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      山莓葉中一種新二萜化合物、制備方法及其用途的制作方法

      文檔序號:810982閱讀:130來源:國知局
      專利名稱:山莓葉中一種新二萜化合物、制備方法及其用途的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及山莓葉中一種新二萜新化合物、分離純化制備方法及其在制備抗腫瘤藥物方面的用途。
      背景技術(shù)
      山莓(Rubus corchorifolius L. f)屬薔薇科懸鉤子屬中一種落葉灌木。多生長于向陽山坡、溪邊、山谷、荒地和灌叢中,海拔300m 1500m。除東北、內(nèi)蒙古、青海、新疆、西藏外,全國均有分布。福建全省各地均有山莓分布,野生資源蘊(yùn)藏量相當(dāng)大。我國利用山莓的歷史悠久,在古書《本草拾遺》、《本草綱目》、《名醫(yī)別錄》、《食療本草》中就有山莓藥用 價值的詳細(xì)記載,其藥用已有上千年歷史。山莓果、根及葉均可入藥。二萜化合物的抗腫瘤活性是十分顯著的。L.Z. Li等(2010)從芫花中得到一個新的二萜化合物并研究得出其對人類早期的HL-60腫瘤細(xì)胞具有抑制作用,其IC50值為11.74iiM。Li FS等(2010)從乳香中得到七個大環(huán)二萜類化合物,這七種化合物均對Bel-7402,Hela和SW-480腫瘤細(xì)胞有抑制作用。盤永才等(2006)從柳珊瑚中分離得到的三種二萜中,二萜T-7對腫瘤細(xì)胞KB,P388和L1210等顯示出很強(qiáng)的抑制活性,ED50依次為2. 80、0. 31、0. 22 u g/mL ;二萜T_8、T_9,也有很強(qiáng)的抗腫瘤活性;張敏等人(張敏,2007,藥學(xué)學(xué)報;張敏,2011,HELVETICA CHIMICA ACTA)從山莓葉中分離得到了四個新的二萜化合物3 a,16 a,17,19-對映-貝殼杉烷-四醇和2羰基-16 a -羥基-對映-貝殼杉烷-17-P-D-葡糖苷。33,16 a,17,19-四羥基-對映貝殼杉-19-乙酸酯,3 P,16 a,17,19-四羥基-對映貝殼杉-19-乙酸酯-17-氧-P -D-葡萄糖苷。陳雪香等人(陳雪香,2010,HELVETICACHIMICA ACTA)從山莓葉中分離鑒定出三個新化合物化合物分別為93,16 a , 17 三輕基-對映貝殼杉 _2 酮(9 0 ,16 a , 17-trihydroxy-ent-kaur-2-one), 16 a,17,19 三輕基-對映貝殼杉-2 酮(16 a , 17,19-trihydroxyl-ent-kaur-2-one), 2 ^ , 3 a ,16 a,17-四輕基-對映-貝殼杉醇(2 旦,3 a , 16 a , 17~tetrahydroxyI-ent-kauranoI),且均具有抗腫瘤的作用。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明的目的是提供從山莓中分離出的一個新二萜化合物,MTT腫瘤活性實驗證明該化合物具有抗腫瘤作用。本發(fā)明所提供的一個新二萜化合物是從山莓中經(jīng)過反復(fù)硅膠柱層析、薄層層析和結(jié)晶的方法所得,化學(xué)名稱分別為16 a、17、18-三羥基-對映-貝殼杉烷-18-0-0 -D-葡
      萄糖苷。其結(jié)構(gòu)式如下
      權(quán)利要求
      1.山莓葉中一種新二萜化合物,結(jié)構(gòu)式為
      2.一種如權(quán)利要求I所述的山莓葉中一種新二萜化合物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟 (1)稱取粉碎的山莓葉,加入體積分?jǐn)?shù)濃度60-80%的乙醇水溶液,料液重量體積比為Ig 10ml,攪勻,先超聲提取30min,然后于室溫下浸提48h,過濾,濾渣再重復(fù)提取一次,合并濾液,濃縮冷凍干備用; (2)將浸膏液用依次用石油醚,氯仿、乙酸乙酯、正丁醇反復(fù)多次萃取,將萃取液分別濃縮,冷凍干燥,分別得石油醚,氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物; (3)將乙酸乙酯萃取物進(jìn)行中壓硅膠柱色譜分離,用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行洗脫,再用乙酸乙酯與甲醇進(jìn)行梯度洗脫,洗脫的流速為15mL/min,同時每管收集的流份量為20mL,收集洗脫液; (4)將洗脫液進(jìn)行壓硅膠柱層析分離純化,用氯仿與甲醇進(jìn)行梯度洗脫,收集的樣品點板合并樣品,收集的樣品點板合并樣品,將樣品進(jìn)行結(jié)晶,得化合物和母液。
      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的山莓葉中一種新二萜化合物的制備方法,其特征在于,步驟(3)中,用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行洗脫時,首先用石油醚洗脫,然后用石油醚和乙酸乙酯混合液洗脫,石油醚和乙酸乙酯的重量配比為20 80。
      4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的山莓葉中一種新二萜化合物的制備方法,其特征在于,步驟(3)中,用乙酸乙酯與甲醇進(jìn)行梯度洗脫時,乙酸乙酯與甲醇的重量配比分別為100 0,40 I,10 1,0 I。
      5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的山莓葉中一種新二職化合物的制備方法,其特征在于,步驟(4)中,用氯仿與甲醇進(jìn)行梯度洗脫時,氯仿和甲醇的重量配比分別為25 1,15 1,10 1,5 I。
      6.如權(quán)利要求I所述的山莓葉中一種新二萜化合物在制備抗腫瘤藥物方面的用途。
      全文摘要
      本發(fā)明所提供的一個新二萜化合物及其制備方法,該化合物的化學(xué)名稱為16α、17、18-三羥基-對映-貝殼杉烷-18-O-β-D-葡萄糖苷,其結(jié)構(gòu)式為該化合物是從山莓中經(jīng)過反復(fù)硅膠柱層析、薄層層析和結(jié)晶的方法所得,MTT腫瘤活性實驗證明該化合物具有抗腫瘤作用。
      文檔編號A61K31/7032GK102718809SQ201210183809
      公開日2012年10月10日 申請日期2012年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月26日
      發(fā)明者周麗萍, 曹庸, 陳雪香 申請人:曹庸
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