一種山莓提取物，該提取物的制備方法及醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及一種山莓提取物，該提取物的制備方法及醫(yī)藥用 途。
【背景技術(shù)】
[0002] 藥材山莓為薔薇科懸鉤子屬植物山莓的果實(shí)，又名懸鉤子（《本草綱目拾遺》）、沿 鉤子（《日用本草》）、山泡子（《天目山藥用植物志》）。
[0003] 原植物山莓（學(xué)名：Rubus corchorifolius L. f.)，又名樹莓、山拋?zhàn)印⑴Ｄ膛?、?秧泡，三月泡、四月泡、龍船泡，大麥泡、泡兒刺，刺萌蘆、饅頭菠、高腳波，直立灌木，高1-3 米；枝具皮刺，幼時為柔毛。單葉，卵形至卵狀披針形，多生在向陽山坡、山谷、荒地、溪邊和 疏密灌叢中潮濕處，目前尚未由人工引種栽培?；ㄆ?-3月，果期4-6月。具有澀精益腎 助陽明目、醒酒止渴、化痰解毒之功效，主治腎虛、遺精、醉酒、丹毒等癥。葉性微苦，解毒、消 月中、斂瘡等、咽喉腫痛、多發(fā)性膿腫、乳腺炎等癥。除東北、甘肅、青海、新疆、西藏外，中國其 余省份、朝鮮、日本、緬甸、越南均有分布。
[0004] 原植物山莓為直立灌木，高1-3米；枝具皮刺，幼時被柔毛。單葉，卵形至卵狀披 針形，長5-12厘米，寬2. 5-5厘米，頂端漸尖，基部微心形，有時近截形或近圓形，上面色較 淺，沿葉脈有細(xì)柔毛，下面色稍深，幼時密被細(xì)柔毛，逐漸脫落至老時近無毛，沿中脈疏生小 皮刺，邊緣不分裂或3裂，通常不育枝上的葉3裂，有不規(guī)則銳鋸齒或重鋸齒，基部具3脈。 葉柄長1-2厘米，疏生小皮刺，幼時密生細(xì)柔毛；托葉線狀披針形，具柔毛?；▎紊蛏贁?shù)生 于短枝上；花梗長0. 6-2厘米，具細(xì)柔毛；花直徑可達(dá)3厘米；花萼外密被細(xì)柔毛，無刺；萼 片卵形或三角狀卵形，長5-8毫米，頂端急尖至短漸尖；花瓣長圓形或橢圓形，白色，頂端圓 鈍，長9-12毫米，寬6-8毫米，長于萼片；雄蕊多數(shù)，花絲寬扁；雌蕊多數(shù)，子房有柔毛。果實(shí) 由很多小核果組成，近球形或卵球形，直徑1-1. 2厘米，紅色，密被細(xì)柔毛；核具皺紋?；ㄆ?2-3月，果期4-6月。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種山莓提取物，該提取物的制備方法和液相分析方法， 含有該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備抗甲1型流感病毒藥物的用途。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] -種山莓提取物，該提取物由以下方法制備：
[0008] (a)以重量計，每100份藥材包含干燥的山莓80~90份和干燥的黨參10~20 份，混合粉碎；(b)用65~75 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液； (c)對步驟（b)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用20~30% 乙醇沖洗7~9個柱體積除去多糖，再用55~65%乙醇洗脫9~11個柱體積，收集55~ 65%乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0009] 進(jìn)一步地，步驟（d)中所述大孔樹脂為AB-8型大孔樹脂。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為70%。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟（d)為用正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用25%乙醇沖洗8個 柱體積除去多糖，再用60 %乙醇洗脫10個柱體積，收集60 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干 燥。
[0012] 為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同產(chǎn)地、批次藥材制備的山莓提 取物批間差異，所述提取物的液相分析方法為：
[0013] 色譜柱：Agilent Zorbax SB C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 y m);
[0014] 流動相：A為甲醇，B為0. 1 %磷酸水溶液；
[0015]梯度洗脫程序：0?01 ~15min，A 25%~35% ;15 ~25min，A 35%~50% ;25 ~ 32min，A 50% ;32 ~35min，A 50%~25% ;35 ~40min，A 25%;
[0016] 流動相流速：1. OmL ? min S
[0017] 檢測波長：255nm;
[0018] 柱溫：30°C ;
[0019] 進(jìn)樣量：10yL。
[0020] 藥物制劑，含有治療有效量的所述山莓提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0021] 所述的山莓提取物在制備治療甲1型流感病毒的藥物中的應(yīng)用。
[0022] 所述的藥物制劑在制備治療甲1型流感病毒的藥物中的應(yīng)用。
[0023] 本發(fā)明提取物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0024] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明山莓提取物，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0025] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0026] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過對山莓藥材進(jìn)行提取、除雜、富集處理，能得到治療甲 1型流感病毒的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖譜， 用于控制不同產(chǎn)地、批次藥材制備的提取物的批間差異。
【附圖說明】
[0027] 圖1為山莓提取物HPLC液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0029] 實(shí)施例1 :山莓提取物制備
[0030] 藥材來源：山莓和黨參購自安徽亳州中藥材市場。
[0031] 主要試劑：食品級乙醇購自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級AB-8大孔樹脂購 自天津波鴻樹脂有限公司；甲醇為HPLC級，購于TEDIA;85%磷酸為HPLC級，購于TEDIA; 色譜用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0032] 將8. 5kg干燥的山莓和1.5kg干燥黨參混合粉碎，用70 %乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對濃縮液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂 (2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫10個柱 體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得山莓提取物浸膏粉約155g。
[0033] 實(shí)施例2:山莓提取物②制備（80份山莓，20份黨參）
[0034] 制備方法：將8. 0kg干燥的山莓和2. 0kg干燥黨參混合粉碎，用70%乙醇熱回流 提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫 10個柱體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得山莓提取物浸膏粉約155g。
[0035] 實(shí)施例3:山莓提取物③制備（90份山莓，10份黨參）
[0036] 制備方法：將9. 0kg干燥的山莓和1. 0kg干燥黨參混合粉碎，用70%乙醇熱回流 提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫 10個柱體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得山莓提取物浸膏粉約155g。
[0037] 實(shí)施例4:山莓提取物④制備（75份山莓，25份黨參）
[0038] 制備方法：將7. 5kg干燥的山莓和2. 5kg干燥黨參混合粉碎，用70%乙醇熱回流 提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對濃縮液依次用石油醚 (6