用于治療過(guò)度增生性障礙、優(yōu)選具有受損的p53功能的過(guò)度增生性障礙的包含CIP2A沉默 ...的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明是基于以下發(fā)現(xiàn)：沉默CIP2A(KIAA1524)基因會(huì)使癌細(xì)胞對(duì)某些小分子化學(xué)治療劑的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)活性敏化。因而，本發(fā)明涉及各種聯(lián)合治療、致敏方法和藥物組合物。本發(fā)明另外涉及基于得自所述對(duì)象的樣品中的CIP2A和p53表達(dá)和/或蛋白活性為對(duì)象選擇癌癥治療的方法。
【專利說(shuō)明】用于治療過(guò)度增生性障礙、優(yōu)選具有受損的P53功能的過(guò)度增生性障礙的包含ClP2A沉默劑的藥物組合
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及聯(lián)合癌癥治療劑的領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]癌癥是影響全世界所有社會(huì)群體的破壞性疾病。據(jù)估計(jì)2個(gè)男性中的I個(gè)和3個(gè)女性中的1個(gè)將在其一生中發(fā)展某種形式的癌癥。
[0003]令人感興趣的是，最近已經(jīng)確定，不論不同癌癥類型之間的表型變異性如何，有限數(shù)目的遺傳元件的微擾足以在許多不同的人細(xì)胞類型中誘發(fā)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(綜述見(jiàn)(Zhao等人，2004))。通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，Ras和端粒末端轉(zhuǎn)移酶(TERT)的活化，與腫瘤抑制蛋白p53和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白(Rb)的失活一起，可以永生化多種人細(xì)胞類型，所述人細(xì)胞類型可以隨后響應(yīng)于蛋白磷酸酶2A (PP2A)的抑制而轉(zhuǎn)化為致瘤狀態(tài)。因此，這些普通的遺傳元件可以被視作癌癥發(fā)展的主要調(diào)節(jié)劑(Zhao等人，2004)。
[0004]PP2A是在很大程度上保守的蛋白絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶(PSP)，其作為由一個(gè)催化亞基(PP2Ac或C)、一個(gè)支架亞基(PR65或A)和替代性的調(diào)節(jié)B亞基之一組成的三聚體蛋白復(fù)合物而起作用。如上所述，最近的實(shí)驗(yàn)證據(jù)已經(jīng)肯定地確認(rèn)，PP2A活性的抑制是人細(xì)胞轉(zhuǎn)化的先決條件(綜述見(jiàn)(Westermarck和Hahn, 2008))。盡管如此,關(guān)于在體內(nèi)調(diào)節(jié)PP2A復(fù)合物組成和/或活性的機(jī)制知之甚少。PP2A抑制機(jī)制的鑒別可提供開(kāi)發(fā)新類型的再活化PP2A腫瘤抑制物活性的癌癥治療劑的機(jī)會(huì)。該想法類似于以用小分子(諸如Nutlin-3)再活化P53的腫瘤抑制物活性為目的的癌癥治療方案(Vassilev等人，2004)。
[0005]在2007年，鑒別出了一種新穎的PP2A抑制劑蛋白，其被命名為PP2A的癌性抑制劑(CIP2A) (Junttila等人，2007)。CIP2A會(huì)與PP2A和與最重要的致癌轉(zhuǎn)錄因子之一MYC相互作用。此外，siRNA介導(dǎo)的CIP2A的消除顯著增加MYC-PP2A復(fù)合物中的PP2A活性，并導(dǎo)致MYC絲氨酸62去磷酸化和MYC蛋白降解。還已經(jīng)證實(shí)，CIP2A是惡性細(xì)胞生長(zhǎng)和體內(nèi)腫瘤形成所需的(Junttila 等人，2007; Khanna 等人，2009; Westermarck 和 Hahn,2008)。此外，最近的工作已經(jīng)證實(shí)了 CIP2A在幾種常見(jiàn)的人惡性腫瘤中的過(guò)表達(dá)，并且驗(yàn)證了它作為臨床上有關(guān)的人癌蛋白的作用(Khanna等人，2009; Westermarck和Hahn,
2008)。因而，這些結(jié)果證實(shí)，CIP2A是一種新穎的在人惡性腫瘤中抑制PP2A的人癌蛋白。
[0006]細(xì)胞殺死和/或細(xì)胞凋亡是癌癥治療方案的優(yōu)選終點(diǎn)。另一方面，固有的或獲得性的抗性是與當(dāng)前使用的化學(xué)療法有關(guān)的主要問(wèn)題。因而，盡管已經(jīng)揭示了惡性腫瘤的至少一些基礎(chǔ)機(jī)制，本領(lǐng)域需要開(kāi)發(fā)用于過(guò)度增生性疾病和尤其是癌癥的藥物。腫瘤抑制蛋白P53的活化會(huì)響應(yīng)于多種臨床使用的化療劑而介導(dǎo)細(xì)胞的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)(Chari等人，
2009)。但是，由于p53功能在大約50-70%的人癌癥中是受損的，這是化學(xué)療法抗性的一個(gè)重要原因(Chari等人，2009)。在大多數(shù)情況下，癌癥中的p53通過(guò)基因突變或通過(guò)p53的負(fù)調(diào)節(jié)劑(諸如MDM2)或病毒蛋白(諸如人乳頭瘤病毒(HPV) 16 E6蛋白)的過(guò)表達(dá)而失活。因而，為了克服抗藥性，顯然需要這樣的方案:其使攜帶在功能上受損的P53的那些癌細(xì)胞對(duì)化學(xué)療法敏化(Chari等人，2009)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用作藥物的至少一類CIP2A沉默劑和化學(xué)治療劑的組合，所述藥物用于治療包含具有受損的P53功能的細(xì)胞的過(guò)度增殖障礙，所述化學(xué)治療劑選自小分子酪氨酸激酶抑制劑、PARP抑制劑、CHKl抑制劑、硫代葡萄糖苷、烷化劑、植物生物堿、PI3K/mT0R抑制劑、組蛋白脫乙?；浮NA-PK抑制劑、STAT抑制劑、抗代謝藥和存活抑制劑。在權(quán)利要求1中闡述了每類藥劑的合適藥劑。
[0008]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了藥物組合物，其包含根據(jù)本發(fā)明的CIP2A沉默劑和化學(xué)治療劑的組合以及至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
[0009]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種使過(guò)度增生性細(xì)胞對(duì)化學(xué)治療劑敏化的方法，所述方法包括:在需要這種致敏的人或動(dòng)物對(duì)象中使CIP2A基因沉默。
[0010]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種在需要這種治療的人或動(dòng)物對(duì)象中治療過(guò)度增生性疾病的方法，所述方法包括:給所述對(duì)象伴隨地、同時(shí)地或相繼地施用至少一類CIP2A沉默劑和選自小分子酪氨酸激酶抑制劑、PARP抑制劑、CHKl抑制劑、硫代葡萄糖苷、烷化劑、植物生物堿、PI3K/mT0R抑制劑、組蛋白脫乙酰基酶、DNA-PK抑制劑、STAT抑制劑、抗代謝藥和存活抑制劑的化合物。在權(quán)利要求8中闡述了每個(gè)類別的合適化合物。
[0011]此外，本發(fā)明的一個(gè)方面提供了一種為需要這種治療的對(duì)象選擇癌癥治療的方法，其中所述方法包括:評(píng)價(jià)得自所述對(duì)象的樣品中的CIP2A和P53表達(dá)和/或蛋白活性，和對(duì)于其樣品為CIP2A表達(dá)和/或活性陰性的和p53活性受損的對(duì)象，選擇至少一種化學(xué)治療劑的單一療法，且對(duì)于其樣品為CIP2A表達(dá)陽(yáng)性的和p53活性受損的對(duì)象，選擇根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的聯(lián)合治療。
[0012]在上述方面的某些實(shí)施方案中，所述CIP2A沉默劑選自:siRNA分子、DsiRNA分子、人工miRNA前體、shRNA分子、反義寡核苷酸、核酶和阻止CIP2A向PP2Ac起作用的藥劑。在其它實(shí)施方案中，所述CIP2A沉默劑包含選自以下的核酸序列:SEQ ID N0:l_25，和與所述SEQ ID NO: 1-25具有至少80%序列同一性且保留它們的CIP2A沉默活性的序列。
[0013]在上述方面的某些實(shí)施方案中，要治療的過(guò)度增生性障礙選自:銀屑病、心肌肥大、良性腫瘤、實(shí)體癌癥和血液學(xué)癌癥。所述實(shí)體癌癥的非限制性例子包括:頭和頸的鱗狀細(xì)胞癌、結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、宮頸癌、食管癌、肺癌、肝癌、腦癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，而血液學(xué)癌癥的非限制性例子包括急性和慢性T-細(xì)胞和B-細(xì)胞白血病以及淋巴瘤。
[0014]在從屬權(quán)利要求、下面的附圖、詳細(xì)描述和實(shí)施例中闡述了本發(fā)明的其它具體實(shí)施方案、目的、細(xì)節(jié)和優(yōu)點(diǎn)。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0015]在下面，將借助于優(yōu)選的實(shí)施方案參考附圖更詳細(xì)地描述本發(fā)明，其中
圖1顯示了當(dāng)與單獨(dú)SCR SiRNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞相比時(shí)，在用與標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)治療劑組合的siRNA抑制CIP2A以后，在人衍生的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系T98G中誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡水平(即天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3/7活性)。[0016]圖2顯示了當(dāng)與單獨(dú)的SCR siRNA相比時(shí)，使用CTG測(cè)定在人衍生的宮頸癌細(xì)胞系HeLa中確定的、與不同化療藥物組合的CIP2A siRNA的降低細(xì)胞生存力的效力。
[0017]圖3證實(shí)了使用天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3/7測(cè)定所確定的各種化療藥物在原代小鼠淋巴瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的效力，所述原代小鼠淋巴瘤細(xì)胞源自CIP2A缺陷型(CIP2A+)小鼠或表達(dá)CIP2A的小鼠(CIP2A+/+)小鼠。
[0018]圖4證實(shí)，在用各種的化療藥物處理細(xì)胞以后，當(dāng)與表達(dá)CIP2A的細(xì)胞相比時(shí)，使用CTG測(cè)定確定的細(xì)胞生存力在源自CIP2A缺陷型(CIP2A+)小鼠的原代淋巴瘤細(xì)胞中顯著降低。
[0019]圖5是天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3/7測(cè)定，其測(cè)量當(dāng)與單獨(dú)的SCR siRNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞相比時(shí)，在用與標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)治療劑組合的siRNA抑制CIP2A以后，在人衍生的胃癌細(xì)胞系MKN28中誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡水平(即天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3/7活性)。
[0020]圖6證實(shí)，當(dāng)與單獨(dú)的SCR siRNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞相比時(shí)，在用與標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)治療劑組合的siRNA抑制CIP2A以后，在人衍生的乳腺癌細(xì)胞系MCF-7中沒(méi)有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(即天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3/7活性)。
【具體實(shí)施方式】
[0021]本發(fā)明是基于以下驚人發(fā)現(xiàn):沉默CIP2A基因會(huì)使p53腫瘤抑制蛋白功能受損的癌細(xì)胞對(duì)某些小分子化學(xué)治療劑的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)活性敏化。伴隨地沉默CIP2A基因和施用所述化學(xué)治療劑會(huì)導(dǎo)致其中已經(jīng)抑制P53功能的細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡和/或其它類型的細(xì)胞死亡的水平的累加性或協(xié)同性增加。另一方面，本發(fā)明表明，表達(dá)突變的P53的CIP2A陰性的淋巴瘤細(xì)胞對(duì)使用所述化學(xué)治療劑的單一療法更敏感。因而，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了CIP2A缺失和所述化學(xué)治療劑的聯(lián)合治療，而在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了通過(guò)檢測(cè)患者樣品的CIP2A和p53狀態(tài)而將癌癥患者分級(jí)進(jìn)行化療的方法。
[0022]本發(fā)明的患者分級(jí)方法包括，確定得自所述患者的癌癥組織樣品的CIP2A和p53狀態(tài)。應(yīng)當(dāng)選擇具有CIP2A陰性的和p53滅活的癌細(xì)胞的患者進(jìn)行使用化學(xué)治療劑的單一療法治療，而具有CIP2A陽(yáng)性的和p53滅活的癌細(xì)胞的患者應(yīng)當(dāng)用本發(fā)明的聯(lián)合治療(即CIP2A抑制與某些化學(xué)治療劑的施用一起)來(lái)治療。
[0023]通過(guò)多種方式可以確定癌癥組織樣品或體液中的CIP2A水平。例如，可以如下定量組織或體液中的CIP2A蛋白水平:i)通過(guò)RT-PCR或通過(guò)雜交技術(shù)，確定得自所述組織或體液的CIP2A mRNA表達(dá)，或ii)對(duì)預(yù)期含有蛋白CIP2A的組織或體液實(shí)施識(shí)別所述CIP2A的抗體，并檢測(cè)和/或定量所述抗體，或通過(guò)蛋白組學(xué)技術(shù)對(duì)所述組織或體液實(shí)施分析。合適的雜交技術(shù)包括例如DNA雜交和RNA印跡。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)免疫測(cè)定方案，例如標(biāo)記連接的免疫吸附測(cè)定、蛋白質(zhì)印跡和免疫組織化學(xué)方法，可以進(jìn)行抗體的檢測(cè)或定量。
[0024]通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)方法，可以確定癌癥組織或體液樣品中受損的p53功能。選擇的方法至少部分地取決于受損的p53功能的基礎(chǔ)機(jī)制。例如,如本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的，通過(guò)雜交技術(shù)、或通過(guò)DNA或RNA測(cè)序、或通過(guò)RNA或DNA的RT-PCR分析，可以進(jìn)行P53失活突變的檢測(cè)。通過(guò)與CIP2A水平相同的方式，可以確定p53的負(fù)調(diào)節(jié)劑(諸如MDM2或病毒蛋白諸如人乳頭瘤病毒(HPV) 16 E6蛋白)的過(guò)表達(dá)。
[0025]通過(guò)確定單獨(dú)的CIP2A和p53或者它們與其它蛋白或基因的組合的狀態(tài)，可以進(jìn)行所述患者分級(jí)方法。
[0026]通過(guò)本領(lǐng)域已知的任意合適的方法，包括、但不限于RNA干擾(RNAi)，可以得到CIP2A基因沉默。最常見(jiàn)的基于RNAi的基因沉默方案是使用小干擾RNA (siRNA)。
[0027]siRNA的原理在文獻(xiàn)中得到廣泛呈現(xiàn)。作為例子可以提及美國(guó)專利公開(kāi)2003/0143732,2003/0148507,2003/0175950,2003/0190635,2004/0019001,2005/0008617和2005/0043266。siRNA雙鏈體分子包含反義區(qū)和有義鏈，其中所述反義鏈包含與編碼某一蛋白質(zhì)的mRNA序列中的靶區(qū)互補(bǔ)的序列，且所述有義鏈包含與所述反義鏈互補(bǔ)的序列。因此，siRNA雙鏈體分子由2個(gè)核酸片段裝配成，其中I個(gè)片段包含反義鏈，且第2個(gè)片段包含所述siRNA分子的有義鏈。換而言之，siRNA是小雙鏈RNA (dsRNA)。所述有義鏈和反義鏈可以經(jīng)由接頭分子共價(jià)連接，所述接頭分子可以是多核苷酸接頭或非核苷酸接頭。所述反義鏈和有義鏈的長(zhǎng)度可以變化，且通常是各自約19-21個(gè)核苷酸。在某些情況下，siRNA可以包含22、23或24個(gè)核苷酸。
[0028]另一個(gè)基于RNAi的CIP2A沉默方案是，使用更長(zhǎng)的、通常25-35個(gè)核苷酸的Dicer底物siRNA (DsiRNA)，已經(jīng)報(bào)道其在某些情況下比對(duì)應(yīng)的常規(guī)21-聚體siRNA更有效(Kim等人，2005)。Dicer在體內(nèi)將DsiRNA加工成有活性的siRNA。
[0029]有活性的siRNA反義鏈在細(xì)胞中形成，并且它識(shí)別靶mRNA的靶區(qū)。這又會(huì)導(dǎo)致RISC內(nèi)切核酸酶復(fù)合物(RISC = RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物)對(duì)靶RNA的切割以及RNA依賴性的RNA聚合酶(RdRP)對(duì)額外RNA的合成，這可以激活Dicer并產(chǎn)生額外的siRNA雙鏈體分子，從而放大應(yīng)答。
[0030]本文中使用的術(shù)語(yǔ)“dsRNA”表示siRNA和DsiRNA兩者。
[0031]通常，但不一定，dsRNA的反義鏈和有義鏈二者包含幾個(gè)、通常1-3個(gè)核苷酸的3’-端突出端。所述3’突出端可以包括一個(gè)或多個(gè)修飾的核苷酸，諸如2’-O-甲基核糖核苷酸。所述反義鏈的5’-端通常是磷酸酯基團(tuán)(P)。具有末端磷酸酯基團(tuán)(P)的dsRNA雙鏈體比單鏈反義鏈更容易施用進(jìn)細(xì)胞中。在某些情況下，有義鏈的5’ -端或反義鏈和有義鏈二者的5’ -端可以包含P基團(tuán)。
[0032]由于其被存在于活細(xì)胞中的核糖核酸酶的降解，正常的、未修飾的RNA在生理?xiàng)l件下具有低穩(wěn)定性。如果要外源性地施用寡核苷酸，那么非常希望根據(jù)已知方法修飾該分子，以便增強(qiáng)其對(duì)抗化學(xué)和酶促降解的穩(wěn)定性。
[0033]在本領(lǐng)域中(例如在US 2005/0255487中，通過(guò)引用并入本文)廣泛描述了要在體內(nèi)外源性地施用的核苷酸的修飾。基本上可以修飾核苷酸的任何部分，即核糖、堿基和/或核苷酸間磷酸二酯鏈。例如，從核糖單位除去2’ -OH基團(tuán)以產(chǎn)生2’ -脫氧核糖核苷酸，會(huì)導(dǎo)致提高的穩(wěn)定性。先前也公開(kāi)了在該基團(tuán)處的其它修飾:用烷基、烯基、烯丙基、烷氧基烷基、鹵代、氨基、疊氮基或巰基替代核糖2’-OH基團(tuán)。還可以進(jìn)行在核糖單位處的其它修飾:含有在核糖的2’-位和4’-位之間的亞甲基連接的鎖核酸(LNA)可以用于產(chǎn)生更高的固有穩(wěn)定性。
[0034]此外，核苷酸間磷酸二酯鍵可以例如這樣進(jìn)行修飾:使得一個(gè)或多個(gè)氧被硫、氨基、烷基或烷氧基替代。也可以修飾核苷酸中的堿基。
[0035]優(yōu)選地，寡核苷酸包含在核糖處的一個(gè)或多個(gè)2’ -羥基的修飾，和/或一個(gè)或多個(gè)核苷酸間磷酸二酯鍵中的修飾，和/或在核糖的2’ -位和4’ -位之間的一個(gè)或多個(gè)鎖核酸(LNA)修飾。
[0036]特別優(yōu)選的修飾是例如用2’ -脫氧、2’ -O-甲基、2’ -鹵代(例如氟代)或2’ -甲氧基乙基替代一個(gè)或多個(gè)2’-OH基團(tuán)。特別優(yōu)選的是這樣的寡核苷酸:其中某些核苷酸間磷酸二酯鍵也被修飾，例如被硫代磷酸酯鍵替代。
[0037]在某些實(shí)施方案中，dsRNA可以含有一種或多種合成的或天然的核苷酸類似物，包括、但不限于，硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、甲基膦酸酯、手性-甲基膦酸酯和肽-核酸(PNA)，只要dsRNA保留它們的CIP2A沉默能力。
[0038]應(yīng)當(dāng)指出，上面提及的修飾僅是非限制性例子。
[0039]與RNAi相關(guān)的挑戰(zhàn)之一是，鑒別對(duì)相應(yīng)mRNA的有效dsRNA。應(yīng)當(dāng)指出，具有不完全互補(bǔ)性的基因會(huì)被dsRNA非故意地減量調(diào)節(jié)，從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)解釋和潛在毒性方面的問(wèn)題。但是，這可以通過(guò)用設(shè)計(jì)算法小心地設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)膁sRNA來(lái)部分地解決。這些計(jì)算機(jī)程序用一組規(guī)則篩選給定的靶序列，以發(fā)現(xiàn)具有低GC含量的序列段、內(nèi)部重復(fù)序列的缺乏、富含A/U的5末端和高局部自由結(jié)合能，這些是增強(qiáng)dsRNA的沉默效應(yīng)的特征。
[0040]為了鑒別在本發(fā)明中有用的試劑，使用商業(yè)和非商業(yè)算法設(shè)計(jì)了幾種不同的CIP2A siRNA。為此目的，將CIP2A的全長(zhǎng)cDNA序列(KIAA1524)裝載到siRNA算法程序(Eurofins MWG Operon’s Online Design Tool)和由 Cui 等人(Cui 等人，2004)開(kāi)發(fā)的獨(dú)立程序。此外，隨后通過(guò)基因組范圍的DNA序列比對(duì)(BLAST)篩選算法產(chǎn)生的siRNA序列，以消除沒(méi)有免于脫靶的siRNA。換而言之，具有與除靶基因(CIP2A)以外的其它基因匹配的更短序列區(qū)域的所有那些siRNA被認(rèn)為對(duì)于進(jìn)一步應(yīng)用而言是無(wú)價(jià)值的。
[0041]然后將得到的siRNA轉(zhuǎn)染至不同的細(xì)胞系，并通過(guò)測(cè)量用CIP2A特異性抗體進(jìn)行siRNA處理以后CIP2A蛋白的量而在蛋白水平研究它們的降解mRNA和進(jìn)一步缺失CIP2A翻譯的能力(表1)。
[0042]表1.CIP2A 特異性的 siRNA
【權(quán)利要求】
1.用作藥物的至少一類CIP2A沉默劑和選自以下的化合物的組合，所述藥物用于治療包含具有受損的P53功能的細(xì)胞的過(guò)度增殖障礙: -小分子激酶抑制劑，其選自拉帕替尼、坦度替尼、凡他尼布、達(dá)沙替尼、PKC-412、H-7和舒尼替尼； -PARP抑制劑，其選自ABT-888、AG-014699、IND-71677、奧拉帕利和PARP抑制劑III ； -CHKl 抑制劑，其選自 UCN-01、AZD7762、PF-477736、SB 218078 和 G06976 ; -硫代葡萄糖苷，其是吲哚-3-甲醇； -烷化劑，其選自順鉬和替莫唑胺； -植物生物堿，其選自紫杉醇和長(zhǎng)春瑞濱； -PI3K/mTOR抑制劑，其選自雷帕霉素和TGX-221 ； -組蛋白脫乙?；敢种苿?，其是曲古抑菌素A ; -DNA-PK 抑制劑，其是 NU-7441 ； -STAT抑制劑，其是S31-201 ； -抗代謝藥，其是吉西他濱；和 -存活抑制劑，其選自LY2181308、特拉羅考和YM155。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合，其中所述CIP2A沉默劑選自:siRNA分子、DsiRNA分子、人工miRNA前體、shRNA分子、反義寡核苷酸、核酶和阻止CIP2A向PP2Ac起作用的藥劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合，其中所述CIP2A沉默劑包含選自以下的核酸序列:SEQID NO: 1-25，和與所述SEQ ID NO: 1_25具有至少80%序列同一性且保留它們的CIP2A沉默活性的序列。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合,其用于治療過(guò)度增生性疾病,所述過(guò)度增生性疾病選自銀屑病、心肌肥大、良性腫瘤、實(shí)體癌癥和血液學(xué)癌癥。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合，其中所述實(shí)體癌癥選自:頭和頸的鱗狀細(xì)胞癌、結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、宮頸癌、食管癌、肺癌、肝癌、腦癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，且所述血液學(xué)癌癥選自:急性和慢性T-細(xì)胞和B-細(xì)胞白血病和淋巴瘤。
6.藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-5中的任一項(xiàng)所述的組合和至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
7.使過(guò)度增生性細(xì)胞對(duì)化學(xué)治療劑敏化的方法，其通過(guò)在需要這種致敏的人或動(dòng)物對(duì)象中使CIP2A基因沉默。
8.在需要這種治療的人或動(dòng)物對(duì)象中治療過(guò)度增生性疾病的方法，所述方法包括:給所述對(duì)象伴隨地、同時(shí)地或相繼地施用至少一類CIP2A沉默劑和選自以下的化合物: -小分子激酶抑制劑，其選自拉帕替尼、坦度替尼、凡他尼布、達(dá)沙替尼、PKC-412、H-7和舒尼替尼； -PARP抑制劑，其選自ABT-888、AG-014699、IND-71677、奧拉帕利和PARP抑制劑III ； -CHKl 抑制劑，其選自 UCN-01、AZD7762、PF-477736、SB 218078 和 G06976 ; -硫代葡萄糖苷，其是吲哚-3-甲醇； -烷化劑，其選自順鉬和替莫唑胺； -植物生物堿，其選自紫杉醇和長(zhǎng)春瑞濱；-PI3K/mT0R抑制劑，其選自雷帕霉素和TGX-221 ； -組蛋白脫乙?；敢种苿?，其是曲古抑菌素A; -DNA-PK 抑制劑，其是 NU-7441 ； -STAT抑制劑，其是S31-201 ； -抗代謝藥，其是吉西他濱；和 -存活抑制劑，其選自LY2181308、特拉羅考和YM155。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述CIP2A沉默劑選自:siRNA分子、DsiRNA分子、人工miRNA前體、shRNA分子、反義寡核苷酸、核酶和阻止CIP2A向PP2Ac起作用的藥劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述CIP2A沉默劑包含選自以下的核酸序列:SEQID NO: 1-25和與所述SEQ ID NO: 1-25具有至少80%序列同一性且保留它們的CIP2A沉默活性的序列。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其用于治療過(guò)度增生性疾病，所述過(guò)度增生性疾病選自銀屑病、心肌肥大、良性腫瘤、實(shí)體癌癥和血液學(xué)癌癥。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述實(shí)體癌癥選自頭和頸的鱗狀細(xì)胞癌、結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌、 卵巢癌、前列腺癌、宮頸癌、腦癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。
13.為需要這種治療的對(duì)象選擇癌癥治療的方法，其中所述方法包括:評(píng)價(jià)得自所述對(duì)象的樣品中的CIP2A和p53表達(dá)和/或蛋白活性，和對(duì)于其樣品為CIP2A表達(dá)和/或活性陰性的和P53活性受損的對(duì)象，選擇至少一種化學(xué)治療劑的單一療法，且對(duì)于其樣品為CIP2A表達(dá)陽(yáng)性的和p53活性受損的對(duì)象，選擇根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合作為療法。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述對(duì)象患有在權(quán)利要求5或6中定義的疾病。
15.試劑盒，其包含用于實(shí)踐根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法的試劑。
【文檔編號(hào)】A61K31/4406GK103917228SQ201280054472
【公開(kāi)日】2014年7月9日 申請(qǐng)日期:2012年9月6日 優(yōu)先權(quán)日:2011年9月6日
【發(fā)明者】J.維斯特馬克, A.斯杰韋 申請(qǐng)人:圖爾庫(kù)大學(xué)