專利名稱：3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及口服制劑，其包含如本文描述的基本上游離的3- (6- (1- (2，2- 二氟苯 并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化 合物1)、水和粘度劑。所述口服制劑還可以包括表面活性劑、消泡劑、緩沖劑和掩味劑。本 發(fā)明還涉及用這種制劑治療CFTR介導(dǎo)的疾病例如囊性纖維化病的方法。
背景技術(shù)：
CFTR是cAMP/ATP介導(dǎo)的陰離子通道，其在多種細(xì)胞類型中被表達(dá)，所述細(xì)胞類型 包括吸收性和分泌性上皮細(xì)胞，其中它調(diào)節(jié)陰離子的跨膜流動，并調(diào)節(jié)其它離子通道和蛋 白質(zhì)的活性。在上皮細(xì)胞中，CFTR的正常功能對于維持包括呼吸和消化組織在內(nèi)的整個(gè)身 體的電解質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)是非常關(guān)鍵的。CFTR是由約1480個(gè)氨基酸組成，這些氨基酸編碼由串聯(lián)重 復(fù)的跨膜區(qū)所構(gòu)成的蛋白質(zhì)，每個(gè)跨膜區(qū)含有6個(gè)跨膜螺旋和1個(gè)核苷酸結(jié)合區(qū)。2個(gè)跨膜 區(qū)通過一個(gè)具有多個(gè)磷酸化位點(diǎn)的大的、極性的、調(diào)節(jié)性(R)-區(qū)域相連，所述磷酸化位點(diǎn) 調(diào)節(jié)通道活性和細(xì)胞運(yùn)輸。編碼CFTR的基因已經(jīng)被鑒別和測序(參見Gregory，R. J.等人(1990)Nature 347 382-386 ；Rich, D. P.等人(1990)Nature347 :358_362)，(Riordan, J. R.等人(1989) Science 245:1066-1073)。這種基因的缺陷引起CFTR突變，導(dǎo)致囊性纖維化(“CF”)，這 是人類最常見的致命性遺傳疾病。在美國，囊性纖維化影響大約2，500分之一的嬰兒。在全 部美國人口中，多達(dá)1千萬人攜帶有缺陷基因的單個(gè)副本，而沒有明顯的不良作用。相反， 帶有兩個(gè)CF相關(guān)基因副本的個(gè)體會發(fā)生CF的致虛弱和致命作用，包括慢性肺病。在患有囊性纖維化病的患者中，在呼吸道上皮中內(nèi)源性表達(dá)的CFTR突變導(dǎo)致頂 膜的陰離子分泌減少，使離子和體液轉(zhuǎn)運(yùn)失衡。所導(dǎo)致的陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)的減少使得CF患者的 肺中粘液蓄積增加，并伴隨微生物感染，最終導(dǎo)致死亡。除了呼吸道疾病以外，CF患者典型 地患有胃腸方面的問題和胰腺功能不全，如果不治療的話，會導(dǎo)致死亡。此外，大多數(shù)患有 囊性纖維化病的男性都不能生育，而患有囊性纖維化病的女性則生育力降低。與帶有兩個(gè) CF相關(guān)基因副本所導(dǎo)致的嚴(yán)重后果相反，攜帶有單個(gè)CF相關(guān)基因副本的個(gè)體表現(xiàn)出對霍 亂和腹瀉所致脫水的抵抗力增加——這也許解釋了 CF基因在人群中相對高頻率出現(xiàn)的原 因。CF染色體的CFTR基因的序列分析已經(jīng)揭示了多種致病性突變(Cutting，G. R.等 人(1990)Nature 346 :366_369 ；Dean, Μ.等人(1990)Cell 61 863 870 ；和 Kerem, B-S.等人(1989)Science245 1073-1080 ；Kerem, B-S 等人(1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA87 8447-8451)。迄今為止，已經(jīng)鑒別出了 1000種以上的致病性CF基因突變(http://www. genet, sickkids. on. ca/cftr/)。最常見的突變是在CFTR氨基酸序列的第508位上的苯丙 氨酸的缺失，通常被稱為AF508-CFTR。這種突變在大約70%的囊性纖維化病例中都會發(fā) 生，與嚴(yán)重的疾病有關(guān)。AF508_CFTR中第508位殘基的缺失妨礙了初生蛋白的正確折疊。這導(dǎo)致該突 變蛋白不能退出ER，和通過質(zhì)膜。結(jié)果，膜中存在的通道數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于表達(dá)野生型CFTR 的細(xì)胞中所觀察到的數(shù)量。除了運(yùn)輸受損以外，該突變還導(dǎo)致通道門控缺陷。這樣加起 來，膜中通道數(shù)量減少和門控缺陷導(dǎo)致通過上皮的陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)減少，導(dǎo)致離子和體液轉(zhuǎn) 運(yùn)出現(xiàn)缺陷(Quinton，P.M. (1990)，F(xiàn)ASEB J. 4 =2709-2727) 然而，研究已經(jīng)顯示出，盡 管比野生型CFTR少，膜中AF508-CFTR的數(shù)量減少是有用的。(Dalemans等人(1991)， Nature Lond. 354 :526_528 ；Denning 等人，出處同前；Pasyk 和 Foskett (1995)，J. Cell. Biochem. 270 12347-50)。除了 Δ F508-CFTR以外，其它導(dǎo)致運(yùn)輸、合成和/或通道門控缺 陷的致病性CFTR突變可以被向上或向下調(diào)節(jié)，以改變陰離子分泌，并改變疾病進(jìn)程和/或 嚴(yán)重性。盡管除了陰離子以外CFTR還轉(zhuǎn)運(yùn)許多種分子，但是顯然，這種作用(轉(zhuǎn)運(yùn)陰離子) 代表了跨越上皮細(xì)胞而轉(zhuǎn)運(yùn)離子和水的重要機(jī)制中的一個(gè)要素。其它要素包括上皮Na+通 道、ENaC、Na+/2C17K+共轉(zhuǎn)運(yùn)體、Na+-K+-ATP酶泵和基底外側(cè)膜K+通道，它們負(fù)責(zé)將氯離子 攝取到細(xì)胞中。這些要素一起起作用，通過它們在細(xì)胞內(nèi)的選擇性表達(dá)和定位來實(shí)現(xiàn)跨上皮細(xì) 胞的定向轉(zhuǎn)運(yùn)。通過存在于頂膜上的ENaC和CFTR與在細(xì)胞的基底外側(cè)表面上表達(dá)的 Na+-K+-ATP酶泵和Cl—通道之間的協(xié)調(diào)活性，發(fā)生了氯離子的吸收。氯離子從腔側(cè)的繼發(fā) 性主動轉(zhuǎn)運(yùn)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的氯離子蓄積，接著被動地通過Cl—通道離開細(xì)胞，導(dǎo)致向量轉(zhuǎn)運(yùn)。 Na+/2C17K+共轉(zhuǎn)運(yùn)體、Na+-K+-ATP酶泵和基底外側(cè)膜K+通道在基底外側(cè)表面上的排列和腔 側(cè)上的CFTR協(xié)調(diào)氯離子通過腔側(cè)上CFTR的排泄。由于水可能從不自己主動轉(zhuǎn)運(yùn)，因此它 依靠鈉和氯離子的大量流動所產(chǎn)生的微小的跨上皮滲透梯度來流過上皮。如上述所討論的，據(jù)認(rèn)為，AF508-CFTR中第508位殘基的缺失會妨礙初生蛋白正 確折疊，導(dǎo)致該突變蛋白不能退出ER和通過質(zhì)膜。結(jié)果，質(zhì)膜中存在的成熟蛋白熟量不足， 上皮組織內(nèi)的氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)顯著減少。事實(shí)上，這種ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體被ER機(jī)制進(jìn)行有缺陷的ER 加工的細(xì)胞現(xiàn)象已經(jīng)顯示出，其不僅是CF疾病的潛在基礎(chǔ)，而且是廣泛的其他獨(dú)立性和遺 傳性疾病的潛在基礎(chǔ)。ER機(jī)制可能發(fā)生故障的兩種方式是，與蛋白質(zhì)的ER出口的偶聯(lián)喪 失，引起降解，或者是這些有缺陷/錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)的ER蓄積[Aridor M，等人，Nature Med. , 5 (7), ρρ745_751 (1999) ；Shastry, B. S.,等人’ Neurochem. International, 43, ρρ 1-7(2003) ；Rutishauser, J.，等人，Swiss Med ffkly, 132, pp211_222 (2002) ；Morello, JP 等人，TIPS，紅，pp. 466-469 (2000) ；Bross P.，等人，Human Mut.，M，PP- 186-198 (1999)]。3-(6-(1-(2，2_ 二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊烯_5_基)環(huán)丙烷甲酰氨 基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的鹽形式作為CFTR活性的調(diào)節(jié)劑公開在國際PCT公開WO 2007056341 (將所述公開的全部內(nèi)容引入本文作為參考)中，因此，其可用于治療CFTR-介 導(dǎo)的疾病例如囊性纖維化病。然而，需要CFTR活性的調(diào)節(jié)劑例如化合物1的穩(wěn)定形式，其可用于調(diào)節(jié)哺乳動物細(xì)胞膜中CFTR的活性。為了便于使用和患者的舒適性，還需要可用于 向患者給予有效劑量的化合物1的化合物1的穩(wěn)定的口服制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及具有下述結(jié)構(gòu)的3-(6-(1-(2，2_ 二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的口服制劑
權(quán)利要求
含水制劑，包含3 (6 (1 (2，2 二氟苯并[d][1，3]間二氧雜環(huán)戊烯 5 基)環(huán)丙烷甲酰氨基) 3 甲基吡啶 2 基)苯甲酸、水和粘度劑。
2.權(quán)利要求1的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的特征在于，使用Cu Ka-射線 得到的X射線粉末衍射中的一個(gè)或多個(gè)峰在15. 2-15. 6度、16. 1-16. 5度和14. 3-14. 7度。
3.權(quán)利要求2的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的特征在于，一個(gè)或多個(gè)峰在15.4,16. 3 和 14. 5 度。
4.權(quán)利要求2的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 14. 6-15. 0 度。
5.權(quán)利要求4的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 14. 8 度。
6.權(quán)利要求4的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并d][l，3]間二氧雜環(huán)戊烯_5_基) 環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在17. 6-18. 0度。
7.權(quán)利要求6的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 17. 8 度。
8.權(quán)利要求6的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在16.4-16. 8 度。
9.權(quán)利要求8的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 16. 4-16. 8 度。
10.權(quán)利要求9的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 16. 6 度。
11.權(quán)利要求9的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 7. 6-8. 0 度。
12.權(quán)利要求11的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 7. 8 度。
13.權(quán)利要求11的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 25. 8-26. 2 度。
14.權(quán)利要求13的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 26. 0 度。
15.權(quán)利要求13的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 21. 4-21. 8 度。
16.權(quán)利要求15的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 21. 6 度。
17.權(quán)利要求15的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 23. I-23. 5 ^^^ο
18.權(quán)利要求17的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的進(jìn)一步的特征在于，一個(gè)峰在 23. 3 ^^ ο
19.權(quán)利要求1的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的特征在于，衍射圖譜基本上類 似于

圖1的衍射圖譜。
20.權(quán)利要求1的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的特征在于，衍射圖譜基本上類 似于圖2的衍射圖譜。
21.權(quán)利要求1的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸具有單斜晶系、PZ1Ai空間群和 下述晶胞大小a = 4. 9626(7) A α = 90°b = 12. 2994(18)人 β = 93. 938(9) °c = 33. 075(4) A Y = 90°。
22.權(quán)利要求1的制劑，其中所述粘度劑選自甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙甲基 纖維素、羥丙基纖維素、海藻酸鈉、聚丙烯酸酯、聚維酮、阿拉伯膠、瓜爾膠、黃原膠、西黃蓍 膠和硅酸鋁鎂。
23.權(quán)利要求1的制劑，其中所述粘度劑為甲基纖維素。
24.權(quán)利要求1的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的濃度為0. 5-20%重量。
25.權(quán)利要求1的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的濃度為2. 5-3. 5%重量。
26.權(quán)利要求1的制劑，其中粘度劑的濃度為0.1-2%重量。
27.權(quán)利要求1的制劑，其中粘度劑的濃度為0.5%重量。
28.權(quán)利要求1的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的濃度為0. 5-20%重量；且粘 度劑的濃度為0. 1-2%重量。
29.權(quán)利要求1的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸的濃度為2. 5-3. 5%重量；且粘 度劑的濃度為0.5%重量。
30.權(quán)利要求1的制劑，還包含表面活性劑。
31.權(quán)利要求30的制劑，其中所述表面活性劑為陰離子型表面活性劑、陽離子型表面 活性劑或非離子型表面活性劑。
32.權(quán)利要求31的制劑，其中所述表面活性劑為選自如下的陰離子型表面活性劑 十二烷基硫酸鹽、月桂基硫酸鹽、月桂基聚氧乙烯醚硫酸酯鹽、烷基苯磺酸鹽、丁酸鹽、己酸 鹽、辛酸鹽、癸酸鹽、月桂酸鹽、肉豆蔻酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、花生酸鹽、山崳酸鹽、肉豆 寇烯酸鹽、棕櫚油酸鹽、油酸鹽、亞油酸鹽、α “亞麻酸鹽、花生四烯酸鹽、二十碳五烯酸鹽、 芥酸鹽和二十二碳六烯酸鹽。
33.權(quán)利要求31的制劑，其中所述表面活性劑為選自如下的陽離子型表面活性劑 十六烷基三甲基溴化銨、西吡氯銨、聚乙氧基化牛脂胺、苯扎氯銨和芐索氯銨
34.權(quán)利要求31的制劑，其中所述表面活性劑為選自如下的非離子型表面活性劑聚 山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯65、聚山梨酯80、烷基聚(氧乙烯)、泊洛 沙姆、烷基多聚葡糖苷、辛基葡糖苷、癸基麥芽糖苷、脂肪醇、鯨蠟醇、油醇、椰油酰基單乙醇 胺、椰油?；掖及贰⒑鸵王；掖及贰?br> 35.權(quán)利要求30的制劑，其中所述表面活性劑為聚山梨酯80。
36.權(quán)利要求30的制劑，其中表面活性劑的濃度為0.1-10%重量。
37.權(quán)利要求30的制劑，其中表面活性劑的濃度為0.5%重量。
38.權(quán)利要求30的制劑，其中所述表面活性劑為0.5%重量的聚山梨酯80。
39.權(quán)利要求1的制劑，其還包含消泡劑。
40.權(quán)利要求39的制劑，其中所述消泡劑包括聚二甲基硅氧烷。
41.權(quán)利要求40的制劑，其中所述消泡劑為二甲基硅油。
42.權(quán)利要求39的制劑，其中消泡劑的濃度為0.01-0. 2%重量。
43.權(quán)利要求39的制劑，其中消泡劑的濃度為0.05%重量。
44.權(quán)利要求1的制劑，其還包含緩沖劑。
45.權(quán)利要求44的制劑，其中所述緩沖劑包括乙酸、硼酸、碳酸、磷酸、琥珀酸、蘋果酸、 酒石酸、檸檬酸、醋酸、苯甲酸、乳酸、甘油酸、葡糖酸、戊二酸或谷氨酸的鈉鹽、鉀鹽或銨鹽。
46.權(quán)利要求44的制劑，其中所述緩沖劑包括檸檬酸的鈉鹽、鉀鹽或銨鹽。
47.權(quán)利要求1的制劑，其還包含掩蔽劑和/或調(diào)味劑。
48.口服制劑，包含3-(6-(1-(2，2_ 二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊烯_5_基)環(huán)丙 烷甲酰氨基)-3_甲基吡啶-2-基)苯甲酸、水、甲基纖維素、聚山梨酯80和二甲基硅油。
49.權(quán)利要求48的制劑，其中3-(6-(1-(2，2_二氟苯并[d][l，3]間二氧雜環(huán)戊 烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的存在濃度為2. 5% 3. 5%重量。
50.權(quán)利要求49的口服制劑，其中甲基纖維素的存在濃度為0.5%重量。
51.權(quán)利要求50的口服制劑，其中聚山梨酯80的存在濃度為0.5%重量。
52.權(quán)利要求51的口服制劑，其中二甲基硅油的存在濃度為0.05%重量。
53.一種治療哺乳動物的囊性纖維化病的方法，其包括給予權(quán)利要求1的制劑。
54.權(quán)利要求53的方法，其中所述方法包括給予另外的治療劑。
55.權(quán)利要求54的方法，其中所述另外的治療劑選自溶粘蛋白劑、支氣管擴(kuò)張劑、抗生 素、抗感染劑、抗炎劑、除本發(fā)明化合物以外的CFTR調(diào)節(jié)劑、和營養(yǎng)劑。
56.試劑盒，其包括權(quán)利要求1的制劑和其使用說明。
全文摘要
本發(fā)明涉及3-(6-(1-(2，2-二氟苯并[d][1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基)環(huán)丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的制劑、其藥用包裝或試劑盒，及使用它們的治療方法。
文檔編號A61P25/14GK101998854SQ200880125110
公開日2011年3月30日 申請日期2008年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月7日
發(fā)明者A·凱沙瓦茲舒克里, C·永 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司