專利名稱：：一種防治老年癡呆癥的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于防治老年癡呆癥的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：隨著全世界向老齡社會進(jìn)入步伐的不斷加快，各種神經(jīng)退行性老年疾病，如輕度認(rèn)知障礙、老年癡呆等疾病已經(jīng)成為威脅人類晚年健康，降低老年人生活質(zhì)量的重要危險因素，給社會及家庭帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和沉重的精神壓力。因此，開發(fā)改善認(rèn)知功能障礙，治療老年癡呆癥的藥物成為全球各國醫(yī)療工作者的研究重點(diǎn)，受到中西方醫(yī)學(xué)界的高度重視。西方醫(yī)藥界研究抗輕度認(rèn)知障礙及以阿爾茨海默病為主的老年癡呆藥物的思路主要圍繞四抗(抗炎、抗氧化、抗膽固醇、抗淀粉樣蛋白)和兩擬(擬膽堿和擬谷氨酸)來進(jìn)行，目前美國食品藥品管理局批準(zhǔn)的治療阿爾茨海默病(AD)的藥物包括他克林、多奈哌齊、利凡斯的明、加蘭他敏和美金剛等，這些藥物雖能短期內(nèi)改善癡呆患者的癥狀，但不能延緩疾病的發(fā)展，并且其中有些藥物對肝臟還具有較強(qiáng)的毒副作用，目前幾乎不使用，有些藥物價格昂貴，患者及其家屬難以承受，因此，急需要開發(fā)有良好療效，副作用少，且價格便宜的新型藥物?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的輕度認(rèn)知功能障礙、老年癡呆等類疾病大概涵蓋于傳統(tǒng)中醫(yī)中“癡呆”、“善忘”、“郁證”、“顫震”、“顫證”、“振掉”等衰老性疾病范疇。概“夫精者，生之本也”(《素問金匱真言論》)，因此，中醫(yī)認(rèn)為腎中精氣充足與否是決定人體是否衰老的主要條件。而“癡呆”、“善忘”等類的衰老性疾病，多因腎精虧損，腦髓虛空成病，因此多采取補(bǔ)腎益精法進(jìn)行治療。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種預(yù)防和/或治療老年癡呆癥的藥物組合物。本發(fā)明所提供的藥物組合物，由下述質(zhì)量份的原料組成金絲桃苷10-40、淫羊藿苷20-80和五味子乙素5-20。本發(fā)明的藥物組合物可進(jìn)一步由下述質(zhì)量份的原料組成金絲桃苷18-23、淫羊藿苷35-42和五味子乙素8-12。本發(fā)明中所用的原料金絲桃苷，又名槲皮素-3-0-β-D-吡喃半乳糖苷，屬于黃酮醇苷類化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式1所示。該化合物廣泛存在于各種植物體內(nèi)，如金絲桃科、薔薇科、桔?？?、唇形科、杜鵑花科、葵科、藤黃科、豆科以及衛(wèi)矛科等的果實(shí)與全草中，故可從植物中提取得到，如從菟絲子中提取得到金絲桃苷。也可按照現(xiàn)有技術(shù)中公開的方法合成得到，或通過商業(yè)途徑獲得。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>本發(fā)明中所用的原料淫羊藿苷，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式2所示。該化合物廣泛存在于小檗科植物淫羊藿(EpimediumgrandiflorumMorr.)的莖葉，朝鮮淫羊藿(E.koreanumNakai)，心葉淫羊藿(E.brevicornumMaxim.)等植物中，故可從上述植物中提取得到。也可按照現(xiàn)有技術(shù)中公開的方法合成得到，或通過商業(yè)途徑獲得。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>本發(fā)明中所用的原料五味子乙素，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式3所示。該化合物可從五味子中提取的得到，也可按照現(xiàn)有技術(shù)中公開的方法合成得到，或通過商業(yè)途徑獲得。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>本發(fā)明的再一個目的是提供所述藥物組合物的應(yīng)用。本發(fā)明所提供的藥物組合物的應(yīng)用是該組合物在制備預(yù)防和/或治療老年癡呆癥藥物中的應(yīng)用或在制備改善認(rèn)知功能障礙藥物中的應(yīng)用。所述老年癡呆癥具體可為阿爾茨海默病。同時，以本發(fā)明所提供的藥物組合物為活性成分制成的預(yù)防和/或治療老年癡呆癥的藥物以及改善認(rèn)知功能障礙藥物也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。所述藥物可通過口服、外用、注射、滲透、吸收、物理或化學(xué)介導(dǎo)的方法導(dǎo)入機(jī)體如肌肉、皮內(nèi)、皮下、靜脈或粘膜組織；或是被其它物質(zhì)混合或包裹后導(dǎo)入機(jī)體。需要的時候，在上述藥物中還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。所述載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體及潤滑劑等。該藥物可以制成藥學(xué)上可接受的任何劑型，如片劑、注射劑、膠囊劑、顆粒劑、丸齊U、微丸、散劑、滴丸劑、湯劑、糖漿劑、合劑、煎膏劑和浸膏劑等。上述各種劑型的藥物均可以按照中藥制劑的常規(guī)方法制備。上述預(yù)防和/或治療老年癡呆癥的藥物的使用劑量和使用方法取決于諸多因素，包括患者的年齡、體重、性別、自然健康狀況、營養(yǎng)狀況、化合物的活性強(qiáng)度、服用時間、代謝速率、病證的嚴(yán)重程度以及診治醫(yī)師的主觀判斷。本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)上述因素可以容易地決定藥物組合物使用劑量和使用方法。試驗(yàn)證明經(jīng)過大鼠定位航行及空間探索實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明的總黃酮和總多糖組合物組可以提高AD(阿爾茨海默病)模型大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力一縮短其逃避潛伏期和搜索距離且顯著增加空間探索實(shí)驗(yàn)中原平臺所在象限搜索時間和距離占總時間和距離的百分比。進(jìn)而表明本發(fā)明的藥物組合物可用于治療老年癡呆癥，尤其治療老年癡呆癥前期(如阿爾茨海默癡呆前期)，改善患者認(rèn)知功能障礙，延緩患者大腦萎縮的發(fā)展，提高患者記憶力，尤其是腎虛精虧型癡呆前期患者，補(bǔ)腎益精生髓為該藥物組合物的最大特點(diǎn)。具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行說明，但本發(fā)明并不局限于此。下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所述試劑和生物材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所用的原料來源如下淫羊藿苷天津一方科技有限公司，BBT00838金絲桃苷天津一方科技有限公司，BBT00398五味子乙素中國藥品生物制品檢定所，110765-200205。實(shí)施例1、制備藥物組合物的膠囊劑按照下述質(zhì)量份稱取各原料金絲桃苷20、淫羊藿苷40、五味子乙素10；將上述藥物混合后按照常規(guī)的膠囊劑的制備工藝加入常規(guī)輔料制成。實(shí)施例2、制備藥物組合物的片劑按照下述質(zhì)量份稱取各原料金絲桃苷40、淫羊藿苷20、五味子乙素15；將上述藥物混合后按照常規(guī)的片劑的制備工藝加入常規(guī)輔料制成。實(shí)施例3、制備藥物組合物的膠囊劑按照下述質(zhì)量份稱取各原料金絲桃苷10、淫羊藿苷80、五味子乙素5；將上述藥物混合后按照常規(guī)的膠囊劑的制備工藝加入常規(guī)輔料制成。實(shí)施例4、制備藥物組合物的口服液按照下述質(zhì)量份稱取各原料金絲桃苷20、淫羊藿苷80、五味子乙素20；將上述藥物混合后按照常規(guī)的口服液的制備工藝加入常規(guī)輔料制成。實(shí)施例5、本發(fā)明的藥物組合物對于癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響1、材料1.1動物SD雄性大鼠(SPF等級)，體重285315g，由中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院科學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供(許可證號SCXK-軍-2007-004)。1.2試劑藥物1)試驗(yàn)藥物按金絲桃苷、淫羊藿苷、五味子乙素以質(zhì)量比204010的比例配伍得組合物A；按金絲桃苷、淫羊藿苷、五味子乙素以質(zhì)量比20400.4的比例配伍得組合物B;2)陽性對照藥選用石杉堿甲片，河南太龍藥業(yè)產(chǎn)品，批號H10940156；3)Αβ25_35購自Sigma公司，無菌生理鹽水溶解配制成5μg/ml，37°C老化7天，-20°C保存?zhèn)溆谩?.3實(shí)驗(yàn)儀器SN_3N腦立體定位儀(日本Narishige)，DMS_2Morris水迷宮系統(tǒng)(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所)。2、方法2.1構(gòu)建AD模型大鼠大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，用2%戊巴比妥鈉腹腔麻醉(4050mg/kg體重)，固定于腦立體定位儀上，頭頂部被皮，碘酊消毒后切開皮膚，參照包新民的《大鼠腦立體定位圖》，選擇右側(cè)側(cè)腦室為注射靶區(qū)，于前囟向后1.0mm、中線旁開1.7mm處，用三棱針鉆開顱骨，暴露硬腦膜，再用5μ1微量注射器自腦表面垂直進(jìn)針4.Omm,將IOmMAβ25-35溶液5μ1緩慢注入(注入時間不少于5min)，留針2min后緩慢撤針，縫合傷口；假手術(shù)組鉆開顱骨后即縫合傷口。各組動物術(shù)后常規(guī)腹腔注射芐星青霉素抗感染。待動物清醒后治療組即開始灌胃給藥。2.2給藥方法分組采用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為四個組空白對照組，模型組，組合物A組，組合物B組，石杉堿甲片為陽性藥對照組。每組6只。用藥量為成人臨床劑量的20倍藥物組合物15mg·Kg"1·cf1，石杉堿甲片20mg·Kg—1·cf1。諸藥均以蒸餾水配成溶液給大鼠灌胃，每日1次，每次2ml，空白對照和模型組則以等體積蒸餾水灌胃，連續(xù)15d后進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)。2.3行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法水迷宮由圓形水池、黑色平臺和記錄系統(tǒng)3部分組成。水池直徑(120X50X30)cm；水池用墨水染成黑色，水溫保持在22°C-26°C；水池放在1間小屋的中央。池壁上隨意掛兩個物體作為近距離視覺暗示，室內(nèi)的門、窗、柜組、攝像頭等構(gòu)成遠(yuǎn)距離視覺暗示。平臺沒于水下2cm，上面有幾個小孔以提供一個大鼠容易站穩(wěn)的表面。水迷宮測試包括連續(xù)5d的定位航行試驗(yàn)(placenavigation)和一次空間探索試驗(yàn)(spatialprobetest)。定位航行試驗(yàn)試驗(yàn)前Id將大鼠放入水池中(不放入平臺)自由游泳2min，使其熟悉迷宮內(nèi)的環(huán)境。試驗(yàn)歷時5d，每天分上、下午兩個時間段，每個時間段測試4次，每天共8次。測試開始時，將平臺放在近端的象限中點(diǎn)，平臺隱藏于水面下1cm，沿水池的4個象限中部的池壁將大鼠面向池壁輕巧地放入水池，自動攝像系統(tǒng)記錄大鼠尋找平臺的時間(逃避潛伏期)和游泳途徑(過程)，電腦自動記錄上述數(shù)據(jù)；設(shè)定120s為最長逃避潛伏期，120s后自動停止記錄。如果大鼠在120s內(nèi)找到平臺，記錄其實(shí)際逃避潛伏期；如果在120s未找到平臺，由實(shí)驗(yàn)者將其引上平臺并停留10s，逃避潛伏期記為120s。空間探索試驗(yàn)第6d撤除平臺，讓大鼠自原平臺對側(cè)象限盆壁的中點(diǎn)入水自由游泳120s，記錄其游泳軌跡，軟件分析計(jì)算動物在各象限所用時間和各象限軌跡長度。計(jì)算動物在原平臺所在象限游泳時間占逃避潛伏期的百分比，在原平臺象限的軌跡長度占搜索距離的百分比。2.4統(tǒng)計(jì)方法統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(〒±s)表示，采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件。定位航行實(shí)驗(yàn)采用多元方差分析(M-ANOVA)，空間探索實(shí)驗(yàn)采用單因素方差分析(OneWayAN0VA)，組間兩兩比較采用LDS法。3、結(jié)果3.1藥物組合物對AD模型大鼠定位航行試驗(yàn)逃避潛伏期的影響表1、各組對AD大鼠定位航行實(shí)驗(yàn)中逃避潛伏期和搜索距離的影響(J±^n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與模型組比較"P<0.05表2、各組對AD大鼠空間探索實(shí)驗(yàn)中在原平臺所在象限搜索時間及距離的百分比的影響(3f±5，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與模型組比較2)P<0.01；與空白對照組比較3)P<0.01結(jié)果表明經(jīng)過大鼠定位航行及空間探索實(shí)驗(yàn)，金絲桃苷、淫羊藿苷和五味子乙素組合物A可以提高AD模型大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力一縮短其逃避潛伏期和搜索距離且顯著增加空間探索實(shí)驗(yàn)中原平臺所在象限搜索時間和距離占總時間和距離的百分比。實(shí)施例6、藥物組合物對于癡呆大鼠在體長時程增強(qiáng)的影響1、材料1.1動物同實(shí)施例5。1.2試劑藥物同實(shí)施例5。1.3實(shí)驗(yàn)儀器SN_3N腦立體定位儀(日本Narishige)，VC-Il記憶示波器(日本NihonKonden),SEN-7203三道電子刺激器(日本NihonKonden)，SS-202J刺激隔離器(日本NihonKonden)。2、方法2.1構(gòu)建AD模型大鼠同實(shí)施例5。2.2給藥方法同實(shí)施例5。2.3電生理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法(1)電極的埋植以20%烏拉坦(urethane，1.2g/kg，ip.)麻醉動物，并固定于立體定位儀上，電極定位參照pellegrino大鼠腦圖譜，雙極刺激電極埋植于內(nèi)嗅區(qū)前穿通纖維(perforantpath,PP)，其定位坐標(biāo)為AP-7.5mm,L4.2mm,H3.Omm；記錄電極坐標(biāo)為AP-3.8mm,L2.5mm,H3.5mm，位于同側(cè)海馬齒狀回的顆粒細(xì)胞層。在上述坐標(biāo)部位鉆一直徑為1.5mm的小孔，分別埋植記錄電極及刺激電極，調(diào)整刺激電極和記錄電極的位置，找到以固定強(qiáng)度的刺激記錄到最大的群峰電位(p0pulati0nspike，PS)時將電極固定。(2)誘發(fā)電位的記錄和觀測采用細(xì)胞外記錄方法。測試刺激(頻率為1/30HZ，波寬為0.Ims的方波)由電子刺激器產(chǎn)生后，經(jīng)刺激隔離器和刺激電極輸向PP，誘發(fā)的動作電位經(jīng)生物放大器在記憶示波器上顯示，并同時輸入計(jì)算機(jī)進(jìn)行分析、記錄PS幅值，作為DG顆粒細(xì)胞群興奮性的指標(biāo)。調(diào)整刺激強(qiáng)度，采用引起最大PS幅值所需刺激強(qiáng)度的1/2作為測試刺激強(qiáng)度，整個實(shí)驗(yàn)過程中測試刺激強(qiáng)度參數(shù)恒定不變。(3)HFS參數(shù)海馬齒狀回的顆粒細(xì)胞層LTP是由10串200Hz的HFS所誘導(dǎo)，每串刺激由5個波寬0.Ims的方波刺激組成，刺激間隔為200ms，刺激強(qiáng)度與測試刺激相同。(4)數(shù)據(jù)的采集每個測試刺激都誘發(fā)出一個PS，將連續(xù)10個PS幅值疊加后的平均值作為一個時間點(diǎn)的PS幅值，以給藥前30min所測得6個時間點(diǎn)的PS幅值的平均值作為自身基礎(chǔ)突觸傳遞水平，每個時間點(diǎn)的突觸傳遞水平以與基礎(chǔ)突觸傳遞水平比較得出的相對值(％)表示。2.5統(tǒng)計(jì)方法統(tǒng)計(jì)學(xué)處理電生理學(xué)按下式計(jì)算PS增加幅度PS增加幅度=(給藥后某時間點(diǎn)的PS幅值-給藥前的PS幅值)/給藥前的PS幅值。t檢驗(yàn)用于組間比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、結(jié)果表3高頻刺激后各組PS幅度增強(qiáng)的比較(無±s，n=6)_組別PS增幅(％)_空白對照組220·8±3·6αα#模型組173.4士4.5石杉堿甲組210.3士4·藥物組合物A組197.15士4·55α**藥物組合物B組178.8士4.67_注與模型組比較，AP<0.05,AAP<0.01；與總方組比較，#Ρ<0.01；與空白對照組比較，*Ρ<0.05，<0·01。如表3所示，各組動物在高頻刺激后PS的幅度都較刺激前增加，表明各組動物海馬齒狀回都有LTP的形成。模型組PS雖然有一定的增強(qiáng)，但明顯低于空白對照組(P<0.01)；石杉堿甲組高頻刺激后PS幅度增強(qiáng)明顯大于模型組(P<0.01)，藥物組合物A組與模型組比較，幅度也有增加(P<0.05)，藥物組合物B組增長幅度與模型組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。權(quán)利要求一種預(yù)防和/或治療老年癡呆癥的藥物組合物，由下述質(zhì)量份的原料組成金絲桃苷10-40、淫羊藿苷20-80和五味子乙素5-20。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物由下述質(zhì)量份的原料組成金絲桃苷18-23、淫羊藿苷35-42和五味子乙素8_12。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物由下述質(zhì)量份的原料組成金絲桃苷20、淫羊藿苷40和五味子乙素10。4.一種預(yù)防和/或治療老年癡呆癥藥物，其活性成分為權(quán)利要求1-3中任一所述的藥物組合物。5.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物，其特征在于所述藥物的劑型為藥學(xué)上可接受的任意一種劑型；優(yōu)選為口服劑型。6.一種改善認(rèn)知功能障礙藥物，其活性成分為權(quán)利要求1-3中任一所述的藥物組合物。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物，其特征在于所述藥物的劑型為藥學(xué)上可接受的任意一種劑型；優(yōu)選為口服劑型。8.權(quán)利要求1-3中任一所述的藥物組合物在制備下述藥物中的應(yīng)用1)預(yù)防和/或治療老年癡呆癥藥物，所述老年癡呆癥優(yōu)選為阿爾茨海默癡呆癥；2)改善認(rèn)知功能障礙藥物；3)提高阿爾茨海默癡呆癥模型大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力藥物。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述老年癡呆癥為阿爾茨海默癡呆癥。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于提高所述空間記憶學(xué)習(xí)能力表現(xiàn)為在定位航行試驗(yàn)中縮短其逃避潛伏期和搜索距離，且增加空間探索實(shí)驗(yàn)中原平臺所在象限搜索時間占總時間的百分比，以及搜索距離占距離的百分比。全文摘要本發(fā)明公開了一種預(yù)防和/或治療老年癡呆癥的藥物組合物。該組合物是由下述質(zhì)量份的原料組成金絲桃苷10-40、淫羊藿苷20-80和五味子乙素5-20。試驗(yàn)證明經(jīng)過大鼠定位航行及空間探索實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明的藥物組合物可以提高AD(阿爾茨海默病)模型大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力--縮短其逃避潛伏期和搜索距離且顯著增加空間探索實(shí)驗(yàn)中原平臺所在象限搜索時間和距離占總時間和距離的百分比。因此表明該提取物組合物可用于預(yù)防或治療老年癡呆癥。文檔編號A61P25/28GK101797267SQ20101016123公開日2010年8月11日申請日期2010年4月28日優(yōu)先權(quán)日2010年4月28日發(fā)明者劉庚信,富宏,張?zhí)?曾克武,李娌,楊金霞,王學(xué)美,黎巍威申請人:北京大學(xué)第一醫(yī)院