專利名稱：青霉素類藥物皮試試劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種青霉素類藥物皮試試劑及其制備方法，屬于化學(xué)制藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
青霉素是一組具有相同的核結(jié)構(gòu)(乙內(nèi)酰胺和噻唑烷環(huán))和不同側(cè)鏈的重要抗生素。青霉素G (PG)是從青霉素培養(yǎng)液中提??；青霉素V (PV)是在青霉素菌培養(yǎng)時加入側(cè)鏈；青霉素類的其他藥物為半合成制造(人為修飾側(cè)鏈)。由于側(cè)鏈結(jié)構(gòu)不同，青霉素類藥物皮試試劑的命名、抗菌譜和特異性呈現(xiàn)多樣化。隨著科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，新型抗生素層出不窮。而青霉素也在這個激烈的競爭中不斷進步和發(fā)展。其作為預(yù)報人體對青霉素過敏反應(yīng)的試劑，主要經(jīng)歷了以下幾個發(fā)展過程。第一代試劑，1941年，PG被用于臨床治療，良好的療效和幾乎可以忽略的毒性，使它一直被列為一線抗生素。但PG存在的問題是I型過敏反應(yīng)(即刻型過敏反應(yīng))發(fā)生率高(約 4%)，其中每10萬例中可有1 2例為過敏性休克。上世紀(jì)50年代，臨床采用PG50U作皮試，以預(yù)報個體敏感狀態(tài)，陽性率為50%。由于假陽性反應(yīng)過高(在非選擇性人群中約30%)， 特異性低，于是產(chǎn)生了“滾雪球效應(yīng)”，即越來越多對PG并不敏感的患者，由于皮試曾經(jīng)呈假陽性，使得醫(yī)師無法處方，因而其使用率也越來越低，而我國自1950年至今，也一直是采用第一代試劑，目前同樣也存在使用率低的現(xiàn)狀。世界衛(wèi)生組織(WHO)在上世紀(jì)60年代初提出深入研究預(yù)報青霉素I型過敏反應(yīng)試劑的問題。10年后第二代試劑問世，有兩個重要組份青霉噻唑酰-多賴氨酸 (Benzylpenicilloyl-polylysine, BPO-PLL或PLL)，亦稱主抗原決定簇；青霉噻唑羧酸鹽 (Benzylpenicilloate)或青霉烯酸(Benzylpenicillenic acid)和極少量青霉素的混合物，亦稱次要抗原決定簇。該組試劑預(yù)報青霉素I型過敏反應(yīng)正確率高達97. 6%，解決了青霉素使用的安全和假陽性問題，被許多發(fā)達國家廣泛使用。由于目前國際上采用的第二代皮試試劑原料-多賴氨酸是在研究所實驗室中人工合成的，有固定的賴氨酸數(shù)目和分子量。如瑞士的青霉素皮試試劑產(chǎn)品PENKET是由10 個賴氨酸合成，分子量為5000，因此制備BPO-PLL的成本高；也有合成20個賴氨酸作原料， 其分子量為10000。其成本過高，不能廣泛地在發(fā)展中國家推廣應(yīng)用，并且該青霉素皮試試劑的具體制備方法未公開。因此發(fā)明設(shè)計一種制備成本低，以便能供全世界范圍內(nèi)使用的青霉素皮試試劑成為必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種青霉素類藥物皮試試劑及其制備方法，以使其制備成本降低，能夠供全世界范圍內(nèi)的人們使用。
本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下一種青霉素類藥物皮試試劑，包括青霉噻唑酰-多賴氨酸(PPL)和青霉噻唑羧酸鹽(BPNC0)，所述青霉噻唑酰-多賴氨酸(PPL)由下述通式(I)表示:
權(quán)利要求
1. 一種青霉素類藥物皮試試劑，其特征在于，包括青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽，所述青霉噻唑酰-多賴氨酸由下述通式(I )表示
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青霉素類藥物皮試試劑，其特征在于，所述青霉噻唑酰-多賴氨酸中的多賴氨酸的分子量為1000 10000。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青霉素類藥物皮試試劑，其特征在于，所述青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽溶于生理鹽水或生理緩沖液，所述青霉噻唑酰-多賴氨酸的濃度為 0. 035mg/mL，所述青霉噻唑羧酸鹽的濃度為0. 5mg/mL。
4.一種青霉素類藥物皮試試劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟1)分別制備青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽；2)按照青霉烷法測定制備的青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽的純度，所述青霉噻唑酰-多賴氨酸的純度> 90%，所述青霉噻唑羧酸鹽的純度> 60% ；3)分裝純度測定后的青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽，再冷凍干燥，即可。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的青霉素類藥物皮試試劑的制備方法，其特征在于，所述1)中青霉噻唑酰-多賴氨酸的制備包括以下步驟Al.將多賴氨酸與青霉素類抗生素加入盛有氯化鈉溶液的反應(yīng)器皿中，調(diào)節(jié)PH值，使其溶解形成反應(yīng)體系；Bi.于20 25°C，攪拌反應(yīng)體系，并在反應(yīng)體系中加入NaOH調(diào)節(jié)PH至7. 5 14，使多賴氨酸與青霉素類抗生素結(jié)合，通過薄層層析板噴水合茚三酮觀察反應(yīng)體系中是否存在多賴氨酸的游離氨基；Cl.將反應(yīng)結(jié)合的青霉噻唑酰-多賴氨酸反應(yīng)體系中含有的青霉素降價物，過柱純化分離；Dl.將過柱純化后的青霉噻唑酰-多賴氨酸加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，于真空濃縮蒸發(fā)；El.將真空濃縮后的青霉噻唑酰-多賴氨酸加蒸餾水過柱洗脫，收集洗脫液，將其分段用電導(dǎo)儀測定，去除含鹽部分；Fl.將去鹽的青霉噻唑酰-多賴氨酸再蒸發(fā)濃縮后，冷凍干燥，保存于-40°C，待用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的青霉素類藥物皮試試劑的制備方法，其特征在于，所述步驟 Al中多賴氨酸與青霉素的摩爾比為1 :3，氯化鈉溶液的濃度為1M/L，PH值為7. 4。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的青霉素類藥物皮試試劑的制備方法，其特征在于，所述步驟 Bl中，攪拌6 10小時，所述NaOH的濃度為1M/L，將PH值調(diào)至8 10。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的青霉素類藥物皮試試劑的制備方法，其特征在于，所述步驟 Bl中，在層析板噴水合茚三酮后，反應(yīng)體系呈無色，多賴氨酸的游離氨基不存在，加入1M/L 的HCL，調(diào)節(jié)PH至7，或在層析板噴水合茚三酮后，反應(yīng)體系呈淡紅色色，多賴氨酸的游離氨基存在，再加入青霉素類抗生素，繼續(xù)攪拌，直至多賴氨酸的游離氨基不存在。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的青霉素類藥物皮試試劑的制備方法，其特征在于，所述步驟 Dl中，于真空條件下，水溫30 50°C濃縮蒸發(fā)。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的青霉素類藥物皮試試劑的制備方法，其特征在于，步驟1)中青霉噻唑羧酸鹽的制備包括以下步驟A2.將青霉素類抗生素加入盛有蒸餾水的器皿中，于20 25°C攪拌，使其溶解為青霉素類抗生素溶液，所述青霉素溶液的濃度為0. lg/mL ；B2.在青霉素類抗生素溶液中加入NaOH調(diào)節(jié)PH至8 13，于20 25°C保持，攪拌 0. 5 1. 5小時；C2.然后將反應(yīng)器皿置入冰水混合物中，在反應(yīng)器皿內(nèi)滴入1M/L的HCL，調(diào)節(jié)PH至7，停止反應(yīng)；D2.將反應(yīng)后的體系轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，于真空條件下，水溫30 50°C濃縮蒸發(fā)，冷凍干燥，保存于_40°C，待用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種青霉素類藥物皮試試劑及其制備方法，所述青霉素類藥物皮試試劑，包括先后單獨使用的青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽，所述青霉噻唑酰-多賴氨酸由下述通式(Ⅰ)表示 (Ⅰ)其中，所述青霉噻唑酰-多賴氨酸中多賴氨酸的分子量為1000～10000；所述青霉素類藥物皮試試劑的制備方法，包括以下步驟1)分別制備青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽；2)按照青霉烷法測定制備的青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽的純度；3)分裝純度測定后的青霉噻唑酰-多賴氨酸和青霉噻唑羧酸鹽，再冷凍干燥，即可。
文檔編號A61K49/00GK102370994SQ20101024848
公開日2012年3月14日 申請日期2010年8月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月9日
發(fā)明者朱大勛 申請人:朱大勛