專利名稱：：一種用于治療頸椎病的中藥制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于治療頸椎病的中藥制劑，屬于中藥制藥
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：頸椎病是臨床常見病和多發(fā)病，近幾年頸椎病的發(fā)病率在逐年上升，且稱年輕化趨勢；嚴(yán)重的影響了人們的身體健康。2009年8月26日中國專利公報(bào)公開了由本申請人申報(bào)的名稱為"一種用于治療頸椎病的中成藥"，公開號(hào)為CN101513470的專利申請，組成發(fā)明所述中成藥的各味藥物原料的重量配比為當(dāng)歸20-2300個(gè)重量單位、川芎10-1100個(gè)重量單位、黃芪15-1900個(gè)重量單位、丹參10-1500個(gè)重量單位、雞血藤15-1800個(gè)重量單位、熟地20-3000個(gè)重量單位、伸筋草10-1100個(gè)重量單位、肉灰蓉15-1800個(gè)重量單位、骨碎補(bǔ)10-1500個(gè)重量單位、桑枝20-3000個(gè)重量單位、葛根15-1800個(gè)重量單位、續(xù)斷20-2300個(gè)重量單位，但是在實(shí)際的應(yīng)用過程中我們發(fā)現(xiàn)這種中成藥的效果還不夠理想。我們在原來的基礎(chǔ)上，通過大量的試驗(yàn)摸索，找到了最佳的組方配比，臨床藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)效果更為顯著，我們按常規(guī)工藝制成了膠囊劑、片劑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種療效更為顯著的治療頸椎病的中藥制劑。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的按照重量組分計(jì)算，本發(fā)明中藥組合物是由如下重量的原料按常規(guī)工藝制備而成當(dāng)歸225g、川芎105g、黃芪188g、丹參150g、雞血藤180g、熟地黃300g、伸筋草105g、肉蓯蓉180g、骨碎補(bǔ)150g、桑枝300g、葛根180g、續(xù)斷225g。(熟地黃和熟地是同種藥材，熟地黃簡稱熟地)。所述中藥組合物是膠囊劑、片劑。以膠囊劑為例，主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明原料重量配比當(dāng)歸225份、川芎105份、黃芪188份、丹參150份、雞血藤180份、熟地黃300份、伸筋草105份、肉灰蓉180份、骨碎補(bǔ)150份、桑枝300份、葛根180份、續(xù)斷225份(即當(dāng)歸225g、川芎105g、黃芪188g、丹參150g、雞血藤180g、熟地黃300g、伸筋草105g、肉灰蓉180g、骨碎補(bǔ)150g、桑枝300g、葛根180g、續(xù)斷225g)同原發(fā)明重量配比1:當(dāng)歸30份、川芎40份、黃芪20份、丹參10份、雞血藤20份、熟地30份、伸筋草25份、肉蓯蓉16份、骨碎補(bǔ)20份、桑枝30份、葛根20份、續(xù)斷25份及原發(fā)明重量配比2:當(dāng)歸1000份、川芎500份、黃芪1500份、丹參1200份、雞血藤1500份、熟地1500份、伸筋草900份、肉灰蓉1400份、骨碎補(bǔ)800份、桑枝1500份、葛根1300份、續(xù)斷1200份相比，藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有顯著提高。我們還對本發(fā)明制劑藥理作用進(jìn)行了驗(yàn)證，藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果顯著。主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)—、藥物1、原料a、本發(fā)明組當(dāng)歸225g、川芎105g、黃芪188g、丹參150g、雞血藤180g、熟地黃300g、伸筋草105g、肉蓯蓉180g、骨碎補(bǔ)150g、桑枝300g、葛根180g、續(xù)斷225g(按本發(fā)明當(dāng)歸225份、川芎105份、黃芪188份、丹參150份、雞血藤180份、熟地黃300份、伸筋草105份、肉蓯蓉180份、骨碎補(bǔ)150份、桑枝300份、葛根180份、續(xù)斷225份配比)。b、原發(fā)明l組當(dāng)歸240g、川芎320g、黃芪160g、丹參80g、雞血藤160g、熟地240g、伸筋草200g、肉蓯蓉128g、骨碎補(bǔ)160g、桑枝240g、葛根160g、續(xù)斷200g(按原發(fā)明重量配比l:當(dāng)歸30份、川芎40份、黃芪20份、丹參10份、雞血藤20份、熟地30份、伸筋草25份、肉蓯蓉16份、骨碎補(bǔ)20份、桑枝30份、葛根20份、續(xù)斷25份配比)。c、原發(fā)明2組當(dāng)歸160g、川芎80g、黃芪240g、丹參192g、雞血藤240g、熟地240g、伸筋草144g、肉蓯蓉224g、骨碎補(bǔ)128g、桑枝240g、葛根208g、續(xù)斷192g(按原發(fā)明重量配比2:當(dāng)歸1000份、川芎500份、黃芪1500份、丹參1200份、雞血藤1500份、熟地1500份、伸筋草900份、肉蓯蓉1400份、骨碎補(bǔ)800份、桑枝1500份、葛根1300份、續(xù)斷1200份配比)。2、a、b、c制法以上十二味，加水煎煮三次，第一次加10倍量水煎煮1.5小時(shí)，第二、三次各加8倍量水，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度1.151.25(50°C)的清膏，真空干燥，粉碎，加入淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，即得。二、試驗(yàn)及結(jié)果(—)對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄兼有，體重1822g。2、藥物本發(fā)明組、原發(fā)明1組和原發(fā)明2組劑量均為3.6g生藥/kg;乙醚；二甲苯。藥物在實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配置，灌胃給藥。實(shí)驗(yàn)方法昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重1822g，隨機(jī)分成4組，每組10只。對照組灌胃同體積的蒸餾水；本發(fā)明組、原發(fā)明l組和原發(fā)明2組灌胃給藥均為3.6g生藥/kg。連續(xù)給藥3d，每日l次，末次給藥lh后，用100X二甲苯0.04ml/只涂于右耳內(nèi)外兩面，左耳作為對照，lh后將小鼠乙醚麻醉處死，減下雙耳用8mm直徑大孔器分別在小鼠的同一部位打下圓耳片，稱重。計(jì)算出小鼠耳廓腫脹度(小鼠右耳片與左耳片的重量差)。進(jìn)行組間顯著性檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1表1對小鼠耳廓二甲苯所致腫脹的影響(x士s)分組動(dòng)物(只)劑量(g/kg)耳廓腫脹度(mg)對照組10一14.5±3.3原發(fā)明1組103.611.2±2.9*A原發(fā)明2組103.610.9±3.4*A本發(fā)明組103.68.1±2.3女女與對照組相比*P<0.05，**P<0.01;與本發(fā)明組比AP<0.05。結(jié)果表明本發(fā)明組、原發(fā)明l組和原發(fā)明2組可明顯抑制二甲苯所致小鼠耳廓的腫脹。本發(fā)明組小鼠耳廓腫脹度明顯低于對照組(P<0.01);本發(fā)明組與原發(fā)明1組、原4發(fā)明2組相比較，本發(fā)明對二甲苯所致小鼠耳廓的腫脹有顯著的抑制作用(P<0.05)，說明本發(fā)明的抗炎作用明顯優(yōu)于原發(fā)明1組和原發(fā)明2組。二、對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄兼有，體重1822g。2、藥物本發(fā)明組、原發(fā)明1組和原發(fā)明2組劑量均為3.6g生藥/kg;醋酸。藥物在實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配置，灌胃給藥。實(shí)驗(yàn)方法昆明小鼠40只，雌雄各半，體重1822g，隨機(jī)分成4組，每組10只。對照組灌胃同體積的蒸餾水；本發(fā)明組、原發(fā)明1組和原發(fā)明2組灌胃給藥均為3.6g生藥/kg。連續(xù)給藥7d，末次給藥lh后，每鼠均腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/只，記錄15min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)，并計(jì)算各組鎮(zhèn)痛百分率。進(jìn)行組間顯著性檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2表2對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>與對照組相比**P<0.01;與本發(fā)明組AP<0.05。結(jié)果表明本發(fā)明組、原發(fā)明l組和原發(fā)明2組對醋酸所致小鼠扭體具有明顯的抑制作用。本發(fā)明組與對照組相比有極顯著性的差異(P<0.01);本發(fā)明組與原發(fā)明l組、原發(fā)明2組相比較，本發(fā)明組對醋酸所致小鼠扭體具有顯著的抑制作用(P<0.05)，說明本發(fā)明的鎮(zhèn)痛作用明顯優(yōu)于原發(fā)明1組和原發(fā)明2組。三、對急性血瘀大鼠微循環(huán)障礙的影響實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物Wistar種大鼠，雌雄兼有，體重230250g。2、藥物本發(fā)明組、原發(fā)明1組和原發(fā)明2組劑量均為2.5g生藥/kg;鹽酸腎上腺素；戊巴比妥鈉。藥物在實(shí)驗(yàn)前用5%葡萄糖溶液配置，靜脈注射給藥。實(shí)驗(yàn)方法Wistar大鼠50只，雌雄各半，體重230250g，隨機(jī)分為5組，每組10只，除空白對照組外，其他4組動(dòng)物每只大鼠皮下注射2次0.1%鹽酸腎上腺素，每次0.08ml/100g，間隔4h，中間進(jìn)行1次冰水浴，溫度02t:，浸泡5min。如此處理后，動(dòng)物禁食不禁水12h，第2d進(jìn)行微循環(huán)實(shí)驗(yàn)?？瞻讓φ战M和模型對照組均給予5%葡萄糖溶液0.2ml/100g;本發(fā)明組、原發(fā)明1組和原發(fā)明2組給藥劑量均為2.5g生藥/kg。將動(dòng)物用戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉，沿腹白線縱形切開腹壁23cm，輕輕拉出回腸部，將腸系膜置于盛有臺(tái)式液恒溫灌流槽上。舌下靜脈注射給藥后通過微循環(huán)顯微鏡和圖象處理系統(tǒng)直接觀察腸系膜微循環(huán)變化。觀察給藥后微動(dòng)脈血流速度(BFVA)、微動(dòng)脈管徑(DA)、毛細(xì)血管數(shù)(N)的值。進(jìn)行組間顯著性檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3表3對急性血瘀大鼠微循環(huán)障礙的影響(x士s)分組動(dòng)物(只)劑量(g/kg)BFVA(um/s)DA(um)N(條)空白對照組10一240.87±10.754.95±0.529.0±1.06模型對照組10一213.08±10.524.03±0.416.4±1.09原發(fā)明1組102.5228.15±11.28**△4.58±0.39**△7.9±1.05**△原發(fā)明2組102.5227.09±10.37**△4.56±0.38*7.8±1.01*本發(fā)明組102.5238.71±10.16**4,93±0.32**8.9±1.01**與模型對照組相比**P<0.01，與本發(fā)明組比AP<0.05。結(jié)果表明本發(fā)明組、原發(fā)明組1和原發(fā)明組2組均能明顯改善急性血瘀大鼠微循環(huán)障礙，具有活血化瘀作用，與對照組相比有極顯著性差異(P<0.01)。本發(fā)明組與原發(fā)明1組、原發(fā)明2組相比較，本發(fā)明組對改善急性血瘀大鼠微循環(huán)障礙具有顯著的作用(P<0.05)，說明本發(fā)明的改善急性血瘀大鼠微循環(huán)的作用明顯優(yōu)于原發(fā)明l組和原發(fā)明2組。四、對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性病變的作用實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物Wistar種雄性大鼠，體重230250g。2、藥物本發(fā)明組、原發(fā)明1組和原發(fā)明2組劑量均為2.5g生藥/kg。藥物在實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配置，灌胃給藥。實(shí)驗(yàn)方法Wistar種雄性大鼠40只，體重230250g，隨機(jī)分為4組，每組10只，用容積毛細(xì)管法測量右后足跖容積，然后自右后足跖皮內(nèi)注射弗式完全佐劑0.05ml致炎，于致炎后第19d灌胃給藥物，對照組灌胃同體積的蒸餾水；本發(fā)明組、原發(fā)明1組和原發(fā)明2組灌胃給藥均為2.5g生藥/kg。連續(xù)給藥7d，每天1次，于致炎后第26d再測量右后足跖容積，以致炎前和致炎后第26d容積之差作為腫脹度。進(jìn)行組間顯著性檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4表4對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性病變的作用(x士s)分組動(dòng)物(只)劑量(g/kg)腫脹度(ml)腫脹抑制率(％)對照組10—0.57±0.12—原發(fā)明1組102.50.42±0.09**△26.3原發(fā)明2組102.50.40±0.08**△29.8本發(fā)明組102.50.32±0.08**43.9與對照組相比**P<0.01;與本發(fā)明組比AP<0.05。結(jié)果表明本發(fā)明組、原發(fā)明l組和原發(fā)明2組對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性病變具有明顯的抑制作用。本發(fā)明組與對照組相比有極顯著性差異(P<0.01);本發(fā)明組與原發(fā)明1組、原發(fā)明2組相比較，本發(fā)明組對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性病變具有顯著的抑制作用(P<0.05)，說明本發(fā)明治療佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性病變的作用明顯優(yōu)于原發(fā)明1組和原發(fā)明2組。我們還對本發(fā)明制劑藥理作用進(jìn)行了驗(yàn)證，以本發(fā)明膠囊劑為例，具體試驗(yàn)如下實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ陀^察本發(fā)明膠囊劑對頸腰椎病癥狀的治療作用。試驗(yàn)方法根據(jù)中醫(yī)對頸腰椎病機(jī)理的認(rèn)識(shí)，以及本發(fā)明膠囊劑的組成和功能主治，我們從活血化瘀、祛風(fēng)濕、抗炎、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)耐力方面進(jìn)行研究和探索。(1)通過觀察本發(fā)明膠囊劑對佐劑性關(guān)節(jié)炎模型大鼠足跖腫脹度的影響來研究其對頸椎病病因的治療作用。(2)通過對大鼠棉球肉芽腫及小鼠耳腫的影響來判斷本發(fā)明膠囊劑對慢性炎癥及急性炎癥的作用。(3)通過熱板試驗(yàn)和扭體試驗(yàn)驗(yàn)證本發(fā)明膠囊劑的鎮(zhèn)痛作用。(4)通過對正常小鼠耐缺氧的影響和對正常小鼠游泳時(shí)間的影響來評價(jià)本藥是否具有降低耗氧量及耐疲勞的作用。(5)通過對比顯微鏡下給藥前后小鼠耳廓特定部位毛細(xì)血管開放量，血流速度，血管輸入口徑及血管輸出口徑的變化，以及通過對急性血瘀模型大鼠體外血栓形成和血液流變性的影響來判斷本發(fā)明膠囊劑的活血化瘀作用。1.實(shí)驗(yàn)材料1.1儀器天平型號(hào)1012-PT，精密度為0.lg，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。WX-9型多部位微循環(huán)顯微儀，徐州光學(xué)儀器總廠生。全自動(dòng)血液流變儀北京中勤世帝科學(xué)儀器有限公司，規(guī)格型號(hào)LQ-R-80A編號(hào)20020380027A。SA-B型體外血栓形成血小板粘附二用儀國營江西省新元技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)，型號(hào)SA-B機(jī)號(hào)15，生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)贛醫(yī)械準(zhǔn)字(93)第221034號(hào)。1.2試劑弗式完全佐劑(FCA)美國SIGMA公司1.3動(dòng)物SD大鼠，ICR小鼠，SPF級(jí)，動(dòng)物合格證SCXK(陜)2007-001，動(dòng)物合格證SCXK(軍)2007-007，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心、第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.4受試藥物名稱本發(fā)明膠囊劑(按本發(fā)明實(shí)施例1制得)。來源陜西東泰制藥有限公司。中試產(chǎn)品批號(hào)20081004。臨床人用量一日3次，一次4粒。規(guī)格每粒0.5g。含量本發(fā)明膠囊劑每g相當(dāng)于4.576g生藥材。1.5陽性藥物潑尼松國藥準(zhǔn)字H33021207，規(guī)格2mg/片，批號(hào)080545，有效期至2011年4月，浙江仙琚制藥股份有限公司生產(chǎn)。吲哚美辛片(消炎痛)國藥準(zhǔn)字H61021414，規(guī)格25mg/片，批號(hào)08081201，有效期至2011年9月，西安迪賽生物藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。鹽酸普萘洛爾(心得安)國藥準(zhǔn)字H14021523，規(guī)格10mg/片，批號(hào)20070801，有效期至201007，山西臨汾健民制藥廠生產(chǎn)。人參蜂王漿衛(wèi)食健字(2000)第0093號(hào)，規(guī)格10ml/支，批號(hào)2009020606有效期至20110206，北京三九藥業(yè)生產(chǎn)。頸復(fù)康顆粒國藥準(zhǔn)字Z13022204，批號(hào)080515，有效期至2011年5月。規(guī)格5g/袋，承德頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司。多貝斯(羥苯磺酸鈣膠囊)國藥準(zhǔn)字H20000713，規(guī)格0.5g/粒，批號(hào)0801014，有效期20100129，西安利君制藥有限公司生產(chǎn)。復(fù)方丹參片國藥準(zhǔn)字Z44021003，規(guī)格0.3g/片，批號(hào)070105，有效期2009年12月，廣東省博羅先鋒藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)。2.實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果劑量設(shè)置及給藥方式本品為臨床經(jīng)驗(yàn)方，本發(fā)明膠囊劑經(jīng)小范圍志愿病人使用，其有效用量一日3次，一次4粒，每粒0.5g。本發(fā)明膠囊劑每g相當(dāng)于4.576g生藥材。在此基礎(chǔ)上，我們換算成動(dòng)物藥效劑量，進(jìn)行驗(yàn)證性試驗(yàn)研究。人體重按60kg計(jì)，臨床日用量為0.lg/kg。大鼠給藥量大劑量1.4g/kg，中劑量0.7g/kg，小劑量0.35g/kg，分別相當(dāng)臨床人用量的14倍、7倍、3.5倍。小鼠給藥量大劑量2.0/kg，中劑量1.Og/kg，小劑量0.5g/kg，分別相當(dāng)臨床人用量的20倍、10倍、5倍。2.1本發(fā)明膠囊劑對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠足跖腫脹的影響2.1.l實(shí)驗(yàn)方法按方法[2'3]將大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只。取大鼠，先測每只大鼠左右后肢的周長。每只鼠右后跖皮下注射弗式完全佐劑O.lml。然后分別給予本發(fā)明膠囊劑1.4、0.7、0.35g/kg(相當(dāng)于臨床用量的14、7、3.5倍)，大、中、小劑量均以lml/100g灌胃給藥；陽性藥物潑尼松量為0.03g/kg;頸復(fù)康顆粒量為2.33g/kg(相當(dāng)于臨床用量的7倍)；空白組給予純凈水lml/100g灌胃。連續(xù)給藥3天，觀察本發(fā)明膠囊劑對原發(fā)性足跖腫(右后足)的影響，用無彈性細(xì)繩繞足踝三圈測出致炎后4h、8h、12h、24h、48h、72h、96h、5d右后肢周長。繼續(xù)觀察繼發(fā)癥狀是否出現(xiàn)，如果出現(xiàn)對側(cè)(左側(cè))足爪紅腫，鼠尾結(jié)節(jié)等繼發(fā)癥狀，出現(xiàn)繼發(fā)癥狀當(dāng)日或次日，則連續(xù)給藥8天，觀察本品對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠足跖腫脹(左后足)繼發(fā)癥狀的治療作用，從第6d開始，測8、10、12、14、15、16、17、18、19、20、21、21、23d左后足周長，末次給藥后并對前肢、鼠尾、耳病發(fā)生率等繼發(fā)癥狀做相應(yīng)紀(jì)錄，全身病變按04級(jí)評分法[4]評價(jià)，根據(jù)未注射佐劑的其余3只肢體的病變具體積分，O分關(guān)節(jié)無紅腫；1分1個(gè)關(guān)節(jié)紅腫；2分23個(gè)關(guān)節(jié)紅腫；3分4個(gè)以上關(guān)節(jié)紅腫；4分波及全足腫脹，不能負(fù)重伴全身皮疹或尾部結(jié)節(jié)1分。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中對大鼠的體重進(jìn)行記錄，組間比較。給藥后的周長減去給藥前的周長為足腫脹度，組間比較，t檢驗(yàn)，結(jié)果如下。3.1.2試驗(yàn)結(jié)果①對原發(fā)癥狀的影響每只鼠右后跖皮下注射弗式完全佐劑0.1ml后，連續(xù)給藥3天，用無彈性細(xì)繩繞足踝三圈測出致炎后4h、8h、12h、24h、48h、72h、96h、5d右后肢周長。結(jié)果見表1、圖1、可以看出，與模型組比較，陽性藥物潑尼松、頸復(fù)康以及本發(fā)明膠囊劑大、中、小劑量均能抑制弗式完全佐劑所致的大鼠原發(fā)性足跖腫脹，作用時(shí)間從致炎后4h-5d。②對繼發(fā)癥狀的影響于致炎后第12天起，觀察到大鼠致炎對側(cè)足爪出現(xiàn)腫脹，繼發(fā)癥狀開始出現(xiàn)，于致炎后第14d大鼠基本出現(xiàn)左側(cè)后肢腫脹，前肢、鼠尾、耳病發(fā)生率等繼發(fā)癥狀也相繼出現(xiàn)，表明模型成立。于第15d開始給藥，連續(xù)給藥8天，以觀察本發(fā)明膠囊劑對繼發(fā)病變的治療作用，每天給藥后1小時(shí)用無彈性的細(xì)繩繞足踝三圈測出周長，末次給藥后并對前肢、鼠尾、耳病發(fā)生率等繼發(fā)癥狀做用積分法相應(yīng)紀(jì)錄全身病變評分。結(jié)果見表2、表3及圖2、圖3，可以看出，與模型組比較，陽性藥物潑尼松、頸復(fù)康及本發(fā)明膠囊劑大、中、小劑量都能抑制大鼠的繼發(fā)性足跖腫脹，降低全身病變評分。表1本發(fā)明膠囊劑對原發(fā)性足跖腫的周長影響(X±S)組別動(dòng)物數(shù)(只)致炎前周長(mm)足腫脹度=給藥后足周長一給藥前足周長(mm)致炎后4h8h12h模型組1021.95±1.453.43±0.813.83±0.874.18±0.75頸復(fù)康1021.98±1.552.52±0.69*2.62±0.76*2.77±0.73*潑尼松1022.08±1.431.82±0.76**1.75±0.54**1.60±0.69**大劑量1022.03±1.432.02±0.77*2.15±0.82*2.20±0.63*中劑量1021.98±1.422.22±0.65*2.35±0.81*2.47±0.68*小劑量1022.07±1.432.43±0.73*2.55±0.79*2.75±0.72*組別足腫脹度=給藥后足周長_給藥前足周長(mm)24h48h72h96h5d模型組4.38±0.784.98±0.815.33±0.824.68±0.632.65±0.76頸復(fù)康2.80±0.78*3.12±0.59*2.87±0.57*2.25±0.54*1.37±0.48*潑尼松1.47±0.691.40±0.77**1.25±0.71**0.90±0.65**0.60±0.57**大劑量2.12±0.552.22±0.56*1.87±0.46*1.45±0.55*0.78±0.55*中劑量2.32±0.632.47±0.64*2.10±0.57*1.60±0.57*1.07±0.66*小劑量2.58±0.712.95±0.59*2.48±0.68*1.88±0.54*1.13±0.57*與模型組相比較*p<0.05，**p<0.01圖1本發(fā)明膠囊劑對原發(fā)性足跖腫周長的影響表2本發(fā)明膠囊劑對繼發(fā)性足跖腫的周長影響(X±S)9后足周長一給藥前足周長(mm)組別動(dòng)物數(shù)(只)，、(mm)致炎后6d8d10d12d模型組1020.08±1.471.22±0.331.79±0.372.73±0.513.18±0.79頸復(fù)康1022.16±1.491.25±0.411.81±0.292,71±0.533.16±0.94潑尼松1022.18±1.451.21±0.281.87±0.372,79±0.493.19±0.76大劑量1022.10±1.431.25±0.291.85±0.402.78±0.393.18±0.83中劑量1022.17±1.441.20±0.241.80±0.382.80±0.413.25±0.79小劑量1022.02±1.381.20±0.291.80±0.292.78±0.673.23士0.73組別致炎前周長足腫脹度-給藥后足周長一給藥前足周長(mm)(mm)14d15d16d17d18d模型組20.08±1.474.28±0.784.98±0.885.46±0.845.63±0.795.73±0,89頸復(fù)康22.1fr±1.494.41±0.934.66±0.514.21±0.85**4.06±0.87**4.16±0.99**潑尼松22.18±1.454.49±0.81楊±0.67*3.53±0.64**3.34±0.59**3.29±0.66**大劑量22.10士1.434.38±0.754.53±0.664.08±0.58**3.93±0,42**3.96±0.67**中劑量22.17±1.444.35±0.624.50±0.704.10±0.65**3.99±0.53**3.94±0,75**小劑量22.02±1.384.30±0.674.50±0.664.20±0.56**4.05±0.35**4.00±0.65**組別致炎前周長足腫脹度-給藥后足周長一給藥前足周長(mm)(mm)19d20d21d22d23d模型組20.08±1.475.93±0.896.08±0.986.23±0.945.33±1.024.68±0.82頸復(fù)康22.16±1.494.26±1.14**4.41±1.04**4.51±0.95**3.91±0.81**3.46±0.65**潑尼松22.18±1.453.34±0.73**3.39±0,96**3.49±0.72**3,29±0.46**3.24±0.38**大劑量22.10±1.434.11±0.79**4.27±0.93**4.37±0.85**3.77±0.42**3.38土0.56"中劑量22.17±1.444.24±0.83**4.39±0.98**4.54±0.89**4.09±0.49**3.64±0.51*小劑量22.02±1.384.29±0.85**4.53±0.94**4.68±0.81**4.14±0.63**3.74±0.62*與模型組相比較*p<0.05，**p<0.01圖2本發(fā)明膠囊劑對繼發(fā)性足跖腫的周長影響(見說明書附圖2)表3對大鼠全身病變的評分動(dòng)物數(shù)(只)評分P值IB1.60±0.69100.90±0.74P<0.05100.40±0.52P〈0.01100.60±0.69P〈0.01100.80±0.63P<0.05100.90±0.74P>0.05圖3對佐劑關(guān)節(jié)炎大鼠全身病變的評分(見說明書附圖3)③對體重的影響在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中對大鼠的體重進(jìn)行記錄，組間比較。結(jié)果見表4及圖4，可以看出，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中各組大鼠的體重均有增加，與模型組比較，本發(fā)明膠囊劑大劑量、中劑量、小劑量及頸復(fù)康體重增加較多，而潑尼松組大鼠體重增加較少，但無顯著性差異。組康松量量量型復(fù)尼劑劑劑模頸潑大中小表4對大鼠體重的影響(X±3)動(dòng)物救組別，^，給藥前體重藥后l周藥后2周藥后3周注與模型組相比，各組p>0.05圖4灌胃本發(fā)明膠囊劑對大鼠體重的影響(見說明書附圖4)小結(jié)對大鼠原發(fā)性足跖腫脹，本發(fā)明膠囊劑大、中、小劑量1.4、0.7、0.35g/kg及頸復(fù)康、潑尼松均表現(xiàn)抑制作用，其中潑尼松最顯著；對繼發(fā)性足跖腫脹，本發(fā)明膠囊劑大、中、小劑量及頸復(fù)康、潑尼松也表現(xiàn)明顯的抑制作用，并且本發(fā)明膠囊劑大、中、小劑量呈一定的劑量關(guān)系；對體重影響，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中各組大鼠的體重均有增加，與模型組比較，本發(fā)明膠囊劑大劑量、中劑量、小劑量及頸復(fù)康體重增加較多，而潑尼松組大鼠體重增加較少，但無顯著性差異提示本發(fā)明膠囊劑對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠原發(fā)性、繼發(fā)性足跖腫脹的有抑制作用，且呈劑量關(guān)系，起效劑量為0.35g/kg。2.2本發(fā)明膠囊劑對大鼠棉球肉芽腫的影響按方法[4]取SD大鼠60只，體重80-100g，適應(yīng)性喂養(yǎng)7天。隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半，對照組，陽性藥潑尼松組，本發(fā)明膠囊劑大、中、小三個(gè)劑量組。造模各組大鼠均用乙醚麻醉，剪去大鼠腋下處毛，用碘酒及酒精消毒后，作一橫切口，直徑約為10mm，用血管鉗將皮膚組織分離至肌筋膜，然后用鑷子輕輕拉開切口，將20mg消毒的棉球埋入切口，最后用0號(hào)線縫合二針，以防脫落，手術(shù)當(dāng)日肌肉注射青霉素鈉4000單位，連續(xù)4天，以防感染。給藥手術(shù)第二日開始給藥，本發(fā)明膠囊劑1.4、0.7、0.35g/kg，陽性藥潑尼松量為3.5mg/kg，對照組給予純凈水，均以lml/100g灌胃給藥或水，連續(xù)7天，第8天，將大鼠烏拉坦麻醉，頸動(dòng)脈放血處死，用手術(shù)剪刀和鑷子把肉芽組織剝離，細(xì)心地將附在肉芽上的血痂和肌筋膜分離干凈，用電子天平稱重，所得重量減去原棉球重量20mg，即得肉芽腫濕重，收集肉芽腫置6(TC的烘箱中2小時(shí)取出，在干燥器中冷卻后，稱量所得重量減去原棉球重量，即得肉芽腫干重。組間比較，t檢驗(yàn)。結(jié)果見表5。表5本發(fā)明膠囊劑對大鼠棉球肉芽腫形成的影響(X±S)132.6±12.91132.4±11.64132.4±13.21129.7±12.15133.4土10.86132.4±12.08162.1±17,79162.8±14.24162.5±15.47160.6±18.98165.9±16.66164.4±14.25l肌1±15.84183.3±14.67177.5±15.64182.8±18.95185.4±16.89184.1±16.26195.6±18.63206.3±18.54195.9±15.52207.4±22.56211.0±20.72207.3±17.61組康松量量量型復(fù)尼劑劑劑模頸潑大中小11<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注與對照組比較*p<0.05，**p<0.01由表5可見，與對照組比較，本發(fā)明膠囊劑1.4、0.7、0.35g/kg劑量組可明顯減輕大鼠棉球肉芽組織的濕重及干重，對大鼠棉球肉芽組織形成有明顯抑制作用。提示本品對慢性炎性增生有一定的抑制作用。起效劑量為小劑量O.35g/kg。2.3本發(fā)明膠囊劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響按文獻(xiàn)^方法，取健康ICR小鼠50只，體重18-22g，適應(yīng)性喂養(yǎng)5天。隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半。分別為對照組，灌胃去離子水10ml/kg，陽性對照組，灌胃潑尼松5mg/kg，本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg，各組灌胃體積均為10ml/kg，給藥后60min。給小鼠左耳前后兩面，涂巴豆油約O.lml，右耳做正常對照。4h后，將小鼠拉頸處死，剪下雙耳，用9mm打孔器在左右耳同一位置打孔，在精密扭力天平上稱重，左耳重量減去右耳重量即為該鼠的腫脹度，腫脹度除以右耳重量為小鼠耳腫的腫脹率，組間比較，t檢驗(yàn)。結(jié)果見表6。表6本發(fā)明膠囊劑對小鼠耳腫脹的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注與對照組比較*p<0.05，**P<0.01從表6可以看出，本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg劑量組能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳腫。提示本品對急性炎性有一定的抑制作用。起效劑量為小劑量0.5g/kg。2.4本發(fā)明膠囊劑對熱板引起小鼠舔足的影響按方法[6]取ICR小鼠70只，雌性，體重18g-22g，預(yù)選合格小鼠。將水浴槽加滿水，使水面接觸熱板，水溫控制50±0.5°C。將小鼠放于熱板上，小鼠舔后足的時(shí)間為痛閾值，選取痛閾值在5-30秒范圍內(nèi)的小鼠62只，隨機(jī)分為五組，對照組、陽性組每組13只，本發(fā)明膠囊劑三個(gè)劑量組每組12只。給藥前測痛閾值2次，取平均值為給藥前痛閾值。對照組灌胃純凈水0.lml/10g，陽性組灌胃消炎痛20mg/kg，其他三組分別灌胃本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg，各組灌胃體積均為10ml/kg，測給藥后30、60min小鼠痛閾值，以給藥后的痛閾值減去給藥前的痛閾平均值為痛閾延長值，組間比較，t檢驗(yàn)。結(jié)果見表7。從表7可見，與對照組比較，本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg劑量組能延長小鼠熱板引起小鼠舔足的反應(yīng)時(shí)間，即痛閾延長值明顯高于對照組。提示本品具有鎮(zhèn)痛作用，起效劑量為小劑量O.5g/kg。表7本發(fā)明膠囊劑劑對小鼠熱板舔足時(shí)間的影響(X士S)n=10<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注與對照組比較*p<0.05，**P<0.013.5本發(fā)明膠囊劑對冰醋酸所致正常小鼠扭體反應(yīng)的影響按方法[6]取小鼠50只，雄性，體重18g-22g，適應(yīng)性喂養(yǎng)5天，隨機(jī)分為5組，每組10只，對照組，陽性藥消炎痛組，本發(fā)明膠囊劑大、中、小三個(gè)劑量組。對照組灌胃純凈水0.lml/10g，陽性組灌胃消炎痛20mg/kg，其他三組分別灌胃本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg，各組灌胃體積均為10ml/kg，1小時(shí)后，每鼠腹腔注射0.6%冰醋酸0.lml/10g。記錄給予冰醋酸至出現(xiàn)第l次扭體的時(shí)間(潛伏期)和20分鐘內(nèi)扭體的次數(shù)，不發(fā)生扭體的小鼠或潛伏期超過10分鐘的，其潛伏期按10分鐘計(jì)。見表8。表8本發(fā)明膠囊劑對小鼠扭體法鎮(zhèn)痛作用的比較(X±S)組別齊u量動(dòng)物數(shù)第l次扭體反應(yīng)潛伏期min20min內(nèi)扭體次數(shù)對照組10ml/kg101.94±0.6941.90±10.42消炎痛組20mg/kg106.18±1.78**17.00±4.03**本發(fā)明膠囊劑大劑量2.0g/kg105.27±1.22**24.00±6.31**本發(fā)明膠囊劑中劑量l.Og/kg104.22±1.78**32.50±8.41*本發(fā)明膠囊劑小劑量0.5g/kg103.12±1.09*37.70±7.86注與對照組相比較*p<0.05，**p<0.01由表8可見，與對照組比較，本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg劑量組能明顯延長小鼠扭體潛伏期，2.0、1.0、0.5g/kg劑量組抑制小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，且呈劑量關(guān)系。提示本品具有鎮(zhèn)痛作用，起效劑量為小劑量0.5g/kg。3.6本發(fā)明膠囊劑對正常小鼠耐缺氧的影響按方法[7]取小鼠50只，雄性，體重18g-22g，適應(yīng)性喂養(yǎng)5天，隨即分為五組，對照組，陽性藥組，本發(fā)明膠囊劑大、中、小三個(gè)劑量組。對照組灌胃蒸餾水，陽性組灌胃心得安20mg/kg，其他三組分別灌胃本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg，每日一次，各組灌胃體積均為10ml/kg，連續(xù)給藥5天，心得安第5天給藥一次。末次給藥或水1小時(shí)后，測小鼠耐缺氧生存時(shí)間(min)。試驗(yàn)用廣口瓶5只，容積250ml，每瓶內(nèi)加入鈉石灰70g，上面加一磨口瓶蓋，蓋好瓶蓋并計(jì)時(shí)，以小鼠呼吸停止為指標(biāo)，記錄小鼠生存時(shí)間(min)，各組交叉進(jìn)行。組間比較，t檢驗(yàn)，結(jié)果見表9。表9本發(fā)明膠囊劑對正常小鼠耐缺氧能力的影響(X±S)組別劑量動(dòng)物數(shù)生存時(shí)間(min)P值對照組10ml/kg1018.89±5.84心得安組20mg/kg1033.95±5.39PO.01本發(fā)明膠囊劑大2.Og/kg1030.60±5.29P<0.01劑量本發(fā)明膠囊劑中1.Og/kg1025.04±5.35P<0.05劑量本發(fā)明膠囊劑小0.5g/kg1022.59±5.38P>0.05劑量由表9可見，與對照組比較，本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0g/kg劑量組能明顯延長小鼠在缺氧條件下的存活時(shí)間。143.7本發(fā)明膠囊劑對正常小鼠游泳時(shí)間的影響按方法[8]取小鼠50只，雌性，體重18g-22g，適應(yīng)性喂養(yǎng)7天，隨機(jī)分為五組，對照組，陽性組，本發(fā)明膠囊劑大、中、小三個(gè)劑量組。正常對照組灌胃蒸餾水，陽性對照組人參蜂王漿用量為20ml/kg，其他三組分別給予本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg，每日一次，各組灌胃體積均為10ml/kg，連續(xù)給藥5天。末次給藥或水后1小時(shí)，把小鼠放入25t:水中游泳，尾部負(fù)重2g，每鼠一池，以小鼠因疲勞而頭部沒入水中3次為指標(biāo)，記錄游泳時(shí)間(min)。組間比較，t檢驗(yàn)，結(jié)果見表10。由表10可見，與對照組比較，本發(fā)明膠囊劑2.0g/kg劑量組能明顯延長小鼠游泳時(shí)間，提示本發(fā)明膠囊劑具有抗疲勞作用。表10本發(fā)明膠囊劑對正常小鼠耐疲勞能力的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>3.8本發(fā)明膠囊劑對小鼠耳廓微循環(huán)的影響試驗(yàn)方法參考文獻(xiàn)[9]方法，選健康ICR小鼠50只，體重20±2g，隨機(jī)分成5組，每組10只，早$各半，將小鼠用1%戊巴比妥鈉0.05ml/10g腹腔注射麻醉(嚴(yán)格消毒)，腹向下固定在小鼠觀察臺(tái)上，使耳廓平展在耳托上，并選定耳邊界某處用苦味酸標(biāo)記，在耳托上和耳廓表面滴加少許香柏油，將觀察臺(tái)置于BL-420生物機(jī)敏實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)顯微載物臺(tái)上、調(diào)節(jié)泛光源適當(dāng)亮度，在50倍鏡下觀察，啟動(dòng)微循環(huán)軟件、調(diào)整鏡下視野，使由攝像機(jī)傳輸?shù)诫娔X屏幕上的圖像清晰，在標(biāo)記點(diǎn)附近選定某一邊界，畫出血管分布草圖(以備下次觀測時(shí)找到原測血管部位)，測量其毛細(xì)血管開放量，血流速度(微米/秒)，血管輸入口徑(微米)及血管輸出口徑(微米)，然后即日開始給藥，連續(xù)給藥3日，第一組為正常對照組灌胃去離子水O.lml/10g，第二組灌胃多貝斯0.25g/kg，相當(dāng)于人臨床用量10倍，第三至五組分別灌胃本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg。第3次給藥后，領(lǐng)UlO、20、30min小鼠原部位的血管開放量、血流速度、血管輸入口徑及血管輸出口徑，減去給藥前的相應(yīng)值即為血管開放量變化值，血流速度變化值，血管輸入及輸出口徑變化值，組間對比，t檢驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果見表11、12、13、14。表11可見，本發(fā)明膠囊劑2.Og/kg，在10-30min可使小鼠耳廓毛細(xì)血管開放數(shù)量增多；表12可見，本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0g/kg在10-30min、本發(fā)明膠囊劑0.5g/kg在30min，可使小鼠耳廓毛細(xì)血管血流速度加快；表13、14可見，本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg，在10-30min可使小鼠耳廓毛細(xì)血管輸入、輸出口徑增大。提示本品有一定的改善微循環(huán)作用，起效劑量0.5g/kg。表11本發(fā)明膠囊劑對小鼠毛細(xì)血管開放量的影響n=10X士SD給藥后不同時(shí)間(min)變化值組別g/kg給藥前^^^表12本發(fā)明膠囊劑對小鼠毛細(xì)血管血流速度的影響n=10X士SD給藥后不同時(shí)間(min)變化值組別g/kg給藥前^^~~表13本發(fā)明膠囊劑對小鼠毛細(xì)血管輸入口徑的影響n=10X士SD^iS'給藥后不同時(shí)間(min)變化值組別g/kg給藥前^^表14本發(fā)明膠囊劑對小鼠毛細(xì)血管輸出口徑的影響n=10X士SDiS給藥后不同時(shí)間(min)變化值組別g/kg給藥前1020302.5±0.712.6±0.522.9±0.742.9±0.743.0±0.820.1±0.741.0±0.47**0.8±0.63*0.6±0.520.5±0.530.3±0.821.7±0.48**1.2±0.63*0.8±0.420.6±0.700.4±0.702.2±0.63**1.4±0.70**0.8±0.420.6±0.701282.5±28.601285.0±20.001286.0±15.951291.0±14.301294.5±12.3414.5±19.539.0±17.13**36.3土16.37*33.3±17.71*30.5±16.1316.5±16.6744.5±15.71**43.5±16.63**34.6±14.67*31.1±15.6917.0±17.8347.5±14.77**45.8壬17.15**34.8±14.39*32.8±15.20*109.1±7.60107.1±7.62106.2±9.83108.6±6.00110.7±7.016.1±7.3921.0±8.50**19.0±8.43**17.3±7.06**16.7±7.13*8.8±8.1522.7±9.21**20.8±9.58**18.8±6.51**17.5±7.07*9.1±7.6423.7±8.50**21.1±9.79**20.3±6.29**19.1±6.72**111.3±10.16108.5±8.22106.4±12.81105.6±5.23110.0±7.307.8±7.8720.5±6.64**16.8±7.97*16.3±6.85*15.6±6.64*8.2±7.8923.2±6.58**20.3±9.59**18.3土6.46**17.3±6.31*8.3±7.7324.0±5.52**22.1±8.09**19.2±6.03**18.6±7.00**52o1斯遣遣懂w貝劑劑劑對多大中小52oo組、斯糧糧嚴(yán):〖貝劑劑劑對多大中小52oo眉斯還還嚴(yán)對多大中丄組、斯糧糧糧對多大中小16注與對照組比較*P<0.05，**P<0.013.9本發(fā)明膠囊劑對急性血瘀模型大鼠體外血栓形成和血液流變性的影響試驗(yàn)方法參考文獻(xiàn)方法取健康大鼠60只，早性，體重280_320g，隨機(jī)分為六組，每組10只。第一組正常對照組，灌胃去離子水10ml/kg，第二組血瘀模型對照組，每天灌胃去離子水10ml/kg，第三組陽性對照組，灌胃復(fù)方丹參片0.63g/kg(相當(dāng)人用量14倍)，第四-第六組為本發(fā)明膠囊劑大、中、小劑量組，分別每天灌胃1.4、0.7、0.35g/kg，給藥體積均為10ml/kg，連續(xù)給藥7天，末次給藥后30分鐘，除正常對照組外，模型組、陽性對照組、大、中、小劑量組均皮下注射鹽酸腎上腺素0.15mg/只，注射2小時(shí)后，除正常對照組外，以上各組大鼠均浸入Ot:冰水中5min，然后擦干大鼠毛皮上的水，2小時(shí)后除正常對照組外，其余各組再次皮下注射鹽酸腎上腺素0.15mg/只，禁食不禁水18小時(shí)，用10%烏拉坦lml/100g腹腔注射麻醉，分離頸總動(dòng)脈，插管取血5ml，使血自然流入含少量肝素鈉的試管，邊流邊搖，使血抗凝，在LQ-R-80A全自動(dòng)血液流變儀上檢測，室溫22°C，樣品恒溫37°C。另取1.8ml血液，使血自然流入特制的預(yù)先硅化過的聚乙烯管中，固定在SA-B型體外血栓形成血小板粘附二用儀上，旋轉(zhuǎn)10分鐘，迅速取出血栓，在濾紙上吸干血液，用刻度尺量取血栓長度，用電子天平稱血栓濕重，然后放到60°C的烤箱中烘干，再用電子天平稱血栓干重。組間比較，t檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Exce12003。試驗(yàn)結(jié)果見表15、表16、表17、表18、表19。表15對大鼠體外血栓形成的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注模型組與對照組比較AP<0.05;△△P<0.01給藥組與模型組比較*P<0.05;**P<0.01(表16-19同)表15可見，模型組與正常對照組比較，大鼠血栓長度、血栓濕重和干重顯著增加(P<0.01)，模型成立；本發(fā)明膠囊劑1.4、0.7、0.35g/kg及復(fù)方丹參片，可使大鼠血栓長度顯著減少、血栓濕重和干重顯著減輕(P<0.01，P<0.05)。表16對急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響(X±S)組別動(dòng)物數(shù)全血粘度值全血粘度值全血粘度值血漿粘度(mpa.s)(只)(200rapa.s)(30mpa.s)(3mpa.s)空白組107.07±0.939.02±0.6815.06±1.221.79±0.03模型組108.35土0.72厶a10.49±U5aa17.10±1.34aa1.84±0.07a陽性組107.46±0.71*9.62±0.38*16.65±0.841.81±0.04大劑量107.36±1.07*9.15±1.17*15.76±1.21*1.81±0.02中劑量107.38±U6*9.21±0.84*16.07±1.371.80±0.03小劑量107.52±0.89*9.19±0.88*16.40土0.841.81±0.02表17對急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響(X±S)組別動(dòng)物數(shù)紅細(xì)胞壓積血沉血紅蛋白紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(只)(mm/H)(g/L)(lel2/L)空白組100.59±0.021.80±0.79185.00±15.256.67±0.57模型組100.69土0.02a厶2.80士0.79aa197.30±12.687.06±0.33陽性組100.64±0.03**2.20±0.42*192.00±10.396.91±0.37大劑量100.61±0.02**2.00±0.82*187.60±10.696.81±0.41中劑量100,62±0.03**2.30±0.67186.10±11.846.75±0.51小劑量100.64±0.05**2.50±0.85186.70±10.246.78±0.44表18對急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響(X±S)組別動(dòng)物數(shù)全血高切全血中切全血低切紅細(xì)胞剛性(只)還原粘度還原粘度還原粘度空白組105.25±0.637.11±0.4912.98±1.135.25±0.63模型組105.22±0.516.91±0.8012.20±0.935.22±0.51陽性組105.16±0.716.76±0.5212.81±0.545.16±0.71大劑量105.54±0.647.07±0.7713.05±0.995.54±0.64中劑量105.47±0.666.74±0.5813.10±1.475.47±0.66小劑量105.15±0.566.67±0.5512.82±0.935.15±0.5618表19對急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>從表16-19可見，模型組全血粘度值(200mpa.s)、全血粘度值(30mpa.s)、全血粘度值(3mpa.s)、血漿粘度(mpa.s)、紅細(xì)胞壓積、血沉、血沉方程K值、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞電泳時(shí)間(s)均明顯高于空白對照組，試驗(yàn)?zāi)Ｐ统闪?。?.4g/kg劑量全血粘度值(200mpa.s)、全血粘度值(30mpa.s)、全血粘度值(3mpa.s)、紅細(xì)胞壓積、血沉、血沉方程K值、紅細(xì)胞聚集指數(shù)均明顯低于模型組；0.7g/kg劑量全血粘度值(200mpa.s)、全血粘度值(30mpa.s)、全血粘度值(3mpa.s)、紅細(xì)胞壓積、血沉方程K值均明顯低于模型組；0.35g/kg劑量全血粘度值(200mpa.s)、全血粘度值(30mpa.s)、紅細(xì)胞壓積、血沉方程K值均明顯低于模型組。以上結(jié)果提示，本品有改善血液粘稠度作用。提示本品有一定的體外抗血栓以及改善血液流變形作用，起效劑量0.35g/kg。[OMO]3.綜合評價(jià)本品為治療頸椎病的中藥復(fù)方，有臨床人用歷史，臨床人用量一日3次，一次4粒。規(guī)格每粒0.5g。成品每g相當(dāng)于4.576g生藥材。結(jié)果1)本發(fā)明膠囊劑對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠足跖腫脹的影響對大鼠原發(fā)性足跖腫脹，本發(fā)明膠囊劑1.4、0.7、0.35g/kg表現(xiàn)抑制作用；對繼發(fā)性足跖腫脹，本發(fā)明膠囊劑1.4、0.7、0.35g/kg也表現(xiàn)明顯的抑制作用，提示本發(fā)明膠囊劑對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠原發(fā)性、繼發(fā)性足跖腫脹的有抑制作用，且呈劑量關(guān)系。2)對大鼠棉球肉芽腫的影響本發(fā)明膠囊劑1.4、0.7、0.35g/kg可明顯減輕大鼠棉球肉芽組織的濕重及干重，對大鼠棉球肉芽組織形成有明顯抑制作用，提示本品對慢性炎性增生有一定的抑制作用。3)對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳腫，提示本品對急性炎性有一定的抑制作用。4)本發(fā)明膠囊劑對熱板引起小鼠舔足的影響本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg劑量組能延長小鼠熱板引起小鼠舔足的反應(yīng)時(shí)間，即痛閾延長值明顯高于對照組，提示本品具有鎮(zhèn)痛作用。5)本發(fā)明膠囊劑對冰醋酸所致正常小鼠扭體反應(yīng)的影響本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg劑量組能明顯延長小鼠扭體潛伏期并抑制小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，且呈劑量關(guān)系，提示本品具有鎮(zhèn)痛作用。6)本發(fā)明膠囊劑對正常小鼠耐缺氧的影響本發(fā)明膠囊劑2.0、1.Og/kg劑量組能明顯延長小鼠在缺氧條件下的存活時(shí)間。7)本發(fā)明膠囊劑對正常小鼠游泳時(shí)間的影響本發(fā)明膠囊劑2.0g/kg劑量組能明顯延長小鼠游泳時(shí)間，提示本發(fā)明膠囊劑具有抗疲勞作用。8)本發(fā)明膠囊劑對小鼠耳廓微循環(huán)的影響本發(fā)明膠囊劑2.0g/kg，在10-30min可使小鼠耳廓毛細(xì)血管開放數(shù)量增多；本發(fā)明膠囊劑2.0、1.Og/kg在10-30min、本發(fā)明膠囊劑0.5g/kg在30min，可使小鼠耳廓毛細(xì)血管血流速度加快；本發(fā)明膠囊劑2.0、1.0、0.5g/kg，在10-30min可使小鼠耳廓毛細(xì)血管輸入、輸出口徑增大，提示本品有一定的改善微循環(huán)作用。9)對急性血瘀模型大鼠體外血栓形成和血液流變性的影響本發(fā)明膠囊劑1.4、0.7、0.35g/kg，可使大鼠血栓長度顯著減少、血栓濕重和干重顯著減輕。本發(fā)明膠囊劑1.4g/kg可使全血粘度值(200mpa.s)、全血粘度值(30mpa.s)、全血粘度值(3mpa.s)、紅細(xì)胞壓積、血沉、血沉方程K值、紅細(xì)胞聚集指數(shù)均明顯低于模型組；0.7g/kg可使全血粘度值(200mpa.s)、全血粘度值(30mpa.s)、全血粘度值(3mpa.s)、紅細(xì)胞壓積、血沉方程K值均明顯低于模型組；0.35g/kg可使全血粘度值(200mpa.s)、全血粘度值(30mpa.s)、紅細(xì)胞壓積、血沉方程K值均明顯低于模型組。提示本品有一定的體外抗血栓以及改善血液流變形作用，起效劑量0.35g/kg。大鼠起效劑量為小劑量0.35g/kg，小鼠起效劑量0.5g/kg。4.結(jié)論本發(fā)明膠囊劑能對風(fēng)寒侵襲所致的頸椎病病因進(jìn)行治療；同時(shí)風(fēng)寒之邪引發(fā)氣脈不通，不通則痛，而本發(fā)明膠囊劑對疼痛有鎮(zhèn)痛作用，改善患者的不適癥狀；現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為頸椎病是慢性炎性疾病，本發(fā)明膠囊劑具有抑制慢性炎癥作用，阻礙頸椎病的發(fā)展；頸腰椎病患者的血流變異常似與"痹在于脈則血凝而不流"，本發(fā)明膠囊劑可促進(jìn)微循環(huán)，促進(jìn)血液流動(dòng)，具有體外抗血栓以及改善血液流變形，從而改善這種痹癥。綜上，可以看出本發(fā)明膠囊劑具有針對頸椎病病因、癥狀進(jìn)行治療，同時(shí)在治療過程中針對好發(fā)人群的發(fā)病因素有一定的改善作用，本發(fā)明藥效學(xué)試驗(yàn)效果顯著。急毒試驗(yàn)報(bào)告本品給ICR品系小鼠灌胃未測出LD5。，24小時(shí)內(nèi)給藥2次，觀察14天，小鼠無死亡，其最大受試藥物量為40g/kg，相當(dāng)生藥183g/kg，約為臨床人擬用量的400倍。在此劑量下未觀察到本品的毒性反應(yīng)。長毒試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)共分四個(gè)組，大、中、小劑量組及空白對照組，每組40只大鼠，早$各半。均采用灌胃給藥，連續(xù)給予本品6個(gè)月，大、中、小劑量分別為7.5、3.75、1.875g/kg(相當(dāng)生藥量34.32、17.16、8.58g/kg)，為臨床用量的75、37.5、18.75倍。觀測項(xiàng)目包括一般性觀察和全面檢測。檢測內(nèi)容有血液學(xué)檢查12項(xiàng)，血液生化學(xué)檢查15項(xiàng)，臟器指數(shù)12項(xiàng)及病理組織學(xué)檢查30項(xiàng)。結(jié)果本品長期服用對大鼠攝食量無明顯影響，對大鼠體重增長也無明顯影響。對血液學(xué)、血液生化、臟器指數(shù)無明顯影響。病理組織學(xué)檢查提示本品長期大劑量服用可引起肝細(xì)胞顆粒變性及輕度纖維組織增生，心肌間質(zhì)血管擴(kuò)張，腎臟髓質(zhì)可見透明蛋白管型及間質(zhì)血管擴(kuò)張充血，胃、十二指腸可見潰瘍樣改變，上皮層及固有層可見炎細(xì)胞浸潤。膠囊的安全劑量為中劑量3.75g/kg，為臨床用量的37.5倍。處方當(dāng)歸225g川芎105g黃芪188g丹參150g雞血藤180g熟地黃300g伸筋草105g肉蓯蓉180g骨碎補(bǔ)150g桑枝300g葛根180g續(xù)斷225g。1、本發(fā)明膠囊劑的制備方法為以上十二味，加水煎煮三次，第一次加IO倍量水煎煮1.5小時(shí)，第二、三次各加8倍量水，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度1.151.25(50°C)的清膏，真空干燥，粉碎，加入淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得本發(fā)明膠囊劑。具體實(shí)施例方式2、本發(fā)明片劑的制備方法為以上十二味，加水煎煮三次，第一次加IO倍量水煎煮1.5小時(shí)，第二、三次各加8倍量水，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度1.151.25(50°C)的清膏，真空干燥，粉碎，加入淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，加入適量硬脂酸鎂，壓制成iooo片，包衣，即得本發(fā)明片劑。權(quán)利要求一種用于治療頸椎病的中藥制劑，其特征在于制成該中藥制劑的中藥原料為當(dāng)歸225g、川芎105g、黃芪188g、丹參150g、雞血藤180g、熟地黃300g、伸筋草105g、肉蓯蓉180g、骨碎補(bǔ)150g、桑枝300g、葛根180g、續(xù)斷225g。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于所述中藥制劑為片劑、膠囊劑。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的膠囊劑的制備方法，其特征在于以上十二味，加水煎煮三次，第一次加10倍量水煎煮1.5小時(shí)，第二、三次各加8倍量水，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度l.151.25(50°C)的清膏，真空干燥，粉碎，加入淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，即得本發(fā)明膠囊劑。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的片劑的制備方法，其特征在于以上十二味，加水煎煮三次，第一次加10倍量水煎煮1.5小時(shí)，第二、三次各加8倍量水，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度l.151.25(50°C)的清膏，真空干燥，粉碎，加入淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，加入適量硬脂酸鎂，壓片，包衣，即得本發(fā)明片劑。全文摘要本發(fā)明涉及一種用于治療頸椎病的中藥制劑，該中藥制劑是由當(dāng)歸225g、川芎105g、黃芪188g、丹參150g、雞血藤180g、熟地黃300g、伸筋草105g、肉蓯蓉180g、骨碎補(bǔ)150g、桑枝300g、葛根180g、續(xù)斷225g，按常規(guī)工藝制備而成，包括膠囊劑、片劑；該制劑具有很好的活血通絡(luò)的作用，臨床藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)在對頸椎病的治療方面較原藥物組合物有著更顯著的效果。文檔編號(hào)A61K36/804GK101785809SQ200910023858公開日2010年7月28日申請日期2009年9月11日優(yōu)先權(quán)日2009年9月11日發(fā)明者羅川申請人:陜西東泰制藥有限公司