專利名稱：一種用于治療癌癥的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種用于治療癌癥的藥物組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
1893年有位醫(yī)生發(fā)現(xiàn)流感大流行后，有些白血病病人的病情好轉(zhuǎn)，以后不斷發(fā)現(xiàn) 在流感病毒流行后，有些腫瘤發(fā)生自發(fā)緩解。1912年意大利醫(yī)生D印ace發(fā)現(xiàn)一個患宮頸癌 的婦女，在被犬咬傷后接種狂犬病疫苗，使宮頸癌得到緩解。這是首次人工注射病毒疫苗引 起腫瘤緩解的例證。一位匈牙利養(yǎng)雞人患晚期胃癌，在一次病毒性雞瘟流行后，他的癌腫意 外地消退了。在此啟發(fā)下，醫(yī)生們對一位前列腺癌的病人進行活的新城疫病毒接種，數(shù)次治 療后，癌腫全部消退。另外還發(fā)現(xiàn)淋巴細胞性白血病患者在治療過程中患了麻疹，結(jié)果使白 血病長期緩解。人們從這些偶然的現(xiàn)象中得到啟發(fā)，并大膽地進行嘗試性治療，由此為病毒 的腫瘤治療積累了豐富的實踐經(jīng)驗。welA等于1970年報告，在試驗過的53種病毒中，已證 明有38種對人或動物的腫瘤有治療作用，其中28種為RNA病毒，10種為DNA病毒。目前 臨床上已試用治療部分腫瘤，如惡性黑色素瘤，白血病、宮頸癌及惡性淋巴瘤，還有胃癌、乳 腺癌和膀胱癌等。所使用的病毒包括雞新城疫病毒、和細小病毒等。用病毒治療腫瘤，在許 多報告病例中的確取得滿意的療效。在病毒腫瘤治療中應(yīng)注意兩個問題①治療對象治 療腫瘤的病毒進入機體后，機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)來限制病毒擴散，故這種治療往往僅能取得 短期緩解。因而治療應(yīng)當(dāng)早用，即在瘤細胞不多時，效果好。②病毒的選擇理想治療腫瘤 的病毒，應(yīng)是高效而無毒，但實際很難找到這樣的病毒。雞新城疫病毒的抗腫瘤機制十分復(fù) 雜，大致有下面三種1.雞新城疫病毒對腫瘤細胞直接毒性作用?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)很多病毒能直 接殺死腫瘤細胞，生物學(xué)家正努力尋找特異性殺傷腫瘤細胞而對正常細胞投有‘毒性”的病 毒。分裂異常旺盛的腫瘤細胞是雞新城疫病毒的理想宿主。2.免疫性溶解腫瘤細胞的作 用。雞新城疫病毒能使細胞表面病毒粒子發(fā)芽引起腫瘤細胞膜免疫原性增加，這樣機體產(chǎn) 生的免疫反應(yīng)不僅針對病毒而且包括病毒所寄生的腫瘤細胞。這一機制在病毒抗腫瘤中起 重要作用。3.干擾作用。人類的許多腫瘤發(fā)生與病毒的感染有密切聯(lián)系，當(dāng)機體或腫瘤細 胞再感染另一種雞新城疫病毒時，就會產(chǎn)生IFN(干擾素)，干擾腫瘤病毒，并抑制腫瘤細胞 的生長。實驗證明IFN對動物的病毒性腫瘤有良好的治療作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種用于治療癌癥的藥物組合物。本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述用于治療癌癥的藥物組合物的制 備方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是一種用于治療癌癥的藥物組合物，主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其 中每1000 10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 10mg、雞新城疫病毒的血凝效價為1 640。優(yōu)選的，上述用于治療癌癥的藥物組合物，是由下述方法得到的(1)選用雞新城疫病毒在9 13日齡雞胚尿囊腔中于37 40°C培養(yǎng)96 130 小時，吸取含有雞新城疫病毒的雞胚新城疫病毒尿囊液，并用生理鹽水調(diào)節(jié)病毒血凝效價 至 1 640 ；(2)將步驟(1)收取的雞胚新城疫病毒尿囊液，按每1000 10000ml雞胚新城疫 病毒尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 IOmg進行混合；(3)將步驟O)中配好的混合物進行過濾除菌，即得。優(yōu)選的，上述用于治療癌癥的藥物組合物，其中每10000ml雞胚新城疫病毒尿囊 液中DNA酶2mg和RNA酶ang、雞新城疫病毒的血凝效價為1 640。上述用于治療癌癥的藥物組合物的制備方法，具體制備步驟如下(1)選用雞新城疫病毒在9 13日齡雞胚尿囊腔中于37 40°C培養(yǎng)96 130 小時，吸取含有雞新城疫病毒的雞胚新城疫病毒尿囊液，并用生理鹽水調(diào)節(jié)病毒血凝效價 至 1 640 ；(2)將步驟(1)收取的雞胚新城疫病毒尿囊液，按每1000 10000ml雞胚新城疫 病毒尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 IOmg進行混合；(3)將步驟O)中配好的混合物進行過濾除菌，即得。優(yōu)選的，上述用于治療癌癥的藥物組合物的制備方法，其中步驟O)中按每 10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶2mg進行混合。本發(fā)明的有益效果是上述用于治療癌癥的藥物組合物能提高機體免疫功能，有效抑制腫瘤、標本兼治， 其制備方法簡單，適合規(guī)?；I(yè)生產(chǎn)的需要。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明所述技術(shù)方案作進一步的說明。實施例1一種用于治療癌癥的藥物組合物，主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其 中每10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶ang、雞新城疫病毒的血凝效價 為1 640。具體制備方法如下(1)雞胚選擇選擇受精雞蛋于38°C孵化10天，檢出死胚和寡蛋；(2)病毒接種①雞新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；②次日在無菌條件下將雞胚移入操作間，在接種部位打個小孔；③用Iml注射器吸取雞新城疫病毒液0. anl，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；④于38°C培養(yǎng)96小時；(3)收獲雞新城疫病毒①在無菌條件下對培養(yǎng)后的雞胚進行消毒；②用無菌的大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取尿囊液；③收獲完的雞新城疫病毒液收集到一個瓶子里，測效價，并用生理鹽水調(diào)節(jié)血凝 效價為1 640，得到10000ml尿囊液；(4)加酶混合在無菌室內(nèi)，將aiig的DNA酶和^iig的RNA酶加入上述步驟(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)純化①將經(jīng)過酶處理好的尿囊液拿進無菌室，在無菌條件下將尿囊液過濾除菌，進行 分裝。實施例2一種用于治療癌癥的藥物組合物，主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其 中每10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶3mg和RNA酶:3mg、雞新城疫病毒的血凝效價 為1 640。具體制備方法如下(1)雞胚選擇選擇受精雞蛋于40°C孵化9天，檢出死胚和寡蛋；(2)病毒接種①雞新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；②次日在無菌條件下將雞胚移入操作間，在接種部位打個小孔；③用Iml注射器吸取雞新城疫病毒液0. :3ml，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；④于37°C培養(yǎng)130小時；(3)收獲雞新城疫病毒①在無菌條件下對培養(yǎng)后的雞胚進行消毒；②用無菌的大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取尿囊 液；③收獲完的雞新城疫病毒液收集到一個瓶子里，測效價，并用生理鹽水調(diào)節(jié)血凝 效價為1 640，得到10000ml尿囊液；(4)加酶混合在無菌室內(nèi)，將:3mg的DNA酶和!Bmg的RNA酶加入上述步驟(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)純化①將經(jīng)過酶處理好的尿囊液拿進無菌室，在無菌條件下將尿囊液過濾除菌，進行 分裝。實施例3一種用于治療癌癥的藥物組合物，主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其 中每IOOOml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶Img和RNA酶lmg、雞新城疫病毒的血凝效價 為1 640。具體制備方法如下(1)雞胚選擇選擇受精雞蛋于39°C孵化12天，檢出死胚和寡蛋；(2)病毒接種
①雞新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；②次日在無菌條件下將雞胚移入操作間，在接種部位打個小孔；③用Iml注射器吸取雞新城疫病毒液0. 1ml，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；④于40°C培養(yǎng)105小時；(3)收獲雞新城疫病毒①在無菌條件下對培養(yǎng)后的雞胚進行消毒；②用無菌的大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取尿囊 液；③收獲完的雞新城疫病毒液收集到一個瓶子里，測效價，并用生理鹽水調(diào)節(jié)血凝 效價為1 640，得到IOOOml尿囊液；(4)加酶混合在無菌室內(nèi)，將Img的DNA酶和Img的RNA酶加入上述步驟(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)純化①將經(jīng)過酶處理好的尿囊液拿進無菌室，在無菌條件下將尿囊液過濾除菌，進行 分裝。實施例4一種用于治療癌癥的藥物組合物，主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其 中每5000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶5mg和RNA酶5mg、雞新城疫病毒的血凝效價 為1 640。具體制備方法如下(1)雞胚選擇選擇受精雞蛋于38°C孵化13天，檢出死胚和寡蛋；(2)病毒接種①雞新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；②次日在無菌條件下將雞胚移入操作間，在接種部位打個小孔；③用Iml注射器吸取雞新城疫病毒液0. anl，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；④于39°C培養(yǎng)115小時；(3)收獲雞新城疫病毒①在無菌條件下對培養(yǎng)后的雞胚進行消毒；②用無菌的大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取尿囊 液；③收獲完的雞新城疫病毒液收集到一個瓶子里，測效價，并用生理鹽水調(diào)節(jié)血凝 效價為1 640，得到5000ml尿囊液；(4)加酶混合在無菌室內(nèi)，將5mg的DNA酶和5mg的RNA酶加入上述步驟(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)純化①將經(jīng)過酶處理好的尿囊液拿進無菌室，在無菌條件下將尿囊液過濾除菌，進行 分裝。
實施例5一種用于治療癌癥的藥物組合物，主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其 中每10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶9mg和RNA酶9mg、雞新城疫病毒的血凝效價 為1 640。具體制備方法如下(1)雞胚選擇選擇受精雞蛋于40°C孵化10天，檢出死胚和寡蛋；(2)病毒接種①雞新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；②次日在無菌條件下將雞胚移入操作間，在接種部位打個小孔；③用Iml注射器吸取雞新城疫病毒液0. :3ml，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；④于39°C培養(yǎng)100小時；(3)收獲雞新城疫病毒①在無菌條件下對培養(yǎng)后的雞胚進行消毒；②用無菌的大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取尿囊 液；③收獲完的雞新城疫病毒液收集到一個瓶子里，測效價，并用生理鹽水調(diào)節(jié)血凝 效價為1 640，得到10000ml尿囊液；(4)加酶混合在無菌室內(nèi)，將9mg的DNA酶和9mg的RNA酶加入上述步驟(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)純化①將經(jīng)過酶處理好的尿囊液拿進無菌室，在無菌條件下將尿囊液過濾除菌，進行 分裝。實施例6一種用于治療癌癥的藥物組合物，主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其 中每8000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶IOmg和RNA酶10mg、雞新城疫病毒的血凝效 價為1 640。具體制備方法如下(1)雞胚選擇選擇受精雞蛋于38°C孵化9天，檢出死胚和寡蛋；(2)病毒接種①雞新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；②次日在無菌條件下將雞胚移入操作間，在接種部位打個小孔；③用Iml注射器吸取雞新城疫病毒液O.aiil，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；④于37°C培養(yǎng)125小時；(3)收獲雞新城疫病毒①在無菌條件下對培養(yǎng)后的雞胚進行消毒；②用無菌的大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取尿囊 液；③收獲完的雞新城疫病毒液收集到一個瓶子里，測效價，并用生理鹽水調(diào)節(jié)血凝效價為1 640，得到8000ml尿囊液；(4)加酶混合在無菌室內(nèi)，將IOmg的DNA酶和IOmg的RNA酶加入上述步驟(3)得到的尿囊液 中，混合均勻；(5)純化①將經(jīng)過酶處理好的尿囊液拿進無菌室，在無菌條件下將尿囊液過濾除菌，進行 分裝。實施例7一種用于治療癌癥的藥物組合物，主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其 中每5000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶ang、雞新城疫病毒的血凝效價 為1 640。具體制備方法如下(1)雞胚選擇選擇受精雞蛋于38°C孵化9天，檢出死胚和寡蛋；(2)病毒接種①雞新城疫病毒接種的前一天畫出氣室和接種部位；②次日在無菌條件下將雞胚移入操作間，在接種部位打個小孔；③用Iml注射器吸取雞新城疫病毒液0. 1ml，注入雞胚內(nèi)，用石蠟封口 ；④于37°C培養(yǎng)96小時；(3)收獲雞新城疫病毒①在無菌條件下對培養(yǎng)后的雞胚進行消毒；②用無菌的大鑷子敲碎蛋殼，用無菌的小鑷子扒開囊膜，用無菌吸管吸取尿囊 液；③收獲完的雞新城疫病毒液收集到一個瓶子里，測效價，并用生理鹽水調(diào)節(jié)血凝 效價為1 640，得到5000ml尿囊液；(4)加酶混合在無菌室內(nèi)，將2mg的DNA酶和2mg的RNA酶加入上述步驟(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)純化將經(jīng)過酶處理好的尿囊液拿進無菌室，在無菌條件下將尿囊液過濾除菌，進行分裝。實施例8應(yīng)用小白鼠做抗腫瘤實驗，試驗共分為4組，每組16只小鼠，小鼠腋下接種H22肝 癌細胞，制作肝癌模型。各試驗藥物均瘤內(nèi)注射，每只0. 1毫升，每天一次，用藥療程為7天， 試驗結(jié)果見表1。表1
組別藥品小鼠(只)用藥方案用藥次數(shù)抑瘤率(％ )1生理鹽水161次/天7次
權(quán)利要求
1.一種用于治療癌癥的藥物組合物，其特征在于主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA 酶組成，其中每1000 10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶 1 10mg、雞新城疫病毒的血凝效價為1 640。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療癌癥的藥物組合物，其特征在于是由下述方法得 到的(1)選用雞新城疫病毒在9 13日齡雞胚尿囊腔中于37 40°C培養(yǎng)96 130小 時，吸取含有雞新城疫病毒的雞胚新城疫病毒尿囊液，并用生理鹽水調(diào)節(jié)病毒血凝效價至 1 640 ；(2)將步驟(1)收取的雞胚新城疫病毒尿囊液，按每1000 10000ml雞胚新城疫病毒 尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 IOmg進行混合；(3)將步驟O)中配好的混合物進行過濾除菌，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于治療癌癥的藥物組合物，其特征在于其中每 10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶ang、雞新城疫病毒的血凝效價為 1 640。
4.一種權(quán)利要求1或2所述的用于治療癌癥的藥物組合物的制備方法，其特征在于 具體制備步驟如下(1)選用雞新城疫病毒在9 13日齡雞胚尿囊腔中于37 40°C培養(yǎng)96 130小 時，吸取含有雞新城疫病毒的雞胚新城疫病毒尿囊液，并用生理鹽水調(diào)節(jié)病毒血凝效價至 1 640 ；(2)將步驟(1)收取的雞胚新城疫病毒尿囊液，按每1000 10000ml雞胚新城疫病毒 尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 IOmg進行混合；(3)將步驟O)中配好的混合物進行過濾除菌，即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于治療癌癥的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中 步驟O)中按每10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶2mg進行混合。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于治療癌癥的藥物組合物及制備方法，所述組合物主要由雞新城疫病毒、DNA酶和RNA酶組成，其中每1000～10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中含有DNA酶1～10mg和RNA酶1～10mg、雞新城疫病毒的血凝效價為1∶640；制備方法為(1)選用雞新城疫病毒在雞胚尿囊腔中進行培養(yǎng)，吸取尿囊液并用生理鹽水調(diào)節(jié)病毒血凝效價至1∶640；(2)按每1000～10000ml雞胚新城疫病毒尿囊液中含有DNA酶1～10mg和RNA酶1～10mg進行混合；(3)將配好的混合物進行過濾除菌，即得；所述用于治療癌癥的藥物組合物能有效抑制腫瘤，其制備方法簡單，適合規(guī)模化工業(yè)生產(chǎn)的需要。
文檔編號A61K38/46GK102139097SQ20111007462
公開日2011年8月3日 申請日期2011年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月25日
發(fā)明者古長慶, 王國新, 王智佳, 趙鋼 申請人:天津濟命生生物科技有限公司