專利名稱：：一種治療中風類疾病的千草腦脈通藥物及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明屬中藥制藥
技術領域：
，涉及一種具有活血祛瘀，化痰活絡作用，用于治療痰瘀阻絡所致中風，中經絡，半身不遂，口眼歪斜，言語不利等癥的藥物制劑，具體涉及一種治療中風類疾病的千草腦脈通藥物及其制備方法。
背景技術：
：根據國家藥品標準WS-10195(ZD-0195)-2002中給出的配方和提取工藝制備而成的千草腦脈通合劑，是一種具有活血祛瘀，化痰活絡作用，用于治療痰瘀阻絡所致中風，中經絡，半身不遂，口眼歪斜，言語不利等癥的口服中藥制劑。以下是該藥品標準中所載的部分內容處方虎尾草133.3g，千斤墜66.7g制法以上二味，加水煎煮二次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.10(60°C)的清膏，冷卻，加乙醇使含醇量達70%，靜置24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，得流浸膏，加水至1000ml，調節(jié)pH值至5.07.0，灌裝，滅菌，即得。中藥合劑雖為傳統(tǒng)劑型，但根據患者臨床反映，這種藥品口感苦澀，難以堅持長期服用，即服用順應性較差；同時服用量大，運輸、攜帶及使用都不方便，影響了它的應用范圍。另外由于其制備工藝落后，除雜不完全，貯藏過程中容易產生沉淀，影響產品質量。因此亟待開發(fā)一種產品質量穩(wěn)定，服用量小、攜帶方便、順應性好的千草腦脈通口服藥物制劑。
發(fā)明內容本發(fā)明為了解決現(xiàn)有千草腦脈通合劑制備工藝落后，質量不穩(wěn)定、服用順應性差的缺點，提供一種工藝先進合理、適合工業(yè)化大生產，質量穩(wěn)定、服用量小、順應性好的千草腦脈通藥物及其制備方法。為解決上述問題本發(fā)明提供技術方案如下一種千草腦脈通藥物，其特征在于該藥物是由如下方法制備得到的取虎尾草2重量份，千斤墜l重量份，用60%~80%乙醇提取2~3次，每次12小時，乙醇用量為藥材重量的610倍，提取液濃縮至在6(TC時相對密度為1.10~1.20，濃縮液加水至1~2倍藥材重量，攪勻、靜置后過濾，濾液上大孔樹脂吸附，流速為0.5~3柱體積/小時，上樣量為干樹脂重量藥材重量=1:2~4，過柱液重吸附一次，靜置12h后洗脫，先用5~8倍柱體積水洗脫，再用6~10倍柱體積60%~80%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮、干燥為本發(fā)明藥物的提取干粉；或將乙醇洗脫液濃縮成6(TC時相對密度為1.351.40的稠膏。上述千草腦脈通藥物可制成片劑、分散片、顆粒劑、膠囊劑或丸劑等。本發(fā)明千草腦脈通藥物制備工藝包括下列步驟取虎尾草2重量份，千斤墜1重量份，用60%~80%乙醇提取2~3次，每次12小時，乙醇用量為藥材重量的610倍，提取液濃縮至在60'C時相對密度為1.10~1.20，濃縮液加水至1~2倍藥材重量，攪勻、靜置后過濾，濾液上大孔樹脂吸附，流速為0.5~3柱體積/小時，上樣量為干樹脂重量藥材重量=1:2~4，過柱液重吸附一次，靜置12h后洗脫，先用5~8倍柱體積水洗脫，再用6~10倍柱體積60%~80%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮、干燥為本發(fā)明藥物的提取干粉；或將乙醇洗脫液濃縮成6(TC時相對密度為1.35~1.40的稠膏。本發(fā)明所用大孔吸附樹脂可為DIOI、LS303、LSA40、LSA21或XDA-1。本發(fā)明千草腦脈通藥物制備工藝具體可包括下列步驟以g或Kg為單位，按照重量計算，取虎尾草2重量份，千斤墜l重量份，用70%乙醇提取3次，時間分別為2h、lh、lh，乙醇用量分別為藥材重量的10、8、6倍，合并提取液，過濾，提取液濃縮至在6(TC時相對密度1.20，濃縮液加水至2倍藥材重量，靜置后過濾，濾液上大孔樹脂吸附，流速為2柱體積/小時，上樣量為干樹脂重量藥材重量為1:2，過柱液重吸附一次，靜置12h后洗脫，先用6倍柱體積水洗脫，再用8倍柱體積70%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮、干燥為本發(fā)明藥物的提取干粉；或將乙醇洗脫液濃縮成6(TC時相對密度為1.35~1.40的稠膏。本發(fā)明有益效果與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明提供的提取工藝先進合理，大大提高了本品的有效成分，減少服用量，制成的制劑療效確切，質量穩(wěn)定，達到了發(fā)明目的。在研究提取工藝的過程中，考慮到虎尾草的主要有效成為黃酮類，千斤墜的主要有效成分為木脂素類，兩者均在醇中溶解度較大，故考慮采用醇提，以增大有效成分的提取率，同時考慮到虎尾草中含有大量的葉綠素等脂溶性雜質，故醇提取液濃縮后加水靜置以除去脂溶性雜質。為了進一步富集有效成分，減少服用量，故選用大孔吸附樹脂進一步純化，使其有效部位總黃酮類成分含量大于50%，有效成分松脂素單葡萄糖苷含量大于15%。通過一系列的實驗，以選擇本發(fā)明提供的提取工藝加藥劑學上可接受的輔料制成的制劑，質量穩(wěn)定，療效明顯。含量測定方法(一)總黃酮(以蘆丁計)測定對照品溶液的制備精密稱取經蘆丁對照品適量，加甲醇制成1.0mg/mL的對照品貯備液；精密量取貯備液造量，加水稀釋成0.2mg/mL的對照品溶液。標準曲線的制備精密量取對照品溶液O.O、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL，分別置25mL量瓶中，各加5%亞硝酸鈉溶液lmL，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液lmL，搖勻，放置6分鐘，加4%氫氧化鈉溶液10mL，水稀釋至刻度，搖勻，放置1520分鐘，照分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VB),以相應試劑作空白，在500rnn波長處測定吸收度。以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。測定法精密稱取相當于含生藥材2g的本發(fā)明藥物，加水10mL溶解，加氯仿-醋酸乙酯(4:1)，輕搖提取4次，每次15mL,棄去氯仿-醋酸乙酯提取液，水液加水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次15mL，合并正丁醇提取液，用少許無水硫酸鈉脫水，置水浴上蒸至約2mL，加水溶解，轉移至100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過；精密量取續(xù)濾液lmL，置25mL量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自"加5%亞硝酸鈉溶液lmL"起，依法測定吸收度，由標準曲線讀出供試品溶液中相當于蘆丁的重量，計算，即得。(二)松脂素單葡萄糖苷測定以用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水(35:65)為流動相，檢測波長為230nm，流速為1.0mL/min，柱溫為室溫；取松脂素單葡萄糖苷對照品適量，加甲醇制成0.28mg/mL的對照品溶液；精密稱取相當于含千斤墜藥材0.25g的本發(fā)明藥物，具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲提取30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10pL，注入液相色譜儀，測定，即得；試驗例l:提取純化工藝研究(1)提取工藝醇濃度試驗取虎尾草2重量份，千斤墜1重量份(兩藥材總重量為100g)，分別用60%、70%、80%乙醇提取3次，第一次2h，第二次1.5h，第三次lh，乙醇用量第一次10倍量，第二次8倍量，第三次6倍量，合并提取液，過濾，濾液濃縮并干燥，計算提取物重量并測定含量，結果見表l。表l不同濃度乙醇提取試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注提取率％=(提取物含量X提取物重量)+藥材該成分總量乂100%結果表明三種濃度的醇提取率均大于90%,說明有效成分均能提取完全，而80%醇提取時提取率沒有明顯提高，且提取物重量增加、有效成分含量降低，表明雜質提出增多，故優(yōu)選70%的醇提取。以70%乙醇為提取溶媒，按以上提取工藝提取，提取液合升，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1.10(60°C)的稠膏，加水至每ml提取液含生藥材0.5g(簡稱提取液A),測定含量為總黃酮25.2mg/mL，松脂素單葡萄糖苷7.2mg/mL，供以下大孔吸附樹脂實驗篩選用。(2)樹脂型號篩選靜態(tài)吸附解吸實驗準確稱取一定量處理好的各種樹脂各5g，置于100mL錐形瓶中，分別加入上述提取液AlOmL，每隔10min振搖20s，持續(xù)2h，靜止24h后，過濾，得液體樣品①，測定濃度。將濾出后的樹脂用蒸餾水洗去樹脂表面的提取液A，另置100mL錐形瓶中，精確加入70n/。乙醇20mL，每隔10min振搖20s，24h后，過濾，得液體樣品②，測定濃度。按照下式計算各樹脂對總黃酮與松脂素單氧葡萄糖苷的靜態(tài)飽和吸附量(mg/g)、解吸量(mg/g)和解吸率(。/。)，結果見表2。飽和吸附量=(提取液A濃度-樣品①濃度)X樣品①體積+干樹脂重量；解吸量Hf品②濃度X樣品②體積+干樹脂重量；解吸率z解吸量+飽和吸附量X100%表25種樹脂靜態(tài)吸附量和解吸率測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>動態(tài)吸附解吸實驗準確稱取一定量處理好的各種樹脂5g，濕法裝柱，吸取上述提取液A20mL，上樣吸附，過柱液重吸附一次，靜置12h，蒸餾水洗脫至無色后，用70°/。乙醇洗脫，將各吸附后殘液、水洗液、醇洗脫液濃縮至一定體積，測定含量。按下列公式計算比吸附量(mg/g)、比洗脫量(mg/g)和回收率(M)，結果見表3。比吸附量=(上柱液成分總量-殘液成分總量-水洗液成分總量)+干樹脂重量比洗脫量=醇洗液成分總量+干樹脂重量回收率=醇洗液成分總量+上柱液成分總量X100%表35種樹脂動態(tài)吸附量和回收率測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>由表2、表3結果可知，D101樹脂對總黃酮與松脂素單葡萄糖苷無論是在靜態(tài)飽和吸附量、解吸率還是動態(tài)比吸附量、醇洗液成分總量及回收率均優(yōu)于其它樹脂，故優(yōu)選用D101樹脂。(3)D101樹脂分離純化工藝研究A.上樣量及上樣濃度的研究上樣量的確定取處理好的樹脂5份，濕法裝柱，分別吸取提取液A適量按生藥材與干樹脂重量比為1:1、2:1、3:1、4:1、5:1上柱吸附，上柱吸附完全后用6BV(BV為柱床體積，下同)的蒸餾水洗柱，再用8BV的70。/。的乙醇洗脫，將醇洗脫液濃縮至一定體積，測定成分總量，計算回收率，見表4。上樣液濃度的確定取處理好的樹脂5份，濕法裝柱，取提取液A100mL5份，其中2份分別濃縮至25mL、50mL，一份不處理，另2份分別加水稀釋1、2倍，即每mL含生藥材2、1、0.5、0.25、0.125g。上柱吸附完全后，用6BV的蒸餾水洗柱，再用8BV的70%乙醇洗脫，將醇洗脫液濃縮至一定體積，測定成分總量，計算回收率，見表4。表4上樣量與上樣濃度試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表4結果可知，當干樹脂重量生藥材重量比為l:1~4時兩成分回收率均大于50%，但結合工業(yè)化大生產的適用性與生產成本，優(yōu)選干樹指質量與上柱生藥材量比1:2~4。當上樣液生藥材量固定的情況下，當上樣液的濃度增大時，回收率增大，但當生藥材量為2g/mL時，因濃度過大，發(fā)生絮凝和沉淀，回收率稍有下降；而上樣液濃度偏低時，時間增加，工效降低，0.5g/mL與1.0g/mL總黃酮與松脂素單葡萄糖苷的回收率均相差不大，故大生產時上樣液濃度可以為0.51.0g生藥/mL，即可以將醇提濃縮液加水至藥材重量的1~2倍。B.洗脫劑乙醇濃度的篩選取處理好的樹脂5份，濕法裝柱，取20mL提取液A上柱吸附完全后，用6BV蒸餾水洗柱后，再分別用30%、50%、60%、70%、80%乙醇洗脫，每種洗脫液收集8BV，濃縮各部分液體樣品，測定含量，計算回收率，見附圖1及表5。表5洗脫劑乙醇濃度試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由結果可知，乙醇濃度為60~80%時，兩成分回收率均大于50%,70%、80%回收率無明顯增大，故優(yōu)選70%。C.水洗體積的篩選取處理好的樹脂4份，濕法裝柱，取20mL提取液A上柱吸附完全后，分別用3、5、6和8BV的蒸餾水洗脫，再用8BV的70%乙醇洗脫，將醇洗液濃縮到一定體積，測定各成分的含量并計算回收率與純度，結果見表6。純度=醇洗液成分總量/醇洗液干浸膏量乂100%表6水洗體積試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由結果可知，用58BV的水洗脫后，醇洗液回收率均大于50%，兩成分純度之和均大于80%，故生產上可先用5-8BV的水洗脫，優(yōu)選56BV。D.洗脫終點確定取處理好的樹脂適量，濕法裝柱，取20mL提取液A吸附完全后，用5BV蒸餾水洗柱，再用70%的乙醇洗脫，按柱床體積收集，共收集10個洗脫份，測定每個洗脫份的成分含量，計算回收率，結果見表7。表7洗脫終點確定試驗<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由結果可知，當洗脫液70Q/。乙醇用量為6BV時，總黃酮與松脂素單葡萄糖苷的總回收率均已達到60%以上，故生產上乙醇用量為610BV,優(yōu)選68BV，最優(yōu)選為6BV。E.洗脫速度的考察取處理好的樹脂適量，濕法裝柱，取20mL提取液A吸附完全后，用5BV蒸餾水洗柱，再用6BV70。/o的乙醇洗脫，洗脫速度分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0BV/h，收集乙醇洗脫液，測定含量與干浸膏重量，結果均無明顯差別，說明洗脫速度為0.53BV/h時對產品收率及含量無明顯影響。試驗例2:臨床有效性研究本試驗例用于說明本發(fā)明藥物對痰瘀阻絡所致中風，中經絡，半身不遂，口眼歪斜，言語不利等癥的治療效果。臨床上用本發(fā)明片劑(實施例3)治療由痰瘀阻絡所致的急性中風、中經絡患者120例，基本恢復32例(26.67%)，顯著進步49例(40.83%)，進步28例(23.33%)，總有效率90.83%;治療前認知障礙為77例(64.17%)，輕、中、重度認知障礙分別為40例、29例、8例，治療后總例數(shù)為41例(34.17%)，輕、中、重分別為22例、15例、4例；治療前情感障礙為84例(70%)，可能抑郁、抑郁、嚴重抑郁3級分別為41例、33例、10例，治療后總例數(shù)為52例(43.33%)，3級分別為27例、18例、7例；癥狀改善總有效率肢體活動障礙為84.17%,舌強語蹇(言語不利)為68.33%。說明本發(fā)明藥物可明顯改善中風癱瘓癥狀，改善情感障礙，使患者最大程度地回歸家庭與社會。臨床試驗過程中同時還觀察了本發(fā)明片劑對血尿常規(guī)、肝腎功能等安全性指標的影響，發(fā)現(xiàn)治療前后無明顯異常變化，臨床服用過程中也未報告有胃腸道及其它不良反應發(fā)生，說明本發(fā)明服用安全。本發(fā)明的服用方法口服，每日三次，每次2片(或l袋顆粒劑，或2粒膠囊)。30天為一療程。圖1為不同濃度乙醇洗脫回收率示意圖。具體實施例方式下面通過實施例來更詳細地描述本發(fā)明。實施例中所用到的藥材均購自云南大理藥材市場，經檢驗均符合云南省2005年版藥材標準項下的各項規(guī)定。實施例1:取虎尾草2重量份，千斤墜1重量份(兩藥材重量和為1Kg)，用80%乙醇提取2次，時間分別為2h、1.5h，乙醇用量分別為藥材重量的IO倍、8倍，合并提取液，過濾，6(TC減壓濃縮至相對密度為1.10(60°C),濃縮液加水至1倍藥材重量，攪勻，靜置后過濾，濾液上D101大孔樹脂吸附，流速為0.3柱體積/小時，上樣量為干樹脂重量藥材重量(1:4)，過柱液重吸附一次，靜置12h后洗脫，先用5倍柱體積水洗脫，再用6倍柱體積80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，濃縮、干燥為本發(fā)明藥物的提取物干粉；或將80%乙醇洗脫液濃縮成相對密度為1.40(6(TC)的稠膏。實施例2取虎尾草2重量份，千斤墜1重量份(兩藥材重量和為1Kg)，用70%乙醇提取3次，時間分別為2h、lh、lh，乙醇用量分別為藥材重量的10、8、6倍，合并提取液，過濾，6(TC減壓濃縮至相對密度為1.20(6(TC)，濃縮液加水至2倍藥材重量，攪勻，靜置后過濾，濾液上D101大孔樹脂吸附，流速2柱體積/小時，上樣量為干樹脂重量藥材重量(1:2)，過柱液重吸附一次，靜置12h后洗脫，先用6倍柱體積水洗脫，再用8倍柱體積70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，濃縮、干燥為本發(fā)明藥物的提取干粉；或將70%乙醇洗脫液濃縮成相對密度為1.35(60'C)的稠膏。實施例3:片劑取上述實施例1中提取物干粉，加淀粉120克，微晶纖維素30g，混勻，過篩，用60%乙醇制粒，6CTC以下干燥，整粒，加入0.5%硬脂酸鎂，混勻，壓制成1000片(lg生藥/片)，包薄膜衣，即為本發(fā)明的片劑。實施例4:顆粒劑取上述實施例2中提取物藥液，加糊精400g,乳糖100g，阿司帕坦15g，噴霧干燥制粒，整粒，制成顆粒500袋(1.5g/袋)，即為本發(fā)明的顆粒劑(2g生藥/袋)。實施例5:膠囊劑取上述實施例2中提取物干粉，加淀粉150g，混勻，過篩，用60%乙醇制粒，60'C以下干燥，整粒，灌裝，制成膠囊1000粒(lg生藥/粒)，即為本發(fā)明的膠囊劑。實施例6:分散片取上述實施例1中提取物干粉，加低取代羥丙基纖維素60g、微晶纖維素33g，羧甲基淀粉素鈉15g、阿司帕坦2g，混勻，過五號篩，用95%乙醇制粒，6(TC以下干燥，整粒，加入0.5%硬脂酸鎂，混勻，壓成1000片(lg生藥/片)，即為本發(fā)明的分散片。對比例按千草腦脈通合劑原制備工藝取虎尾草666.5g，千斤墜333.5g，加水10倍量煎煮二次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.10(6(TC)的清膏，冷卻，加乙醇使含醇量達70%，靜置24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，得流浸膏，繼續(xù)減壓干燥得干浸膏，稱定重量并測定含量，另取實施例1、2項下的提取物干粉稱定重量并測定含量，結果見表8。表8本發(fā)明工藝與原工藝結果比較<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>權利要求1、一種千草腦脈通藥物，其特征在于該藥物是由如下方法制備得到的取虎尾草2重量份，千斤墜1重量份，用60％～80％乙醇提取2～3次，每次1～2小時，乙醇用量為藥材重量的6～10倍，提取液濃縮至在60℃時相對密度為1.10～1.20，濃縮液加水至1～2倍藥材重量，攪勻、靜置后過濾，濾液上大孔樹脂吸附，流速為0.5～3柱體積/小時，上樣量為干樹脂重量藥材重量＝12～4，過柱液重吸附一次，靜置12h后洗脫，先用5～8倍柱體積水洗脫，再用6～10倍柱體積60％～80％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮、干燥為本發(fā)明藥物的提取干粉；或將乙醇洗脫液濃縮成60℃時相對密度為1.35～1.40的稠膏。2、根據權利要求1所述的一種千草腦脈通藥物，其特征在于所述藥物的劑型為片劑、分散片、顆粒劑、膠囊劑或丸劑。3、根據權利要求1所述的一種千草腦脈通藥物，其特征在于所述的大孔吸附樹脂為DIOI、LS303、LSA40、LSA21或XDA-1。4、一種權利要求1所述的千草腦脈通藥物的制備方法，其特征在于該制備方法包括下列步驟取虎尾草2重量份，千斤墜1重量份，用60%~80%乙醇提取2~3次，每次1~2小時，乙醇用量為藥材重量的6~10倍，提取液濃縮至在6(TC時相對密度為1.10~1.20，濃縮液加水至12倍藥材重量，攪勻、靜置后過濾，濾液上大孔樹脂吸附，流速為0.5-3柱體積/小時，上樣量為干樹脂重量藥材重量=1:2~4，過柱液重吸附一次，靜置12h后洗脫，先用5~8倍柱體積水洗脫，再用6~10倍柱體積60%~80%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮、干燥為本發(fā)明藥物的提取干粉；或將乙醇洗脫液濃縮成60'C時相對密度為1.35~1.40的稠膏。5、根據權利要求4所述的千草腦脈通藥物的制備方法，其特征在于該制備方法包括下列步驟取虎尾草2重量份，千斤墜l重量份，用70%乙醇提取3次，時間分別為2h、lh、lh，乙醇用量分別為藥材重量的10、8、6倍，合并提取液，提取液濃縮至在6(TC時相對密度U01.20，濃縮液加水至2倍藥材重量，靜置后過濾，濾液上大孔樹脂吸附，流速為2柱體積/小時，上樣量為干樹脂重量藥材重量為1:2，過柱液重吸附一次，靜置12h后洗脫，先用6倍柱體積水洗脫，再用8倍柱體積70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，濃縮、干燥為本發(fā)明藥物的提取干粉；或將70%乙醇洗脫液濃縮成60'C時相對密度為1.35~1.40的稠膏。全文摘要本發(fā)明涉及一種治療中風類疾病的千草腦脈通藥物及其制備方法，具體采用60％～80％乙醇提取后，提取液濃縮加水靜置，濾液再上大孔吸附樹脂進一步純化。本發(fā)明解決了現(xiàn)有千草腦脈通合劑制備工藝落后，質量不穩(wěn)定、服用順應性差的不足，提供一種工藝先進合理、適合工業(yè)化大生產，質量穩(wěn)定、含量高，服用劑量小、順應性好的千草腦脈通藥物。文檔編號A61K36/185GK101361801SQ200810157200公開日2009年2月11日申請日期2008年9月24日優(yōu)先權日2008年9月24日發(fā)明者周自桂,瑞景,勇秦,胡傳良,春金申請人:胡傳良