專利名稱：藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛及其衍生物與制備和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)，具體涉及藜蘆胺降解產(chǎn)物藜盧芴醛及其衍生物與它們 的制備和在制備抗腫瘤藥的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
藜盧屬(Fera/r"w)為百合科(Liliaceae)植物，世界上約有40種。中醫(yī)用藜蘆 (K"fgn/w L.)、興安藜盧(K必;mWcww(Turcz.)Loes.f.)、天目藜蘆(^&/ >^/^/ Loes.f.)、毛穗藜戶(Pf/waacW Regel)、大理藜盧(K Loes.f.)、毛葉藜戸
(ffgmmft;/7on^ (Maxim.) Loes.f.)等的根和根莖入藥，用于中風(fēng)痰壅，癲癇、喉痹 不通，及疥癬和惡瘡(中華本草(八).上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999， 183-188)。 現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，藜蘆生物堿具有降血壓和抗腫瘤作用(中藥辭海(第四巻). 中國醫(yī)藥科技出版社，1998，8-13;徐國鈞，徐珞珊，王崢乾等.常用中藥材 品種整理和質(zhì)量研究(第四冊).福建科學(xué)技術(shù)出版社,2001,121-178)。從藜 蘆中分離得到的甾體生物堿—藜蘆胺(結(jié)構(gòu)如下式A)具有顯著的抗腫瘤活性， 但是該化合物的毒性較大，小鼠靜脈和皮下給藥，其LDso分別為3.1 mg/kg和
4.5mg/kg (Kiyoshi Tanaka, / Ptonwa. ￡jc/ . 77iempeWas. 1955， 113(1):
89-99)。
藜蘆胺A

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于研究設(shè)計以藜蘆胺為原料制備藜蘆芴醛及 其衍生物的方法和這些化合物的醫(yī)藥應(yīng)用。
本發(fā)明提供了一種藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛l，具有下列結(jié)構(gòu)式
6本發(fā)明另一目的提供了一種藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛l的衍生物藜蘆芴酸 2、藜蘆芴醇3、藜蘆芴縮醛4、 3-羰基-A^藜蘆芴醛5、 3-羰基-A^藜蘆芴酸6、 3-羰基-A^藜蘆芴醇7、 3-羰基-A^藜蘆芴縮醛8、 3-去氧-A^藜蘆芴醛9、 3-去氧-八4-藜戶芴酸IO、 3-去氧-厶4-藜蘆芴醇11、 3-去氧-A、藜蘆芴縮醛12、 3-去氧-5，6-二氫 -藜盧荷醛13、 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴酸14、 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴醇15、 3-去氧-5，6-二氫-藜蘆芴縮醛16、 3-氯藜蘆芴醛17、 3-氯藜蘆芴酸醛18、 3-氯藜蘆芴 醇19、 3-氯藜盧芴縮醛20，具有下列結(jié)構(gòu)式18 19 20
本發(fā)明的又一目的是提供了上述藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛l及其衍生物的制
備方法，以甾體生物堿藜蘆胺(A)為原料，經(jīng)過間氯過氧苯甲酸(mCPBA)氧化 降解制備藜蘆芴醛l。
生物堿藜蘆胺(A)可以市售得到。
本發(fā)明的再一 目的是提供了上述藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛l及其衍生物的制 備方法。包括下列步驟
(1) 以步驟(1)藜蘆芴醛l為底物經(jīng)氧化、還原、縮合反應(yīng)得到3個衍生物 藜戸荷酸2、藜蘆芴醇3、藜蘆芴縮醛4。
(2) 以藜蘆胺A為原料制備4個中間體3-羰基-At藜蘆胺(B)， 3-去氧-A4-藜蘆胺(C)， 3-去氧-5，6-二氫-藜蘆胺(D)， 3-氯藜蘆胺(E);(3) 4個中間體B, C, D, E分別經(jīng)間氯過氧苯甲酸(mCPBA)氧化降解制備得 到3-羰基-A、藜蘆芴醛5， 3-去氧-厶4-藜蘆芴醛9， 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴醛13， 3-氯藜蘆芴醛17;所述B， C， D， E為公開的化合物。
(4) 化合物5， 9， 13， 17分別經(jīng)氧化、還原、縮合反應(yīng)，各得3個衍生物， 共12個化合物3-羰基-A、藜蘆芴酸6， 3-羰基-A、藜蘆芴醇7， 3-羰基-A、藜蘆芴 縮醛8， 3-去氧-A、藜蘆芴酸10， 3-去氧-A、藜蘆芴醇11， 3-去氧-A、藜蘆芴縮醛12， 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴酸14， 3-去氧-5，6-二氫-藜蘆芴醇15， 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴縮醛16， 3-氯藜蘆芴酸18， 3-氯藜蘆芴醇19, 3-氯藜蘆芴縮醛20。
步驟(1)藜蘆芴醛l的制備中以二氯甲垸、氯仿、四氯化碳、THF、 二氧六 環(huán)或丙酮為溶劑，優(yōu)選二氯甲垸、氯仿；原料與溶劑的比例為lg/200mL lg/20mL， 優(yōu)選lg/100mL lg/50mL。以間氯過氧苯甲酸為氧化劑，間氯過氧苯甲酸與藜蘆 芴醛1的摩爾比為1:1 5:1，優(yōu)選2.5:1。反應(yīng)溫度為0-6(TC，優(yōu)選15-18。C。反應(yīng)中 采用酸催化，如鹽酸、硫酸或冰醋酸等，其加入量為藜蘆胺A原料的1-5XW/W。
反應(yīng)過程如下
本發(fā)明還有一個目的是提供了上述藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛l及其衍生物 2-20化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明選用人胰腺癌細胞BxPC-3和SW19卯，小細胞肺癌細胞NCI-H446 人腸癌(LOVO)等細胞系，采用MTT法測試藜戸芴醛1及其衍生物的抗腫瘤活性。結(jié)果表明化合物藜蘆芴醛1對胰腺癌細胞BxPC-3和SW19卯，小細胞肺癌 (NCI-H446)，人腸癌(LOVO)均具有顯著的抑制作用，其中對小細胞肺癌 (NCI-H446)的ICso為0.566 pg/mL?；衔?, 5, 8， 13， 17對所選四種瘤株也 具有良好的抑制活性。


圖1化合物藜蘆芴醛1的'HNMR譜 圖2化合物藜蘆芴醛1的13C NMR譜
具體實施例方式
通過以下實施例對本發(fā)明進一步說明。 實施例1:
將2.0g(4.9mmo1)藜蘆胺A溶于40mL甲苯中，加入環(huán)己酮5mL(48.2 mmol)和異丙醇鋁2.0 g (9.8 mmol)，升溫至IIO'C反應(yīng)3 h，蒸除甲苯，得到黃 色油狀物，經(jīng)硅膠柱純化，得到白色粉末狀化合物3-羰基-么4-藜蘆胺8(1.28)， 收率60.3%，熔點187-189。C。
3-羰基-A、藜蘆胺(B)的結(jié)構(gòu)確證
ESI陽MS: 408 [M+H]+， ^-NMR (600 MHz， CDC13， J/Hz) & 7.24 (d, 1H， ^ 7.8， H-16), 6.98 (d， 1H, /= 7.8， H國15)， 5.83 (s， 1H, H-4), 3.50 (dd， 1H， </= 6.6,4.8， H-20), 3.26 (m, 1H， H-23)， 3.06 (m， 1H， H-8), 2.92 (dd， 1H, /= 12， 1.8， H-26b), 2.76 (q， 1H, H-llb), 2.61 (m, 1H， H-6b)， 2.56 (m, 1H， H-lla), 2.55 (m, 1H， H-2b)， 2.49 (d， 1H， 《/= 4.2， H-22), 2.47 (m， 1H, H-6a)， 2.43 (brs， 1H， H-7b)， 2.40 (brs， 1H, H-2a)， 2.32 (brs， 3H, H-18), 2.11 (t， 1H， /= 11.4， H-26a)， 2.04 (m， 1H， H-lb)， 2.02 (m， 1H， H-24b)， l.卯(td， 1H, 4.2, H-la)， 1.77 (m， 1H, H-9)， 1.50 (dd, 1H, >= 12.6， 3.6, H-25), 1.47 (d， 1H, > 3.6， H-7a)， 1.39 (d, 3H， 《/- 7.2, H-21), 1.30 (brs, 3H, H-19), 1.01 (q， 1H, /= 10.8, H-24a), 0.83 (d, 3H， J= 6.6, H-27); l3C-NMR (150 MHz， CDC13) & 199.4 (C-3)，
170.0 (C-5), 142.8 (C-14), 142.1 (C-12), 140.6 (C-17), 132.9 (C-13), 125.4 (C-16)，
125.1 (C-4)， 119.4 (C陽15)， 70.8 (C-23), 67.0 (C-22), 59.4 (C-9)， 59.6 (C-9), 53.9 (C-26), 44.0 (C-24), 43.7 (C陽8), 38.5 (C-IO)， 36.1 (C-l)， 36.1 (C-20)， 33.7 (C-2)， 33.1 (C-6)， 32.0 (C-25)， 30.1 (C國ll)， 29.5 (C-7), 19.5 (C國21)， 18.8 (C-27), 16.8 (C-19)， 15.8 (C-18)。
實施例2:
將0.5 8(1.2腿01)3-羰基-厶4-藜蘆胺(B)溶于50mL—縮二乙二醇，加入l.O mL (20 mmol)水合肼，1.2 g (21 mmol)的氫氧化鉀，在160'C下攪拌，2 h后降溫 至12(TC，除去體系中的水，再升溫至180'C，反應(yīng)4h左右。反應(yīng)液加入150mL冰水中，于冰箱內(nèi)靜置2h，過濾，得白色固體0.36§。用50mL丙酮結(jié)晶，得白 色粉末0.208，母液上硅膠柱，用梯度的石油醚乙酸乙酯混合液洗脫，得到白 色固體3-去氧-A4-藜戸胺(C) 46mg，收率為52.2%， ESI-MS: w/z 394 [M+H]+。 實施例3:
在帶攪拌的50mL高壓反應(yīng)釜中，加入3-去氧-A、藜蘆胺(C) 0.3 g，乙醇20 mL， Pd/C50mg，將反應(yīng)釜中空氣用氫氣置換后加壓至350psi，室溫下反應(yīng)6 8 h，過濾回收Pd/C，蒸除溶劑得固體0.3g，上硅膠柱，用梯度的石油醚乙酸乙 酯混合液洗脫，得到白色固體3-去氧-5， 6二氫-藜蘆胺(D) 256 mg，收率為85%， ESI-MS: m/z 396 [M+H]+。
實施例4:
將41 mg (0.1 mmol)藜蘆胺A溶于8 mL吡啶中，冰水冷卻后滴加SOCl2 0.2 mL (2.8mmo1)，逐漸升溫至25'C，反應(yīng)過夜。TLC表明反應(yīng)結(jié)束，加入50mL乙酸乙 酯，用3x30mL的水洗滌，有機層用30mL的飽和食鹽水洗滌，用無水Na:jS04干 燥。蒸除溶劑得粗產(chǎn)物40mg，經(jīng)硅膠柱分離得到3-氯藜蘆胺(E) (20mg)， ESI-MS: zn/z 427.3 [M+H]+。
實施例5:
將82 mg (0.2 mmol)藜蘆胺(l)溶于15 mL CH2C12中，加入75%的間氯過氧苯 甲酸(/wPCA)92mg(0.4mmo1)。于30°C以下反應(yīng)24 h。反應(yīng)結(jié)束后加入5%的 Na2C03溶液調(diào)pH至7-8，用3x50 mL CH2C12萃取，有機層用無水Na2S04干燥。 蒸除溶劑得78mg粗品，經(jīng)硅膠柱純化得白色粉末藜蘆芴醛122mg，收率33.9 %。
實施例6:
將82 mg (0.2 mmol)藜蘆胺(l)溶于15 mL CH2C12中，加入75%的間氯過氧苯 甲酸OzPCA)92mg(0.4mmol)和碳酸氫鈉20mg(0.24mmo1)。于20'C以下反應(yīng) 14 h。反應(yīng)結(jié)束后用3x50mLCH2Cl2萃取，有機層用無水Na2S04干燥。蒸除溶 劑得75mg粗品，經(jīng)硅膠柱純化得白色粉末藜蘆芴醛138mg，收率58.5%。
實施例7:
將82 mg (0.2 mmol)藜蘆胺(l)溶于15 mL CH2C12中，加入75%的間氯過氧苯 甲酸0wPCA)92mg(0.4mmol)和冰醋酸450mL(7.5mmo1)。于20'C以下反應(yīng) 26h。反應(yīng)結(jié)束后用3x50mLCH2Cl2萃取，有機層用無水Na2S04干燥。蒸除溶 劑得83mg粗品，經(jīng)硅膠柱純化得白色粉末藜蘆芴醛142.5mg，收率65%。
實施例8:
將82 mg (0.2 mmol)藜蘆胺(l)溶于15 mL CH2C12中，加入75%的間氯過氧苯 甲酸0wPCA)92mg(0.4mmol)和碳酸氫鈉20mg(0.24mmo1)。于20'C以下反應(yīng) 6后加入冰醋酸600 mL (10 mmol)，繼續(xù)反應(yīng)6 h，反應(yīng)結(jié)束后用3x50 mL CH2C12
11萃取，有機層用無水Na2S04干燥。蒸除溶劑得83mg粗品，經(jīng)硅膠柱純化得白 色粉末藜蘆芴醛148mg，收率74%。 化合物藜戸荷醛l的結(jié)構(gòu)確證
白色粉末，熔點155~156°C; ESI-MS: Wz 323 [M-H]; 325 [M+H]+;
!H-NMR (600 MHz, CDC13， J/Hz) & 7.0.3 (d， 1H， /= 8.0, H-16)， 6.90 (dd, 1H， ■/= 8.0， 3.6, H-15), 5.50 (t, 1H,聲3.0， H-6)， 3.84 (m, 1H, H-20), 3.59 (m, 1H, H-3), 3.00 (td, 1H, /= 12.0， 6.0, H誦8), 2.80 (q， 1H， /= 3.6, H-llb), 2.65 (m， 1H， H-lla)， 2.61 (m, 1H, H-7b), 2.42 (m 1H， H-4b), 2.30 (m, 1H， H-4a)， 2.27 (brs, 3H， H-18), 2.01 (td, IH,J- 11.4, 1.8, H-7a), 1.91 (m， 1H, H-2b)，1.87 (m, 1H， H-lb), 1.84 (m, 1H, H-9), 1.61 (m, 1H, H-2a)， 1.40 (d, 3H, /= 8.4, H-21)， 1.28 (td， 1H, /= 9.6, 3.6， H-la), 1.15 (brs， 3H， H-19);
13C-NMR (150 MHz, CDC13) & 201.4 (C-22), 145.6 (C-14), 143.8 (C-12)， 142.5 (C-5), 134.4 (C-17), 132.7 (C-13)， 126.0 (C-16)， 121.9 (C-6), 120.7 (C-15), 71.8 (C-3), 57.0 (C隱9)， 49.4 (C-20), 41.9 (C-4)， 41.4 (C-8)， 38.1 (C-l)， 36.9 (C陽IO), 31.4 (C國2), 30.5 (C-ll)， 30.3 (C-7)， 19.3 (C-19)， 15.8 (C-IS)， 14.6 (C-21). 實施例9:
將10 mg (0.25 mmol)的NaOH溶于3 mL水中，加入28.6 (0.12 mmol)的 Ag20，攪拌溶解，冰浴冷卻條件下滴加含20 mg (0.06 mmol) 1的四氫呋喃(THF) 的溶液2mL，升至室溫，劇烈攪拌l 2h。反應(yīng)結(jié)束后加5X的HC1調(diào)至中性， 以25mL氯仿萃取2次，有機層用無水Na2S04干燥。蒸除溶劑得淡黃色固體18 g，經(jīng)硅膠柱純化得白色粉末藜蘆芴酸2 14 mg，收率69% 。其ESI-MS為m/z: 339 [M-H]-。
實施例10:
將10 mg (0.03 mmol) 1溶于3 mL的乙醇中，加入3.4 (0.09 mmol)的NaBH4， 室溫下攪拌0.5-1 h。反應(yīng)結(jié)束以20 mL氯仿萃取2次，有機層用無水Na2S04 干燥。蒸除溶劑得淡黃色固體9.58，經(jīng)硅膠柱純化得白色粉末藜蘆芴醇38mg， 收率79%。其ESI-MS為w/z: 325 [M-H]-， 327 [M+H]+。
實施例11:
將20 mg (0.06 mmol) 1溶于25 mL的甲醇中，再加入對甲苯磺酸2 mg (0.01 mmol)，反應(yīng)瓶上端接索氏提取器，回流條件下攪拌2~3 h。反應(yīng)結(jié)束后蒸 除甲醇，加入20mL水，以25mL氯仿萃取2次，有機層用無水Na2S04干燥。 蒸除溶劑得淡黃色固體20.58，經(jīng)硅膠柱純化得白色粉末藜蘆芴縮醛416mg，收 率70% 。其ESI-MS為/w/z: 369 [M-H]-， 371 [M+H]+。實施例12:
藜盧芴醛l對胰腺癌細胞、小細胞肺癌細胞、腸癌細胞增殖的抑制作用 樣品配制將藜蘆芴醛1用DMSO (Merck)溶解后，加入PBS(-)配成1000 pg/mL的溶液，然后用含DMSO的PBS(-)稀釋。
細胞株BxPC-3 (人原位胰腺癌細胞)；SW1990 (人胰腺癌細胞)，
NCI-H446(人小細胞肺癌)，LOVO (人腸癌細胞) 培養(yǎng)液 RPMI1640+15MNBS+雙抗 試驗方法
MTT法:96孔板每孔加入濃度為3~4X 104個/mL的細胞懸液100pL，置37 °C， 5。/oC02培養(yǎng)箱內(nèi)。24h后，加入樣品液，10pL/孔，設(shè)雙復(fù)孔，37°C， 5% C02作用72h。每孔加入5 mg/mL的MTT溶液20 nL，作用4h后加入溶解液， 100nL/孔，置培養(yǎng)箱內(nèi)，溶解后用MK-2全自動酶標儀測570nmOD值。
結(jié)果見表1。表明化合物藜蘆芴醛1對胰腺癌細胞BxPC-3和SW1990， 小細胞肺癌(NCI-H446)，人腸癌(LOVO)均具有顯著的抑制作用，其中對小細胞
肺癌(NCI-H446)的IC50為0.566 pg/mL。化合物2， 5， 8， 13, 17對所選四 種瘤株也具有良好的抑制活性。
表l 24個化合物對胰腺癌、小細胞肺癌細胞、腸癌細胞增殖抑制作用 化合物 IC5Q (pg/mL)
BxPC-3NCI-H446SW1990LOVO
16.350.5663.584.55
217.309.7116.5910.23
3>100>100>10088.65
4>100>100>10095.60
516.055.3510.1021.33
620.8718.2017.6915.23
7>100>100>100101.2
811.231011.989.85
9>1002.26〉10056.36
1017.7910.5132.8124.15
11>10078.09>10056.66
12>10027.90>10077.63
1315.736.8616.4563.40
1434.8516.8741.1720.31
15>10053.18>10096.85
1316>100>100>100>100
1712.721.2112.8620.66
1833.0128.5432.2540.25
19>100>100>100>100
2031.6217.4430.4023.56
環(huán)杷明*18.688.2628.8140.16
*環(huán)杷明為陽性對照藥
實施例13:
試劑和材料
受試樣品藜蘆芴醛l，用數(shù)滴土溫-80助溶后加0.5XCMC配制成所需濃度
陽性對照藥物絲裂霉素(MMC,上海新亞藥業(yè)有限公司) 實驗動物BALB/C裸鼠(SPF級)，雄性，18-20g，由上海斯萊克實驗動 物責(zé)任有限公司購得。
移植性腫瘤人體胰腺癌PANC-1，由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院藥理室提供。 實驗方法
取生長良好的PANC-1實體瘤，無菌條件下切割成2-3mm大小的均勻小塊， 用套管針每只小鼠右腋皮下接種一塊，隨機分為5組，分別為
1) Control(生理鹽水)，
2) MMC(lmg/kg, ipx2)
3) 1 (1 mg/kg， igxl4)
4) 1(3mg/kg,igx14)
5) 1(10mg/kg,igx14)
接種后13日開始給藥，藜蘆芴醛l連續(xù)經(jīng)口灌胃14天(dO-dl3)， MMC腹 腔注射2次(dO， d3)，給藥體積為0.5ml/20g體重，并用游標卡尺每4天測瘤塊 的長徑(a)、短徑(b)，腫瘤體積(tumor volume, TV)計算公式為TV=l/2xaxb2， 相對腫瘤體積(relative tumor volume, RTV)計算公式為RTV = Vt/Vo， Vo為分 籠時(即do)測量所得腫瘤體積，Vt為每一次測量時的腫瘤體積。抗腫瘤活性的 評價指標為相對腫瘤增殖率T/C(%)， T/C(%) = TRTV /CRTV x 100%，或腫瘤增 殖抑制率(％): (l-T/C)x 100%，并進行T檢驗。接種后35天脫頸處死動物，解 剖取瘤塊，稱瘤重，計算瘤重抑瘤率。測試數(shù)據(jù)如表2。Weight (g) Inhibition rate (%)
2.08±0.45
1.12±0.29" 46.15 1.30±0.33** 37.50 1.21士0.21** 41.83 1.12±0.19** 46.15
表2.藜盧荷醛1的體內(nèi)抗PANC-1腫瘤活性研究 Group Dosage Dosage No.death/total
regime
1 25.0
2 1.0
3 1.0
4 3.0
5 10.0
*/7<0.05, **p<0.01
10/10 6/6 6/6 6/6 6/6
4^444
1 p 11 1- 11
g g g g
1 *1 ,1 !!
權(quán)利要求
1、一種藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛1，其特征在于它具有下列結(jié)構(gòu)式
2、 一種藜戸胺降解產(chǎn)物藜盧芴醛l的衍生物，其特征在于所述衍生物包括 藜盧莉酸2、藜聲荷醇3、藜戶芴縮醛4、 3-羰基-A、藜蘆芴醛5、 3-羰基-A4-藜戸荷酸6、 3-羰基-A、藜蘆芴醇7、 3-羰基-A、藜蘆芴縮醛8、 3-去氧-A、藜蘆芴醛 9、 3-去氧-A"-藜盧芴酸10、 3-去氧-A、藜蘆芴醇U、 3-去氧-A、藜蘆芴縮醛12、 3-去氧-5，6-二氫-藜蘆芴醛13、 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴酸14、 3-去氧-5， 6-二氫-藜 戸芴醇15、 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴縮醛16、 3-氯藜蘆芴醛17、 3-氯藜蘆芴酸18、 3-氯藜戸荷醇19、 3-氯藜蘆芴縮醛20;它們分別具有下列結(jié)構(gòu)式
3、 一種如權(quán)利要求l所述的藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛l的制備方法，其特征 在于該方法以留體生物堿藜戸胺A為原料，經(jīng)過間氯過氧苯甲酸氧化降解制備藜 蘆芴醛l。
4、 一種如權(quán)利要求2所述的藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛1的制備方法，其特征 在于該方法包括下列步驟(1) 以步驟(1)藜蘆芴醛l為底物經(jīng)氧化、還原、縮合反應(yīng)得到3個衍生物: 藜盧芴酸2、藜盧芴醇3、藜蘆芴縮醛4。(2) 以藜蘆胺A為原料制備4個中間體3-羰基-A、藜蘆胺B， 3-去氧-A、藜 蘆胺C， 3-去氧-5，6-二氫-藜蘆胺D， 3-氯藜蘆胺E;(3) 4個中間體B,C，D，E分別經(jīng)間氯過氧苯甲酸氧化降解制備得到3-羰基-厶4-藜蘆芴醛5, 3-去氧-A^藜蘆芴醛9， 3-去氧-5，6-二氫-藜蘆芴醛13, 3-氯藜蘆 荷醛17;(4)化合物5， 9， 13， 17分別經(jīng)氧化、還原、縮合反應(yīng)，各得3個衍生物， 共12個化合物3-羰基-A、藜蘆芴酸6， 3-羰基-A、藜蘆芴醇7， 3-羰基-A、藜蘆芴 縮醛8， 3-去氧-At藜蘆芴酸10， 3-去氧-A、藜蘆芴醇11， 3-去氧-A、藜蘆笏縮醛12， 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴酸14， 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴醇15， 3-去氧-5,6-二氫-藜蘆芴縮醛16， 3-氯藜蘆芴酸18， 3-氯藜蘆芴醇19， 3-氯藜蘆芴縮醛20。
5、根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其特征在于步驟(1)藜蘆芴醛l的制備中以二氯 甲烷、氯仿、四氯化碳、THF、 二氧六環(huán)或丙酮為溶劑，優(yōu)選二氯甲垸、氯仿； 原料與溶劑的比例為lg/200ml^lg/20mL,優(yōu)選lg/100mL lg/50mL;以間氯過氧 苯甲酸為氧化劑，間氯過氧苯甲酸與藜蘆芴醛1的摩爾比為1:1 5:1，優(yōu)選2,5:1; 反應(yīng)溫度為0-60'C，優(yōu)選15-18'C;反應(yīng)中采用鹽酸、硫酸或冰醋酸進行酸催化， 酸加入量為藜蘆胺的1-5XW/W;反應(yīng)過程如下
6、 根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其特征在于所述步驟(1)和(4)醛類化合物為 底物經(jīng)氧化反應(yīng)制備酸類化合物過程中，采用Ag20/NaOH氧化體系，其Ag20與 原料的摩爾比為1:1 5:1，優(yōu)選2.0:1;反應(yīng)溫度為-10-4(TC,優(yōu)選0-20。C; THF、 二氧六環(huán)或丙酮為溶劑，優(yōu)選THF;原料與溶劑的比例為lg/300mL lg/50mL， 優(yōu)選 lg/160mL~lg/80mL。
7、 根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其特征在于所述步驟(1)和(4)醛類化合物為 底物經(jīng)還原反應(yīng)制備醇類化合物過程中，采用NaBH4還原，其NaBH4與原料的摩 爾比為0.25:1 5:1，優(yōu)選1:1 3:1;反應(yīng)溫度為0-40'C，優(yōu)選0-2(TC;乙醇、甲醇 為溶劑，原料與溶劑的比例為lg/200mL lg/20mL，優(yōu)選lg/80mL lg/20mL。
8、 根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其特征在于所述步驟(1)和(4)醛類化合物為 底物經(jīng)縮合反應(yīng)制備縮醛的過程中，在甲苯磺酸催化下與甲醇成縮醛；甲苯磺酸 與藜蘆芴醛1的摩爾比為1:20 1:5;原料與溶劑的比例為lg/2000mL lg/100 mL， 優(yōu)選lg/200 mL lg/50mL。
9、 一種如權(quán)利要求l所述的藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛l在制備抗腫瘤藥物中 的應(yīng)用。
10、 根據(jù)權(quán)利要求6的應(yīng)用，其特征在于所述藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛l的衍 生物2-20化合物中任一化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種藜蘆胺降解產(chǎn)物藜蘆芴醛1及其衍生物。以甾體生物堿藜蘆胺(A)為原料，經(jīng)過間氯過氧苯甲酸氧化降解制備藜蘆芴醛，進一步經(jīng)過氧化、還原、縮合反應(yīng)，得到藜蘆芴醛1衍生物20個化合物。本發(fā)明所述的20個化合物對癌細胞系具有良好的抑制活性，其中，化合物1，2，5，8，13，17對人胰腺癌細胞BxPC-3和SW1990，小細胞肺癌細胞NCI-H446人腸癌LOVO等細胞系具有良好的抑制活性，化合物藜蘆芴醛(1)的抑制活性最為顯著。
文檔編號A61P35/00GK101565446SQ200910052480
公開日2009年10月28日 申請日期2009年6月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月4日
發(fā)明者磊 單, 張衛(wèi)東, 徐?？? 李慧粱, 柳潤輝, 建 湯, 沈云亨, 娟 蘇 申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)