(shí)內(nèi)施用。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為本文中描述的VEGF拮抗劑。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為貝伐單抗。在其它實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為索拉非尼。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以單獨(dú)有效地治療胂瘤再生長(zhǎng)的量施用。在其它實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以小于單獨(dú)有效地治療腫瘤再生長(zhǎng)的量施用。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑各自以治療肺瘤再生長(zhǎng)協(xié)同有效的量施用。在一些實(shí)施方式中，肺瘤為本文中描述的腫瘤。在一些實(shí)施方式中，腫瘤為結(jié)腸肺瘤、肺腫瘤、乳腺腫瘤、腎腫瘤、肝腫瘤、卵巢胂瘤、前列腺肺瘤或胰腺肝瘤。在一些實(shí)施方式中，腫瘤為前列腺腫瘤或胰腺胂瘤。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括放射治療或化學(xué)治療。放射和/或化學(xué)治療可以在施用Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑之前、期間或之后進(jìn)行。在其它方面中，本發(fā)明提供了血管生成相關(guān)疾病的治療方法，該方法包括在向?qū)ο笫┯冒琓iel胞外域-結(jié)合劑的第二藥劑之前，在一段時(shí)間內(nèi)向?qū)ο笫┯冒琕EGF拮抗劑的第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約1天至35天(如，1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、20、21、28、30或35天，或者其間的任何天數(shù))施用第一藥劑。在其它實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約4天(如，3、4或5天)、大約6天(如，5、6或7天)、大約8天(如，7、8或9天)、大約10天(如，8、9、10、11或12天)、大約20天(如，19、20或21天)或大約2周(如，12、13、14、15或16天)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后繼續(xù)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后停止施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為本文中描述的Tiel胞外域-結(jié)合劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為DX-2240、DX-2220或其組合。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為本文中描述的VEGF拮抗劑。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為貝伐單抗。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為索拉非尼。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤脈管系統(tǒng)變化的步驟，且當(dāng)胂瘤脈管系統(tǒng)與施用第一藥劑之前相比表現(xiàn)出變化時(shí)施用第二藥劑。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括監(jiān)控腫瘤生長(zhǎng)的步驟，且當(dāng)表現(xiàn)出胂瘤生長(zhǎng)時(shí)施用第二藥劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以單獨(dú)有效地治療血管生成相關(guān)疾病的量施用。在其它實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以小于單獨(dú)有效地治療血管生成相關(guān)疾病的量施用。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑各自以對(duì)治療血管生成相關(guān)疾病協(xié)同有效的量施用。在一些實(shí)施方式中，血管生成相關(guān)疾病為癌癥或肺瘤，例如，本文中描述的癌癥或肺瘤。在一些實(shí)施方式中，血管生成相關(guān)疾病為結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌、腎癌、肝癌、卵巢癌、前列腺癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，血管生成相關(guān)疾病為前列腺癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括放射治療或化學(xué)治療。放射和/或化學(xué)治療可以在施用Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑之前、期間或之后進(jìn)行。在其它方面中，本發(fā)明描述提供手術(shù)后輔助治療的方法，該方法包括在施用包含Tiel胞外域-結(jié)合劑的第二藥劑之前，在一段時(shí)間內(nèi)對(duì)已手術(shù)切除肺瘤的對(duì)象施用包含VEGF拮抗劑的第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約1天至35天(如，1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、20、21、28、30或35天，或者其間的任何天數(shù))施用第一藥劑。在其它實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約4天(如，3、4或5天)、大約6天(如，5、6或7天)、大約8天(如，7、8或9天)、大約10天(如，8、9、10、11或12天)、大約20天(如，19、20或21天)或大約2周(如，12、13、14、15或16天)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后繼續(xù)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后停止施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為本文中描述的VEGF拮抗劑。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為貝伐單抗。在其它實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為索拉非尼。在一些實(shí)施方式中，第一藥劑在手術(shù)的大約5、10、15、20、24、35、40或48小時(shí)內(nèi)施用。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為本文中描述的Tiel胞外域-結(jié)合劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為DX-2240、DX-2220或其組合。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以單獨(dú)有效地治療胂瘤再生長(zhǎng)的量施用。在其它實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以小于單獨(dú)有效地治療腫瘤再生長(zhǎng)的量施用。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑各自以對(duì)治療腫瘤再生長(zhǎng)協(xié)同有效的量施用。在一些實(shí)施方式中，腫瘤為本文中描述的肺瘤。在一些實(shí)施方式中，肺瘤存在于結(jié)腸、肺、乳腺、腎、肝、卵巢、前列腺或胰腺中。在一些實(shí)施方式中，腫瘤為前列腺腫瘤或胰腺腫瘤。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括放射治療或化學(xué)治療。放射和/或化學(xué)治療可以在施用Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑之前、期間或之后進(jìn)行。在其它方面中，本發(fā)明提供使肺瘤脈管系統(tǒng)對(duì)VEGF的下降敏化的方法，該方法包括在對(duì)患有血管生成相關(guān)疾病的對(duì)象施用包含VEGF拮抗劑的第二藥劑之前向?qū)ο笫┯冒琓ie1胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約1天至35天(如，1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、20、21、28、30或35天，或者其間的任何天數(shù))施用第一藥劑。在其它實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約4天(如，3、4或5天)、大約6天(如，5、6或7天)、大約8天(如，7、8或9天)、大約10天(如，8、9、10、11或12天)、大約20天(如，19、20或21天)或大約2周(如，12、13、14、15或16天)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后繼續(xù)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后停止施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為本文中描述的Tiel胞外域-結(jié)合劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為DX-2240、DX-2220或其組合。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為本文中描述的VEGF拮抗劑。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為貝伐單抗。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤脈管系統(tǒng)變化的步驟，且當(dāng)腫瘤脈管系統(tǒng)與施用第一藥劑之前相比表現(xiàn)出變化時(shí)施用第二藥劑。在一些實(shí)施方式中，血管生成相關(guān)疾病為癌癥或腫瘤，例如，本文中描述的癌癥或腫瘤。在一些實(shí)施方式中，所述癌癥為結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌、腎癌、肝癌、卵巢癌、前列腺癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，所述癌癥為前列腺癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括放射治療或化學(xué)治療。放射和/或化學(xué)治療可以在施用Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑之前、期間或之后進(jìn)行。在一些方面中，本發(fā)明提供降低正施用VEGF拮抗劑的患有癌癥的對(duì)象中肺瘤再生長(zhǎng)速率的方法，該方法包括向?qū)ο笫┯冒琓iel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑和包含VEGF拮抗劑的第二藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約1天至35天(如，1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、20、21、28、30或35天，或者其間的任何天數(shù))施用第一藥劑。在其它實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之前大約4天(如，3、4或5天)、大約6天(如，5、6或7天)、大約8天(如，7、8或9天)、大約10天(如，8、9、10、11或12天)、大約20天(如，19、20或21天)或大約2周(如，12、13、14、15或16天)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后繼續(xù)施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，在施用第二藥劑之后停止施用第一藥劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為本文中描述的Tiel胞外域-結(jié)合劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為DX-2240、DX-2220或其組合。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為本文中描述的VEGF拮抗劑。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為貝伐單抗或索拉非尼。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤生長(zhǎng)和在顯示生長(zhǎng)跡象時(shí)施用第二藥劑的步驟。在一些實(shí)施方式中，所述癌癥為本文中描述的癌癥。在一些實(shí)施方式中，所述癌癥為結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌、腎癌、肝癌、卵巢癌、前列&泉癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，所述癌癥為前列&1l癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括放射治療或化學(xué)治療。放射和/或化學(xué)治療可以在施用Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑之前、期間或之后進(jìn)行。在一些方面中，本發(fā)明提供通過在施用包含VEGF拮抗劑的第二藥劑之前向?qū)ο笫┯冒琓iel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑而降低向?qū)ο笫┯肰EGF拮抗劑的頻率的方法。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為本文中描述的Tiel胞外域-結(jié)合劑。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為DX-2240、DX-2220或其組合。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為本文中描述的VEGF拮抗劑。在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑為索拉非尼。在其它實(shí)施方式中，所述方法包括監(jiān)控對(duì)象的肺瘤生長(zhǎng)的步驟。在一些實(shí)施方式中，所述癌癥為本文中描述的癌癥。在一些實(shí)施方式中，所述癌癥為結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌、腎癌、肝癌、卵巢癌、前列腺癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，所述癌癥為前列腺癌或胰腺癌。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括放射治療或化學(xué)治療。放射和/或化學(xué)治療可以在施用Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑之前、期間或之后進(jìn)行。在另一方面中，本發(fā)明包括Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑用于制備根據(jù)本文公開的方法治療血管生成相關(guān)疾病的藥物。在其它方面中，本發(fā)明提供本文中描述的方法，其中使用Tie2胞外域-結(jié)合劑代替Tiel胞外域-結(jié)合劑或與其結(jié)合使用。在其它方面中，本發(fā)明提供一種包括包含Tiel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑、包含VEGF拮抗劑的第二藥劑和根據(jù)本文描述的方法使用的說明書的試劑盒。在本文描述的方面中，血管生成相關(guān)疾病包括，但不限于，腫瘤性疾病(如，實(shí)體瘤、瘤轉(zhuǎn)移和良性腫瘤，特別是需要血液供應(yīng)或血管生成的肺瘤性疾病)；炎性疾病(如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、狼瘡、再狹窄、牛皮癬、移植物抗宿主反應(yīng)或多發(fā)性硬化癥)；眼部血管生成疾病，例如，糖尿病性視網(wǎng)膜病、早產(chǎn)兒一見網(wǎng)膜病、黃斑變性(如，濕和/或干性年齡相關(guān)性黃斑變性)、角膜移植片排斥、新生血管性青光眼、晶狀體后纖維組織增生癥、虹膜紅變(rubeosis);遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥(Osier-WebberSyndrome);心肌血管生成；斑塊內(nèi)新血管形成；毛細(xì)管擴(kuò)張；血友病關(guān)節(jié)；血管纖維瘤以及創(chuàng)面肉芽形成。良性腫瘤包括，但不限于，血管瘤、聽神經(jīng)瘤、神經(jīng)纖維瘤、沙眼以及膿性肉芽瘤。實(shí)體瘤包括，但不限于，各個(gè)器官系統(tǒng)的惡性胂瘤，例如，肉瘤、腺瘤和癌瘤，如那些侵襲肺、乳腺、胃腸(如結(jié)腸)、和生殖泌尿道(如腎臟、膀胱上皮細(xì)胞)、咽的惡性肺瘤以及腺癌，包括如大多數(shù)結(jié)腸癌、直腸癌、腎細(xì)胞癌、肝癌、非小細(xì)胞肺癌、小腸癌、食道癌和胰腺癌的惡性肝瘤?？杀恢委煹膶?shí)體瘤的其它實(shí)例還包括纖維肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、成骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管內(nèi)皮肉瘤(lymphangioendotheliosarcoma)、滑〗莫瘤、間皮瘤、尤因肉瘤(Ewing'stumor)、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、胃腸系統(tǒng)癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、生殖泌尿系統(tǒng)癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、嚢腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細(xì)胞癌、肝細(xì)胞瘤、膽管癌、絨毛膜癌、精原細(xì)胞瘤、胚胎性癌、維爾姆斯瘤(Wilms'tumor)、子宮頸癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌、睪丸腫瘤、肺癌、小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、+>果體瘤、成血管細(xì)胞瘤、聽神經(jīng)瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦膜瘤、黑素瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤。在本文描述的一些方面中，所述血管生成相關(guān)疾病為炎性疾病，例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、類風(fēng)濕性或風(fēng)濕性炎性疾病、或者其它慢性炎性疾病(如慢性哞喘、動(dòng)脈或移植后動(dòng)脈粥樣硬化、以及子宮內(nèi)膜異位癥)?？杀恢委煹钠渌苌上嚓P(guān)疾病包括具有異常或不期望的血管生成的那些疾病，如眼部新生血管形成，例如，視網(wǎng)膜病(包括糖尿病性視網(wǎng)膜病和年齡相關(guān)性黃斑變性)、成血管細(xì)胞瘤、血管瘤和動(dòng)脈硬化。在本文描述的一些方面中，所述對(duì)象需要減少血管生成，或經(jīng)確定需要減少血管生成。例如，對(duì)象患有腫瘤性疾病，如轉(zhuǎn)移癌。例如，對(duì)象患有血管生成依賴性癌或胂瘤。所述肺瘤可以為實(shí)體瘤，如直徑至少為1、2、3、5、8或10mm的肺瘤。在一個(gè)實(shí)施方式中，實(shí)體瘤具有缺氧性核。所述方法可以包括在施用拮抗藥之前評(píng)價(jià)對(duì)象并檢測(cè)對(duì)象中的實(shí)體瘤。在本文描迷的一些方面中，Tiel胞外域-結(jié)合劑增加了Tie復(fù)合體形成。在本文描述的一些方面中，Tiel胞外域-結(jié)合劑增加了Tiel的酪氨酸磷酸化。在本文描述的一些方面中，Tiel胞外域-結(jié)合劑誘導(dǎo)細(xì)胞表面的Tiel下調(diào)。在本文描述的一些方面中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為包括至少一個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(CDR，如HCCDR1、HCCDR2、HCCDR3、LCCDR1、LCCDR2和/或LCCDR3)的抗體，該互補(bǔ)決定區(qū)來自E3(DX-2240)、E3b(DX-2220)、M0044-A06、M0044-A11、M0044-B04、M0044-B05、M0044--B08、M0044-B09、M0044-B10、M0044-B12、M0044-C07、MOO林-DOl、M0044-E03、M0044-F03、M0044-F06、M0044-F09、M0044.-G06、M0044-G07、M0044-Gil;M0044-H03、M0044-H05、M0044--脂、M0044-H09、M0045-A02、M0045-A04、M0045-B01、M0045--B03、M0045-B11、M0045-C02、M0045-C11、M0045-C12、M0045--DOl、M0045-D07、M0045-G01、M0045-G10、M0046-A11、M0046--B06、M0046-B10、M0046-G12、M0046-H03、M0046-H10、M0046--Hll、M0047-B03、M0047-D01、M0047-D03、M0047-E10、M0047-曙G09、M0053-A02、M0053-A03、M0053-A05、M0053-A09、M0053.-B09、M0053-B11、M0053-D03、M0053-D06、M0053-D12、M0053--E03、M0053畫E04、M0053-E08、M0053-F04、M0053-F05、16M0053.匿F06、M0053-F08、M0054.-B06、M0054-B08、M0054.-GOl、M0054畫G05、M0055.-B12、M0055畫C05、M0055.-D12、M0055-E04、M0055--FIO、M0055-G02、M0056.-A06、M0056-B08、M0056--E08、M0056-F01、M0056--G03、M0056-G04、M0056--H12、M0057-B05、M0058.■E09、M0058-F03、M0059--A06、M0060-B02、M0061.-C06、M0061-F07、M0062--B05、M0062-B07、M0062--E03、M0062-E11、M0053隱G04、M0054-C03、M0054-H10、M0055-C07、M0055-E06、M0055-G03、M0056畫B09、M0056-F02、M0056-G08、M0057-脂、M0058-G03、M0060-H01、M0061-G12、M0062-C08、M0053曙G05、M0054-C07、M0055-A09、M0055畫D03、M0055畫E10、M0055-H04、M0056畫C03、M0056-F10、M0056-G12、M0058-A09、M0058-腦、M0061-A03、M0061-簡(jiǎn)、M0062-D04、M0054-A08、M0054畫E04、M0055-B11、M0055畫D06、M0055畫E12、M0056-A01、M0056-C04、M0056-F11、M0056-H04、M0058-D04、M0059-A02、M0061-C05、M0062-A12、M0062-E02、M0062-F10、M0062-G06或M0062-HOl。VEGF拮抗劑是一種以VEGF信號(hào)通路作為靶點(diǎn)或負(fù)調(diào)節(jié)VEGF信號(hào)通路的物質(zhì)。后一類的實(shí)例包括VEGF抑制劑(例如，如通過與VEGF結(jié)合而直接抑制VEGF(如VEGF-A、-B、-C或-D)的物質(zhì)(例LUCENTIS),或其它抑制劑如哌加他尼(pegaptanib)、新伐司他(NEOVASTAT)、AE-941、VEGFTrap和PI-88))、VEGF表達(dá)調(diào)節(jié)劑(例如，INGN-241、口服四硫鉬酸鹽、2-甲氧雌二醇、2-曱氧雌二醇納米晶體分散體、貝伐西尼鈉(bevasiranibsodi職)、PTC-299、Veglin)、VEGF受體抑制劑(如KDR或VEGF受體III(Flt4)，例如，抗-KDR抗體、如CDP-791、IMC-1121B的VEGFR2抗體，如CT-322的VEGFR2阻滯劑)、VEGFR表達(dá)調(diào)節(jié)劑(例如，VEGFR1表達(dá)調(diào)節(jié)劑Sirna-027)或VEGF受體下游信號(hào)抑制劑。在本文描述的一些方面中，VEGF拮抗劑為貝伐單抗、哌加他尼、蘭尼單抗、索拉非尼、舒尼一,尼(sunitinib)、新4戈司他、AE-941、VEGFTrap、帕唑帕尼(pazopanib)、凡德、j也尼(vandetanib)、瓦4也4立尼(vatalanib)、塞i也蘭尼(cediranib)、芬維A胺(fenretinide)、角蓋胺(squalamine)、INGN-241、口月良四碌^鉬酸鹽、四碌u鉬酸鹽、PanzemNCD、2-甲氧雌二醇、AEE-788、AG-013958、貝伐西尼鈉、AMG-706、阿西替尼(axitinib)、BIBF-1120、CDP-791、CP隱547632、PI-88、SU畫14813、SU畫6668、XL-647、XL-999、IMC-1121B、ABT-869、BAY-57-9352、BAY-73-4506、BMS-582664、CEP陽7055、CHIR-265、CT-322、CX-3542、E-7080、ENMD-1198、OSI-930、PTC-299、Sirna-027、TKI-258、Veglin、XL-184或ZK-304709。在本文描述的一些方面中，Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑的施用用作輔助治療。輔助治療可以是在對(duì)象接受切除整個(gè)腫瘤或部分腫瘤的手術(shù)后(例如，在手術(shù)治療成膠質(zhì)細(xì)胞瘤或結(jié)腸直腸、乳腺或肺癌后)向?qū)ο笫┯玫氖中g(shù)后治療。在一些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的施用在手術(shù)的6、12、24、48或100小時(shí)內(nèi)開始。在本文描述的一些方面中，所述方法包括另外的治療形式。例如，另外的治療形式為放射治療或細(xì)胞毒性化學(xué)治療劑，如抗代謝藥(例如，5-FU，與甲酰四氫葉酸)、伊立替康(irinotecan)、(或其它拓樸異構(gòu)酶抑制劑)、多柔比星或所有這些藥物的任何組合，包括施用所有這些藥物。所述方法可以進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的以下的一項(xiàng)或多項(xiàng)下降的步驟胂瘤尺寸減小；癌癥標(biāo)志物的減少，如癌癥特異性抗原水平；新?lián)p傷表現(xiàn)的減少，如在骨掃描中；新的疾病相關(guān)癥狀的表現(xiàn)減少；或軟組織塊的尺寸減小或穩(wěn)定；或任何與臨床結(jié)果的改善相關(guān)的參數(shù)。可以在以下的一個(gè)或多個(gè)階段中監(jiān)控對(duì)象治療開始前；治療期間；或已經(jīng)施用治療的一個(gè)或多個(gè)要素后。監(jiān)控可以用于評(píng)價(jià)是否需要用相同的Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑進(jìn)行進(jìn)一步治療或用另外的藥劑進(jìn)行另外的治療。通常，上述的一個(gè)或多個(gè)參數(shù)的下降或穩(wěn)定預(yù)示對(duì)象的情況得到改善。關(guān)于監(jiān)控的信息可以用例如電子或數(shù)字形式記錄。所述對(duì)象可以為哺乳動(dòng)物，例如，靈長(zhǎng)類動(dòng)物，特別是高等靈長(zhǎng)類動(dòng)物如人類。本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將通過以下的詳細(xì)說明和權(quán)利要求書變得更加清楚。本發(fā)明的實(shí)施方式可以包括本文中描述的特征的任何組合。術(shù)語"實(shí)施方式"決不必然地排除本文(如在另一個(gè)實(shí)施方式中)公開的一個(gè)或多個(gè)其它特征。本申請(qǐng)通篇引用的所有參考文獻(xiàn)、專利申請(qǐng)以及專利的內(nèi)容通過引用的方式在此明確地并入本文中。圖1顯示人Tiel的氨基酸序列。圖2顯示了描繪在胰腺胂瘤模型中施用DX-2240IO天后施用貝伐單抗的情況的曲線圖。圖3顯示了描繪在胰腺腫瘤^^型中施用DX-224020天后施用貝伐單抗的情況的曲線圖。圖4顯示了描繪在胰腺腫瘤模型中施用DX-224015天后施用索拉非尼的情況的曲線圖。圖5顯示了描繪在前列腺腫瘤模型中施用DX-2240后施用索拉非尼的情況的曲線圖。圖6顯示了描繪在前列腺腫瘤模型中施用DX-2240后施用貝伐單抗的情況的曲線圖。圖7顯示了描繪在胰腺腫瘤模型中施用DX-2240后按不同時(shí)間表施用貝伐單抗的情況的曲線圖。圖8顯示了描繪在胰腺腫瘤模型中施用DX-224010或20天后施用貝伐單抗的情況的曲線圖。圖9顯示了描繪在胰腺腫瘤模型中施用DX-2240的同一天或5天后施用貝伐單抗的情況的曲線圖。圖IO顯示了來自DX-2240處理的小鼠的腫瘤的凝集素染色。圖ll顯示了描繪在前列腺腫瘤模型中施用DX-224015天后施用不同劑量的貝伐單抗的情況的曲線圖。圖12顯示了描繪在前列腺肺瘤模型中施用DX-224015天后施用貝伐單抗的情況的曲線圖。具體實(shí)施例方式本發(fā)明人令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，當(dāng)施用第二藥劑之前施用第一藥劑一段足夠長(zhǎng)的時(shí)間時(shí)，Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。例如，在施用VEGF拮抗劑之前施用Tiel胞外域-結(jié)合劑時(shí)出現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)。因此，本發(fā)明提供通過在不同的時(shí)間向?qū)ο笫┯肨iel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑來治療血管生成相關(guān)疾病(例如，改善血管生成相關(guān)疾病的至少一個(gè)癥狀)的方法。例如，在一個(gè)方面中，治療對(duì)象的血管生成相關(guān)疾病(例如，改善血管生成相關(guān)疾病的至少一個(gè)癥狀)的方法包括首先施用Tiel胞外域-結(jié)合劑，然后施用VEGF拮抗劑。施用Tiel胞外域-結(jié)合劑(例如，DX-2240或DX-2220)引起表達(dá)Tiel和Tie2的細(xì)胞(如內(nèi)皮細(xì)胞)表面的Tiel/Tie2異二聚體的下調(diào)。因此，本發(fā)明還提供通過首先施用Tiel胞外域-結(jié)合劑，然后施用VEGF拮抗劑改善血管生成相關(guān)疾病的至少一個(gè)癥狀的方法。術(shù)語"治療"或"處理"指單獨(dú)或與一種或多種其它藥劑(如第二藥齊'J)組合向?qū)ο螅缁颊?，如具有疾?如本文中描述的疾病)、疾病的癥狀或患病的體質(zhì)或者具有易患該病的體質(zhì)的患者，應(yīng)用或施用一種藥劑以治療、治愈、減輕、緩解、改變、補(bǔ)救、改善、增進(jìn)或影響所述疾病、疾病的癥狀或易患病的體質(zhì)。處理細(xì)胞指細(xì)胞活性的下降，例如，內(nèi)皮細(xì)胞形成管狀體或血管的能力。下降不是必須要活性全部消除，而是如細(xì)胞活性或數(shù)目的下降，如統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的下降。如本文中所用的，術(shù)語"抗體"指包括至少一個(gè)免疫球蛋白可變區(qū)或免疫球蛋白可變區(qū)序列的蛋白質(zhì)。例如，抗體可以包括重(H)鏈可變區(qū)(本文中簡(jiǎn)寫為VH)和輕(L)鏈可變區(qū)(本文中簡(jiǎn)寫為VL)。在另一實(shí)例中，抗體包括兩個(gè)重(H)鏈可變區(qū)和兩個(gè)輕(L)鏈可變區(qū)。術(shù)語"抗體"包括抗體的抗原結(jié)合片段(例如，單鏈抗體、Fab片段、F(ab')2、Fd片段、Fv片段和dAb片段)以及完全抗體。VH和VL區(qū)可進(jìn)一步細(xì)分為稱為"互補(bǔ)決定區(qū)"(CDR)的高變區(qū)，其中散布有稱為"框架區(qū)"(FR)的更保守的區(qū)?？蚣軈^(qū)和CDR的范圍已被精確地確定(參見Kabat,E.A.等人，(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第五版，美國(guó)衛(wèi)生和福利部(U.S.DepartmentofHealthandHumanServices),NIH出版號(hào).91-3242,和Chothia，C.等人，(1987)J.Mol.Biol.196:901-917)。本文使用Kabat定義。各VH和VL典型地由三個(gè)CDR和四個(gè)FR組成，,人氨基端到羧基端按照如下順序排列FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。"免疫球蛋白域"指來自免疫球蛋白分子的可變或恒定域的結(jié)構(gòu)域。免疫球蛋白域通常含有由大約7個(gè)|3-鏈形成的2個(gè)P-折疊和1個(gè)保守的二硫鍵(參見，如A.F.Williams和A,N.Barclay,1988Ann-RevImmunol.6:381-405)。如在Chothia等人，(1992)J.Mol.Biol.227:799-817;Tomlinson等人，(1992)J.Mol.Biol.227:776-798);和Tomlinson等人，(1995)EMBOJ.14(18):4628-38中所述的，免疫球蛋白可變區(qū)的高變環(huán)的正則結(jié)構(gòu)(canonicalstructure)可以由其序列推斷出來。如本文中所用的，"免疫球蛋白可變域序列"指可以形成免疫球蛋白可變域結(jié)構(gòu)的氨基酸序列。例如，該序列可以包括天然存在的可變域的全部或部分氨基酸序列。例如，該序列可以略去1個(gè)、2個(gè)或多個(gè)N-或C-末端氨基酸、內(nèi)部氨基酸，可以包括l個(gè)或多個(gè)插入或附加的末端氨基酸，或者可以包括其它替換。在一個(gè)實(shí)施方式中，包括免疫球蛋白可變域序列的多肽可以與另一免疫球蛋白可變域序列結(jié)合以形成靶結(jié)合結(jié)構(gòu)(或"抗原結(jié)合位點(diǎn)")，例如，與Tiel相互作用(如與Tiel結(jié)合或抑制Tiel)的結(jié)構(gòu)?？贵w的VH或VL鏈可進(jìn)一步包括重或輕鏈恒定區(qū)的全部或部分，從而分別形成重或輕免疫球蛋白鏈。在一個(gè)實(shí)施方式中，抗體是兩個(gè)重免疫球蛋白鏈和兩個(gè)輕免疫球蛋白鏈的四聚體，其中重和輕免疫球蛋白鏈通過如二硫鍵相互連接。重鏈恒定區(qū)包括3個(gè)結(jié)構(gòu)域CH1、CH2和CH3。輕鏈恒定區(qū)包括CL結(jié)構(gòu)域。重和輕鏈的可變區(qū)含有與抗原相互作用的結(jié)合域。抗體的恒定區(qū)通常介導(dǎo)抗體與宿主組織或因子(包4舌免疫系統(tǒng)的多種細(xì)月包(如效應(yīng)細(xì)月包)和經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)的第一組分(Clq))的結(jié)合。術(shù)語"抗體"包括IgA、IgG、IgE、IgD、IgM型(以及其亞型)的完整免疫球蛋白。免疫球蛋白的輕鏈可以為k或X型的。在一個(gè)實(shí)施方式中，抗體為糖基化的?？贵w可以對(duì)抗體依賴性細(xì)胞毒性和/或補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性起作用。術(shù)語"單特異性抗體"指表現(xiàn)出對(duì)特定靶點(diǎn)(如表位)的單一結(jié)合特異性和親和力的抗體。該術(shù)語包括"單克隆抗體"，單克隆抗體指作為單一分子種類產(chǎn)生的，例如，由同質(zhì)的分離細(xì)胞群產(chǎn)生的抗體。"單克隆抗體組合物"指在包括單一分子種類抗體的組合物中的抗體或其片段的制劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，由哺乳動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體。可以組合一個(gè)或多個(gè)單克隆抗體種類?？贵w的一個(gè)或多個(gè)區(qū)可以為人源或?qū)嶋H上人源的。例如，一個(gè)或多個(gè)可變區(qū)可以為人源或?qū)嶋H上人源的。例如，一個(gè)或多個(gè)CDR可以為人源的，如，HCCDR1、HCCDR2、HCCDR3、LCCDR1、LCCDR2和LCCDR3。各輕鏈CDR可以為人源的。HCCDR3可以為人源的。一個(gè)或多個(gè)框架區(qū)可以為人源的，例如，HC或LC的FR1、FR2、FR3和FR4。在一個(gè)實(shí)施方式中，所有框架區(qū)均是人源的，例如，從人的體細(xì)胞(如，產(chǎn)生免疫球蛋白的造血細(xì)胞，或非造血細(xì)胞)得到的。在一個(gè)實(shí)施方式中，人源序列為胚系序列(germlinesequence),例如，由胚系核酸編碼的。一個(gè)或多個(gè)恒定區(qū)可以為人源或?qū)嶋H上人源的。在另一實(shí)施方式中，框架區(qū)(例如，F(xiàn)R1、FR2和FR3全體，或FR1、FR2、FR3和FR4全體)或整個(gè)抗體的至少70、75、80、85、90、92、95或98%可以為人源或?qū)嶋H上人源的。例如，F(xiàn)R1、FR2和FR3全體可以是至少70、75、80、85、90、92、95、98或99%與編碼輕或重鏈序列的位點(diǎn)的人源胚系V片段編碼的人源序列相同?？贵w的全部或部分可通過免疫球蛋白基因或其片段編碼。示例性的人免疫球蛋白基因包括k、X、a(IgAl和IgA2)、丫(IgGl、IgG2、IgG3、IgG4)、5、s和n恒定區(qū)基因以及眾多的免疫球蛋白可變區(qū)基因。全長(zhǎng)免疫球蛋白輕鏈(約25Kd或214個(gè)氨基酸)由NH2-端的可變區(qū)基因(約110個(gè)氨基酸)和COOH-端的k或人恒定區(qū)基因編碼。全長(zhǎng)免疫球蛋白重鏈(約50Kd或446個(gè)氨基酸)類似地由可變區(qū)基因(約116個(gè)氨基酸)和其它前述的恒定區(qū)基因中的一個(gè)，如y(編碼約330個(gè)氨基酸)編碼。輕鏈指包括輕鏈可變域的任何多肽。重鏈指包括重鏈可變域的任何多肽。如本文中所用的，術(shù)語全長(zhǎng)抗體的"抗原結(jié)合片段"(或簡(jiǎn)稱為"抗體部分"或"片段")指保持與目標(biāo)靶點(diǎn)特異性結(jié)合的能力的全長(zhǎng)抗體的一個(gè)或多個(gè)片段。術(shù)語全長(zhǎng)抗體的"抗原結(jié)合片段"所包含的結(jié)合片段的實(shí)例包括(i)Fab片段，由VL、VH、CL和CH1結(jié)構(gòu)域組成的單價(jià)片段；(ii)F(ab')2片段，包括由鉸鏈區(qū)的二硫橋鍵連接的兩個(gè)Fab片段的二價(jià)片段；(iii)由VH和CH1結(jié)構(gòu)域組成的Fd片段；(iv)由抗體單臂的VL和VH結(jié)構(gòu)域組成的Fv片段；(v)由VH結(jié)構(gòu)域組成的dAb片段(Ward等人，(1989)Nature341:544-546);和(vi)保持功能性的分離的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)。而且，盡管Fv片段的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域VL和VH由獨(dú)立的基因編碼，但是它們可以采用重組方法通過使它們能夠形成為單個(gè)蛋白質(zhì)鏈的合成接頭結(jié)合，在該單個(gè)蛋白質(zhì)鏈中VL和VH區(qū)配對(duì)形成稱為單鏈Fv(scFv)的單價(jià)分子。參見,如Bird等人，(1988)Science242:423-426;和Huston等人，(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883。常規(guī)技術(shù))獲得口。術(shù)語"單特異:抗體"指表現(xiàn)出對(duì);定靶點(diǎn)(如表位)的單一結(jié)合特異性和親和力的抗體。該術(shù)語包括"單克隆抗體"或"單克隆抗體組合物"，其在本文中指單分子組合物的抗體或其片段的制劑。如本文中所用的，"同種型"指由重鏈恒定區(qū)基因編碼的抗體種類(如IgM或IgGl)。在一個(gè)實(shí)施方式中，抗體的HC或LC包括對(duì)應(yīng)于由人胚系序列編碼的氨基酸序列(如，框架區(qū)和/或在CDR中)的序列。例如，抗體可以包括來自人DP47抗體的序列。在一個(gè)實(shí)施方式中，抗體的一個(gè)或多個(gè)密碼子相對(duì)于胚系核酸序列發(fā)生改變，但被選擇以編碼相同的氨基酸序列?？梢赃x擇密碼子，例如，以使特定系統(tǒng)中的表達(dá)最優(yōu)化、產(chǎn)生限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)、產(chǎn)生靜止指紋(silentfingerprint)等。"人源化"免疫球蛋白可變區(qū)為包括足夠數(shù)目的人框架氨基酸位點(diǎn)的免疫球蛋白可變區(qū)，從而使該免疫球蛋白可變區(qū)在正常人體中不引起免疫反應(yīng)。"人源化"免疫球蛋白的描述包括如US6,407,213和US5,693,762。"實(shí)際上人源的，，免疫球蛋白可變區(qū)為包括足夠數(shù)目的人框架氨基酸位點(diǎn)的免疫球蛋白可變區(qū)，從而使該免疫球蛋白可變區(qū)在正常人體中不引起免疫反應(yīng)。"實(shí)際上人源的，，抗體為包括足夠數(shù)目的人如本文中所用的，"Tie復(fù)合體，，指包括Tiel和Tie2(也可以包4舌血管生成素(Ang))的異源復(fù)合體或Tiel的同源復(fù)合體。異源Tie復(fù)合體部分地通過Tiel和Tie2的胞外域的聯(lián)合形成，并且也可以包括Ang。如本文中所用的，"復(fù)合體成員"指包括在異源Tie復(fù)合體中的蛋白質(zhì)。因此，Tiel和Tie2以及任選的Ang都為復(fù)合體成員。術(shù)語"Ang"包4舌所有的血管生成素，^口Angl、Ang2、Ang3和Ang4。除了Tiel、Tie2和Ang夕卜，異源Tie復(fù)合體還可以包括其它蛋白質(zhì)。"血管生成，，包括脈管發(fā)育(例如，血管或淋巴管發(fā)育)的所有階段，包括最初的脈管形成和后來的脈管重建和形態(tài)學(xué)改變。如本文中所用的，術(shù)語"激動(dòng)劑"和"拮抗劑"描述其與特定活性或作用有關(guān)的性質(zhì)。例如，E3或E3b抗體可以為與促進(jìn)Tiel自締合(如，均二聚化)有關(guān)的激動(dòng)劑，也可以為與減少或抑制Tie復(fù)合體形成和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的管形成有關(guān)的拮抗劑。同樣，作為與Tiel信號(hào)通路有關(guān)的激動(dòng)劑的物質(zhì)可以為與內(nèi)皮細(xì)胞出芽、分裂和管形成有關(guān)的拮抗劑。術(shù)語"Tiel胞外域"指Tiel蛋白質(zhì)的胞外區(qū)，例如，大致包括圖1(SEQIDNO:l)的氨基酸25-759的區(qū)域。其它示例性區(qū)域?yàn)榘ㄒ粋€(gè)或多個(gè)EGF-樣結(jié)構(gòu)域的區(qū)域(例如，圖1的214-256、258-303、303-345、214-303、258-345或214-345);—個(gè)或多個(gè)Ig-樣C2-型結(jié)構(gòu)域(例如，43-105、43-426、372-426);一個(gè)或多個(gè)纖連蛋白III型重復(fù)序列(例如，圖1的446-540、543-639、643-744、446-639、543-744或446-744);和其組合。術(shù)語"第一Ig漏樣C2-型結(jié)構(gòu)域"和"Igl"指Tiel或Tie2中相對(duì)于其它Ig-樣C2-型結(jié)構(gòu)域(第二個(gè)這樣的結(jié)構(gòu)域)位置最靠近蛋白質(zhì)氨基端的免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域。例如，對(duì)于Tiel,第一免疫球蛋白樣C2-型結(jié)構(gòu)域位于約殘基43至約殘基105處，而第二Ig-樣C2-型結(jié)構(gòu)域位于約殘基372至約殘基426處。如本文中所用的，"結(jié)合親和力"指表觀締合常數(shù)或Ka。Ka為解離常數(shù)(Kd)的倒數(shù)。例如，配體對(duì)于特定靶分子可以具有至少105、106、107或108M—'的結(jié)合親和力。相對(duì)于第二靶點(diǎn)，配體與第一靶點(diǎn)結(jié)合的更高親和力可以由比結(jié)合第二靶點(diǎn)的Ka(或數(shù)值Kd)更高的結(jié)合第一靶點(diǎn)的Ka(或更小的數(shù)值Kd)表示。在這種情況下，配體相對(duì)于第二耙點(diǎn)具有對(duì)第一靶點(diǎn)的特異性。結(jié)合親和力(例如，對(duì)于特異性或其它比較)的差別可以至少為1.5、2、5、10、50、100或1000倍。例如，Tiel胞外域-結(jié)合劑可以比另一抗原(如，Tie2、EGF、纖連蛋白或人血清白蛋白)至少優(yōu)先1.5、2、5、10、50、100或1000倍地與Tiel結(jié)合。結(jié)合親和力可以通過包括平衡透析法、平tf結(jié)合法、凝膠過濾法、ELISA、表面等離子共振技術(shù)或光i普法(例如，采用熒光分析)的多種方法測(cè)定。這些技術(shù)可用于測(cè)量隨配體(或靶點(diǎn))濃度的函數(shù)變化的結(jié)合和游離配體的濃度。通過以下等式，結(jié)合配體([結(jié)合])的濃度與游離配體([游離])的濃度和在靶分子上的配體結(jié)合位點(diǎn)的濃度相關(guān)，其中(N)為每個(gè)靶分子的結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)目25[結(jié)合]=N[游離]/((l/Ka)+[游離])盡管Ka的定量測(cè)定是常規(guī)的，但并不總是必需進(jìn)行Ka的準(zhǔn)確測(cè)定，這是由于有時(shí)足以獲得親和力的定量測(cè)定，例如，使用如ELISA或FACS分析的方法測(cè)得，其與IQ成比例，而因此可用于比較，如確定是否更高的親和力高于參照物的如2、5、10、20或50倍。結(jié)合親和力通常在0.01MHEPES(pH7.4)、0.15MNaCl、3mMEDTA和0.005%(v/v)的表面活性劑P20中評(píng)價(jià)。"分離的組合物"指從天然樣品(由其可以獲得分離的組合物)的至少一個(gè)組分的至少90%去除的組合物。如果目標(biāo)物質(zhì)種類或物質(zhì)種類群是至少5、10、25、50、75、80、90、95、98或99%純的(按重量-重量計(jì))，則人工或天然產(chǎn)生的組合物可以為"具有至少一定程度的純度的組合物"。"表位"指被配體結(jié)合的靶化合物上的位點(diǎn)，所述配體如抗原結(jié)合蛋白質(zhì)(例如，F(xiàn)ab或抗體)。例如，在靶化合物為蛋白質(zhì)的情況下，表位可以指被配體結(jié)合的氨基酸。重疊表位包括至少一個(gè)共用氨基酸殘基。如本文中所用的，術(shù)語"基本相同"(或"基本同源")在本文中用于指含有足夠數(shù)目的與第二氨基酸或核苷酸序列相同或等效(例如，具有相似的側(cè)鏈，如保守的氨基酸替換)的氨基酸殘基或核苷酸第一氨基酸或核苷酸序列，從而第一和第二氨基酸或核苷酸序列具有相似的活性。在抗體的情況下，第二抗體具有相同的特異性和至少50°/。的相同的親和力。與本文公開的序列相似或同源(例如，至少大約85%的序列同一性)的序列也是本申請(qǐng)的部分。在一些實(shí)施方式中，序列同一性可以為大約85%、90%、91%、92°/。、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更高。或者，當(dāng)在選擇的雜交條件(例如，高度嚴(yán)格的雜交條件)下核酸片段與該鏈的互補(bǔ)鏈雜交時(shí)存在實(shí)質(zhì)的同一性。核酸可以存在于整體細(xì)胞中、細(xì)胞裂解產(chǎn)物中、或者以部分純化或基本純化的形式存在。兩個(gè)序列之間的"同源性"或"序列同一性"(這兩個(gè)術(shù)語在本文中互換使用)的計(jì)算如下進(jìn)行。將序列進(jìn)行比對(duì)而達(dá)到最佳比較目的(例如，可以將間隔引入到第一和第二氨基酸或核酸序列的一個(gè)或兩個(gè)中以達(dá)到最佳比對(duì)，并且為了比較目的可以忽略非同源序列)。在優(yōu)選實(shí)施方式中，用于比較目的而進(jìn)行比對(duì)的參照序列的長(zhǎng)度為參照序列長(zhǎng)度的至少30%,優(yōu)選至少40%,更優(yōu)選至少50%,甚至更優(yōu)選至少60%，并且還甚至更優(yōu)選至少70%、80%、90%、100%。然后比較相應(yīng)的氨基酸位置或核苷酸位置處的氨基酸或核苷酸。當(dāng)?shù)谝恍蛄兄械奈恢帽慌c第二序列中相應(yīng)位置的相同的氨基酸殘基或核普酸占據(jù)時(shí)，則分子在該位置是相同的(如本文中所用的，氨基酸或核酸"同一性"等同于氨基酸或核酸"同源性")。兩個(gè)序列之間的同一性百分比為這兩個(gè)序列共有的相同位置數(shù)目的函數(shù)(同時(shí)考慮間隔的數(shù)目和各間隔的長(zhǎng)度，所述間隔需要被引入以達(dá)到兩個(gè)序列的最佳比對(duì))。序列的比較和兩個(gè)序列間同一性百分比的確定可以采用數(shù)學(xué)算法來完成。在優(yōu)選實(shí)施方式中，兩個(gè)氨基酸序列之間的同一性百分比采用Needl函n和Wunsch((1970)J.Mol.Biol.48:444-453)算法確定，該算法已被加入到GCG軟件包的GAP程序中，其使用Blossum62矩陣或PAM250矩陣，16、14、12、10、8、6或4的間隔權(quán)重(gapweight)和l、2、3、4、5或6的長(zhǎng)度權(quán)重(lengthweight)。在又另一優(yōu)選實(shí)施方式中。兩個(gè)核普酸序列之間的同一性百分比采用GCG軟件包中的GAP程序確定，其采用NWSgapdna.CMP矩陣，及40、50、60、70或80的間隔權(quán)重和1、2、3、4、5或6的長(zhǎng)度權(quán)重。特別優(yōu)選的一組參數(shù)(如果專業(yè)人員不確定應(yīng)采用什么參數(shù)來確定是否分子在本文所述的序列同一性或同源性限度內(nèi)，他應(yīng)該使用這組參數(shù))是Blossum62評(píng)分矩陣，具有間隔罰分12、間隔延伸罰分(gapextendpenalty)4和移碼(frameshift)間隔罰分5。如本文中所用的，術(shù)語"同源的"與"相似性"同義，意思是目標(biāo)序列由于存在一個(gè)或多個(gè)氨基酸置換而與參照序列不同(盡管也可以27存在適度的氨基酸插入或缺失)。目前計(jì)算與參照序列的同源性或相似性水平的優(yōu)選手段是采用BLAST算法(可從美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院(NationalInstitutesofHealth)的美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(NationalCenterofBiotechnologyInformation,NCBI),BethesdaMD得到)，在各種情況中，使用算法默認(rèn)或推薦的參數(shù)確定計(jì)算的序列的關(guān)聯(lián)顯著性。兩個(gè)氨基酸或核苷酸序列之間的同一性百分比還可以采用E.Meyers和W.Miller((1989)CABIOS,4:11-17)的算法確定,該算法已被加入到ALIGN程序(版本2.0)中，其采用PAM120殘基重量表(weightresiduetable)、間隔長(zhǎng)度罰分12和間隔罰分4。術(shù)語"多肽"或"肽"(其可以互換使用)指由肽鍵連接的3個(gè)或更多個(gè)氨基酸的聚合體，例如，長(zhǎng)度在3至30之間、12至60之間、或30至300之間、或超過300個(gè)氨基酸。多肽可以包括一個(gè)或多個(gè)非天然氨基酸。通常，多肽只包括天然氨基酸。"蛋白質(zhì)"可以包括一個(gè)或多個(gè)多肽鏈。因此，術(shù)語"蛋白質(zhì)"包括多肽。蛋白質(zhì)或多肽也可以包括一個(gè)或多個(gè)修飾，例如，糖基化、酰胺化、磷酸化等等。術(shù)語"小肽"可用于描述長(zhǎng)度在3至30個(gè)氨基酸之間的多肽，例如，長(zhǎng)度在8至24個(gè)氨基酸之間。統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性可以通過現(xiàn)有4支術(shù)中已知的任何方法確定。示例性的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)包括StudentsT檢驗(yàn)、MannWhitneyU非參數(shù)檢驗(yàn)和Wilcoxo非參數(shù)統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)。一些統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性關(guān)系具有小于0.05或0.02的P值。特定的配體可能表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著(例如，P值0.05或0.02)的差異，例如，在特異性或結(jié)合方面。"血管生成依賴性癌癥和腫瘤"是其生長(zhǎng)(體積和/或質(zhì)量的擴(kuò)張)需要增加向它們供給血液的血管的數(shù)目和密度的癌癥和腫瘤。"退化(regression)"指腫瘤質(zhì)量和尺寸的減小，例如，減小至少2、5、10或25%。"胂瘤脈管系統(tǒng)對(duì)VEGF下降敏化"指特定的條件，在該條件下脈管暴露于以VEGF信號(hào)通路為靶點(diǎn)或負(fù)調(diào)節(jié)VEGF信號(hào)通路的物質(zhì)(如VEGF拮抗劑)時(shí)，表現(xiàn)出與脈管系統(tǒng)在不存在這種條件時(shí)暴露于所述物質(zhì)相比生長(zhǎng)和/或功能性和下降。如本文中所用的，術(shù)語肺瘤脈管系統(tǒng)的"變化"指腫瘤內(nèi)部或腫瘤周圍的血管發(fā)生的生理學(xué)和/或功能變化。該變化可以是，但不限于下述的一種或多種肺瘤血管生長(zhǎng)、血流量、血容量、血管通透性、腫瘤代謝、微血管密度(MVD)、周細(xì)胞覆蓋度或瘤內(nèi)壓力(即，間質(zhì)液壓或IFP)的增大或減小。腫瘤代謝、周細(xì)胞覆蓋度和血流量的下降表明血管功能的下降。血管通透性和IFP的增加表明血管功能的下降。以下是可用于評(píng)價(jià)腫瘤脈管系統(tǒng)變化的已知技術(shù)的實(shí)例。用造影劑進(jìn)行的計(jì)算機(jī)X線斷層攝影術(shù)(CT)可以測(cè)量血流量、血容量和血管通透性。超聲(如多普勒超聲)也可以評(píng)價(jià)血流量和血容量。用造影劑進(jìn)行的磁共振成像(MRI)可以測(cè)量血容量和血管通透性。此外，使用一些放射性示蹤劑(如H2015、"CO和"FDG)的正電子發(fā)射斷層掃描術(shù)(PET)可以測(cè)定血流量、血容量和肺瘤代謝。內(nèi)窺鏡才全查技術(shù)(如軟式乙狀結(jié)腸鏡檢查)可用于測(cè)量IFP。用各種抗體染色的腫瘤活組織一全查也可以評(píng)^介腫瘤脈管系統(tǒng)的變化。采用抗例如PECAM、CD34或血管假性血友病因子(vonWillebrandFactor)的抗體使血管可見，可以確定腫瘤區(qū)域中每平方樣i米的血管凄t目，即MVD。用抗PECAM和a-平滑肌肌動(dòng)蛋白或NG2的抗體雙重染色的腫瘤活組織檢查可以評(píng)價(jià)血管的周細(xì)胞覆蓋度。本文描述的方法可以包括在施用第一藥劑之后監(jiān)控腫瘤脈管系統(tǒng)，并在顯示胂瘤脈管系統(tǒng)發(fā)生變化時(shí)開始施用第二藥劑。例如，在一些方面中，可以在開始施用Tiel胞外域-結(jié)合劑(例如，DX-2240或DX-2220)之后監(jiān)控對(duì)象中的肺瘤脈管系統(tǒng)。在出現(xiàn)腫瘤脈管系統(tǒng)變化的跡象時(shí)，可以開始施用VEGF拮抗劑(例如，貝伐單抗)。Tiel胞外域-結(jié)合劑可用于本發(fā)明的Tiel胞外域-結(jié)合劑與Tiel的表位(例如，人Tiel胞外域)結(jié)合。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑增加Tie復(fù)合體的形成。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑增加Tiel的酪氨酸磷酸化。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑誘導(dǎo)細(xì)胞表面的Tiel下調(diào)。示例性的Tiel胞外域-結(jié)合劑已被預(yù)先公開(參見，例如，美國(guó)專利第5,955,291號(hào)和美國(guó)專利公開第2005/0136053、2006/0024297和2006/0057138號(hào)，特別是美國(guó)專利公開2006/0057138號(hào)的圖7-39和實(shí)施例28-30)，并且包括E3、E3b、M0044-A06、M0044-A11、M0044-B05、M0044畫B08、M0044-B04M0044--B12M0044.-F06M0044.-H03M0045.-A04M0045--C11M0045--G10M0046--H03M0047--D03M0053--A05M0053--D06M0053--F04M0053--G05M0054--C07M0055.-A09M0055--D03M0055.-E10M0055--H04M0056--C03M0056--F10M0056--G12M0058--A09M0058-陽HOlM0044-C07、M0044畫F09、M0044-簡(jiǎn)、M0045-B01、M0045-C12、M0046-A11、M0046-H10、M0047-E10、M0053-A09、M0053-D12、M0053-F05、M0054-A08、M0054-E04、M0055-B11、M0055-D06、M0055-E12、M0056-A01、M0056-C04、M0056-Fll、M0056-H04、M0058-D04、M0059-A02、M0044-D01、M0044-G06、M0044-脂、M0045-B03、M0045-D01、M0046-B06、M0046-H11、M0047-G09、M0053-B09、M0053-E03、M0053-F06、M0054-B06、M0054-G01、M0055-B12、M0055-D12、M0055-F10、M0056-A06、M0056-E08、M0056-G03、M0056-H12、M0058-E09、M0059-A06、M0044-B09、M0044-E03、M0044-G07、M0044-腳、M0045-B11、M0045-D07、M0046-B10、M0047-B03、M0053-A02、M0053-Bll、M0053-E04、M0053-F08、M0054-B08、M0054-G05、M0055-C05、M0055-E04、M0055-G02、M0056-B08、M0056-F01、M0056-G04、M0057-B05、M0058-F03、M0060-B02、M0044-BIO、M0044-F03、M0044-G11、M0045-A02、M0045-C02、M0045-G01、M0046-G12、M0047-D01、M0053-A03、M0053-D03、M0053-E08、M0053-G04、M0054-C03、M0054-H10、M0055-C07、M0055-E06、M0055-G03、M0056-B09、M0056-F02、M0056-G08、M0057-H07、M0058-G03、M0060-麗、M0061-A03、M0061-C05、M0061-C06、M0061畫F07、M0061-G12、M0061-H09、M0062畫A12、M0062-B05、M0062-B07、M0062-C08、M0062-D04、M0062-E02、M0062-E03、M0062-E11、M0062-F10、M0062-G06和M0062-H01?？贵wE3及其變體(例如，DX-2220、DX-2240)和M0044-B08誘導(dǎo)Tie復(fù)合體的形成、Tiel酪氨酸磷酸化和細(xì)胞表面的Tiel下調(diào)。另外的或可替代的Tiel胞外域-結(jié)合蛋白質(zhì)可以采用本領(lǐng)域中已知的技術(shù)分離，包括由被免疫的動(dòng)物(如小鼠)分離的B細(xì)胞制備的雜交瘤產(chǎn)生或從展示文庫選擇的單克隆抗體。可用于識(shí)別Tiel胞外域-結(jié)合劑的展示文庫可以呈現(xiàn)肽(例如，結(jié)構(gòu)肽，如被二硫鍵限制的肽，參見，例如美國(guó)專利公開2006/0084113號(hào))或抗體(例如，F(xiàn)ab;參見，例如Hoet等人，2005,Nat.Biotech.23(3):344-48)。Tiel月包外域(或其部分，如EGF域、纖連蛋白重復(fù)序列或Ig-超家族域(例如，Ig樣C2型2域))可用于識(shí)別與Tiel胞外域結(jié)合的展示文庫成員。例如，Tiel胞外域可以被重組表達(dá)、連接到載體上，然后與展示文庫(例如，呈現(xiàn)抗體的噬菌體展示文庫)混合。與Tiel胞外域靶點(diǎn)結(jié)合的那些文庫成員隨后進(jìn)行分離并進(jìn)一步鑒定。這些技術(shù)在本領(lǐng)域是已知的并描述于美國(guó)專利申請(qǐng)第2006/0057138號(hào)中。另夕卜的/可替代的Tiel胞外域-結(jié)合劑的活性可以采用多種分析法測(cè)定，包括描述于美國(guó)專利7>開2006/0057138的實(shí)施例2中的Tiel/EpoR嵌合BaF3細(xì)胞分析。另外的分析法包括血管發(fā)生分析(tubulogenesisassay)(例如，JonesMK等人，1999,NatureMedicine5:1418-1423)、Tiel胞外域-結(jié)合劑誘導(dǎo)的Tiel酪氨酸磷酸化(例如，在約氨基酸1117處的基序YVN中酪氨酸的石粦酸化)的測(cè)量、以及在體內(nèi)模型中(例如，腫瘤異種移植或原位胂瘤移植)。Tiel胞外域-結(jié)合抗體可以被修飾以使抗體的可變區(qū)與一個(gè)或多個(gè)胚系序列更相似。例如，抗體可以包括l個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸替換(如，在框架區(qū)或CDR區(qū))以使其與參照胚系序列更相似。Vkappa的示例性胚系參照序列包括:012/02、018/08、A20、A30、L14、Ll、U5、L4/18a、L5/U9、L8、L23、L9、L24、Lll、U2、011/01,A17、Al、A18、A2、A19/A3、A23、A27、All、L2/L16、L6、L20、L25、B3、B2、A26/A10禾口A14。參見，侈'J^口，Tomlinson等人，(1995)EMBOJ.14(18):4628-38。HC可變域的胚系參照序列可以基于具有特定正則結(jié)構(gòu)(如，在Hl和H2高變環(huán)中的1-3結(jié)構(gòu))的序列。如在Chothia等人，(1992)J.Mol.Biol.227:799-817;Tomlinson等人，(1992)J.Mol.Biol.227:776-798)和Tomlinson等人，(1995)EMBOJ.14(18):4628-38中所述的，免疫J求蛋白可變域中高變環(huán)的正則結(jié)構(gòu)可以由其序列推斷出來。具有1-3結(jié)構(gòu)的示例性序列包括DP-1、DP-8、DP-12、DP-2、DP-25、DP-15、DP-7、DP-4、DP-31、DP-32、DP-33、DP畫35、DP-40、7-2、hv3005、hv3005f3、DP-46、DP-47、DP-58、DP-49、DP-50、DP-51、DP-53和DP-54。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑為適體。如本文中所用的，術(shù)語核酸"適體"指一種核酸分子，其具有包括至少5個(gè)核苷酸的內(nèi)部非雙鏈核酸結(jié)構(gòu)的構(gòu)象。適體可以是具有自互補(bǔ)區(qū)的單鏈核酸分子。由于選擇的適體可以通過標(biāo)準(zhǔn)核酸擴(kuò)增程序回收，所以適體可以在體外進(jìn)行篩選。該方法可以被通過將選擇的適體裂解成池(pool)并用可4全測(cè)的標(biāo)記物(如焚光團(tuán)M多飾池中的各適體在，例如后面選4奪輪中得到增強(qiáng)。具有功能上改變標(biāo)記物性質(zhì)的適體的池可以被識(shí)別。這些池可以被反復(fù)裂解和重復(fù)分析以識(shí)別具有所需性質(zhì)的個(gè)別適體(參見，例如，Jhaveri等人，NatureBiotechnol.18:1293)。此外，可以在體內(nèi)篩選適體的活性。例如，改組核酸(shufflednucleicacid)可以被克隆到引入到細(xì)胞的表達(dá)載體中?？梢詫?duì)由表達(dá)的改組核酸得到的RNA適體的生物活性進(jìn)行篩選。具有該活性的細(xì)胞可以一皮分離并且回收所篩選的RNA適體的表達(dá)載體。治療性寡聚物(例如，適體)的一個(gè)重要特征是被施用的寡聚物的骨架設(shè)計(jì)。在一些實(shí)施方式中，所述骨架含有在體內(nèi)穩(wěn)定的核苷酸間鍵，且其結(jié)構(gòu)使得寡聚物對(duì)內(nèi)源性核酸酶(如攻擊磷酸二酯鍵的核酸酶)具有抗性。同時(shí)，寡聚物保持與靶DNA或RNA雜交的能力(Agarwal,K.L.等人，(1979)NucleicAcidsRes.6:3009;Agarwal,S.等人，(1988)Proc,Natl.Acad.SciUSA85:7079)。修飾的寡核苦酸可以使用替代的核苷酸間鍵構(gòu)建。這些示例性連接鍵中的幾種描述于Uhlmann，E.和Peyman，A.(1990)ChemicalReviews90:543-584中。其中有曱基膦酸酯類(其中與磷連接的氧中的一個(gè)被甲基替代)、硫逐磷酸酯類(其中硫替代這些氧中的一個(gè))和各種酰胺化物(其中NH2或如代氧)。這些替代賦予增強(qiáng)的穩(wěn)定性。WO91/15500教導(dǎo)了各種寡核苦酸類似物，其中一個(gè)或多個(gè)核苷酸間鍵被基于硫的鍵替代，通常是與磷酸二酯電子等排的和等電位的氨基磺酸二酯(sulfamatediester)。WO89/12060類似地公開了含有硫化物、亞砜和砜的鍵。WO86/05518提出了有規(guī)立構(gòu)的聚合3',5'鍵的變體。美國(guó)專利第5,079,151號(hào)公開了通過2',5'磷酸二酯鍵與單鏈DNA連接的分支RNA的msDNA分子。美國(guó)專利第5,264,562號(hào)描述了式--Y'CX'2Y，—的修飾鍵，其中Y'獨(dú)立地為O或S，并且其中各X'為穩(wěn)定的取代基并被獨(dú)立地選擇。嗎啉型核苷酸間鍵描述于美國(guó)專利第5,034,506號(hào)中，并且在一些情況中其使寡聚物對(duì)互補(bǔ)靶序列的增強(qiáng)的親和力得以增加。美國(guó)專利第5,264,562和5,596,086號(hào)公開了具有能夠與靶RNA和DNA強(qiáng)雜交的修飾核苷酸鍵的修飾寡核苷酸。VEGF拮抗劑用于本發(fā)明的VEGF拮抗劑為VEGF途徑拮抗劑。VEGF途徑拮抗劑包括VEGF抑制劑(例如，VEGF-A、-B或-C,如貝伐單抗)、VEGF表達(dá)調(diào)節(jié)劑(例如，INGN-241、口服四碌u鉬酸鹽、2-甲氧雌二醇、2-曱氧雌二醇納米晶體分散體、貝伐西尼鈉(bevasiranibsodium)、PTC-299,Veglin)、VEGF受體抑制劑(例如，如抗-KDR抗體的KDR或VEGF受體III(Flt4),如CDP-791、IMC-1121B的VEGFR2抗體，如CT-322的VEGFR2阻滯劑)、如hF4-3C5的VEGFR3抗體、VEGFR表達(dá)調(diào)節(jié)劑(例如，VEGFRl表達(dá)調(diào)節(jié)劑Siraa-027)或VEGF受體下33游信號(hào)抑制劑。示例性VEGF抑制劑包括貝伐單抗、哌加他尼、蘭尼單抗、新伐司他、AE-941、VEGFTrap和PI-88。示例性VEGF受體拮抗劑包括VEGF受體酪氨酸激酶活性的抑制劑。4-[4-(l-氨基-l-曱基乙基)苯基]-2-[4-(2-嗎啉-4-基-乙基)苯基氨基]嘧啶-5-腈(JNJ-17029259)是一種5-氰基嘧啶結(jié)構(gòu)類化合物，5-氰基嘧啶類為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-2(VEGFR-2)的口服給藥的、選擇性的、納摩爾的抑制劑。另外的實(shí)例包括PTK-787/ZK222584(阿斯利康)、SU5416、SU11248(輝瑞)和ZD6474([N-(4-溴-2-氟苯基)-6-甲氧基—7—[(1_曱基哌啶_4-基)曱氧基]喹唑啉-4—胺])、凡德他尼、塞地蘭尼、AG畫013958、CP-547632、E-7080、XL-184、L-21649和ZK-304709。其它VEGF拮抗劑為廣i普特異性酪氨酸激酶抑制劑，例如，SU6668(參見,例如，Bergers,B.等人,2003J.Clin.Invest.I11:1287-95)、索拉非尼、舒尼替尼、帕唑帕尼、瓦他拉尼、AEE-788、AMG-706、阿西替尼、BIBF-1120、SU-14813、XL-647、XL-999、ABT-869、BAY-57-9352、BAY-73-4506、BMS-582664、CEP-7055、CHIR-265、OSI-930和TKI-258。還可以使用下調(diào)細(xì)胞表面的VEGF受體的物質(zhì)(如芬維A胺)和抑制VEGF受體下游信號(hào)的物質(zhì)(如角鯊胺)。蛋白質(zhì)制備標(biāo)準(zhǔn)重組核酸方法可用于表達(dá)Tiel胞外域-結(jié)合蛋白質(zhì)和作為蛋白質(zhì)的VEGF拮抗劑。參見，例如，描述于Sambrook&Russell，分子克隆實(shí)驗(yàn)手冊(cè)(MolecularCloning:ALaboratoryManual),第三版,冷泉港實(shí)驗(yàn)室(ColdSpringHarborLaboratory),N.Y.(2001)和Ausubel等人,CurrentProtocolsinMolecularBiology(GreenePublishingAssociatesandWileyInterscience),N.Y.(1989)中的技術(shù)。通常，將編碼該結(jié)合蛋白質(zhì)的核酸序列克隆到核酸表達(dá)載體中。如果蛋白質(zhì)包括多條多肽鏈，則可將各條鏈克隆到表達(dá)載體中，例如，相同或不同的載體中，所述載體被表達(dá)于相同或不同的細(xì)胞中。下面還給出了制備抗體的方法。一些抗體(例如，F(xiàn)ab)可以在細(xì)菌細(xì)胞(例如，大腸桿菌細(xì)胞)中產(chǎn)生。例如，如果Fab由在展示體(displayentity)和噬菌體蛋白質(zhì)(或其片段)之間包括可抑制終止密碼子的噬菌體展示載體中的序列編碼，則載體核酸可以被混入(shuffle)不能抑制終止密碼子的細(xì)菌細(xì)胞中。在這種情況中，F(xiàn)ab不與基因III蛋白質(zhì)融合，且被分泌到介質(zhì)中?？贵w也可以在真核細(xì)胞中產(chǎn)生。在一個(gè)實(shí)施方式中，抗體(例如，scFv's)表達(dá)于如畢赤酵母(乃'c/H'a)(參見，例如，Powers等人,(2001)JImmunolMethods.251:123-35)、漢遜酵母(i/a"^w/a)或酵母菌屬(5Vzcc/^ram;;ce5))的酵母纟田月包中。在一個(gè)實(shí)施方式中，抗體在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中產(chǎn)生。優(yōu)選的用于表達(dá)克隆抗體或其抗原結(jié)合片段的哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞包括中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO細(xì)胞)(包括描述于Urlaub和Chasin,(1980)Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:4216-4220中的dhfr-CHO細(xì)胞，其與如描述于Kaufman和Sharp,(1982)Mol.Biol.159:601-621中的DHFR可選標(biāo)志物一起使用)；淋巴細(xì)胞系，例如，NSO骨髓瘤細(xì)胞、SP2纟田月包、COS纟田胞、HEK293T細(xì)胞；以及來自于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物(例如，轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物)的細(xì)胞。例如，所述細(xì)胞為乳腺上皮細(xì)胞。除了編碼免疫球蛋白域的核酸序列之外，重組表達(dá)載體可以攜帶另外的序列，如調(diào)節(jié)載體在宿主細(xì)胞中的復(fù)制的序列(例如，復(fù)制的起始區(qū))和可選標(biāo)志基因?？蛇x標(biāo)志基因有助于選擇載體已被引入到其中的宿主細(xì)胞(參見，例如，美國(guó)專利第4,399,216、4,634,665和5,179,017號(hào))。例如，通常，可選標(biāo)志基因賦予載體已被引入到其中的宿主細(xì)胞對(duì)藥物(如G418、潮霉素或氨甲蝶呤)的抗性。優(yōu)選的可選標(biāo)志基因包括二氫葉酸還原酶(DHFR)基因(用于具有氨曱蝶呤選擇/擴(kuò)增的dhfr-宿主細(xì)胞中)和weo基因(用于G418選擇)。另外的示例性表達(dá)系統(tǒng)是從LonzaGroupLtd.CH得到的谷氨酰胺合成酶(GS)載體系統(tǒng)(參見，例如，Clark等人，(2004)BioProcessInternational2(4):48-52;Barnes等人，(2002)BiotechBioeng.81(6):631-639)。在抗體或其抗原結(jié)合部分的重組表達(dá)的示例性系統(tǒng)中，通過磷酸4丐介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將編碼抗體重鏈和抗體輕鏈兩者的重組表達(dá)載體引入到dhfr-CHO細(xì)胞中。在該重組表達(dá)載體內(nèi)，抗體重鏈和輕鏈各自與增強(qiáng)子/啟動(dòng)子調(diào)控元件(例如，由SV40、CMV、腺病毒等得到的，如CMV增強(qiáng)子/AdMLP啟動(dòng)子調(diào)控元件或SV40增強(qiáng)子/AdMLP啟動(dòng)子調(diào)控元件)可操作地連接以驅(qū)動(dòng)高水平的基因轉(zhuǎn)錄。重組表達(dá)載體還攜帶DHFR基因，其允許使用氨曱蝶呤選對(duì)/擴(kuò)增來篩選已用載體轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞。對(duì)選擇的轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)以允許抗體重鏈和輕鏈進(jìn)行表達(dá)并從培養(yǎng)基中回收完整抗體。標(biāo)準(zhǔn)分子生物學(xué)技術(shù)被用于制備重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞、選擇轉(zhuǎn)化體、培養(yǎng)宿主細(xì)胞和從培養(yǎng)基中回收抗體。例如，一些抗體可以通過親和色譜法用A蛋白或G蛋白進(jìn)行分離。密碼子使用可以適合于宿主細(xì)胞的密碼子偏性(codonbias),例如，對(duì)于CHO細(xì)月包，其可以適應(yīng)于密碼子偏性中國(guó)地鼠(Cn'ce^/w^gn'"M)基因。此外，在可能的情況下可以避免非常高(>80%)或非常低(<30%)GC含量的區(qū)域。在優(yōu)化過程中，避免以下順式作用序列基序內(nèi)部TATA-盒；chi-位點(diǎn)和核糖體進(jìn)入位點(diǎn)；富含AT或富含GC的序列延伸段(sequencestretch);ARE、INS、CRS序列元件；重復(fù)序列和RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)；及(隱含)剪接供體和受體位點(diǎn)、分支點(diǎn)?？砂凑誗harp,P.M.和Li,W.H.，NucleicAcidsRes.15(3)，1987進(jìn)行評(píng)價(jià)?？梢允褂脴?biāo)準(zhǔn)密碼子適應(yīng)指數(shù)(CAI)。稀有密碼子包括具有0-40之間的質(zhì)量級(jí)(qualityclass)的那些密碼子。密碼子改變(例如，密碼子優(yōu)化)的序列可用于制備抗體。示例性的方法包括提供包含編碼抗體的核酸的哺乳動(dòng)物細(xì)胞并在細(xì)胞中表達(dá)核酸，例如，保持細(xì)胞在蛋白質(zhì)被表達(dá)的條件下。編碼抗體的核酸可以在哺乳動(dòng)物表達(dá)載體(例如，引入到細(xì)胞的載體)中提供。所述細(xì)胞可以為非人類哺乳動(dòng)物細(xì)胞，例如，CHO細(xì)胞。對(duì)于包括Fc域的抗體，抗體制備系統(tǒng)優(yōu)選合成其中Fc域被糖基化的抗體。例如，IgG分子的Fc域在CH2域中的天冬酰胺297處被糖基化。該天冬酰胺是用雙觸(biantennary)型低聚糖修飾的位點(diǎn)。已證明該糖基化是Fey受體和補(bǔ)體Clq介導(dǎo)的效應(yīng)子作用所需要(Burton和Woof,(1992)Adv.Immunol.51:1-84;Jefferis等人，(1998)Immunol.Rev.163:59-76)。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，F(xiàn)c域在使對(duì)應(yīng)于天冬酰胺297的殘基適當(dāng)?shù)靥腔牟溉閯?dòng)物表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生。Fc結(jié)構(gòu)域還可以包括其它真核的翻譯后修飾?？贵w也可以由轉(zhuǎn)基因動(dòng)物產(chǎn)生。例如，U.S5,849,992描述了在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺中表達(dá)抗體的方法。構(gòu)建包括乳特異性啟動(dòng)子(milk-specificpromoter)、編碼目標(biāo)抗體的核酸和分泌的信號(hào)序列的轉(zhuǎn)基因。由這種轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物中的雌性動(dòng)物產(chǎn)生的乳汁包括分泌于其中的目標(biāo)抗體。該抗體可以從乳汁中被純化或者在一些應(yīng)用中直接使用。也可以通過免疫法(例如，使用動(dòng)物，如具有天然、人或部分人的免疫球蛋白基因座)產(chǎn)生與Tiel胞外域結(jié)合的抗體。這種抗體可以為任何同種異型抗體，例如，a,z同種異型、f同種異型或非A同種異型。非人類抗體也可以被修飾以包括對(duì)人免疫球蛋白序列的置換，例如，在特定位置處的共有的人氨基酸殘基，例如在以下的一個(gè)或多個(gè)(優(yōu)選至少5個(gè)、10個(gè)、12個(gè)或全部)位置處(在輕鏈可變域的FR中)4L、35L、36L、38L、43L、44L、58L、46L、62L、63L、64L、65L、66L、67L、68L、69L、70L、71L、73L、85L、87L、98L和/或(在重鏈可變域的FR中)2H、4H、24H、36H、37H、39H、43H、45H、49H、58H、60H、67H、68H、69H、70H、73H、74H、75H、78H、91H、92H、93H和/或103H(根據(jù)Kabat編號(hào))。參見，例如，U.S.6,407,213。藥物組合物為藥物組合物施用。一種物質(zhì)的"藥物組合物"是用藥學(xué)上可接受的載體配制的藥劑。藥物組合物包括標(biāo)記的結(jié)合蛋白(例如，用于體內(nèi)成像)以及治療組合物。如本文中所用的，"藥學(xué)上可接受的載體"包括生理學(xué)相容的任何的和所有的溶劑、分散介質(zhì)、包覆材料、抗細(xì)菌和抗真菌劑、等滲和吸收延遲劑等。優(yōu)選地，載體適合于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、非腸道、脊柱或表皮施用(例如通過注射或輸注)。根據(jù)給藥途徑的不同，可以將結(jié)合蛋白包被于材料中以保護(hù)化合物不受可能使化合物失活的酸和其它天然條件的作用。"藥學(xué)上可接受的鹽"指保留母體化合物的希望的生物學(xué)活性并且不產(chǎn)生任何不希望的毒物學(xué)效應(yīng)的鹽(參見，例如Berge，S.M.等人，(1977)J.Pharm.Sci.66:1-19)。這種鹽的實(shí)例包括酸加成鹽和堿加成鹽。酸加成鹽包括由無毒的無機(jī)酸(如鹽酸、硝酸、磷酸、硫酸、氫溴酸、氫碘酸、亞磷酸等)以及無毒的有機(jī)酸(如脂族單-和二羧酸、苯基取代的鏈烷酸、羥基鏈烷酸、芳族酸、脂族和芳族磺酸等)得到的那些鹽。堿加成鹽包括由堿土金屬(如鈉、鉀、鎂、4丐等)以及無毒的有機(jī)胺(如N,N'-二千基乙二胺、N-曱基葡萄糖胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、普魯卡因等)得到的那些鹽。藥物組合物可以為各種形式。這些包4舌，例如，液體、半固體和固體劑型，如液體溶液(例如，可注射的和可輸注的溶液)、分散體或混懸劑、片劑、丸劑、散劑、脂質(zhì)體和栓劑。優(yōu)選的形式取決于預(yù)期的給藥模式和治療應(yīng)用。對(duì)于為蛋白質(zhì)的Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑，典型的優(yōu)選制劑是可注射或可輸注的溶液形式，如與用于向人體施用抗體的那些制劑相似的組合物。對(duì)于這些蛋白質(zhì)性質(zhì)的物質(zhì)，優(yōu)選的施用模式通常是非腸道(例如，靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi))形式。在一些實(shí)施方式中，蛋白質(zhì)性質(zhì)的Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑通過，例如以小于30、20、10、5或1mg/min的速度的靜脈輸注施用以達(dá)到大約1至100mg/m2或7至25mg/m2的劑量，或通過注射施用。在其它實(shí)施方式中。蛋白質(zhì)性質(zhì)的Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑通過肌內(nèi)或皮下注射施用。如本文中所用的，短語"非腸道給藥"和"非腸道地施用"意思是除了腸內(nèi)和局部給藥以外的給藥模式，通常通過注射，并且非限制性38地包括靜脈內(nèi)、月幾內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、嚢內(nèi)、眶內(nèi)、心內(nèi)、真皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)氣管、皮下、表皮下、關(guān)節(jié)內(nèi)、嚢下、蛛網(wǎng)膜下、脊柱內(nèi)、硬膜外和胸骨內(nèi)注射和輸注。Tiel胞外域-結(jié)合劑和/或VEGF拮抗劑可配制成溶液劑、微乳液、分散體、脂質(zhì)體或其它適合于高藥物濃度的有序結(jié)構(gòu)。無菌注射溶液可以通過將所需量的藥物加入具有上面列舉的成分中的一種或多種成分的組合(根據(jù)需要的適當(dāng)溶劑中，隨后過濾滅菌來制備。通常，分散體通過將活性化合物加入到含有基本分散介質(zhì)和所需的其它成分(來自于上面列舉的那些成分)的無菌賦形劑中而制備。在用于制備無菌注射溶液的無菌粉末的情況中，優(yōu)選的制備方法是真空干燥和冷凍干燥，該方法由先前無菌過濾的溶液產(chǎn)生活性成分加上任何其它所需成分的4分末。溶液劑的適當(dāng)流動(dòng)性可以通過，例如4吏用如卵磷脂的涂層、在分散體的情況下通過保持需要的顆粒大小以及通過使用表面活性劑而得到保持?？勺⑸浣M合物的延長(zhǎng)吸收可通過在組合物中包括延遲吸收的物質(zhì)(例如，單石更脂酸鹽和明膠)而產(chǎn)生。給藥途徑和/或模式將根據(jù)所需結(jié)果發(fā)生改變。在某些實(shí)施方式中，活性化合物可以用使化合物避免快速釋放的載體制備，如控釋制齊'j(包括植入劑)和微嚢給藥系統(tǒng)?？梢允褂每缮锝到獾?、生物相容性聚合物，如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐類、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯類和聚乳酸。制備這種制劑的許多方法取得專利權(quán)或被普遍知道。參見，例如，纟爰釋和控釋纟合藥系統(tǒng)(SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystems),J.R.Robinson編輯，馬塞爾'德克爾^〉司(MarcelDekker,Inc.),紐約，1978。在某些實(shí)施方式中，結(jié)合蛋白可以口服施用，例如，與惰性稀釋劑或可吸收的食用載體一起。化合物(如果需要，和其它成分)也可以包封在硬或軟殼明膠膠嚢中、壓制成片劑或直接加入到對(duì)象的飲食中。對(duì)于口服治療給藥，化合物可以與賦形劑合并在一起，并以口服片劑、含片劑、錠劑(troche)、膠嚢劑、酏劑、混懸劑、糖漿劑、圓片劑(wafer)等的形式使用。為了通過除了非腸道給藥以外的其它方式來施用本文描述的化合物，用材料包覆該化合物或與材料一起共同施用該化合物以防止其失活可能是必要的。藥物組合物可以用本領(lǐng)域已知的醫(yī)療裝置施用。例如，在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，藥劑可以用無針皮下注射裝置施用，如在美國(guó)專利第5，399，163、5,383,851、5，312，335、5,064,413、4,941,880、4,790,824或4,596,556號(hào)中公開的裝置。植入劑和模塊的實(shí)例包括美國(guó)專利第4,487,603號(hào)，其公開了用于以可控速率給予藥物的可植入的微量輸液泵；美國(guó)專利第4,486,194號(hào)，其公開了用于通過皮膚給予藥物的治療裝置；美國(guó)專利第4,447,233號(hào)，其公開了以精確的輸注速率給予藥物的藥物輸液泵；美國(guó)專利第4,447,224號(hào)，其公開了用于連續(xù)給藥的變流可植入輸液器；美國(guó)專利第4,439,196號(hào)，其公開了具有多腔室的滲透性給藥系統(tǒng)；和美國(guó)專利第4,475,196號(hào)，其公開了滲透性給藥系統(tǒng)。當(dāng)然，許多其它的這類植入劑、給藥系統(tǒng)和模塊也是已知的。在某些實(shí)施方式中，本文中描述的結(jié)合蛋白可以進(jìn)行配制以確保在體內(nèi)的適當(dāng)分布。例如，血腦屏障(BBB)排除許多高度親水的化合物。為了確保治療蛋白穿過BBB(如果需要)，其可以被配制在如脂質(zhì)體中。對(duì)于制備脂質(zhì)體的方法，參見，例如美國(guó)專利第4,522，811、5,374,548和5,399,331號(hào)。脂質(zhì)體可以包括被選擇性地轉(zhuǎn)運(yùn)到特定的細(xì)胞或器官中的一個(gè)或多個(gè)部分，因此增強(qiáng)了靶向藥物輸送(參見，例如V.V.Ranade,(1989)J.Clin.Pharmacol.29:685)?？梢哉{(diào)整劑量方案以提供最佳的期望反應(yīng)(例如，治療反應(yīng))。例如，可以給予單次推注，可以隨著時(shí)間給予幾個(gè)分劑量，或者可以按照治療情況的緊急需要所示而按比例地減少或增加劑量。為使給藥容易和劑量均勻，配制單位劑量形式的非腸道組合物是特別有利的。如本文中所用的，單位劑量形式指適合作為用于被治療對(duì)象的單次劑量的物理分離的單位；各個(gè)單位含有與需要的藥物載體結(jié)合的預(yù)計(jì)產(chǎn)生期望療效的預(yù)定量活性化合物。單位劑量形式的規(guī)格可以由(a)活性化合物的獨(dú)特的性質(zhì)和要達(dá)到的特定的療效和(b)在配制這種活性化合物用于個(gè)體的靈敏治療的技術(shù)中的固有限制支配并直接取決這些因素。藥物組合物可以使用治療有效量或預(yù)防有效量的本文描述的革巴結(jié)合蛋白制備。組合物的治療有效量可以根據(jù)一些因素進(jìn)行變化，如個(gè)體的疾病狀態(tài)、年齡、性別和體重，以及結(jié)合蛋白在個(gè)體中引起所需反應(yīng)的能力。治療有效量也是治療的有益效果超過組合物的任何毒性或有害效果的量。治療有效量?jī)?yōu)選抑制可測(cè)量的參數(shù)，例如，相對(duì)于未治療的對(duì)象抑制至少約20%、更優(yōu)選至少約40%、甚至更優(yōu)選至少約60%和還更優(yōu)選至少約80%的炎癥或胂瘤生長(zhǎng)率。化合物抑制可測(cè)量的參數(shù)(例如，癌癥)的能力可以在能預(yù)言人類腫瘤中的有效性的動(dòng)物模型系統(tǒng)中進(jìn)行評(píng)價(jià)?；蛘撸M合物的這一性質(zhì)可以通過按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的分析方法檢查化合物抑制，如體外抑制，的能力進(jìn)行評(píng)價(jià)。包括(a)Tiel胞外域-結(jié)合劑，(b)VEGF拮抗劑和(c)根據(jù)本文公開的方法的使用說明書的試劑盒也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。治療應(yīng)用的說明書包括在患有(a)癌癥或腫瘤性疾病，(b)炎性疾病(例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)或眼內(nèi)疾病的患者中使用的建議劑量和/或給藥模式。該試劑盒可進(jìn)一步包含在一個(gè)或多個(gè)分開的藥物制劑中的至少一種另外的試劑，如適當(dāng)配制的另外的治療劑(例如，細(xì)胞毒性化學(xué)治療劑)。穩(wěn)定化和保持在一些實(shí)施方式中，Tie1胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑與提高其在循環(huán)系統(tǒng)(例如，血液、血清、淋巴或其它組織)中的穩(wěn)定性和/或保持的成分物理結(jié)合。例如，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑可以與聚合物結(jié)合，例如，基本上非抗原性聚合物，如聚環(huán)氧烷烴(polyalkyleneoxide)或聚環(huán)氧乙烷(polyethyleneoxide)。適宜的聚合物重量會(huì)變化很大。示例性的聚合物包括具有約200至約35,000、約1,000至約15,000和約2,000至約12,500的數(shù)均分子量的聚合物，但是可以在更高的范圍內(nèi)變動(dòng)(例如，高至約500,000D)，并且在一些實(shí)施方式中為至少約20,000D，或至少約30，000D或至少約40,000D。所選擇的分子量可以取決于要得到的結(jié)合物的有效大小、聚合物的性質(zhì)(例如結(jié)構(gòu)，如線性或分支的)和衍生化的程度。可用于Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑修飾的聚合物包括水溶性聚合物，例如，親水性聚乙烯聚合物(如聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮)。這種聚合物的非限制性列表包括聚環(huán)氧烷烴均聚物(如聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇)、聚氧乙烯化多元醇、其共聚物和其嵌段共聚物，條件是保持嵌段共聚物的水溶性。其它可用的聚合物包括聚氧化烯炫類(polyoxyalkylenes),如聚氧乙烯、聚氧丙烯、以及聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物(Pluronics);聚曱基丙烯酸酯類；卡波姆；包括如下糖單體的分支或無分支多糖D-甘露糖、D-和L-半乳糖、巖藻糖、果糖、D-木糖、L-阿拉伯糖、D-葡糖醛酸、唾液酸、D-半乳糖醛酸、D-甘露糖醛酸(如多聚甘露糖醛酸或海藻酸)、D-葡萄糖胺、D-半乳糖胺、D-葡萄糖以及包括同多糖和雜多糖(如乳糖、支鏈淀粉、淀粉、羥乙基淀粉、直鏈淀粉、硫酸葡聚糖、葡聚糖、糊精、糖原、或如透明質(zhì)酸的酸性粘多糖類的多糖亞單位)的神經(jīng)氨酸；糖醇的聚合物，如聚山梨糖醇和聚甘露糖醇；肝素或乙酰肝素。其它化合物也可以連接到相同的聚合物上，例如，細(xì)胞毒素、標(biāo)記物、或者另一靶向劑(如，另一耙結(jié)合劑)或不相關(guān)的物質(zhì)。單活化的、烷氧基末端的聚環(huán)氧烷烴(PAO),如單曱氧基末端的聚乙二醇(mPEG's);(^.4烷基末端的聚合物；和雙活化的聚環(huán)氧乙烷(二醇類)可用于交聯(lián)。參見，例如，U.S.5,951,974。以其最常見的形式，聚乙二醇(PEG)是具有羥基末端的并具有以下通式的直鏈或支鏈聚醚HO-(CH2CH20)n-CH2CH2-OHPEG可以通過由氫氧離子對(duì)環(huán)氧環(huán)的親核攻擊引發(fā)的環(huán)氧乙烷陰離子開環(huán)聚合而合成。特別用于多肽修飾是具有以下通式的單曱氧基PEG(mPEG):CH30-(CH2CH20)n-CH2CH2-OH對(duì)于進(jìn)一步描述，參見例如Roberts等人，(2002)AdvancedDrugDeliveryReviews，54:459-476。共價(jià)交聯(lián)可用于將靶結(jié)合劑(例如，蛋白質(zhì))連接到聚合物上，例如，與賴氨酸殘基上發(fā)現(xiàn)的N-末端氨基和s氨基、以及其它氨基、亞胺基、羧基、巰基、羥基或其它親水基團(tuán)交聯(lián)。聚合物可以與靶結(jié)合蛋白質(zhì)直接共價(jià)連接而不使用多功能(一般地雙功能)交聯(lián)劑。與氨基的共價(jià)結(jié)合通過基于氰尿酰氯、羰基二咪唑、醛反應(yīng)基團(tuán)(PEG醇鹽加溴代乙醛的縮二乙醇、PEG加DMSO和乙酸酐、或PEG氯化物加4_羥基苯醛的酚鹽、活化琥珀酰亞胺酯、活化二;5克代碳酸PEG、2,4，5-三氯苯基氯曱酸酯或?qū)ο趸铰葧跛狨セ罨疨EG)的已知化學(xué)反應(yīng)完成。羧基可以通過使用碳二亞胺偶聯(lián)PEG-胺而衍生。巰基可以通過與馬來酰亞胺基取代的PEG(如烷氧基-PEG胺加磺基琥珀酰亞氨基4-(N-馬來酰亞胺基曱基)環(huán)己烷-l-羧酸酯(WO97/108斗7)或由ShearwaterPolymers,Inc.(亨維爾，亞拉巴馬州)購(gòu)得的PEG-馬來酰亞胺偶聯(lián))而衍生。或者，結(jié)合蛋白質(zhì)上的游離氨基(如賴氨酸殘基上的e氨基)可以用2-亞氨基-四氫噻吩(thiolane)(Traut's試劑)硫醇化，然后與含有馬來酰亞胺的PEG衍生物偶聯(lián)，例如，如Pedley等人，Br.J.Cancer,70:1126-1130(1994)中所述?？蛇B接Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑的功能化PEG聚合物可從例如ShearwaterPolymers,Inc.(亨維爾，亞拉巴馬州)得到。這種市售可得的PEG衍生物包括，例如氨基-PEG、PEG氨基酸酯、PEG-酰肼、PEG-硫醇、PEG-琥珀酸酯、羧甲基化PEG、PEG-丙酸、PEG氨基酸、PEG琥珀酰亞胺基琥珀酸酯、PEG琥珀酰亞胺基丙酸酯、羧曱基化PEG琥珀酰亞胺酯、PEG的琥珀酰亞胺基碳酸酯、氨基酸PEG的琥珀酰亞胺酯、PEG-氧4戈羰基咪唑(PEG-oxycarbonylimidazole)、PEG-硝基苯基碳酸酯、PEG三氟乙基磺酸酯(PEGtresylate)、PEG-縮水甘油醚、PEG-醛、PEG乙烯砜、PEG-馬來酰亞胺、PEG-二硫化正吡啶、異功能PEG、PEG乙烯基衍生物、PEG硅烷和PEGphospholide。用于偶聯(lián)這些PEG衍生物的反應(yīng)條件可以根據(jù)所涉及的Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑、希望的PEG化程度和所使用的PEG衍生物而變化。涉及PEG衍生物選擇的一些因素包括希望的連接點(diǎn)(如賴氨酸或半胱氨酸R-基團(tuán))；衍生物的水解穩(wěn)定性和反應(yīng)性；鍵的穩(wěn)定性、毒性和抗原性；對(duì)于分析的適Tie1胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑與聚合物的結(jié)合物可以通過例如凝膠過濾或離子交換色譜(例如，HPLC)與未反應(yīng)的原料分離。結(jié)合物的異質(zhì)種類以相同的方式彼此純化。不同種類(例如，含有一個(gè)或兩個(gè)PEG殘基)的分離也是可能的，例如，由于非反應(yīng)氨基酸的離子性質(zhì)的不同。參見，例如，WO96/34015。輩巴結(jié)合蛋白質(zhì)也可以與提供穩(wěn)定化或保持功能的蛋白質(zhì)，如白蛋白(例如，人血清白蛋白)物理結(jié)合。US2004/0171794描述了用于將蛋白質(zhì)與血清白蛋白物理結(jié)合的示例性方法。為了示例性目的，人白蛋白序列或其片段參見EP201239、EP322094、WO97/24445、W095/23857,特別是如US2004/0171794和WO01/79480中的SEQIDNO:18所示的人白蛋白成熟形式，或來自其它脊推動(dòng)物的白蛋白或其片段，或這些分子或其片段的類似物或變體。其它示例性人血清白蛋白蛋白質(zhì)可以包括以下點(diǎn)突變組中的一個(gè)或兩個(gè)Leu-407至Ala、Leu-408至Val、Val-409至Ala和Arg-410至Ala;或Arg-410至Ala、Lys-413至Gin和Lys-414至Gin(參見，例如，國(guó)際公開第W095/23857號(hào)，參考US2004/0171794中的SEQIDNO:18)。使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供通過在不同的時(shí)間開始Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑的施用改善血管生成相關(guān)疾病的至少一個(gè)病癥的方法。在一些方面中，施用Tiel胞外域-結(jié)合劑，然后施用VEGF拮抗劑。在第一次施用VEGF拮抗劑之前的一段時(shí)間施用Tiel胞外域-結(jié)合劑，該段時(shí)間可以在第一次施用VEGF拮抗劑之前的1天至最多35天(例如，5、7、10、14、20、21、28或30天)的范圍內(nèi)，或者可以在顯示腫瘤脈管系統(tǒng)或胂瘤生長(zhǎng)發(fā)生變化的跡象時(shí)施用Tiel胞外域-結(jié)合劑。該段時(shí)間可以基于例如對(duì)于給定的治療周期的第一次Tiel胞外域-結(jié)合劑施用來計(jì)算。在一些實(shí)施方式中，對(duì)象需要減少血管生成或經(jīng)確認(rèn)為如此。例如，對(duì)象患有腫瘤性疾病(如轉(zhuǎn)移癌)。例如，對(duì)象患有血管生成依賴性癌癥或肺瘤。所述肺瘤可以為實(shí)體瘤，例如，直徑為至少1、2、3、5、8或10mm的肺瘤。在一個(gè)實(shí)施方式中，實(shí)體瘤具有缺氧性核。所述方法可以包括在施用該拮抗劑之前評(píng)估對(duì)象并才全查對(duì)象中的實(shí)體瘤。在一些實(shí)施方式中，第一次施用VEGF拮抗劑后繼續(xù)施用Tiel胞外域-結(jié)合劑，而在其它實(shí)施方式中，開始施用VEGF拮抗劑時(shí)停止施用Tiel胞外域-結(jié)合劑。在一些實(shí)施方式中，以單獨(dú)有效地減少對(duì)象中的血管生成或以別的方式治療對(duì)象中的疾病(例如，改善疾病的癥狀)的量施用Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑。在其它實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以比單獨(dú)有效減少對(duì)象中的血管生成或者以別的方式治療或預(yù)防對(duì)象中的疾病的量小的量施用。在其它實(shí)施方式中，在一些實(shí)施方式中，VEGF拮抗劑以比單獨(dú)有效減少對(duì)象中的血管生成或者以別的方式治療或預(yù)防對(duì)象中的疾病的量小的量施用(例如，當(dāng)VEGF拮抗劑是貝伐單抗且疾病是非鱗狀細(xì)胞、非小細(xì)胞肺癌時(shí)，阿瓦斯汀(AVASTIN)的劑量小于15mg/kg)。在一些實(shí)施方式中，Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑以協(xié)同有效的量(例如，當(dāng)與單獨(dú)施用的任一化合物相比時(shí)產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)的量)施用。Tiel胞外域-結(jié)合劑(例如，本文中公開的Tiel胞外域-結(jié)合蛋白)可以增強(qiáng)以VEGF途徑作為耙點(diǎn)的物質(zhì)(例如，如貝伐單抗的VEGF-A-結(jié)合抗體)的活性。因此，在一個(gè)用于治療癌癥的聯(lián)合治療中，第二治療是抑制VEGF途徑信號(hào)傳導(dǎo)的物質(zhì)，如VEGF-A-結(jié)合抗體(例如，貝伐單抗)，其以比在沒有Tiel胞外域-結(jié)合蛋白的情況下施用VEGF-途徑抑制劑的劑量小的劑量施用。例如，當(dāng)Tiel胞外域-結(jié)合蛋白在與VEGF拮抗劑(例如，抗-VEGF-A抗體)的聯(lián)合治療中一起使用時(shí)，VEGF拮抗劑的劑量可以由沒有與Tiel胞外域-結(jié)合蛋白聯(lián)合施用時(shí)的VEGF拮抗劑劑量下降(例如，比沒有與Tiel胞外域-結(jié)合蛋白聯(lián)合施用時(shí)的VEGF拮抗劑劑量小至少10%、25%、40%或50%)。例如，當(dāng)在與Tiel胞外域-結(jié)合蛋白(但沒有其它化學(xué)治療劑)聯(lián)合治療中施用時(shí)，貝伐單抗(AVASTIN⑧)的劑量小于約15、13.5、11.25、9或7.5mg/kg。當(dāng)與化學(xué)治療劑(例如，推注-IFL(伊立替康125mg/m2IV、5-氟尿嘧啶500mg/m2IV和甲酰四氫葉酸20mg/m2IV,每隔6周的4周內(nèi)每周1次給藥)、FOLFOX4(第一天奧沙利鉑85mg/n^和曱酰四氫葉酸200mg/m2同時(shí)IV，然后在5-FU400mg/m2lV推注后600mg/m2持續(xù)IV;第二天曱酰四氫葉酸200mg/m2IV，然后在5-FU400mg/m2lV推注后600mg/m2持續(xù)IV;每2周重復(fù))、或5-FU)聯(lián)合施用時(shí)，貝伐單抗劑量減小至5或10mg/kg。因此，在聯(lián)合治療中，當(dāng)與本文中公開的Tiel胞外域-結(jié)合蛋白聯(lián)合施用時(shí)，貝伐單抗的劑量可以減小至低于約10、9、7.5、6或5mg/kg(在沒有Tiel胞外域-結(jié)合蛋白的情況下，貝伐單抗的劑量為10mg/kg時(shí))，或者低于約5、4.5、3.75、3或2.5mg/kg(在沒有Tiel胞外域-結(jié)合蛋白的情況下，貝伐單抗的劑量為5mg/kg時(shí))。血管生成相關(guān)疾病包括，但不限于胂瘤性疾病(如，實(shí)體瘤、腫瘤轉(zhuǎn)移和良性腫瘤，特別是需要血液供應(yīng)或血管生成的腫瘤性疾病)；炎性疾病(如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、狼瘡、再狹窄、牛皮癬、移植物抗宿主反應(yīng)或多發(fā)性硬化癥)；眼部血管生成疾病，例如，視網(wǎng)膜病(例如，如糖尿病性視網(wǎng)膜病的增殖性視網(wǎng)膜病、缺血性視網(wǎng)膜病或早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病)、脈絡(luò)膜新血管生成、水晶體新血管生成、角膜新血管生成、虹膜新血管生成、或結(jié)膜新血管生成、黃斑變性(如，濕性和/或干性年齡相關(guān)性黃斑變性)、角膜移植片排斥、新生血管性青光眼、晶狀體后纖維組織增生癥、虹膜紅變；遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥；心肌血管生成；斑塊內(nèi)新血管生成；毛細(xì)管擴(kuò)張；血友病關(guān)節(jié)；血管纖維瘤以及創(chuàng)面肉芽形成。良性胂瘤包括，但不限于，血管瘤、聽神經(jīng)瘤、神經(jīng)纖維瘤、沙眼以及膿性肉芽腫。實(shí)體瘤包括，但不限于，各個(gè)器官系統(tǒng)的惡性肺瘤，例如，肉瘤、腺瘤和癌瘤，如那些侵襲肺、乳腺、胃腸(如結(jié)腸)、和生殖泌尿道(如腎臟、膀胱上皮細(xì)胞)、咽的惡性肺瘤，以及腺癌，包括如大部分結(jié)腸癌、直腸癌、腎細(xì)胞癌、肝癌、非小細(xì)胞肺癌、小腸癌、食道癌和胰腺癌的惡性腫瘤。可被治療的實(shí)體瘤的其它實(shí)例還包括纖維肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤因肉瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、胃腸系統(tǒng)癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、生殖泌尿系統(tǒng)癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀上皮細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、嚢腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細(xì)胞癌、肝細(xì)胞癌、膽管癌、絨毛膜癌、精原細(xì)胞瘤、胚胎性癌、維爾姆斯瘤、子宮頸癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌、睪丸腫瘤、肺癌、小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、盧貞咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、成血管細(xì)胞瘤、聽神經(jīng)瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦膜瘤、黑素瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤以及視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤。當(dāng)血管生成相關(guān)疾病為腫瘤性疾病時(shí)，疾病癥狀的改善是如通過臨床測(cè)量方法(例如，MRI、CT、診斷性放射測(cè)量(如骨掃描)等)所確定的腫瘤性疾病的量(例如，腫瘤尺寸)的消除、減少、穩(wěn)定，或者腫瘤生長(zhǎng)速率或數(shù)目(例如，轉(zhuǎn)移)的下降?？杀挥绊懙钠渌鼌?shù)包括日常生活活動(dòng)，如疼痛(例如，患者使用直觀或數(shù)字量表報(bào)告疼痛)。在一些實(shí)施方式中，血管生成相關(guān)疾病為炎性疾病，例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、類風(fēng)濕性或風(fēng)濕性炎性疾病、或者其它慢性炎性疾病(如慢性哮喘、動(dòng)脈或移植后動(dòng)脈粥樣硬化、以及子宮內(nèi)望的血管生成的那些疾病，如眼部新血管生成，例如，一見網(wǎng)膜病(包括糖尿病性^L網(wǎng)膜病和年齡相關(guān)性黃斑變性)、成血管細(xì)胞瘤、血管瘤和動(dòng)"永》更化。牛皮癬是以脫屑和炎癥為特征的慢性皮膚病。當(dāng)牛皮癬發(fā)生時(shí)，常見皮膚片增厚、變紅并覆蓋有銀色鱗屑，稱為斑塊。牛皮癬最常出現(xiàn)在肘、膝、頭皮、下背部、面部、手掌和足底。該疾病還可以侵襲指曱、腳趾曱以及口和生殖器內(nèi)的軟組織。大約10%患有牛皮癬的人具有產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎癥狀的關(guān)節(jié)炎癥。可以釆用靜態(tài)醫(yī)師整體評(píng)價(jià)(staticPhysicianGlobalAssessment,sPGA)對(duì)患者進(jìn)行評(píng)估，并且在千凈和非常嚴(yán)重之間的6個(gè)分類范圍內(nèi)接受分類評(píng)分。評(píng)分是基于斑塊、脫屑和紅斑。本發(fā)明的治療方法可用于實(shí)現(xiàn)這些指標(biāo)中的至少一個(gè)的改善。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎("RA")是一種引起疼痛、肺脹、僵硬和功能缺失的慢性炎性疾病，主要是關(guān)節(jié)。RA經(jīng)常開始于滑膜，其為包圍關(guān)節(jié)產(chǎn)生保護(hù)嚢的膜。在許多患有RA的個(gè)體中，白細(xì)胞從循環(huán)系統(tǒng)滲入到滑膜中引起持續(xù)的異常炎癥(例如，滑膜炎)。結(jié)果，滑膜發(fā)生炎癥，引起發(fā)熱、發(fā)紅、腫脹和疼痛。軟骨中的膠原逐漸被破壞，使關(guān)節(jié)腔變窄并最終使骨頭損壞。該炎癥引起被侵襲區(qū)域的侵蝕性骨損傷。在該過程中，滑膜的細(xì)胞異常生長(zhǎng)并分裂，從而使正常的薄滑膜增厚并導(dǎo)致關(guān)節(jié)在觸碰時(shí)肺脹和肥大。RA可以通過各種臨床測(cè)量評(píng)價(jià)。一些示例性指標(biāo)包括總體Sharp評(píng)分(totalSharpscore,TSS)、Sharp侵蝕評(píng)分和HAQ功能障礙指數(shù)(HAQdisabilityindex)。本文的治療方法可用于實(shí)現(xiàn)這些指標(biāo)中的至少一種的改善。如本文中所用的，對(duì)治療疾病(例如，改善其至少一個(gè)癥狀)有效的Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑的量，或"治療有效量"指對(duì)對(duì)象進(jìn)行單或多劑量給藥時(shí)有效地延長(zhǎng)治療、減輕、緩解或改善患有本文所述疾病的患者的情況使其優(yōu)于在沒有這種治療的情況下所預(yù)期的情況的Tie1胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑的量。在一些情況中，治療有效量可以通過評(píng)估結(jié)合劑相對(duì)于未處理的對(duì)照小鼠減小棵鼠中異種移植物的腫瘤尺寸的能力而確定。如本文中所用的，"抑制腫瘤或其它贅生物的生長(zhǎng)"指減慢、中斷、阻滯或終止其生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，而不必須表明贅生物生長(zhǎng)的完全消除。本文中描述的抗體的治療有效量的示例性、非限制性范圍是0.1-20mg/kg,更優(yōu)選1-10mg/kg。耙結(jié)合抗體可以通過靜脈輸注以小于30、20、10、5或1mg/min的速度施用以達(dá)到大約1至100mg/m2或5至30mg/n^的劑量。對(duì)于分子量小于抗體的Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑，適宜的量可以按比例減小。應(yīng)注意劑量值可以隨待減輕的疾病的類型和嚴(yán)重程度而改變。另外還應(yīng)理解，對(duì)于任何特定的對(duì)象，應(yīng)根據(jù)個(gè)體需求和管理或監(jiān)控組合物給藥的人的專業(yè)判斷隨時(shí)間調(diào)整具體的劑量方案，并且應(yīng)理解本文提出的劑量范圍只是示例性的而不意欲限制要求保護(hù)的組合物的范圍或?qū)嵤??？梢员恢委煹膶?duì)象包括人類和非人類動(dòng)物。例如，人類可以為患有特征為異常細(xì)胞增殖或細(xì)胞分化的疾病的人類患者。術(shù)語"非人類動(dòng)物"包括所有脊推動(dòng)物，例如，非哺乳動(dòng)物(如家禽、兩棲動(dòng)物、爬行動(dòng)物)和哺乳動(dòng)物(如非人類靈長(zhǎng)類、羊、狗、牛、豬等)。施用Tiel胞外域-結(jié)合劑、VEGF拮抗劑和其它物質(zhì)(例如，細(xì)胞毒素化學(xué)治療劑)的方法也描述于"藥物組合物"中。所使用分子的適宜的劑量將取決于對(duì)象的年齡和體重以及所使用的特定藥物。聯(lián)合治療本文公開的治療方法可用于與一個(gè)或多個(gè)另外的治療模式聯(lián)合，另外的治療模式包括，但不限于手術(shù)、放射治療和化學(xué)治療。關(guān)于本文所述的方法，術(shù)語"聯(lián)合"指使用一種或多種另外的物質(zhì)或治療來處理相同的患者，其中所述物質(zhì)或治療的使用或作用在時(shí)間上重疊。另外的物質(zhì)或治療可以在Tiel胞外域-結(jié)合蛋白和/或VEGF拮抗劑被施用的同時(shí)施用，或以任何順序順續(xù)施用。序貫施用是在不同時(shí)間給予的施用。在一種物質(zhì)和另一種物質(zhì)施用之間的時(shí)間可以為分鐘、小時(shí)、天或周。另外的物質(zhì)或治療也可以是另一抗癌劑或治療?？拱﹦┑姆窍拗菩詫?shí)例包括，例如，抗微管劑、拓樸異構(gòu)酶抑制劑、抗代謝物、有絲分裂抑制劑、烷化劑、嵌入劑、能夠干擾信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的物質(zhì)、能夠促進(jìn)細(xì)胞凋亡的物質(zhì)、放射物和抗其它胂瘤相關(guān)抗原的抗體(包括棵抗體、免疫毒素和放射偶聯(lián)物)。特定類抗癌劑的實(shí)例詳細(xì)給出如下抗微管蛋白/抗微管劑，例如紫杉醇、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春瑞濱、多西他賽(taxotere);拓樸異構(gòu)酶I抑制劑，例如伊立替康、托泊替康、喜樹堿、多柔比星、依托泊苷、米托蒽醌、柔紅霉素、伊達(dá)比星、替尼泊苷、安吖啶、表柔比星、美巴龍(merbarone)、鹽酸吡羅蒽醌；抗代謝物，例如，5-氟尿嘧啶(5-FU)、氨曱蝶呤、6-巰基噪呤、6-硫代鳥。票呤、磷酸氟達(dá)拉濱、阿糖胞苷/Ara-C、三曱曲沙、吉西他濱、阿西維辛、阿拍^若新、吡唑呋喃菌素、N-膦酰乙?；?L-天冬氨酸PALA、噴司他丁、5-氮雜胞普、5-氮雜-2'-脫氧胞苷、ara-A、克拉屈濱、5-氟尿苷、FUDR、漆唑呋林、N-[5-[N-(3,4-二氫-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基曱基)-N-曱氨基]-2-噻吩曱酰]-L-谷氨酸；烷化劑，例如順鉑、卡鉬、絲裂霉素C、BCNU=卡莫司汀、美法侖、塞替派、白消安、苯丁酸氮芥、普卡霉素、達(dá)卡巴口秦、磷酸異環(huán)磷酰胺、環(huán)磷酰胺、氮芥、尿嘧啶氮芥、溴丙哌。秦(pipobroman)、4-甘薯苦醇；通過其它作用機(jī)制起作用的物質(zhì)，例如，二氫侖p底隆(dihydrolenperone)、螺莫司汀和縮肽(desipeptide);生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，例如，增強(qiáng)抗肺瘤反應(yīng)(如干擾素)；細(xì)胞凋亡劑，如i文線菌素D;以及抗激素，例如抗雌激素(如他莫昔芬)，或例如抗雄激素(如4'-氰基-3-(4-氟苯基磺?；?-2-羥基-2-甲基-3'-(三氟甲基)丙酰苯胺。聯(lián)合治療可以包括施用降低其它治療的副作用的物質(zhì)。所述物質(zhì)可以為降低抗癌治療的副作用的物質(zhì)。例如，該物質(zhì)可以是曱酰四氫葉酸(例如，與5-氟尿嘧啶聯(lián)用)。聯(lián)合治療還可以包括施用降低施用其它治療的頻率的物質(zhì)。該物質(zhì)可以為在其它治療的抗癌效果降低后減少胂瘤生長(zhǎng)的物質(zhì)。以下實(shí)例不應(yīng)理解為限制本發(fā)明。實(shí)施例實(shí)施例1:示例性Tiel胞外域-結(jié)合抗體序列以下為免疫球蛋白輕鏈和重鏈可變域的示例性序列806C-M0044-B08L-可變域(AA):KSYPLTFGEGTKVEIK(SEQIDNO:2)L-可變域(DNA):GACCAAGGTGGAGATCAAA(SEQIDNO:3)H-可變域(AA):C(SEQIDNO:5)DX-2220為全長(zhǎng)、IgGl、胚系的人抗-Tiel抗體E3b。DX-2220的序列如下DX-2220輕鏈氨基酸序列DYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQIDNO:6)DX-2220重鏈氨基酸序列K(SEQIDNO:7)示例性DX-2220輕一隨核苷酸序列<formula>formulaseeoriginaldocumentpage53</formula>GA(SEQIDNO:9)實(shí)施例2:DX-2240的序列胚系F同種異型的E3抗體DX-2240(輕、重-可變區(qū)、恒定區(qū))?？勺儏^(qū)SYPHTFGQGTRLEIK(SEQIDNO:10)輕鏈恒定區(qū)HQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQIDNO:11)DX-2240重《連可變區(qū)VYYCARAPRGYSYGYYYWGQGTLVTVSS(SEQIDNO:12)重鏈恒定區(qū)(CH1、4交鏈區(qū)、CH2、CH3):KVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRNHYTQKSLSLSPGK(SEQIDNO:13)輕鏈可任選地進(jìn)一步包括以下信號(hào)序列MGWSCIILFLVATATGVHS(SEQIDNO:14)。重鏈可任選地進(jìn)一步包括以下信號(hào)序列MGWSCIILFLVATATGAHS(SEQIDNO:15)。實(shí)施例3:在乳腺癌異種移植模型中Tiel胞外域-結(jié)合蛋白和VEGF拮抗劑不同給藥時(shí)間表的評(píng)價(jià)在人胂瘤異種移植沖莫型中測(cè)試了DX-2240和貝伐單抗(抗-VEGF抗體)或索拉非尼(多激酶抑制劑)聯(lián)用的抗腫瘤活性。將從攜帶皮下BxPC-3(人乳腺癌細(xì)胞系)腫瘤的宿主棵鼠(nu/nu)收獲的BxPC3肺瘤片段皮下植入到雌性棵鼠(試驗(yàn)動(dòng)物)中并使其形成腫瘤。當(dāng)肺瘤達(dá)到大約100mm、腫瘤植入后約18天)時(shí)將小鼠按照肺瘤尺寸配對(duì)并隨機(jī)分成各種治療組。將動(dòng)物分成表1所示的治療組("開始"指開始治療的天數(shù))。DX-2240以20mg/kg腹膜內(nèi)(IP)注射給予；貝伐單抗以10mg/kgIP注射給予，索拉非尼以60mg/kg口服給予(共9個(gè)劑量)，和對(duì)照IgG(帕利J朱單抗，與DX-2240同種型的抗體)以標(biāo)明的給藥起始日和給藥方案以20mg/kgIP注射給予。還包括另外的陽性對(duì)照組(組13):這些動(dòng)物以40mg/kgQ3d給予吉西他濱共4個(gè)劑量。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>DX-2240與索拉非尼的聯(lián)用導(dǎo)致較小的腫瘤尺寸減小，雖然該效應(yīng)不大于對(duì)照IgG/索拉非尼聯(lián)用。這可能由于這種腫瘤類型對(duì)索拉非尼的超敏性。當(dāng)給予DX-2240時(shí)，預(yù)期存在將在一些腫瘤類型中產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)的索拉非尼的最佳劑量。實(shí)施例4:在前列腺癌異種移植模型中Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑不同給藥時(shí)間表的評(píng)價(jià)將DU145前列腺癌細(xì)胞皮下注射到無胸腺nu/nu小鼠中并使形成腫瘤。將動(dòng)物分成9-10只小鼠的組，然后進(jìn)行以下處理DX-2240(20mg/kg通過IP注射，Q2d)、同種型匹配的抗體對(duì)照(A2，20mg/kg通過IP注射，Q2d)、貝伐單抗(12mg/kg通過IP注射，Q5d)、DX-224020mg/kgQ2d+貝伐單抗(DX-224020mg/kgQ2d+貝伐單抗12mg/kg,Q5d，在第25天開始)、DX-224020mg/kgQ4d+貝伐單抗(DX-224020mg/kgQ4d+貝伐單抗12mg/kg,Q5d,在第25天開始)、DX陽224010mg/kgQ4d+貝伐單抗(DX-224010mg/kgQ4d+貝伐單抗12mg/kg，Q5d,在第25天開始)、DX-22405mg/kgQ4d+貝伐單抗(DX-22405mg/kgQ4d+貝伐單抗12mg/kg,Q5d，在第25天開始)、DX-22401mg/kgQ4d+貝伐單抗(DX-22401mg/kgQ4d+貝伐單抗12mg/kg，Q5d,在第25天開始)、DX-2240+索拉非尼(DX-224020mg/kg通過IP注射，Q2d，每天索拉非尼100mg/kg口月良(PO)共9天(QDx9)在第25和56天開始)或A2+索拉非尼(A220mg/kg通過IP注射，Q2d,索拉非尼100mg/kgPOQDx9在第25和56天開始)。第34天后，只給予DX-2240和只給予A2的組中的小鼠被給予另外的藥物，并不再用作該試驗(yàn)的對(duì)照。腫瘤體積每周測(cè)量?jī)纱?。肺瘤體積數(shù)據(jù)總結(jié)于圖5和6中。如圖5中所示，在該模型中順序施用DX-2240、施用隨后索拉非尼顯著降低了胂瘤生長(zhǎng)(在DX-2240和索拉非尼共同給藥的期間引起肺瘤收縮)，而且該降低看起來在較后的時(shí)間點(diǎn)(例如，較大的胂瘤尺寸)是協(xié)同的。該模型看起來對(duì)貝伐單抗是高度敏感的(以12mg/kg、Q5d單獨(dú)施用貝伐單抗，引起腫瘤收縮)，因此不能觀察到序貫施用Tiel胞外域-結(jié)合劑(DX-2240)的協(xié)同效應(yīng)。實(shí)施例5:在胰腺癌模型中DX-2240和VEGF拮抗劑不同給藥時(shí)間表的評(píng)價(jià)評(píng)價(jià)了DX-2240在BxPC-3人胰腺癌模型中的程序依賴性(schedule-dependent)抗腫瘤活性。DX-2240和貝伐單抗按各種不同的時(shí)間表施用，且活性與用貝伐單抗和對(duì)照IgG(帕利珠單抗)共同處理的組比較。此外，我們檢查了肺瘤脈管系統(tǒng)的變化并用a-小鼠VEGF結(jié)合抗體4全測(cè)了鼠VEGF的任何潛在效應(yīng)。將雌性棵鼠(nu/nu)分成14個(gè)組。將從棵鼠宿主中皮下生長(zhǎng)的胂瘤收獲的BxPC3肺瘤片段用套針皮下植入到組1-12的動(dòng)物中。將大約lxl(^個(gè)來自組織培養(yǎng)的BxPC-3細(xì)胞皮下注射到組13-14的小鼠中。當(dāng)注射的腫瘤長(zhǎng)到尺寸為大約104mm、才直入后大約19天)和才直入的腫瘤長(zhǎng)到尺寸為大約110mm、植入后大約22天)時(shí)，將動(dòng)物按照肺瘤尺寸配對(duì)成處理和對(duì)照組。組1和組2的動(dòng)物用于評(píng)價(jià)腫瘤脈管系統(tǒng)。組13和組14的動(dòng)物用于比較DX-2240對(duì)由細(xì)胞注射形成的肺瘤的作用。在動(dòng)物配對(duì)后開始處理(第一天)。所有組中的動(dòng)物按照體重給藥(10ml/kg)。對(duì)照IgG和DX-2240以20mg/kgIP注射給藥，且貝伐單抗和大鼠a-小鼠VEGFIgG抗體以10mg/kgIP注射給藥(每隔3天給藥1次)。在第-3、1、5、6、10或20天開始給藥。不同給藥時(shí)間表示于表4中。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>*用于評(píng)價(jià)腫瘤脈管系統(tǒng)的動(dòng)物從第1天直到第39天每周兩次記錄個(gè)體和組平均肺瘤體積。各組的平均腫瘤體積示于表5中并總結(jié)于圖7中。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>如圖8中所示，與上面實(shí)施例3中的試驗(yàn)結(jié)果一致，該試驗(yàn)顯示出與對(duì)照組相比，施用DX-2240、隨后在第10或第20天施用貝伐單抗產(chǎn)生腫瘤尺寸減小的協(xié)同改善。如圖9中所示，在第1天施用對(duì)照IgG或DX-2240并在第1天或第5天開始施用貝伐單抗的共同給藥組在腫瘤生長(zhǎng)抑制方面沒有表現(xiàn)出明顯的差別。a-小鼠VEGF抗體的加入在DX-2240/貝伐單抗處理動(dòng)物(組12)中引起減小的腫瘤生長(zhǎng)抑制，但是與對(duì)照IgG/貝伐單抗聯(lián)用(組11)相比DX-2240/貝伐單抗聯(lián)用仍減小了腫瘤生長(zhǎng)。與具有相似的測(cè)得腫瘤體積(400mm)的植入腫瘤相比，由細(xì)胞注射形成的腫瘤(組13和14)對(duì)DX-2240/貝伐單抗聯(lián)用的敏感性較低。然而，不清楚一旦注射的肺瘤達(dá)到其體積終點(diǎn)(endpoint)時(shí)是否將仍保持該降低的敏感性。為了測(cè)定腫瘤脈管系統(tǒng)中的變化，在第5、10、15和20天從組1和2中各組隨機(jī)選擇3個(gè)動(dòng)物用于破壞性樣品(包括肺瘤和血清)收集。對(duì)動(dòng)物IV注射150pL生物素化-凝集素溶液(在第5和15天不注射)。5分鐘后，通過心內(nèi)注射對(duì)動(dòng)物灌注1%多聚曱醛的PBS溶液3分鐘。然后收集腫瘤，置于灌注溶液中，并立刻用于分析。通過心臟穿刺收集血液并提取血清，在液氮中速凍，并在-80貯存。凝集素染色試驗(yàn)的數(shù)據(jù)總結(jié)于表6和圖10中。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>與來自對(duì)照動(dòng)物的腫瘤相比，來自用DX-2240處理的動(dòng)物的腫瘤表現(xiàn)出較少的凝集素染色。結(jié)果表明在DX-2240處理的動(dòng)物中有較少的功能性腫瘤脈管系統(tǒng)。實(shí)施例6:在前列腺腫瘤模型中DX-2240和索拉非尼不同給藥時(shí)間表的評(píng)價(jià)在DU145人前列腺腫瘤模型中，與用DX-2240和對(duì)照IgG(帕利珠單抗)的處理比較，評(píng)價(jià)了按不同時(shí)間表用DX-2240和索拉非尼處理的肺瘤生長(zhǎng)抑制。用從組織培養(yǎng)收集的DU145細(xì)胞對(duì)雄性棵鼠(nu/nu)進(jìn)行皮下注射(lxlO個(gè)細(xì)胞/小鼠)。當(dāng)腫瘤長(zhǎng)到大約95mm3大小時(shí)(注射后大約7天)，按腫瘤尺寸將動(dòng)物配對(duì)成處理組和對(duì)照組。在動(dòng)物配對(duì)后(第1天)開始處理。對(duì)照組和處理組中的動(dòng)物按照體重給藥(IOml/kg)。DX-2240和對(duì)照IgG(帕利珠單抗)通過IP注射給藥，或者從第1天開始每隔1天給藥1次進(jìn)行17次處理，或者從第1天開始每4天給藥1次進(jìn)行9次處理。索拉非尼從第15天開始通過強(qiáng)飼法每天1次口服給藥進(jìn)行9次處理。作為對(duì)照，對(duì)照IgG從第1天開始每隔1天給藥進(jìn)行17次處理。用于該研究的給藥濃度和時(shí)間表示于表7中。從第1天直到第57天每周2次記錄個(gè)體的和組平均的腫瘤體積。結(jié)果示于表8中并總結(jié)于圖11中。與單獨(dú)用對(duì)照IgG或單獨(dú)用DX-2240處理的動(dòng)物相比，用DX-2240和索拉非尼處理的動(dòng)物表現(xiàn)出腫瘤生長(zhǎng)下降。特別地，與共同施用對(duì)照IgG和索#^非尼的動(dòng)物相比，用DX-2240(20mg/kg;Q2Dxl7;第1天)結(jié)合索拉非尼(100mg/kg;QDx9;第15天)處理的動(dòng)物在化合物給藥終止后繼續(xù)表現(xiàn)出胂瘤生長(zhǎng)的顯著下降。<table>tableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage64</column></row><table>權(quán)利要求1.一種治療血管生成相關(guān)疾病的方法，該方法包括在向?qū)ο笫┯冒琕EGF拮抗劑的第二藥劑之前向?qū)ο笫┯冒琓ie1胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在施用第二藥劑之前大約1至35天施用第一藥劑。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在施用第二藥劑之前大約1、4、6、8或10天施用第一藥劑。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在施用第二藥劑之前大約2周施用第一藥劑。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在施用第二藥劑之前大約10天施用第一藥劑。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在施用第二藥劑之前大約20天施用第一藥劑。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在施用第二藥劑之后繼續(xù)施用第一藥劑。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在施用第二藥劑之后停止施用第一藥劑。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑是DX-2240或DX-2220。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑是貝伐單抗。11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑是索拉非尼。12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以單獨(dú)有效地治療血管生成相關(guān)疾病的量施用。13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑或VEGF拮抗劑以低于單獨(dú)有效地治療血管生成相關(guān)疾病的量施用。14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑各自以對(duì)治療血管生成相關(guān)疾病協(xié)同有效的量施用。15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述血管生成相關(guān)疾病是癌癥或肺瘤。16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述血管生成相關(guān)疾病是前列腺癌或胰腺癌。17.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤脈管系統(tǒng)變化的步驟，并當(dāng)肺瘤脈管系統(tǒng)與施用第一藥劑之前相比表現(xiàn)出任何變化時(shí)施用第二藥劑。18.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤尺寸變化的步驟。19.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，進(jìn)一步包括放射治療或化學(xué)治療。20.—種手術(shù)后輔助治療的方法，該方法包括在施用包含VEGF拮抗劑的第二藥劑之前，向已手術(shù)切除腫瘤的對(duì)象施用包含Tie1胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑是DX-2240。22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述第一藥劑在手術(shù)的48小時(shí)內(nèi)施用。23.—種治療血管生成相關(guān)疾病的方法，該方法包括在向?qū)ο笫┯冒琓iel胞外域-結(jié)合劑的第二藥劑之前向?qū)ο笫┯冒琕EGF拮抗劑的第一藥劑。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中在施用第二藥劑之前大約1至35天施用第一藥劑。25.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑是DX-2240。26.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑是貝伐單抗。27.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑是索拉非尼。28.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤脈管系統(tǒng)變化的步驟，并當(dāng)腫瘤脈管系統(tǒng)與施用第一藥劑之前相比表現(xiàn)出任何變化時(shí)施用第二藥劑。29.—種使紳瘤脈管系統(tǒng)對(duì)VEGF下降敏化的方法，該方法包括在向?qū)ο笫┯冒琕EGF拮抗劑的第二藥劑之前向?qū)ο笫┯冒琓iel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑。30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑是DX-2240。31.根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑是貝伐單抗。32.根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的肺瘤脈管系統(tǒng)變化的步驟，并當(dāng)腫瘤脈管系統(tǒng)與施用第一藥劑之前相比表現(xiàn)出任何變化時(shí)施用第二藥劑。33.—種抑制在施用VEGF拮抗劑的對(duì)象中的胂瘤再生長(zhǎng)的方法，該方法包括在向?qū)ο笫┯冒琕EGF拮抗劑的第二藥劑之前向?qū)ο笫┯冒琓iel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑。34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑是DX-2240。35.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑是貝伐單抗或索拉非尼。36.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤脈管系統(tǒng)變化的步驟，并當(dāng)肺瘤脈管系統(tǒng)與施用第一藥劑之前相比表現(xiàn)出任何變化時(shí)施用第二藥劑。37.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤生長(zhǎng)的步驟。38.—種降低對(duì)象的化學(xué)治療劑或放射施用頻率的方法，該方法包括向?qū)ο笫┯冒琓iel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑和包含VEGF拮抗劑的第二藥劑。39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的方法，其中所述Tiel胞外域-結(jié)合劑是DX-2240。40.根據(jù)權(quán)利要求38所述的方法，進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤脈管系統(tǒng)變化的步驟，并當(dāng)腫瘤脈管系統(tǒng)與施用第一藥劑之前相比表現(xiàn)出任何變化時(shí)施用第二藥劑。41.根據(jù)權(quán)利要求39所述的方法，進(jìn)一步包括監(jiān)控對(duì)象的腫瘤生長(zhǎng)的步驟。42.—種治療血管生成相關(guān)疾病的方法，該方法包括向?qū)ο笫┯冒琓ie2胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑和包含VEGF拮抗劑的第二藥劑。43.才艮據(jù);f又利要求42所述的方法，其中在施用第一藥劑之后施用第二藥劑。44.根據(jù)權(quán)利要求42所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑是貝伐單抗或索拉非尼。45.—種試劑盒，其包括包含Tiel胞外域-結(jié)合劑的第一藥劑、包含VEGF拮抗劑的第二藥劑和根據(jù)權(quán)利要求1的方法使用的說明書。全文摘要本發(fā)明公開了治療血管生成相關(guān)疾病的新方法。通過施用Tie1胞外域-結(jié)合劑和VEGF拮抗劑治療血管生成相關(guān)疾病。文檔編號(hào)A61K38/00GK101528247SQ200780038470公開日2009年9月9日申請(qǐng)日期2007年10月17日優(yōu)先權(quán)日2006年10月17日發(fā)明者A·阿魯蘭安戴姆,C·R·伍德,D·T·德雷恩斯菲爾德,R·K·杰恩申請(qǐng)人:戴克斯公司