專利名稱：β-阻斷劑在制備用于治療血管瘤藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及β -阻斷劑在制備用于治療諸如嬰兒血管瘤的血管瘤藥物中的用途。本發(fā)明還公開了通過使用本發(fā)明治療血管瘤的方法。在下文中，加方括號(hào)加粗的參考文獻(xiàn)為引用的文獻(xiàn)和公開物，并列于說明書的實(shí) 施例部分之后所列的參考文獻(xiàn)中。
背景技術(shù)：
兒童血管瘤中嬰兒毛細(xì)血管瘤(IH)在皮膚和肝臟中最常見。如在Frieden IJ等 人著有的“嬰兒血管外皮細(xì)胞瘤關(guān)于嬰兒血管外皮細(xì)胞瘤的研究場所的現(xiàn)有知識(shí)、未來方 向和進(jìn)程”，Pediatr Dermatol2005 ；22 383-406[1]中所公開的，嬰兒毛細(xì)血管瘤(IH)是 最常見的嬰兒軟組織腫瘤，并發(fā)生于4%至10%的1歲以下兒童。IH由細(xì)胞類型的復(fù)雜混合物組成，包括大多數(shù)的內(nèi)皮細(xì)胞，與外膜細(xì)胞相關(guān)的、樹 突狀細(xì)胞和肥大細(xì)胞。如在文件[1]中和由BielenbergD. R.等人著有的“嬰兒皮膚的血管 外皮細(xì)胞瘤的逐增與鄰近表皮的增生和血管造影直接相關(guān)，與內(nèi)生的血管造影抑制劑的表 達(dá)成倒置關(guān)系”，INF-beta. Int. J. Oncol. ；14 :401_408 [10]、Boye E等人著有的“來自血管 外皮細(xì)胞瘤的內(nèi)皮細(xì)胞的無性繁殖和可變習(xí)性” J Clin Invest2001 ；107 :745_52[9]所公 開的，在起源上，來自增殖血管瘤的內(nèi)皮細(xì)胞是無性繁殖，表明血管瘤來自于內(nèi)皮前體細(xì)胞 的無性擴(kuò)增，其可能是如[1]中公開的造血干細(xì)胞衍生的。在文件[1]中，IH內(nèi)皮細(xì)胞表現(xiàn)出獨(dú)特的分子表型，其特征為免疫組織化學(xué)陽性 吲哚胺2，3-加雙氧酶(IDO)和LYVE-I在早期IH中均為陽性在成熟為血管表型期間消失， 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 1 (Glut-I)、Lewis Y Ag(Le Y)、FcRyll、merosin、CCR6 和 CD15。對(duì)IH生長和退化的調(diào)節(jié)物的了解仍然很少，但是已經(jīng)證實(shí)，在它們的生長期，涉 及兩種主要的前血管生成因子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)和血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)，其是原位存在的，但是如在文件[1]和在Mancini A. J.等人著有的“青少年毛細(xì)血 管瘤的增殖和細(xì)胞凋亡”，A. m. J. Dermatopathol. 1996 ；18 :505_514[11]中所公開的，也存 在于血液和尿液中。此外，在增殖性IH中VEGF受體(VEGF-R)的原位雜交顯示了 VEGF-R在整個(gè)血管 瘤中均勻分布，而尚未組合到血管中。在IH的生長期，組織學(xué)研究顯示內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞均處于增殖狀態(tài)(MIB1 染色強(qiáng)陽性)，如在Mancini等人著有的“青少年毛細(xì)血管瘤的增殖和細(xì)胞凋亡”，Am J Dermatopathol 1996 ；18 505-14[10]中所公開；另一方面，在退化期期間，細(xì)胞表現(xiàn)出凋 亡的標(biāo)志物，如在[10]和Razon M. J.等人著有的“細(xì)胞凋亡增加與嬰兒血管瘤的退化開 始相一致”，Microcirculation 1998 ；5 189-195[11]中所公開。一種解釋毛細(xì)血管瘤中內(nèi) 皮細(xì)胞凋亡的假設(shè)是在細(xì)胞表面ICAM-I的表達(dá)，但是可選的可能性可能是刺激因子例如 VEGF的喪失[1]。腎上腺素能系統(tǒng)是心臟和血管功能的主要調(diào)節(jié)物。如在D' AngeloG.等人著有的"cAMP依賴性蛋白激酶通過阻斷Raf活化抑制毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長因子和成 纖維細(xì)胞生長因子的促有絲分裂作用” J. Cell Biochem. 1997 ；67 :353_366[13]中公開的， 毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)β_2-腎上腺素能受體，其調(diào)節(jié)NO的釋放，引起內(nèi)皮依賴性血管舒 張。此外，腎上腺素能受體屬于G-蛋白偶聯(lián)受體家族，當(dāng)它們被腎上腺素能兒茶酚胺 活化時(shí)，能夠促進(jìn)一系列細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，如在laccarino等人著有的“通過β 2-腎 上腺素能受體過表達(dá)增強(qiáng)缺血性血管再生內(nèi)皮腎上腺素能系統(tǒng)的一種新作用”，Circ Res 2005 ；97 1182-1189[12]和[13]中所公開。β _受體刺激能夠誘導(dǎo)血管生成因子例如VEGF 或bFGF的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的修飾，如在[13]中所公開。已經(jīng)證實(shí)，cAMP水平的增加抑制VEGF 和bFGF誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖。在cAMP中藥理學(xué)或腎上腺素能受體介導(dǎo)的升高阻斷 了 MAPK信號(hào)途徑的促分裂素誘導(dǎo)的活化，導(dǎo)致經(jīng)由提高的PKA活性的Raf-I活性的阻斷 [13]。此外，已經(jīng)證實(shí)β -阻斷可以誘導(dǎo)培養(yǎng)的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，如在Sommers Smith S. K.等人著有的“β-阻斷劑誘導(dǎo)培養(yǎng)的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡”，In Vitro Cell Dev. Biol. Anim. 2002 ；38 :298_304[14]中所公開。盡管它們的良性自限性過程，常見的IH很少在它們的增殖期引起局部并發(fā)癥例 如潰瘍或出血。例如在Enjolras 0.等人著有的“兒童中報(bào)警性血管瘤的管理一項(xiàng)25例 病例的回顧”，PediatricS1990 ；85 :491_8[4]中所公開的所謂的報(bào)警HI能夠損害生命的或 感覺的功能，尤其是當(dāng)分別存在于上呼吸道和眼眶區(qū)域時(shí)。此外，如在文件[1]和Tanner J. L.等人著有的“伴隨面部血管瘤生長父母和兒 童應(yīng)對(duì)及適應(yīng)，兒科”，1998 ；101 446-452[2]中公開的，IH導(dǎo)致至少短暫的化妝品毀容，其 引發(fā)了首先在父母中、其后在患病的兒童中的心理發(fā)病。全身性或病灶內(nèi)的皮質(zhì)類固醇被用作在增殖期期間問題性病變的第一線治療，如 在Bennett ML等人著有的“使用口服皮質(zhì)類固醇對(duì)皮膚血管瘤是有效的，一種基于證據(jù)的 評(píng)價(jià)”，Arch. Dermatol. 2001 ；137 :1208_13[3]中所公開。然而，即使在高劑量(2到5mg/kg體重/天)下，治療緩解率在30%至60%之間， 如在文件[1]、[3]和[4]中公開的。副作用通常是短暫的和有限的，例如，庫興綜合征樣消 退、應(yīng)激性、生長抑制，但是可能導(dǎo)致更為關(guān)切的肥厚型心肌病。其他治療選擇包括干擾素(!-2&和213(給藥1-31^/1117天的40%至50%的完全緩 解)(幾百萬單元/m2)，但是在低于1歲的兒童中報(bào)道了神經(jīng)毒性的風(fēng)險(xiǎn)，如在文件[1]和 [5]中公開的；如在文件[1]中公開的，長春新堿也因其抗有絲分裂性質(zhì)被使用，但是其公 知的不利面是周圍神經(jīng)病、便秘和血液毒性。此外，新的抗血管生成因子例如avastatin由于它們的副作用，在幼兒中是相反 地指示的。此外，由于接受治療的大多數(shù)患者是嬰兒或小孩，對(duì)已知化合物耐受的患者變得
至關(guān)重要。因而，需要可選的、更有效和更低毒性的化合物，用于治療IH，特別是嬰兒毛細(xì)血 管瘤。本發(fā)明滿足這些和其他需求。

發(fā)明內(nèi)容
萘心安是良好耐受的非選擇性阻斷劑，通常在幼兒中使用，用于心臟適應(yīng) 癥，如Villain E等人著有的“在長QT綜合征兒童中采用β -阻斷治療心臟事件的發(fā)生 率較低”，Eur. Heart J. 2004 ;25 1405-11 [6]、Fritz K.I.等人著有的 “ β -阻斷劑對(duì)癥 狀性地塞米松誘導(dǎo)的早產(chǎn)嬰兒肥厚型梗阻性心肌病的作用三個(gè)病例報(bào)告和文獻(xiàn)綜述”，J Perinatol 1998 ；18 :38_44[7]和Kilian K.著有的“嬰兒高血壓的原因及治療”，J. Perinat Neonatal Nurs. 2003 ;17 :65_74[8]所公開的。但是這種β -阻斷劑一般在治療血管瘤中 的使用尚未被實(shí)驗(yàn)且未公開。本發(fā)明人是實(shí)驗(yàn)并注意到β-阻斷劑可能非常有效地控制IH的生長、甚至治療IH 的第一人。在本申請(qǐng)中提供了觀察和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，在本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供了 阻斷劑在制備用于治療血管瘤藥物中 的用途?！?β -阻斷劑”在本文中還指β -受體阻斷劑、β "腎上腺素能受體阻斷劑、β _阻 斷劑、β "阻斷劑或β "腎上腺素能受體阻斷劑，或表明抑制天然的或人工的激動(dòng)劑與任何 類型的β -腎上腺素能受體(β -1、β _2、β -3或其他)結(jié)合的化合物的任何其他命名。根據(jù)本發(fā)明，阻斷劑可以是非選擇性的阻斷劑、β-1-選擇性阻斷劑、 α-1/β-腎上腺素能拮抗劑、β-2-選擇性β-阻斷劑。阻斷劑還可以是兩種或更多 種β -阻斷劑的混合物。可以在本發(fā)明中使用的β -阻斷劑的實(shí)例在Goodman和Gilman著有的“治療學(xué)的 病理學(xué)基礎(chǔ)”，eleventh edition, chapter 10，pp 271-295，2006 [19]中公開。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)使用非選擇性阻斷劑時(shí)，它可以選自例如包含阿普洛 爾、布新洛爾、卡替洛爾、卡維地洛、拉貝洛爾、左布諾洛爾、美沙洛爾、甲吲洛爾、美替洛爾、 納多洛爾、氧烯洛爾、噴布洛爾、吲哚洛爾、普羅帕酮(普羅帕酮是也作為腎上腺素能受 體拮抗劑的鈉通道阻斷藥物)、萘心安、索他洛爾、噻嗎洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組?？?以使用其混合物。根據(jù)本發(fā)明當(dāng)使用選擇性β-阻斷劑時(shí)，例如，它可以選自包含醋丁洛爾、阿 替洛爾、倍他洛爾、比索洛爾、塞利洛爾、艾司洛爾、美托洛爾、奈必洛爾的組。β -阻斷劑還可能具有內(nèi)在的擬交感活性，如醋丁洛爾、倍他洛爾、卡替洛爾、卡維 地洛、拉貝洛爾、氧烯洛爾、噴布洛爾、吲哚洛爾、萘心安。優(yōu)選地，β -阻斷劑是萘心安或其藥學(xué)上的鹽，例如L-或D-萘心安或其混合物。 混合物可以是L-和D-萘心安的混合物，其數(shù)量為0 1到1 0，例如1 1。萘心安的 藥學(xué)上可接受的鹽可以是萘心安鹽酸鹽或萘心安的任何其他制劑，無論該制劑是否變化或 改變萘心安的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)或代謝性。根據(jù)本發(fā)明，藥物可以是用于治療嬰兒毛細(xì)血管瘤的藥物。根據(jù)本發(fā)明，該藥物還可以是用于治療其他血管瘤的藥物，例如，選自包含血管 瘤(即，上皮血管瘤、血竇血管瘤、紡錘形細(xì)胞血管瘤)、叢狀血管瘤、血管內(nèi)皮瘤(即， kaposiform IfiIiW )、von Hippel-Lindau ^^ ΕΦ WiliW^> Bournevi 1 Ie _巾白勺il 管纖維瘤和血管脂瘤、膿性肉芽腫、血管肉瘤，例如Kaposi' s肉瘤、擴(kuò)張的動(dòng)靜脈畸形、腫 瘤相關(guān)的血管增生的組。參考文獻(xiàn)M. Wassef和coll著有的“血管腫瘤和血管畸形、分類、病理學(xué)及影像學(xué)”，Ann Chir PlastEsth 2006 ；51 263-281[20]公開了這些主動(dòng)增殖腫瘤 的病理解剖學(xué)分類。藥物可以是可被施用給人類或動(dòng)物的任何形式。可以直接進(jìn)行施藥，即，純的或基 本上純的，或在β“阻斷劑與藥學(xué)上可接受的載體和/或介質(zhì)混合后進(jìn)行。根據(jù)本發(fā)明，藥物可以是糖漿或可注射的溶液。根據(jù)本發(fā)明，所述藥物可以是用于口服施用的藥物，選自包含液體制劑、口服泡騰 劑型、口服粉劑、多顆粒系統(tǒng)、或口服可分散劑型的組。例如，當(dāng)所述藥物是用于口服施用的藥物時(shí)，它可以是選自包含溶液、糖漿、懸浮 液、乳劑和口服滴劑的組的液體制劑形式。當(dāng)所述藥物是口服泡騰劑型的形式時(shí)，它可以是 選自包含片劑、微粒、粉劑的組的形式。當(dāng)所述藥物是口服粉劑或多顆粒系統(tǒng)的形式時(shí)，它 可以選自包含珠子、微粒、迷你片劑和微顆粒的組的形式。當(dāng)所述藥物是口服可分散劑型的 形式時(shí)，它可以選自包含口分散片劑、凍干薄片、薄膜、咀嚼片、片劑和膠囊、醫(yī)用口香糖的 組的形式。根據(jù)本發(fā)明，所述藥物可以是用于口腔和舌下給藥途徑的藥物，例如，選自包含口 腔或舌下片劑、粘膜粘附制劑、錠劑、口粘膜滴劑或噴霧劑的組。根據(jù)本發(fā)明，所述藥物可以是用于局部經(jīng)皮施用的藥物，例如，選自包含軟膏劑、 乳膏劑、凝膠、洗滌劑、貼片和泡沫的組。根據(jù)本發(fā)明，所述藥物可以是用于鼻部施用的藥物，例如，選自包含滴鼻劑、鼻部 噴霧、鼻部粉劑的組。根據(jù)本發(fā)明，所述藥物可以是用于直腸施用的藥物，例如，栓劑或硬明膠膠囊。根據(jù)本發(fā)明，所述藥物可以是用于胃腸外施用的藥物，例如，皮下的、肌肉內(nèi)的、靜 脈內(nèi)的施用。本領(lǐng)域的技術(shù)人員清楚地理解，在此使用的術(shù)語“形式”是指藥物用于 其實(shí)際用途的藥物制劑。例如，所述藥物可以選自下組的形式，所述組包含可注 射的形式(例如，Avlocardyl 5mg/ml)、糖漿(例如，Efferalgan 3% )、口服 懸浮液(例如，Efferalgan 3% )、丸粒(例如，Dafalgan lg )、粉劑(例如， Doliprane 1 OOmg )、微粒劑(例如，Zoltum 10mg )、噴霧劑、穿表皮的貼片(例 如，Cordipatch 5mg/24h)或局部形式(乳膏劑、洗滌劑、洗眼劑)(例如，分別地， Dermoval creme 、 Betneval lotion和Chibroxine collyre)。在這些實(shí)例中，β -阻斷劑，例如，上述β -阻斷劑之一，例如，萘心安，可以添加或 可以替換所述藥物的活性成分。藥學(xué)上可接受的載體可以是取決于受試者用于向人類或動(dòng)物施用β -阻斷劑的 任何已知的藥學(xué)上的載體。例如，這種載體可以選自包含例如單甲氧基-聚乙二醇(例如， 在Viraferonpeg 中)或脂質(zhì)體(例如，在Ambizome 中)的組。所述介質(zhì)可以是用于β-阻斷劑向人類或動(dòng)物施用的任何已知的介質(zhì)。例如，這 種介質(zhì)可以選自包含例如cremophor (例如，在Sandimmim 中)或eelIulosis (例如，在 Avlocardyl LPl60mg 中)的組。藥物的藥物形式根據(jù)要治療的人類或動(dòng)物來選擇。例如，對(duì)于兒童或嬰兒，優(yōu)選糖漿或注射。施用可以用重量刻度的移液管來進(jìn)行。根據(jù)本發(fā)明，藥物可以包含任何藥學(xué)上可接受的和有效劑量的β -阻斷劑來治療 血管瘤。例如，藥物可以包含一種劑量，其容許1到5mg/kg體重/天、例如2到4mg/kg體 重/天的施用。在第二個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療患有血管瘤的受試者的方法，也公開了。這種方 法包括向所述受試者施用阻斷劑的步驟。血管瘤和β -阻斷劑，以及可用的制劑如上文定義。所述施用可以通過使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的、和對(duì)施用β “阻斷劑有用的任何 藥物途徑來進(jìn)行。上文提供了藥物的施用形式的實(shí)例。例如，施用可以通過β-阻斷劑的 直接注射來進(jìn)行。這種施用途徑以及糖漿對(duì)于嬰兒當(dāng)然是優(yōu)選的。施用可以被限定，以容許藥學(xué)上可接受的和有效的劑量的遞送用于血管瘤的治 療。例如，施用可以包含1到5mg/kg體重/天的劑量，例如2到4mg/kg體重/天。施用可 以以每天一次給藥或多次給藥來進(jìn)行。本申請(qǐng)的發(fā)明人在實(shí)驗(yàn)上清楚地證實(shí)了使用阻斷劑在嬰兒毛細(xì)血管瘤(IH) 中強(qiáng)的抗血管生成作用。本發(fā)明人對(duì)血管瘤進(jìn)行的進(jìn)一步研究顯示，腎上腺素能β 2受體存在于血管瘤內(nèi) 皮細(xì)胞的表面(參見下文的實(shí)施例)。這確認(rèn)了本發(fā)明獲得的結(jié)果，提供了生理病理解釋， 并確認(rèn)了在本發(fā)明的框架內(nèi)阻斷劑的作用機(jī)制。這也確認(rèn)了萘心安的功效與其作為
阻斷劑的活性之間的聯(lián)系。由于現(xiàn)有技術(shù)的新的抗血管生成因子例如avastatin，由于它們的副作用在幼兒 中被相反地指示，根據(jù)本發(fā)明的萘心安的使用構(gòu)成了對(duì)全身性皮質(zhì)類固醇、以及甚至對(duì)干 擾素或長春新堿的安全的可選方案。萘心安是具有弱的內(nèi)在擬交感活性的非選擇性β -阻斷劑，其對(duì)IH的顯著治療作 用可以通過三種機(jī)制解釋1.誘導(dǎo)細(xì)胞缺氧的外周血管收縮劑作用，萘心安導(dǎo)致外周的血管收縮，這種效果 在我們治療的IH上立即可見。2.通過Raf/MAPK途徑或HIF途徑的負(fù)調(diào)節(jié)，VEGF和bFGF基因的降低的表達(dá) (Giatromanoloki A, Arvanitidou V, Hatzimichael A, Simopoulos C, Sivridis E[17])。 在皮膚毛細(xì)血管瘤中HIF-2alpha/VEGF途徑的活化(Shyu KG, Liou JY, Wang BW，F(xiàn)ang WJ, Chang H著有的“Cardiovedilol預(yù)防壓力超負(fù)荷大鼠心臟的心臟肥大和低氧誘導(dǎo)因 子-1 α及血管內(nèi)皮生長因子的過表達(dá)”，J Biomed Sci. 2005 ；12 :409_420[18])。3.對(duì)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞凋亡觸發(fā)作用。在下文公開的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，在顯現(xiàn)了 IH的嬰兒中觀察到與病變的明顯的軟化相 關(guān)的強(qiáng)烈紅色到紫色的顏色變化。這種作用可以誘導(dǎo)引起皮細(xì)胞增殖阻滯的血管瘤的慢性缺氧。然而，在發(fā)明人的實(shí)驗(yàn)中，在萘心安治療下IG的進(jìn)展性改善強(qiáng)烈地表明對(duì)增殖生 長因子的持續(xù)作用。在這點(diǎn)上不清楚的是，治療的靶點(diǎn)是內(nèi)皮細(xì)胞本身還是其他細(xì)胞例如間質(zhì)細(xì)胞或 肥大細(xì)胞?？赡苌婕敖忉孖H的退化的第三種機(jī)制是由β-阻斷誘導(dǎo)的早期內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。
然而當(dāng)在IH的增殖期期間停止治療時(shí)，在呈現(xiàn)的兩個(gè)病例中血管瘤的重新生長 不支持這種假說。此外，在第二個(gè)病例中，通過利用裂解的CaSpaSeS3和8抗體的免疫組織 化學(xué)，發(fā)明人沒有發(fā)現(xiàn)凋亡細(xì)胞標(biāo)志物。進(jìn)一步的，目前在嬰兒或兒童患者中廣泛的使用β-阻斷劑，在心臟疾病中，如文 件Villain Ε.等人著有的“在長QT綜合征兒童中采用β _阻斷治療心臟事件的發(fā)生率較 低”，Eur.Heart J. 2004 ；25 1405-1411 [6]中所示的長 QT 綜合征、文件 Fritz K. I.等人 著有的“ β-阻斷劑對(duì)癥狀性地塞米松誘導(dǎo)的早產(chǎn)嬰兒肥厚型梗阻性心肌病的作用三個(gè) 病例報(bào)告和文獻(xiàn)綜述”，J. Perinatal 1998 ；18 :38_44[7]中所示的肥厚型心肌癥、或文件 Kilian K.等人著有的“嬰兒高血壓的原因及治療”，J. Perinat. Neonatal Nurs 2003 ； 17 65-74[8]中所示的高血壓中具有良好的耐受性。通過以下實(shí)施例參考附圖來進(jìn)一步說明本發(fā)明，不得理解為是對(duì)本發(fā)明的限制。


圖1顯示在開始萘心安治療之前、4周的在先全身性類固醇治療之后血管瘤的外 觀的圖像。圖2顯示根據(jù)本發(fā)明在開始萘心安治療之后僅僅七天的血管瘤外觀的圖像。圖3顯示在6個(gè)月齡時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的圖像，其中兒童仍然繼續(xù)根據(jù)本發(fā)明治療，在先 的全身性類固醇治療自2個(gè)月起停止。圖4顯示根據(jù)本發(fā)明在9個(gè)月萘心安治療時(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的圖像。圖5是用免疫組織化學(xué)的方法獲得的圖片，顯示β 2受體在IH的內(nèi)皮細(xì)胞上表 達(dá)。圖6是用免疫組織化學(xué)的方法獲得的圖片，顯示HIFl-α (紅色染色)在IH的內(nèi) 皮細(xì)胞上表達(dá)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 根據(jù)本發(fā)明的第一實(shí)驗(yàn)?zāi)行詪雰撼尸F(xiàn)了涉及鼻部棱錐的ΙΗ。在2月齡時(shí)，由于與鼻部中隔和中柱壞死相 關(guān)的呼吸困難，引入了全身性類固醇。在3mg/kg體重/天(mg/kg/天)的潑尼松龍治療一 個(gè)月之后，血管瘤被穩(wěn)定，但是鼻部壞死進(jìn)展。由于嬰兒逐漸地拒絕服用潑尼松龍片劑，我 們引入相當(dāng)劑量的倍他米松滴劑(0. 5mg/kg/天)。在4月齡，血管瘤已經(jīng)停止生長，鼻內(nèi)潰 瘍?nèi)Ｈ欢?，該兒童在控制訪視時(shí)返回具有與收縮期心雜音相關(guān)的180到200次脈搏/ 分鐘的心動(dòng)過速。心臟超聲檢查顯示阻塞性肥厚型心肌病，調(diào)整倍他米松劑量從3mg/kg體 重/天降至2mg/kg體重/天(mg/kg/天)。因而我們開始使用3mg/kg/天的β-阻斷劑萘心安(化學(xué)品IUPAC名稱 (2RS)-1-[1-甲基乙基)氨基]_3(萘-1基氧基)丙-2-醇)治療。萘心安作為含有市售 萘心安粉劑的膠囊劑來施用。在開始萘心安治療次日，血管瘤顏色從強(qiáng)烈紅色變?yōu)樽仙?且軟化。倍他米松由潑尼松龍?zhí)娲渲饾u減少，并且在開始萘心安之后6周停止。盡管降低了全身性類固醇，IH仍然繼續(xù)改善。在5個(gè)半月齡，當(dāng)停止類固醇時(shí)，未注意到IH大小或顏色的反彈。在14月齡時(shí)，該兒童仍然接受萘心安，皮質(zhì)類固醇誘導(dǎo)的肥 厚型心肌病轉(zhuǎn)歸。IH是完全扁平的，在黃-橙不正常顏色的皮膚背景上僅有皮膚毛細(xì)管擴(kuò) 張持續(xù)存在、以及鼻內(nèi)和中柱壞死的后遺癥。實(shí)施例2 根據(jù)本發(fā)明的第二實(shí)驗(yàn)第二個(gè)嬰兒，男性三胞胎，在30周出生，自出生起呈現(xiàn)斑塊樣IH，累及全部右側(cè)上 肢和右側(cè)額頂骨和上眼瞼區(qū)域。在一月齡，在3個(gè)區(qū)域的皮下部分發(fā)生，包括上眼瞼、腮腺區(qū)域和腋下的皺褶。由 于視覺喪失的風(fēng)險(xiǎn)，潑尼松龍以3mg/kg/天開始。然而，在2周的治療之后，病情未得到控制，我們決定提高潑尼松龍為5mg/kg/天， 持續(xù)2周。盡管采用這種方案，但I(xiàn)H繼續(xù)擴(kuò)大，在2月齡時(shí)眼瞼已不能張開，右側(cè)面部由于如 圖1所示的巨大腫瘤而畸形。此外，腋下的皺褶被臨床上測量直徑為5cm的腫瘤IH部分占 據(jù)。MRI顯示沒有腦內(nèi)異常，但是揭示IH涉及錐內(nèi)外的眼眶區(qū)域，并且導(dǎo)致眼球突出。 此外，MRI顯示牙周的IH與壓縮的頸內(nèi)部分相連續(xù)，導(dǎo)致氣管和食道的偏離腋下腫塊測量 為26mm X 45mm X 40mm，并且延伸到右側(cè)肺尖部。心臟超聲檢查顯示心輸出量增加。潑尼松龍的劑量降低到3mg/kg/天，根據(jù)本發(fā)明開始用萘心安2mg/kg/天的治療。與之前嬰兒(參見上述實(shí)施例1) 一樣，在萘心安開始后僅12小時(shí)，病變軟化。七天后，如圖2中呈現(xiàn)的圖片所顯示，由于血管瘤的皮下部分大小的顯著降低，自 發(fā)的眼睛張開是可能的。牙周和腋下的腫塊大小顯著降低。本發(fā)明獲得的這些出乎意料的結(jié)果與圖1的圖片中呈現(xiàn)的結(jié)果相比較，后者顯示 在現(xiàn)有技術(shù)的全身性類固醇治療(2周3mg/kg/d和2周5mg/kg/d)4周之后、開始萘心安治 療之前的血管瘤的外觀。潑尼松龍治療逐漸地減少，而IH繼續(xù)改善。在3個(gè)月齡時(shí)，在臂上獲取活檢樣品， 顯示典型的IH。內(nèi)皮細(xì)胞證實(shí)用單克隆抗體MIB-I染色較差，表明在幼兒中IH的增殖活性 較弱。為了評(píng)估萘心安的可能的促細(xì)胞凋亡作用，進(jìn)行了利用單克隆抗裂解的 caspase-3 禾口 8 抗體(Ozyme, Saint Quentin en Yvelines, France)的免疫組織化學(xué)分析， 但是沒有證實(shí)陽性的免疫染色[15]。潑尼松龍?jiān)?月齡時(shí)停止，沒有任何反彈，但是萘心安治療的3天中斷引起上眼瞼 和牙周區(qū)域上血管瘤大小的輕度增加。萘心安治療以2mg/kg/天的再引入在僅24小時(shí)后就是成功的。在6月齡，眼睛張開是滿意的，未注意到嚴(yán)重的視力損害，牙周和腋下的皮下血管 瘤部分不明顯，IH在面部和手臂均顯著地消退。圖3提供了顯示在6月齡時(shí)這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果的圖片，此時(shí)該兒童仍然繼續(xù)服用2mg/ kg/d的萘心安，但是自2個(gè)月起停用了全身性類固醇。沒有注意到血管瘤的皮下部分，皮膚 上的部分顯著地消退。此外，該兒童沒有患上任何視力損害。在9個(gè)月齡，治療停止，如在圖4的圖片中顯示的，沒有任何IH的重新生長。
實(shí)施例3 根據(jù)本發(fā)明的第三實(shí)驗(yàn)呈現(xiàn)右側(cè)眼周IH的女嬰在3周齡首次被注意到，局限于內(nèi)眼角。在2月齡，IH的 皮下部分延伸到眼眶，并限制了上眼瞼的張開。多普勒超聲顯示測量直徑為32mm、厚度為12mm的IH。在從其父母獲得知情同意之后，其接受2mg/kg/天的萘心安治療。在12小時(shí)內(nèi)注 意到病變的扁平化，隨后是漸進(jìn)性的改善。在萘心安開始后7天進(jìn)行的對(duì)照超聲檢查顯示IH大小的降低直徑21mm對(duì)比 32mm,厚度6mm對(duì)比12mm，沒有任何血液動(dòng)力學(xué)的改變。萘心安在一個(gè)月后停止，但是注意到IH大小的新的增加，使得重新開始治療成為必要。在7月齡，IH是扁平的并且消退，超聲檢查未能鑒定任何皮下的部分。在8個(gè)月時(shí)停止萘心安，沒有血管瘤的任何反彈。患有血管瘤的另外七例兒童已經(jīng)用萘心安治療，獲得了類似的結(jié)果。本發(fā)明沒有 觀察到治療失敗。這種結(jié)果在現(xiàn)有技術(shù)中從未實(shí)現(xiàn)，例如，使用皮質(zhì)治療或干擾素的現(xiàn)有技 術(shù)?？傊?，這些實(shí)施例清楚地顯示，萘心安在IH中具有強(qiáng)烈的抗血管生成作用。由于 新的抗血管生成因子例如avastatin，由于它們的副作用在幼兒中被相反地指示，萘心安可 以構(gòu)成對(duì)全身性皮質(zhì)類固醇、以及甚至對(duì)干擾素或長春新堿的合理的、安全的可選方案。實(shí)施例4 評(píng)論和進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)明人偶然注意到，萘心安，通常在幼兒中用于心臟適應(yīng)癥的、耐受良好的非選 擇性β-阻斷劑，可以控制IH的生長期，如在Leaute-Labreze C, Dumas de la Roque E，Hubiche T, Boralevi F, Thambo JB著有的“萘心安用于嬰兒重度血管瘤”，New Engl J Med2008,358 ；24 2650-51[16]中所報(bào)道的。偏離的性別比率的可能的解釋，以及 HIF-2alpha途徑的活化和隨后內(nèi)皮細(xì)胞的VEGF過量表達(dá)，在皮膚毛細(xì)血管瘤的病理中 涉及(Giatromanolaki等人著有的“皮膚毛細(xì)血管瘤中HIF_2alpha/VEGF途徑的活化”， Pathology2005 149-51 [17])。令人驚訝地，研究用于治療心臟肥大的β-阻斷劑，Shyu等 人揭示cardivedilol將HIF-I alpha和VEGF的蛋白質(zhì)和mRNA逆轉(zhuǎn)錄到基線值(Shyu等 人著有的“Cardiovedilol預(yù)防壓力超負(fù)荷大鼠心臟的心臟肥大和低氧誘導(dǎo)因子_1 α及血 管內(nèi)皮生長因子的過表達(dá)”，J Biomed Sci.2005 ;12 :409-420[18])。進(jìn)行進(jìn)一步的研究，考 察在IH中在體內(nèi)和體外的β -腎上腺素能受體的血管生成級(jí)聯(lián)下游，以及考察影響IH表 型的可能的遺傳決定因素。組織學(xué)和免疫組織化學(xué)皮膚活檢物被包埋在石蠟中，切成5 μ m切片，用蘇木色素_曙紅染色以評(píng)估一般 的形態(tài)。為了顯現(xiàn)α 2-腎上腺素能受體的存在和HIFl-α的表達(dá)水平，將切片分別與單克 隆兔抗人α 2-腎上腺素能受體1 100 (ΡΑ1-20659, ABR, Golden, USA)或單克隆小鼠抗人 HIFl-α 1 1000 (ab8366，abcam，Cambridge，UK)在 4°C孵育過夜。作為第二系統(tǒng)，我們使 用了 Envision 辣根過氧化酶系統(tǒng)(K4002，K4000 Dako, Trappes, France)，其增強(qiáng)了針對(duì) α 2-腎上腺素能受體的兔子和針對(duì)HIFl-α的小鼠的染色敏感性。切片用氨基甲酸氨基乙 酯(Κ3461，Dako，Trappes，F(xiàn)rance)顯現(xiàn)，用蘇木色素復(fù)染。
初步的免疫組織化學(xué)發(fā)現(xiàn)顯示，β 2受體(圖5)在IH的內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)。如近 來觀察到的，HIFl-α (圖6)也在IH的內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)。參考文獻(xiàn)列表[l]Frieden IJ,Haggstrom A,Drolet ΒΑ,Mancini AJ,Friedlander SF,Boon L, andcoll. “嬰兒血管外皮細(xì)胞瘤關(guān)于嬰兒血管外皮細(xì)胞瘤的研究場所的現(xiàn)有知識(shí)、未來方 向和進(jìn)程，，.Pediatr Dermatol 2005;22:383-406.[2] Tanner JL, Dechert MP, BA ；Frieden IJ. “伴隨面部血管瘤生長父母和兒童 應(yīng)對(duì)及適應(yīng)，兒科” .Pediatrics. 1998 ；101 :446_452.[3]Bennett ML, Fleischer AB，Chamlin SL, Frieden IJ. “使用口服皮質(zhì)類固醇 對(duì)皮膚血管瘤是有效的，一種基于證據(jù)的評(píng)價(jià)”.Arch Dermatol 2001 ；137 1208-13.[4]Enjolras 0，Riche MC, Merland JJ, Escande JP. “兒童中報(bào)警性血管瘤的管 理一項(xiàng) 25 例病例的回顧” .Pediatrics 1990 ；85 :491_8·[5]Ezekowitz RAB, Phil CBD, Mulliken JB, Folkman J. “干擾素 α-2a 對(duì)危及 生命的嬰兒血管瘤的治療.New Engl J Med 1992 ；326 1456-63.[6]Villain Ε, Denjoy I, Lupoglazoff JM, Guicheney P, Hainque B, Lucel V, Bonnet D. “在長QT綜合征兒童中采用β -阻斷治療心臟事件的發(fā)生率較低”.Eur HeartJ 2004；25 1405-11.[7]Fritz Kl,Bhat AM. “ β -阻斷劑對(duì)癥狀性地塞米松誘導(dǎo)的早產(chǎn)嬰兒肥厚型梗 阻性心肌病的作用三個(gè)病例報(bào)告和文獻(xiàn)綜述”.J Perinatol 1998 ；18 =38-44.[8]Kilian K. “嬰兒高血壓的原因及治療” .J Perina Neonatal Nurs2003 ； 17 65-74.[9]Boye E，Yu Y, Paranya G, Paranya G,Mulliken JB, Olsen BR Bischoff J. “來 自血管外皮細(xì)胞瘤的內(nèi)皮細(xì)胞的無性繁殖和可變習(xí)性”.J Clin Invest2001 ；107 =745-52.[IOlMancini AJ, Smoller BR. “青少年毛細(xì)血管瘤的增殖和細(xì)胞凋亡” .Am JDermatopathol 1996;18:505-14.[11] Razon MJ, Kraling BM, Mulliken JB, Bischoff J. “細(xì)胞凋亡增加與嬰兒血 管瘤的退化開始相一致”.Microcirculation 1998 ；5 189-95.[12]laccarino G,Ciccarelli M,Soriento D,Galasso G,Campanile A,Santulli G, Cipolletta Ε, Cerullo V, Cimini V, Altobelli GG, Piscione F, Priante O, Pastore L, Chiarello Μ, Salvatore F, Koch WJ, Trimarco B. “通過 β 2-腎上腺素能受體過表達(dá) 增強(qiáng)缺血性血管再生內(nèi)皮腎上腺素能系統(tǒng)的一種新作用”.Circ Res2005 ；97 :1182_1189.[13]D' Angelo G, Lee H, Weiner Rl. “cAMP 依賴性蛋白激酶通過阻斷 Raf 活化 抑制毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長因子和成纖維細(xì)胞生長因子的促有絲分裂作用”.J Cell Biochem 1997 ；67 :353_366.[14] Sommers Smith SK, Smith DM. “ β -阻斷劑誘導(dǎo)培養(yǎng)的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的 凋亡”· In Vitro Cell Dev Biol Anim 2002 ；38 :298_304·[15]Chaturvedi V, Sitailo LA, Bodner B, Denning MF, Nickoloff BJ.定義 含caspase的細(xì)胞凋亡機(jī)制有助于人類皮膚替代物的角質(zhì)化.Exp Dermatol. 2006 Jan ； 15(1) 14-22.
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權(quán)利要求
1.一種β-阻斷劑在制備用于治療血管瘤藥物中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中，所述阻斷劑選自包含非選擇性的阻斷 齊U、β "I"選擇性β “阻斷劑、α -1/ β -腎上腺素能拮抗劑的混合物、β -2-選擇性β -阻 斷劑和兩種或更多種阻斷劑的混合物的組。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中，所述阻斷劑是非選擇性的阻斷劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中，所述非選擇性的阻斷劑選自包含阿普洛爾、 布新洛爾、卡替洛爾、卡維地洛、拉貝洛爾、左布諾洛爾、美沙洛爾、甲吲洛爾、美替洛爾、納 多洛爾、氧烯洛爾、噴布洛爾、吲哚洛爾、普羅帕酮、萘心安、索他洛爾、噻嗎洛爾、其藥學(xué)上 可接受的鹽和其混合物的組。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其中，所述β-阻斷劑是β -1選擇性的β -阻斷劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中，所述β-1選擇性的阻斷劑選自例如包含醋 丁洛爾、阿替洛爾、倍他洛爾、比索洛爾、塞利洛爾、艾司洛爾、美托洛爾、奈必洛爾的組。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中，所述阻斷劑具有內(nèi)在擬交感活性。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其中，所述β-阻斷劑選自包含醋丁洛爾、倍他洛爾、卡 替洛爾、卡維地洛、拉貝洛爾、氧烯洛爾、噴布洛爾、吲哚洛爾、萘心安的組。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中，所述阻斷劑是萘心安或其藥物鹽。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的用途，其中，所述藥物是用于治療毛細(xì)血管瘤和 /或毛細(xì)血管嬰兒血管瘤的藥物。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的用途，其中，所述藥物是糖漿或可注射的溶液。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的用途，其中，所述藥物是用于口服施用的藥物， 選自包含液體制劑、口服泡騰劑型、口服粉劑、多顆粒系統(tǒng)、口服可分散劑型的組。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的用途，其中，所述用于口服施用的藥物是選自包含溶液、糖 漿、懸浮液、乳劑和口服滴劑的組的液體制劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的用途，其中，所述藥物是用于口腔和舌下途徑 的藥物。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的用途，其中，所述藥物是用于局部_經(jīng)皮施用的 藥物。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的用途，其中，所述用于局部施用的藥物選自包含軟膏劑、乳 膏劑、凝膠、洗滌劑、貼片、泡沫的組。
17.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的用途，其中，所述藥物是用于鼻部施用的藥物。
18.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的用途，其中，所述藥物是用于直腸施用的藥物。
19.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的用途，其中，所述藥物是用于胃腸外施用的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及β-阻斷劑在制備用于治療血管瘤，例如嬰兒血管瘤藥物中的用途。所述β-阻斷劑可以是非選擇性的β-阻斷劑，例如萘心安。本發(fā)明提供了一般用于治療血管瘤的已知化合物，例如皮質(zhì)類固醇、干擾素或長春新堿的替代藥物。
文檔編號(hào)A61K31/138GK102006864SQ200880111892
公開日2011年4月6日 申請(qǐng)日期2008年10月16日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月19日
發(fā)明者克里斯蒂娜·萊奧泰-拉布尼茨, 吉恩-伯努瓦·塔姆波, 埃里克·羅克·德拉·迪馬, 阿蘭·塔伊布 申請(qǐng)人:維克多塞加倫波爾多第二大學(xué)