專利名稱：一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及動(dòng)物纖維蛋白膠材料，尤其是涉及一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的
方法。
背景技術(shù)：
纖維蛋白膠是由富纖維蛋白原組分(Fibrinogen-Rich-Fraction FRF。其中主要 含有纖維蛋白原、XI11因子、纖維連接蛋白)、凝血酶、氯化鈣等組成的生物材料。通過模擬 凝血反應(yīng)的最后階段，用凝血酶激活纖維蛋白原形成纖維蛋白丄iu等使用原子力熒光顯微
鏡檢測單一纖維蛋白絲的彈性限度和可延長性，顯示纖維蛋白具有異乎尋常的可延長性和 彈性，其物理性能遠(yuǎn)強(qiáng)于蜘蛛絲，這一結(jié)果刊登在2006年8月的"科學(xué)"雜志上。
纖維蛋白膠材料的應(yīng)用目前還主要集中在臨床止血方面，在其他方面的應(yīng)用還有 極大擴(kuò)展空間，尤其是組織工程支架方面。纖維蛋白可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞分 泌細(xì)胞外基質(zhì)；可以與眾多的細(xì)胞基質(zhì)(如纖維連接蛋白)，生長因子(如成纖維細(xì)胞生長 因子，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子等)結(jié)合，使其成為一種"智能生物材料"，作為一種創(chuàng)傷愈合 和組織修復(fù)的起始蛋白。近年來逐漸引起人們?cè)絹碓蕉嗟闹匾?。纖維蛋白膠體的機(jī)械強(qiáng)度， 伸展性、降解速度等物理特性可以通過添加凝血酶、XIII因子、鈣離子、纖溶活性物質(zhì)及其 它輔料加以調(diào)節(jié)；另外，纖維蛋白膠(無論是人血來源還是動(dòng)物血來源)在外科臨床的廣泛 應(yīng)用，證明該材料與人體組織相容性極好，不僅具有豐富的原料來源，宿主對(duì)移植物不產(chǎn)生 免疫反應(yīng)，安全可靠。所以纖維蛋白膠的應(yīng)用還有待挖掘。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種方法簡單可靠、 可隨意變換結(jié)構(gòu)、應(yīng)用性強(qiáng)的用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法。 本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的 方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(l)分別配置A1和B1溶液，(2)將A1和B1溶液 等量快速混勻并倒入模具，(3)冷凍干燥，(4)伽馬射線照射滅菌；所述的A1溶液包括重量 比為3 9 : 1 : 0.05 0.2 : 15 25的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶和甘油；所 述的Bl溶液為凝血酶1 5IU/ml，氯化鈣2 8mg/ml。
所述的Ai溶液包括重量比為6 : i : o. i : 18的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨
肽酶和甘油；所述的Bl溶液為凝血酶2IU/ml，氯化鈣4. 4mg/ml。 所述的Al和Bl溶液在1 3分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在1 3分鐘后從模具 中取出。 所述的Al和Bl溶液在2分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在2分鐘后從模具中取出。 所述的冷凍干燥使材料的水份在1 %以下。 所述的冷凍干燥使材料的水份為0. 5 1 % 。 所述的伽馬射線照射滅菌為20 30KGY劑量的伽馬射線照射24 72小時(shí)。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用的工藝簡單有效，只要提供適合的模具均能制作出 以纖維蛋白為原料的支架，利于纖維蛋白膠的應(yīng)用，纖維蛋白原的濃度具有調(diào)整空間，可以 制作出不同性質(zhì)的纖維蛋白支架，采用凍干后射線滅菌技術(shù)，可以保證纖維蛋白不被破壞， 這點(diǎn)是制作組織工程支架的基礎(chǔ)。


圖1為管形支架的模具示意圖；
圖2為凍干曲線圖。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
實(shí)施例1
配置溶液 —，纖維蛋白原溶液10ml備用(Al)，其中纖維蛋白原30mg/ml、羧甲基纖維素 CMC5mg/ml、氨肽酶APN 0. 5mg/ml、甘油90mg/每份。二，準(zhǔn)備催化劑溶液(Bl) lOml， Bl溶 液中凝血酶2IU/ml，氯化鈣4. 4mg/ml備用。
制備凝膠管 如圖1所示，把Al溶液和Bl溶液混勻攪拌后，迅速注入塞好皮塞3的玻璃套1和 玻璃桿2套件。 凍干小心取下凝膠管放入準(zhǔn)備好的平皿中，凍干，凍干曲線如圖2所示。
滅菌采用3層塑膠袋將凍干材料密封，在20-30KGY劑量下輻照滅菌24小時(shí)。
實(shí)施例2 —種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，該方法包括以下步驟(l)分別配置A1 和Bl溶液，(2)將Al和Bl溶液等量在1分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在1分鐘后從模具中 取出，(3)冷凍干燥，使材料的水份為0.5%， (4)采用20KGY劑量的伽馬射線照射72小時(shí) 滅菌；所述的A1溶液包括重量比為3 : 1 : 0.05 : 15的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽 酶和甘油；所述的Bl溶液為凝血酶1IU/ml，氯化鈣2mg/ml。
實(shí)施例3 —種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，該方法包括以下步驟(l)分別配置A1 和Bl溶液，(2)將Al和Bl溶液等量在3分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在3分鐘后從模具中 取出，(3)冷凍干燥，使材料的水份為1%， (4)采用20KGY劑量的伽馬射線照射36小時(shí)滅 菌；所述的A1溶液包括重量比為9 : 1 : 0.2 : 25的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶 和甘油；所述的Bl溶液為凝血酶5IU/ml，氯化鈣8mg/ml。
權(quán)利要求
一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)分別配置A1和B1溶液，(2)將A1和B1溶液等量快速混勻并倒入模具，(3)冷凍干燥，(4)伽馬射線照射滅菌；所述的A1溶液包括重量比為3～9∶1∶0.05～0.2∶15～25的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液為凝血酶1～5IU/ml，氯化鈣2～8mg/ml。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，其特征在于，所述的Ai溶液包括重量比為6 : i : o. i : is的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶和甘油；所述的Bl溶液為凝血酶2IU/ml，氯化鈣4. 4mg/ml。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，其特征在于，所述 的Al和Bl溶液在1 3分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在1 3分鐘后從模具中取出。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，其特征在于，所述 的Al和Bl溶液在2分鐘內(nèi)混勻并倒入模具，并在2分鐘后從模具中取出。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，其特征在于，所述 的冷凍干燥使材料的水份在1%以下。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，其特征在于，所述 的冷凍干燥使材料的水份為0. 5 1%。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，其特征在于，所述 的伽馬射線照射滅菌為20 30KGY劑量的伽馬射線照射24 72小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用纖維蛋白膠材料構(gòu)建支架的方法，該方法包括以下步驟(1)分別配置A1和B1溶液，(2)將A1和B1溶液等量快速混勻并倒入模具，(3)冷凍干燥，(4)伽馬射線照射滅菌；所述的A1溶液包括重量比為3～9∶1∶0.05～0.2∶15～25的纖維蛋白原，羧甲基纖維素，氨肽酶和甘油；所述的B1溶液為凝血酶1～5IU/ml，氯化鈣2～8mg/ml。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有方法簡單可靠、可隨意變換結(jié)構(gòu)、應(yīng)用性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61L27/00GK101757688SQ20081020290
公開日2010年6月30日 申請(qǐng)日期2008年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月18日
發(fā)明者何紅兵 申請(qǐng)人:上海松力生物技術(shù)有限公司