專利名稱：杜仲化學(xué)成分作為血管保護(hù)劑的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及傳統(tǒng)中藥材杜仲中的若干化學(xué)成分的新用途，特別是杜仲中的千葉素 A、漢黃芩素、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、白樺酯酸、京尼 平苷作為血管保護(hù)劑的制藥用途。
背景技術(shù)：
人體血管系統(tǒng)有其自身的正常代謝平衡功能，但是出現(xiàn)血管功能異常，可造成對 血管系統(tǒng)的損害。如血管平滑肌細(xì)胞增殖是動脈粥樣硬化斑塊形成和冠狀動脈成形術(shù)后發(fā) 生再狹窄的病理基礎(chǔ)；平滑肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高會引起血管收縮，而血管舒縮功能的 異常會導(dǎo)致高血壓的發(fā)生。一些血管保護(hù)劑可通過拮抗高鉀引起的血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)鈣離 子濃度的升高以及拮抗去甲腎上腺素引起的血管收縮而發(fā)揮降壓作用，通過抑制血管平滑 肌細(xì)胞增殖防治動脈粥樣硬化斑塊形成，從而維持血管的正常生理功能，在防治高血壓、動 脈粥樣硬化、血管成形術(shù)后再狹窄、冠心病、腦血管病中具有重要的作用。杜仲為杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的樹皮，又名思仙(《本經(jīng)》)， 木綿、思仲(《別錄》)，石思仙(《本草衍義補(bǔ)遺》)。味甘微辛，性溫入肝、腎經(jīng)。具有補(bǔ)肝 腎，強(qiáng)筋骨，安胎的功效。用于治療腰脊酸疼，足膝痿弱，小便余浙，陰下濕癢，胎漏欲墮，胎 動不安，高血壓。鑒于杜仲良好的效果，藥物學(xué)家對其化學(xué)成分進(jìn)行了廣泛的研究。目前從杜仲中 分離的生物活性成分主要有三類，木質(zhì)素類，環(huán)烯醚萜類和黃酮類等化學(xué)成分?，F(xiàn)代藥理研 究表明，杜仲的降壓作用與松脂醇二葡萄糖苷、生物堿、綠原酸、桃葉珊瑚苷和糖類有關(guān)。抗 腫瘤作用與木質(zhì)素、苯丙素和環(huán)烯醚萜有關(guān)。其水煎液和醇提液均有補(bǔ)腎、增強(qiáng)免疫作用。 杜仲藥材還有抗氧化、抗衰老、抗肌肉骨骼老化、抗菌、抗病毒的作用。CN101347418 (中國專利申請?zhí)?00710044099. 5，
公開日2009 年 1 月 21 日)研 究了 8-0-4'型木質(zhì)素在制備抗補(bǔ)體活性藥物中的用途，該發(fā)明據(jù)說從中藥杜仲中分離提 取得到化合物8-0-4'型木脂素，經(jīng)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)對在補(bǔ)體系統(tǒng)的經(jīng)典和旁路途徑激活所 引發(fā)的細(xì)胞溶血有抑制，對補(bǔ)體系統(tǒng)的經(jīng)典和旁路途徑激活有明顯抑制作用；藥理試驗(yàn)結(jié) 果證明，具有顯著的抗補(bǔ)體作用，且有效濃度低。CN101260131(中國專利申請?zhí)?00810031122. 1，
公開日:2008 年 9 月 10 曰)公 開了從杜仲中提取得到環(huán)烯醚萜活性部位及單體京尼平甙酸(geniposidic acid，GPA)、京 尼平甙(geniposidhGP)及桃葉珊瑚甙(aUCUbin，AU)的方法，該方法以杜仲(皮、葉或籽) 為原料，采用常規(guī)浸提法、超聲波提取法或微波提取法對原材料進(jìn)行提取，以溶劑萃取、特 種吸附劑吸附分離等方法對提取液進(jìn)行初步純化，得到環(huán)烯醚萜活性部位(環(huán)烯醚萜總量 不低于50% )，再采用制備高效液相色譜技術(shù)，以醇-水溶液為流動相，對GPA、GP和AU進(jìn) 行分離，低溫濃縮并冷凍干燥，得到以上三種單體，其含量均不低于90 %?，F(xiàn)有技術(shù)尚未見有關(guān)于杜仲特別是其提取物，更特別地是其單體化學(xué)成分具有例 如血管保護(hù)劑和/或降血壓等的作用。因此，對杜仲化學(xué)基礎(chǔ)進(jìn)行進(jìn)一步的研究，探尋具有生理活性的組成，這對于為臨床上相關(guān)疾病的治療提供新的途徑而言具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是對杜仲化學(xué)基礎(chǔ)進(jìn)行進(jìn)一步的研究，探尋具有生理活性的組成， 為臨床上相關(guān)疾病的治療提供新的途徑。本發(fā)明人對杜仲進(jìn)行系統(tǒng)的植物化學(xué)分離，令人 意外地發(fā)現(xiàn)，中藥材杜仲，特別是其提取物，更特別地是從杜仲中提取的某些單體化學(xué)成分 具有有效的血管保護(hù)劑和/或降血壓等的作用。本發(fā)明基于上述發(fā)現(xiàn)而得以完成。為此，本發(fā)明第一方面提供了杜仲在制備用于作為血管保護(hù)劑和/或降血壓劑的 藥物中的用途，或者在制備用于治療和/或預(yù)防血管增生性疾病的藥物中的用途。根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的用途，其中所述血管保護(hù)劑用于治療和/或預(yù)防選 自下列的疾病或病癥血管性病癥包括但不限于動脈粥樣硬化、高血壓、血管成形術(shù)后再狹 窄、冠心病、腦血管病。根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的用途，其中所述血管增生性疾病選自下列的疾病或 病癥血管性病癥包括但不限于動脈粥樣硬化、高血壓、血管成形術(shù)后再狹窄、冠心病、腦血 管病、腎小球疾病、肺動脈高壓、糖尿病性血管病變、脈管炎，偏頭痛，血管性頭痛。根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物給予哺乳動物，其給藥劑量為 所述哺乳動物每天每kg體重相當(dāng)于杜仲藥材l_40g，優(yōu)選2-20g，更優(yōu)選5-10g。本發(fā)明第二方面提供了杜仲提取物在制備用于作為血管保護(hù)劑和/或降血壓劑 的藥物中的用途，或者在制備用于治療和/或預(yù)防血管增生性疾病的藥物中的用途。根據(jù)本發(fā)明第二方面任一項(xiàng)的用途，其中所述血管保護(hù)劑用于治療和/或預(yù)防選 自下列的疾病或病癥血管性病癥包括但不限于動脈粥樣硬化、高血壓、血管成形術(shù)后再狹 窄、冠心病、腦血管病、腎小球疾病、肺動脈高壓、糖尿病性血管病變、脈管炎，偏頭痛，血管 性頭痛。根據(jù)本發(fā)明第二方面任一項(xiàng)的用途，其中所述血管增生性疾病選自下列的疾病或 病癥血管性病癥包括但不限于動脈粥樣硬化、高血壓、血管成形術(shù)后再狹窄、冠心病、腦血 管病、腎小球疾病、肺動脈高壓、糖尿病性血管病變、脈管炎，偏頭痛，血管性頭痛。根據(jù)本發(fā)明第二方面任一項(xiàng)的用途，其中所述的杜仲提取物中包含至少一種選自 以下的成分京尼平苷(在本文可稱為EUB30-1)、漢黃芩素(在本文可稱為EUC-4)、千葉 素A(在本文可稱為EUC-6)、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2' ,4'-三羥基二氫查耳酮 (在本文可稱為EUE-3)、和白樺脂酸(在本文可稱為EUC-2)。根據(jù)本發(fā)明第二方面任一項(xiàng)的用途，其中所述的杜仲提取物中包含以下的成分 京尼平苷、漢黃芩素、千葉素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羥基二氫查耳 酮、和白樺脂酸。根據(jù)本發(fā)明第二方面任一項(xiàng)的用途，其中所述京尼平苷、漢黃芩素、千葉素Α、 α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2' ,4'-三羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸的總量占所述 提取物總重量的10-90% (w/w,即重量百分?jǐn)?shù)，下同)，優(yōu)選20 80% (w/w)，更優(yōu)選30 60% (w/w) ο根據(jù)本發(fā)明第二方面任一項(xiàng)的用途，其中所述的藥物的劑量為所述哺乳動物每天 每kg體重相當(dāng)于杜仲藥材l_40g，優(yōu)選2-20g，更優(yōu)選5-10g。根據(jù)本發(fā)明第二方面任一項(xiàng)的用途，其中所述的杜仲提取物是經(jīng)如下步驟制備
5的將杜仲用含水乙醇溶液提取；使所得醇提取物用石油醚萃取，棄醚層，將殘余物濃縮， 干燥，得提取物；或者使所得醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，將各萃 取物分別回收溶劑后得固形物，合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物，得提 取物。 根據(jù)本發(fā)明第二方面任一項(xiàng)的用途，其中所述的杜仲提取物是經(jīng)如下步驟制備 的 a)將杜仲用2 20倍量(優(yōu)選5 15倍量，更優(yōu)選8 12倍量，例如10倍量) 的60 98% (優(yōu)選70 98%，更優(yōu)選80 98%，例如80%、85%、90%、95%或98%)乙 醇浸泡5 24小時(優(yōu)選5 18小時，更優(yōu)選8 15小時)；b)回流提取0. 5 10小時(優(yōu)選0. 5 8小時，更優(yōu)選0. 5 6小時，更優(yōu)選
0.5 4小時，更優(yōu)選1 4小時，例如1小時、2小時、3小時、4小時)，傾出提取液；c)任選地使步驟b)的藥渣重復(fù)進(jìn)行步驟a)和步驟b) 1 3次(例如1次、2次、 3次)；d)合并步驟b)和步驟C)的提取液，過濾，濾液回收乙醇至在室溫下的密度約為
1.15-1. 20的濃縮液；e)使步驟d)的濃縮液用石油醚萃取，棄醚層，將殘余物濃縮，干燥，得提取物；或 者，e)使步驟d)的濃縮液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，將各萃取物分別回 收溶劑后得固形物，合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物，得提取物。上述方法所得的提取物的化學(xué)組成可通過本發(fā)明下文所述的純化步驟知曉，或者 直接進(jìn)行色譜分析測得該提取物中包含至少一種選自以下的成分京尼平苷、漢黃芩素、千 葉素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸。優(yōu)選 的是包含全部的上述5種成分。本發(fā)明第三方面提供了選自下列成分的一種或多種的組合在制備作為血管保護(hù) 劑和/或降血壓劑的藥物中的用途，或者在制備用于治療和/或預(yù)防血管增生性疾病的藥 物中的用途京尼平苷、漢黃芩素、千葉素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三 羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸。根據(jù)本發(fā)明第三方面任一項(xiàng)的用途，其中所述血管保護(hù)劑用于治療和/或預(yù)防選 自下列的疾病或病癥血管性病癥包括但不限于動脈粥樣硬化、高血壓、血管成形術(shù)后再狹 窄、冠心病、腦血管病、腎小球疾病、肺動脈高壓、糖尿病性血管病變、脈管炎，偏頭痛，血管 性頭痛。根據(jù)本發(fā)明第三方面任一項(xiàng)的用途，其中所述血管增生性疾病選自下列的疾病或 病癥血管性病癥包括但不限于動脈粥樣硬化、高血壓、血管成形術(shù)后再狹窄、冠心病、腦血 管病、腎小球疾病、肺動脈高壓、糖尿病性血管病變、脈管炎，偏頭痛，血管性頭痛。根據(jù)本發(fā)明第三方面任一項(xiàng)的用途，其為下列成分在制備作為血管保護(hù)劑和/或 降血壓劑的藥物中的用途京尼平苷、漢黃芩素、千葉素Α、α -氧-β -D-葡萄吡喃糖基-4， 2' ,4' _三羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸。根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物給予哺乳動物，其給藥劑量為 所述哺乳動物每天每kg體重相當(dāng)于杜仲藥材l_40g，優(yōu)選2-20g，更優(yōu)選5-10g。根據(jù)本發(fā)明第三方面任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物給予哺乳動物，以所述哺乳動 物每天每kg體重計(jì)，其中所述各成分單獨(dú)或任意組合時的劑量可以相互獨(dú)立地分別為
權(quán)利要求
杜仲在制備用于作為血管保護(hù)劑和/或降血壓劑的藥物中的用途，或者在制備用于治療和/或預(yù)防血管增生性疾病的藥物中的用途。
2.杜仲提取物在制備用于作為血管保護(hù)劑和/或降血壓劑的藥物中的用途，或者在制 備用于治療和/或預(yù)防血管增生性疾病的藥物中的用途。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的用途，其中所述血管增生性疾病選自下列的疾病或病癥血管性 病癥包括但不限于動脈粥樣硬化、高血壓、血管成形術(shù)后再狹窄、冠心病、腦血管病、腎小球 疾病、肺動脈高壓、糖尿病性血管病變、脈管炎，偏頭痛，血管性頭痛。
4.根據(jù)權(quán)利要求2至3任一項(xiàng)的用途，其中所述的杜仲提取物中包含至少一種選自以 下的成分京尼平苷、漢黃芩素、千葉素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羥 基二氫查耳酮、和白樺脂酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求2至4任一項(xiàng)的用途，其中所述京尼平苷、漢黃芩素、千葉素Α、 α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2' ,4' _三羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸的總量占所述提 取物總重量的10-90% (w/w) ο
6.根據(jù)權(quán)利要求2至5任一項(xiàng)的用途，其中所述的杜仲提取物是經(jīng)如下步驟制備的 將杜仲用含水乙醇溶液提??；使所得醇提取物用石油醚萃取，棄醚層，將殘余物濃縮，干燥， 得提取物；或者使所得醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，將各萃取物 分別回收溶劑后得固形物，合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物，得提取 物。
7.選自下列成分的一種或多種的組合在制備作為血管保護(hù)劑和/或降血壓劑的藥物 中的用途，或者在制備用于治療和/或預(yù)防血管增生性疾病的藥物中的用途京尼平苷、漢 黃芩素、千葉素Α、α_氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，其中所述血管增生性疾病選自下列的疾病或病癥血管性 病癥包括但不限于動脈粥樣硬化、高血壓、血管成形術(shù)后再狹窄、冠心病、腦血管病、腎小球 疾病、肺動脈高壓、糖尿病性血管病變、脈管炎，偏頭痛，血管性頭痛。
9.根據(jù)權(quán)利要求7至8任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物給予哺乳動物，以所述哺乳動物每 天每kg體重計(jì)，其中所述各成分單獨(dú)或任意組合時的劑量可以相互獨(dú)立地分別為成分劑量(mg/kg體重/天)京尼平苷0.01-4mg漢黃芩素0.05-2mg千葉素A0.05-2mgα-氧-P-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4 三羥基二氫查耳酮0.05-2mg白樺脂酸0.01-4mg
10.根據(jù)權(quán)利要求7至9任一項(xiàng)的用途，其中下列成分的一種或多種的組合是從杜仲中 提取得到京尼平苷、漢黃芩素、千葉素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸。
11.一種用于作為血管保護(hù)劑和/或降血壓劑或者用于治療和/或預(yù)防哺乳動物(特 別是人)血管增生性疾病的藥物組合物，其中包含治療和/或預(yù)防有效量的杜仲提取物以 及任選的藥學(xué)可接受的賦形劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的藥物組合物，其中所述的杜仲提取物中包含至少一種選自以下 的成分京尼平苷、漢黃芩素、千葉素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羥基 二氫查耳酮、和白樺脂酸。
13.一種用于作為血管保護(hù)劑和/或降血壓劑或者用于治療和/或預(yù)防哺乳動物(特 別是人)血管增生性疾病的藥物組合物，其中包含治療和/或預(yù)防有效量的至少一種藥物 活性成分以及任選的藥學(xué)可接受的賦形劑，所述的藥物活性成分選自京尼平苷、漢黃芩 素、千葉素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及杜仲化學(xué)成分作為血管保護(hù)劑的新用途。具體地說，本發(fā)明涉及杜仲或杜仲提取物在制備用于作為血管保護(hù)劑和/或降血壓劑的藥物中的用途，或者在制備用于治療和/或預(yù)防血管增生性疾病的藥物中的用途。其中所述的杜仲提取物中包含至少一種選自以下的成分京尼平苷、漢黃芩素、千葉素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2′，4′-三羥基二氫查耳酮、和白樺脂酸。根據(jù)本發(fā)明，所述5種化學(xué)成分或者包含它們的杜仲提取物可以用作有效的血管保護(hù)劑和/或降血壓劑，用于治療和/或預(yù)防血管增生性疾病。
文檔編號A61K31/56GK101972294SQ201010505169
公開日2011年2月16日 申請日期2010年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月9日
發(fā)明者劉二偉, 張伯禮, 樊官偉, 王虹, 王躍飛, 蘇艷芳, 高秀梅 申請人:天津中醫(yī)藥大學(xué)