專(zhuān)利名稱：磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的應(yīng)用，尤其涉及磷酸肌酸鈉用于制備治療多種原因引起的休克的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
休克是指由于心排量不足或周?chē)鞣植籍惓Ｒ鹬車(chē)M織的灌注量不足，不能維持生命需要的一種狀態(tài)，通常都有低血壓和少尿。休克可由低血容量、血管擴(kuò)張、心源性或這些因素綜合引起。休克的基礎(chǔ)損害是低血壓所致的各器官、組織灌注減少，于是由于O2的傳送或攝取不足，組織細(xì)胞不能維持有氧代謝的需要，而轉(zhuǎn)為無(wú)氧代謝，致使乳酸的產(chǎn)生和積聚增加。隨著休克的持續(xù)，臟器功能出現(xiàn)障礙，隨之以不可逆的細(xì)胞損害和死亡。近年來(lái)，隨著對(duì)休克發(fā)病機(jī)制的新認(rèn)識(shí)，休克治療措施也得以相應(yīng)發(fā)展，出現(xiàn)了許多新的抗休克藥物，它們大體可分為3種類(lèi)型第一類(lèi)是在較老抗休克藥物基礎(chǔ)上向增強(qiáng)療效、減少不良反應(yīng)或向定向作用點(diǎn)上發(fā)展的抗休克藥物，如新型腎上腺素能激動(dòng)劑、阿片受體拮抗劑、鈣通道阻滯劑、花生四烯酸代謝產(chǎn)物抑制劑或拮抗劑；第二類(lèi)是發(fā)現(xiàn)新用途的抗休克藥物如磷酸二脂酶抑制劑；第三類(lèi)就是近年來(lái)出現(xiàn)的新型抗休克藥物，如休克細(xì)胞因子拮抗藥物以及內(nèi)毒素拮抗藥物等。抗休克的藥物種類(lèi)雖然較多，但大多數(shù)藥物的抗休克機(jī)理在于對(duì)于休克時(shí)由于組織缺血缺氧狀態(tài)下無(wú)氧代謝反應(yīng)及由此產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物的生成都是比較單一的被動(dòng)拮抗、阻斷或抑制，從而減少因休克對(duì)生命的影響。顯然，這些抗休克藥物不能真正減少有氧呼吸的發(fā)生，減少因缺血缺氧對(duì)組織的影響，不能起到主動(dòng)保護(hù)作用，同時(shí)藥物安全性存在一定風(fēng)險(xiǎn)。磷酸肌酸是肌體如心肌、骨骼肌、腦、腎、視網(wǎng)膜等高耗能組織細(xì)胞內(nèi)一種重要成分。它于1927年首先在肌肉中被發(fā)現(xiàn)，至上世紀(jì)七十年代清楚了它的主要生理作用第一， 它是細(xì)胞內(nèi)能量代謝的緩沖物質(zhì)。由于它的作用，上述組織或細(xì)胞內(nèi)的ATP含量才能基本保持恒定，不至于因消耗能量的增加而有大的變化。第二，它是能量的載體。磷酸肌酸分子中的高能磷酸鍵來(lái)自線粒體產(chǎn)生的ATP分子，磷酸肌酸分子攜帶著來(lái)自ATP分子的高能磷酸鍵在胞漿內(nèi)被酶促轉(zhuǎn)運(yùn)至耗能部位(如肌纖維，肌漿網(wǎng)，細(xì)胞膜等)，使那里不斷產(chǎn)生的 ADP得以重新被磷酸化。1974年，英國(guó)人發(fā)現(xiàn)了磷酸肌酸有保護(hù)細(xì)胞膜的作用，從此開(kāi)始了對(duì)它的藥理作用系統(tǒng)性研究。經(jīng)過(guò)多年的努力，它作為藥物(針劑)于九十年代中期國(guó)外開(kāi)始在臨床上使用，在心內(nèi)科被用于心肌梗死的治療，糾正心肌梗死發(fā)展前期的心室心律不齊；在心外科它被添加至停搏液中，使手術(shù)后病人心臟的功能快速恢復(fù)正常。磷酸肌酸鈉自上市以來(lái)，主要作為缺血缺氧狀態(tài)下的心肌保護(hù)功能使用，開(kāi)發(fā)和使用，實(shí)際上，由于其具有(1)由于參與能量代謝。磷酸肌酸分子中的高能磷酸鍵來(lái)自線粒體產(chǎn)生的ATP分子，磷酸肌酸分子攜帶著來(lái)自ATP分子的高能磷酸鍵在胞漿內(nèi)被酶促轉(zhuǎn)運(yùn)至耗能部位(如肌纖維，肌漿網(wǎng)，細(xì)胞膜等)，使那里不斷產(chǎn)生的ADP得以重新被磷酸化，去除ADP，抑制血小板聚集，具有改善微循環(huán)的作用；同時(shí)由于外源性的磷酸肌酸參加，可以為細(xì)胞組織提供必要的能量，而減少代償性的無(wú)氧呼吸的發(fā)生，減少了乳酸的產(chǎn)生和積聚，減少細(xì)胞損害和死亡。(2)過(guò)抑制肌纖膜上的5'核苷酸酶反應(yīng)，使心肌細(xì)胞內(nèi)的腺苷酸流失量減少。在缺血缺氧情況下，由于心肌細(xì)胞內(nèi)磷酸肌酸、肌酸、肌酸激酶等多種能量代謝必須物質(zhì)的流失，多種耗能酶反應(yīng)所生成的ADP只能通過(guò)胞漿內(nèi)的腺苷酸激酶來(lái)使其重新磷酸化。但是，腺苷酸激酶每進(jìn)行一次反應(yīng)，就要有一半的腺苷酸變成AMP，而AMP被細(xì)胞膜上的5'核苷酸酶催化生成容易透過(guò)膜而流失的核苷一腺苷和肌苷，使細(xì)胞內(nèi)的腺苷酸庫(kù)存量減少。大量試驗(yàn)已表明，外源性磷酸肌酸是5'核苷酸酶的抑制劑，通過(guò)對(duì)該酶活力的抑制可使AMP保留在肌細(xì)胞內(nèi)，它可再通過(guò)腺苷酸激酶反應(yīng)重新生成參與能量代謝的ADP和ATP。(3)安全性好，因?yàn)榱姿峒∷徕c，作為心肌保護(hù)劑藥品已經(jīng)在國(guó)內(nèi)外上市應(yīng)用多年，由于其本身即為機(jī)體細(xì)胞內(nèi)源性物質(zhì)，經(jīng)臨床應(yīng)用表現(xiàn)出良好的安全性。目前國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道磷酸肌酸鈉具有抗休克的醫(yī)藥活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人意外的發(fā)現(xiàn)，磷酸肌酸鈉具有抗休克的醫(yī)藥活性，隨后通過(guò)大量動(dòng)物試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證了磷酸肌酸鈉的抗休克醫(yī)藥活性。因此，本發(fā)明的目的在于提供磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的應(yīng)用，尤其提供磷酸肌酸鈉用于制備治療多種原因引起的休克的藥物中的應(yīng)用。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的新用途。具體來(lái)說(shuō)，所述的休克是因礦難、電擊、溺水、外傷失血引起的休克。優(yōu)選地，所述的藥物為磷酸肌酸鈉注射劑。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的磷酸肌酸鈉注射劑為無(wú)菌分裝粉針劑或注射用凍干粉針劑。磷酸肌酸鈉制劑的制備方法可以為以下任何一種(1)磷酸肌酸鈉原料經(jīng)無(wú)菌制劑分裝，制備成無(wú)菌制劑。(2)磷酸肌酸鈉原料經(jīng)注射用水溶解后，活性炭吸附并脫碳，除菌過(guò)濾，然后超濾除熱源，乙醇沉淀，減壓干燥，無(wú)菌分裝后制備成注射用粉針劑。( 按照中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)CN101288649A公開(kāi)的方法制備成磷酸肌酸鈉粉針劑。磷酸肌酸鈉無(wú)菌分裝制劑的用法為用時(shí)采用注射溶媒溶解，靜脈滴注或推注。本發(fā)明涉及的磷酸肌酸鈉用于抗休克具有如下優(yōu)點(diǎn)和顯著的進(jìn)步(1)藥效顯著。根據(jù)實(shí)施例1的磷酸肌酸鈉對(duì)大鼠休克模型的影響試驗(yàn)可以看出，大鼠累計(jì)失血量達(dá)總血量的40%后造成失血模型，經(jīng)磷酸肌酸鈉注射治療，與模型對(duì)照組比較，給藥組可以有效改善失血性休克癥狀(P < 0. 01)，抑制缺氧狀態(tài)下無(wú)氧呼吸乳酸產(chǎn)生，具有很好的肝腎保護(hù)功能，明顯延長(zhǎng)大鼠存活時(shí)間。(2)安全性好。由于磷酸肌酸鈉作為心肌保護(hù)劑藥品已經(jīng)在國(guó)內(nèi)外上市應(yīng)用多年，由于其本身即為機(jī)體細(xì)胞內(nèi)源性物質(zhì)，經(jīng)臨床應(yīng)用表現(xiàn)出良好的安全性。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1磷酸肌酸鈉對(duì)大鼠休克模型的影響
1、試驗(yàn)材料(1)受試品磷酸肌酸鈉(2)試驗(yàn)動(dòng)物SD雄性大鼠(3)儀器BL_420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)2、模型建立取健康雄性大鼠40只，體重300 330g，大鼠試驗(yàn)前禁食12小時(shí)，期間自由飲水。 隨機(jī)分成4組假術(shù)組、模型組(模型對(duì)照組)、模型給藥低劑量組(磷酸肌酸鈉低劑量組)、 模型給藥高劑量組(磷酸肌酸鈉高劑量組)。每組10只。試驗(yàn)時(shí)戊巴比妥鈉35mg/kg腹腔注射麻醉后，將動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上。手術(shù)部位剪去毛后用75%乙醇消毒，分離右頸動(dòng)脈、左股動(dòng)靜脈。右頸動(dòng)脈插管通過(guò)壓力傳感器連接于BL-420E生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)監(jiān)測(cè)血壓，通過(guò)引導(dǎo)電極檢測(cè)II導(dǎo)聯(lián)心電圖記錄心率。 左股動(dòng)脈插管用于放血和采集血樣，左股靜脈插管用于回輸液。試驗(yàn)過(guò)程中經(jīng)肛門(mén)置入測(cè)溫探頭檢測(cè)體溫，必要時(shí)應(yīng)用白熾燈照射，使大鼠體溫維持在35 37°C。試驗(yàn)前各導(dǎo)管均用肝素溶液(2.5U/ml)沖洗以抗凝，不給予全身肝素抗凝。操作完畢后動(dòng)物穩(wěn)定30分鐘， 測(cè)各檢測(cè)指標(biāo)基礎(chǔ)值。(血壓、心率、血乳酸、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、肌苷(Cr)含量、死亡率)模型組左股動(dòng)脈插管用于放血，放血過(guò)程持續(xù)60min.采用雙階段放血方式，前 40min 為梯度放血期。分別按 9. Oml/(kg · IOmin)、6· Oml/(kg · IOmin)、5· Oml/(kg · IOmin) *2.5ml/(kg*10min)的速率放血。本階段的累計(jì)失血量達(dá)總血量的40 %，平均動(dòng)脈壓 (MAP)通常降至4. OkPa左右。后20mim為血量調(diào)節(jié)期，大鼠失血40%后5 IOmin收縮壓可回升到8. OkPa，此時(shí)開(kāi)始慢速放血，待MAP降至(4. O士 1. 7)kPa,即為放血終點(diǎn)，再維持該血壓30min，完成失血性休克模型的制備。模型制備完成后進(jìn)行恢復(fù)消毒縫合，然后再檢測(cè)上述各項(xiàng)指標(biāo)。假術(shù)組按模型組方法實(shí)施手術(shù)，但不進(jìn)行放血操作。3、復(fù)蘇治療按上述方法制備休克模型的動(dòng)物被隨機(jī)分為模型(模型對(duì)照組)靜脈滴注5%葡萄糖生理鹽水50ml/kg和全部失血；模型給藥組(磷酸肌酸鈉低劑量組)靜脈滴注含磷酸肌酸鈉0. 3mg/ml的5%葡萄糖生理鹽水50ml/kg和全部失血)模型給藥組(磷酸肌酸鈉高劑量組)靜脈滴注含磷酸肌酸鈉1. 5mg/ml的5%葡萄糖生理鹽水50ml/kg和全部失血)各組按上述劑量分別滴注相應(yīng)的復(fù)蘇液，按15分鐘勻速輸入。分別于靜脈滴注開(kāi)始后0、15、30、60、120、180、M0、360、480分鐘的MAP、心率，并分別于Oh、lh、4h、6h、》i取血0. 3ml檢測(cè)血乳酸、血清ALT、血清Cr，平均存活時(shí)間及死亡情況。4、試驗(yàn)結(jié)果大鼠累計(jì)失血量達(dá)總血量的40%，造成失血模型后，經(jīng)磷酸肌酸鈉注射治療，與模型對(duì)照組比較，給藥組可以有效改善失血性休克癥狀，抑制缺氧狀態(tài)下無(wú)氧呼吸乳酸產(chǎn)生， 具有很好的肝腎保護(hù)功能，明顯延長(zhǎng)大鼠存活時(shí)間，具體參見(jiàn)表1-表6。表1 大鼠 MAP 變化(kPa η = IOX士S)
權(quán)利要求
1.磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的應(yīng)用，其中休克是因礦難、電擊、溺水或外傷失血引起的休克。
3.如權(quán)利要求1或2所述的磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的應(yīng)用，其中所述的藥物為磷酸肌酸鈉注射劑。
4.如權(quán)利要求3所述的磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的應(yīng)用，其中所述的磷酸肌酸鈉注射劑為無(wú)菌分裝粉針劑或注射用凍干粉針劑。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了磷酸肌酸鈉用于制備抗休克藥物中的應(yīng)用，尤其是磷酸肌酸鈉用于制備治療因礦難、電擊、溺水、外傷失血引起的休克的藥物中的應(yīng)用。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，磷酸肌酸鈉可以有效改善失血性休克癥狀，抑制缺氧狀態(tài)下無(wú)氧呼吸乳酸產(chǎn)生，具有很好的肝腎保護(hù)功能，明顯延長(zhǎng)休克動(dòng)物的存活時(shí)間。
文檔編號(hào)A61P9/00GK102210695SQ20111009177
公開(kāi)日2011年10月12日 申請(qǐng)日期2011年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月13日
發(fā)明者蘆志剛 申請(qǐng)人:吉林英聯(lián)生物制藥股份有限公司