專利名稱：手參在制備降脂保肝藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物藥物效能，尤其是手參藥物中應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
祖國(guó)醫(yī)學(xué)并無(wú)高脂血癥的病名，根據(jù)其臨床常見(jiàn)頭暈、胸悶、心悸、肢體麻木、疲倦乏力等證候，可歸入眩暈、胸痹、中風(fēng)、血疲、痰濕等病證范疇。然而祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)脂質(zhì)的認(rèn)識(shí)卻源遠(yuǎn)流長(zhǎng)，如《靈樞·衛(wèi)氣失常第五十九》中說(shuō)“人有肥有膏有肉……。”認(rèn)為“膏者其肉淖，……脂者其肉堅(jiān)……膏者多氣，多氣者熱，熱者耐寒?！保蜗蟮孛枋隽酥|(zhì)在人體中的某些功能作用。若脂膏過(guò)多則有形體變化，稱為“膏人”、“脂人”，少則“體無(wú)膏澤”(《靈樞 經(jīng)脈第十》)。明代醫(yī)家張景岳在《類經(jīng)》中亦云“膏，脂膏也。津液和合為膏，以填補(bǔ)于骨空之中，則為腦為髓，為精為血……。，，由此可知，膏與津液同一源流，屬津液之一，膏是津液之稠濁者，膏可以化血。清代醫(yī)家張志聰對(duì)膏脂的生理功能進(jìn)一步作了補(bǔ)充說(shuō)明，他在 《靈樞集注》中說(shuō)“中焦之氣蒸津液化其精微，發(fā)泄于腠理，淖澤注于骨，補(bǔ)益髓腦，潤(rùn)澤皮膚，是津液行于三百六十五節(jié)，而滲灌于皮膚肌腠者也。溢于外則皮膚膏肥，馀于內(nèi)則膏脂豐滿。”明確提出了人體的膏脂為中焦水谷所化生，隨津液的敷布而運(yùn)行。高脂飲食與高脂血癥的發(fā)生有直接的因果關(guān)系，這與《素問(wèn)·通評(píng)虛實(shí)論篇》中指出的“肥貴人”乃“高粱之疾”之病機(jī)一致?，F(xiàn)代醫(yī)家繼承并發(fā)展了古人對(duì)脂質(zhì)的認(rèn)識(shí)，如有人認(rèn)為，本病是嗜食肥甘、高粱厚味，脾胃運(yùn)化失職，肝膽輸泄調(diào)暢失司，腎輸布失調(diào)，與肝脾腎三臟關(guān)系十分密切。也有人認(rèn)為本病往往由于過(guò)食肥甘厚味和醇酒乳酪，使臟腑轉(zhuǎn)化不及，或臟腑功能失調(diào)，飲食不歸正化，膏脂輸化障礙或先天稟賦不足，無(wú)以“陽(yáng)化氣，陰成形”，均可導(dǎo)致膏脂過(guò)多，滲入血中，發(fā)生高脂血癥。還有人認(rèn)為本病主要脾胃消谷運(yùn)化功能失調(diào)，轉(zhuǎn)化為痰濕，再由痰濕內(nèi)滯，浸淫脈管，血行受阻而致血癖為病。部分人認(rèn)為高脂血癥為脾失健運(yùn)，中焦氣機(jī)失調(diào)，痰濕內(nèi)生，流注經(jīng)脈，滲入血中所致。一些人認(rèn)為高脂血癥為本虛標(biāo)實(shí)之證，與肝腎兩臟最為密切，其標(biāo)為痰、為濕、為陽(yáng)亢，其本為肝腎兩虛。通過(guò)對(duì)379 例高脂血癥病例分析認(rèn)為“氣虛”是發(fā)病的主要病機(jī)，其它病機(jī)依次為痰濁、陰虛、血癖。在臨床觀察中發(fā)現(xiàn)，高脂血癥患者大多飲食偏嗜，過(guò)食肥甘，形體肥胖，且多為從事腦力勞動(dòng)者ο目前，祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)高脂血癥的病因、病機(jī)認(rèn)識(shí)基本上是一致的，其發(fā)生或由于外源性脂質(zhì)攝入過(guò)多，或由于體內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂所致。多數(shù)醫(yī)家認(rèn)為高脂血癥與肝脾腎三臟關(guān)系密切，以正虛為本，痰濁血瘀為標(biāo)。高脂血癥是血脂異常的慣稱，血脂是血漿或血清中的脂類，包括膽固醇、甘油三酯、磷脂、游離脂肪酸等。而高脂血癥就是指血液中一種或多種脂質(zhì)成分異常升高，超出正常范圍，如果符合以下一項(xiàng)或幾項(xiàng)，就說(shuō)明患有高脂血癥總膽固醇、甘油三酯過(guò)高；低密度脂蛋白過(guò)高；高密度脂蛋白過(guò)低等。血漿中的膽固醇和甘油三酯都有兩個(gè)來(lái)源外源性者來(lái)自食物，經(jīng)消化后由小腸吸收；內(nèi)源性者由體內(nèi)合成。甘油三酯在肝內(nèi)合成，而膽固醇主要在肝和小腸粘膜合成。機(jī)體有復(fù)雜的反饋機(jī)制調(diào)節(jié)脂質(zhì)的吸收、合成、分解及排泄，保持其血中濃度的動(dòng)態(tài)平衡。如每人每天膽固醇攝入量增加100毫克，血清膽固醇只上升3毫克-5毫克/升。體內(nèi)每天合成的膽固醇量約有1. 5克，這個(gè)量比外源性膽固醇高得多。肝臟既是膽固醇的合成場(chǎng)所，也是分解處理膽固醇的地方。當(dāng)進(jìn)食過(guò)多的動(dòng)物脂肪(可成為肝、小腸合成膽固醇的原料) 或有腎病綜合癥、先天性脂代謝障礙，肝臟代謝出現(xiàn)障礙時(shí)，都可引起血清膽固醇水平的明顯波動(dòng)。血脂和脂蛋白通常隨年齡增長(zhǎng)而增高，這是因?yàn)槔夏耆搜椭鞍椎拇x全面降低的結(jié)果。一般來(lái)說(shuō)，男性到50歲，女性到65歲左右，膽固醇和甘油三酯達(dá)到峰值。高脂血癥按發(fā)病的原因通常分為兩類，即原發(fā)性高脂血癥和繼發(fā)性高脂血癥。原發(fā)性高脂血癥亦稱家族性高脂血癥，多為先天性遺傳性疾病，可有家族史，是由于脂質(zhì)和脂蛋白代謝先天性缺陷以及某些環(huán)境因素(例如飲食、營(yíng)養(yǎng)和藥物等)，通過(guò)未知的機(jī)制而引起的。繼發(fā)性高脂血癥系發(fā)病于某種病癥的病理基礎(chǔ)上，或某些藥物所引起的脂代謝異常，臨床表現(xiàn)為各原發(fā)病的特點(diǎn)或有用特殊藥物史，并伴有血脂增高。如未控制的糖尿病、 甲狀腺功能減退癥和粘液性水腫、腎病綜合征、肝內(nèi)外膽管梗阻、胰腺炎、異常球蛋白血癥、 痛風(fēng)、酒精中毒和服用女性避孕藥等。由于血漿中的膽固醇和甘油三酯是疏水分子，不能直接在血液中被轉(zhuǎn)運(yùn)，必須與脂蛋白等結(jié)合才能使它們完全溶于血液中以便于在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)。所以任何導(dǎo)致血漿中攜帶膽固醇和/或甘油三酯的脂蛋白水平升高的原因也可形成高脂血癥。高脂血癥治療藥物過(guò)去稱為降血脂藥物，是指降低血總膽固醇和/或血甘油三酯而言，但“降血脂藥物”現(xiàn)多被“調(diào)血脂藥物"概念取代，因?yàn)橹鞍子卸喾N，有些尚有利于動(dòng)脈粥樣硬化的防治，而且血脂亦非越低越好。高脂血癥治療藥物以其結(jié)構(gòu)及作用特點(diǎn)可分為九大類膽酸絡(luò)合劑為陰離子交換樹(shù)脂類，可降低血總膽固醇及低密度脂蛋白，但該類藥物不能降低甚至?xí)哐视腿?；臨床試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)考來(lái)烯胺可降低冠心病死亡率及心梗發(fā)生率。他汀一類(statins)如洛伐他汀、新伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀等主要降低血總膽固醇及低密度脂蛋白，對(duì)血甘油三酯亦有中度降低作用，大規(guī)模臨床研究證實(shí)可降低冠心病發(fā)生及死亡率。副作用主要有胃腸道癥狀、失眠、皮疹、肌痛，需觀察肝、腎功能，測(cè)血轉(zhuǎn)氨酶和肌酸激酶等，以防發(fā)生橫紋肌溶解。留體衍生物谷固醇一般劑量療效可疑，臨床少用。煙酸療效肯定，主要降低血甘油三酯，對(duì)膽固醇亦有降低作用，但藥物不良反應(yīng)較多，新一代煙酸類制劑阿西莫司藥物不良反應(yīng)減輕。苯酸類主要降低血甘油三酯，氯貝丁酯因有報(bào)道可增加消化道腫瘤發(fā)生率及膽石癥發(fā)生率，現(xiàn)已少用。后來(lái)出現(xiàn)的非諾貝特等對(duì)血甘油三酯、血總膽固醇均有降低作用且可升高高密度脂蛋白，臨床療效大規(guī)模臨床研究正在進(jìn)行。多不飽和脂肪酸分ω-6及ω-3型，對(duì)ω-3研究較多，主要降低血甘油三酯。粘多糖及多糖類主要降低血甘油三酯，其對(duì)冠心病防治作用有待大規(guī)模臨床研究證實(shí)。雌激素替代治療可用于低密度脂蛋白水平升高的絕經(jīng)期婦女，在已存在冠心病的婦女應(yīng)用具有二級(jí)預(yù)防作用。其他調(diào)血脂藥物具有一定調(diào)血脂作用，但其作用有待進(jìn)一步研究。綜上所述，這些藥物大多療效不確切，長(zhǎng)期應(yīng)用具有一定的副作用，如消化道癥狀、神經(jīng)癥狀、內(nèi)分泌癥狀、心腦血管癥狀等，而且停藥后體重、血脂回升快，難以達(dá)到長(zhǎng)期治療和預(yù)防的目的。此外，目前外科治療、血漿凈化治療、基因治療高脂血癥等方法正在使用和完善。 如外科治療有回腸末端切除術(shù)、門腔靜脈分流吻合術(shù)和肝移植術(shù)；血漿凈化療法是先將患者血液抽出，從血漿中分離某些成分并將其棄去(去除高濃度脂蛋白)，再輸入新的血漿或代用品，故又稱為血漿置換；基因治療通過(guò)特定的重組DNA，在基因水平治療遺傳性疾病。手參(Gymnadenia conopsea(L. )R. Br.)又稱手掌參、佛手參、手兒參等，系蘭科手參屬多年生草本植物，該屬植物模式種手參為我國(guó)傳統(tǒng)中藥，載于藏醫(yī)最早醫(yī)藥書(shū)《四部醫(yī)典》，以后歷代的蒙、藏本草如《晶珠本草》、《本草圖鑒》等均有記載，塊根入藥，含黏液質(zhì)、皂甙、揮發(fā)油等多種有效成分，在中、藏、蒙藥中均用，有益氣補(bǔ)血、生精止渴等功效，主治肺虛咳喘、虛勞消瘦、神經(jīng)衰弱、久瀉、失血、帶下、乳少、慢性肝炎等癥，具有很高的藥用價(jià)值。國(guó)內(nèi)外未發(fā)現(xiàn)手參降血脂和保肝作用研究。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于現(xiàn)有的技術(shù)的以上不足，本發(fā)明的目的是提供一種手參在制備降脂保肝藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的是通過(guò)如下的手段實(shí)現(xiàn)的手參在制備降脂保肝藥物中的應(yīng)用，以干燥手參為原料經(jīng)醇取制得以手參醇取浸膏為活性成分的藥物，在5g-30g干燥手參/d的日服量下，用于降脂保肝的治療用途。本發(fā)明表明手參具有降低血清及肝臟甘油三酯的升高，從而改善脂質(zhì)異常代謝的作用。同時(shí)，手參低劑量還可明顯降低血清ALT含量(p<0. 05)，高、中劑量對(duì)降低血清AST 含量也具有極顯著性差異(P < 0. OUp < 0. 05)，能夠保護(hù)脂質(zhì)代謝紊亂所造成的肝損傷。
具體實(shí)施例方式在人每天5g_30g干燥手參的日服量中，取15g/人/日的劑量進(jìn)行如下降脂保肝的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD大鼠，雌雄各半，體重170士 10g，由成都達(dá)碩生物科技有限公司提供。合格證號(hào)SCXK (川)2011-13。實(shí)驗(yàn)藥物手參購(gòu)于遵義藥材市場(chǎng)。洛伐他汀膠囊大連大洋制藥有限公司，規(guī)格20mg/粒，生產(chǎn)批號(hào)091201。其它實(shí)驗(yàn)藥品，除特別聲明的外，均為化學(xué)純。2實(shí)驗(yàn)方法2. 1高脂血癥動(dòng)物模型的建立2. 1. 1高脂飼料的配制
高脂飼料配方78. 8%基礎(chǔ)飼料+10%豬油+10%蛋黃粉+1%膽固醇+0.2%膽鹽。 按配方先將基礎(chǔ)飼料、蛋黃粉、膽固醇及膽鹽混合均勻后貯存，備用；喂飼時(shí)，取一定量在按配方加入豬油，混勻，捏成團(tuán)喂養(yǎng)大鼠。2. 1. 2高脂血癥動(dòng)物模型的建立選擇160_180g SPF級(jí)SD大鼠，雌雄各半，適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境3天后，隨機(jī)分出雌雄各5 只大鼠為正常組，喂食普通飼料；其余大鼠喂食高脂飼料，進(jìn)行高脂血癥動(dòng)物模型制造，造模38天。2. 2藥物的制備2. 2. 1手參高、中、低劑量藥物的制備手參提取70%乙醇，10倍量，40KHz超聲提取lh，提取兩次，合并。配藥手參高劑量(5g/kg/d)稱取手參原藥材細(xì)粉200g，按正交考察的優(yōu)選工藝(70% 乙醇、10倍量乙醇、40KHZ、提取90min)超聲提取兩次，過(guò)濾，合并兩次濾液，50°C旋蒸濃縮至流浸膏，以0. 5% CMC-Na(羧甲基纖維素鈉)溶液定容至660mL，即相當(dāng)于每毫升相當(dāng)于含生藥0. 3g。取360mL為高劑量，密封。手參中劑量(2. 5g/kg/d)將以上移取高劑量后剩余的藥液以0. 5% CMC-Na溶液稀釋至600mL，取400mL即為中劑量。手參低劑量(1. 25g/kg/d)將以上移取中劑量后剩余的藥液以0. 5% CMC-Na溶液稀釋至400mL，即為手參低劑量。2. 2. 2陽(yáng)性對(duì)照藥物的配制取20mg/粒，成人用量為0. 5-1粒的洛伐他汀膠囊8粒，去囊殼用0. 5% CMC-Na溶液配成SOOmL溶液，即得陽(yáng)性對(duì)照藥物，密封，4°C冰箱保存，備用。2. 3動(dòng)物分組及給藥方法2. 3. 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及飼養(yǎng)造模M天后，稱重各模型大鼠，按每組雌雄各半原則，隨機(jī)分為5組，每組10只， 分別為模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、手參高劑量組、手參中劑量組、手參低劑量組。加造模前分出的正常組共分為6組。正常組仍喂飼普通飼料，其他組仍喂飼高脂飼料。2. 3. 2給藥方法按5. OmL. 250^1標(biāo)準(zhǔn)給所有大鼠灌胃給藥(Ig)，每天灌胃一次，連續(xù)給藥14天。正常組每天灌胃0. 5 % CMC-Na溶液1次。模型對(duì)照組每天灌胃0. 5 % CMC-Na溶液1次。陽(yáng)性對(duì)照組每天灌胃陽(yáng)性藥物溶液1次。手參高劑量組每天灌胃手參高劑量藥物溶液1次。手參中劑量組每天灌胃手參中劑量藥物溶液1次。手參低劑量組每天灌胃手參低劑量藥物溶液1次。2. 4標(biāo)本的采集、制備2. 4. 1血清樣本的制備各組大鼠灌胃14天后，于最后一次灌胃后禁食12h，不禁水。第15天，股動(dòng)脈取全血，靜置0. 5-1小時(shí)，用高速冷凍離心機(jī)3000r/min離心lOmin，取上清液制得血清樣本，置于-20°C冰箱冷凍保存，用于血清生化測(cè)定。2. 4. 2肝組織勻漿樣本的制備各組大鼠取血后，迅速取出肝，冰生理鹽水沖洗、濾紙吸濕后，稱取濕重0.3g左右，按質(zhì)量體積比1 9加入預(yù)冷的生理鹽水，冰水中用電動(dòng)勻漿機(jī)制成10%肝勻漿，高速冷凍離心機(jī)4°C，6000r/min離心5min，取上清液制得肝組織勻漿樣本，置于_20°C冰箱冷凍保存，用于肝組織生化測(cè)定。2. 5生化指標(biāo)的檢測(cè)2. 5. 1血清、肝組織脂質(zhì)生化指標(biāo)測(cè)定分別取各組血清及肝組織樣本，按各檢測(cè)試劑盒說(shuō)明方法加樣，用全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀，測(cè)定膽固醇(Tc)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，低密度脂蛋白膽固醇 (LDL-C)含量。2. 5. 2肝功能指標(biāo)檢測(cè)分別各組血清樣本，分別按各檢測(cè)試劑盒說(shuō)明方法加樣，用全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀，測(cè)定谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性。2.6數(shù)據(jù)處理與分析方法運(yùn)用SPSS13. 0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)檢測(cè)的生化指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析后，采用t 3結(jié)果與分析檢驗(yàn)。3.1對(duì)大鼠血液、肝組織脂質(zhì)生化指標(biāo)的考察 3. 1. 1對(duì)大鼠血清TC、肝組織TC的影響
權(quán)利要求
1.手參在制備降脂保肝藥物中的應(yīng)用，以干燥手參為原料經(jīng)提取制得以手參浸膏為活性成分的藥物，在5g-30g干燥手參/d的日服量下，用于降脂保肝的治療用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述之手參在制備降脂保肝藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述手參浸膏用作活性成分與其它輔助成分配合為藥用組合物。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了手參在制備降脂保肝藥物中的應(yīng)用，以干燥手參為原料經(jīng)醇取制得以手參醇取浸膏為活性成分的藥物，在5g-30g干燥手參/d的日服量下，用于降脂保肝的治療用途。本發(fā)明表明手參具有降低血清及肝臟甘油三酯的升高，從而改善脂質(zhì)異常代謝的作用。同時(shí)，手參低劑量還可明顯降低血清ALT含量(p＜0.05)，高、中劑量對(duì)降低血清AST含量也具有極顯著性差異(p＜0.01、p＜0.05)，能夠保護(hù)脂質(zhì)代謝紊亂所造成的肝損傷。
文檔編號(hào)A61K36/898GK102247538SQ201110237619
公開(kāi)日2011年11月23日 申請(qǐng)日期2011年8月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月18日
發(fā)明者張?zhí)於? 閆智勇 申請(qǐng)人:西南交通大學(xué)