含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分的活化視黃酸受體的抗老化用組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分的抗老化用組合物，更具體地說(shuō)，涉及一種含有天然原料枸杞以及松葉的混合提取物，活化視黃酸受體，從而具有優(yōu)異的抗老化或者改善皺紋的效果的皮膚外用劑組合物。
【專利說(shuō)明】含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分的活化視黃酸受體的抗老化用組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分的抗老化用組合物，更具體地說(shuō)，涉及一種含有枸杞和松葉的混合物提取物作為有效成分的活化視黃酸受體的抗老化用組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著年齡的增大，人的老化也逐漸嚴(yán)重。特別是皮膚的變化特別明顯，這種皮膚變化的主要現(xiàn)象為皺紋增加，皮膚變厚，失去彈性，并且由于干燥變得粗糙，以及產(chǎn)生斑點(diǎn)等。而這些現(xiàn)象的主要原因被認(rèn)為是受到太陽(yáng)光的長(zhǎng)期照射。太陽(yáng)光對(duì)于皮膚的這種影響被稱為光老化，其主要是由于太陽(yáng)光照射引起表皮和真皮組織的變化而導(dǎo)致的。有報(bào)道稱，在皮膚上涂抹含有維甲酸(全反式維甲酸)、視黃醇以及其衍生物、果酸(AHAs)等面霜時(shí)，可改善皮膚的光老化。然而，由于維甲酸為脂溶性，因此其吸收力低，在生物體內(nèi)不穩(wěn)定，且對(duì)皮膚有刺激性，并且在潛伏期間內(nèi)還可發(fā)生皮膚干燥、傷口和疤痕的脫落等副作用，故將其用做醫(yī)藥以及化妝品的主原料仍存在很大的困難(USP4，677，120)。而視黃醇(維生素A)具有在光、氧氣、熱、脂類過(guò)氧化物等的條件下不穩(wěn)定的缺點(diǎn)，因此也不易使用，由于這些原因必需使用丁基羥基甲苯(BHT)、D-a-生育酚、丁基羥基茴香醚(BHA)、抗壞血酸、生育酚亞油酸酯等抗氧化劑提升其穩(wěn)定性；或者為了與外部隔離，使用脂質(zhì)體或者膠囊等方法，使其穩(wěn)定，而這些均需要投資額外的費(fèi)用(USP6，221，927，USP5, 744，148)。
[0003]對(duì)于通過(guò)活化視黃酸受體(RAR)預(yù)防或者改善皮膚老化的同時(shí)，對(duì)皮膚沒(méi)有副作用以及具有穩(wěn)定性的原料的研究大量地進(jìn)行著。本發(fā)明正是這種研究的結(jié)果，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)使用天然原料枸杞和松葉的混合提取物作為皮膚外用劑組合物，具有優(yōu)異的防止皮膚老化的效果。而目前 為止，對(duì)于枸杞和松葉的上述效果沒(méi)有被研究過(guò)。
[0004]枸杞是枸杞樹(shù)(Lycium chinense Miller)的果實(shí),性狀為一邊較尖的紡錘狀,果皮為紅色或者深紅色。外表有皺褶，而里面有呈黃色的白色籽。籽為扁橢圓形，直徑約為2mm?；緹o(wú)味，味道微甜，具有收斂性。已知的主要功能為肝細(xì)胞保護(hù)作用、降壓作用，此外已知還具有促進(jìn)以及調(diào)節(jié)免疫功能的作用、抗老化作用、抗動(dòng)脈硬化作用、雌激素類似作用、抗腫瘤作用、促進(jìn)造血功能的作用。
[0005]松葉為松樹(shù)(Pinus sylvestris)的葉子和新芽。新鮮的松葉中含有大量的抗壞血酸和維生素A、維生素B、維生素K ;具有苦味的苦味物質(zhì)、黃酮類、花青素、約7至12%的樹(shù)脂(松脂)、約5%左右的鞣質(zhì)(I )、碳水化合物、精油(葉子中的含量為0.13至
1.3%，新葉(芽)中的含量為0.36%，一年生樹(shù)枝中的含量為0.2至0.9%)等。此外，確認(rèn)了整個(gè)松樹(shù)中含有醇、酯等可排除體內(nèi)排泄物,并促進(jìn)新陳代謝的成分；以苯酚化合物、激肽、松脂(terpentine)、維生素A、維生素C、葉綠素為主要成分的成分；還含有格里高基寧(glycokinin, 營(yíng)早3〕iy)、松香酸(0剛_u#)，還具有豐富的鐵，而赤松的葉子中含有24種氨基酸，還確認(rèn)了有19種蛋白質(zhì)構(gòu)成的氨基酸。松葉是維生素C的原料和供給源。由于松葉呈現(xiàn)很深的綠色，故可攝取到豐富的胡蘿卜素。松葉的藥用價(jià)值可例舉萜烯、苯酚化合物、鞣質(zhì)等具有的一般效果，而營(yíng)養(yǎng)價(jià)值可為由各種營(yíng)養(yǎng)素以及無(wú)機(jī)成分，即脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素以及礦物質(zhì)組成的獨(dú)特的成分體現(xiàn)。還有報(bào)道發(fā)現(xiàn)松葉中具有豐富的葉綠素、維生素A、維生素C、特殊維生素P、蛋白質(zhì)、脂肪、磷、鐵、酶、精油等各種礦物成分，因此對(duì)于去除膽固醇具有優(yōu)異的效果，其中含有0.00355%的鈣、0.043%的鉀、0.2%的油酸(害、0.3198%的甘氨酸、0.3467%的絲氨酸、0.00376%的維生素P (蘆丁)、
0.0015%的維生素Α、0.1301%的維生素C。此外，其有益于高血壓、中風(fēng)、糖尿病、老年癡呆，還具有防止老化、抗癌的效果，還有助于肝和胃、便秘和貧血、慢性酒精中毒以及消除宿醉、去除尼古丁、皮膚美容和改善體質(zhì)、減肥、男性精力、各種壓力、由過(guò)度的吸煙和飲酒引起的頭重、眼脹等，尤其是具有提神醒腦的作用，而對(duì)于應(yīng)試考生非常有好處。每100g的松葉含有的成分為:水分(42.9%)、天然蛋白質(zhì)(0.07%)、葡萄糖(30.6%)、礦物質(zhì)(K、Ca、Fe、Mg、P)、維生素等，其是很好的儲(chǔ)存了上述天然營(yíng)養(yǎng)成分的寶庫(kù)。葉綠素作為食品營(yíng)養(yǎng)成分，其具有造血作用(增加血紅蛋白)、肉芽組織的生長(zhǎng)(破損皮膚的再生)、提升腦細(xì)胞活力、降低膽固醇、促進(jìn)組織細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題
[0007]本發(fā)明人為了提供對(duì)于皮膚具有防止老化效果的組合物，利用對(duì)皮膚沒(méi)有副作用，且還具有穩(wěn)定性的天然原料進(jìn)行了反復(fù)多樣的實(shí)驗(yàn)。結(jié)果，發(fā)現(xiàn)將天然原料枸杞和松葉的混合提取物作為皮膚外用劑組合物使用時(shí)，具有優(yōu)異的防止皮膚老化的效果，從而完成了本發(fā)明。
[0008]因此，本發(fā)明的目的在于，提供一種具有優(yōu)異的抗老化效果的皮膚外用劑組合物，其含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分。
·[0009]技術(shù)方案
[0010]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分的抗老化用皮膚外用劑組合物。
[0011]有益效果
[0012]根據(jù)本發(fā)明的組合物，通過(guò)混合使用枸杞和松葉的提取物，活化視黃酸受體，抑制膠原酶的表達(dá)，從而發(fā)揮改善皺紋以及抗老化的作用。并且，包含其的組合物副作用較小且安全，可廣泛應(yīng)用于化妝品或者醫(yī)藥領(lǐng)域。
[0013]最佳實(shí)施方式
[0014]本發(fā)明涉及一種含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分的組合物，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種含有枸杞和松葉的混合物提取物作為有效成分的，活化視黃酸受體的抗老化用組合物。
[0015]對(duì)于所述枸杞及松葉的混合提取物的制備方法沒(méi)有特別的限制，可利用本領(lǐng)域已知的通常的方法實(shí)施。例如，清洗枸杞后進(jìn)行干燥，研成粉末后添加水或者有機(jī)溶劑進(jìn)行提取，之后用濾布進(jìn)行過(guò)濾獲得濾液，使上述濾液熟化后，用濾紙過(guò)濾，然后用分液漏斗進(jìn)行提取，再對(duì)分離出的提取物進(jìn)行減壓濃縮和干燥，從而可獲得枸杞提取物。松葉提取物也可用相同的方法制備，并混合上述兩種提取物制備混合提取物。其中，優(yōu)選將以相同的比例混合枸杞提取物和松葉提取物。
[0016]本發(fā)明中可使用的有機(jī)溶劑可選自乙醇、甲醇、丁醇、醚、乙酸乙酯、氯仿或者這些有機(jī)溶劑和水的混合溶劑，優(yōu)選使用70%的乙醇。此時(shí)，優(yōu)選的提取溫度為25-30°C，優(yōu)選的提取時(shí)間為24-26小時(shí)。如脫離上述提取溫度以及提取時(shí)間時(shí)，可導(dǎo)致提取效率降低或者發(fā)生成分的變化。并且，對(duì)濾液進(jìn)行熟化的溫度優(yōu)選為4-15°C，熟化時(shí)間優(yōu)選為5-7天。如脫離上述熟化溫度及熟化時(shí)間時(shí)，可導(dǎo)致成分的變化。
[0017]本發(fā)明的組合物中，對(duì)于枸杞及松葉混合提取物的含量沒(méi)有特別的限制。更具體地說(shuō)，本發(fā)明枸杞及松葉混合提取物中，相對(duì)于組合物總重量，可含有40-60重量％，優(yōu)選含有45-55重量％的枸杞提取物。其中，如果含量小于40重量％時(shí)，皮膚抗老化效果甚微，而超過(guò)60重量％時(shí)，相比于增加的提取物，其效果的增加甚微。并且，相對(duì)于組合物總重量，可含有40-60重量％，優(yōu)選含有45-55重量％的松葉提取物。其中，如果含量小于40重量％時(shí)，皮膚抗老化效果甚微，而超過(guò)60重量％時(shí)，相比于增加的提取物，其效果的增加甚微。
[0018]本發(fā)明含有枸杞及松葉的混合提取物作為有效成分，從而提供抗老化效果。更具體地說(shuō)，通過(guò)活化視黃酸受體，抑制膠原酶的表達(dá)，促進(jìn)膠原的生成，由此緩解由于人體皮膚老化引起的膠原減少現(xiàn)象，從而提供抑制皮膚老化或者改善皺紋的效果。
[0019]本發(fā)明的組合物可為皮膚外用劑組合物，更具體地說(shuō)，可為抗老化用組合物或者改善皺紋用組合物。
[0020]將根據(jù)本發(fā)明的皮膚外用劑組合物，以化妝品形態(tài)進(jìn)行制劑化時(shí)，可以以柔潤(rùn)化妝水、營(yíng)養(yǎng)化妝水、按摩霜、營(yíng)養(yǎng)霜、保濕霜、手霜、粉底、精華液、營(yíng)養(yǎng)精華液、霜、香皂、潔面泡沫、潔面乳液、潔面霜、身體乳液、身體霜或者面膜等形態(tài)制劑化，但并不僅限于此。并且，本發(fā)明的組合物還可以是具有混懸液、軟膏、乳液或者噴霧劑等劑型的藥物組合物。在各種劑型中，對(duì)于其 成分本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)其它外用劑的種類或者使用目的，適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行選擇和組合。
【具體實(shí)施方式】
[0021]以下，將通過(guò)本發(fā)明的下述實(shí)施例以及試驗(yàn)例詳述本發(fā)明。但下述實(shí)施例以及試驗(yàn)例僅是為了幫助理解本發(fā)明，并不限定本發(fā)明。
[0022][實(shí)施例1]枸杞提取物的制備
[0023]用純凈水洗滌枸杞后干燥，將200g研成粉末的枸杞粉放入I升的70%乙醇水溶液中，在帶有冷凝器的提取機(jī)中煮12小時(shí)進(jìn)行提取，然后用300網(wǎng)目的濾布過(guò)濾后，將上述濾液在4-15°C條件下放置7天進(jìn)行熟化，之后再用沃特曼2號(hào)濾紙進(jìn)行過(guò)濾。
[0024]將上述提取液放入3升裝分液漏斗中，在此加入I升乙酸乙酯后搖晃攪勻，待完全分離成兩層后，取上層(乙酸乙酯層)。再用分液漏斗對(duì)下層(水層)進(jìn)行兩次提取。
[0025]將分離出的上層合并，利用帶有冷凝器的蒸餾裝置，在50°C條件下進(jìn)行減壓濃縮，并進(jìn)行干燥，獲得干重為35.Sg的物質(zhì)。
[0026][實(shí)施例2]松葉提取物的制備
[0027]用純凈水洗滌松葉后干燥，將200g研成粉末的松葉粉放入I升的70%乙醇水溶液中，在帶有冷凝器的提取機(jī)中煮12小時(shí)進(jìn)行提取，然后用300網(wǎng)目的濾布過(guò)濾后，將上述濾液在4-15°C條件下放置7天進(jìn)行熟化，之后再用沃特曼2號(hào)濾紙進(jìn)行過(guò)濾。
[0028]將上述提取液放入3升裝分液漏斗中，在此加入I升乙酸乙酯后搖晃攪勻，待完全分離成兩層后，取上層(乙酸乙酯層)。再用分液漏斗對(duì)下層(水層)進(jìn)行兩次提取。
[0029]將分離出的上層合并，利用帶有冷凝器的蒸餾裝置，在50°C條件下進(jìn)行減壓濃縮，并進(jìn)行干燥，獲得干重為24.9g的物質(zhì)。
[0030][試驗(yàn)例I]改善皺紋效果
[0031]對(duì)通過(guò)上述實(shí)施例1獲得的枸杞提取物、通過(guò)上述實(shí)施例2獲得的松葉提取物，以及等量混合用100g枸杞通過(guò)上述實(shí)施例1的方法獲得的枸杞提取物和用100g松葉通過(guò)上述實(shí)施例2的方法獲得的松葉提取物得到的提取物(實(shí)施例3)，進(jìn)行膠原酶表達(dá)抑制功能(生成抑制活性)的測(cè)定。其中，將已知能抑制膠原酶表達(dá)的視黃酸作為陽(yáng)性對(duì)照組，并以下述方法進(jìn)行測(cè)定。
[0032]首先，在裝有含2.5% 胎牛血清的 DMEM (Dulbecco’ s Modified Eagle，s Media)培養(yǎng)基的96孔平板培養(yǎng)器(96-well microtiter plate)中，接種5000細(xì)胞/孔(well)的人成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，使其長(zhǎng)滿至90%。在無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時(shí)之后，分別利用溶解于無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基中的100 μ g/ml的上述實(shí)施例1和上述實(shí)施例2、分別混合100 μ g/ml濃度的上述實(shí)施例1與上述實(shí)施例2的混合提取物(實(shí)施例3)，以及I μ M視黃酸作為試驗(yàn)物質(zhì)，處理24小時(shí)后獲得細(xì)胞培養(yǎng)液。
[0033]之后，利用膠原酶測(cè)定裝置(美國(guó)法瑪西亞試劑盒公司，Amersham Pharmacia),測(cè)定獲得的細(xì)胞培養(yǎng)液的膠原酶生成程度。
[0034]首先，在均勻涂布有膠原酶I抗的96孔平板(96-well plate)中，加入獲取的上述細(xì)胞培養(yǎng)液，在恒溫槽中，·進(jìn)行3小時(shí)的抗原-抗體反應(yīng)。3小時(shí)后再將結(jié)合有發(fā)色基團(tuán)的膠原II型膠原抗體添加至96孔平板中，再次反應(yīng)15分鐘。15分鐘后，添加誘發(fā)顯色的物質(zhì)，在室溫進(jìn)行15分鐘的顯色，之后再加入IM的硫酸，終止反應(yīng)(顯色)。反應(yīng)液呈黃色，且隨著反應(yīng)進(jìn)行程度的不同，其黃色的顯色程度也不同。
[0035]利用吸光測(cè)定計(jì)，在405nm的波長(zhǎng)下測(cè)定呈黃色的96孔平板的吸光度，根據(jù)下述數(shù)學(xué)式I計(jì)算膠原酶表達(dá)程度，其結(jié)果表示在下述表1中，其是以非處理組的膠原酶表達(dá)程度作為100進(jìn)行比較的結(jié)果。此時(shí)，從未用試驗(yàn)物質(zhì)進(jìn)行處理的組獲取的細(xì)胞培養(yǎng)液作為對(duì)照組。
[0036]數(shù)學(xué)式I
[0037]膠原酶表達(dá)程度(％) =A/B X 100
[0038]A:用上述試驗(yàn)物質(zhì)處理的細(xì)胞組吸光度
[0039]B:對(duì)照組的吸光度
[0040]表1
【權(quán)利要求】
1.一種抗老化用化妝品組合物，其特征在于，其含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗老化用化妝品組合物，其特征在于，在所述混合提取物中，相對(duì)于組合物總重量,枸杞提取物以40-60重量％含有。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗老化用化妝品組合物，其特征在于，在所述混合提取物中，相對(duì)于組合物總重量，松葉提取物以40-60重量％含有。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗老化用化妝品組合物，其特征在于，所述組合物活化視黃酸受體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗老化用化妝品組合物，其特征在于，所述組合物通過(guò)抑制膠原酶的表達(dá)，從而用于改善皺紋。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的抗老化用化妝品組合物，其特征在于，所述組合物為選自柔潤(rùn)化妝水、營(yíng)養(yǎng)化妝水、按摩霜、營(yíng)養(yǎng)霜、保濕霜、手霜、粉底、精華液、營(yíng)養(yǎng)精華液、面霜、香皂、潔面泡沫、潔面乳液、潔面霜、身體乳液、身體霜或者面膜中的任意一種劑型。
7.一種抗老化用藥物組合物，其特征在于，其含有枸杞和松葉的混合提取物作為有效成分。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的抗老化用藥物組合物，其特征在于，所述組合物活化視黃酸受體。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的抗老化用藥物組合物，其特征在于，所述組合物通過(guò)抑制膠原酶的表達(dá)，從而用于改善皺紋。
10.根據(jù)權(quán)利要求7至9中任·一項(xiàng)所述的抗老化用皮膚外用劑藥物組合物，其特征在于，所述組合物為選自混懸液、軟膏、乳液或者噴霧劑中的任意一種劑型。
【文檔編號(hào)】A61K8/97GK103857383SQ201280048960
【公開(kāi)日】2014年6月11日 申請(qǐng)日期:2012年10月9日 優(yōu)先權(quán)日:2011年10月11日
【發(fā)明者】姜永圭, 樸葰星, 金志連, 羅勇柱, 樸錄賢, 廉明勛, 曹濬喆 申請(qǐng)人:株式會(huì)社愛(ài)茉莉太平洋