專利名稱：：化合物、組合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的抑制劑化合物，它們用于治療細(xì)胞增殖性疾病，例如癌癥、增生、再狹窄、心臟肥大、免疫疾病、真菌病和炎癥。
背景技術(shù)：
：用于治療癌癥的治療劑為紫杉垸和長(zhǎng)春花屬生物堿，它們作用于微管。微管是有絲分裂紡錘體的主要結(jié)構(gòu)元件。有絲分裂紡錘體負(fù)責(zé)基因組的復(fù)制拷貝向細(xì)胞分裂所產(chǎn)生的兩個(gè)子細(xì)胞的每個(gè)中的分配。認(rèn)為這些藥物對(duì)有絲分裂紡錘體的破壞導(dǎo)致對(duì)癌細(xì)胞分裂的抑制，并誘導(dǎo)癌細(xì)胞死亡。然而，微管形成其他類型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，包括用于神經(jīng)過程中胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)穆窂健Ｒ驗(yàn)檫@些藥物不特異性地靶向于有絲分裂紡錘體，所以它們具有限制它們的實(shí)用性的副作用。由于如果能夠降低與給予這些藥物有關(guān)的副作用會(huì)實(shí)現(xiàn)的治療益處，所以提高癌癥治療藥物的特異性是相當(dāng)令人感興趣的。傳統(tǒng)上，癌癥治療中的顯著改善與鑒定通過新機(jī)理作用的治療劑有關(guān)。其實(shí)例不僅包括紫杉烷，而且還包括拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑喜樹堿類。由這兩類藥物來看，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白對(duì)于新的抗癌藥物而言是有吸引力的耙。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是有絲分裂紡錘體組裝及功能所必需的酶，但通常并不是其他微管結(jié)構(gòu)的部分，如在神經(jīng)過程中。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白在有絲分裂的所有階段都起到重要作用。這些酶是將ATP水解所釋放的能量轉(zhuǎn)化為驅(qū)動(dòng)細(xì)胞成分(cdlularcargoes)沿微管定向移動(dòng)的機(jī)械力的"分子發(fā)動(dòng)機(jī)"。足以完成該任務(wù)的催化域是一個(gè)約340個(gè)氨基酸的緊密結(jié)構(gòu)。在有絲分裂期間，驅(qū)動(dòng)蛋白將微管組裝成有絲分裂紡錘體的雙極結(jié)構(gòu)。驅(qū)動(dòng)蛋白介導(dǎo)染色體沿紡錘體微管的移動(dòng)，以及有絲分裂紡錘體中與有絲分裂的特定階段有關(guān)的結(jié)構(gòu)變化。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白功能的實(shí)驗(yàn)干擾導(dǎo)致有絲分裂紡錘體的畸形或功能障礙，通常導(dǎo)致細(xì)胞周期停止和細(xì)胞死亡。KSP是己鑒定的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白中的一種。KSP屬于正端定向微管發(fā)動(dòng)機(jī)(plusend-directedmicrotubulemotors)的進(jìn)化保守型驅(qū)動(dòng)蛋白亞族，所述正端定向微管發(fā)動(dòng)機(jī)組裝成由反平行同型二聚體組成的雙極同型四聚體。在有絲分裂期間，KSP與有絲分裂紡錘體的微管結(jié)合。在人細(xì)胞中微量注射針對(duì)KSP的抗體在前中期期間阻止紡錘極分開，產(chǎn)生單極紡錘體，而導(dǎo)致有絲分裂停止，并誘導(dǎo)程序性細(xì)胞死亡。KSP以及其他非人生物中的相關(guān)驅(qū)動(dòng)蛋白使反平行微管成束，并使它們相互之間滑動(dòng)，由此迫使兩個(gè)紡錘極分開。KSP也可介導(dǎo)后期B紡錘體拉長(zhǎng)以及紡錘極處的微管集中。已描述了人KSP(也稱為HsEg5)(Blangy等人，Cell,83:1159-69(1995);Whitehead等人，ArthritisRheum.，39:1635-42(1996);Galgio等人，J.CellBiol"135:339-414(1996);Blangy等人，JBiol.Chem,，272:19418-24(1997);Blangy等人，CellMotilCytoskeleton,40:174-82(1998);Whitehead和Ra加er,J.CellSci.，111:2551-61(1998);Kaiser等人，JBC274:18925-31(1999);GenBank登錄號(hào)X85137,NM004523和U37426)，而且已描述了KSP基因的片段(TRIP5)(Lee等人，MolEndocrinol,9:243-54(1995);GenBank登錄號(hào)L40372)。己報(bào)道了非洲爪蟾屬KSP同系物(Egs)以及果蠅屬KLP61F/KRP130。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，包括KSP，是發(fā)現(xiàn)和開發(fā)新的有絲分裂化學(xué)治療劑的有吸引力的靶。因此，本發(fā)明的目的是提供用于KSP的化合物、組合物和方法。
發(fā)明內(nèi)容根據(jù)如上概述的目的，本發(fā)明提供可用于治療細(xì)胞增殖性疾病的化合物。該化合物是KSP抑制劑，特別是人KSP抑制劑。本發(fā)明還提供包含這些化合物的組合物，和利用這些化合物或組合物的方法，它們可以用于治療細(xì)胞增殖性疾病。在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及治療細(xì)胞增殖性疾病，以及通過抑制KSP活性來治療病癥的方法。該方法采用由式I代表的化合物式I其中:Ri選自氫、任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳垸基-、任選取代的雜芳基-和任選取代的雜芳烷基-;112和112.獨(dú)立地選自氫、任選取代的垸基-、任選取代的垸氧基、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-和任選取代的雜芳烷基；或者R2和R2，一起形成任選取代的3-7元環(huán)；R12選自任選取代的咪唑基、任選取代的咪唑啉基、-NHR4、-N(R4)(COR3)、畫N(R4)(S02R3a)和國(guó)N(R4)(CH2R3b);R3選自氫、任選取代的垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳垸基-、任選取代的雜芳基-、任選取代的雜芳烷基-、RmO-和R17-NH-;Rh選自任選取代的垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳垸基-、任選取代的雜芳基-、任選取代的雜芳烷基-和R17-NH-;R化選自氫、任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-、任選取代的雜芳烷基；R4選自氫、任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜環(huán)基-和任選取代的雜芳烷基-;R5、R6、R7和R8獨(dú)立地選自氫、?；?、任選取代的烷基-、任選取代的烷氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、二垸基氨基、垸基磺?；?、垸基磺酰氨基-、烷硫基-、羧基烷基-、酰胺基-、氨基羰基-、任選取代的芳基和任選取代的雜芳基；Rj5選自任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-和任選取代的雜芳垸基-;且Rn為氫、任選取代的垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-或任選取代的雜芳烷基-，包括單一立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物；式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽；式I的化合物的藥學(xué)可接受的溶劑化物的藥學(xué)可接受的溶劑化物；或者式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，當(dāng)R2和R2，之一為氫時(shí)，則另一個(gè)不是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2和R2,各自為氫，而Ri選自任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-和任選取代的雜芳垸基-，但條件是&不是取代的苯基。在一方面，本發(fā)明涉及通過給予治療有效量的式I的化合物、式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽或者式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽的溶劑化物來治療細(xì)胞增殖性疾病和其它可以通過抑制KSP來治療的疾病的方法。這些疾病和病癥包括癌癥、增生、再狹窄、心臟肥大、免疫疾病、真菌病和炎癥。在另一方面，本發(fā)明涉及用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的化合物。該化合物具有以上式I所示的結(jié)構(gòu)；式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽或者式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物。本發(fā)明還涉及含有治療有效量的與至少一種藥用賦形劑混合的式I的化合物、式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽或式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物的藥物組合物。在另一方面，除了本發(fā)明的化合物，該組合物還包含化學(xué)治療劑。在另外的方面，本發(fā)明提供用于篩選結(jié)合KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的化合物的方法，例如替換本發(fā)明化合物的結(jié)合或者與本發(fā)明的化合物的結(jié)合進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)的化合物。該方法包括混合標(biāo)記的本發(fā)明的化合物、KSP驅(qū)動(dòng)蛋白，以及至少一種候選藥物，然后測(cè)定候選藥物對(duì)KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的結(jié)合。在又一方面，本發(fā)明提供用于篩選KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性調(diào)節(jié)劑的方法。該方法包括混合本發(fā)明的化合物、KSP驅(qū)動(dòng)蛋白，以及至少一種候選藥物，并測(cè)定候選藥物對(duì)KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性的作用。附圉說明參照以下與附圖相關(guān)的描述將更好地理解本發(fā)明。圖1和2分別代表根據(jù)制備A制備的鹽的XRPD和MDSC掃描；在圖2中，方法MDSC-僅有熱，儀器DSCQ1000V6.19Build227。圖3代表根據(jù)制備B制備的鹽的XRPD掃描。具體實(shí)施方式本說明書中所用的以下詞語和短語一般意在具有下述的含義，除了在使用它們的上下文的范圍之內(nèi)作出另外說明。以下的縮寫和術(shù)語在全文具有所示的含義Ac=乙酰基Boc=叔丁氧羰基Bu=丁基c-=環(huán)CBZ=苯酯基=芐氧羰基DCM=二氯甲垸=甲叉二氯=CH2C12DIEA=N,N-二異丙基乙胺DMF=N，N-二甲基甲酰胺DMSO=二甲亞砜Et=乙基HBTU=0-苯并三唑-l-基-N，N,N^，N'-四甲基脲嗡六氟憐酸鹽烷基意在包括直鏈、支鏈或環(huán)狀脂族烴結(jié)構(gòu)以及它們的組合，所述結(jié)構(gòu)可以是飽和或不飽和的。低級(jí)'烷基指1-5個(gè)碳原子，優(yōu)選1-4個(gè)碳原子的烷基。低級(jí)烷基的實(shí)例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基等。優(yōu)選的烷基是C20或更低級(jí)的垸基。更優(yōu)選的烷基是C,3或更低級(jí)的烷基。環(huán)烷基是烷基的一個(gè)子集，包括3-13個(gè)碳原子的環(huán)狀脂族烴基。環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、降冰片垸基(norbomyl)、金剛垸基等。環(huán)烷基-烷基是垸基的另一子集，指通過非環(huán)狀烷基與母體結(jié)構(gòu)連接的環(huán)烷基。環(huán)垸基-烷基的實(shí)例包括環(huán)己基甲基、環(huán)丙基甲基、環(huán)己基丙基等。在本申請(qǐng)中，烷基包括鏈烷基、鏈烯基和炔基殘基，其意在包括乙烯基、烯丙基、異戊二烯基等。亞烷基-、亞鏈烯基-和亞炔基是烷基的其它子集，包括與垸基相同，但在化學(xué)結(jié)構(gòu)內(nèi)具有二個(gè)連接點(diǎn)的殘基。亞烷基的實(shí)例包括亞乙基(-CH2CH2-)、亞丙基(-CH2CH2CH2-)、二甲基亞丙基(-CH2C(CH3)2CH2-)和環(huán)己基亞丙基(-CH2CH2CH(C6H,3)-)。同樣，亞鏈烯基的實(shí)例包括亞乙烯基(-CH-CH-)、亞丙烯基(-CI^CH-CH2-)和環(huán)己基亞丙烯基(-CH-CHCH(C6Hi3)-)。亞炔基的實(shí)例包括亞乙炔基(-OC-)和亞丙炔基(-CHsCH-CH2-)。當(dāng)命名具有特定數(shù)目的碳的烷基殘基時(shí)，意在包括具有該碳數(shù)的所有幾何異構(gòu)體；因此，例如"丁基"意在包括正丁基、仲丁基、異丁基和叔丁基；"丙基"包括正丙基、異丙基和環(huán)丙基。HMDS=HOAc=IPA=Me=Ph=Py=rt=sat'd二s-=t-=TEA=TFA=THF=Tf=基二硅氮烷叔三乙胺三氟乙酸四氫呋喃三氟甲磺酸(triflate)甲酸丙基基啶溫和六乙異甲苯吡室飽仲烷氧基指優(yōu)選包括l-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀構(gòu)型的烷基以及它們的組合，其通過氧連接在母體結(jié)構(gòu)上(即基團(tuán)垸基-O-)。實(shí)例包括甲氧基-、乙氧基-、丙氧基-、異丙氧基-、環(huán)丙氧基-、環(huán)己氧基等。低級(jí)烷氧基指含有l(wèi)-4個(gè)碳的垸氧基。?；竿ㄟ^羰基官能團(tuán)連接在母體結(jié)構(gòu)上的1-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀構(gòu)型的基團(tuán)以及它們的組合。這種基團(tuán)可以是飽和或不飽和的，脂族或芳族的。酰基殘基中的一個(gè)或多個(gè)碳可被氮、氧或硫置換，只要與母體的連接點(diǎn)在羰基即可。實(shí)例包括乙?；?、苯甲?；⒈；惗□；⑹宥⊙豸驶?、芐氧羰基等。低級(jí)?；负衛(wèi)-4個(gè)碳的?；?。氨基指基團(tuán)-NH2。術(shù)語"取代的氨基"指基團(tuán)-NHR或-NRR，其中R獨(dú)立地選自任選取代的垸基、任選取代的烷氧基、任選取代的氨基羰基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)基、酰基、垸氧羰基、硫烷基、亞硫?；突酋；缍一被?、甲基磺酰氨基、呋喃基-氧-磺酰氨基。氨基羰基-指基團(tuán)-NReCORb、-NReC02Rb或-NReCONRbRe，其中Rb為h或任選取代的ckv烷基、芳基、雜芳基、芳基-(:1-(:4烷基-或雜芳基-CVC4烷基-基團(tuán)；而Re為氫或c廣C4烷基；且其中各任選取代的Rb基團(tuán)獨(dú)立地未被取代或被一或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基取代(vq烷基、芳基、雜芳基、芳基-q-C4垸基-、雜芳基-CrC4烷基-、crc4鹵代垸基、-ocvQ烷基、-od-C4垸基苯基、-01-<:4烷基-011、-OC廣C4鹵代烷基、鹵素、-OH、-NH2、-Q-C4垸基-NH2、-N(CrC4垸基)(C廣C4烷基)、-皿((:1-(:4烷基)、^(01-(:4垸基)(<:1-(:4烷基苯基)、-朋((:1-(:4垸基苯基)、氰基、硝基、氧代(作為雜芳基的取代基)、-co2h、-qppd-cu烷基、-CON(CrQ烷基)(C廣C4烷基)、-CONHO^-C*烷基)、-CONH2、-NHC(0)(CVC4烷基)、-NHC(O)(苯基)、-N(CrC4烷基)C(0)(CVC4烷基)、國(guó)N(d-C4烷基)c(o)(苯基)、-c(o)c,-C4烷基、-(:(0)(:廣(:4苯基、墨c(o)c廣C4鹵代烷基、國(guó)oc(o)c廣C4烷基、402((:1-(:4垸基)、-802(苯基)、-sc^d-Q鹵代烷基)、-S02NH2、-802朋(0:1-<:4烷基)、-802順(苯基)、-NHSOXd-C^烷基)、-朋802(苯基)和-順502((:1-(:4鹵代烷基)?？褂薪z分裂劑指抑制或阻止有絲分裂，例如通過造成中期停止抑制或阻止有絲分裂的藥物。某些抗腫瘤藥物阻斷增殖，并被認(rèn)為是抗有絲分裂劑。芳基和雜芳基分別意指含有0或1-4個(gè)選自O(shè)、N或S的雜原子的5或6元芳環(huán)或雜芳環(huán)；含有0或1-4個(gè)(或更多個(gè))選自O(shè)、N或S的雜原子的雙環(huán)9或10元芳環(huán)或雜芳環(huán)系統(tǒng)；或者含有0或1-4個(gè)(或更多個(gè))選自0、N或S的雜原子的三環(huán)12至14元芳環(huán)或雜芳環(huán)系統(tǒng)。芳族6-14元碳環(huán)包括，例如苯基、萘基、茚滿基、四氫萘基和芴基；而5-10元芳族雜環(huán)包括，例如咪唑基、吡啶基、吲哚基、噻吩基、苯并吡喃酮基、噻唑基、呋喃基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、嘧啶基、吡嗪基、四唑基和吡唑基。芳烷基-指芳基部分通過烷基殘基連接在母體結(jié)構(gòu)上的殘基。實(shí)例包括芐基、苯乙基、苯基乙烯基、苯基烯丙基等。雜芳垸基-指雜芳基部分通過烷基殘基連接在母體結(jié)構(gòu)上的殘基。實(shí)例包括呋喃基甲基、吡啶基甲基、嘧啶基乙基等。芳烷氧基-指基團(tuán)-O-芳垸基。類似地，雜芳烷氧基-指基團(tuán)-O-雜芳烷基；芳氧基-指基團(tuán)-O-芳基；酰氧基-指基團(tuán)-O-酰基；雜芳氧基指基團(tuán)-O-雜芳基；而雜環(huán)氧基-指基團(tuán)-O-雜環(huán)基(即芳垸基、雜芳垸基、芳基?；?、雜環(huán)基或雜芳基通過氧連接在母體結(jié)構(gòu)體上)。羧基烷基-指基團(tuán)-烷基-COOH。酰胺基指基團(tuán)-CONRbRe，其中Rb為H或任選取代的Q-C6烷基、芳基、雜芳基、芳基-01-(:4烷基-或雜芳基-CVCV烷基-基團(tuán)；而Re為氫或Q-C4烷基；且其中各任選取代的Rb基團(tuán)獨(dú)立地未被取代或被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基取代Q-C4烷基、芳基、雜芳基、芳基-CVC4烷基-、雜芳基-c廣C4垸基-、Q-C4鹵代烷基、-0(:1-(:4垸基、-0(:廣(:4垸基苯基、-c廣d烷基-OH、-OCrC4鹵代烷基、鹵素、-OH、-NH2、-(:1-0烷基-順2、-N(C廣Q垸基)(C!-C4垸基)、-Nl^d-d垸基)、-N(d-C4垸基)(CVC4烷基苯基)、-NH(CrC4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代(作為雜芳基的取代基)、-C02H、-c(o)od-cv烷基、-0^((:1-(:4烷基)(<:1-(:4烷基)、-coNi^d-Ct烷基)、-CONH2、-朋(:(0)(<^-(:4烷基)、NHC(O)苯基)、-N(CrC4烷基)C(0)(CVC4垸基)、-N(CrC4烷基)c(o)苯基)、-c(o)crc4烷基、-c(o)crc4苯基、-C(0)d-C4鹵代烷基、-OC(O)CrCV烷基、-802(<:1-<:4烷基)、-802(苯基)、-S02(C廣C4鹵代烷基)、-S02NH2、-SCbNHfd-Q烷基)、-S02NH(苯基)、-NHS02(d-C4烷基)、-順802(苯基)和-順802((:1-(:4鹵代烷基)。鹵素或鹵代指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選氟、氯和溴。二鹵代芳基、二鹵代烷基、三鹵代芳基等指被指定數(shù)目的多個(gè)鹵素(這里分別為2、2和3個(gè))但不一定是多個(gè)相同的鹵素取代的芳基和烷基；因此4-氯-3-氟苯基在二鹵代芳基的范圍之內(nèi)。雜環(huán)基指其中1-4個(gè)碳被諸如氧、氮或硫的雜原置換的環(huán)垸基或芳基。本發(fā)明范圍內(nèi)的雜環(huán)的實(shí)例包括氮雜環(huán)丁烷基、咪唑啉基、吡咯垸基、吡唑基、吡咯基、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、四氫異喹啉基、苯并呋喃基、苯并二噁垸基、苯并二氧基(當(dāng)作為取代基出現(xiàn)時(shí)，通常稱為亞甲二氧基苯基)、四唑基、嗎啉基、噻唑基、吡啶基、噠嗪基、哌啶基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、噁唑基、噁唑啉基、異噁唑基、二噁垸基(dioxanyl)、四氫呋喃基等。"N-雜環(huán)基"指含氮雜環(huán)。術(shù)語雜環(huán)基包括雜環(huán)基的子集雜芳基。N-雜環(huán)基殘基的實(shí)例包括氮雜環(huán)丁烷基、4-嗎啉基、4-硫代嗎啉基、1-哌啶基、l-吡咯烷基、3-噻唑垸基、哌嗪基和4-(3,4-二氫苯并噁嗪萄。取代的雜環(huán)基的實(shí)例包括4-甲基-l-哌嗪基和4-芐基-l-哌啶基。離去基團(tuán)或原子是任何在反應(yīng)條件下從原料上裂解，從而促進(jìn)特定部位的反應(yīng)的基團(tuán)。除非另外說明，這種基團(tuán)的適宜的實(shí)例是鹵原子、甲磺酰氧基、對(duì)硝基苯磺酰氧基和甲苯磺酰氧基。任選意指隨后所述的事件或環(huán)境可能發(fā)生或不發(fā)生，且該表述包括所述事件或環(huán)境發(fā)生的情況和它不發(fā)生的情況。例如，"任選取代的垸基"包括本文定義的"烷基"和"取代的垸基"。關(guān)于含有一個(gè)或多個(gè)取代基的任何基團(tuán)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，這種基團(tuán)不意在引入立體上不實(shí)15際的和/或合成上不實(shí)際的和/或本身不穩(wěn)定的任何取代或者取代方式。取代的烷氧基指其中垸基組分被取代的烷氧基(即-o-(取代的烷基))。、一種優(yōu)選的取代的烷氧基是"聚垸氧基"或-O-(任選取代的亞烷基)-(任選取代的烷氧基)，并包括諸如-OCH2CH20CH3的基團(tuán)和二醇醚如聚乙二醇的殘基和-0(CH2CH20)x-CH3，其中x為約2-20，優(yōu)選約2-10，更優(yōu)選約2-5的整數(shù)。另一種優(yōu)選的取代的垸氧基是羥基垸氧基或-OCH2(CH2)yOH，其中y是約l-10，優(yōu)選約l-4的整數(shù)。包括含有任選取代的烷基、芳基和雜芳基部分的基團(tuán)(例如烷氧基、芳垸基和雜芳垸基)的取代的烷基、芳基和雜芳基部分的取代的烷基、芳基和雜芳基分別指其中一個(gè)或多個(gè)(至多約5個(gè)，優(yōu)選至多約3個(gè))氫原子被獨(dú)立地選自以下的取代基置換的垸基、芳基和雜芳基-Ra、ORb、-0((:1-(:2烷基)0-(作為芳基取代基)、-SRb、NRbRe、鹵素、氰基、硝基、-CORb、-C02Rb、-CONRbRe、-OCORb、-OC02Rb、-OCONRbRc、-NRcCORb、-NRcC02Rb、NRcCONRbRc、-C02Rb、CONRbRc、NRcCORb、-SORa、-S02Ra、-S02NRbR^-NRcS02Ra，其中R8是任選取代的CrCV烷基、芳基、雜芳基、芳基-CrQ烷基-或雜芳基-CrCV烷基，Rb為H或任選取代的CpC6垸基、芳基、雜芳基、芳基-Q-CV烷基-或雜芳基-CrC4垸基-基團(tuán)；W為氫或Q-CV烷基；其中各任選取代的Ra基團(tuán)和Rb基團(tuán)獨(dú)立地未被取代或被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基取代Ci-C4烷基、芳基、雜芳基、芳基-Q-C4烷基-、雜芳基-CrC4垸基-、c,-C4鹵代烷基、-0(:1-<:4垸基、-0<:1-(:4烷基苯基、-c廣C4烷基-oh、-oc廣C4鹵代烷基、鹵素、-oh、-nh2、-(:廣(:4垸基-^2、-N(CrC4烷基)(Q-C4垸基)、-NH(d-cv烷基)、-1^(<:1-(:4垸基)((:1-(:4烷基苯基)、-NH(C-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代(作為雜芳基的取代基)、-C02H、-c(o)oc廣C4烷基、-(:0>^((:1-(:4烷基)((:1-<:4垸基)、《0順(<:1-<:4垸基)、-conh2、-nhc(o)(CrCv烷基)、-nhc(o)(苯基)、_;^((:1國(guó)(:4烷基)(:(0)((:1-(:4烷基)、-N(CVC4垸基)C(O)(苯基)、-CXOXVQ垸基、-CCCOCVCj苯基、-c(o)c廣C4鹵代烷基、-oc(o)d-cv烷基、-802(<:1-(:4烷基)、-502(苯基)、-S02(C廣C4鹵代烷基)、-S02NH2、-S02NH(C!-C4垸基)、-502服(苯基)、-朋802((:1-(:4垸基)、->^802(苯基)和-1^802((:1-(:4卣代烷基)。硫垸基指基團(tuán)-s-(任選取代的烷基)、-s-(任選取代的芳基)、-s-(任選取代的雜芳基)和-s-(任選取代的雜環(huán)基)。亞硫酰基指基團(tuán)-S(O)-H、-S(O)-(任選取代的垸基)、-S(O)-任選取代的芳基)、-s(o)-(任選取代的雜芳萄、-s(o)-(任選取代的雜環(huán)基)和-s(oH任選取代的氨基)?；酋；富鶊F(tuán)-S(02)-H、S(02)-(任選取代的烷基)、-8(02)-(任選取代的芳基)、-8(02)-(任選取代的雜芳基)、-8(02)-(任選取代的雜環(huán)基)、-3(02)-(任選取代的烷氧基)、-8(02)-任選取代的芳氧基)、-5(02)-(任選取代的雜芳氧基)、-s(02)-(任選取代的雜環(huán)氧基)和-s(02H任選取代的氨基)。藥學(xué)可接受的鹽指保持游離化合物的生物有效性，不是生物學(xué)上不期望的，與適宜的酸或堿形成的那些鹽，包括藥學(xué)可接受的酸加成鹽和堿加成鹽。藥學(xué)可接受的酸加成鹽包括由無機(jī)酸，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等衍生的鹽，和由有機(jī)酸如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對(duì)甲苯磺酸、水楊酸等衍生的鹽。藥學(xué)可接受的堿加成鹽包括由無機(jī)堿衍生的鹽，如鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁鹽等。特別優(yōu)選銨、鉀、鈉、鈣和鎂鹽。堿加成鹽還包括由藥學(xué)可接受的有機(jī)無毒堿衍生的鹽，包括伯、仲和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代的胺)、環(huán)胺和堿性離子交換樹脂(如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺)的鹽。保護(hù)基具有與其在有機(jī)合成中有關(guān)的常規(guī)含義，即選擇性阻斷多官能化合物的一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)部位，從而使化學(xué)反應(yīng)可以在另一個(gè)未受保護(hù)的反應(yīng)部位進(jìn)行并可以在選擇性反應(yīng)完成之后容易地除去的基團(tuán)。許多保護(hù)基已在諸如以下的文獻(xiàn)中公開T.H.Greene禾卩P.G.M.Wuts，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,ThirdEdition,JohnWiley&Sons,NewYork(1999)，該文獻(xiàn)引入本文作參考。例如，在羥基保護(hù)形式中，化合物中存在的至少一個(gè)羥基被羥基保護(hù)基保護(hù)。同樣，胺和其它反應(yīng)基團(tuán)可以類似地保護(hù)。溶劑化物指通過溶劑和式I的化合物或其鹽的相互作用而形成的化合物。式I的化合物的適宜的溶劑化物是藥學(xué)可接受的溶劑化物，如水合物，包括一水合物和半水合物。本文所述的許多化合物含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心(例如R2和R2，連接其上的碳，其中R2不同于R2，)，并因此可以產(chǎn)生對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體和其它可以根據(jù)絕對(duì)立體化學(xué)定義為(R)-或(S)-的立體異構(gòu)形式。本發(fā)明意在包括所有這些可能的異構(gòu)體，包括外消旋混合物、光學(xué)純形式和中間體混合物。旋光(R)-和(S)-異構(gòu)體可以使用手性合成子或手性試劑制備，或者使用常規(guī)技術(shù)拆分。當(dāng)本文所述的化合物含有烯屬雙鍵或其它幾何不對(duì)稱中心時(shí)，除非特別指出，它意指該化合物包括E和Z幾何異構(gòu)體。同樣地，也意在包括所有的互變異構(gòu)形式和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體。當(dāng)需要時(shí)，可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法拆分R-和S-異構(gòu)體，例如通過形成可以例如用結(jié)晶法分離的非對(duì)映異構(gòu)體鹽或者配合物；通過形成可以例如用結(jié)晶法、氣-液或液相色譜法分離的非對(duì)映異構(gòu)體衍生物；使一種對(duì)映異構(gòu)體與對(duì)映異構(gòu)體特異性試劑進(jìn)行選擇性反應(yīng)，例如進(jìn)行酶氧化或還原，然后分離修飾和未修飾的對(duì)映異構(gòu)體；或者在手性環(huán)境中，例如在手性載體，如具有結(jié)合的手性配體的二氧化硅上或者在手性溶劑存在下進(jìn)行氣-液或液相色譜處理?？梢岳斫猓?dāng)通過上述的一種分離方法將所需要的對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成另一種化學(xué)實(shí)體時(shí)，可能需要進(jìn)一步的步驟來釋放所需要的對(duì)映異構(gòu)體形式?；蛘?，可以通過使用旋光試劑、底物、催化劑或溶劑進(jìn)行不對(duì)稱合成，或者通過用不對(duì)稱轉(zhuǎn)化將一種對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成另一種，來合成特定的對(duì)映異構(gòu)體。本發(fā)明的化合物本發(fā)明涉及一類新的化合物，它們可以被描述為苯并吡喃"4-酮或色烯-4-酮，它們是一種或多種有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的抑制劑。通過抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白但不抑制其它驅(qū)動(dòng)蛋白(例如轉(zhuǎn)運(yùn)驅(qū)動(dòng)蛋白)，對(duì)細(xì)胞增殖的特異性抑制得以實(shí)現(xiàn)。雖然不意在受任何理論的限制，但本發(fā)明利用以下發(fā)現(xiàn):干擾有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白功能導(dǎo)致有絲分裂紡綞體的畸形或者功能障礙，通常導(dǎo)致細(xì)胞周期停止和細(xì)胞死亡。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，本文所述的化合物抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該化合物抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP，并調(diào)節(jié)一種或多種選自以下的人有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白HSET(參見美國(guó)專利6,361,993，其引入本文作參考)；MCAK(參見美國(guó)專利6,331,424，其引入本文作參考)；CENP-E(參見PCT公開WO99/13061，其引入本文作參考)；Kif4(參見美國(guó)專利6,440,684，其引入本文作參考);MKLP1(參見美國(guó)專利6,448,025，其引入本文作參考);Kifl5(參見美國(guó)專利6,355,466，其引入本文作參考)；Kid(參見美國(guó)專利6,387,644，其引入本文作參考)；Mppl、CMKrp、Kinl-3(參見美國(guó)專利6,461,855，其引入本文作參考)；Kip3a(參見PCT公開WO01/96593，其引入本文作參考)；Kip3d(參見美國(guó)專利6,492,151，其引入本文作參考)；和RabK6。抑制人KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的方法包括使本發(fā)明的抑制劑與驅(qū)動(dòng)蛋白，特別是人驅(qū)動(dòng)蛋白，優(yōu)選人KSP或其片段和變體接觸。該抑制作用可以是KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的ATP水解活性和/或有絲分裂紡綞體形成活性的抑制，使得有絲分裂紡綞體被破壞。減數(shù)分裂紡綞體也可被破壞。本發(fā)明的目的是開發(fā)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，特別是KSP，尤其是人KSP的抑制劑，以治療與細(xì)胞增殖有關(guān)的病癥。傳統(tǒng)上，癌癥，一種細(xì)胞增殖性疾病治療的顯著改善與鑒定通過新機(jī)理作用的治療劑有關(guān)。其實(shí)例不僅包括似乎對(duì)微管形成產(chǎn)生作用的紫杉烷類試劑，而且還包括拓樸異構(gòu)酶I抑制劑喜樹堿類。本文所述的化合物、組合物和方法區(qū)別可能在于它們的選擇性，而且優(yōu)選用于治療細(xì)胞增殖性疾病，包括但不限于癌癥、增生、再狹窄、心臟肥大、免疫疾病、真菌病和炎癥。因此，本發(fā)明涉及采用式I代表的化合物的方法1Ri2R8式I其中Rj選自氫、任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-和任選取代的雜芳垸基-;&和仗2.獨(dú)立地選自氫、任選取代的烷基-、任選取代的烷氧基、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-和任選取代的雜芳烷基；或者R2和R2，一起形成任選取代的3-7元環(huán)；R12選自任選取代的咪唑基、任選取代的咪唑啉基、-NHR4、-N(R4)(COR3)、-N(R4)(S02R3a)(CH2R3b);R3選自氫、任選取代的垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-、任選取代的雜芳烷基-、R1504BR17-NH-;R3a選自任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-、任選取代的雜芳垸基-和Rn-NH-;R3b選自氫、任選取代的垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-、任選取代的雜芳垸基；R4選自氫、任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜環(huán)基-和任選取代的雜芳烷基-;R5、R6、R7和Rg獨(dú)立地選自氫、酰基、任選取代的烷基-、任選取代的垸氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、二烷基氨基、垸基磺?；?、烷基磺酰氨基-、垸硫基-、羧基烷基-、酰胺基-、氨基羰基-、任選取代的芳基和任選取代的雜芳基；Ru選自任選取代的垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳垸基-、任選取代的雜芳基-和任選取代的雜芳烷基-;且Rn為氫、任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜芳基-或任選取代的雜芳烷基-，包括單一立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物；式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽；式I的化合物的藥學(xué)可接受的溶劑化物的藥學(xué)可接受的溶劑化物；或者式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物。當(dāng)Ri2為咪唑時(shí)，R,2具有下式其中R9選自氫、任選取代的CrC8垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳基-d-C4-垸基-、任選取代的雜芳基-Q-Cr垸基-、任選取代的芳基-(:1-(:4-烷氧基、任選取代的雜芳基-Q-C4-垸氧基、任選取代的雜芳基；而Rn和Ru，獨(dú)立地為氫、任選取代的Ct-C8垸基-、任選取代的芳基-或任選取代的芳基一C廣C4-院基0當(dāng)R^為咪唑啉時(shí)，Ru具有下式其中R9選自氫、任選取代的CrCs垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳基-CrO烷基和任選取代的雜芳基；而R1G、R1Q,、R14和R^獨(dú)立地選自氫、任選取代的c,-C8烷基-、任選取代的芳基-和任選取代的芳基-(:1-<:4-烷基o在一個(gè)實(shí)施方案中，R,選自氫、任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳烷基、任選取代的雜芳基和任選取代的雜芳烷基；R2和R2，獨(dú)立地選自氫、任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的芳基、任選取代的芳垸基、任選取代的雜芳基和任選取代的雜芳烷基；或者R2和R2,—起形成任選取代的3-7元環(huán)；條件是如果R2和Ry之一為氫，則另一個(gè)不是氫；R12選自任選取代的咪唑基、任選取代的咪唑啉基、-NHR4、-N(R4)(COR3)、-N(R4)(S02R3，-N(R4)(CH2R3b);R3選自氫、任選取代的垸基、任選取代的芳基、任選取代的芳垸基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳垸基、R,sO-和R17-NH-;R^選自任選取代的垸基、任選取代的芳基、任選取代的芳烷基、任選取代的雜芳基和任選取代的雜芳烷基和Rn-NH-;R3b選自氫、任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳垸基；R4選自氫、任選取代的烷基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜環(huán)基-和任選取代的雜芳垸基-;R5、R6、R7和Rg獨(dú)立地選自氫、酰基、任選取代的垸基-、任選取代的烷氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、二院基氨基、烷基磺酰基、烷基磺酰氨基、垸硫基、羧基烷基、酰胺基、氨基羰基、任選取代的芳基和任選取代的雜芳基-;R,5選自任選取代的垸基、任選取代的芳基、任選取代的芳垸基、任選取代的雜芳基和任選取代的雜芳烷基-,Rn選自氫、任選取代的垸基、任選取代的芳基、任選取代的芳垸基、任選取代的雜芳基或任選取代的雜芳垸基，包括單一立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物；式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽；式I的化合物的藥學(xué)可接受的溶劑化物的藥學(xué)可接受的溶劑化物；者式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2和Rr為氫，且Ri選自任選取代的芳基、任選取代的芳烷基、任選取代的雜芳基和任選取代的雜芳烷基，但條件是&不是取代的苯基；R12選自任選取代的咪唑基、任選取代的咪唑啉基、-NHR4、-N(R4)(COR3)、-N(R4)(S02R3a^a-N(R4)(CH2R3b);R3選自氫、任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳烷基、&50-和R17-NH-;R3a選自任選取代的垸基、任選取代的芳基、任選取代的芳烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳烷基和R17-NH-;R3b選自氫、任選取代的垸基、任選取代的芳基、任選取代的芳烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳垸基；R4選自氫、任選取代的垸基-、任選取代的芳基-、任選取代的芳烷基-、任選取代的雜環(huán)基-和任選取代的雜芳烷基-,R5、R6、R7和Rg獨(dú)立地選自氫、?；?、任選取代的垸基、任選取代的烷氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、二垸基氨基、烷基磺?；?、垸基磺酰氨基、烷硫基、羧基烷基、酰胺基、氨基羰基、任選取代的芳基和任選取代的雜芳基-;Ru選自任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳垸基、任選取代的雜芳基和任選取代的雜芳垸基-;且Rn選自氫、任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳烷基、任選取代的雜芳基和任選取代的雜芳烷基，包括單一立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物；式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽；式I的化合物的藥學(xué)可接受的溶劑化物的藥學(xué)可接受的溶劑化物；或者式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2不同于R2,，R2和R2，連接其上的立23體(stereogenic)中心為R構(gòu)型。命名法式I的化合物可以下述的方式命名和編號(hào)(例如用AutoNom2.1版或ISIS-DRAW，其各自利用IUPAC命名系統(tǒng))。例如，化合物即根據(jù)式I的化合物，其中&為芐基，R2為丙基(特別是異丙基)，R2，為氫;Ri2為-N(R0(COR3);113為3,4-二甲基苯基-;R4為3-氨基丙基-;R5、Rg和Rs為氫；而R7為氰基；將其命名為N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氰基_4_氧_411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-3,4-二甲基-苯甲酰胺。同樣，化合物即根據(jù)式I的化合物，其中&為3-甲氧基-節(jié)基，R2為丙基(特別是異丙基)，Rr為氫；Ri2為取代的咪唑啉；R5，R6,和R8為氫；仗7為氯；&為亞甲二氧基苯基-;R1()、R,o,、R"和RM，為氫；可以將其命名為2-[1-(2-苯并[1，3〗二噁茂-5-基-4，5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-7-氯-3-(3-甲氧基-芐基)-色烯國(guó)4-酮(2-[l-(2-benzo[l,3]dioxol-5-yl-4,5-dihydro-imidazol-l-yl)-2-methyl-propyl]-7國(guó)chloro-3-(3-methoxy-benzyl)-chromen-4-one)。式I的化合物的合成式I的化合物可以根據(jù)參照以下反應(yīng)方案所述的方法或者利用本領(lǐng)域中已知的技術(shù)來制備。例如參見Hirao等人(19S4)Synthesis1076-1078和Coppola等人(19S1)Synthesis523-526，它們引入本文作參考。除非另外說明，術(shù)語"溶劑"、"惰性有機(jī)溶劑"或"惰性溶劑"意指在相關(guān)描述的反應(yīng)條件下為惰性的溶劑[例如包括苯、甲苯、乙腈、四氫呋喃("THF")、二甲基甲酰胺("DMF")、氯仿、二氯甲烷(或甲叉二氯)、乙醚、甲醇、吡啶等]。除非有相反的說明，用于本發(fā)明的反應(yīng)的溶劑是惰性有機(jī)溶劑。術(shù)語"q.s."意指加入足以實(shí)現(xiàn)所述功能，例如使溶液變成目標(biāo)體積(即100%)的數(shù)量。一般地，羧酸的酯可以通過常規(guī)酯化方法來制備，例如烷基酯可以通過用適宜的鏈烷醇，通常在酸性條件下處理所需的羧酸來制備。同樣，酰胺可以使用常規(guī)酰胺化方法來制備，例如酰胺可以通過用適宜的胺處理相關(guān)的羧酸來制備?；蛘?，可以任選在三甲基鋁存在下，根據(jù)TetrahedronLett.48,4171-4173，1977所述的方法，用胺處理諸如酸的甲酯的低級(jí)烷基酯，得到所需的酰胺。羧基可以作為烷基酯，例如甲酯得到保護(hù)，所述的酯可以用常規(guī)的方法制備和除去，一種用于將甲酯基轉(zhuǎn)化成羧基的方便的方法是使用氫氧化鋰水溶液。本文提及的化合物的鹽和溶劑化物可以根據(jù)需要用本領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)。例如，如果本發(fā)明的化合物為酸，則可以通過用無機(jī)或有機(jī)堿，如胺(伯、仲或叔)、堿金屬或堿土金屬氫氧化物等處理游離酸來制備所需的堿加成鹽。適宜的鹽的例示性實(shí)例包括由以下物質(zhì)衍生的有機(jī)鹽氨基酸如甘氨酸和精氨酸；氨；伯、仲和叔胺；如乙二胺，和環(huán)胺如環(huán)己胺、哌啶、嗎啉和哌嗪；以及由鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁和鋰衍生的無機(jī)鹽。如果化合物為堿，則所需的酸加成鹽可以通過本領(lǐng)域中已知的任何適宜的方法制備，包括用無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或者用有機(jī)酸如乙酸、馬來酸、琥珀酸、苦杏仁酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、吡喃糖苷酸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、a-羥基酸如檸檬酸或酒石酸、氨基酸如天門冬氨酸或谷氨酸、芳族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸等處理游離堿。如果需要的話，本文所述的化合物和中間體的分離和純化可以通過任何適宜的分離或純化方法，例如過濾、萃取、結(jié)晶、柱色譜法、薄層色譜法或厚層色譜法或者這些方法的組合來實(shí)現(xiàn)?？梢詤⒖急疚囊韵碌膶?shí)施例來具體例示適宜的分離方法。但是，其它等同的分離方法當(dāng)然也可以使用。反應(yīng)方案的簡(jiǎn)要說明反應(yīng)方案1例示式109的化合物，式I的化合物的合成中間體的合成。反應(yīng)方案2例示式I的化合物的合成，其中R12為-N(R4)(COR3)。反應(yīng)方案3例示式I的化合物的合成，其中R7為-OH。反應(yīng)方案4例示式I的化合物的合成，其中R7為-OCH3。反應(yīng)方案5例示式I的化合物的另一合成，其中R12為-N(R4)(COR3)。反應(yīng)方案6例示式I的化合物的合成，其中R12為-N(R4)(S02R3a)。反應(yīng)方案7例示式I的化合物的合成，其中R12為-N(R4)(CH2R3b)。反應(yīng)方案8例示式I的化合物的合成，其中R12為任選取代的咪唑基。反應(yīng)方案9例示式I的化合物的另一合成，其中R,2為任選取代的咪唑基。反應(yīng)方案10例示式I的化合物的合成，其中R12為任選取代的咪唑啉基。反應(yīng)方案11例示式I的化合物的第二種合成，其中R,2為任選取代的咪唑啉基。反應(yīng)方案12例示式I的化合物的合成，其中Ru為-N(R4)(COR3)，其中R3為-OR！5。反應(yīng)方案13例示式I的化合物的合成，其中Ru為-N(R4)(COR3)，其中R3為-NHRn。反應(yīng)方案14例示式1407的化合物的合成，該化合物可以用作合成式I的化合物的中間體。反應(yīng)方案15例示例示式1505的化合物的合成，該化合物可以用作合成式I的化合物的中間體。原料任選取代的式101的化合物可商購得到，例如購自AldrichChemicalCompany,Milwaukee,WI。其它反應(yīng)物同樣可商購得到，或者可以容易地由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用常用的合成方法來制備。反應(yīng)方案l式103的化合物的制備參考反應(yīng)方案1,步驟1，在約1分鐘內(nèi)將約1當(dāng)量的氯甲酸乙酯加入0-5。C的在非極性、非質(zhì)子溶劑如THF中的式101的化合物(優(yōu)選其中的氨基保護(hù)基，PG為Boc基團(tuán))和堿如三乙胺的溶液中。約15分鐘后，在約5分鐘內(nèi)加入在非極性、非質(zhì)子溶劑如THF中的過量二甲基羥胺鹽酸鹽(優(yōu)選約1.2當(dāng)量)和堿如三乙胺的混合物。將產(chǎn)物，式103的化合物分離，并不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。式105的化合物的制備參照反應(yīng)方案1，步驟2,通過在非極性、非質(zhì)子溶劑如乙醚中混合式R,CH2Br的化合物(通常約3當(dāng)量)和鎂屑來制備格氏試劑。通常約1.5小時(shí)后完成格利雅反應(yīng)。將在非極性、非質(zhì)子溶劑如乙醚中的式103的化合物的溶液加入該格氏試劑中。應(yīng)該監(jiān)測(cè)溫度，并使其不超過3(TC。分離并純化產(chǎn)物，式105的化合物。式107的化合物的制備參照反應(yīng)方案1，步驟3,在~3分鐘內(nèi)將雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(約3.3當(dāng)量燥慢加入-78。C的在非極性、非質(zhì)子溶劑如THF中的式105的溶液中。應(yīng)該監(jiān)測(cè)反應(yīng)溶液溫度，并以足以防止溫度超過約-54'C的速度加入堿。在加入完成后，將所得溶液在-78'C下保持約30分鐘。然后加入式106的酰基氯(優(yōu)選純的)。將反應(yīng)溶液于-78i:下保持約30分鐘。分離產(chǎn)物并將其不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。將以上粗產(chǎn)物，堿如碳酸鉀和極性、非質(zhì)子溶劑如DMF的混合物在約室溫下保持約30分鐘。分離并純化產(chǎn)物，式107的化合物。式109的化合物的制備參照反應(yīng)方案l，步驟4，可以任選地從胺上除去保護(hù)基PG。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，除去保護(hù)基的條件隨不同的保護(hù)而變。這些條件在本領(lǐng)域中是已知的，并可以見于，例如Greene等人，上述。當(dāng)PG為Boc時(shí)，可以通過用TFA水溶液(優(yōu)選TFA:H20,97.5:2.5)在室溫下處理式107的化合物來將其除去。分離并純化產(chǎn)物，式109的化合物。旋光化合物的制備在R2不同于R2，的本發(fā)明的化合物中，特定的立體構(gòu)型(如(R)異構(gòu)體)在R2和R2，連接其上的立體中心處可能是優(yōu)選的。該旋光化合物可以通過本領(lǐng)域中已知的方法制備。例如，將式109的胺溶于惰性有機(jī)溶劑(如IPA)，并加熱至60'C。在單獨(dú)的容器中，將拆分試劑(如二苯甲?；?D-酒石酸)溶解，優(yōu)選溶于相同的溫溶劑中，然后將其快速加入(同時(shí)攪拌)溫的胺溶液中。通過在16小時(shí)內(nèi)持續(xù)攪拌下冷卻至室溫使反應(yīng)混合物結(jié)晶。分離并純化所需的異構(gòu)體，例如式109的化合物的(R)異構(gòu)體。為在余下的關(guān)于式I的化合物合成的描述中簡(jiǎn)要起見，應(yīng)該理解可以使用單一異構(gòu)體或異構(gòu)體混合物得到對(duì)應(yīng)的產(chǎn)物。反應(yīng)方案2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>式203的制備參照反應(yīng)方案2，步驟1，向式109的化合物的溶液中連續(xù)加入稍過量(優(yōu)選約1.2當(dāng)量)的包含R4，的醛(即具有式R4，CH0的化合物，其中R4，CH2-等同于上述的R4和R4，或者是這種取代基的受保護(hù)的前體，例如(3-氧-丙基)-氨基甲酸叔丁酯)和還原劑如三乙酸基硼氫化鈉。將所得混合物攪拌數(shù)小時(shí)。分離并純化產(chǎn)物，式203的化合物。式205的制備參照反應(yīng)方案2，步驟2，向在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中的式203的化合物和胺堿如二異丙基乙胺的溶液中加入R3?；?如d-C(0)-R3，其中R3如上述)。將所得溶液于氮?dú)夥蘸褪覝叵聰嚢钄?shù)小時(shí)。分離并純化產(chǎn)物，式205的化合物。式207的制備任選地，然后除去式205的化合物的任何保護(hù)基。例如，如果R4包含保護(hù)基為Boc的受保護(hù)的胺，則可以通過用酸如三氟乙酸在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲垸中的處理式205的化合物，同時(shí)在約室溫下保持反應(yīng)來除去Boc基團(tuán)。該反應(yīng)通過例如TLC監(jiān)測(cè)。一旦完成，分離并純化產(chǎn)物，式207的化合物。反應(yīng)方案3式303的化合物的制備參照反應(yīng)方案3，步驟1，向在非極性、非質(zhì)子溶劑如DMF中的式301的化合物的溶液中加入氫化鈉。將所得溶液于約45'C下攪拌約5分鐘，然后通過移液管加入烯丙醇(約1.4當(dāng)量)。將所得溶液于約45'C下攪拌約12小時(shí)，然后冷卻至室溫。分離產(chǎn)物，式303的化合物，不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。式30S的化合物的制備參照反應(yīng)方案3，步驟2，向在非質(zhì)子溶劑如乙腈中的式303的化合物的室溫溶液中加入嗎啉，然后加入Pd(PPh3)4。將所得溶液攪拌約5分鐘。分離并純化產(chǎn)物，式305的化合物。反應(yīng)方案4參照反應(yīng)方案4，將式401的化合物溶于在甲醇中的0.5M甲醇鈉,并加熱至約7(TC。將溫度于約70'C下持續(xù)約12小時(shí)，然后冷卻至室溫。分離并純化產(chǎn)物，式403的化合物。反應(yīng)方案5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>511步驟6式503的制備參照反應(yīng)方案5，步驟1，室溫下在約5分鐘內(nèi)向在非極性、非質(zhì)子溶劑如CH2Cl2中的式501的化合物和堿如三乙胺的溶液中加入約1當(dāng)量的式C1-(C0)-CH2R的?；?。在約30分鐘后，分離產(chǎn)物，式503的化合物，并不經(jīng)任何進(jìn)一步的純化而使用。式505的化合物的制備參照反應(yīng)方案5，步驟2，在約140'C下，在約15分鐘內(nèi)將A1C13(約1.3當(dāng)量)緩慢加入式503的化合物中。在氣體產(chǎn)生停止后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。分離并純化產(chǎn)物，式505的化合物。式507的化合物的制備參照反應(yīng)方案5，步驟3，將式505的化合物和胺基團(tuán)已被保護(hù)基PG(優(yōu)選Boc基團(tuán))適宜保護(hù)的式506的氨基酸(優(yōu)選約1.1當(dāng)量)、偶合試劑如皿1!;(優(yōu)選約1.2當(dāng)量)、堿如TEA，和非極性、非質(zhì)子溶劑如CH2Cl2在室溫下保持約5小時(shí)。分離并純化產(chǎn)物，式507的化合物。式509的化合物的制備參照反應(yīng)方案5，步驟4，將在極性、非質(zhì)子溶劑如DMF中的式507的酯和堿如碳酸鉀的混合物在約140。C下加熱。約30分鐘后，分離并純化產(chǎn)物，式509的化合物。式Sll的化合物的制備參照反應(yīng)方案5，步驟5，然后除去胺保護(hù)基PG。當(dāng)PG為Boc時(shí)，這可以通過用酸的水溶液(優(yōu)選97.5:2.5TFA:H20)于室溫下處理約1小時(shí)來完成。分離游離胺，并不經(jīng)進(jìn)一步純而使用。將所得產(chǎn)物，包含R4的醛(即具有式R4，CHO的化合物，其中R4，CH2-等于上述的R4和R4，或者是這種取代基的受保護(hù)的前體，例如(3-氧-丙基)-氨基甲酸叔丁酯；優(yōu)選約1.45當(dāng)量)，還原劑如Na(OAc)3BH，和非極性、非質(zhì)子溶劑如CH2C12在室溫下保持約3小時(shí)。分離并純化產(chǎn)物，式511的化合物。式513的化合物的制備參照反應(yīng)方案5，步驟6，室溫下向式511的化合物、堿如二異丙基乙胺，和非極性、非質(zhì)子溶劑如CH2Cl2的溶液中加入式R3COCl的?；?優(yōu)選約2當(dāng)量)。在約2.5小時(shí)后，分離并純化產(chǎn)物，式513的化合物。反應(yīng)方案6參照反應(yīng)方案6，向在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中的式203的化合物和胺堿如二異丙基乙胺的溶液中加入具有式Cl-S(0)rR3a或0-(S(0)2-R3a)2的化合物，其中R3a如上述。將所得溶液于氮?dú)夥蘸褪覝叵聰嚢钄?shù)小時(shí)。分離并純化產(chǎn)物，式603的化合物。反應(yīng)方案7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>參照反應(yīng)方案7，向在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中的式203的化合物和胺堿如二異丙基乙胺的溶液中加入具有式X-CH2-R3b的化合物，其中R3b如上述，而X為Br、Cl、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯。將所得溶液于氮?dú)夥蘸褪覝鼗蚣訜嵯聰嚢钄?shù)小時(shí)。分離并純化產(chǎn)物，式703的化合物。反應(yīng)方案8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>式803的制備參照反應(yīng)方案8，步驟l，在堿(如碳酸鉀)存在下向溶于極性、非質(zhì)子溶劑(如DMF)中的任選取代的式109的化合物中加入1當(dāng)量的任選取代的適宜保護(hù)的醛，其中這種醛還包含離去基團(tuán)，優(yōu)選鹵化物(如溴乙醛二甲基縮醛)。將溶液加熱回流，監(jiān)測(cè)反應(yīng)完成(例如通過TLC)。將反應(yīng)混合物冷卻，并分離并純化對(duì)應(yīng)的任選取代的式803的化合物。式805的制備參照反應(yīng)方案8，步驟2，在約1.5摩爾當(dāng)量的胺堿(如三乙胺)存在下，向在惰性溶劑(如二氯甲烷)中的任選取代的式803的化合物中加入約1.5摩爾當(dāng)量的R9酰基氯，如C1-C(0)-R9，其中R9如本文所述。該反應(yīng)在攪拌和室溫下進(jìn)行4-24小時(shí)。通過例如TLC監(jiān)測(cè)完成。分離并純化對(duì)應(yīng)的式805的化合物。式807的制備參照反應(yīng)方案8,步驟3，將在乙酸中的式805的化合物和過量乙酸銨的溶液加熱回流1-4小時(shí)。通過例如TLC監(jiān)測(cè)完成。分離并純化對(duì)應(yīng)的式807的化合物。反應(yīng)方案9參照反應(yīng)方案9，步驟l，室溫下攪拌在極性、非質(zhì)子溶劑如DMF中的式109的化合物、式R13，(CO)CH2X的a-鹵代酮試劑(其中X為鹵化物，而Ru,如本文所述)，和約1當(dāng)量的堿如碳酸鉀的懸浮液。用水稀釋反應(yīng)物，并未經(jīng)純化而將通常為固體的所得化合物，式903的化合物用于隨后的步驟。如果所得化合物不為固體，則用標(biāo)準(zhǔn)方法分離之，然后用于隨后的步驟。式905的制備參照反應(yīng)方案9，步驟2，將在有機(jī)溶劑如二氯甲烷中的式903的化合物、約1當(dāng)量的胺堿如三乙胺和約1當(dāng)量的?；?如式R9-C0C1的化合物)的溶液于室溫下攪拌數(shù)小時(shí)。通過例如TLC監(jiān)測(cè)完成。分離并純化對(duì)應(yīng)的式905的化合物。式907的制備參照反應(yīng)方案9，步驟3，使用Dean-Stark阱和冷凝器將在乙酸中的式905的化合物和過量乙酸銨的溶液加熱回流。通過例如TLC監(jiān)測(cè)完成。分離并純化對(duì)應(yīng)的式907的化合物。式909的制備參照反應(yīng)方案9，步驟4，當(dāng)Ru,包含受保護(hù)的氨基垸基時(shí)，可以除去氨基保護(hù)的基團(tuán)。例如，當(dāng)氨基作為對(duì)應(yīng)的鄰苯二甲酰亞胺得到保護(hù)時(shí)，如下除去保護(hù)基。將在極性、質(zhì)子溶劑如乙醇中的式907的化合物和過量無水肼的溶液加熱回流。將反應(yīng)物冷卻至5'C，并濾出任何沉淀。將濾液真空濃縮并純化，得到式909的化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，可以用其它條件除去其它保護(hù)基。反應(yīng)方案10<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>式1003的制備參照反應(yīng)方案IO，步驟l，用任選取代的含醛氨基甲酸酯將式109的胺還原氨化，得到尿烷中間體。更具體而言，向在二氯甲烷中的式109的化合物和1當(dāng)量的適宜保護(hù)的醛(Seki等人，Chem.Pharm.Bull.1996，44，2061)的溶液中加入稍過量的還原劑，如三乙酸基硼氫化鈉。將所得混濁混合物保持在室溫下。通過例如TLC監(jiān)測(cè)完成。分離對(duì)應(yīng)的式1003的化合物，并將其不經(jīng)純化而用于隨后的步驟。式1005的制備參照反應(yīng)方案10,步驟2，然后除去氨基保護(hù)基PG。當(dāng)PG為Boc保護(hù)基時(shí)，這可以通過用強(qiáng)酸如三氟乙酸處理在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中的式1003的化合物的溶液來完成。將所得溶液于室溫下保持過夜，并減壓濃縮。分離殘余物，得到式1005的化合物，將其不經(jīng)純化而用于隨后的步驟。式1007的制備參照反應(yīng)方案IO，步驟3，向在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中的式1005的化合物的溶液中加入過量，優(yōu)選約2當(dāng)量的胺堿如三乙胺，然后加入約1當(dāng)量或稍過量的式R9-C0-C1的?；取⑺萌芤河谑覝叵聰嚢杓s3小時(shí)。通過例如TLC監(jiān)測(cè)完成。分離并純化對(duì)應(yīng)的式1007的化合物。式1009的制備參照反應(yīng)方案10，步驟4，將在過量三氯氧化磷中的式1007的化合物的溶液加熱回流。8小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并減壓濃縮。分離并純化對(duì)應(yīng)的式1009的化合物。反應(yīng)方案11<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>式1109的制備作為反應(yīng)方案10的步驟3和4的另一選擇，可在不分離中間體酰胺的情況下將式1005的伯胺酰化，然后進(jìn)行乙酸介導(dǎo)的環(huán)化，產(chǎn)生式1109的目標(biāo)化合物。此路線如反應(yīng)方案ll所示。更具體而言，向在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中的式1005的化合物的溶液中加入過量，優(yōu)選約2當(dāng)量的胺堿，如三乙胺，然后加入約1當(dāng)量的式R9-C0-C1的?；?。將所得溶液于室溫下攪拌2小時(shí)，然后減壓蒸發(fā)。用冰醋酸處理所得固體，然后將所得懸浮液加熱回流約48小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，然后減壓蒸發(fā)。分離并純化對(duì)應(yīng)的式1109的化合物。反應(yīng)方案12Rs0ls9203參照反應(yīng)方案12，使式203的化合物與稍過量的式R150(C0)C1的化合物在堿如三乙胺存在下，在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)。分離并純化產(chǎn)物，式1203的化合物。參照反應(yīng)方案13，使式203的化合物與稍過量的異氰酸酯R17-N=C=0在堿如三乙胺存在下，在非極性、非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)。分離并純化產(chǎn)物，式1303的化合物。反應(yīng)方案141407式1403的化合物的制備參照反應(yīng)方案14，步驟l，將非極性、非質(zhì)子溶劑如THF，和在非極性、非質(zhì)子溶劑中的過量任選取代的乙烯基溴化鎂的溶液(更優(yōu)選在THF中的約3當(dāng)量的1.0M任選取代的乙烯基溴化鎂的溶液)冷卻至-78。C，同時(shí)在氮?dú)夥障聰嚢?。在約30分鐘內(nèi)滴加在非極性、非質(zhì)子溶劑如THF中的式1401的化合物的溶液來處理混合物。將混合物在-78'C下攪拌30分鐘后，移出冷卻浴，并使反應(yīng)混合物緩慢暖至室溫過夜(約15小時(shí))。分離并純化產(chǎn)物，式1403的化合物。式1405的化合物的制備參照反應(yīng)方案14，步驟2，在惰性氣氛，如氬氣氛下，向在無水、非極性、非質(zhì)子溶劑如乙腈中的式1403的化合物的溶液中加入約1當(dāng)量的式R,，-X的化合物(其中Rr是任選取代的乙烯基、任選取代的芳基或任選取代的雜芳基，而X為I、Br或-OTf)，和堿如三乙胺，然后加入乙酸鈀(II)(優(yōu)選約0.025當(dāng)量)。將所得溶液加熱至約80'C。約15小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。分離并立即純化產(chǎn)物，式1405的化合物。式1407的化合物的制備在氮?dú)夥障?，向在非極性、非質(zhì)子溶劑如乙酸乙酯中的式1405的化合的的溶液中加入10重量％擔(dān)載在碳上的鈀。用氫氣球置換氮，并清洗燒瓶。3小時(shí)后，用氮清洗反應(yīng)燒瓶，并用C鹽濾墊過濾(用溶劑如乙酸乙酯沖洗)。分離并純化產(chǎn)物，式1407的化合物。反應(yīng)方案15is的式1503的化合物的制備參照反應(yīng)方案15，步驟l，將約1當(dāng)量的羰基二咪唑緩慢加入在非極性、非質(zhì)子溶劑如THF中的式1501的化合物(優(yōu)選其中的氨基保護(hù)基PG為Boc)的室溫溶液中。在約1小時(shí)后，分離產(chǎn)物，式1503的化合物，并不經(jīng)純化而使用。式1505的化合物的制備參照反應(yīng)方案15，步驟2,由在非極性、非質(zhì)子溶劑如THF中的式R,CH2Br的化合物和鎂屑制備格氏試劑。將在非極性、非質(zhì)子溶劑如THF中的式1503的化合物的溶液冷卻至約0-5°C。然后通過注射器將格氏試劑的溶液加入式1503的化合物的0-5'C的溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)溫度，并使其不超過約15°C。將反應(yīng)混合物在約0-5'C下保持約1小時(shí)。分離并純化產(chǎn)物，式1505的化合物。優(yōu)選的方法和最終步驟使式I的化合物任選與藥學(xué)可接受的酸或堿接觸以形成對(duì)應(yīng)的酸或堿加成鹽。使式I的化合物的藥學(xué)可接受的酸加成鹽任選與堿接觸以形成對(duì)應(yīng)的式I的游離堿。使式I的化合物的藥學(xué)可接受的堿加成鹽任選與酸接觸以形成對(duì)應(yīng)的式I的游離酸。優(yōu)選的化合物當(dāng)R2或R2，不為氫時(shí)優(yōu)選的R,當(dāng)考慮式I的化合物時(shí)，在R2或R2，之一不為氫或都不為氫(更優(yōu)選R2或R2，之一不為氫)時(shí)的優(yōu)選的實(shí)施方案中，&選自氫、任選取代的CrC8垸基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的芳基-CVC4-垸基-和任選取代的雜芳基-CVC4-烷基-(更優(yōu)選任選取代的芳基和任選取代的芳基-C,-C4-烷基-)。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R,選自氫、任選取代的CVC4垸基、任選取代的苯基-CrC4-垸基-、任選取代的萘基甲基、任選取代的苯基，和萘基。更優(yōu)選R,為任選取代的苯基-Q-C4-垸基-或任選取代的雜芳基-Ci-C4-院基-。在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，Ri為萘基、苯基、溴苯基、氯苯基、甲氧基苯基、乙氧基苯基、甲苯基、二甲基苯基、氯氟苯基、甲基氯苯基、乙基苯基、苯乙基、芐基、氯芐基、甲基芐基、甲氧基芐基、氰基芐基、羥基芐基、二氯節(jié)基、二甲氧基芐基或萘基甲基。更優(yōu)選&為芐基、氰基芐基、甲氧基芐基或萘基甲基。最優(yōu)選R,為芐基。R2和Rr為氫時(shí)優(yōu)選的I^在R2和R2，均為氫的實(shí)施方案中，優(yōu)選R,選自任選取代的芳基、任選取代的芳基-Q-C4-烷基-、任選取代的雜芳基和任選取代的雜芳基-Ci-Cr垸基-,但條件是Ri不是取代的苯基。更優(yōu)選R!為任選取代的芳基-CrC4烷基-或任選取代的雜芳基-CrCr垸基-。更優(yōu)選當(dāng)R2和R2，均為氫時(shí)，&選自任選取代的苯基-Q-C4-烷基和任選取代的萘基甲基。在R2和R2，均為氫的更優(yōu)選的實(shí)施方案中，^選自芐基、氯芐基、甲基芐基、甲氧基芐基、氰基節(jié)基、羥基節(jié)基、二氯芐基、二甲氧基芐基和萘基甲基。更優(yōu)選&為芐基、氰基芐基、甲氧基芐基或萘基甲基。更優(yōu)選R!為芐基。優(yōu)選的R2在考慮式I的化合物時(shí)，并且如本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的，本文所述的化合物在R2和R2，連接其上的碳上具有可能的手性中心。R2和R2，基團(tuán)可以相同或不同；如果不同的話，該化合物是手性的(即具有立體中心)。當(dāng)R2和R2,不同時(shí)，在優(yōu)選的的實(shí)施方案中Rr為氫，而R2不為氫。本發(fā)明包括使用純對(duì)映異構(gòu)體和對(duì)映異構(gòu)體混合物，包括外消旋混合物，雖然通常優(yōu)選使用基本上光學(xué)純的對(duì)映異構(gòu)體。術(shù)語"基本上光學(xué)純的"或者"對(duì)映異構(gòu)體純的"意指具有至少約95%的所描述的對(duì)映異構(gòu)體，而沒有一種雜質(zhì)超過約1%，優(yōu)選至少約97.5%對(duì)映異構(gòu)體過量。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2和R2,連接其上的立體中心是R構(gòu)型。在一個(gè)實(shí)施方案中，R2為任選取代的CVC4垸基，而R2，為氫或任選取代的d-C4垸基。更優(yōu)選R2，為氫，而R2為任選取代的Q-C4烷基。在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2選自甲基、乙基、丙基(特別是環(huán)丙基或異丙基)、丁基(特別是叔丁基)、甲硫基乙基、甲硫基甲基、氨基丁基、(CBZ)氨基丁基、環(huán)已基甲基、芐氧基甲基、甲基亞硫?；一?、甲基亞硫?；谆土u基甲基，而R2，為氫。特別優(yōu)選當(dāng)R2，為氫時(shí)，R2為乙基或丙基(特別是環(huán)丙基或異丙基)。更優(yōu)選R2為異丙基。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2和R2,連接其上的立體中心是R構(gòu)型。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2和Rr均為氫。當(dāng)R12為-N(R4)(COR3)時(shí)優(yōu)選的R3基團(tuán)當(dāng)考慮式I的化合物(其中R12為-N(R4)(COR3))時(shí)，在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3選自任選取代的CrC8烷基、任選取代的芳基-CVC4-烷基-、任選取代的雜芳基-C,-C4-烷基-、任選取代的雜芳基、任選取代的芳基、R150-和Rn-NH-，1115選自任選取代的CVQ烷基和任選取代的芳基，而Rn選自氫、任選取代的CVCV烷基和任選取代的芳基。優(yōu)選的R3是任選取代的Q-CV烷基(例如被低級(jí)垸氧基取代的Q-Q烷基)、任選取代的雜芳基和任選取代的芳基。在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R3不為RnNH-或R"0-時(shí)，R3選自苯基；被一個(gè)或多個(gè)以下取代基取代的苯基鹵素、CrC4烷基、被羥基取代的CrCV烷基(例如羥基甲基)、CrCV烷氧基、被CrCV烷氧基取代的Q-Q烷基、硝基、甲酰基、羧基、氰基、亞甲二氧基、亞乙二氧基、?；?例如乙酰基)、-N-酰基(例如N-乙酰基)或三氟甲基；芐基；苯氧基甲基-;卣代苯氧基甲基-;苯基乙烯基-;雜芳基-;被Q-C4烷基取代的雜芳基或被鹵素取代的CVC4烷基(例如CF3);被d-C4烷氧基-和芐氧基甲基-取代的Q-C4垸基。在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R3不為RnNH-或R450-時(shí)，R3選自苯基、卣代苯基、二卣代苯基、氰基苯基、鹵代(三氟甲基)苯基、羥基甲基苯基、甲氧基苯基、乙氧基苯基、羧基苯基、乙基苯基、甲苯基、亞甲二氧基苯基、亞乙二氧基苯基、甲氧基氯苯基、二氫-苯并二噁烯基(dihydro-benzodioxinyl)、甲基鹵代苯基、三氟甲基苯基、雙(三氟甲基)苯基芐基、呋喃基、C,-C4垸基取代的呋喃基、三氟甲基呋喃基、CrQ烷基取代的三氟甲基呋喃基、苯并呋喃基、苯硫基、CrC4烷基取代的苯硫基、苯并噻吩基、苯并噻二唑基、吡啶基、H引哚基、甲基吡啶基、三氟甲基吡啶基、吡咯基、喹啉基、甲代吡啶基、吡唑基、C,-C4烷基取代的吡唑基、N-甲基吡唑基、Q-C4垸基取代的N-甲基吡唑基、d-C4垸基取代的吡嗪基、CrC4烷基取代的異噁唑基、苯并異噁唑基、嗎啉代甲基、甲硫基甲基、甲氧基甲基、N-甲基咪唑基和咪唑基。進(jìn)一步更優(yōu)選地，R3為甲苯基、鹵代苯基、鹵代甲基苯基、羥基甲基苯基、亞甲二氧基苯基、甲?；交蚯杌交?。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R3為RnNH-時(shí)，Rn選自氫、CVC4烷基；環(huán)己基；苯基；和被鹵素、d-C4烷基、d-C4烷氧基或C,-C4烷硫基取代的苯基。在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R3為R7NH-時(shí)，Rn為氫、異丙基、丁基、環(huán)己基、苯基、溴苯基、二氯苯基、甲氧基苯基、乙基苯基、甲苯基、三氟甲基苯基或甲基硫代苯基。在R3為RisO-的實(shí)施方案中，R,5選自任選取代的CrQ垸基和任選取代的芳基。當(dāng)R12為-N(R4)(S02R3a)時(shí)優(yōu)選的R3a基團(tuán)優(yōu)選地，當(dāng)Rl2為-N(R4)(S02R3a)時(shí)，R3a選自C廣C3垸基；苯基；萘基；被鹵素、Q-Q烷基、CrCV烷氧基、氰基、硝基、亞甲二氧基或三氟甲基取代的苯基；聯(lián)苯基和雜芳基。更優(yōu)選R3a選自被鹵素、d-C4垸基、Q-C4烷氧基、氰基、硝基、亞甲二氧基或三氟甲基取代的苯基和萘基。當(dāng)R12為-N(R4)(CH2R3b)時(shí)優(yōu)選的R3b基團(tuán)優(yōu)選地，當(dāng)R12為-N(R4)(CH2R3b)時(shí)，R3b選自C廣Cu烷基;取代的C廣C4垸基；苯基；萘基；被羧基、烷氧羰基、氰基、鹵素、CVQ烷基-、CrC4垸氧基、硝基、亞甲二氧基或三氟甲基取代的苯基；聯(lián)苯基，芐基；和雜最優(yōu)選，R3b選自鹵代苯基、多鹵代苯基、甲基^代苯基、甲苯基、二甲基苯基、甲氧基苯基、二甲氧基苯基、氰基苯基、三氟甲基苯基、三氟甲氧基苯基、雙(三氟甲基)苯基、羧基苯基、叔丁基苯基、甲氧羰基苯基、哌啶基和萘基。當(dāng)r12為-NHR4、^(^)((:0113)或-]^(114)(<:1121131))時(shí)優(yōu)選的Rj基團(tuán)在優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R,為-NHR4、-N(R4)(COR3:^-N(R4XCH2R3b)時(shí)，R4選自氫、任選取代的CVC,3烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基-d-Cr烷基-、任選取代的雜環(huán)基和任選取代的雜芳基-CVCr烷基-(優(yōu)選氫或任選取代的Q-Cu垸基)。更優(yōu)選R4選自氫、Q-C4垸基；環(huán)己基；被羥基、C廣C4垸氧基或C-C4烷基取代的苯基；芐基；雜芳基甲基-;雜芳基乙基-;雜芳基丙基-;和Rw-亞烷基-，其中R,6為羥基、二(CrQ垸基)氨基-、(Q-C4烷基)氨基-、氨基、CVC4烷氧基-或N-雜環(huán)基-，特別是吡咯烷基、哌啶子基或咪唑基。更優(yōu)選R4為Rw-亞烷基-，其中Ri6為氨基、CrC4烷基氨基-、二(C,-C4烷基)氨基-、Q-C4烷氧基-、羥基或N-雜環(huán)基。優(yōu)選R^為氨基。在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)Ri2為-NHR4、-N(R4)(COR3)或-N(R4)(:CH2R3b:^，R4選自氫、甲基、乙基、丙基、丁基、環(huán)己基、羧基乙基、羧基甲基、甲氧基乙基、羥基乙基、羥基丙基、二甲基氨基乙基、二甲基氨基丙基、二乙基氨基乙基、二乙基氨基丙基、氨基丙基、甲基氨基丙基、2，2-二甲基-3-(二甲基氨基)丙基、l-環(huán)己基-4-(二乙基氨基)丁基、氨基乙基、氨基丁基、氨基戊基、氨基己基、氨基乙氧基乙基、異丙基氨基丙基、二異丙基氨基乙基、1-甲基~4-(二乙基氨基)丁基、(t-Boc)氨基丙基、羥基苯基、節(jié)基、甲氧基苯基、甲基甲氧基苯基、二甲基苯基、甲苯基、乙基苯基、(氧代吡咯烷基)丙基、(甲氧羰基)乙基、芐基哌啶基、吡啶基乙基、吡啶基甲基、嗎啉基乙基、嗎啉基丙基、哌啶基、氮雜環(huán)丁垸基甲基、氮雜環(huán)丁烷基乙基、氮雜環(huán)丁烷基丙基、吡咯烷基乙基、吡咯垸基丙基、哌啶基甲基、哌啶基乙基、咪唑基丙基、咪唑基乙基、(乙基吡咯烷48基)甲基、(甲基吡咯烷基)乙基、(甲基哌啶基)丙基、(甲基哌嗪基)丙基、呋喃基甲基和吲哚基乙基。更優(yōu)選R4為氨基乙基、氨基丙基、氨基丁基、氨基戊基、氨基己基、甲基氨基乙基、甲基氨基丙基、甲基氨基丁基、甲基氨基戊基、甲基氨基己基、二甲基氨基乙基、二甲基氨基丙基、二甲基氨基丁基、二甲基氨基戊基、二甲基氨基己基、乙基氨基乙基、乙基氨基丙基、乙基氨基丁基、乙基氨基戊基、乙基氨基己基、二乙基氨基乙基、二乙基氨基丙基、二乙基氨基丁基、二乙基氨基戊基或二乙基氨基己基，最優(yōu)選氨基丙基。當(dāng)R12為-N(R4)(S02R3a)時(shí)優(yōu)選的R4基團(tuán)優(yōu)選地，當(dāng)R^為-N(R4)(S02R3a)時(shí)，R4選自Ci-CV烷基、環(huán)己基；被羥基、d-Q烷氧基或Q-C4烷基取代的苯基；芐基；雜芳基甲基-;雜芳基乙基-;雜芳基丙基-,,雜芳基乙基-;雜芳基丙基-和R^亞烷基-，其中R^為羥基、二(CVQ烷基)氨基-、(CrQ垸基)氨基-、氨基、CVCV烷氧基-或N-雜環(huán)基-，特別是吡咯垸基、哌啶子基或咪唑基。Ru為咪唑優(yōu)選地，當(dāng)Ru為咪唑時(shí)，Ri2具有下式其中R9選自氫、任選取代的Q-C8垸基、任選取代的芳基、任選取代的芳基-CrCr烷基-、任選取代的雜芳基-CrC4-垸基-、任選取代的芳基-CrQ-烷氧基-、任選取代的雜芳基-Q-C4-烷氧基-、任選取代的雜芳基-;而R3和Ru,獨(dú)立地為氫、任選取代的d-Cs烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基-CVC4-烷基-(優(yōu)選任選取代的芳萄。更優(yōu)選R9為被Q-C4-烷基、Q-Cr垸氧基-和/或鹵素(特別是CVCr烷基和/或鹵素)取代的苯基；苯基；或芐基。進(jìn)一步更優(yōu)選R9為甲苯基；鹵代苯基；或卣代甲基苯基。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，Rn為氫，而R,3,為取代的CrCV烷基。更優(yōu)選R13為氫，而R^為氨基甲基、氨基乙基、氨基丙基、乙酰氨基-甲基、乙酰氨基乙基、芐氧羰基氨基-甲基或芐氧羰基氨基-乙基。Rl2為咪唑啉優(yōu)選地，當(dāng)Ro2為咪唑啉時(shí)，R12具有下式其中R9選自氫、任選取代的Q-C8垸基、任選取代的芳基、任選取代的芳基-CrC4-烷基-和任選取代的雜芳基-;而Rk)、R1()，、R14和R^獨(dú)立地選自氫、任選取代的C-C8烷基、任選取代的芳基和任選取代的芳基-CrC4-烷基-。更優(yōu)選R9為亞甲二氧基苯基；苯基；被C,-C4烷基、d-Cj烷氧基和/或鹵素取代的苯基；或芐基。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R9為亞甲二氧基苯基-;苯基；或被甲氧基、鹵素和/或甲基(優(yōu)選鹵素和域甲基，包括甲苯基)取代的苯基，更優(yōu)選亞甲二氧基苯基或所述取代的苯基。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1Q、R1Q，、Rw和R"獨(dú)立地為氫或任選取代的烷基(優(yōu)選任選取代的d-C4烷基)。更優(yōu)選R,o和Ru),獨(dú)立地選自氫或任選取代的CVC4烷基(更特別為甲基或氨基烷基-)，而Rw和R14為氫。優(yōu)選的Rs、R6、R7和Rs基團(tuán)當(dāng)考慮式I的化合物時(shí)，在其他優(yōu)選的實(shí)施方案中，R5、R6、R7和Rg獨(dú)立地選自氫；?；榛?；被烷基、垸氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、二烷基氨基、烷基磺?；?、垸基磺酰氨基、垸硫基、羧基烷基、酰胺基、氨基羰基、低級(jí)烷基氨基羰基-(例如甲基氨基羰基-或乙基氨基羰基-)、二(低級(jí)烷基)氨基羰基-(例如二甲基氨基羰基-或二乙基氨基羰基-)、芳基或雜芳基取代的烷基；烷氧基；被烷基、?；?、垸氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、二垸基氨基、烷基磺酰基、垸基磺酰氨基、烷硫基、羧基烷基、酰胺基、氨基羰基、低級(jí)烷基氨基羰基-(例如甲基氨基羰基-或乙基氨基羰基-)、二(低級(jí)垸基)氨基羰基-(例如二甲基氨基羰基-或二乙基氨基羰基-)、芳基或雜芳基取代的烷氧基；鹵素；羥基；硝基；氰基；二烷基氨基；烷基磺?；?；烷基磺酰氨基；烷硫基；羧基烷基；酰胺基；酰氨基羰基；芳基；被烷基、?；⑼檠趸?、鹵素、羥基、硝基、氰基、二烷基氨基、烷基磺酰基、垸基磺酰氨基、烷硫基、羧基垸基、酰胺基、氨基羰基、低級(jí)烷基氨基羰基-(例如甲基氨基羰基-或乙基氨基羰基-)、二(低級(jí)烷基)氨基羰基-(例如二甲基氨基羰基-或二乙基氨基羰基-)、芳基或雜芳基取代的芳基；雜芳基或被烷基、?；?、烷氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、二烷基氨基、垸基磺?；?、烷基磺酰氨基、烷硫基、羧基垸基、酰胺基、氨基羰基、低級(jí)烷基氨基羰基-(例如甲基氨基羰基-或乙基氨基羰基-)、二(低級(jí)垸基)氨基羰基-(例如二甲基氨基羰基-或二乙基氨基羰基-)、芳基或雜芳基取代的雜芳基。更優(yōu)選Rs、R6、R7和Rs獨(dú)立地選自氫、氨基、烷基氨基、羥基、鹵素(特別是氯和氟)、C廣C4烷基(特別是甲基)、CrQ鹵代烷基(特別是三氟甲基)、d-C4垸氧基(特別是甲氧基)、CrC4鹵代垸氧基和氰基。更優(yōu)選R5、&、R7和Rg為甲氧基、氫、氰基或鹵素(特別是C1、F)。各具體的取代基進(jìn)一步優(yōu)選Rs為氨基、烷基氨基、三氟甲基、氫或鹵素；R6為氫、烷基(特別是甲基)或卣素；R為氫、卣素、烷基(特別是甲基)、烷氧基(特別是甲氧基)、氰基或三氟甲基；而Rs為氫或鹵素。更進(jìn)一步優(yōu)選這樣的化合物，其中Rs、R6、R7和Rs中僅一個(gè)不為氫，特別是R7。更優(yōu)選這樣的化合物，其中Rs、R6和Rg為氫，而R7為氰基、甲氧基或鹵素(特別是Cl、F)。優(yōu)選的鹽形式優(yōu)選的化合物通常能夠形成酸加成鹽(即包含與藥學(xué)可接受的酸反應(yīng)形成酸加成鹽的部位)。本發(fā)明包括式I的化合物的藥學(xué)可接受的酸加成鹽。本發(fā)明的化合物的酸加成鹽以標(biāo)準(zhǔn)方式，在適宜的溶劑中，由母體化合物和過量酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、馬來酸、琥珀酸或甲磺酸制備。優(yōu)選的鹽形式為鹽酸鹽、磷酸鹽和草酸鹽，特別優(yōu)選鹽酸鹽形式。非藥學(xué)可接受的本發(fā)明化合物的鹽和/或溶劑化物可以用作制備式(1)的化合物的藥學(xué)可接受的鹽和域溶劑化物的中間體或式(I)的化合物本身，其本身構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。優(yōu)選的亞屬在式I的化合物的特別優(yōu)選的亞屬中，R,為芐基、鹵代芐基、甲氧基芐基-、氰基芐基或萘基甲基-;R2為乙基或丙基；R2，為氫；R5為氫；&為氫；R7為鹵素、氰基、甲氧基或氫；Rg為氫；而Ri2為-NR4(COR3)，其中R3為任選取代的芳基(優(yōu)選鹵代苯基、鹵代甲基苯基-、亞甲二氧基苯基-、甲氧基苯基-、乙氧基苯基-、氰基苯基-或被低級(jí)?；虻图?jí)垸基氨基羰基-，例如甲基氨基羰基-或乙基氨基羰基-，或二(低級(jí)烷基)氨基羰基-，例如二甲基氨基羰基-或二乙基氨基羰基-取代的苯基；而R4為Ri6-亞烷基-，其中Rw為羥基、二(Q-C4)垸基氨基-、(d-C4烷基)氨基-、氨基、吡咯垸基、哌啶子基、咪唑基和嗎啉代(更優(yōu)選在此實(shí)施方案中，R!為芐基、鹵代芐基、甲氧基芐基、氰基芐基或萘基甲基；而R2為丙基(特別是異丙基-或環(huán)丙基)。在式I的化合物的另一個(gè)特別優(yōu)選的亞屬中，R^為芐基、鹵代芐基、甲氧基芐基-、氰基芐基或萘基甲基-;R2為乙基或丙基；R2，為氫；Rs為氫；R6為氫；R7為卣素、氰基、甲氧基或氫；Rg為氫；R12為-順(012&0，其中R4為Rw-亞垸基-，其中R，6為羥基、二(CrC4)烷基氨基-、(C廣C4垸基)氨基-、氨基、吡咯烷基、哌啶子基、咪唑基或嗎啉代；而R3b為任選取代的芳基。在式I的化合物的特別優(yōu)選的亞屬中，R,為芐基、鹵代芐基、甲氧基芐基、氰基芐基或萘基甲基；R2選自乙基或丙基；Rr為氫；R5為氫；Re為氫；R7為鹵素、氰基、甲氧基或氫；Rg為氫；而R,2為上式的任選取代的咪唑啉基，其中R1G、R1()，、R"和Ri4，獨(dú)立地為氫或任選取代的垸基(優(yōu)選任選取代的C,-C4垸基)；而R9為任選取代的苯基(優(yōu)選卣代苯基、卣代甲基苯基、甲苯基或亞甲二氧基苯基)。更優(yōu)選在此實(shí)施方案中，R,為節(jié)基、甲氧基芐基或氰基芐基；R2為丙基(特別是異丙基或環(huán)丙基)；而R16為氨基。在式I的化合物的特別優(yōu)選的亞屬中，R,為芐基、鹵代卡基、甲氧基芐基、氰基芐基或萘基甲基；R2選自乙基或丙基；R2，為氫；R5為氫；&為氫；R7為鹵素、氰基、甲氧基或氫；Rs為氫；而R,2為上式的任選取代的咪唑，其中R13為氫，而R,3，為氫或任選取代的烷基(優(yōu)選任選取代的CrC4垸基)；而R9為任選取代的芳基(優(yōu)選鹵代苯基、鹵代甲基苯基、甲苯基或亞甲二氧基苯基)。更優(yōu)選Ru為氫，而R,3，為氨基甲基、氨基乙基、氨基丙基、乙酰氨基-甲基、乙酰氨基乙基、芐氧羰基氨基-甲基或芐氧羰基氨基-乙基。更優(yōu)選在此實(shí)施方案中，R,為芐基、甲氧基芐基或氰基芐基；R2為丙基(特別是異丙基或環(huán)丙基)；而Rw為氨基。當(dāng)Ru為-N(R4)(S02R3a)時(shí)，R,最優(yōu)選選自Q-C4烷基、芐基、取代的芐基和取代的苯基；R2為CrC4垸基；&，為氫；R3a選自取代的苯基和萘基；R4為Rw-亞烷基-;R7為氫、氟、甲基或氯；R5、和R8為氫；而1116選自羥基、二(Q-C4)氨基、(CVCV烷基)氨基、氨基、吡咯垸基、哌啶子基、咪唑基和嗎啉代。當(dāng)R12為-NHR4或-N(R4)(CH2R3b)時(shí),Rt優(yōu)選選自氫、任選取代的CrC4烷基、任選取代的芐基、任選取代的苯基和任選取代的萘基甲基；R2為任選取代的CH34烷基，而R2，為氫；R3b選自任選取代的烷基；任選取代的苯基；聯(lián)苯基，任選取代的芳垸基；和任選取代的雜環(huán)基；而R4選自氫，任選取代的CrCV烷基；環(huán)己基；任選取代的苯基；任選取代的芐基；雜環(huán)基；雜芳基甲基；雜芳基乙基；和雜芳基丙基。更優(yōu)選R4為R『亞垸基_，其中Rt6為羥基、二(d-C4)烷基氨基-、(d-CV烷基)氨基-、氨基、CrC4垸氧基-或N-雜環(huán)基。當(dāng)Ri2為-NHR4或-N(R4)(CH2R3b)時(shí)，最優(yōu)選選自C廣C4垸基、任選取代的芐基和任選取代的苯基(更優(yōu)選任選取代的芐基，例如節(jié)基、氰基節(jié)基)；R2為任選取代的CrC4烷基(更優(yōu)選丙基，特別是異丙基或環(huán)丙基)；R2，為氫；R3b選自任選取代的苯基、任選取代的雜環(huán)基和萘基；R4選自氫、任選取代的芐基、任選取代的雜環(huán)基，和R,6-亞烷基-;R6和R7選自齒素、氰基、甲氧基或氫；R5和R^為氫；而R^選自二(CrC4烷基氨基)-、(CrC4垸基)氨基-、氨基、吡咯烷基、哌啶基、咪唑基和嗎啉基。在式I的化合物的特別優(yōu)選的亞屬中，R,為芐基、鹵代節(jié)基(特別是Cl-芐基和F-芐基)、甲氧基芐基-、氰基芐基或萘基甲基-;尺2為乙基或丙基；R2，為氫；Rs為氫；Re為氫；&為鹵素、氰基、甲氧基或氫；Rs為氫；而R^為-NHR4，其中R4為氫(更優(yōu)選在此實(shí)施方案中，Ri為芐基、鹵代芐基、氰基芐基；而R2為丙基，特別是異丙基或環(huán)丙基)。當(dāng)R3b存在時(shí)，它最優(yōu)選選自被一個(gè)或多個(gè)鹵素、甲基、甲氧基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基和或甲氧羰基取代的苯基[例如鹵代苯基、多鹵代苯基、甲苯基、二甲基苯基、甲氧基苯基、二甲氧基苯基、氰基苯基、三氟甲基苯基、三氟甲氧基苯基、雙(三氟甲基)苯基、羧基苯基、叔丁基苯基、甲氧羰基苯基];哌啶基和萘基。特別優(yōu)選的化合物包括^(3-氨基-丙基)-^{1-[3-(3-氰基-芐基)-7-羥基-4-氧-411-色烯-2-基〗-2-甲基-丙基}-3-氟-4-甲基-苯甲酰胺；4-乙酰基-1^(3-氨基-丙基)^-[1-(3-芐基-7-甲氧基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-苯甲酰胺；2_{1_[4-(2-氨基-乙基)-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-3-芐基-4-氧-4H-色烯-7-腈；3-節(jié)基-2-[l-(4，4-二甲基-2-對(duì)甲苯基-4，5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]4-氧-4H-色烯-7-腈；苯并[1，3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基)-{1-[7-氯-3-(3-氰基-芐基)-4-氧-很-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-0-[7-氯-3-(3-氰基-芐基)-4-氧-4H-色烯-2-基]-2畫甲基-丙基H-甲基-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(7-氯-3-萘-l-基甲基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-2-甲氧基-乙酰胺；4-乙?；?1^(3-氨基-丙基)-^[1-(3-芐基-7-氰基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[7-氯-3-(3-氰基-芐基)-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-3-氟-4-甲基-苯甲酰胺；苯并[l，3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；苯并[l，3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；3國(guó)芐基_2_[1_(4，4-二甲基-2-對(duì)甲苯基-4，5-二氫-咪唑-1-基)-2-甲基-丙基]-7-羥基-色烯-4-酮；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]_3_氣_4_甲基-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-節(jié)基-7-甲氧基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]_3-氟-4-甲基-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[1-(3-芐基-7-甲氧基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-4-甲基-苯甲酰胺；3-芐基-2-[l-(4，4-二甲基-2-對(duì)甲苯基-4,5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-7-甲氧基-色烯-4-酮；3-節(jié)基-7-氟-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4，4-二甲基-4，5-二氫-咪唑-1-基〗-2-甲基-丙基}-色烯-4-酮；3-節(jié)基-2-[l-(4，4-二甲基-2-對(duì)甲苯基-4,5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-7-氟-色烯-4-酮；3-節(jié)基-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4,4-二甲基-4,5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-7-氰基-色烯-4-酮；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-4-甲基-苯甲酰胺；4-乙酰基-N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-苯甲酰胺；>^-(3-氨基-丙基)-3-氟-]^{1-[7-氟-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-411-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-4-甲基-苯甲酰胺；4-乙?；?N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[7-氯畫3-(3-氰基-芐基)-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-苯甲酰胺；(2-(l-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-2-對(duì)甲苯基_舊-咪唑-4-基卜乙基)-氨基甲酸芐酯；2-[1-(2-苯并[1，3]二噁茂-5-基-4，4-二甲基-4，5-二氫-咪挫-1-基)-2-甲基-丙基]-3-節(jié)基-7-氰基-色烯-4-酮；4-乙酰基-N-(3-氨基-丙基)-N-[I-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-3-氟-4-甲基-苯甲酰胺；^(3-氨基-丙基)-^{1-[7-氟-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-411-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-4-甲氧基-苯甲酰胺；苯并[1,3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基)-{1-[7-氟-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-很-色烯-2-基]-2-甲基-丙基卜酰胺；2-{1_[4-(2-氨基-乙基)-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-羥基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]_3_氣_4-甲基-苯甲酰胺；苯并[l,3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-羥基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-4-甲基-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-(1-[7-氟-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-411-色烯-2-基〗-2-甲基-丙基}-2-甲氧基-乙酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-0-[7-氟-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-4-甲基-苯甲酰胺；56>1-(3-氨基-丙基)-1^[(3-芐基-7-氯-4-氧-411-色烯-2-基)-環(huán)丙基-甲基]-4-甲基-苯甲酰胺；2，3-二氫-苯并[1,4]二噁烯-6-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氯-4-氧-很-色烯-2-基>2-甲基-丙基]-酰胺；N-(3-氨基-丙基)-3-氟-N-0-[7-氰基-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基M-甲基-苯甲酰胺；3-芐基-7-氯-2-[2-甲基-l-(2-對(duì)甲苯基-4，5-二氫-咪唑-l-基)-丙基]-色烯-4-酮；3-芐基-7-氟-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4,5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}_色烯_4-酮；2-[l-(4-氨基甲基-2-對(duì)甲苯基-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-3-節(jié)基-7-氯-色烯-4-酮；3_芐基_7_甲氧基_2_[2_甲基小(2_對(duì)甲苯基_4,5-二氫-咪唑-1-基)-丙基〗-色烯-4-酮；2誦[l-(2-苯并[l,3]二噁茂-5-基-4，5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮；4畫乙?；?N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-苯甲酰胺；4-乙?；?^(3-氨基-丙基)-1^-{1-[7-氰基-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-411-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-苯甲酰胺；3-節(jié)基-7-氯-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4,5-二氫-咪唑小基]-2-甲基-丙基}-色烯-4-酮；3-芐基-7-氟-2-[2-甲基-l-(2-對(duì)甲苯基-4,5-二氫-咪唑-l-基)-丙基]-色烯-4-酮；2-[l-(2-苯并[l，3]二噁茂-5-基-4,5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-3-芐基-7-氟-色烯-4-酮；>^-(3-氨基-丙基)-^[-{1-[7-氰基-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-411-色烯-2-基]-2-甲基-丙基M-甲基-苯甲酰胺；苯射l,3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基)-{1-[7-氰基-3_(3-甲氧基-節(jié)基M-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基)-酰胺；3陽(2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4，5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-7-甲氧基-4-氧-4H-色烯-3-基甲基)-芐腈；3-{7-氯-2-[2-甲基小(2-對(duì)甲苯基-4，5-二氫-咪唑-1-基)-丙基]-4-氧411-色烯-3-基甲基}-芐腈；3-{7-甲氧基-2-[2-甲基-1-(2-對(duì)甲苯基-4,5-二氫-咪唑-1-基)-丙基]-4-氧-4H-色烯-3-基甲基卜芐腈；3-(7-氟-2-[2-甲基-l-(2-對(duì)甲苯基-4,5-二氫-咪唑-l-基)-丙基]-4-氧-4H-色烯-3-基甲基卜芐腈；N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[7-氯-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-3-氟-4-甲基-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[3-(3-氰基-芐基)-7-甲氧基-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-4-甲基-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[3-(3-氰基-芐基)-7-甲氧基-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-3-氟-4-甲基-苯甲酰胺；3-{2-[1-(2-苯并[1，3]二噁茂-5-基-4，5-二氫-咪唑-1-基)-2-甲基-丙基]-7-氟—4-氧-4H-色烯-3-基甲基卜芐腈；3-芐基-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4，5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基〉一4-氧-4H-色烯-7-腈；2-[l-(2-苯并[l,3]二噁茂-5-基-4，5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-3-芐基一4-氧-4H-色烯-7-腈；3-(7-氯-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4,5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基—4-氧-4H-色烯-3-基甲基)-芐腈；3-{2-[1-(2-苯并[1,3]二噁茂-5-基-4，5-二氫-咪唑-1-基)-2-甲基-丙基]-7-甲氧基-4-氧-4H-色烯-3-基甲基卜芐腈；3_(7-氟-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4，5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基—4-氧-4H-色烯-3-基甲基)-芐腈；苯射l，3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基Hl-卩-氰基-M3-氰基-節(jié)基M-氧-411-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-酰胺；苯并[1，3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基)-{1-[3-(3-氰基-節(jié)基)-7-甲氧基-4-氧-很-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-酰胺；苯并[1，3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基)-{1-[3-(3-氰基-芐基)-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基)-酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[3-(3-氰基-芐基)-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基M-甲基-苯甲酰胺；苯并[l,3]二噁茂-5-羧酸(3-氨基-丙基Hl-[7-氯-3-(3-甲氧基-芐萄-4-氧-411-色烯-2-基]-2-甲基-丙基卜酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[7-氰基-3-(3-氰基-芐基)斗氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-4-甲基-苯甲酰胺；3-節(jié)基-2-[2-甲基-1-(2-對(duì)甲苯基-4,5-二氫-咪唑-1-基)-丙基]-4-氧-411-色烯-7-腈；2-[l-(2-苯并[l，3]二噁茂-5-基-4,5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-3-芐基-7-甲氧基-色烯"4-酮；1^-(3-氨基-丙基)-]^{1-[7-氯-3-(3-甲氧基-芐基)斗氧-411-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-2-甲氧基-乙酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[7-氰基-3-(3-氰基-芐基)-4-氧-4H-色烯-2-基]-2國(guó)甲基-丙基}-3-氟-4-甲基-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-(l-[3-(3-氰基-芐基)-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙對(duì)-3-氟-4-甲基-苯甲酰胺；2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-7-氯-3-(3-甲氧基-芐基)-色烯-4-酮；2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-3-節(jié)基-7-氟-色烯-4-酮；2_{1_[4-(2-氨基-乙基)-2-(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基—3-節(jié)基-4-氧-4H-色烯-7-腈；2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-3-節(jié)基-7-氟-色烯-4-酮；2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙200810083749.1說明書第54/102頁基}-7-氯-3-(3-甲氧基-節(jié)基)-色烯-4-酮；2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基卜3-節(jié)基-7-氯-色烯-4-酮；3-芐基-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4,5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-7-甲氧基-色烯-4-酮；3-(2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-7-氯-4-氧-4H-色烯-3-基甲萄-節(jié)腈；3-(2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基n氣-4-氧-4H-色烯-3-基甲萄-節(jié)腈；2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-7-氟-3-(3-甲氧基-節(jié)基)-色烯-4-酮；2_{1-[4_(2_氨基-乙基)_2_(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基卜3-(3-氰基-節(jié)基)-4-氧-4H-色烯-7-腈；N-(3-氨基-丙基)-3-氟-N-0-[7-羥基-3-(3-甲氧基-芐基)-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基}-4-甲基-苯甲酰胺；2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}-3-(3-甲氧基-芐萄—4-氧-4H-色烯-7-腈；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-4-乙氧基-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-6-三氟甲基-煙酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-6-三氟甲基-煙酰胺；&(3-氨基-丙基)-1^[1-(3-芐基-7-氟-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-異煙酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-4-氰基-苯甲酰胺；4-乙酰氨基-^(3-氨基-丙基)-仏[1-(3-芐基-7-氯-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-苯甲酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[1-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-6-三氟甲基-煙酰胺；苯并[l,2,3]噻二唑-5-羧酸(3-氨基-丙基Hl-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；苯并[l，2，3]噻二唑-5-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；4-乙酰氨基^-(3-氨基-丙基)-^[1-(3-芐基-7-氟-4-氧-很-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-苯甲酰胺；苯射l,2，3]噻二唑-5-羧酸(3-氨基-丙基Hl-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基〗-煙酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-4-甲氧基-苯甲酰胺；苯并[l，2,3]噻二唑-5-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氰基4-氧4H-色烯_2_基)_2_甲基_丙基]_酷胺；5-甲基-吡嗪-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-3-二甲基氨基-苯甲酰胺；2-[1-(2-苯并[1，3]二噁茂-5-基-4，5-二氫-咪唑-1-基)-2-甲基-丙基]-3-(3-甲氧基-節(jié)基)-4-氧-4H-色烯-7-腈；7-氯-3-(3-甲氧基-節(jié)基)-2-[2-甲基-1-(2-對(duì)甲苯基-4，5-二氫-咪唑小基)-丙基]-色烯-4-酮；7-氯-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4,5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基}_3-(3-甲氧基-節(jié)萄-色烯-4-酮；2-[l-(2-苯并[l，3〗二噁茂畫5-基-4，5-二氫誦咪唑小基)-2-甲基-丙基〗-7-氯-3-(3-甲氧基-芐基)-色烯-4-酮；7-氟-3-(3-甲氧基-節(jié)基)-2-[2-甲基-1-(2-對(duì)甲苯基>4，5-二氫-咪唑-1-基)-丙基]-色烯-4-酮；7-氟-2-{1-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-4，5-二氫-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基-3-(3-甲氧基-芐萄-色烯-4-酮；2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基-7-氟-3-(3-甲氧基-芐基)-色烯-4-酮；2-{1-[4-(2-乙酰氨基-乙基)-2-(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基卜3-(3-甲氧基-節(jié)基)-4-氧-4H-色烯-7-羧酸酰胺；3-(2-{1-[4-(2-氨基-乙基)-2-(3-氟-4-甲基-苯基)-咪唑-1-基]-2-甲基-丙基卜7-氟-4-氧-4H-色烯-3-基甲基)-節(jié)腈；N-0-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-2-對(duì)甲苯基-111-咪唑-4-基甲基}-乙酰胺；苯并問噻吩-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氰基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；l-甲基-lH-n引哚-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；2，5-二甲基-211-吡唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氰基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；2，5-二甲基-2H-吡唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基口-甲基-丙基]-酰胺；2,5-二甲基-2H-吡唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙萄-酰胺；5-甲基-211-吡唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氟4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；呋喃-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氟-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；呋喃-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氯-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；2,5-二甲基-呋喃-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；2，5-二甲基-呋喃-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-甲基-噻吩-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氰基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-甲基-噻吩-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氟-4-氧-411-色烯-2-基)_2_甲基_丙基]_酷胺；5-甲基-異噁唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氯-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-甲基-2-三氟甲基-呋喃-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氰基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-甲基_異噁唑_3-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氟-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-甲基-異噁唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；苯并[<1異噁唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-節(jié)基-7-氯-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；苯并問異噁唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-節(jié)基-7-氟-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；1-甲基-111-吡咯-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[1-(3-芐基-7-氟-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；1_甲基_1!1-咪唑-4-羧酸(3-氨基-丙基)-[(10-1-(3-芐基-7-氰基-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；>1-(3-氨基-丙基)-1^[(10-1-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4;-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-3-二甲基氨基-苯甲酰胺；5-甲基-2-三氟甲基-呋喃-3-羧酸(3-氨基-丙基H(R)小(3-節(jié)基-7-氰基—4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；5-甲基-異噁哇-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[(R)-l-(3-芐基-7-氰基-4-氧-4H-色烯-2_基)-2_甲基_丙基]_酷胺；l-甲基"H-咪唑-4-羧酸(3-氨基-丙基H(R)-l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；l-甲基-lH-吡咯-2-羧酸(3-氨基-丙基)-[(R)-l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯—2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；苯并[c]異噁唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[(R)-l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯_2_基)_2_甲基_丙基]_酷胺；和5-甲基-異噁唑-3-羧酸(3-氨基-丙基)-[(R)-l-(3-芐基-7-氟-4-氧-4H-色烯_2_基)_2-甲基-丙基]-酰胺。實(shí)用性、測(cè)試和給藥一般實(shí)用性一旦制備，本發(fā)明的化合物用于多種應(yīng)用，包括改變有絲分裂。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，有絲分裂可以多種方式改變，即，可以通過增加或減少有絲分裂途徑中的組分的活性來影響有絲分裂。換句話說，有絲分裂可通過抑制或者活化某些組分而干擾平衡來影響(如被破壞)。類似的方法可用于改變減數(shù)分裂。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物用于抑制有絲分裂紡綞體形成，由此導(dǎo)致有絲分裂中延長(zhǎng)的細(xì)胞周期停止。在這方面，術(shù)語"抑制"是指減少或干擾有絲分裂紡綞體形成或?qū)е掠薪z分裂紡綞體功能障礙。本文的術(shù)語"有絲分裂紡綞體形成"是指通過有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白將微管組合成雙極結(jié)構(gòu)。本文的術(shù)語"有絲分裂紡綞體功能障礙"是指有絲分裂停止或者單極紡綞體形成。本發(fā)明的化合物用于與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，KSP結(jié)合和/或抑制其活性。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，KSP是人KSP，盡管該化合物可以用于與來自其它生物體的KSP驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合。在這方面，"抑制"意指增加或減少紡綞極分離，導(dǎo)致有絲分裂紡綞極的畸形，即張刑splaying)，或者導(dǎo)致有絲分裂紡綞體的形態(tài)干擾。為這些目的的KSP的定義中還包括KSP的變體和/或片段。參見美國(guó)專利6,437,115，該文獻(xiàn)引入本文作參考。還已證明本發(fā)明的化合物對(duì)KSP具有特異性。但是，本發(fā)明包括將該化合物用于結(jié)合或調(diào)節(jié)其它有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白。本發(fā)明的化合物用于治療細(xì)胞增殖性疾病?？捎帽疚奶峁┑幕衔?、組合物和方法治療的疾病狀態(tài)包括但不限于癌癥(以下進(jìn)一步討論)、自體免疫疾病、真菌病、關(guān)節(jié)炎、移植物排斥反應(yīng)、炎性腸病、醫(yī)療過程(包括但不限于手術(shù)、血管成形術(shù)等)后誘發(fā)的細(xì)胞增殖。治療包括抑制細(xì)胞增殖?？梢岳斫猓谝恍┣闆r下，細(xì)胞有可能不處在異常狀態(tài)，而且仍需要治療。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括應(yīng)用于即將罹患這些疾病或狀態(tài)之任一種的細(xì)胞或者受試者。認(rèn)為本文提供的化合物、組合物和方法對(duì)于治療癌癥特別有用，所述癌癥包括實(shí)體瘤，如皮膚、乳腺、腦、子宮頸癌、睪丸癌等。更具體而言，可用本發(fā)明的化合物、組合物及方法治療的癌癥包括但不限于心.*肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂瘤和畸胎瘤；肺支氣管癌(鱗狀細(xì)胞、未分化小細(xì)胞、末分化大細(xì)胞、腺癌)、肺泡(細(xì)支氣管)癌、支氣管腺癌、肉瘤、淋巴瘤、軟骨錯(cuò)構(gòu)瘤、間皮瘤；胃腸道食管(鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰(胰管腺癌、胰島瘤、高血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、胰腺癌)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波濟(jì)肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管腺瘤、絨毛腺瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；泌尿生殖道腎(腺癌、維爾姆斯腫瘤(腎胚細(xì)胞瘤)、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鱗狀細(xì)胞癌、過渡細(xì)胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、絨膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺癌、腺癌樣腫瘤、脂瘤)；肝臟肝細(xì)胞瘤(肝細(xì)胞癌)、膽管癌、肝胚細(xì)胞瘤、血管肉瘤、肝細(xì)胞腺癌、血管瘤；骨成骨肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細(xì)胞瘤、軟骨肉瘤、尤65因肉瘤、惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤)、多發(fā)性脊髓瘤、惡性巨細(xì)胞腫瘤脊索瘤、軟骨骨瘤(骨軟骨外生骨疣)、良性軟骨瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨粘液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細(xì)胞腫瘤；神經(jīng)系統(tǒng)顱骨(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)、腦(星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管瘤、胚組織瘤(松果體瘤)、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)鞘瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、先天性腫瘤)、脊索(神經(jīng)纖維瘤、腦膜瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、肉瘤)；婦科子宮(子宮內(nèi)膜癌)、子宮頸(子宮頸癌、腫瘤前子宮頸發(fā)育異常)、卵巢(卵巢癌(漿液囊腺癌、假粘液性囊腺癌、未分類的癌)、粒層-膜細(xì)胞腫瘤、塞爾托利-萊迪希細(xì)胞腫瘤、無性細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤)、外陰(鱗狀細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、陰道(透明細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、葡萄簇狀肉瘤(胚胎橫組肌肉瘤))、輸卵管(癌)；血液血液(髓細(xì)胞樣白血病(急勝和慢性)、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、骨髓增生性疾病、多發(fā)性骨髓瘤、脊髓發(fā)育不良綜合癥)、何杰金病、非何杰金淋巴瘤(惡性淋巴瘤)；皮膚惡性黑素瘤、基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、卡波濟(jì)肉瘤、痣發(fā)育不良痣(molesdysplasticnevi)、脂瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、癲痕瘤、牛皮癬；以及腺體成神經(jīng)細(xì)胞瘤。因此，本文所用術(shù)語"癌細(xì)胞"包括患任何一種如上所述的病癥的細(xì)胞。測(cè)試為測(cè)定KSP-調(diào)節(jié)活性，通常將KSP或者本發(fā)明的化合物不可擴(kuò)散地結(jié)合在不溶性載體上，所述載體具有單獨(dú)的樣品接受區(qū)域(如微量滴定板、陣歹ij(airay)等)。該不溶性載體可由任何樣品可結(jié)合于其上的材料制成，易于與可溶性材料分離，或者與整個(gè)篩選方法相適應(yīng)。這種載體的表面可以是固體或者多孔性的，而且可以是任何方便的形狀。合適的不溶性載體的實(shí)例包括微量滴定板、陣列、膜和珠。這些材料通常由玻璃、塑料(如聚苯乙烯)、多糖、尼龍或者硝基纖維素、TefionW等制成。微量滴定板和陣列特別方便，因?yàn)槭褂蒙倭吭噭┖蜆悠芳纯赏瑫r(shí)進(jìn)行大量的測(cè)定。樣品的具體結(jié)合方式不是關(guān)鍵性的，只要其與試劑以及本發(fā)明的整個(gè)方法相適應(yīng)，保持化合物的活性而且不可擴(kuò)散即可。優(yōu)選的結(jié)合方法包括使用抗體(當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)結(jié)合于載體上時(shí)，其不會(huì)立體地阻斷配體結(jié)合位點(diǎn)或者活化序列)、直接結(jié)合在"粘性"或者離子載體上、化學(xué)交聯(lián)、在表面上合成蛋白質(zhì)或試劑等。在結(jié)合樣品后，通過洗滌除去過量未結(jié)合的材料。然后可通過與牛血清白蛋白(BSA)、酪蛋白或者其他無毒蛋白或者其他物質(zhì)一起溫育而將樣品接受區(qū)域阻斷。本發(fā)明的化合物本身可以用于抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，特別是KSP的活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，將本發(fā)明的化合物與KSP混合，病測(cè)定KSP的活性。驅(qū)動(dòng)蛋白(包括KSP)活性在本領(lǐng)域中是己知的，而且包括一種或者多種驅(qū)動(dòng)蛋白活性。驅(qū)動(dòng)蛋白活性包括影響ATP水解的能力；微管結(jié)合；滑動(dòng)以及聚合/解聚(對(duì)微管動(dòng)力學(xué)的影響)；與紡錘體的其他蛋白質(zhì)結(jié)合；與細(xì)胞周期控制中涉及的蛋白質(zhì)結(jié)合；作為其他酶，如激酶或者蛋白酶的底物；以及特異性驅(qū)動(dòng)蛋白細(xì)胞活性如紡錘極分離。進(jìn)行游動(dòng)測(cè)定的方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是己知的(例如參見Hall等人(1996),Biophys.J，71:3467-3476;Turner等人，1996AnalBiochem.242(1):20-5;Gittes等人，1996,Biophys.J.70(1):418-29;Shirakawa等人，1995，J.Exp.Biol198:1809-15;Winkelmann等人，1995,Biophys.J.68:2444-53;Winkelmann等人，1995,Biophys.J.68:72S)。也可使用本領(lǐng)域中已知的測(cè)定ATP酶水解活性的方法。優(yōu)選地，使用基于溶液的測(cè)定。美國(guó)專利6,410,254描述了這種測(cè)定，該文獻(xiàn)引入本文作參考。或者，使用常規(guī)方法。例如，可對(duì)驅(qū)動(dòng)蛋白的Pi釋放進(jìn)行定量。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，ATP酶水解活性測(cè)定使用0.3MPCA(高氯酸)和孔雀綠試劑(8.27mM鉬(II)酸鈉、0.33mM孔雀綠草酸鹽，以及0.8mMTrionX-100)。為進(jìn)行該測(cè)定，將10pL反應(yīng)物在90|iL冷的0.3MPCA中終止反應(yīng)。使用磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)物，所以可將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為mM所釋放的無機(jī)磷酸鹽。當(dāng)所有的反應(yīng)物和標(biāo)準(zhǔn)物都己在PCA中終止反應(yīng)時(shí)，在例如微量滴定板的相關(guān)孔中添加100)LiL孔雀綠試劑。使混合物顯色10-15分鐘，然后讀取板在650nm處的吸光度。如果使用磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)物，則可將吸光度讀數(shù)轉(zhuǎn)化為mMPi，并相對(duì)時(shí)間作圖。另外，本領(lǐng)域中已知的ATP酶實(shí)驗(yàn)包括熒光素酶測(cè)定。驅(qū)動(dòng)蛋白運(yùn)動(dòng)域的ATP酶活性也可用于監(jiān)測(cè)試劑的作用，且對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是己知的。在一個(gè)實(shí)施方案中，在沒有微管存在下進(jìn)行驅(qū)動(dòng)蛋白的ATP酶測(cè)定。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在微管存在下進(jìn)行ATP酶測(cè)定。在以上測(cè)定中可檢測(cè)不同類型的試劑。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，試劑的作用不依賴于微管和ATP的濃度。在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過增加ATP、微管或者這兩者的濃度，可降低試劑對(duì)驅(qū)動(dòng)蛋白ATP酶的作用。在又一個(gè)實(shí)施方案中，通過增加ATP、微管或者這兩者的濃度，可增強(qiáng)試劑的作用。體外抑制KSP的生化活性的化合物然后可在體內(nèi)進(jìn)行篩選。體內(nèi)篩選方法包括細(xì)胞周期分布、細(xì)胞生存力，或者有絲分裂紡錘體的存在、形態(tài)、活性、分布或者數(shù)目的測(cè)定。例如通過流式細(xì)胞儀監(jiān)測(cè)細(xì)胞群的細(xì)胞周期分布的方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是己知的，測(cè)定細(xì)胞生存力的方法也是如此。例如參見美國(guó)專利6,437,115，該文獻(xiàn)引入本文作參考。監(jiān)測(cè)紡錘體的形成和畸形的顯微方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言也是已知的(例如參見WhiteheadandRattner(1998)，J,CellSci.Ill:2251-61;Galgio等人，(1996)J.CellBio1.,135:399-414)，這些文獻(xiàn)引入本文作參考。本發(fā)明的化合物抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白。抑制作用的一個(gè)量度是ICso，其定義為KSP的活性相對(duì)于對(duì)照降低50%的化合物濃度。優(yōu)選的化合物IC50低于約lmM,在優(yōu)選實(shí)施方案中，ICso低于約100jxM，在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，IC5o低于約10nM，在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，ICso低于約ljaM，在尤為優(yōu)選的實(shí)施方案中，ICso低于約100nM，而在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，ICso低于約10nM。ICs()的測(cè)量使用如本文所述的ATP酶測(cè)定進(jìn)行。抑制作用的另一個(gè)量度是Ki。對(duì)于IC5o低于lpM的化合物，Kj或者Kd定義為本文所述的化合物與KSP相互作用的離解速率常數(shù)。優(yōu)選的化合物具有低于約100pM的Ki，在優(yōu)選實(shí)施方案中，Ki低于約10pM，在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，Ki低于約1nM,在尤為優(yōu)選的實(shí)施方案中，Kj低于約100nM，而在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，Kj低于約lOnM?；衔锏腒i基于三個(gè)假設(shè)和Michaelis-Menten方程由IC5o測(cè)定。第一，僅一個(gè)化合物分子結(jié)合在酶上，而且沒有協(xié)同性。第二，活性酶的濃度和測(cè)試化合物是已知的(例如，在制劑中沒有顯著量的雜質(zhì)或者失活形式)。第三，酶-抑制劑復(fù)合物的酶促速率是零。速率(即化合物濃度)數(shù)據(jù)擬合于以下方程中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage69</formula>其中V是觀察的速率，Vm^是游離酶的速率，Io是抑制劑濃度，Ec是酶濃度，而Kd是酶-抑制劑復(fù)合物的離解常數(shù)。抑制作用的再一個(gè)量度是GI5Q,其定義為導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)速率降低50%的化合物濃度。優(yōu)選的化合物具有低于約1mMGI5Q;GIso低于約20pM的化合物是更優(yōu)選的；G^低于約10pM的化合物是更優(yōu)選的；Gl5o低于約1pM的化合物是更優(yōu)選的；GIso低于約100nM的化合物是更優(yōu)選的；GI^低于約10nM的化合物是更優(yōu)選的。GIso通過使用諸如本文所述的細(xì)胞增殖測(cè)定來測(cè)定。發(fā)現(xiàn)這類化合物抑制細(xì)胞增殖。小分子抑制劑的體外效力例如通過測(cè)定人卵巢癌細(xì)胞(SKOV3)在與9點(diǎn)稀釋系列的化合物接觸72小時(shí)后的生存力來測(cè)定。細(xì)胞生存力通過測(cè)定甲臘，一種通過MTS/PMS，可商購得到的試劑的生物還原形成的產(chǎn)物的吸光度來測(cè)定。劑量反應(yīng)曲線上的各點(diǎn)計(jì)算為72小時(shí)的未處理的對(duì)照細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)減去背景吸收(完全細(xì)胞殺死)。已成功地用于臨床治療癌癥(癌癥化學(xué)療法)的抗增殖化合物的Gl50是有很大變化的。例如，在A549細(xì)胞中，紫杉醇Gl5o為4nM，阿霉素為63nM，5-氟尿嘧啶為1nM，而羥基脲為500pM(由NationalCancerInstitute,DevelopmentalTherapeuticProgram,http:〃dtp.nci.nih.gov/提供的數(shù)據(jù))。因此，抑制細(xì)胞增殖的化合物可能是有用的，與表現(xiàn)抑制作用的濃度無關(guān)。為了將本發(fā)明的化合物用于篩選結(jié)合KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的化合物的方法，將KSP結(jié)合在載體上，然后在測(cè)定中添加本發(fā)明的化合物?；蛘?，將本發(fā)明的化合物結(jié)合在載體上，并添加KSP。可在其中尋求新的結(jié)合劑的化合物種類包括特異性抗體、在化學(xué)文庫的篩選中鑒定的非天然結(jié)合劑、肽類選對(duì)于人細(xì)胞毒性低的候選藥物的篩選測(cè)定。為此目的可使用多種測(cè)定，包括標(biāo)記的體外蛋白-蛋白結(jié)合測(cè)定、電泳淌度位移測(cè)定、用于蛋白結(jié)合的免疫測(cè)定、官能團(tuán)測(cè)定(磷酸化測(cè)定等)等?？梢远喾N方式測(cè)定本發(fā)明的化合物與KSP的結(jié)合。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物例如用熒光或者放射活性基團(tuán)標(biāo)記，然后直接測(cè)定結(jié)合。例如，這可如下進(jìn)行將KSP的全部或者一部分連接在固體載體上，添加經(jīng)標(biāo)記的測(cè)試化合物(例如其中至少一個(gè)原子被可檢測(cè)的同位素置換的本發(fā)明的化合物)，洗掉過量試劑，并測(cè)定標(biāo)記物的量是否是固體載體上存在的標(biāo)記物的量。本文的術(shù)語"標(biāo)記"是指化合物直接或者間接地用提供檢測(cè)信號(hào)的標(biāo)記物標(biāo)記，所述標(biāo)記物例如是放射同位素、熒光標(biāo)記、酶、抗體、顆粒(如磁性顆粒)、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記或者特異性結(jié)合分子等。特異性結(jié)合分子包括成對(duì)物質(zhì)，如生物素和抗生蛋白鏈菌素，地高新和抗地高新等。對(duì)于特異性結(jié)合物，根據(jù)如上概述的已知方法，互補(bǔ)一方通常與用供檢測(cè)的分子標(biāo)記。標(biāo)記物可直接或者間接提供可檢測(cè)的信號(hào)。在某些實(shí)施方案中，僅標(biāo)記組分之一。例如，可用1251或者熒光團(tuán)在酪氨酸位置處標(biāo)記驅(qū)動(dòng)蛋白。或者，用不同的標(biāo)記物標(biāo)記一個(gè)以上組分，例如蛋白質(zhì)用1251標(biāo)記，而有絲分裂劑用熒光團(tuán)標(biāo)記。本發(fā)明的化合物也可用作篩選其他候選藥物的競(jìng)爭(zhēng)劑。本文所用的術(shù)語"候選藥物"或者同義詞是指要檢測(cè)其生物活性的任何分子，如蛋白質(zhì)、寡肽、小有機(jī)分子、多糖、多核苷酸等。它們可能能夠直接或者間接改變細(xì)胞增殖表型或者細(xì)胞增殖序列的表達(dá)，所述細(xì)胞增殖序列包括核酸序列和蛋白質(zhì)序列。在其他情況下，篩選細(xì)胞增殖蛋白結(jié)合和/或活性的改變。該類型的篩選可在有或者沒有微管存在下進(jìn)行。在篩選蛋白結(jié)合或活性時(shí)，優(yōu)選的實(shí)施方案不包括任何已知結(jié)合該特定的蛋白的分子，所述蛋白例如聚合物結(jié)構(gòu)(如微管)以及能量源(如ATP)。本文測(cè)定的優(yōu)選實(shí)施方案包括在其內(nèi)源天然狀態(tài)下不結(jié)合細(xì)胞增殖蛋白的候選藥物，本文稱其為"外源性"藥物。在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，外源性藥物進(jìn)一步排除KSP的抗體。候選藥物可包括多種化學(xué)物質(zhì)類別，但通常它們是有機(jī)分子，優(yōu)選分子量超過100且小于約2500道爾頓的小有機(jī)分子。候選藥物包括與蛋白的結(jié)構(gòu)相互作用，特別是氫鍵和親脂性結(jié)合所必需的官能團(tuán)，其通常至少包括胺、羰基、羥基、醚或者羧基，優(yōu)選至少這些化學(xué)官能團(tuán)的兩種。候選藥物經(jīng)常包括環(huán)狀碳或者雜環(huán)結(jié)構(gòu)和/或芳香或者多芳香結(jié)構(gòu)，它們被一個(gè)或者多個(gè)上述官能團(tuán)取代。候選藥物還在生物分子中發(fā)現(xiàn)，所述生物分子包括肽、糖、脂肪酸、甾體化合物、嘌呤、嘧啶以及它們的衍生物、結(jié)構(gòu)類似物或者組合?！都策x藥物得自包括合成或者天然化合物的文庫的多種來源。例如，有多種方法隨機(jī)和定向合成多種有機(jī)化合物及生物分子，包括隨機(jī)寡核苷酸的表達(dá)。或者，細(xì)菌、真菌、植物和動(dòng)物提取物形式的天然化合物文庫也是可獲得或者容易產(chǎn)生的。另外，天然或者合成制備的文庫及化合物容易地通過常規(guī)的化學(xué)、物理和生物化學(xué)方法進(jìn)行修飾。已知的藥物可迸行定向或者隨機(jī)化學(xué)修飾，如酰化、烷化、酯化和域酰胺化，以產(chǎn)生結(jié)構(gòu)類似物。競(jìng)爭(zhēng)性篩選測(cè)定可通過在第一個(gè)樣品中混合KSP以及候選藥物來進(jìn)行。第二個(gè)樣品包括本發(fā)明的化合物、KSP以及候選藥物。這可在有或者沒有微管存在下進(jìn)行。測(cè)定這兩個(gè)樣品的候選藥物結(jié)合，而兩個(gè)樣品之間的結(jié)合變化或者不同表明存在能夠結(jié)合KSP并可能抑制其活性的藥物。也就是說，如果第二個(gè)樣品中候選藥物的結(jié)合不同于第一個(gè)樣品，則表明候選藥物能夠結(jié)合KSP。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，候選藥物與KSP的結(jié)合通過使用競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合測(cè)定來測(cè)定。在該實(shí)施方案中，競(jìng)爭(zhēng)劑是已知與KSP結(jié)合的結(jié)合物質(zhì)，如抗體、肽、結(jié)合配偶體、配體等。在某些情況下，例如在候選藥物和結(jié)合物質(zhì)之間，用結(jié)合物質(zhì)置換候選藥物，可存在競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，候選藥物是經(jīng)標(biāo)記的。首先將候選藥物或者競(jìng)爭(zhēng)劑或者它們兩個(gè)添加至KSP中，其時(shí)間足以進(jìn)行結(jié)合，如果有結(jié)合的話?？稍谌魏斡欣谧罴鸦钚缘臏囟认逻M(jìn)行溫育，通常在4-4(TC之間。溫育的時(shí)間根據(jù)最佳活性來選擇，但也可進(jìn)行最佳化，以有利于快速高通量篩選。通常0.1-1小時(shí)是足夠的。過量試劑通常被除去或者洗掉。接著添加第二組分，然后觀察有或者沒有經(jīng)標(biāo)記的組分，以表明結(jié)合。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，首先添加競(jìng)爭(zhēng)劑，然后添加候選藥物。競(jìng)爭(zhēng)劑的置換是候選藥物與KSP結(jié)合并由此能夠結(jié)合以及可能抑制KSP活性的指標(biāo)。在該實(shí)施方案中，任一組分可迸行標(biāo)記。因此，例如，如果競(jìng)爭(zhēng)劑是經(jīng)標(biāo)記的，則在洗滌溶液中存在標(biāo)記物表明被藥物置換?；蛘?，如果候選藥物是經(jīng)標(biāo)記的，在載體上存在標(biāo)記物表明置換。在另一個(gè)實(shí)施方案中，首先添加候選藥物，并進(jìn)行溫育和洗滌，然后添加競(jìng)爭(zhēng)劑。不存在競(jìng)爭(zhēng)劑的結(jié)合可能表明候選藥物以更高的親和力與KSP結(jié)合。因此，如果候選藥物是經(jīng)標(biāo)記的，在載體上存在標(biāo)記物，并且沒有競(jìng)爭(zhēng)劑結(jié)合，有可能表明候選藥物能夠與KSP結(jié)合。抑制作用通過篩選能夠抑制KSP活性的候選藥物來測(cè)試，其包括以下步驟如上混合候選藥物和KSP，并測(cè)定KSP生物活性的改變。因此，在該實(shí)施方案中，候選藥物應(yīng)與KSP結(jié)合(雖然這可能不是必需的)，并如本文定義改變其生物或者生化活性。該方法包括細(xì)胞的體外篩選法和體內(nèi)篩選法，用于篩選包括細(xì)胞周期分布、細(xì)胞生存力的改變，或用于篩選有絲分裂紡錘體的存在、形態(tài)、活性、分布或者量，如以上概述?；蛘?，可使用不同的篩選，以鑒定與天然KSP結(jié)合但不與修飾的KSP結(jié)合的候選藥物?？稍跍y(cè)定中使用陽性對(duì)照和陰性對(duì)照。優(yōu)選所有的對(duì)照和測(cè)試樣品都至少平行三份進(jìn)行，以得到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性的結(jié)果。所有樣品的溫育時(shí)間應(yīng)足以使藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合。在溫育后，洗滌所有的樣品，使得沒有非特異性結(jié)合材料，并測(cè)定通常經(jīng)標(biāo)記的藥物結(jié)合的量。例如，當(dāng)采用放射性標(biāo)記物時(shí)，樣品可在閃爍計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)，以測(cè)定結(jié)合化合物的量。在篩選測(cè)定中可包括多種其他試劑。這些試劑包括例如鹽、中性蛋白質(zhì)(如白蛋白)、洗漆劑等，它們可以用于促進(jìn)最佳的蛋白-蛋白結(jié)合和/或降低非特異性或者背景相互作用。還可使用可提高測(cè)定效率的試劑，如蛋白酶抑制劑、核酸酶抑制劑、抗微生物劑等?？梢匀魏雾樞蛱砑咏M分的混合物，以提供所需的結(jié)合。給藥因此，本發(fā)明的化合物給藥于細(xì)胞。本文的"細(xì)胞"是指有絲分裂或減數(shù)分裂可以改變的任何細(xì)胞。本文的"給藥"是指給予細(xì)胞培養(yǎng)物或患者中的細(xì)胞治療有效劑量的本發(fā)明的化合物。本文的"治療有效劑量"是指產(chǎn)生其給藥所欲產(chǎn)生的作用的劑量。確切的劑量取決于治療目的，并由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用已知的技術(shù)來確定。本領(lǐng)域中已知，可能需要根據(jù)全身與局部給藥、給藥途徑、年齡、體重、總的健康狀況、性別、飲食、給藥時(shí)間、配方的性質(zhì)、藥物相互作用以及需要治療的確切病癥及其嚴(yán)重程度進(jìn)行調(diào)整，而且可由本領(lǐng)域技術(shù)人員用常規(guī)的實(shí)驗(yàn)來確定。但是，用于治療腫瘤生長(zhǎng)，例如結(jié)腸或乳癌的式I的化合物的有效量(通常通過靜脈內(nèi)給藥)通常范圍是對(duì)于每周一次或每月一次的給藥方案而言，每次給藥為0.1-100(包括1-100)mg/n^受者表面積，通常對(duì)于每周一次至每月一次的給藥方案而言，每次給藥為2-30mg/i^受者表面積。式I的化合物的鹽、溶劑化物或者鹽的溶劑化物的有效量的可以確定為式I的化合物本身有效量的一定比例。設(shè)想類似的劑量對(duì)于本文所提到的其它病癥的治療而言是合適的。為本發(fā)明的目的，"患者"包括人和其他動(dòng)物(f寺別是哺乳動(dòng)物)以及其他生物體。因此，該方法可應(yīng)用于人的治療和獸醫(yī)應(yīng)用中。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，患者是哺乳動(dòng)物，而在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，患者是人。具有所希望的藥理活性的本發(fā)明的化合物可以給予患者，優(yōu)選以包含藥用賦形劑的藥學(xué)可接受的組合物給予患者，如本文所述。根據(jù)引入的方式，該化合物可以如下討論的多種方式配方。治療活性化合物在配方中的濃度可為約0.1-100重量％。藥物可單獨(dú)或者與其他治療(即放射療法)或者其他化學(xué)治療劑如似乎作用于微管形成的紫杉烷類藥物或拓樸異構(gòu)酶I抑制劑喜樹堿類一起給予。使用時(shí)，可以在本發(fā)明的化合物給藥之前、同時(shí)或之后進(jìn)行其它化學(xué)治療劑給藥。在本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明的化合物與一種或多種其它化學(xué)治療劑聯(lián)合給藥。"聯(lián)合給藥"是指將本發(fā)明的化合物給予患者，使得在患者的血流中可以同時(shí)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物和聯(lián)合給藥的化合物，而不管化合物實(shí)際上何時(shí)給藥，包括同時(shí)給藥。本發(fā)明的化合物和組合物的給藥可以多種方式完成，包括但不限于口服、皮下、靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)、經(jīng)皮、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、肺內(nèi)、陰道、直腸或者眼內(nèi)。在某些情況下，例如在治療傷口和炎癥時(shí)，該化合物或組合物可直接以溶液或者噴霧劑施用。藥物劑型包括式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物和一種或多種藥用賦形劑。如本領(lǐng)域中己知，藥用賦形劑是第二成分，其功能是促使或促進(jìn)各種劑型(例如口服劑型如片劑、膠囊劑和液體；局部劑型如皮膚、眼睛和耳用劑型；栓劑；注射劑；呼吸用劑型等)的藥或藥物的遞送。藥用賦形劑包括惰性或非活性成分、增效劑或?qū)嵸|(zhì)上有助于活性成分的醫(yī)療效果的化學(xué)物質(zhì)。例如，藥用賦形劑可以用于改善流動(dòng)特征、產(chǎn)品均勻性、穩(wěn)定性、味道或外觀，以使劑量操作和給藥容易，從而方便使用，或者控制生物利用度。雖然藥用賦形劑常被描述為惰性或無活性，但在本領(lǐng)域中可以認(rèn)識(shí)到在藥用賦形劑的性質(zhì)和含有它們的劑型之間存在一定的關(guān)系。適用作載體或稀釋劑的藥用賦形劑在本領(lǐng)域中是已知的，并且用于多種配方。伊!j鄉(xiāng)口參見Remington'sPharmaceuticalSciences,18thEdition,A.R.Gennaro，Editor,MackPublishingCompany(1990);Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,20thEdition,A.R.Gennaro,Editor,LippincottWilliams&Wilkins(2000);HandbookofPharmaceuticalExcipients，3rdEdition,A.H.Kibbe，Editor,AmericanPharmaceuticalAssociation,andPharmaceuticalPress(2000);禾口HandbookofPharmaceuticalAdditives,compiledbyMichaelandIreneAsh,Gower(1995)，各文獻(xiàn)均引入本文作參考?？诜腆w劑型如片劑通常包含一種或多種藥用賦形劑，它們例如可以有助于賦予令人滿意的加工和壓縮特征，或者給片劑提供附加的所需物理特征。這些藥用賦形劑可以選自稀釋劑、粘合劑、助流劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑、甜味劑、聚合物、蠟或其它延遲溶解的物質(zhì)。用于靜脈內(nèi)給藥的組合物一般包含靜脈內(nèi)液體，即簡(jiǎn)單化學(xué)物質(zhì)如糖、氨基酸或電解質(zhì)的無菌溶液，它們可以容易地被循環(huán)系統(tǒng)遞送和消化。這些液體可以用注射用水USP制備。常用于靜脈內(nèi)(IV)的液體公開在Remington,theScienceandPracticeofPharmacy[前面提供的完整引文]中，并包括醇(例如在右旋糖和水("D/W")中[例如5%右旋糖]或在生理鹽水溶液("NSS")中的右旋糖和水[例如5%右旋糖]中；例如5%醇)；合成氨基酸如Aminosyn、FreAmine、Travasol，例如分另ij為3.5或7;8.5;3.5、5.5或8.5%;氯化銨，例如2.14%;葡聚糖40，在NSS中，例如10%，或者在D5/W中，例如10%;葡聚糖70，在NSS中，例如6%，或者在D5/W中，例如6%;右旋糖(葡萄糖，D5/W)，例如2.5-50%;右旋糖和氯化鈉，例如5-20%右旋糖和0.22-0.9%NaCl;乳酸化Ringer's(Hartmann's)，例如NaCl0.6%、KC10.03%、CaCl20.02%;乳酸鹽0.3%;甘露糖醇，例如5%，任選與右旋糖，例如10%，或者NaCl，例如15或20%組合；多種含有電解質(zhì)、右旋糖、果糖、轉(zhuǎn)化糖Ringer's的不同組合的電解質(zhì)溶液，例如NaC10.860/0、KC10.03%、CaCl20.033%;碳酸氫鈉，例如5%;氯化鈉，例如0.45、0.9、3或5%;乳酸鈉，例如1/6M;和無菌注射用水。、這種液體的pH可以改變，并且通常為3.5-8，如本領(lǐng)域中已知。以下實(shí)施例用于更詳細(xì)地描述使用上述發(fā)明的方式并描述關(guān)于實(shí)施本發(fā)明的各個(gè)方面所考慮的最佳方式。應(yīng)理解的是，這些實(shí)施例絕不是對(duì)本發(fā)明真實(shí)范圍的限制，而僅是用于說明目的。在本說明書中引用的所有200810083749.1的出版物，包括但不限于專利和專利申請(qǐng)都引入本文作參考，如同各單獨(dú)的出版物在本文中具體和單獨(dú)地指出是引入本文作參考一樣。實(shí)施例所有無水溶劑均購自AldrichChemicalCompany,在SureSeal⑧容器中。加入試劑，并用單通道或多通道移液管進(jìn)行水萃取。用Whatman/Polyfiltronics24孑L、10mL過濾模塊進(jìn)行過濾。用LabconcoVortex-Evaporator或者用4x6氮多支管刮除來從陣列上蒸發(fā)揮發(fā)性物質(zhì)。實(shí)施例l合成化合物oa)3-苯基-丙酸3-氯-苯酯23。C下在5分鐘內(nèi)向3-氯苯酚(1，50.1g,0.3mol)、三乙胺(TEA，85mL)和CH2C12(500mL)的溶液中加入氫化肉桂酰氯(2,31mL，0.3mol)。30分鐘后，將反應(yīng)混合物真空濃縮。然后將粗漿溶于10:1己烷:EtOAc(300mL)，并用lNNaOH(100mL)和鹽水(100mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)并用硅膠塞過濾(10:1己烷:EtOAc沖洗)。將洗脫液濃縮，得到78g淺黃色油，將其不經(jīng)任何進(jìn)一步純化而使用。b)l-(4-氯-2-羥基-苯基)-3-苯基-丙-l-酮140。C下在15分鐘內(nèi)將A1C13(52g,0.39mol)緩慢加入酯3(78g，0.3mol)中。再過15分鐘后，氣體釋放終止，將反應(yīng)混合物傾入1L燒瓶中，并冷卻至RT。將所得固體溶于CH2C12(100mL)，并緩慢地用1NHC1(200mL)終止反應(yīng)。用EtOAc(600mL)稀釋此混合物，并分離各層。用鹽水(100mL)洗滌有機(jī)層，干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。將粗油溶于20:1己烷:EtOAc(500mL)，并用硅膠塞沖洗(100%己烷；20:1己垸:EtOAc沖洗)。將濾液濃縮，得到淺褐色油，用閃蒸柱色譜法(50:1己烷:EtOAc;40:1己烷:EtOAc;30:1己烷:EtOAc;20:1己烷:EtOAc)將其純化，得到31,2g(40%)4，為一種白色固體。c)2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基-丁酸5-氯-2-(3-苯基-丙酰萄-苯酯將苯酚4(23.18g,89.1mmol)、BOC-D-纈氨酸(5,21.29g,98.05薩ol)、HBTU(40.57g，107讓ol)、TEA(37mL,265腿ol)和CH2C12(155mL)的溶液于23'C下保持5小時(shí)。用EtOAc(500mL)稀釋反應(yīng)混合物，并用飽和NH4C1水溶液(2xl00mL)和鹽水(lOOmL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(100%己烷；50:1己烷:EtOAc;40:1己烷:EtOAc;30:1己烷:EtOAc;20:1己烷:EtOAc;10:1己烷:EtOAc)純化所得殘余物，得到35.7g(87。/。)的6，為一種黃色油。d)[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯將酯6(35.55g，79.17腿ol)、K2C03(21.8g，158.4mmol)禾DDMF(264mL)的混合物放置在140'C油浴中。30分鐘后，用H2O(300mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，并用Et20(3x200mL)萃取。用鹽水(100mL)洗滌有機(jī)層，干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己烷:EtOAc)純化所得殘余物，得到3.5g(10.2。/。)7。e)2-(l-氨基-2-甲基-丙基)-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮將色酮7(1.8g,4.18mmol)和TFA:H20(97.5:2.5,30mL)在23。C下保持1小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于EtOAc(100mL)并用1NNaOH(25mL)和鹽水(25mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮，得到一種無色油，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。f)^{2-[1-(3-芐基-7-氯-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基氨基]-1,1-二甲基-乙基}-4-甲基-苯甲酰胺將色酮8(72mg，0.22mmol)、醛9(65mg,0.32mmol)、Na(OAc)3BH(184mg，0.87mmol)禾卩CH2C12(1mL)于23。C下保持3小時(shí)。用EtOAc(20mL)稀釋反應(yīng)混合物，并用1NNaOH(5mL)和鹽水(5mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(3:1己垸:EtOAc)純化所得殘余物，得到80mg(70。/。)10，為一種白色固體。g)3-芐基-7-氯-2-[l-(4，4-二甲基-2-對(duì)甲苯基-4，5-二氫-咪唑-l-基)-2-甲基-丙基]-色烯-4-酮將色酮10(80mg，0.15mmol)、POCl3(0.1mL，1.1mmol)和PhMe(1mL)加熱至110'C。3.5小時(shí)后，加入另一部分POCl3(0.1mL，l.lmmo1)。l小時(shí)后，用EtOAc(20mL)稀釋反應(yīng)混合物，并用1NNaOH(10mL)和鹽水(10mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(20:1CHCl3:MeOH)純化所得殘余物，得到50mg(65%)11，為一種白色固體。實(shí)施例2合成化合物a)制備(3-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基氨基]-丙基卜氨基甲酸叔丁酯將色酮8(420mg，1.24mmol)、醛12(280mg，1.6mmol)、NaCN(OAc)3BH(790mg,3.7mmol)和CH2C12(4.1mL)于23。C下保持3小時(shí)。用EtOAc(20mL)稀釋反應(yīng)混合物，并用1NNaOH(5mL)和鹽水(5mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(5:1己垸:EtOAc;3:1己垸:EtOAc)純化所得殘余物，得到460mg(75%)13，為一種粘性油。b)制備P-[[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-(4-甲基-苯甲酰基)-氨基]-丙基卜氨基甲酸叔丁酯23。C下向色酮13(1.3g,2.6mmol)、二異丙基乙胺(D正A，1.8mL)和CH2C12(7.5mL)的溶液中加入對(duì)甲苯酰氯(0.7mL,5.22mmol)。2.5小時(shí)后，用EtOAc(100mL)稀釋反應(yīng)混合物，并用飽和NaHC03水溶液(2x20mL)和鹽水(20mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(3:1己烷:EtOAc)純化所得殘余物，得到1.43g(89%)14，為一種無色油。c)制備N-(3-氨基-丙基)-N-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]_4_甲基_苯甲酰胺將色酮14(1.43g，2.32mmol)禾QTFA:H20(97.5:2.5，30mL)在23。C下保持1小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于EtOAc(100mL)，并用1NNaOH(25mL)和鹽水(25mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮，得到一種白色固體，由^NMR和LCMS分析認(rèn)定其為>95%純。使用類似于以上實(shí)施例2所述的方法制備以下化合物。實(shí)施例3合成化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage81</formula>將羰基二咪唑(9.14g,56.37mmol)緩慢加入BOC-D-纈氨酸(5，12.25g，56.37mmol)和THF(185mL)的室溫溶液中。1小時(shí)后，用50。/。NaCl水溶液(200mL)洗滌溶液，然后用鹽水(2x200mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮，得到一種白色固體，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。將(2-溴乙基)苯(2.51mL，18.38mmol)、鎂屑(477mg，19,62mmol)禾口THF(20mL)于60'C下加熱1小時(shí)，然后冷卻至室溫。將16(2.0g，9.19mmol)和THF(20mL)的溶液冷卻至0-5'C。然后通過注射器將苯乙基氯化鎂溶液加入0-5'C的纈氨酸咪唑溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)溫度，并使其不超過15'C。將反應(yīng)混合物于0-5'C下保持1小時(shí)。用飽和NH4Cl水溶液(2OmL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，并用EtOAc(100mL)稀釋。分離各層，并用鹽水(30mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己垸:EtOAc;5:l己垸:EtOAc)純化所得殘余物，得到1.15g(41%)17。LRMS(MH-氾uOCO)附/z206.1。通過注射器將LHMDS(l.M，在THF中，9.53mL,3.3當(dāng)量)緩慢加入酮17(882mg，2.89mmol)的-78'C溶液中。在加入完成后，將所得淺橙色溶液于-78'C下保持40分鐘。通過注射器滴加純的4-氯-2-氟苯甲酰氯(18,460^iL,2.89mmol)(假設(shè)密度為1，20g/mL)。反應(yīng)溶液變成橙色，并將其保持40分鐘。用飽和NH4C1水溶液(20mL)終止反應(yīng)溶液的反應(yīng)，并用EtOAc(50mL)稀釋。分離各層，并用鹽水(30mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己垸:EtOAc)純化所得殘余物，得到U5g(86%)19。LRMS(MH-HF)附/z442.1。將19(1.15g,2.49mmol)、K2C03(420mg,3.04mmol)和DMF(12mL)的混合物于室溫下保持30分鐘。用鹽水(50mL)終止黃色反應(yīng)溶液的反應(yīng)，并用Et2O(50mL)稀釋。分離各層，并用鹽水(2x50mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己垸:EtOAc)純化所得殘余物，得到20。LRMS(MH)m/z442.1。使用類似于以上實(shí)施例2和3所述的方法制備以下所示的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage82</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage82</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage83</column></row><table>實(shí)施例4可選的化合物制備方法172.K2C03，DMF2091%(2步)在1分鐘內(nèi)在N2氣氛下將氯甲酸乙酯(U.0mL,115mmol)加入BOC-D-纈氨酸(5，25.0g，115mmol)、三乙胺(16,0mL，115mmol)和THF(145mL)的0-5。C溶液中。使反應(yīng)溶液的內(nèi)部溫度升至9°C。15分鐘后，在5分鐘內(nèi)加入二甲基羥胺鹽酸鹽(13.46g，138mmol)、三乙胺(32.0mL,230mmol)和THF(110mL)的混合物。將內(nèi)部溫度升至17°C。一旦完成加入，移出^C/H20浴，并將反應(yīng)溶液于23t:下保持l小時(shí)。然后濃縮反應(yīng)溶液。將粗殘余物溶于EtOAc(200mL)，并用1NHC1(200mL)和鹽水(100mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮，得到30g(100y。)21，為一種無色油，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。23。C和N2氣氛下，在配備回流冷凝器的lL圓底燒瓶中混合(2-溴乙基)苯(38.0mL，273腿ol)、鎂屑(7.0g，289mmol)和Et20(500mL)。~10分鐘后，反應(yīng)混合物開始放熱，使反應(yīng)混合物進(jìn)行至回流，并間歇地用冰氾20浴冷卻。1.5小時(shí)后，完成格利雅反應(yīng)，并將溶液冷卻至23'C。通過套管將21(18.0g，82.7mmol)和Et20(200mL)的溶液加入苯乙基溴化鎂的20°C溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)溫度，并使其不超過30'C。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)反應(yīng)混合物溫度，并用冰/1120浴調(diào)節(jié)(20-30'C)。在23。C下1小時(shí)后，通過傾入lNHCl(300mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(IOOmL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己垸:EtOAc)純化所得殘余物，得到13.4g(53%)17。LRMS(MH-出uOCO)m/z206.1。在~3分鐘內(nèi)通過注射器將雙(三甲基甲硅垸基)酰胺鋰(LHMDS，1.0M，在THF中，94.0mL，3.3當(dāng)量)緩慢加入酮17(8.74g，28.62mmol)和THF(100mL)的-78'C溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)反應(yīng)溶液溫度，并以足以防止溫度超出-54'C的速率加入堿。加入完成后，將所得溶液于-78'C下保持30分鐘。在~1分鐘內(nèi)通過注射器滴加純的4-氯-2-氟苯甲酰氯(18，4.58mL,28.62mmol)(假設(shè)密度為I.20g/mL)(溫度從-78。C升至-59。C)。將反應(yīng)溶液于-78。C下保持30分鐘。用1NHC1(100mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(IOOmL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。將所得殘余物不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。將以上粗產(chǎn)物、K2C03(4.75g,34.34mmol)和DMF(100mL)的混合物于23。C下保持30分鐘。通過加入Et20(200mL)和鹽水(200mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(2x200mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層千燥(MgS04),過濾，并濃縮。將所得殘余物吸附于硅膠(CH2C2),并用閃蒸柱色譜法(10:1己烷:EtOAc)純化，得到11.5g(91%,2步)20，為一種白色固體。LRMS(MH)w/z442.1。實(shí)施例s5分鐘內(nèi)在N2氣氛下將甲基氯化鎂(82.5mL，3.0M,在THF中，247mmol)加入21(17.95g,69.0腿ol)和THF(200mL)的0-5。C溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)反應(yīng)混合物溫度，并以足以防止溫度超過19'C的速率加入格氏試劑。一旦完成加入，移出冷卻浴，并將反應(yīng)混合物在23。C下保持2小時(shí)。然后用lNHCl(100mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(IOOmL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮，得到12.5g(84%)22，為一種白色固體(根據(jù)&NMR為〉95o/。純)，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。在3分鐘內(nèi)通過注射器將LHMDS(128mL，1.0M，在THF中)加入酮22(12.5g,58.1mmol)和THF(200mL)的-78。C溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)反應(yīng)溶液溫度，并以足以防止溫度超過-58'C的速率加入堿。30分鐘后，在30秒內(nèi)加入a-溴-間甲苯腈(23，12.5g，63.9mmol)和THF(50mL)的溶液(溫度從-78升至-60'C)。立即用冰/H20浴代替冷卻浴，并將反應(yīng)溶液于-0'C下保持20分鐘。用1NHC1(100mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(100mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己烷:EtOAc)純化所得殘余物，得到11.6g(60%)24。然后用^NMR檢查表明24僅~80%純，但沒有進(jìn)行進(jìn)一步的純化。LRMS(MH-迅uOCO)附/z231.1。通過注射器將雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(LHMDS，1.0M，在THF中，28.4mL,3.3當(dāng)量)緩慢加入酮24(2.84g，8.6mmol)禾QTHF(40mL)的-78。C溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)反應(yīng)溶液溫度，并以足以防止溫度超過-48'C的速率加入堿。在加入完成后，將所得溶液于-78'C下保持30分鐘。通過注射器滴加純的4-氯-2-氟苯甲酰氯(18，1.38mL，8.6mmol)(假設(shè)密度為1.20g/mL)。反應(yīng)溶液變成橙色，并保持30分鐘。用1NHC1(20mL)終止反應(yīng)溶液的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(20mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。將所得殘余物不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。將以上粗產(chǎn)物、K2C03(1.43g，10.34mmol)和DMF(43mL)的混合物于23"下保持1小時(shí)。通過加入Et20(100mL)和鹽水(200mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(2x200mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。將所得殘余物吸附于硅膠(CH2Cl2)，并用閃蒸柱色譜法(5:1己烷:EtOAc)純化，得到2.7g(67%,2步)25。'HNMR檢查表明25僅~80%純，但沒有進(jìn)行進(jìn)一步純化。LRMS(MH)w/z467.1。將色酮25(2.71g，5.80mmol)和TFA:H20(97,5:2.5，25mL)于23。C下保持1小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于EtOAc(100mL)，并用1NNaOH(25mL)和鹽水(25mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(l:l己垸:EtOAc;l:2己垸:EtOAe;1:4己垸:EtOAc)純化所得殘余物，得至lj1.20g(56%)26。LRMS(MH)附/z367.1。實(shí)施例6通過注射器將雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(LHMDS,1.0M，在THF中,23.5mL，3.3當(dāng)量)緩慢加入酮17(2.18g,7.14mmol)和THF(20mL)的-78'C溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)反應(yīng)溶液溫度，并以足以防止溫度超過-50'C的速率加入堿。在加入完成后，將所得溶液于-78'C下保持30分鐘。通過注射器滴加純的2，4-二氟苯甲酰氯(27,1.05mL,8.57mmol)。反應(yīng)溶液變?yōu)槌壬?，并保?0分鐘。用1NHCl(20mL)終止反應(yīng)溶液的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(20mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己烷:EtOAc)純化所得殘余物，得到2.16g(68%)28。'HNMR檢査表明28僅85n/。純，但沒有進(jìn)行進(jìn)一步純化。將28(2.16g，4.9腿ol)、K2C03(812mg，5.86mmol)禾卩DMF(24mL)的混合物于23'C下保持1小時(shí)。用鹽水(50mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，并用Et2O(50mL)稀釋。分離各層，并用鹽水(2x50mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己烷:EtOAc)純化所得殘余物，得到1.25g(60%)29。LRMS(MH)m/z426.2。實(shí)施例7訂2.K2C03.DMF3180%(2步>通過注射器將雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(LHMDS，1.0M,在THF中，47mL，3.3當(dāng)量)緩慢加入的酮17(4.37g,14.31mmol)和THF(55mL)的-78。C溶液中。通過內(nèi)部溫度計(jì)監(jiān)測(cè)反應(yīng)溶液溫度，并以足以防止溫度超過-50'C的速率加入堿。加入完成后，將所得溶液于-78t:下保持30分鐘。通過注射器快速加入4-氰基-2-氟苯甲酰氯(30,1.38mL，8.6mmol)和THF(5mL)的溶液(溫度從-78。C升到-50。C)。反應(yīng)混合物變成深紅色，并保持30分鐘。用1NHCl(20mL)終止反應(yīng)溶液的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(20mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。將所得殘余物不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。將以上粗產(chǎn)物、K2C03(2.40g,17.17mmol)禾卩DMF(70mL)的混合物于23'C下保持1小時(shí)。通過加入Et20(200mL)和鹽水(200mL)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，并用鹽水(2x200mL)洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮。用閃蒸柱色譜法(10:1己垸:EtOAc)純化所得殘余物，得到4.95g(80。/。，2步)31。LRMS(MH)w/z433.2。將7-氟-色酮32(96mg,0.19mmol)溶于在甲醇(10mL)中的0.5M甲醇鈉，并加熱至70'C。將溫度在70'C下保持12小時(shí)，然后冷卻至室溫。減壓除去溶劑。向所得殘余物中加入EtOAc(20mL)和水(20mL)。分離各層，并用附加的EtOAc(3xl5mL)萃取水相。合并有機(jī)相，用鹽水(25mL)洗滌并干燥(Na2S04)。真空濃縮，得到一種無定形白色固體，用閃蒸柱色譜法(20:1DCM:MeOH)將其純化，得到92mg(94%)33。LRMS(MH)w/z509.3。實(shí)施例8實(shí)施例9將化合物29(608mg,1.43mmol)溶于在甲醇(40mL)中的0.5M甲醇鈉的溶液。將混合物加熱回流3小時(shí)(或直至LC-MS表明無原料殘留)。然后蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于二氯甲垸(200mL)，并加入水，其中通過加入2NHC1溶液將混合溶液的pH調(diào)節(jié)至9。通過硫酸鈉干燥收集的有機(jī)層。蒸發(fā)溶劑后，在真空下干燥最終的化合物34(580mg,92%)。實(shí)施例10向在DMF(5mL)中的32(56mg,0.11mmol)的溶液中加入NaH(5mg在礦物油中的60%懸浮液，0.15mmol)。將所得溶液于45'C下攪拌5分鐘，然后通過移液管加入烯丙醇(IO0.15mmol)。將所得溶液于45'C下攪拌12小時(shí)，然后冷卻至室溫。加入EtOAc(50mL)和水(15mL)，并分離各層。用EtOAc(3x15mL)萃取水相。合并有機(jī)相，用水(2x30mL)和鹽水(2x30mL)洗滌，千燥(Na2S04)并減壓濃縮，得到35，為一種無定形固體，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用(54mg，91%)。LRMS(MH)m/z535.0。向35(54mg，0.10mmol)和MeCN(5mL)的室溫溶液中加入嗎啉(440.50mmol)，然后加入Pd(PPh3)4(5mg,10%)。將所得溶液攪拌5分鐘，然后減壓濃縮。用閃蒸柱色譜法，使用分步洗脫(20:1DCM:MeOH,10:1DCM:MeOH)純化殘余物，得到41mg36，為一種米色固體(81%)。LRMS(MH)m/z495.2。實(shí)施例113-芐基-7-氯-2-2-甲基-l-(2-對(duì)甲苯基-4，5-二氫-咪唑-l-基)-丙基-色烯-4-酮的制備a)(2-[l-(3-節(jié)基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基氨基]-乙基氨基甲酸叔丁酯向在二氯甲垸(150mL)中的2-(l-氨基-2-甲基-丙基)-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮(6.0g,18mmol)和(3-氧乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.6g,23mmol)的溶液中加入三乙酸基硼氫化鈉(7.4g，35mmol)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌16小時(shí)，此時(shí)用1N氫氧化鈉(150mL)稀釋，并劇烈攪拌2小時(shí)。用1N氫氧化鈉(100mL)和鹽水(100mL)洗滌有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，并濃縮。用閃蒸色譜法(0—50%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物，得到5.7g(67。/。)標(biāo)題化合物。MS(ES+)m/e485[M+H]+。b)2-[l-(2-氨基-乙基氨基)-2-甲基-丙基]-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮將在4:1二氯甲烷/三氟乙酸(250mL)中的(2-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(5.7g,12mmol)的溶液于室溫下保持1.5小時(shí)，此時(shí)將其濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(200mL)，用10%碳酸鈉、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，并濃縮。將殘余物(4.2g，91%收率)不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。c)N-(2-[l-(3-節(jié)基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基氨基]-乙基)-4-甲基-苯甲酰胺向在二氯甲垸(IOOmL)中的2-[l-(2-氨基-乙基氨基)-2-甲基-丙基]-3-節(jié)基-7-氯-色烯-4-酮(4.1g,11mmol)和三乙胺(2.2mL，17mmol)的冷(0。C)的溶液中加入在二氯甲烷(20mL)中的對(duì)甲苯甲酰氯(1.7g,11mmol)的溶液。將反應(yīng)物于0。C下保持2小時(shí)，此時(shí)用乙醚(250mL)將其稀釋。用1N氯化氫(2x200mL)、飽和碳酸氫鈉(200mL)和鹽水(150mL)洗滌所得溶液，用硫酸鎂干燥，并濃縮。用閃蒸色譜法(0—60%乙酸乙酯/己垸)純化殘余物，得到2.8g(50%)標(biāo)題化合物。MS(ES+)m/e503[M+H]+。d)3-節(jié)基-7-氯-2-[2-甲基-1-(2-對(duì)甲苯基-4，5-二氫-咪唑-1-基)-丙基]-色烯-4-酮將在甲苯(60mL)中的N-(2-[l-(3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基氨基]-乙基}-4-甲基-苯甲酰胺(2.8g，5.5mmd)和三氯氧化磷(9.4mL，100mmol)的混合物于85'C下加熱7小時(shí)，然后加熱回流1小時(shí)。濃縮反應(yīng)物，并通過甲苯共沸除去剩余的三氯氧化磷。用乙酸乙酯(100mL)稀釋殘余物，并用飽和碳酸氫鈉(IOOmL)和鹽水(lOOmL)洗滌，用硫酸鎂干燥，并濃縮。用閃蒸色譜法(0~>8%甲醇/二氯甲垸)純化所得殘余物，得到1.4g(50%)標(biāo)題化合物。MS(ES+)m/e485[M+H]+。根據(jù)類似于實(shí)施例1、3和/或4所述的方法制備以下化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage91</column></row><table>實(shí)施例122-(R)-l-(4-氨基甲基-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-基)-2-甲基-丙基-3-節(jié)基-7-氯-色烯-4-酮的制備a)2-[(R)-l-(3-鄰苯二甲酰亞氨基-2-氧-丙基氨基)-2-甲基-丙基]-3-節(jié)基-7-氯-色烯-4-酮向在DMF(10mL)中的2-((R)-l-氨基-2-甲基-丙基)-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮(0.5g,1.5mMol)和K2C03(0.21g，1.5mMol)中加入N-(3-溴-2-氧丙基)-鄰苯二甲酰亞胺(0.45g，1.5mMol)(Nair等人，J.Org.Chem.;40;1975;1745)。在RT下將反應(yīng)物攪拌3小時(shí)，真空濃縮，回收于EtOAc，用水、鹽水洗滌，干燥(Na2S04)，并蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物(0.88g,100%),為一種黃色固體MS(ES)m/e543.2(M+H)+。b)2-((R)-l-[N-甲苯?；?(3-鄰苯二甲酰亞氨基-2-氧-丙基)氨基]-2-甲基-丙基}-3-節(jié)基-7-氯-色烯-4-酮向在CH2Cl2(10mL)中的2-[(R)-l-(3-鄰苯二甲酰亞氨基-2-氧-丙基氨基)_2-甲基-丙基]-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮(0.88g,1.5mMol)中加入Et3N(0.23mL,1.6mMol)和甲苯酰氯(0.21mL,1.6mMol)。將反應(yīng)物于RT下攪拌18小時(shí)，真空濃縮，回收于EtOAc,用1NHC1、鹽水洗滌，干燥(MgS04)并蒸發(fā)至干。用硅膠閃蒸色譜法(5-15%EtOAc/己垸)純化，然后與石油醚一起研磨，過濾，并真空千燥，得到標(biāo)題化合物(0.89g，90%),為一種白色固體:MS(ES)m/e661.2(M+H)+。c)N-{l-[(R)-1-(3-芐基-7-氯-4-氧-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-2-對(duì)甲苯基-1H-咪唑_4_基甲基}_鄰苯二甲酰亞胺向2-{(R>l-[N-甲苯酰基-(3-鄰苯二甲酰亞氨基-2-氧-丙基)氨基]-2-甲基-丙基}-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮(0.88g，1.3mMol)和NH40ac(5.13g,66.8mMol)中加入HOAc(15mL)。將反應(yīng)物攪拌，并加熱回流(155。C油浴)2.5小時(shí)，冷卻至RT，并真空濃縮。將殘余物回收于EtOAc，用水、鹽水洗滌，干燥(MgS04)并蒸發(fā)至干。用硅膠閃蒸色譜法(50。/。EtOAc/己烷)純化，然后與(l:2)Et20/石油醚一起研磨，過濾并真空干燥，得到標(biāo)題化合物(0.5192g,6％)，為一種棕褐色固體NMR(400MHz,CDC13)S8.11(d，J=8.6Hz，1H)，7.89(2d,2H)，7.73(2d,2H),7.53(d，J=1.8Hz，1H),7.52(s,1H),7.39(d，J=8.0Hz,2H)，7.36(dd,1H),7.32(d,J=8.0Hz,2H),7.14(m,3H)，6.74(d，J=1.5Hz,1H),6.72(s，1H)，5.04(d，J-8.8Hz，1H)，4.94(s,2H),4.01(d,J=15.5Hz,1H)，2.63(m,1H)，2.46(s，3H)，2.44(d，J=15.5Hz,1H)，0.95(d,J=6.6Hz，3H)，0.29(d，J=6.7Hz，3H);MS(ES)m/e642.0(M+H)+。d)2-[(^-1-(4-氨基甲基-2-對(duì)甲苯基-咪唑-1-萄-2-甲基-丙基]-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮向在EtOH(15mL)中的N-(l-[(R)-l-(3-芐基-7-氯-4-氧-3，4-二氫-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-2-對(duì)甲苯基-lH-咪唑-4-基甲基}-鄰苯二甲酰亞胺(0.50g，0.78mMol)中加入一水合肼(0.12mL，2.5mMol)。將反應(yīng)物于室溫下攪拌72小時(shí)，用C鹽濾墊過濾以除去不溶性沉淀，用EtOH沖洗，并蒸發(fā)至干。用硅膠閃蒸色譜法[5-10%(在MeOH中的5%NH40H)/CH2Cl2]純化，得到標(biāo)題化合物(364mg，91%)，為一種白色固體泡沫NMR(400MHz，CDC13)S8.14(d,J=8.6Hz,1H)，7.63(d,J=1.8Hz,1H),7.37(m,6H),7.15(m，3H)，6.71(d,J=1.7Hz,1H)，6.69(s,1H),5.00(d,J=10.9Hz,1H),4.07(d，J=15.5Hz,1H)，3.92(d,1H),3.88(d,1H)，2.72(brs,2H),2.65(m，1H),2.49(s，3H)，2.48(d，J=15,5Hz，1H),0.93(d，J=6.6Hz,3H)，0.30(d，J=6.7Hz，3H);MS(ES)m/e512.2(M+H)+。<table>tableseeoriginaldocumentpage208</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage94</column></row><table>實(shí)施例13沐{1-(^-1-(3-節(jié)基-7-氯-4-氧-3，4-二氫-色烯-2-基)-2-甲基-丙基H-對(duì)甲苯基-lH-咪唑-4-基甲基)-乙酰胺的制備向在CH2C12(5mL)中的2-[(R)-l-(4-氨基甲基-2-對(duì)甲苯基-咪唑小基)-2-甲基-丙基]-3-芐基-7-氯-色烯-4-酮(0.17g，0.33mMol)中攪拌加入吡啶(27nL,0.33mMol)和Ac20(63|xL，0.67mMol)。RT下攪拌4小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)物。將殘余物與(l:l)Et20/石油醚一起研磨，過濾并真空干燥，得到標(biāo)題化合物(163mg,89%),為一種白色固體&NMR(400MHz，CDC13)58.14(d，J=8.6Hz，1H)，7.59(d,J=1.8Hz,1H)，7.43(m，6H)，7.17(m，3H),6.84(brs,1H)，6.71(d，J=2.2Hz，1H),6.69(s，1H),5.07(d，J=10.9Hz，1H)，4.50(2d,1H)，4.43(2d，1H)，4.07(d，J=15.5Hz，1H),2.66(m,1H)，2.51(s，3H)，2.48(d，J=15.5Hz,1H)，2.00(s，3H)，0.95(d，J=6.6Hz，3H)，0.34(d，J=6.7Hz，3H);MS(ES)m/e554.4(M+H)+。S0Cl2在配備回流冷凝器的250mL圓底燒瓶中，在N2氣氛下將4-氰基-2-氟苯甲酸(l,25g)、DMF(O.lmL)和亞硫酰氯(50mL)的混合物于9(TC油浴中加熱回流30分鐘。用蒸餾頭代替回流冷凝器，并從反應(yīng)罐中蒸餾過量的亞硫酰氯。將油浴溫度升至12(TC以促進(jìn)蒸餾。2小時(shí)后，將反應(yīng)容器冷卻至23'C，并放置在減壓(25托)下。然后將反應(yīng)容器于90'C下加熱20分鐘，然后于130。C下加熱90分鐘，以除去任何過量的剩余亞硫酰氯。然后將反應(yīng)容器冷卻至23。C，并在高真空(0.2托)下放置。反應(yīng)容器配備清潔的蒸餾頭和收集燒瓶。將容器置于137'C油浴，并從反應(yīng)罐中蒸餾出產(chǎn)物(1)各=1071:@~0.2托)。蒸餾物在冷卻時(shí)固化，得到2，為一種白色固體，接近定量收率。在配備回流冷凝器的250mL圓底燒瓶中，在N2氮?dú)夥障聦?-氯-2-氟苯甲酸(3，25g)、DMF(0.1mL)和亞硫酰氯(50mL)的混合物于90。C油浴中加熱回流30分鐘。用蒸餾頭置換回流冷凝器，并從反應(yīng)罐中蒸餾出過量亞硫酰氯。將油浴溫度升至120'C以促進(jìn)蒸餾。2小時(shí)后，將反應(yīng)容器冷卻至23。C，并放置在減壓(25托)下。然后將反應(yīng)容器于90'C下加熱20分鐘，然后于12(TC下加熱90分鐘，以除去任何過量的剩余亞硫酰氯。然后將反應(yīng)容器冷卻至23'C，并配備清潔蒸餾頭和收集燒瓶。將容器置于16(TC袖浴，并從反應(yīng)罐中蒸餾出產(chǎn)物(b.p尸124'C⑨25托)，得到4，為一種無色油，接近定量收率。頁實(shí)施例15、TPAP.4-甲基嗎琳'OHN-氣化物室溫下將胡椒酰氯(l，7.8g，42mmol)加入2-氨基-2-甲基-1-丙醇(4ml,42rnrno1)、CH2C12(200mL)和三乙胺(l1.7ml，84mmol)的溶液中。45分鐘后濃縮反應(yīng)溶液，用EtOAc(40mL)稀釋所得殘余物，并用鹽水(30mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮，得到一種淺褐色油。將粗物質(zhì)(2,8.8g)不經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。在0。C下于N2氣氛下將四丙基過釕酸銨(TPAP,638mg,1.8mmol)分部分加入2(8.6g,36.3mmol)、CH2C12(73ml,2mL/mmol)、4-甲基嗎啉N-氧化物(6.4g,54.5mmol)和分子篩4A活化粉末(18g,500mg/mmol)的溶液中。15分鐘后使反應(yīng)物暖至室溫。1小時(shí)后反應(yīng)完成(TLC)，用二氧化硅過濾，用EtOAc(100mL)洗脫，并濃縮濾液。這得到7g米色固體(3)。將該物質(zhì)重結(jié)晶將EtOAc(30mL)、MeOH(10mL)和己烷(lmL)分部分加入，加熱并超聲。如此得到一種油，然后加入己烷(100mL)并冷卻。結(jié)晶在溶液冷卻時(shí)立即開始沉淀。將混合物過濾，并用己烷(10mL)洗滌結(jié)晶，得到4.88g(57。/。)3，為米色絨毛狀結(jié)晶。實(shí)施例16VnnTPAP,4-甲基嗎啉N^^""N-教化物H-----------一EOC,HOBTO^^^CHjC^D隊(duì)CHjqa1{Hr54'*.鄰％將2-氨基-2-甲基-l-丙醇(4ml,42n血o1)、CH2C12(200mL)、4-乙酰苯甲酸(1,6.9g,42mmol)、EDC(l-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺HC1，12.1g，63mmol)、HOBT(N-羥基苯并三唑H20，6.4g，42mmol)和Hunig堿(二異丙基乙胺，22mL,126mmol)的混合物于室溫下攪拌18小時(shí)。一旦完成(TLC,LC/MS)，濃縮反應(yīng)混合物，用EtOAc(50mL)稀釋所得殘余物，并用NaHC03(2x40mL)和鹽水(40mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgS04)，過濾，并濃縮濾液。用閃蒸柱色譜法(4:1:1己烷:EtOAc:CH2Cl2;1:1:1己烷:EtOAc:CH2Cl2;1:1EtOAc:CH2Cl2)純化粗物質(zhì)以除去雙?；镔|(zhì)。得到醇2，收率54。/。(5.36g)。在(TC下于N2氣氛下將四丙基過釕酸銨(TPAP,387mg，1.1mmol)分部分加入2(5.36g,22.8mmol)、CH2C12(46mL，2mL/mmo1)、4-甲基-嗎啉N-氧化物(4g，34.2mmol)和分子篩4A活化粉末(l1.4g,500mg/mmol)的溶液中。15分鐘后使反應(yīng)物暖至室溫。1小時(shí)后反應(yīng)完成(TLC)，用二氧化硅過濾，用EtOAc(100mL)洗脫，并濃縮濾液。這得到4.4g淺粉色固體(3)。將該物質(zhì)重結(jié)晶將1:1己烷:EtOAc(5mL)、CH2C12(20mL)禾卩MeOH(10mL)分部分加入，加熱并超聲。如此得到一種油，然后加入己烷(100mL)并冷卻。結(jié)晶在溶液冷卻時(shí)立即開始沉淀。將混合物過濾，并用己烷(IOmL)洗滌結(jié)晶，得至lj2.46g(46。/。)3，為米色絨毛狀結(jié)晶。實(shí)施例17將在草酰氯(5mL)中的4-乙酰基苯甲酸(500mg)的溶液加熱回流2小時(shí)。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)任何剩余的草酰氯，并將殘余物真空干燥。產(chǎn)物的收率是定量的。實(shí)施例18<formula>formulaseeoriginaldocumentpage98</formula>((R)-l-異丙基-2-氧-丁-3-烯基)-氨基甲酸叔丁酯將四氫呋喃(THF，100mL)和在THF(360mL，360mmo1，3.1當(dāng)量)中的1.0M乙烯基溴化鎂的溶液冷卻至-78'C，同時(shí)在氮?dú)夥障聰嚢琛?0分鐘內(nèi)用在THF(50mL)中的[(R)-(甲氧基-甲基-氨基甲?；?-甲基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(30.3g，116mmol,1當(dāng)量)逐滴處理混合物。將所得深黃色混合物于-78'C下攪拌30分鐘后，移去冷卻浴，并使反應(yīng)混合物緩慢暖至室溫過夜(15小時(shí))。將反應(yīng)混合物緩慢傾入lN鹽酸水溶液(700mL)的冰冷卻的溶液中，然后暖至室溫。用(3x600mL)乙酸乙酯萃取有機(jī)物，用硫酸鈉干燥，過濾，并真空濃縮。用閃蒸柱色譜法(5-10%乙酸乙酯/己烷)純化，得到產(chǎn)物，為一種白色固體(16.8&64%)。ESMS[M+H]+:228.4。[(R)-(E)-l-異丙基-4-(3-甲氧基苯基)-2-氧-丁-3-烯萄-氨基甲酸叔丁酯在氬氣氛下向在無水乙腈(150mL)中的((R)-l-異丙基-2-氧-丁-3-烯基)-氨基甲酸叔丁酯(13.54g，59.6mmol)的溶液中加入3-碘茴香醚(13.96g，59.6腿ol)、三乙胺(9.1mL，65.6mmol)，然后加入乙酸鈀(II)(335mg,1.49mmol)。將所得澄清的黃色溶液加熱至80。C。加熱時(shí)反應(yīng)物加深，并發(fā)生鈀黑沉淀。15小時(shí)后，使反應(yīng)混合物冷卻至室顯，用水(150mL)終止反應(yīng)，并用乙醚(150mL)稀釋。用鹽水(100mL)洗漆乙醚層，并用乙醚(二個(gè)50mL部分)萃取合并的水層。用硫酸鎂干燥萃取物，過濾并減壓濃縮。用硅膠色譜法(9:1己烷/EtOAc)立即純化殘余物，得到17.6g(88%)[(R)-(E)-l-異丙基_4-(3-甲氧基-苯基)-2-氧-丁-3-烯基]-氨基甲酸叔丁酯，為一種黃色油。MS(ES+)m/e334,0[M+H]+。[(R)-(Z)-4-(3-氰基-苯基)-l-異丙基-2-氧-丁-3-烯基卜氨基甲酸叔丁酯根據(jù)關(guān)于[(R)-(E)-l-異丙基-4-(3-甲氧基-苯基)-2-氧-丁-3-烯基]-氨基甲酸叔丁酯所述的方法，用3-碘芐腈(5.50g，24.0mmol,1當(dāng)量)得到標(biāo)題化合物，為一種黃色固體(7.4g~卯％純物質(zhì))。ESMS[M+H]+:329.2。(^-(￡)-1-異丙基-4-(3-甲氧基-苯基)-2-氧-丁基-氨基甲酸叔丁酯氮?dú)夥障孪蛟谝宜嵋阴?450mL)中的[(R)-(E)-l-異丙基-4-(3-甲氧基-苯基)_2_氧_丁_3-烯基]-氨基甲酸叔丁酯(17.6g，52.9mmol)的溶液中加入10重量o/。擔(dān)載在碳上的鈀(300mg)。用氫氣球替換氮，并清洗燒瓶。3小時(shí)后，用氮清洗反應(yīng)燒瓶，并用C鹽濾墊過濾(用乙酸乙酯沖洗)。將濾液減壓濃縮，并用硅膠色譜法(9:1己烷/EtOAc)純化殘余物，得到16.2g(91%)[(R)-(E)-l-異丙基-4-(3-甲氧基-苯基)-2-氧-丁基]-氨基甲酸叔丁酯，為一種無色油。MS(ES+)m/e336.4[M+H]+。[a]D20=+19.1(c=0.755，MeOH)。NMR(400MHz，CDC13)S7.21(m，1H),6,80-6.77(m，2H),6.75(s，1H),5.13(d,J=8.4Hz,1H)，4.28(dd,J=8.8,4.4Hz,1H),3.81(s,3H),2.93-2.88(m，2H)，2.85-2.76(m，2H)，2.14(m，IH)，1.46(s，9H),1.00(d,J=6.8Hz,3H)，0.75(d,J=6.8Hz,3H)。oi丫YoI[(R)-4-(3-氰基-苯萄-l-異丙基-2-氧-丁基l-氨基甲酸叔丁酯室溫下將擔(dān)載在碳上的鈀(740mg10%wt/wtPd/C)力卩入在甲醇(200mL)中的[(R)-(Z)-4-(3-氰基-苯基)-l-異丙基-2-氧-丁-3-烯基]-氨基甲酸叔丁酯(7.4g，22.5mmo1,1當(dāng)量)的脫氣溶液中。將反應(yīng)混合物完全脫氣，并用來自氣球的氫氣回填。在大氣壓下氫化2.5小時(shí)。然后用乙醚(300mL)稀釋(脫氣的)反應(yīng)混合物，用C鹽過濾，并用附加的乙醚(2x100mL)洗滌。真空濃縮后，用閃蒸柱色譜法(20%乙酸乙酯-己垸)純化殘余物，得到酮產(chǎn)物，為一種白色固體(5.9g,79%)。ESMS[M+H]+:331.2。'HNMR(400MHz,CDC13)S7.51(m，2H),7,46(m,1H)，7.41(m,1H),5.07(m，1H)，4.24(m,1H)，2.98(m,2H),2.86(m,2H),2.11(m，1H)，1.45(s,9H),0.98(d，3H，J=6.76Hz)，0.74(d，3H,J=6.78Hz)。[a]D=+24.74(c-0.95，CH3OH)。實(shí)施例19根據(jù)類似于上述的方法制備以下化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage100</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage101</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage102</column></row><table>實(shí)施例20用以下方式制備用于靜脈內(nèi)給藥的藥物組合物。1mg/mL(作為游離堿)IV溶液，載體為含有3.5%(w/v)甘露醇的pH5.0的50mM乙酸鈉緩沖液組成*單元配方(mg/mL)實(shí)施例2的化合物(游離堿)1.000冰醋酸L081乙酸鈉三水合物4.355甘露醇，不含熱原35.000注射用水(WFI)q.s.至lmL*除了活性化合物之外的所有組分為USP或Ph.Eur。向適宜的混合容器中充入約75%的含WFI的本體溶液。將冰醋酸(1.081g)、乙酸鈉三水合物(4.355g)、甘露醇(35.000g)和活性化合物(1.000g)稱重，并分別加入混合容器中。加入后，通過用攪拌器攪拌將各成分溶于混合物。測(cè)量本體溶液的pH，并用5NNaOH或5N冰醋酸調(diào)節(jié)至5.0。用WFI使溶液達(dá)到其最終體積(l升)。如果活性化合物為藥學(xué)可接受的鹽、水合物或水合物的鹽，例如一鹽酸鹽或一鹽酸鹽的水合物，則加入與游離堿相等的活性化合物量。實(shí)施例21^(3-氨基丙基)-!^[(10-1-3-芐基-7-氯-4-氧-411-色烯-2-基)-2-甲基-丙基1-4-甲基-苯甲酰胺的鹽酸鹽的制備在一個(gè)實(shí)施方案中，以以下方式形成N-(3-氨基丙基)-N-[(R)-l-3-節(jié)基一7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基]-4-甲基-苯甲酰胺的鹽酸鹽，如根據(jù)實(shí)施例2制備的。通過以下方法適宜地制備HC1鹽使游離堿(例如溶于適宜的溶劑，如TBME、THF和乙酸乙酯的一種或多種)與鹽酸、適宜的鹽酸水溶液或在水存在下反應(yīng)。向混合物中適宜地加入HC1鹽晶種以幫助結(jié)晶?？梢杂贸Ｒ?guī)技術(shù)如過濾和干燥(用溶劑，如TBME、THF和乙酸乙酯的一種或多種適宜地洗滌鹽)來分離所得鹽。在特定的實(shí)施方案中，如下制備鹽1.將游離堿溶于10體積的TBME和5體積的THF，溶解在室溫下適宜地進(jìn)行；2.加入HC1水溶液，例如6.0M或12.0M，適宜地為1.1當(dāng)量，例如逐滴加入；3.向溶液中加入HC1鹽結(jié)晶作為晶種，例如根據(jù)以下制備B進(jìn)行制備；4.適宜地?cái)嚢柚敝两Y(jié)晶形成；5.適宜地通過采用過濾，用適宜的溶劑如TBME洗滌，并干燥而分離結(jié)晶o在更特定的實(shí)施方案中，如下制備鹽制備A向配備攪拌棒的小瓶中加入500mgN-(3-氨基丙基)-N-[(R)-l-3-節(jié)基;氯-4-氧一H-色烯-2-基]-2-甲基-丙基]-4-甲基-苯甲酰胺和3mlTBME，并將游離堿于室溫下溶于TBME。鼓入HC1氣體約30秒鐘，直至形成一種白色固體。過濾并用500viLTBME將固體沖洗兩次。將固體轉(zhuǎn)移至試管，加入4mlTBME和攪拌棒，并在室溫下攪拌(鹽不溶解)。將含有混合物的試管放置在ArgonautRS10加熱模塊(ArgonautTechnologies,FosterCity，California)中，或者等同物中，且溫度循環(huán)如下1.室溫下30分鐘2.30分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)變至40'C，并在40。C下保持30分鐘3.30分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)變至室溫，并在室溫下保持30分鐘4.30分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)變至10'C，并在10'C下保持30分鐘5.30分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)變至室溫，并在室溫下保持30分鐘6.根據(jù)需要，重復(fù)2-5通過20小時(shí)循環(huán)蒸發(fā)某些溶劑，在試管側(cè)壁上形成白色粉末，并在其底部形成熔融樣固體。加入2mlTBME。15天后，過濾淺黃色固體，并用約0.5mlTBME洗滌兩次，然后用1ml己烷洗滌兩次。室溫下在真空烘箱中干燥12-24小時(shí)，得到約440mgHCl鹽。圖1和2分別代表根據(jù)制備A制備的鹽的XRPD和MDSC掃描。制備B將4.23g^(3-氨基丙基)-]^-[(11)-1-3-芐基-7-氯-4-氧-411-色烯-2-基]-2-甲基-丙基]-4-甲基-苯甲酰胺溶于5體積(21ml)THF。加入10體積(42ml)TBME(叔丁基甲基醚)，然后一次性加入1.1當(dāng)量的12NHC1(750^1)。用HC1鹽作晶種，如制備A制備(例如分3次加入，每次約10mg，持續(xù)約10分鐘)。將混合物攪拌過夜，例如持續(xù)約12-24小時(shí)。將混合物過濾，用TBME洗滌固體，并在室溫下在真空烘箱中干燥固體過夜，例如持續(xù)約12-24小時(shí)，得到約4.3§11(:1鹽。圖3代表根據(jù)制備B制備的鹽的XRPD掃描，本發(fā)明包括結(jié)晶N-(3-氨基丙基)-N-[(R)-l-3-芐基-7-氯-4-氧-4H-色烯-2-基)-2-甲基-丙基]-4-甲基-苯甲酰胺鹽酸鹽，其特征是X-射線衍射峰在約4.8、9.7、14.7、17.9、18.3、20.1、20.9、22.5、23.2、23.8、26.1和26.9度20。實(shí)施例22用KSP抑制劑處理的腫瘤細(xì)胞系的細(xì)胞生存力的抑制原料和溶液，細(xì)胞SKOV3，卵巢癌(人)。培養(yǎng)基無酚紅RPMI+5%胎牛血清+2mML-谷氨酰胺。用于測(cè)定細(xì)胞生存力的比色劑PromegaMTS四唑嗡化合物。用于最大細(xì)胞殺傷的對(duì)照化合物Topotecan,1(xM。方法第l天-細(xì)胞鋪板用10mLPBS洗滌粘附的SKOV3細(xì)胞，然后加入2mL0.25%胰蛋白104酶，并在37。C下溫育5分鐘。用8mL培養(yǎng)基(無酚紅RPMI+5%FBS)從燒瓶中沖洗細(xì)胞，并轉(zhuǎn)入新鮮的燒瓶。用Coulter計(jì)數(shù)器測(cè)定細(xì)胞濃度，并計(jì)算獲得1000個(gè)細(xì)胞/100pL的適宜的細(xì)胞體積。將100nL培養(yǎng)基細(xì)胞懸浮液(調(diào)節(jié)至1000細(xì)胞/100pL)加入96孔平板的所有孔中，然后在37。C、100%濕度和5%C02下溫育18-24小時(shí)，使細(xì)胞粘附在平板上。方法第2天-化合物加入向一列孔的高壓滅菌的測(cè)定儲(chǔ)備液中以400X最大目標(biāo)濃度加入最初2.5pL的測(cè)試化合物。將1.25pL400X(400pM)Topotecan加入其它孔中(用這些孔的光密度來扣除死亡細(xì)胞和載體的背景吸光度)。將不含DMSO的500tiL培養(yǎng)基加入含有測(cè)試化合物的孔，并將250加入Topotecan孔。將250pL培養(yǎng)基+0.5%DMSO加入其余的孔中，將孔中的測(cè)試化合物連續(xù)稀釋。將來自測(cè)定儲(chǔ)備液的含化合物的培養(yǎng)基成行平板復(fù)制(平行兩份)至對(duì)應(yīng)的細(xì)胞平板。將細(xì)胞平板于37'C、100%濕度和5%C02下溫育72小時(shí)。方法第4天-MTS加入和OD讀數(shù)從培養(yǎng)箱中移出平板，并將40nLMTS/PMS加入每孔。然后將平板于37。C、100%濕度，5。/。C02下溫育120分鐘，然后在5秒的振蕩循環(huán)之后96孔分光光度計(jì)中在490nm處讀取OD。數(shù)據(jù)分析計(jì)算對(duì)照的歸一化的％(吸光度-背景)，并用Xlfit作出劑量-反應(yīng)曲線，由此曲線測(cè)定抑制生存力50%所需的化合物的濃度。本發(fā)明的化合物在通過上述方法測(cè)試時(shí)表現(xiàn)出活性。實(shí)施例23對(duì)映異構(gòu)體分離通過手性色譜法，使用以下條件將富集的3:1R:S的色酮對(duì)映異構(gòu)體的混合物分離成其純對(duì)映異構(gòu)體柱-ChiralpakAD,250x4.6mm(DiacelInc.)。樣品-22.5mg/ml，在1:1i-PrOH:己垸中。條件-用在己垸中的等滲50%i-PrOH的溶液洗脫40分鐘，在18.35分鐘時(shí)洗脫(S)-對(duì)映異構(gòu)體，在26.87分鐘時(shí)洗脫(R)-對(duì)映異構(gòu)體。(R)-對(duì)映異構(gòu)體明顯比實(shí)施例2的化合物的(S)-對(duì)映異構(gòu)體更有效。實(shí)施例24應(yīng)用KSP抑制劑后的單極紡錘體形成人腫瘤細(xì)胞系Skov-3(卵巢)以每孔4,000個(gè)細(xì)胞的密度放入96孔板中，使它們粘附24小時(shí)，并用各種濃度的色酮化合物處理24小時(shí)。細(xì)胞固定在4%甲醛中，并用抗微管蛋白抗體(隨后使用熒光標(biāo)記的第二抗體識(shí)別)和Hoechst染料(其染色DNA)進(jìn)行染色。肉眼檢查表明該化合物導(dǎo)致細(xì)胞周期停止在有絲分裂的前中期。DNA縮合，并且開始形成紡錘體，但休止的細(xì)胞均勻地表現(xiàn)單極紡錘體，這表明抑制了紡錘極體的分離。微量注射抗KSP抗體也導(dǎo)致有絲分裂停止，休止細(xì)胞表現(xiàn)單極紡錘體。實(shí)施例25在用KSP抑制劑處理的腫瘤細(xì)胞系中抑制細(xì)胞增殖以1000-2500個(gè)細(xì)胞/孔的密度將細(xì)胞鋪入96孔板的孔中，然后使它們粘附/生長(zhǎng)24小時(shí)。然后用多種濃度的藥物將它們處理48小時(shí)。添加化合物時(shí)的時(shí)間作為To。使用試劑3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)_2_(4-磺苯基)-2H-四唑鎗(MTS)的基于四唑鎗的測(cè)定(專利號(hào)5，185,450)(參見Promega產(chǎn)品目錄#G3580,CellTiter96AQu咖sOneSolutionCellProliferationAssay),被用于測(cè)定To時(shí)的細(xì)胞存活數(shù)目以及接觸化合物48小時(shí)后存活細(xì)胞的數(shù)目。對(duì)48小時(shí)后存活的細(xì)胞的數(shù)目與添加藥物時(shí)的存活細(xì)胞的數(shù)目進(jìn)行比較，以計(jì)算生長(zhǎng)抑制作用。在僅用載體(0.25。/。DMSO)處理的對(duì)照孔中細(xì)胞在48小時(shí)后的生長(zhǎng)被認(rèn)為是100%的生長(zhǎng)，而添加化合物的孔中的細(xì)胞生長(zhǎng)與其進(jìn)行比較。Gi5()通過化合物的濃度(KiM)對(duì)處理孔中細(xì)胞生長(zhǎng)的百分比作圖而計(jì)算。對(duì)于化合物計(jì)算的Gi5o是與對(duì)照相比抑制生長(zhǎng)50M時(shí)的估計(jì)濃度，即在該濃度100x[(處理48-To)/(對(duì)照48-Tq)]=50其中處理48是48小時(shí)時(shí)處理細(xì)胞的值，而對(duì)照48是48小時(shí)時(shí)對(duì)照細(xì)胞的值。所有的化合物濃度均平行兩份測(cè)試，而對(duì)照是12個(gè)孔的平均值。NationalCancerInstitute使用非常類似的96孔板方案和Gi5。。計(jì)算方法(參見Monks等人，J.Nail.Cancerlust.83:757-766(1991))。但是，NationalCancerInstitute用于定量細(xì)胞數(shù)目的方法不使用MTS，而是使用另外的方法。實(shí)施例26ICS()的計(jì)算使用ATP酶測(cè)定來測(cè)量化合物對(duì)KSP活性的ICso值。使用以下溶液溶液1由3mM磷酸烯醇丙酮酸鉀鹽(SigmaP-7127)、2mMATP(SigmaA-3377)、1mMIDTT(SigmaD-9779)、5紫杉醇(SigmaT-7402)、10ppm消泡289(SigmaA-8436)、25mMPipes/KOHpH6.8(SigmaP6757)、2mM氯化鎂(VWRJT400301)以及1mMEGTA(SigmaE3889)組成。溶液2由1mMNADH(SigmaN8129)、0.2mg/mlBSA(SigmaA7906)、丙酮酸激酶7U/ml、L-乳酸脫氫酶10U/ml(SigmaP0294)、100nMKSP運(yùn)動(dòng)域、50jxg/ml微管、ImMDTT(SigmaD9779)、5紫杉醇(SigmaT-7402)、10ppm消泡289(SigmaA-8436)、25mMPipes/KOHpH6.8(SigmaP6757)、2mM氯化鎂(VWRJT4003-01)以及l(fā)mMEGTA(SigmaE3889)組成。使用溶液1在96孔微量滴定板(ComingCostar3695)中進(jìn)行化合物的系列稀釋(8-12個(gè)2倍稀釋)。在系列稀釋后，每個(gè)孔有50pL溶液l。在每個(gè)孔中添加5^L溶液2，由此使反應(yīng)開始。這可通過手工使用多通道移液管或者用自動(dòng)液體處理裝置來實(shí)現(xiàn)。將微量滴定板轉(zhuǎn)移至微板吸光度讀數(shù)器中，并以動(dòng)態(tài)模式讀取每個(gè)孔在340nm處的多個(gè)吸光度讀數(shù)。所觀察到的變化速率與ATP酶成正比，并繪制其作為化合物濃度的函數(shù)的圖。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)IC50測(cè)定，將獲得的數(shù)據(jù)通過以下四參數(shù)方程使用非線性擬合程序(如Grafit4)進(jìn)行擬合<formula>formulaseeoriginaldocumentpage108</formula>其中y是觀察到的速率，而x是化合物濃度'權(quán)利要求1.式I的化合物式I其中R1選自任選被氰基或甲氧基取代的C6-C14芳基-C1-C4烷基；R2’是氫；R2是C1-C4烷基；R12選自-NHR4、-N(R4)(COR3)、id="icf0002"file="A2008100837490002C2.tif"wi="69"he="26"top="128"left="98"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R3選自O(shè)R15，其中R15是C1-C8烷基；被C1-C4烷氧基取代的C1-C4烷基；被一個(gè)或多個(gè)以下取代基取代的苯基鹵素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氰基、乙酰基、Ac-NH-、(CH3)2N-；被亞甲二氧基取代的C6-C14芳基-C1-C4烷基；和選自以下基團(tuán)的C5-C10雜芳基任選被C1-C4烷基和/或三氟甲基取代的呋喃基，被C1-C4烷基取代的噻吩基，苯并噻吩基，苯并噻二唑基，吡啶基，甲基吡啶基，三氟甲基吡啶基，2-(1-甲基-1H-吲哚基)，2-(1-甲基-1H-吡咯基)，被C1-C4烷基取代的吡唑基，被C1-C4烷基取代的吡嗪基，被C1-C4烷基取代的異噁唑基，和苯并異噁唑基，4-(1-甲基-1H-咪唑)-，R4是氫或被氨基取代的C1-C13烷基，或者是(t-Boc)氨基丙基；R5、R5和R8是氫；R7選自C1-C4烷氧基、鹵素、羥基和氰基；R9是被亞甲二氧基取代的C6-C14芳基-C1-C4烷基或被C1-C4烷基和/或鹵素取代的苯基，或者是亞甲二氧基苯基；R10和R10’獨(dú)立地是氫或C1-C4烷基；R13、R14和R14’是氫；R13’是被氨基或乙酰氨基取代的C1-C8烷基；其是單一立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體混合物的形式；或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或者所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物。2.權(quán)利要求l的化合物，其中R7選自氰基、甲氧基和鹵素。3.權(quán)利要求2的化合物，其中R7是-C1。4.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中R2是乙基或丙基。5.權(quán)利要求4的化合物，其中R2是異丙基。6.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中R,選自任選被氰基或甲氧基取代的苯基-CrC4烷基。7.權(quán)利要求6的化合物，其中R,選自芐基、氰基芐基和甲氧基芐基。8.權(quán)利要求7的化合物，其中R,是芐基。9.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中R3選自對(duì)甲苯基、3-氟-4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙酰基苯基、4-乙氧基苯基、6-三氟甲基-3-吡啶基、2-苯并[b]噻吩、3-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑)、3-(2，5-二甲基-211-吡唑)、2-呋喃基、4-氰基苯基、4-AcNH-苯基、5-苯并[l，2，3]噻二唑-、3-(2，5-二甲基-2H-吡唑)-、4-吡啶基、2-(l-甲基-lH』引噪)-、2-(l-甲基-lH-吡咯)-、2-(5-甲基-吡嗪)-、2-(5-甲基-噻吩)-、3-(2,5-二甲基-呋喃)-、3-(5-甲基-2-三氟甲基-呋喃)-、3-(5-甲基-異噁唑)-、3-苯并[c]異噁唑-、3-N(CH3)2-苯基、3-吡啶基、4-(l-甲基-lH-咪唑)-、6-甲基-3-吡啶基、甲氧基甲基和叔丁氧基。10.權(quán)利要求9的化合物，其中R3是對(duì)甲苯基或3-氟-4-甲基苯基。11.權(quán)利要求l-3之任一項(xiàng)的化合物，其中Ru是-N(R4)(COR3)，且R4選自氫、氨基丙基和(t-Boc)氨基丙基。12.權(quán)利要求ll的化合物，其中R4是3-氨基丙基。13.權(quán)利要求12的化合物，其中Ri是芐基，R2是異丙基，R7是C1，R3是對(duì)甲苯基，且R4是3-氨基丙基。14.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中R,2是N、Rw，且R9是甲苯基、鹵代苯基或鹵代甲基苯基。15.權(quán)利要求14的化合物，其中Ri3，是被氨基取代的CH:4垸基。16.權(quán)利要求15的化合物，其中Rn，是氨基乙基或氨基甲基。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>17.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中1112是、。，且R9選自亞甲二氧基苯基和被Q-C4烷基或鹵素取代的苯基。18.權(quán)利要求17的化合物，其中R9選自亞甲二氧基苯基、甲苯基和鹵代苯基。19.權(quán)利要求18的化合物，其中Ru)和Ru)，獨(dú)立地是氫或甲基。20.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中R2和R2,各自與具有R構(gòu)型的立體中心連接。21.權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的化合物，其中所述藥學(xué)可接受的鹽是鹽酸鹽、磷酸鹽或草酸鹽。22.權(quán)利要求21的化合物，其中所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物是鹽酸鹽一水合物。23.組合物，其包含藥用賦形劑和權(quán)利要求卜22之任一項(xiàng)的式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或者所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物。24.體外調(diào)節(jié)KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性的方法，其包括使所述驅(qū)動(dòng)蛋白與有效量的權(quán)利要求l-22之任一項(xiàng)的式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或者所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物接觸。25.體外抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的方法，其包括使所述驅(qū)動(dòng)蛋白與有效量的權(quán)利要求1-22之任一項(xiàng)的式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或者所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物接觸。26.權(quán)利要求1-22之任一項(xiàng)的式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或者所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物在生產(chǎn)調(diào)節(jié)KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性的藥物中的用途。27.權(quán)利要求1-22之任一項(xiàng)的式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或者所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物在生產(chǎn)抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的藥物中的用途。28.權(quán)利要求1-22之任一項(xiàng)的式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或者所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物在生產(chǎn)治療細(xì)胞增殖性疾病的藥物中的用途。29.權(quán)利要求23的組合物在生產(chǎn)治療細(xì)胞增殖性疾病的藥物中的用途。30.權(quán)利要求28或29的用途，其中所述疾病選自癌癥、增生、再狹窄、心臟肥大、免疫疾病和炎癥。31.權(quán)利要求28或29的用途，其中所述疾病是與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性有關(guān)的病癥。全文摘要本發(fā)明涉及式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或者所述藥學(xué)可接受的鹽的藥學(xué)可接受的溶劑化物，其中R₁、R_2’、R₂、R₁₂、R₅、R₆、R₇和R₈如權(quán)利要求中所定義，所述化合物是單一立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體混合物的形式。本發(fā)明還涉及含有所述化合物的藥物組合物及所述化合物和組合物的應(yīng)用。文檔編號(hào)A61KGK101328163SQ200810083749公開日2008年12月24日申請(qǐng)日期2003年4月11日優(yōu)先權(quán)日2002年4月17日發(fā)明者克里斯托弗·S.·布魯克,馮柏年,古斯塔夫·貝格內(nèi)斯,史蒂文·戴維·奈特,安德魯·麥克唐納,小戴維·J.·C.·莫干斯,肯尼思·A.·紐蘭德,達(dá)西昂特·達(dá)哈納特申請(qǐng)人:賽特凱恩蒂克公司;史克比徹姆公司