專利名稱：一種紫杉醇長(zhǎng)循環(huán)納米粒制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種長(zhǎng)循環(huán)紫杉醇納米粒制劑，同時(shí)本發(fā)明還涉及該紫杉醇納米粒的制備方法。
背景技術(shù)：
紫杉醇(Paclitaxel)是從太平洋紅豆杉樹皮中分離出的一種四環(huán)二萜類化合物。紫杉醇分子式為C47H51O14N,分子質(zhì)量853. 9，具有高度親脂性，不溶于水，血漿蛋白結(jié)合率89%至98%，半衰期為5. 3至17. 4小時(shí)，主要經(jīng)肝臟代謝，腎臟清除僅5%。此藥于1983年開始用于卵巢癌和乳腺癌的臨床研究，1992年美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市。臨床研究已經(jīng)證實(shí)了紫杉醇在抗多種實(shí)體腫瘤，包括乳腺癌、晚期卵巢癌、肺癌、腦部和頸部腫瘤以及急性白血 病方面，都有重要而顯著的作用。臨床上已作為一線用藥而廣泛應(yīng)用。紫杉醇難溶于水，現(xiàn)行臨床注射制劑通常使用表面活性劑聚氧乙烯蓖麻(Cremophor EL)和乙醇增溶，臨床應(yīng)用前需要預(yù)先稀釋，因溶劑的轉(zhuǎn)換，紫杉醇易析出沉淀，并且Cremophor EL可引起體內(nèi)組胺釋放，造成病人出現(xiàn)藥物性皮疹、呼吸急促，支氣管疫攣和低氣壓等過(guò)敏反應(yīng)。另外Cremophor EL還可以溶出聚氯乙烯塑料管和輸液袋中的增塑劑，導(dǎo)致更嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生。即便同時(shí)應(yīng)用氫化可地松，過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生率仍達(dá)10% 30%?；谏鲜鲈?，國(guó)內(nèi)外藥劑工作者開展了廣泛深入的研究，開發(fā)了大量紫杉醇新型制劑。如環(huán)糊精包合物(公開號(hào)為CN1931368的專利含有環(huán)糊精紫杉醇包合物的藥物組合物及其制備方法)、脂質(zhì)體(公開號(hào)為CN101011357的專利一種紫杉醇脂質(zhì)體制劑的制備方法)、聚合物納米粒(公開號(hào)為CN101884618A的專利一種長(zhǎng)循環(huán)紫杉醇納米粒及其制備方法)、乳劑(公開號(hào)為CN1671370A的專利增溶紫杉醇的組合物及其制備方法)，這些新劑型雖然從一定程度上改善了現(xiàn)有制劑的不足，但均存在各自的缺陷，如環(huán)糊精本身存在極高的腎毒性；脂質(zhì)體制劑包封率低、易泄漏、穩(wěn)定性差；聚合物納米粒載藥量低、突釋現(xiàn)象明顯、有機(jī)溶劑不易除盡等；以乳劑處方及工藝制備的紫杉醇乳劑放置兩周即會(huì)析出紫杉醇沉淀。這些難以克服的缺陷阻礙了上述新型制劑的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展和試劑臨床應(yīng)用。納米粒給藥系統(tǒng)(Nanoparticles-baseddrug delivery systems)是將納米技術(shù)和納米材料應(yīng)用于藥學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)生的,它以納米粒(Nanoparticles, NP)作為藥物載體的一種藥物輸送體系。納米粒(Nanoparticle, NP)是一類由高分子物質(zhì)組成的固態(tài)膠體粒子，粒徑大小介于10 lOOOnm，可分散在水中形成近似膠體溶液，由于納米粒性質(zhì)上的奇特性和優(yōu)越性，作為藥物載體，已成為國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥學(xué)的重要研究方向。用于制備納米粒制劑的輔料多為高分子可降解聚合物。聚酯類是迄今為止研究最多，應(yīng)用最廣的生物可降解高分子材料，常用的有聚乳酸(PLA)、聚羥基乙酸(PGA)、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物(PLGA)和聚-己內(nèi)酯(PCL)等。在藥物制劑制備過(guò)程中常用非離子表面活性劑泊洛沙姆(Poloxamer) 188、聚乙二醇(1000、2000、4000)、F68、水溶性維生素E (又稱d-a-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯，TPGS)等做為乳化劑或助乳化劑來(lái)穩(wěn)定制備過(guò)程。在納米粒的制備過(guò)程中，我們嘗試引入卵磷脂作為助乳化劑，因?yàn)榱字蓄愃朴诩?xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，對(duì)于細(xì)胞對(duì)納米粒的吸收有促進(jìn)作用，使得制備的納米粒既有長(zhǎng)循環(huán)納米粒的優(yōu)勢(shì)又有脂質(zhì)體的部分性能。制備納米粒的常 用的方法包括乳化法和納米沉淀法。近年來(lái)發(fā)展了一種改進(jìn)的納米沉淀法，這種方法實(shí)際上是對(duì)溶劑揮發(fā)法的改進(jìn)，但由于成球機(jī)理不同和在納米粒制備過(guò)程中的廣泛應(yīng)用，這種方法已經(jīng)完全獨(dú)立發(fā)展為一種納米粒制備技術(shù)。此方法采用水溶性溶劑如丙酮或乙醇作為油相，將要包載的藥物溶于其中。由于水溶性溶劑進(jìn)入水中后自發(fā)性分散，迅速穿透油/水界面，降低界面張力，使液滴不斷變小，在水中不能溶解的聚合物向界面遷移、沉積并固化，最終形成納米粒。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是重復(fù)性好，粒徑均勻。此方法的缺陷在于，水溶性藥物在溶劑分散的過(guò)程中易于從聚合物相滲漏出來(lái)，導(dǎo)致包封率較低。實(shí)驗(yàn)表明，改進(jìn)的納米沉積技術(shù)保持了較高的粒子產(chǎn)率和很好的粒子表面形態(tài)，為大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)創(chuàng)造了方便。但上述的各種納米沉淀法均是將油相滴加入水相，即將成球材料的良溶劑滴加入不良溶劑中，未見(jiàn)將水相滴加入有機(jī)相來(lái)制備納米粒的報(bào)道，而且本領(lǐng)域技術(shù)人員從未嘗試過(guò)或者嘗試后輕易放棄了反向滴加溶劑的方法，有反向滴加不能用來(lái)制備納米粒的固有偏見(jiàn)。由于PLA和PLGA納米粒容易被巨噬細(xì)胞識(shí)別并吞噬，在體內(nèi)循環(huán)時(shí)間短，不能發(fā)揮足夠的藥效，因此我們往往需要對(duì)納米粒進(jìn)行表面修飾，常用的表面修飾劑有聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、聚維酮、肝素、人血白蛋白、唾液酸及神經(jīng)節(jié)苷酯等，使用PEG修飾是最常用的一種方法，因此通過(guò)特殊的表面修飾來(lái)達(dá)到納米粒長(zhǎng)循環(huán)的目的已經(jīng)是現(xiàn)在研究納米粒的一大熱點(diǎn)。水溶性維生素E具有兩親性，是一種安全高效的乳化劑，其分子末端有類似于PEG的片段，多用于乳劑配方中，但TPGS作為助溶劑用于長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備還未見(jiàn)專利報(bào)道。另?yè)?jù)報(bào)道水溶性維生素E本身具有抗癌活性，且對(duì)抑制抗藥性也有一定的作用。因此在本發(fā)明中我們采用TPGS作為共聚物納米粒的表面活性劑兼長(zhǎng)循環(huán)修飾劑，制備的納米粒同樣具有較好的長(zhǎng)循環(huán)效果。目前就紫杉醇長(zhǎng)循環(huán)納米粒這方面的技術(shù)還不成熟，尚沒(méi)有一套成熟的制備工藝制備出理想的長(zhǎng)效納米粒，很多都停留在實(shí)驗(yàn)室階段，無(wú)法完成規(guī)?；瘮U(kuò)大生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種紫杉醇納米粒制劑，該制劑可長(zhǎng)循環(huán)、毒副作用低、療效高、可靜脈注射。本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問(wèn)題在于提供一種全新的納米粒制備方法，該方法克服了本領(lǐng)域技術(shù)人員的固有偏見(jiàn)，方法簡(jiǎn)便，制備出的納米粒粒徑分布更窄。本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種紫杉醇納米粒制劑，制劑中包含紫杉醇、共聚物、助溶劑和注射用水。其中，所述共聚物為聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乳酸，所述的共聚物與紫杉醇的重量比例為5 I至20 1，特別優(yōu)選為10 I。所述的助溶劑為水溶性維生素E或其與大豆卵磷脂的混合物，優(yōu)選為水溶性維生素E。所述的助溶劑與紫杉醇的重量比例為15 I至60 1，優(yōu)選為30 I。所述的納米粒制劑的平均粒徑小于200nm,納米粒的藥物包封率可達(dá)到70%至95%。本發(fā)明采用PLGA、PLA做為包裹疏水性藥物的共聚物，利用TPGS作為助溶劑形成一層保護(hù)納米粒的殼層材料，并且我們?cè)诠に嚿狭肀傩侣?，采用反向滴加法制備了粒徑均勻、包封率高、載藥量高的新型紫杉醇納米粒，粒徑控制在200納米以下。一種長(zhǎng)循環(huán)納米粒制劑是由以下材料制備完成的紫杉醇I份，載體材料5-20份，助溶劑15-60份，納米粒的粒徑范圍為50 200nm ;所述的載體材料為PLA或者PLGA，所述的助溶劑水溶性維生素E(TPGS)、或其與大豆卵磷脂的混合物。本發(fā)明還提供了上述紫杉醇納米粒制劑的制備方法，包括如下步驟i將紫杉醇和共聚物溶于有機(jī)溶劑中作為油相，助溶劑溶于水中作為水相；ii在剪切力作用下將水相滴加到油相中，得到藍(lán)色乳光的乳液；iii去除有機(jī)溶劑。其中，所述有機(jī)溶劑為丙酮或乙腈，優(yōu)選為丙酮。油相和水相的體積比例為I : 3至I : 8，優(yōu)選為I : 5。本發(fā)明的長(zhǎng)循環(huán)紫杉醇納米粒，由于本身粒徑在50_200nm，可用于靜脈注射和靜脈滴注。所使用的共聚物為可降解材料，本身無(wú)毒副作用，代謝產(chǎn)物為水和二氧化碳，中間產(chǎn)物也是人體正常的代謝產(chǎn)物。水溶性維生素E是人身體必須的材料，作為助溶劑有比其他助溶劑更好的優(yōu)勢(shì)，而且在我們的工藝中TPGS的用量也比其他助溶劑低，即降低了材料的用量，又避免了毒副作用，據(jù)報(bào)道TPGS本身就具有一定的抗腫瘤活性，而且在抑制抗藥性方面也有一定的作用。TPGS的端基相當(dāng)于PEG片段，能夠減少血液對(duì)納米粒的調(diào)理作用，從而延長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間。目前現(xiàn)有的技術(shù)中制備納米粒的方法包括納米沉淀法、自動(dòng)乳化法、乳化聚合法、噴霧干燥法和高壓乳均法等。其中納米沉淀法制備工藝簡(jiǎn)單，可應(yīng)用于大規(guī)模生 產(chǎn)，是一種具備廣泛應(yīng)用前景的制備方法。紫杉醇納米粒給藥后，納米級(jí)別的紫杉醇與腫瘤組織接觸并向其深處滲透，對(duì)腫瘤組織進(jìn)行特異性殺傷，由于EPR效應(yīng)粒徑在50-200nm之間的納米粒材料容易在腫瘤部位聚集，起到藥物累積的效果，可以對(duì)腫瘤更好的殺傷，由于TPGS等殼層的存在使得納米粒可以緩慢的釋放藥物，起到緩釋的效果，減少用藥的次數(shù)。由于TPGS中PEG片段的存在，使得納米粒表面形成比較大的空間位阻，起到長(zhǎng)循環(huán)的作用，另外TPGS等載體材料是納米粒表面形成很多微孔結(jié)構(gòu)，增加納米載體中藥物的釋放，維持腫瘤組織中紫杉醇的有效治療濃度。


圖I正向滴加(實(shí)施例I)納米粒的粒徑分布2反向滴加(實(shí)施例2)納米粒的粒徑分布3腫瘤體積隨注射時(shí)間的變化圖
具體實(shí)施例方式下面用實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受其限制。實(shí)施實(shí)例I :正向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，120mg TPGS溶解于50ml雙蒸水中形成水相；將有機(jī)相以lml/min的速度滴入水相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒。激光動(dòng)態(tài)散射儀測(cè)試平均粒徑為105. 02±30nm，粒徑分布結(jié)果如圖I所示。納米粒的包封率為80. 2±4%，分散系數(shù)為0. 389。實(shí)施實(shí)例2 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，120mg TPGS溶解于50ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒，激光動(dòng)態(tài)散射儀的測(cè)試得到的平均粒徑為140. 01±10nm，粒徑分布結(jié)果如圖2所示。納米粒的包封率為90. 4±3%，分散系數(shù)為0.042。
實(shí)施實(shí)例3 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和8mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，120mg TPGS溶解于50ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒，激光動(dòng)態(tài)散射儀的測(cè)試得到的平均粒徑為156. 01±10nm，粒徑分布結(jié)果如圖2所示。納米粒的包封率為84. 4±3%，分散系數(shù)為0. 108。實(shí)施實(shí)例4 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和2mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，120mg TPGS溶解于50ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒，激光動(dòng)態(tài)散射儀的測(cè)試得到的平均粒徑為135. 51±10nm，粒徑分布結(jié)果如圖2所示。納米粒的包封率為92. 4±3%，分散系數(shù)為0. 035。實(shí)施實(shí)例5 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，84mgTPGS溶解于30ml雙蒸水中形成水相，將36mg大豆卵磷脂溶于IOml 4%乙醇水溶液中，將兩種水溶液混合形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，接著反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒。激光動(dòng)態(tài)散射儀測(cè)得的納米粒平均粒徑為102. 32±10nm。納米粒的包封率為85. 2 ± 4 %，分散系數(shù)為0. 087。實(shí)施實(shí)例6 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，48mgTPGS溶解于30ml雙蒸水中形成水相，將72mg大豆卵磷脂溶于IOml 4%乙醇水溶液中，將兩種水溶液混合形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，接著反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒。激光動(dòng)態(tài)散射儀測(cè)得的納米粒平均粒徑為87. 44±20nm。納米粒的包封率為70. I ±5%，分散系數(shù)為0. 163。實(shí)施實(shí)例7 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，120mgTPGS溶解于80ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒，激光動(dòng)態(tài)散射儀測(cè)試得到納米粒的平均粒徑為143. 29±15nm。納米粒的包封率為88. I ±3%，分散系數(shù)為0. 154。實(shí)施實(shí)例8 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，120mgTPGS溶解于30ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒，激光動(dòng)態(tài)散射儀測(cè)試得到納米粒的平均粒徑為160. 21±20nm。納米粒的包封率為70. I ±5%，分散系數(shù)為0. 235。實(shí)施實(shí)例9 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，120mg TPGS溶解于50ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒，激光動(dòng)態(tài)散射儀的測(cè)試得到的平均粒徑為190. 41±30nm，粒徑分布結(jié)果如圖2所示。納米粒的包封率為79. 4±3%，分散系數(shù)為0. 263。實(shí)施實(shí)例10 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，240mg TPGS溶解于50ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒，激光動(dòng)態(tài)散射儀的測(cè)試得到的平均粒徑為150. 44±20nm，粒徑分布結(jié)果如圖2所示。納米粒的包封率為93. 4±3%，分散系數(shù)為0. 058。實(shí)施實(shí)例11 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml丙酮溶劑中作為油相，60mg TPGS溶解于50ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒，激光動(dòng)態(tài)散射儀的測(cè)試得到的平均粒徑為165. 81±25nm，粒徑分布結(jié)果如圖2所示。納米粒的包封率為71. 4±3%，分散系數(shù)為0. 173。實(shí)施實(shí)例12 :反向滴加長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備40mgPLGA和4mg紫杉醇共同溶于IOml乙腈溶劑中作為油相，120mgTPGS溶解于50ml雙蒸水中形成水相；將水相以5ml/min的速度滴入有機(jī)相中，300r/min低速攪拌下形成淺藍(lán)色的納米乳，接著反應(yīng)IOmin后,轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)下處理30min,去除丙酮溶液，得到長(zhǎng)循環(huán)納米粒。激光動(dòng)態(tài)散射儀測(cè)得的平均粒徑為170.54±30nm。納米粒的包封率為81.4±2%，分散系數(shù)為0. 164。實(shí)施實(shí)例13 :長(zhǎng)循環(huán)納米粒包封率的測(cè)定采用液相高效色譜測(cè)紫杉醇的含量色譜柱安捷倫C18柱；流動(dòng)相乙腈水(50 50 V v);檢測(cè)波長(zhǎng)227nm;流速l.Oml/min;進(jìn)樣量20ul。分別取濃度為0. 25 50ug/ml的紫杉醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照色譜條件進(jìn)行測(cè)試，以峰面積對(duì)紫杉醇濃度進(jìn)行曲線擬合，建立回歸方程。將得到的納米粒混懸液先1000r/min低速離心IOmin去掉沒(méi)有包進(jìn)去的藥物結(jié)晶，再在10000r/min高速離心30min，將上清液吸掉，然后用高純水復(fù)溶再加入同等體積的乙腈破乳，將破乳得到的溶液按照色譜條件測(cè)定紫杉醇的含量。同時(shí)取未經(jīng)任何處理的納米粒混懸液加同樣體積的乙腈破乳，按照HPLC條件測(cè)紫杉醇的含量包封率)=納米粒包封的藥物的量/投入藥物總的量X 100%所得微球的平均包封率為80 95 %。實(shí)施實(shí)例14 :長(zhǎng)循環(huán)納米粒的凍干將納米?；鞈乙弘x心處理過(guò)后，加入10%體積分?jǐn)?shù)的蔗糖，在_40°C下預(yù)凍10h，然后在_60°C冷阱條件下冷凍干燥48h，即的長(zhǎng)循環(huán)納米粒凍干粉末。凍干粉末復(fù)溶后粒徑基本沒(méi)有發(fā)生變化，沒(méi)有聚集現(xiàn)象出現(xiàn)。實(shí)施實(shí)例15 :長(zhǎng)循環(huán)納米粒的動(dòng)物體實(shí)驗(yàn) 為了更好的評(píng)價(jià)我們納米粒的抗腫瘤性能，以下用紫杉醇緩釋納米粒(實(shí)施例2，
3)同現(xiàn)有的臨床用紫杉醇注射液在小鼠肺癌細(xì)胞A549細(xì)胞系皮下瘤模型實(shí)驗(yàn)及其結(jié)果來(lái)比較說(shuō)明紫杉醇納米粒在治療而行腫瘤中的有效性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示紫杉醇納米粒對(duì)A549細(xì)胞系皮下瘤模型有較好的抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。紫杉醇緩釋納米粒劑型(紫杉醇劑量為10mg/kg)與紫杉醇注射液劑型(紫杉醇含量為10mg/kg)相比，毒性較小，且療效持久，不需要長(zhǎng)時(shí)間頻繁給藥。腫瘤抑制結(jié)果如圖3所示。
權(quán)利要求
1.一種紫杉醇納米粒制劑，其特征在于所述制劑中包含紫杉醇、共聚物、助溶劑和注射用水。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的紫杉醇納米粒制劑，其特征在于所述共聚物為聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乳酸，所述的共聚物與紫杉醇的重量比例為5 I至20 : I。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的紫杉醇納米粒制劑，其特征在于所述的助溶劑為水溶性維生素E或其與大豆卵磷脂的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的紫杉醇納米粒制劑，其特征在于所述的助溶劑與紫杉醇的重量比例為15 I至60 I。
5.根據(jù)權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的紫杉醇納米粒制劑，其特征在于所述的納米粒制劑的平均粒徑小于200nm，納米粒的藥物包封率為70%至95%。
6.一種制備根據(jù)權(quán)利I至5中任一項(xiàng)所述的紫杉醇納米粒制劑的方法，其特征在于該方法包括以下步驟 i將紫杉醇和共聚物溶于有機(jī)溶劑中作為油相，助溶劑溶于水中作為水相； ii在剪切力作用下將水相滴加到油相中，得到藍(lán)色乳光的乳液； iii去除有機(jī)溶劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于有機(jī)溶劑為丙酮或乙腈。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的制備方法，其特征在于油相和水相的體積比例為I: 3至 I : 8。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種紫杉醇長(zhǎng)循環(huán)納米粒。本發(fā)明的納米粒制劑包含紫杉醇、共聚物、助溶劑、注射用水等，所制備的納米粒中紫杉醇占共聚物的重量分率為5％～20％。本發(fā)明還公開了一種紫杉醇長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備方法。采用反向滴加溶劑的方法將含助溶劑水溶性維生素E(TPGS)的水相滴入含紫杉醇和共聚物的油相，得到粒徑均勻、平均粒徑小于200nm、包封率高、穩(wěn)定性好的納米粒制劑。本納米粒制劑可用于惡性腫瘤的治療，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)證明其具有更高的安全性和有效性。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102772368SQ201210298490
公開日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年8月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月20日
發(fā)明者余波, 王國(guó)營(yíng), 袁媛 申請(qǐng)人:杭州普施康生物科技有限公司