專利名稱：一種提取卷柏雙黃酮的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種提取卷柏雙黃酮的方法。

背景技術：
卷柏屬植物分布廣泛，全世界共有700余種，我國有70余種。現代藥理研究表明，卷柏屬植物不僅具有傳統(tǒng)的消炎解毒作用，而且具有降血壓、降血糖、抗菌、抗病毒、增強免疫功能和抑制氧化應激等作用。卷柏屬的化學成分為黃酮類、生物堿、酚類、有機酸類、氨基酸及多糖類等，以穗花杉雙黃酮為主的雙黃酮類化合物含量最高。中國專利申請?zhí)?00810197033. 4公開的方法為將江南卷柏植物材料曬干，去雜，粉碎，用石油醚回流脫脂，再用40% -95%乙醇溶液回流提取，過濾，濾液蒸發(fā)回收溶劑，殘渣以乙酸乙酯萃取，萃取液回收溶劑后干燥，得乙酸乙酯提取物，將該提取物溶于5% -45%乙醇溶液，用大孔樹脂純化，收集適當流分，回收乙醇后干燥，得到江南卷柏總雙黃酮提取物。該方法使用大量有機溶劑，溶劑殘留多，且大孔樹脂吸附吸附效果不理想，樣品損失較大。中國專利申請?zhí)?200910066695. 2提供一種卷柏雙黃酮成分的制備方法，利用乙醇提取和聚酰胺柱層析方法從墊狀卷植、卷柏和江南卷柏中大量制備高含量卷柏總黃酮和高純度穗花杉雙黃酮單體成分。該方法不經過濃縮，直接上聚酰胺柱吸附純化，大大降低了樹脂柱的吸附效果。

發(fā)明內容
卷柏雙黃酮的產業(yè)化提取至關重要，為填補現有提取工藝的不足，本發(fā)明提供一種提取卷柏雙黃酮的方法。本發(fā)明的目的是通過以下具體技術方案實現的一種提取卷柏雙黃酮的方法，其特征在于以卷柏為原料，依次用石油醚、丙酮提取，丙酮提取液加入無機鹽溶液和聚乙二醇，攪拌，使充分混合萃取，靜置后形成兩相，卷柏雙黃酮進入聚乙二醇上相，上相液采用超濾膜法將卷柏雙黃酮和聚乙二醇分離，卷柏雙黃酮采用納濾膜濃縮，再濃縮、干燥得到卷柏雙黃酮產品。所述無機鹽為硫酸銨、硫酸鈉、碳酸鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀中的一種或幾種組合。所述聚乙二醇的相對分子量是4000或6000，雙水相體系中聚乙二醇的質量濃度為15-30%，無機鹽的質量濃度為10-15%，萃取溫度為20-35°C，所述的靜置時間為10-15 小時。所述超濾膜的截留分子量為2000-4000，所述納濾膜的截留分子量為300以下。與現有技術相比，(1)本發(fā)明采用雙水相萃取把雙黃酮與生物堿、多糖類雜質分離；( 采用膜法濃縮，可顯著降低能耗；C3)本發(fā)明的提取工藝簡單、設備要求低、成本低、 無污染，適合產業(yè)化生產。
具體實施例方式
實施例1 稱取80目卷柏粉末200g，加入1600ml石油醚進行索氏提取，提取溫度為 60-90°C，提取時間為lh，萃余物揮發(fā)掉殘留的石油醚，得石油醚萃余物，將萃余物用10倍量丙酮加熱回流提取，重復2次，合并提取液，旋轉蒸發(fā)濃縮得到丙酮濃縮液；調整丙酮濃縮液的PH為3. 5，依次加入聚乙二醇6000和硫酸銨，使所形成的雙水相萃取體系中聚乙二醇的質量濃度為15%，硫酸銨的質量濃度是12%，25°C溫度下攪拌萃取半小時，然后靜置 10小時形成兩相，卷柏雙黃酮進入聚乙二醇上相，采用截留分子量為4000的超濾膜將含有卷柏雙黃酮得到聚乙二醇上相進行分離，收集透過液卷柏雙黃酮，采用納濾膜將卷柏雙黃酮透過液進行濃縮，將濃縮液于真空下進一步濃縮、干燥得到卷柏雙黃酮粉末，總黃酮含量以穗花杉雙黃酮計達65 %以上。實施例2:稱取40目卷柏粉末200g，加入1400ml石油醚進行索氏提取，提取溫度為 60-90°C，提取時間為2h，萃余物揮發(fā)掉殘留的石油醚，得石油醚萃余物，將萃余物用8倍量丙酮加熱回流提取，重復3次，合并提取液，旋轉蒸發(fā)濃縮得到丙酮濃縮液；調整丙酮濃縮液的PH為4. 0，依次加入聚乙二醇4000和硫酸鈉，使所形成的雙水相萃取體系中聚乙二醇的質量濃度為30%，硫酸鈉的質量濃度是13%，30°C溫度下攪拌萃取半小時，然后靜置13 小時形成兩相，卷柏雙黃酮進入聚乙二醇上相，采用截留分子量為2000的超濾膜將含有卷柏雙黃酮得到聚乙二醇上相進行分離，收集透過液卷柏雙黃酮，采用納濾膜將卷柏雙黃酮透過液進行濃縮，將濃縮液于真空下進一步濃縮、干燥得到卷柏雙黃酮粉末，總黃酮含量以穗花杉雙黃酮計達65%以上。實施例3:稱取40目卷柏粉末200g，加入2000ml石油醚進行索氏提取，提取溫度為 60-90°C，提取時間為2h，萃余物揮發(fā)掉殘留的石油醚，得石油醚萃余物，將萃余物用12倍量丙酮加熱回流提取，重復2次，合并提取液，旋轉蒸發(fā)濃縮得到丙酮濃縮液；調整丙酮濃縮液的PH為3. 0，依次加入聚乙二醇6000和碳酸鉀，使所形成的雙水相萃取體系中聚乙二醇的質量濃度為25%，碳酸鉀的質量濃度是15%，28°C溫度下攪拌萃取半小時，然后靜置 12小時形成兩相，卷柏雙黃酮進入聚乙二醇上相，采用截留分子量為3000的超濾膜將含有卷柏雙黃酮得到聚乙二醇上相進行分離，收集透過液卷柏雙黃酮，采用納濾膜將卷柏雙黃酮透過液進行濃縮，將濃縮液于真空下進一步濃縮、干燥得到卷柏雙黃酮粉末，總黃酮含量以穗花杉雙黃酮計達65 %以上。實施例4:稱取60目卷柏粉末200g，加入1800ml石油醚進行索氏提取，提取溫度為 60-90°C，提取時間為1.5h，萃余物揮發(fā)掉殘留的石油醚，得石油醚萃余物，將萃余物用6倍量丙酮加熱回流提取，重復2次，合并提取液，旋轉蒸發(fā)濃縮得到丙酮濃縮液；調整丙酮濃縮液的PH為3. 0，依次加入聚乙二醇6000和磷酸二氫鉀，使所形成的雙水相萃取體系中聚乙二醇的質量濃度為15%，磷酸二氫鉀的質量濃度是10%，20°C溫度下攪拌萃取半小時， 然后靜置15小時形成兩相，卷柏雙黃酮進入聚乙二醇上相，采用截留分子量為2000的超濾膜將含有卷柏雙黃酮得到聚乙二醇上相進行分離，收集透過液卷柏雙黃酮，采用納濾膜將卷柏雙黃酮透過液進行濃縮，將濃縮液于真空下進一步濃縮、干燥得到卷柏雙黃酮粉末，總黃酮含量以穗花杉雙黃酮計達65%以上。實施例5:稱取20目卷柏粉末200g，加入1500ml石油醚進行索氏提取，提取溫度為 60-90°C，提取時間為3h，萃余物揮發(fā)掉殘留的石油醚，得石油醚萃余物，將萃余物用12倍量丙酮加熱回流提取，重復3次，合并提取液，旋轉蒸發(fā)濃縮得到丙酮濃縮液；調整丙酮濃縮液的PH為4，依次加入聚乙二醇4000和磷酸氫二鉀，使所形成的雙水相萃取體系中聚乙二醇的質量濃度為20%，磷酸氫二鉀的質量濃度是11%，35°C溫度下攪拌萃取半小時，然后靜置14小時形成兩相，卷柏雙黃酮進入聚乙二醇上相，采用截留分子量為3000的超濾膜將含有卷柏雙黃酮得到聚乙二醇上相進行分離，收集透過液卷柏雙黃酮，采用納濾膜將卷柏雙黃酮透過液進行濃縮，將濃縮液于真空下進一步濃縮、干燥得到卷柏雙黃酮粉末，總黃酮含量以穗花杉雙黃酮計達65%以上。
權利要求
1.一種提取卷柏雙黃酮的方法，其特征在于以卷柏為原料，依次用石油醚、丙酮提取，丙酮提取液加入無機鹽溶液和聚乙二醇，攪拌，使充分混合萃取，靜置后形成兩相，卷柏雙黃酮進入聚乙二醇上相，上相液采用超濾膜法將卷柏雙黃酮和聚乙二醇分離，卷柏雙黃酮采用納濾膜濃縮，再濃縮、干燥得到卷柏雙黃酮產品。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述無機鹽為硫酸銨、硫酸鈉、碳酸鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀中的一種或幾種組合。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述聚乙二醇的相對分子量是4000或 6000，雙水相體系中聚乙二醇的質量濃度為15-30%，無機鹽的質量濃度為10-15%，萃取溫度為20-35°C，所述的靜置時間為10-15小時。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述超濾膜的截留分子量為2000-4000， 所述納濾膜的截留分子量為300以下。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種提取卷柏雙黃酮的方法，屬于藥用植物化學提取工藝技術領域，方法是以卷柏為原料，依次用石油醚、丙酮提取，丙酮提取液加入無機鹽溶液和聚乙二醇，攪拌，使充分混合萃取，靜置后形成兩相，卷柏雙黃酮進入聚乙二醇上相，上相液采用超濾膜法將卷柏雙黃酮和聚乙二醇分離，卷柏雙黃酮采用納濾膜濃縮，再濃縮、干燥得到卷柏雙黃酮產品。本發(fā)明采用雙水相萃取和膜濃縮技術，提取工藝簡單，設備要求低，適合產業(yè)化生產。
文檔編號A61K36/11GK102178703SQ20111011799
公開日2011年9月14日 申請日期2011年5月6日 優(yōu)先權日2011年5月6日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業(yè)發(fā)展有限公司