專利名稱：蘿卜幾丁質結合蛋白在制備口腔衛(wèi)生產(chǎn)品中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及口腔衛(wèi)生用品領域，具體地，涉及蘿卜幾丁質結合蛋白在制備 用于消除和/或減少口腔菌斑或細菌方面的衛(wèi)生產(chǎn)品中的應用。
背景技術：
口腔菌斑是指粘附在牙齒表面或口腔其他軟組織上的微生物群，它是由大 量細菌、細胞間物質、少量白細胞、脫落上皮細胞和食物殘屑等組成，而且它 是口腔常見牙齒疾病齲病和牙周病的主要誘因。
齲齒是由多種因素復合作用所致，目前公認的齲病病因學說是四聯(lián)因素學
說，主要包括細菌、口腔環(huán)境、宿主和時間，其基本點為致齲性食物(特別 是蔗糖和精制碳7jc化合物)在糖，緊緊貼附于牙面由涎液蛋白形成的獲得性膜 上，在這種由牙齒表面解剖結構和生化、生物物理特點形成的不僅得以牢固的 附著于牙面，而且可以在適宜溫度下，有足夠的時間在菌斑深層產(chǎn)酸，侵蝕牙 齒，使之脫礦，并進而破壞有機質，產(chǎn)生齲洞。
牙周病是牙齒組織，包括牙齦、牙骨質、牙周韌帶和牙槽骨因炎癥所致的 一種疾病。牙周病的病因大多由于局部的菌斑、牙垢、牙石、食物嵌塞、不良 修復體等所致。
另外，口臭又稱口氣，是常見疾病，除了患一些系統(tǒng)性疾病或感染時可以引起口臭外，大部分情況下是由存在于牙菌斑、唾液及舌面等處的細菌分解食
物殘渣和唾液中的蛋白質，代謝氨基酸產(chǎn)生揮發(fā)性硫化物(volatile sulfur c ompounds, VSC )，形成難聞的口腔異味。細菌生化學實-驗揭示，口腔中的革蘭 陰性厭氧菌主要參與了這一過程。因此，通過采取措施來減少口腔內細菌特別 是厭氧菌的數(shù)量，能有效地減輕口臭癥狀。
日常使用刷牙、牙線或漱口水等清潔口腔，可減少口腔中的菌斑和細菌， 并在一定程度上預防口臭，但效果不太理想，仍需提供一種有效防止菌斑形成 的安全方法。
中國發(fā)明專利號為02115151.2,專利名稱為蘿卜幾丁質結合蛋白及制備方 法詳細揭露了從蘿卜中提取蘿卜幾丁質結合蛋白M,、 M2、 M3、 M4的方法，揭露了 這四種蛋白的物理化學特性，其中幾丁質結合蛋白Mi、 M2是雙功能酶，兼有溶菌 酶和幾丁質酶的活性，M3、 M4只有幾丁質酶的活性。也就是說蘿卜幾丁質結合蛋 白對革蘭氏陰性細菌(G—)和革蘭氏陰性細菌(G+)都有殺菌作用，同時對真菌 細胞壁也有水解作用。但是，對蘿卜幾丁質結合蛋白的具體應用沒有論述。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供蘿卜來源的幾丁質結合蛋白在制備可消除或減少菌斑 和口腔有害細菌的口腔衛(wèi)生產(chǎn)品中的應用方法。菌斑和或口腔中細菌的完全或 部分減少的結果是口腔疾病、禹齒、牙周炎發(fā)病率的下降，以及口臭發(fā)病率的 下降。
蘿卜是人們常吃的綠色食品，蘿卜來源的幾丁質結合蛋白是天然植物酶， 對人無任何毒害作用，環(huán)保健康。
發(fā)明專利專利號為02115151.2,專利名稱為蘿卜幾丁質結合蛋白及制備方法詳細揭露了從蘿卜中提取蘿卜幾丁質結合蛋白的方法，為蘿卜幾丁質結合蛋 白的廣泛應用和開發(fā)提供了技術條件。
蘿卜幾丁質結合蛋白包含蛋白質Mb M2、 M3、 M4，幾丁質結合蛋白是四者的 總稱。其中Mb M2是雙功能酶，兼有溶菌酶和幾丁質酶的活性，M3、 M4只有幾丁 質酶的活性。M2的溶菌酶活力為6. 0~7. 0萬U/mg蛋白質，M2的幾丁質 酶活力分別為24~47U/ml， M3、 M4的幾丁質酶活力分別為47 ~ 62U/ml。
Mi、 M2是二者都不是糖蛋白，不含半胱氨酸(Cys)，相應地，沒有鏈內和鏈 間二硫鍵，為單體蛋白。Mm M2的生物催化活性中心由谷氨酸(Glu)、天冬氨酸 (Asp)、組氨酸(His)和色氨酸(Trp)殘基組成。以溶壁纟效球菌為底物時， Mi的L值為0. 287mg/ml、 V隨為666. 7U/min， M 的IU直為0. 1533mg/ml、 V,為 3333. 33U/min。 M!反應的溫度為45 ~ 60°C ,反應的pH為5 7;、 M2反應的溫度 為35 55。C，反應的pH為6 8。以N-乙酰葡萄糖胺為底物時，M!反應的pH為 3. 6 ~ 5. 6， M2反應的pH為2. 4 ~ 4. 4。
也就是說蘿卜幾丁質結合蛋白不僅可水解真菌、酵母和昆蟲等細胞壁成份 中的幾丁質，而且可水解革蘭氏陰性細菌(GO和革蘭氏陽性細菌(G+)的細胞壁， 從而達到殺菌的目的。
為了進一步說明本發(fā)明的意義之所在，本文將進一步分析引起牙病和口臭 的細菌的屬性。
經(jīng)鑒定，與牙周病有關的病原體包括牙齦卟啉單胞菌(porphyromonas gingivalis)、中間普雷沃氏菌(Prevotel laintermedia )、放線共生放線桿菌 (Actinobacillus ■ actinomycelemcomitans )、 核粒梭軒菌 (Fusobacterium nucleatum)、嗜蝕艾肯氏菌(Eikenella corrodens )、福賽斯擬桿菌(Bacteroides frosythus)、 二氧化碳嗜纖維菌屬(Capnocytophoge spp.)等。這些病原體都 是革蘭氏陰性細菌(G-)。
變異Mi求菌(Streptococcus sanguis )是引起齲齒的發(fā)生的主要病原體。 體外實驗也表明顯示口腔中的一些革蘭陰性厭氧菌能夠分解蛋白質產(chǎn)生 硫化氬(hydrogen sulfide, H2S )和曱硫醇(methyl mercaptan, CH3SH )這兩種揮發(fā)性碌b化物。Persson等[PerssonS， EdlundMB, ClaessonR， etal.The formation of hydrogen sulfide and methyl mercaptan by oral bacteria. Oral Microbiol Immunol, 1990， 5 ( 4 ) : 195-201.] 的研究發(fā)現(xiàn)，消^:鏈J求菌屬、 優(yōu)桿菌屬、新月形單胞菌屬、擬桿菌屬和梭桿菌屬中的部分細菌能利用L-半胱 氨酸產(chǎn)生硫化氫，而梭桿菌屬、擬桿菌屬、卟啉菌屬和優(yōu)桿菌屬中的一些細菌 可以通過代謝L-甲硫氨酸產(chǎn)生甲硫醇。硫化氫和甲硫醇這兩種氣體構成了口腔 內揮發(fā)性硫化物的90%以上，同時也是口臭的主要成分。
簡而言之，引起牙病和口臭的主要病因是口腔中的革蘭氏陰性細菌。從上 述論述中，可知蘿卜幾丁質結合蛋白，尤其是其中的蛋白質M,、 M2具有較強的殺 滅革蘭氏陰性細菌的能力，這就是本發(fā)明的基本原理。
本發(fā)明的方案是在一種用于口腔衛(wèi)生的產(chǎn)品中使用蘿卜幾丁質結合蛋白， 以消除或減少口腔中存在的菌斑和或細菌。
本發(fā)明還提供了一種用于口腔衛(wèi)生的產(chǎn)品，該產(chǎn)品含有蘿卜幾丁質蛋白。 優(yōu)選地，蘿卜幾丁質蛋白占此產(chǎn)品總重量的
本發(fā)明用于口腔衛(wèi)生的產(chǎn)品，可以采用多種形式的制劑，例如牙膏、牙 線、漱口水，口腔噴霧劑或吸入劑、口香糖等，這些制劑的配方中包括有效成 份、添加劑及用于此制劑形式的適宜的載體。
本發(fā)明的有益效果為(1 )蘿卜幾丁質蛋白為純天然植物蛋白，對人體無 任何毒副作用；(2)提供給口腔良好的清潔，消除或減少口腔病原體微生物， 改善口腔環(huán)境衛(wèi)生；(3)消除或減少產(chǎn)生口臭的病原體，減少口臭的發(fā)病率。
具體實施例方式
本發(fā)明用于口腔衛(wèi)生的產(chǎn)品以牙膏的形式提供時，除含有蘿卜幾丁質結合 蛋白，還含有為產(chǎn)品提供特殊性能的其他化合物、適宜的載體和添加劑，例如 氟源、摩擦劑、表面活性劑、濕潤劑、粘合劑、香料、甜味劑等。
摩擦劑是牙膏的主體，用量在30%~55%之間，常用的摩擦劑有碳酸鈣 (CaC03)、磷酸氫4丐(Ca線'2H20 )、焦磷酸4丐(Ca2P207)、水合硅酸(Si02我0)、氫氧化鋁[A1(0H)J等。他們隨著牙刷一起移動，牙齒上粘附的殘余物在不破壞 牙釉質和牙本質的情況下，會隨著摩擦劑一起除去。
為了增加去污效果，牙膏中還需加入表面活性劑，目前廣泛采用的是十二 烷基硫酸鈉和月桂醇磺酸鈉，既能快速發(fā)泡，又能清洗口腔中的污垢，其一般 用量為2%。
濕潤劑可防止牙膏在軟管中固化變硬，并使膏體具有光澤等效能，用于牙 膏中的濕潤劑有甘油、丙二醇、山梨醇等多種。
粘合劑可使牙膏中配料分散均勻，如羧曱基纖維素鈉鹽及其衍生物、角叉
菜、海藻酸鈉等多種物質。
牙膏中添加香料，如薄荷、留蘭香等，不僅在使用時有清爽芳香之感，還
有殺菌作用，清除口腔中的細菌，防止膏體腐敗。
為使牙膏口感良好，還得加些糖精作甜味劑。這樣，刷牙之后，口腔就會
感覺涼爽舒適，并帶有甜絲絲的芬芳，糖精的配用量一般為0. 01 % ~ 0. 1 % 。
為了防治口腔疾病，有的牙膏中還加入了一些特殊成分①為除去口臭常
在牙膏中加入雙氧代苯基二胍基己烷和柏醇等殺菌劑，銅葉綠酸對防止口臭亦
有一定功效。②防治齲齒可加入氟化合物，既能抑制口腔中殘留物發(fā)酵，又使
牙齒表面的琺瑯質強化。從安全性來考慮，牙膏中氟含量規(guī)定在1000微克以下。
在飲用含氟天然水的人群中，齲齒的發(fā)病率相對較低，但飲用含氟量高的水，
牙齒表面會形成白濁狀(斑狀齒)，反而使齒質變脆。
本發(fā)明所提供的含有蘿卜雙功能酶的牙膏，含有下列組分
組分 占總重量的百分凄t
蘿卜幾丁質蛋白酶 1~50%
30~ 55%
0. 5 ~ 2 %
摩擦劑 表面活性劑濕潤劑 20~50%
粘合劑 0. 5 ~ 2 %
甜味劑 0. 01 % ~ 0. 1 %
防腐劑 適量
水 適量至IOO
本發(fā)明提供的不同產(chǎn)品，例如牙線、漱口水，口腔噴霧劑或吸入劑、口香 糖等，可通過使用本領域已知的常規(guī)技術獲得。 以下將以實施例來進一步說明本發(fā)明。
實施例l.含有蘿卜幾丁質蛋白的牙膏，用常規(guī)方法，通過充分混合適宜量 的各組分，制備具備表l中所示配方的(1)和(2)的牙膏。 表l含有蘿卜幾丁質蛋白的牙膏 組分 重量百分比
配方(1) 配方(2 )
蘿卜幾丁質蛋白酶540
摩擦劑4530
表面活性劑22
甘油3020
粘合劑1. 52
香味劑1. 01. 0
氟化鈉0. 320. 32
著色劑0. 160. 16
糖精鈉0, 130. 13
防腐劑0. 10. 1其他特殊材料 適量 適量
水 加水至1GG 加水至IOO
實施例2
含有蘿卜幾丁質蛋白的漱口水，用常規(guī)方法，通過充分混合適宜量的各 組分，制備具備表l中所示配方的(1)和(2)的漱口水。 表2含有蘿卜幾丁質蛋白的牙膏
組分重量百分比
配方(1)配方(2 )
蘿卜幾丁質蛋白酶540
表面活性劑22
甘油3020
香味劑1. 01. 0
著色劑0. 160. 16
糖精鈉0. 130. 13
防腐劑0. 10. 1
其他特殊材料適量適量
水加水至100加水至100
權利要求
1.蘿卜幾丁質結合蛋白在制備用于改善口腔衛(wèi)生的口腔衛(wèi)生產(chǎn)品中的應用。
2. 如權利要求1所述的蘿卜幾丁質結合蛋白的應用，其特征在于其中的口腔 衛(wèi)生產(chǎn)品中所含蘿卜幾丁質結合蛋白按重量百分比計為1~50%。
3. —種口腔衛(wèi)生產(chǎn)品，其特征在于含有蘿卜幾丁質結合蛋白。
4. 如權利要求3所示的口腔衛(wèi)生產(chǎn)品，其特征在于所含蘿卜幾丁質結合蛋白按 重量百分比計為1~50%。
全文摘要
本發(fā)明涉及蘿卜幾丁質結合蛋白在制備例如牙膏、牙線、漱口水、口腔噴劑或吸入劑以及口香糖等口腔衛(wèi)生產(chǎn)品中的應用，所述口腔衛(wèi)生產(chǎn)品用于消除和/或減少口腔中的菌斑和/或細菌，從而減少牙病(齲齒、牙周病等)和口臭的發(fā)病率。
文檔編號A61K8/30GK101406435SQ200810219200
公開日2009年4月15日 申請日期2008年11月18日 優(yōu)先權日2008年11月18日
發(fā)明者宋秋蘭 申請人:宋秋蘭