專(zhuān)利名稱(chēng)::一種拉米夫定酯注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明屬于中藥制劑
技術(shù)領(lǐng)域:
,涉及拉米夫定酯注射制劑,更具體的說(shuō),是一種拉米夫定酯注射液及其制備方法。
背景技術(shù):
:乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一種世界性疾病發(fā)展中國(guó)家發(fā)病率高,據(jù)統(tǒng)計(jì)全世界無(wú)癥狀攜帶者(HBsAg攜帶者)超過(guò)2.8億,我國(guó)占1億以上。多數(shù)無(wú)癥狀其中1/3出現(xiàn)肝損害的臨床表現(xiàn)。特點(diǎn)為起病較緩,以亞臨床型及慢性型較常見(jiàn)無(wú)黃疽型HBsAg持續(xù)陽(yáng)性者易慢性化。本病主要通過(guò)血液及日常生活密切接觸傳播,另一方式為母嬰傳播乙肝疫苗的應(yīng)用是控制和預(yù)防乙型肝炎的根本措施。拉米夫定酯(Adefovir)為腺嘌呤核苷類(lèi)似物,它可與腺苷酸競(jìng)爭(zhēng)性摻入病毒DNA鏈,作為DNA鏈的終止物抑制DNA聚合酶,終止DNA鏈的合成,而使病毒的復(fù)制受到抑制。拉米夫定酯還可以誘導(dǎo)內(nèi)生性a-干擾素,增加自然殺傷細(xì)胞(NK)的活力和剌激機(jī)體的免疫反應(yīng)。因此有較強(qiáng)的抗HIV、HBV及皰疹病毒的作用。Adefovirdipivoxil為拉米夫定酯的口服制劑。在治療慢性乙肝時(shí),其藥量是治療HIV感染的10%到25%,且毒副作用較小。拉米夫定酯水溶性差,幾不溶于水,又非親脂性物質(zhì)。該成分的這一特殊物理性質(zhì)幾乎成為將其開(kāi)發(fā)成藥品過(guò)程中的一個(gè)瓶頸,無(wú)論是口服還是注射給藥,制劑的研制極其遲緩,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn),如下的問(wèn)題(1)拉米夫定酯在上述公開(kāi)的溶劑中溶解度是極其有限,即使在溶解作用較好的乙醇中溶解度也僅為0.25%(g/100ml)左右,而且在加一定量水稀釋時(shí)即有沉淀析出。(2)上述發(fā)明專(zhuān)利中提到的注射劑,用丙二醇_乙醇為溶媒,僅提到混合溶媒之間的配比,未提到藥物和混合溶媒之間的配比。因這類(lèi)注射劑臨床使用時(shí)不能直接注射,而是需要用注射用水,氯化鈉或葡萄糖輸液稀釋后給藥,如在制劑處方中對(duì)藥物與非水溶劑比例非水溶劑在處方中的比例不加以限定和不添加適當(dāng)助溶劑以提高溶液穩(wěn)定性,當(dāng)臨床用適當(dāng)溶媒稀釋使用時(shí),即會(huì)出現(xiàn)溶液渾濁無(wú)法給藥等問(wèn)題,很難達(dá)到注射給藥的要求。(3)上述發(fā)明公開(kāi)的實(shí)施例1中,采用100%非水溶劑溶解拉米夫定酯得到了所述注射液。但我們?cè)趯?shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn),上述注射液在加入注射用水至10ml時(shí)溶液即出現(xiàn)渾濁,達(dá)不到注射給藥的要求。實(shí)驗(yàn)證明非水溶劑確實(shí)能提高拉米夫定酯的溶解度,但在注射劑處方中必須與拉米夫定酯、水、助溶劑以合理的配比,經(jīng)適當(dāng)?shù)牟襟E和方法制備,才能夠獲得符合注射給藥要求的注射液。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷與不足,提供一種可以用任意比例的注射用水、氯化鈉或葡萄糖輸液稀釋?zhuān)3秩芤撼蚊鞫鹊睦追蚨プ⑸湟杭捌渲苽浞椒?。本發(fā)明的目的是通過(guò)下述技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的拉米夫定酯注射液,由拉米夫定酯、非水溶劑、助溶劑和注射用水組成,其中拉米夫定酯與非水溶劑的重量體積比(g/ml)為l:10-100,優(yōu)選l:15-60,非水溶劑在處方中的用量比為2060%(v/v),助溶劑用量為120%(w/v),每支注射液中含拉米夫定酯0.5或1.0g/ml。本發(fā)明所述的溶解拉米夫定酯用非水溶劑是指生理可耐受的乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇(200,400)等溶劑中的一種或幾種的混合溶劑。所述助溶劑包括葡萄糖、山梨醇、甘露醇等,最好為葡萄糖或山梨醇。特別需要強(qiáng)調(diào)的是拉米夫定酯與非水溶劑的比例,這點(diǎn)對(duì)于制備保持溶液澄明度,符合注射給藥要求的注射液來(lái)說(shuō)是至關(guān)重要的。如拉米夫定酯所占比例過(guò)大,則原料藥在非水溶劑中會(huì)達(dá)到飽和濃度,當(dāng)制備過(guò)程中加處方量的水稀釋時(shí)溶液即會(huì)出現(xiàn)不同程度的渾濁現(xiàn)象,導(dǎo)致過(guò)濾困難和不必要的原料浪費(fèi)以及影響注射液中藥物含量恒定等情況,增加生產(chǎn)難度;拉米夫定酯比例過(guò)小,則會(huì)不必要地增加非水溶媒用量,影響臨床用藥安全性。我們通過(guò)大量的處方篩選試驗(yàn),摸索出既可提高拉米夫定酯溶解性,又可以滿(mǎn)足注射用藥要求的合理的制劑處方和制備方法,通過(guò)使用適量的非水溶劑和助溶劑,增加拉米夫定酯的溶解度和保持溶液的穩(wěn)定性,避免在臨床稀釋使用時(shí)出現(xiàn)溶液渾濁、無(wú)法給藥等問(wèn)題的發(fā)生,盡可能降低非水溶劑的用量,提高了原藥濃度,增加了臨床使用的安全性。本發(fā)明提供的處方和技術(shù)生產(chǎn)的注射劑,可以用任意比例的注射用水,氯化鈉或葡萄糖輸液稀釋?zhuān)3秩芤旱某蚊鞫?,適合靜脈注射給藥。本發(fā)明提供拉米夫定酯注射液規(guī)格為2ml、5ml,每種規(guī)格注射液拉米夫定酯含量為0.5或lmg/ml。本發(fā)明所用的拉米夫定酯原料為本實(shí)驗(yàn)室自制,經(jīng)HPLC檢測(cè),拉米夫定酯的含量在98%以上。本發(fā)明拉米夫定酯注射液的制備方法,其特征在于該方法按以下步驟進(jìn)行(l)取適量拉米夫定酯,在0IO(TC最好為408(TC溶于適量非水溶劑中(2)加入適量注射用水(3)加入適量助溶劑,溶解,補(bǔ)足注射用水(4)用滅菌垂熔玻璃漏斗或其他配制注射液用過(guò)濾方法過(guò)濾,灌封、滅菌即得。為進(jìn)一步說(shuō)明拉米夫定酯注射液的積極效果,本發(fā)明人對(duì)所制備的注射液分別進(jìn)行了加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)、過(guò)敏性試驗(yàn)、全身用藥剌激性試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明本發(fā)明的拉米夫定酯注射液質(zhì)量穩(wěn)定,安全性符合注射劑質(zhì)量要求,可滿(mǎn)足臨床用藥需要?,F(xiàn)分述如下—、拉米夫定酯注射液加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)對(duì)本發(fā)明的方法制備而得的拉米夫定酯注射液,按加速穩(wěn)定性試驗(yàn)法進(jìn)行了穩(wěn)定性研究。穩(wěn)定性試驗(yàn)考察的項(xiàng)目分別為性狀、PH值、澄明度、含量測(cè)定等項(xiàng)。材料與方法樣品批號(hào)060626、0707161)試驗(yàn)條件3740°C,相對(duì)濕度75%。2)考察時(shí)間0月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月。3)考察項(xiàng)目性狀、ra值、澄明度、拉米夫定酯含量測(cè)定;試驗(yàn)結(jié)果如表2_1和2-2所示,拉米夫定酯注射液在本試驗(yàn)條件下很穩(wěn)定。表1樣品加速穩(wěn)定性試驗(yàn)報(bào)告樣品拉米夫定酯注射液(批號(hào)060626)放置時(shí)間0月2個(gè)月3個(gè)月6個(gè)月取樣日期2006.6.24加06.8.242006.9.242006.12.24性狀無(wú)色澄明液體無(wú)色澄明液體無(wú)色澄明液體無(wú)色澄明液體鑒別合格合格合格合格1)pH值2)澄明度7.5合格7.3合格7.3合格7.4合格含量測(cè)定(mg/ml)1.00011.00001.00031.0004表2樣品加速穩(wěn)定性試驗(yàn)報(bào)告樣品拉米夫定酯注射液(批號(hào)0710718)放置時(shí)間0月2個(gè)月3個(gè)月6個(gè)月取樣日期2007.7.182007.9.182007.10.182007.1.18性狀無(wú)色漫明液體無(wú)色澄明液體無(wú)色澄明液體無(wú)色澄明液體鑒別合格合格合格合格1)pH值2〉明度7.2合格7.2合格7.3合格7.2合格含量測(cè)定(mg/通l)0.99981.00011.00031.0001.二、拉米夫定酯注射液全身用藥剌激性試驗(yàn)試驗(yàn)材料受試藥拉米夫定酯注射液,規(guī)格lml/支,每支含拉米夫定酯1.0mg,批號(hào)060624,臨用時(shí)用無(wú)菌生理鹽水溶解配制成所需濃度。試驗(yàn)方法選取4只健康的新西蘭種白兔,體重為33.4kg,飼養(yǎng)一周后供試驗(yàn)用。分別與兔子的左耳耳緣靜脈推注TD,右耳注射無(wú)菌生理鹽水作為參比對(duì)照,每次lmg/kg,藥液濃度為O.6mg/ml,連續(xù)給予3天。在末次給藥后肉眼觀察血管的外觀狀況,然后在距離注射部位lcm處向耳根部方向取一段1.5cm左右的血管,用1%的福爾馬林溶液固定,進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。試驗(yàn)結(jié)果給藥一側(cè)與生理鹽水一側(cè)的耳尖部病變皆一致,皮下組織內(nèi)有輕度慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn),以淋巴細(xì)胞為主。表皮完好,無(wú)損傷,無(wú)增生,皮下附屬腺無(wú)病變。給藥側(cè)軟骨正常,軟骨外有空泡空隙,兩旁血管充血,兩只充血較嚴(yán)重,另兩只充血較輕。皮膚表皮完好,無(wú)缺損,皮下組織無(wú)炎癥,附屬腺無(wú)病變。給生理鹽水側(cè),耳中部?jī)H見(jiàn)軟骨外有空泡空隙,血管不充血,表皮上皮完好無(wú)損,皮下組織無(wú)炎癥,附屬腺無(wú)病變。結(jié)論本品連續(xù)給藥后,給藥側(cè)與對(duì)照側(cè)的耳尖部均有輕度的炎癥,可能是注射操作不當(dāng)引起,與用藥無(wú)關(guān);給藥一側(cè)耳中部出現(xiàn)充血,但未見(jiàn)炎癥。病理檢查未出現(xiàn)異常的變化。在本試驗(yàn)中,連續(xù)應(yīng)用拉米夫定酯注射液未見(jiàn)有血管剌激性。三、拉米夫定酯的過(guò)敏性試驗(yàn)試驗(yàn)材料拉米夫定酯注射液,規(guī)格lml/支,每支含拉米夫定酯1.0mg,臨用時(shí)用無(wú)菌生理鹽水溶解配制成0.6mg/ml的濃度。陽(yáng)性藥卵白蛋白(Albiminegg),Sigma公司產(chǎn)品,華美生物工程公司分裝,批號(hào)BP0038。用無(wú)菌生理鹽水配制成4%的濃度。試驗(yàn)方法選取體重250350g的豚鼠20只,隨機(jī)分成兩組,每組10只。每只豚鼠隔日肌肉注射藥液0.5ml,共注射3次,其中5只在第1次注射藥物后14天再?gòu)墓伸o脈注射原藥液lml,進(jìn)行抗原攻擊,另外5只在第1次注射藥物后21天再?gòu)念i靜脈注射藥液lml,進(jìn)行抗原攻擊。在抗原攻擊后,如有過(guò)敏反應(yīng),則在注藥后幾分鐘內(nèi)發(fā)生,根據(jù)豚鼠表現(xiàn)進(jìn)行平分,平分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)下表。如果高于2分為有過(guò)敏反應(yīng),2分以下表明該藥無(wú)致敏作用。試驗(yàn)設(shè)兩組,一組為拉米夫定酯注射液組,給予拉米夫定酯注射液,一組為陽(yáng)性對(duì)照組,給予卵白蛋白。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>試驗(yàn)結(jié)果抗原攻擊后的動(dòng)物表現(xiàn)評(píng)分見(jiàn)下表抗原攻擊后的行為表現(xiàn)評(píng)分序號(hào)拉米夫定幽注射卵白蛋白組液組444444343結(jié)論本試驗(yàn)中,黃芪注射液沒(méi)有引起動(dòng)物的過(guò)敏反應(yīng)。四、拉米夫定酯溶血試驗(yàn)2%細(xì)胞混懸液的制備取兔血20ml,用玻璃棒攪動(dòng)血液,除去纖維蛋白原,使成脫纖血液,加510ml的生理鹽水,搖勻,20002500rpm離心5分鐘,除去上清液,沉淀的紅細(xì)胞再用510ml生理鹽水如法洗滌3次,至上清液不顯紅色為止。將所得紅血球用生理鹽水配成2%的懸液,供試驗(yàn)用。取拉米夫定酯注射液用生理鹽水配制成O.15mg/ml的溶液備用。試驗(yàn)方法取試管7只,按表3配比量依次加入2%紅細(xì)胞懸液和生理鹽水,混勻后,于37恒溫箱放置半小時(shí),然后分別加入不同量的藥液(第六管為對(duì)照管),搖勻后,置37恒溫箱中。開(kāi)始每隔15分鐘觀察一次,1小時(shí)后,每隔1小時(shí)觀察一次,共觀察2小時(shí),如溶液呈透明紅色,即表示溶血,如溶液中有棕紅色或紅棕色絮狀沉淀,表示有紅細(xì)胞凝聚作用。表3拉米夫定酯注射液溶血反應(yīng)試驗(yàn)23456789100010000<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>試驗(yàn)結(jié)果顯示15號(hào)試管未出現(xiàn)溶血反應(yīng)或凝集反應(yīng),說(shuō)明拉米夫定酯注射液在本試驗(yàn)條件下不產(chǎn)生溶血反應(yīng)和凝集反應(yīng)。具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例可以幫助本領(lǐng)域的技術(shù)人員更全面的理解本發(fā)明。但不以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例1處方拉米夫定酯1.0g乙醇200ml丙二醇150ml山梨醇35g水補(bǔ)足至lOOOml制法取拉米夫定酯,在6(TC下溶于處方量丙二醇中,加入處方量乙醇,攪勻,攪拌下加入部分水,再加入山梨醇溶解后,補(bǔ)水至lOOOml,用滅菌垂熔玻璃漏斗過(guò)濾,灌封,即得1ml規(guī)格拉米夫定酯注射液500支。以本制備方法制備而得的樣品,經(jīng)加速穩(wěn)定性試驗(yàn)(附錄1)證明在試驗(yàn)條件下有很好的穩(wěn)定性,各項(xiàng)指標(biāo)均符合注射劑標(biāo)準(zhǔn)(中國(guó)藥典2000年版附IU)。本注射液3支(1.0mgX2ml)加入到250、500ml規(guī)格的5%葡萄糖輸液和氯化鈉輸液中未出現(xiàn)渾濁等異常現(xiàn)象,動(dòng)物溶血試驗(yàn)、熱源檢查、剌激性試驗(yàn)以及過(guò)敏性試驗(yàn)表明完全符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)施例2:處方拉米夫定酯1.0g乙醇400ml甘油10ml葡萄糖100g水補(bǔ)足至lOOOml制備方法取處方量的拉米夫定酯,室溫下溶于處方量的乙醇和甘油中,攪拌溶解后,加入部分注射用水,攪勻后,加入葡萄糖,攪拌溶解,再補(bǔ)注射用水至lOOOml,過(guò)濾,灌封,滅菌,即得5ml規(guī)格拉米夫定酯注射液200支。實(shí)施例3:處方拉米夫定酯1.0g乙醇300ml丙二醇100ml葡萄糖50g水補(bǔ)足至1000ml制備方法取處方量的拉米夫定酯,4(TC下溶于處方量的乙醇和丙二醇的混合溶液中,攪拌下加入部分水,再加入葡萄糖,溶解后補(bǔ)注射用水至1000ml,過(guò)濾,灌封,滅菌,即得2ml規(guī)格拉米夫定酯注射液500支。實(shí)施例4:處方拉米夫定酯0.5g乙醇250ml山梨醇80g水補(bǔ)足至1000ml制備方法取處方量的拉米夫定酯,3(TC下溶于處方量的乙醇溶液中,攪拌溶解后加入部分水,再加入山梨醇,溶解后補(bǔ)注射用水至lOOOml,過(guò)濾,灌封,滅菌,即得10ml規(guī)格拉米夫定酯注射液100支。實(shí)施例5:處方拉米夫定酯1.0g丙二醇400ml葡萄糖25g水補(bǔ)足至1000ml制備方法取處方量的拉米夫定酯,5(TC下溶于處方量的丙二醇溶液中,攪拌下加入部分水,再加入葡萄糖,補(bǔ)注射用水至lOOOml,過(guò)濾,灌封,滅菌,即得5ml規(guī)格拉米夫定酯注射液200支。實(shí)施例6:處方拉米夫定酯1.Og乙醇200ml聚乙二醇200300ml甘露醇20g水補(bǔ)足至lOOOml制備方法取處方量的拉米夫定酯,4(TC下溶于處方量的乙醇和聚乙二醇200的混合溶液中,攪拌下加入部分水,再加入甘露醇,溶解后補(bǔ)注射用水至lOOOml,過(guò)濾,灌封,滅菌,即得10ml規(guī)格拉米夫定酯注射液100支。實(shí)施例7:處方拉米夫定酯l.Og乙醇300ml丙二醇200ml甘露醇50g水補(bǔ)足至lOOOml制備方法取處方量的拉米夫定酯,7(TC下溶于處方量的乙醇和丙二醇的混合溶液中,攪拌下加入部分水,再加入甘露醇,溶解后補(bǔ)注射用水至lOOOml,過(guò)濾,灌封,滅菌,即得2ml規(guī)格拉米夫定酯注射液500支。權(quán)利要求一種拉米夫定酯注射液,其特征在于由拉米夫定酯、非水溶劑、助溶劑和注射用水組成,其中拉米夫定酯與非水溶劑的重量體積比(g/ml)為1∶10-100,非水溶劑在處方中的用量比為20~60%(v/v),助溶劑用量為1~20%(w/v),每支注射液中含拉米夫定酯0.5或1.0g/ml。2.如權(quán)利要求1所述的拉米夫定酯注射液,其特征在于所述拉米夫定酯與非水溶劑的重量體積比為1:15-60。3.如權(quán)利要求1或2或3所述的拉米夫定酯注射液,其特征在于所述非水溶劑為乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇中的一種或幾種的混合溶劑。4.如權(quán)利要求1所述的拉米夫定酯注射液,其特征在于所述助溶劑為葡萄糖、山梨醇、甘露醇、環(huán)己六醇中的一種或幾種。5.—種拉米夫定酯注射劑的制備方法,該方法按以下步驟進(jìn)行取適量拉米夫定酯,在適當(dāng)溫度下溶于適量非水溶劑中;加入適量注射用水;加入適量助溶劑,溶解,補(bǔ)足注射用水;過(guò)濾,灌封、滅菌即得。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種拉米夫定酯注射液及其制備方法,由拉米夫定酯、非水溶劑、助溶劑和注射用水組成,其中拉米夫定酯與非水溶劑的重量體積比(g/ml)為1∶10-100,優(yōu)選1∶15-60,非水溶劑在處方中的用量比為20~60%(v/v),助溶劑用量為1~20%(w/v),每支注射液中含拉米夫定酯0.5或1.0g/ml。本發(fā)明的拉米夫定酯注射液經(jīng)加速穩(wěn)定性試驗(yàn),動(dòng)物溶血試驗(yàn)、熱源檢查、刺激性試驗(yàn)以及過(guò)敏性試驗(yàn),表明完全符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。具有質(zhì)量穩(wěn)定,起效迅速,毒副作用低的特點(diǎn),避免了在臨床稀釋使用時(shí)出現(xiàn)溶液渾濁、無(wú)法給藥等問(wèn)題的發(fā)生,可滿(mǎn)足臨床的需要。文檔編號(hào)A61P1/00GK101756889SQ20081015254公開(kāi)日2010年6月30日申請(qǐng)日期2008年10月29日優(yōu)先權(quán)日2008年10月29日發(fā)明者宋富智申請(qǐng)人:天津金世制藥有限公司