專利名稱：：一種活血、祛瘀、止痛的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種活血、祛瘀、止痛的藥物組合物，屬于藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：舒胸片收載于《中國(guó)藥典》2005年版一部，是由三七、紅花、川芎3味藥材制成的中藥制劑，具有活血化瘀、通絡(luò)止痛功效。臨床用于瘀血阻滯所致的胸痹等癥。處方用量為三七100g、紅花100g、川芎200g，制備方法為將三味藥材，三七粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩；川芎加水煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，濾液另存，藥渣與紅花加水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并三次煎液，濾過(guò)，濾液靜置24小時(shí)，取上清液，濾過(guò)，濾液濃縮，干燥成干浸膏，粉碎成細(xì)粉，加入三七細(xì)粉，混勻，制成顆粒，干燥，壓制成1000片，包糖衣，即得。用法與用量口服，一次5片，一日3次。其中，三七為方中的君藥，工藝中用三七藥材直接打粉入藥壓片，會(huì)使服用量增大；另外，將原生藥粉入藥衛(wèi)生學(xué)不易控制；工藝中川芎水煎煮2小時(shí)后藥渣與紅花煎煮兩次，煎液合并濃縮后與三七生藥粉混合制粒、壓片。煎煮時(shí)溶媒用量大，濃縮時(shí)間長(zhǎng)，藥物的受熱時(shí)間也延長(zhǎng)，生產(chǎn)效率低。因此，需要一種既能保持或提高藥物的藥效，又能提高煎藥效率的新的提取工藝。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的技方案是提供了一種活血、祛瘀、止痛的藥物組合物，本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法。本發(fā)明提供了一種活血、祛瘀、止痛的藥物組合物，它是由三七、川芎、紅花為原料，提取分離即得，得到的提取物中含有人參皂苷R^、人參皂苷Rbp三七皂苷I^總重量百分含量占O.5-12%;羥基紅花黃色素AO.1-2%;阿魏酸O.01-0.2%。其中，所述的提取物采用動(dòng)態(tài)逆流提取。其中，所述的提取物的制備工藝為三七加0.5-3倍30-95%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加3_15倍量30-95%乙醇30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min，提取液回收乙醇后備用；紅花加6-16倍量的水，30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min;川芎加O.5_3倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加3-15倍量的水，30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min;合并提取物。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的提取物的制備工藝為三七加0.9倍70%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加8倍量70%乙醇5(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min，提取液回收乙醇后備用；紅花加12倍量的水，6(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;川芎加1.7倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加10倍量的水，7(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min;合并提取物。其中，它是由三七、川芎、紅花為原料，提取分離得到的提取物為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的藥劑。其中，所述的藥劑是片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、滴丸劑或口服液。本發(fā)明還提供了一種制備活血、祛瘀、止痛的藥物組合物的方法，它包括下述步驟a、三七加0.5-3倍30-95%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加3-15倍量30-95%乙醇30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min，提取液回收乙醇后備用；紅花加6-16倍量的水，30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min;川芎加O.5_3倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加3-15倍量的水，30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min;b、將制備得到提取物混合、濃縮，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成。其中，所述的制備方法為三七加0.9倍70%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加8倍量70^乙醇5(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min，提取液回收乙醇后備用；紅花加12倍量的水，6(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;川芎加1.7倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加10倍量的水，7(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min。本發(fā)明藥物是采用連續(xù)動(dòng)態(tài)逆流提取制備，提取溫度低，溶媒用量少，減小制備工藝對(duì)有效成分的破壞，提高藥物的療效。如將三七主要有效成分皂苷采用乙醇逆流提取，可以較好的解決這個(gè)問(wèn)題，提取液回收乙醇后與川芎、紅花的藥液一起噴霧干燥，干法制粒壓片，可大大減少輔料的用量，三七提取后服用量也能降低。以下通過(guò)具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，但并不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變和變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的范圍。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明藥物的制備取三七100g、紅花100g、川芎200g三味藥材均分別采用動(dòng)態(tài)逆流提取技術(shù)提取，其中三七加0.9倍70%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加8倍量70%乙醇5(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min，提取液回收乙醇后備用；紅花加12倍量的水(第一次提取的紅花另加2.6倍水補(bǔ)足吸水量)，6(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;川芎加1.7倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加10倍量的水，7(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min。將制備得到提取物混合、濃縮，干燥所得的浸膏粉中，人參皂苷Rgp人參皂苷Rbp三七皂苷Ri三者總重量百分含量占3.62%;羥基紅花黃色素AO.49%;阿魏酸O.047%。實(shí)施例2本發(fā)明藥物提取物的制備取三七100g、紅花100g、川芎200g，三七加3倍95X乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加15倍量95%乙醇IO(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為100min，提取液回收乙醇后備用；紅花加16倍量的水，IO(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為100min;川芎加3倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加15倍量的水，10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為100min;合并提取物。將制備得到提取物混合、濃縮，干燥所得的浸膏粉中，人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl、三七皂苷Rl三者總重量百分含量占3.69%;羥基紅花黃色素AO.29%;阿魏酸0.033%。實(shí)施例3本發(fā)明藥物提取物的制備取三七100g、紅花100g、川芎200g，三七加0.5倍30%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加3倍量30%乙醇30°C逆流提取，階段提取時(shí)間為20min，提取液回收乙醇后備用；紅花加6倍量的水，3(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20min;川芎加0.5倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加3倍量的水，3(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20min;合并提取物。將制備得到提取物混合、濃縮，干燥所得的浸膏粉中，人參皂苷Rg"人參皂苷Rbp三七皂苷Ri三者總重量百分含量占1.95%;羥基紅花黃色素AO.31%;阿魏酸O.027%。實(shí)施例4本發(fā)明藥物提取物的制備取三七100g、紅花100g、川芎200g，三七加0.5倍60%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加6倍量60%乙醇6(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min，提取液回收乙醇后備用；紅花加10倍量的水，5(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;川芎加1.0倍水浸泡，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加6倍量的水，5(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;合并提取物。將制備得到提取物混合、濃縮，干燥所得的浸膏粉中，人參皂苷Rgp人參皂苷Rbp三七皂苷Ri三者總重量百分含量占3.12%;羥基紅花黃色素AO.37%;阿魏酸O.039%。實(shí)施例5本發(fā)明藥物提取物的制備取三七100g、紅花100g、川芎200g，三七加1倍50%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加8倍量50%乙醇6(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min，提取液回收乙醇后備用；紅花加8倍量的水，8(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;川芎加2.0倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加12倍量的水，6(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;合并提取物。將制備得到提取物混合、濃縮，干燥所得的浸膏粉中，人參皂苷Rg"人參皂苷Rbp三七皂苷Ri三者總重量百分含量占3.29%;羥基紅花黃色素A0.41X;阿魏酸O.042%。實(shí)施例6本發(fā)明藥物提取物的制備取三七1009、紅花100g、川芎2009，三七加2倍40X乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加8倍量40%乙醇3(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為50min，提取液回收乙醇后備用；紅花加14倍量的水，8(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為60min;川芎加2.0倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加10倍量的水，9(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為60min;合并提取物。將制備得到提取物混合、濃縮，干燥所得的浸膏粉中，人參皂苷Rgp人參皂苷Rh、三七皂苷Ri三者總重量百分含量占3.03%;羥基紅花黃色素AO.32%;阿魏酸O.037%。實(shí)施例7本發(fā)明藥物片劑的制備將實(shí)施例1制備的提取物，加入硬脂酸鎂等輔料，制粒、整粒，壓片，制成片劑。實(shí)施例8本發(fā)明藥物膠囊劑的制備將實(shí)施例1制備的提取物，加入膠囊劑常用的輔料，裝入膠囊殼，制成膠囊劑。實(shí)施例9本發(fā)明藥物顆粒劑的制備將實(shí)施例1制備的提取物，加入淀粉、糊精等輔料，混合，制粒、整粒，制成顆粒劑。實(shí)施例10本發(fā)明藥物組合物中人參皂苷Rg"人參皂苷Rb"三七皂苷&的含量的測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)Agilent1100型高效液相色譜儀，VWD紫外檢測(cè)器，色譜柱SHIMADZUVP-ODSC18柱(4.6X150mm，5um);以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速lml/min;柱溫25°C;紫外檢測(cè)波長(zhǎng)203nm。理論塔板數(shù)按三七皂苷&計(jì)算應(yīng)不低于4000。三七含量測(cè)定梯度洗脫表時(shí)間(分鐘)流動(dòng)相A(%)流動(dòng)相B(%)030208030~7020—3680—64對(duì)照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Rgp人參皂苷Rb"三七皂苷&對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含人參皂苷RgA4mg、人參皂苷RbA4mg、三七皂苷&0.lmg的混合溶液，即得。供試品溶液的制備取本品5片，研細(xì)，取0.7g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量，放置過(guò)夜，置8(TC水浴上保持微沸2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液過(guò)微孔濾膜(0.45iim)，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計(jì)算，即得。實(shí)施例11本發(fā)明藥物組合物中羥基紅花黃色素A的含量的測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)AgilentllOO型高效液相色譜儀，VWD紫外檢測(cè)器，色譜柱AgilentEclipseXDB-C18柱(4.6X150mm，5um);流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸溶液(15:85);流速lml/min;柱溫25。C;紫外檢測(cè)波長(zhǎng)403nm。理論塔板數(shù)按羥基紅花黃色素A計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量置50ml棕色容量瓶中，加25%甲醇使溶解制成每lml含0.13mg的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品5片，研細(xì)，取1.Og，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入25%甲醇100ml，稱定重量，超聲處理(功率300W，頻率50kHz)40分鐘，放冷，再稱定重量，用25%甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液過(guò)微孔濾膜(0.45iim)，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計(jì)算，即得。實(shí)施例12本發(fā)明藥物組合物中阿魏酸的含量的測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)Agilent1100型高效液相色譜儀，VWD紫外檢測(cè)器，色譜柱AgilentEclipseXDB-C18柱(4.6X150mm，5um);流動(dòng)相為甲醇_0.5%醋酸溶液(40:60);流速lml/min;柱溫25。C;紫外檢測(cè)波長(zhǎng)316nm。理論塔板數(shù)按阿魏酸計(jì)算應(yīng)不低于5000。6對(duì)照品溶液的制備精密稱取阿魏酸對(duì)照品適量置棕色容量瓶中，加70%甲醇使溶解制成每1ml含12g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品研細(xì)，取0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇20ml，稱定重量，超聲處理(功率300W，頻率50kHz)45分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液過(guò)微孔濾膜(0.45iim)，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各lOul，注入液相色譜儀，計(jì)算，即得。實(shí)施例13本發(fā)明藥物與《中國(guó)藥典》2005年版方法制備的舒胸片的含量指標(biāo)對(duì)比用同一批的三七藥材、紅花藥材、川芎藥材分別按本發(fā)明工藝和藥典工藝各制備一批樣品，同時(shí)購(gòu)買(mǎi)市售的舒胸片樣品進(jìn)行質(zhì)量對(duì)比試驗(yàn)，分別測(cè)定含量對(duì)比結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>從上表可見(jiàn)，舒胸片新工藝樣品中三類有效成分的含量顯著增加，因而大大地減少了服用劑量，從5片/次，15片/日；降低為從2片/次，6片/日。增強(qiáng)了藥物的療效，還增加了患者的依從性。以下通過(guò)藥效學(xué)試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果。1試驗(yàn)材料1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)環(huán)境KM小鼠、SD大鼠，標(biāo)準(zhǔn)體重，清潔級(jí)；由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)為scxk(川)2005-19。試驗(yàn)在四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中醫(yī)研究所藥理毒理研究室進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)環(huán)境使用許可證號(hào)057。室溫2024"，相對(duì)濕度60±15%;熒光燈照明，12h/12h明暗相間；潔凈空氣。動(dòng)物均按性別分于鼠籠中飼養(yǎng)，每籠5只，全價(jià)飼料及飲水自由采食，每日更換新鮮水，每周更換墊料2次，每周更換并清洗、消毒一次籠具。1.2藥物及試劑本發(fā)明藥物，1.4g原生藥/g浸膏，由實(shí)施例1制備，四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中醫(yī)研究所中藥藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供，批號(hào)20081024。對(duì)比藥物，1.34g原生藥/g浸膏，按《中國(guó)藥典》2005年版方法制備舒胸片，由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中醫(yī)研究所中藥藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供，批號(hào)20081024。阿司匹林腸溶片，南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司，批號(hào)070622。羅通定片，成都市湔江制藥廠，批號(hào)060402。生脈注射液，江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)08091104。1.3主要儀器瑞士梅特勒-托利多AB204-E型精密電子天平；北京松上技術(shù)有限公司A_6半自動(dòng)生化分析儀；南京普朗醫(yī)用設(shè)備有限公司XF9030型自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀等?？烧{(diào)式定量移液器(上海雷勃分析儀器有限公司)。2實(shí)驗(yàn)方法2.1對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響方法昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重1822g，隨機(jī)分成6組，每組10只。設(shè)模型對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照(阿司匹林)，本發(fā)明藥物、對(duì)比藥物各2個(gè)劑量組(2、4g原生藥/kg)。模型對(duì)照組口服生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組口服阿司匹林20mg/kg，本發(fā)明藥物和對(duì)比藥物口服給藥，容積為O.lml/10g體重，每日l(shuí)次，連續(xù)5天。末次給藥后l小時(shí)于各鼠眼眶用毛細(xì)玻璃管取血，計(jì)時(shí)，觀察凝血時(shí)間。結(jié)果用t檢驗(yàn)比較各組間差異顯著性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。表1:本發(fā)明藥物對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>結(jié)果由表1可見(jiàn)，本發(fā)明藥物與對(duì)比藥物比較，所試4g原生藥/kg組與對(duì)照組比較，其凝血時(shí)間均顯著延長(zhǎng)(P〈0.01)，兩者比較，本發(fā)明藥物凝血時(shí)間顯著增加(P<0.05)。表明本發(fā)明藥物對(duì)小鼠凝血時(shí)間有顯著的延長(zhǎng)作用，明顯優(yōu)于舊工藝。2.2對(duì)小鼠尾部出血時(shí)間的影響方法昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重1822g，隨機(jī)分成6組，每組10只。設(shè)模型對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照(阿司匹林)，本發(fā)明藥物、對(duì)比藥物各2個(gè)劑量組(2、4g原生藥/kg)，口服給藥。模型對(duì)照組口服生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組口服阿司匹林20mg/kg，容積均為0.lml/10g體重，每日l(shuí)次，連續(xù)5天。末次給藥后l小時(shí)于各鼠距尾尖lcm處剪斷，觀察不再出血的時(shí)間。結(jié)果用t檢驗(yàn)比較各組間差異顯著性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05表2:本發(fā)明藥物對(duì)小鼠出血時(shí)間的影響組另lj劑量(g/kg)動(dòng)物數(shù)(只)瘤重(g)P值本發(fā)明藥物2109.753±3.8650.005本發(fā)明藥物41011.99±7.9070.016對(duì)比藥物2105.917±5.8700.665對(duì)比藥物4108.975±5.7900.065阿司匹林0.021023.43±4.7010.00001對(duì)照105.020±2.629結(jié)果由表2可見(jiàn)，本發(fā)明藥物所試2g、4g/kg和對(duì)比藥物4g/kg劑量組與對(duì)照組比較，其出血時(shí)間均顯著延長(zhǎng)；結(jié)果表明本發(fā)明藥物對(duì)小鼠出血時(shí)間有明顯的延長(zhǎng)作用，明顯優(yōu)于舊工藝。2.3對(duì)HAc所致小鼠扭體反應(yīng)的影響方法昆明種小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，分別為模型對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照(羅通定)，本發(fā)明藥物、對(duì)比藥物各2個(gè)劑量組(2、4g原生藥/kg)。模型對(duì)照組口服生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組口服羅通定120mg/kg，口服給藥，容積均為0.lml/10g體重，每日1次，連續(xù)5次。末次給藥后l小時(shí)各鼠腹腔注射HAc0.2ml/只，觀察20分鐘內(nèi)各鼠扭體次數(shù)。結(jié)果用t檢驗(yàn)比較各組間差異顯著性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。表4:本發(fā)明藥物對(duì)HAc所致小鼠扭體反應(yīng)的影響組另IJ劑量動(dòng)物數(shù)扭體次數(shù)P值本發(fā)明藥物2g/kg1024.38±15.350.0132本發(fā)明藥物4g/kg1027.63±16.210.0320對(duì)比藥物2g/kg1037.25±13.080.1984對(duì)比藥物4g/kg1023.88±12.180.0069羅通定0.12g/kg101.50±2.620.000006對(duì)照1047.63±17.36結(jié)果見(jiàn)表4，本發(fā)明藥物所試2g、4g/kg和對(duì)比藥物4g/kg劑量組與對(duì)照組比較，其扭體次數(shù)顯著減少。結(jié)果表明本發(fā)明藥物對(duì)HAc所致小鼠扭體反應(yīng)有明顯的抑制作用，比舊工藝好。2.4對(duì)熱板法所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響方法昆明種小鼠90只，雌性，以55t:熱板篩選出合格小鼠(出現(xiàn)舔后足的時(shí)間在525秒鐘)60只，按痛閾時(shí)間隨機(jī)分層分為6組，分別為模型對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照(羅通定)，本發(fā)明藥物、對(duì)比藥物各2個(gè)劑量組(2、4g原生藥/kg)。模型對(duì)照組口服生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組口服羅通定120mg/kg，口服給藥，灌胃體積均為0.lml/10g體重，每日1次，連續(xù)3次。末次給藥后分別測(cè)定給藥后30、60、90分鐘各鼠出現(xiàn)舔后足的時(shí)間。結(jié)果用t檢驗(yàn)比較各組間差異顯著性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。表5:本發(fā)明藥物對(duì)熱板法所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響9<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*與對(duì)照相比P<0.05，**與對(duì)照相比P<0.01結(jié)果見(jiàn)表5，本發(fā)明藥物和舊工藝各劑量組與對(duì)照組比較，其痛閾值在不同時(shí)間均有不同程度的增加。結(jié)果表明本發(fā)明藥物對(duì)熱板法所致小鼠疼痛反應(yīng)有明顯的鎮(zhèn)痛作用。2.5對(duì)角叉菜膠所致小鼠尾部血栓形成的影響方法昆明種小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只。設(shè)模型對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照(阿司匹林)，本發(fā)明藥物、對(duì)比藥物各2個(gè)劑量組(2、4g原生藥/kg)。模型對(duì)照組口服生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組口服阿司匹林20mg/kg，口服給藥，口服體積均為0.lml/10g體重，每日1次，連續(xù)8次。第5次給藥后1小時(shí)各鼠兩后足注射1.5%角叉菜膠0.03ml，將小鼠置于室溫15t:的環(huán)境中24小時(shí)。測(cè)量注射角叉菜膠后24h、48h、72h小鼠尾全長(zhǎng)及血栓形成長(zhǎng)度，以小鼠血栓長(zhǎng)度除以尾巴總長(zhǎng)度得出血栓形成長(zhǎng)度百分?jǐn)?shù)。結(jié)果用t檢驗(yàn)比較各組間差異顯著性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。表3:本發(fā)明藥物對(duì)角叉菜膠致小鼠尾部血栓形成的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*與對(duì)照相比P<0.05，**與對(duì)照相比P<0.01結(jié)果由表3可見(jiàn)，所試4g/kg與對(duì)照組比較，其血栓形成長(zhǎng)度均顯著減少，表明本發(fā)明藥物對(duì)角叉菜膠所致小鼠尾部血栓形成有明顯的抑制作用。2.6對(duì)小鼠斷頭后張口呼吸的影響方法昆明種小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，分別為模型對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照(羅通定)，本發(fā)明藥物、對(duì)比藥物各2個(gè)劑量組(2、4g原生藥/kg)。模型對(duì)照組口服生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組口服羅通定120mg/kg，口服給藥，口服體積均為0.lml/10g體重，每日1次，連續(xù)5次。末次給藥后1小時(shí)各鼠逐只斷頭，記錄小鼠斷頭后至張口呼吸停止時(shí)的時(shí)間及張口呼吸次數(shù)。結(jié)果用t檢驗(yàn)比較各組間差異顯著性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。表6:本發(fā)明藥物對(duì)小鼠斷頭后張口呼吸時(shí)間及次數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>結(jié)果見(jiàn)表6，本發(fā)明藥物新舊工藝所試2g、4g/kg劑量組與對(duì)照組比較，其張口呼吸時(shí)間及次數(shù)均顯著增加。結(jié)果表明本發(fā)明藥物可明顯延長(zhǎng)小鼠斷頭后張口呼吸時(shí)間及次數(shù)。5結(jié)論從上述試驗(yàn)可知，本發(fā)明藥物通過(guò)本發(fā)明工藝制備后，藥效顯著提高，降低了原工藝對(duì)有效成分的破壞。本發(fā)明藥物具有顯著的活血化瘀作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明藥物對(duì)小鼠凝血時(shí)間、出血時(shí)間均顯著延長(zhǎng)，但兩者比較，本發(fā)明藥物較舊工藝強(qiáng)。本發(fā)明藥物有一定的鎮(zhèn)痛作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明能明顯減少HAc所致小鼠的扭體次數(shù)，較舊工藝的作用更好；對(duì)熱板法所致小鼠舔后足的痛閾值也有不同程度的顯著增加；急性抗缺氧試驗(yàn)表明，可使小鼠斷頭后張口呼吸時(shí)間及次數(shù)均有顯著增加。權(quán)利要求一種活血、祛瘀、止痛的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的三七、川芎、紅花為原料，采用動(dòng)態(tài)逆流提取分離得到提取物，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的藥劑三七1份、紅花1份、川芎2份；所述的提取物中人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和三七皂苷R1的重量百分含量為0.5-12％；羥基紅花黃色素A的重量百分含量為0.1-2％；阿魏酸的重量百分含量為0.01-0.2％。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的提取物的制備工藝為三七加0.5-3倍30-95%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加3-15倍量30-95%乙醇30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min，提取液回收乙醇后備用；紅花加6-16倍量的水，30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min;川芎加0.5_3倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加3-15倍量的水，30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min;合并提取物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述的提取物的制備工藝為三七加0.9倍70%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加8倍量70%乙醇5(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min，提取液回收乙醇后備用；紅花加12倍量的水，6(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;川芎加1.7倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加10倍量的水，7(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min;合并提取物。4.根據(jù)權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑是片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、滴丸劑或口服液。5.—種制備權(quán)利要求1所述的活血、祛瘀、止痛的藥物組合物的方法，它包括下述步驟a、稱取重量配比的原料三七1份、紅花1份、川芎2份；b、三七加0.5-3倍30-95%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加3_15倍量30-95%乙醇30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min，提取液回收乙醇后備用；紅花加6-16倍量的水，30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min;川芎加0.5_3倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加3-15倍量的水，30-10(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為20-100min;c、將制備得到的提取物混合、濃縮，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述的制備方法為三七加0.9倍70%乙醇浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中，加8倍量70%乙醇5(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min，提取液回收乙醇后備用；紅花加12倍量的水，6(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為30min;川芎加1.7倍水浸泡至透心，裝入動(dòng)態(tài)逆流提取裝置中后加10倍量的水，7(TC逆流提取，階段提取時(shí)間為40min。全文摘要本發(fā)明一種活血、祛瘀、止痛的藥物組合物，它是由下述重量配比的三七、川芎、紅花為原料，采用動(dòng)態(tài)逆流提取分離得到提取物，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的藥劑三七1份、紅花1份、川芎2份；所述的提取物中人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和三七皂苷R1的重量百分含量為0.5-12％；羥基紅花黃色素A的重量百分含量為0.1-2％；阿魏酸的重量百分含量為0.01-0.2％。本發(fā)明藥物是采用連續(xù)動(dòng)態(tài)逆流提取制備，提取溫度低，溶媒用量少，減小制備工藝對(duì)有效成分的破壞，提高藥物的療效。文檔編號(hào)A61P29/00GK101744859SQ200810239610公開(kāi)日2010年6月23日申請(qǐng)日期2008年12月12日優(yōu)先權(quán)日2008年12月12日發(fā)明者馮建安,張嵩,李希,肖錦,謝守德申請(qǐng)人:四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中醫(yī)研究所