一種防治肉雞大腸桿菌病的中藥的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公布了一種防治肉雞大腸桿菌病的中藥，由下列藥物組成，按重量份數(shù)：黃連15～20、白頭翁20～24、黃芩15～20、大青葉20～28、石榴皮12～14、烏梅10～12、訶子15～20、黃芪12～15、山楂20～30、神曲10～20、郁金20～22、木香15～18。該方劑是根據(jù)中獸醫(yī)整體觀念和辨證論治理論研制而成，具有清熱解毒、抗菌消炎、澀腸止瀉的功效，防治肉雞大腸桿菌病效果顯著。推廣應(yīng)用表明：臨床治療肉雞大腸桿菌病，治愈率達84.5％。對肉雞場進行預(yù)防性用藥，肉雞大腸桿菌病死亡率由9.0％下降到1.89％；該方劑無殘留、不易產(chǎn)生耐藥性，肉產(chǎn)品食用安全；且中藥方劑制備方法簡單，使用方便，利于推廣。
【專利說明】一種防治肉雞大腸桿菌病的中藥
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及雞用中藥，特別涉及一種防治肉雞大腸桿菌病的中藥?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]肉雞大腸桿菌病是埃希氏大腸桿菌不同血清型引起的一種肉雞重要疫病之一。在臨床上主要表現(xiàn)為敗血癥、纖維素性氣囊炎、肝周炎、心包炎和腹膜炎。各個品種和日齡的雞都可感染，但肉雞最易感染，該病既可是肉雞原發(fā)性疾病，又常是新城疫、禽流感、慢性呼吸道疾病等多種疾病發(fā)生過程中的繼發(fā)病，而造成高的發(fā)病率和死亡率。
[0003]近幾年，豫北地區(qū)肉雞養(yǎng)殖發(fā)展十分迅速和集約化程度不斷提高，已成為重要的肉雞出口基地及農(nóng)民就業(yè)和致富的重要途徑。但由于肉雛雞質(zhì)量參差不齊、飼養(yǎng)管理的相對滯后以及抗菌藥的濫用，造成肉雞大腸桿菌病流行勢頭愈演愈烈，給肉雞養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展帶來嚴重威脅。而藥物殘留和人獸共患病也使該病具有重要的公共衛(wèi)生意義。中草藥及中藥方劑對肉雞大腸桿菌病有很好的防治效果，具有殘毒低和不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點，符合綠色養(yǎng)殖的主題。因此，傳統(tǒng)的中藥被人們重新重視，在畜禽傳染病防治中，發(fā)揮著越來越為重要的作用，有廣闊的發(fā)展前景。本發(fā)明根據(jù)中獸醫(yī)整體觀念和辨證論治理論，研制一種防治肉雞大腸桿菌病中藥復方制劑，旨在為臨床防治肉雞大腸桿菌病提供新的思路。
[0004]目前，臨床常用抗生素和其他化學抗菌藥物對肉雞大腸桿菌病進行治療，導致病原耐藥性日趨嚴重。藥物殘留危害人體健康而受到強烈關(guān)注與質(zhì)疑。而采用免疫接種預(yù)防肉雞大腸桿菌病，由于大腸桿菌的血清型非常多，使用菌苗免疫效果不理想，往往導致免疫失敗。近年來，雖然中藥已應(yīng)用于治療雞大腸桿菌病，但專用防治肉雞大腸桿菌病中藥方劑還不多見。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明提供一種防治肉雞大腸桿菌病的中藥，采用該方劑對肉雞大腸桿菌病防治效果突出，治愈率高，用于預(yù)防肉雞大腸桿菌病，可提高肉雞成活率，推廣應(yīng)用表明:臨床治療肉雞大腸桿菌病，治愈率達84.5%。對肉雞場進行預(yù)防性用藥，肉雞大腸桿菌病死亡率由9.0%下降到1.89%;無藥物殘留，不易產(chǎn)生耐藥性，且該中藥制劑具有制備方法簡單，使用方便等優(yōu)點。
[0006]為達到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為:
[0007]一種用于防治肉雞大腸桿菌的中藥，由黃連、白頭翁、黃芩、大青葉、石榴皮、烏梅、訶子、黃芪、山楂、神曲、郁金和木香組成。
[0008]進一步的，上述中藥各組分按重量份計為:黃連15~20、白頭翁20~24、黃芩15~20、大青葉20~28、石榴皮12~14、烏梅10~12、訶子15~20、黃芪12~15、山楂20~30、神曲10~20、郁金20~22、木香15~18。
[0009]進一步的，上述中藥各組分按重量份計為:黃連15、白頭翁20、黃芩15、大青葉20、石榴皮12、烏梅10、訶子15、黃芪12、山楂20、神曲10、郁金20和木香15。[0010]進一步的，所述用于防治肉雞大腸桿菌病的中藥的制備方法為:
[0011](I)按重量份數(shù)稱取各組分；
[0012](2)加入蒸餾水8倍質(zhì)量，浸泡35min、煎煮，煮沸后文火煎lh，用4層紗布過濾；
[0013](3)藥渣加入適量沸騰蒸餾水，煎煮30min，過濾；
[0014](4)合并兩次藥液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至藥液中生藥含量為0.5g / mL，置于4°C冰箱保存，備用。
[0015]進一步的，所述用于防治肉雞大腸桿菌病的中藥的制備方法為:
[0016](I)按重量份數(shù)稱取黃連15、白頭翁20、黃芩15、大青葉20、石榴皮12、烏梅10、訶子15、黃芪12、山楂20、神曲10、郁金20和木香15原料；
[0017](2)將上述原料混合，用植物粉碎機粉碎、過80~100目篩，分裝成500g /袋中封
口備用。
[0018]本發(fā)明的組方原理為:
[0019]中獸醫(yī)的辨證論治認為，肉.雞大腸桿菌病是由疫毒入侵，濕熱壅積腸道、肺胃熱盛、血淤氣滯引起。大腸桿菌侵入雞體后，體溫升高，精神萎鈍，有氣喘和腹瀉表現(xiàn)，大腸桿菌病似痰迷心竅和腹瀉癥，法當宜開竅除痰，澀腸止瀉。治療時宜選擇清熱解毒、活血散淤、澀腸止瀉的中藥，本試驗正是根據(jù)這一觀點進行組方，所組的復方制劑具有較強的清熱解毒和殺菌作用，還能綜合調(diào)理機體的各種生物機能，增強機體免疫力。
[0020]根據(jù)中獸醫(yī)理論，對肉雞大腸桿菌病的防治應(yīng)當遵循清熱解毒、燥濕涼血、澀腸生津、健脾和胃的原則，以達祛邪扶正之效。
[0021]依據(jù)上述理論和原則，本發(fā)明提供一種用于防治肉雞大腸桿菌的中藥組和方劑。
[0022]黃連:苦，寒。歸心、脾、胃、肝、膽、大腸經(jīng)。黃連是著名的中藥，《神農(nóng)本草經(jīng)》列之為上品。清熱燥濕，瀉火解毒。用于濕熱痞滿，嘔吐，瀉痢，黃疸，高熱神昏，心火亢盛，心煩不寐，血熱吐衄，目赤吞酸，牙痛，消渴，癰腫疔瘡；外治濕疹，濕瘡，耳道流膿。它對痢疾志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、傷寒沙門氏菌、霍亂弧菌等許多病菌都有抑制作用，對菌痢有顯著療效。黃連可以消除大腸桿菌的R質(zhì)粒，對氟喹諾酮類抗菌藥、慶大霉素和多西環(huán)素的耐藥性有明顯的抑制作用。
[0023]白頭翁:苦，寒。入大腸、肝、胃經(jīng)。清熱解毒，涼血止痢之功效。善于清胃腸濕熱及血分熱毒，故為治熱毒血痢之良藥。用治熱痢腹痛，里急后重，下痢膿血，可單用，或配伍黃連。本品尚可用治消化性潰瘍、神經(jīng)性皮炎、急性腎盂腎炎、壞死性腸炎、功能性子宮出血等。白頭翁對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌、枯草桿菌、傷寒桿菌、沙門氏桿菌以及一些皮膚真菌等，均具有明顯的抑制作用。
[0024]黃芩:味苦、性寒。入肺、膽、大腸經(jīng)，有清熱燥濕，瀉火解毒，安胎的作用，主要用于濕熱所致腹痢、黃疸、熱淋；還可用于胎熱不安，熱毒火邪侵淫皮膚之瘡癰毒腫之證。黃芩對葡萄球菌、血溶性鏈球菌、肺炎雙球菌、傷寒桿菌、痢疾球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌具有一定的抑制作用，對大腸桿菌的R質(zhì)粒有較高的消除率，從而可以消除耐藥菌株的質(zhì)粒拮抗大腸桿菌的耐藥性，黃芩苷還可減少大腸桿菌內(nèi)毒素含量，減輕內(nèi)毒素對臟器的損傷和內(nèi)毒素對內(nèi)皮細胞膜結(jié)構(gòu)的損傷。
[0025]大青葉:苦，寒。入肝、心、胃經(jīng)。清熱，解毒，涼血，止血。治溫病熱盛煩渴，流行性感冒，急性傳染性肝炎，菌痢，急性胃腸炎，急性肺炎，丹毒，吐血，衄血，黃疸,痢疾,喉痹，口瘡，癰疽腫毒。對金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌、腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌、卡他球菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、流感桿菌、白喉桿菌及痢疾桿菌有一定抑制作用。體內(nèi)外實驗表明大青葉有抗大腸桿菌0mB4內(nèi)毒素作用。
[0026]石榴皮:性寒，味酸澀。入大腸、腎二經(jīng)。澀腸止瀉，止血，驅(qū)蟲，痢疾，腸風下血。治療久瀉，久痢，便血，脫肛。有收斂作用，當它與胃腸粘膜接觸后，能沉淀或凝固局部的蛋白質(zhì)，使在表面形成較為致密的保護層，有助于局部創(chuàng)面愈合或保護局部免受刺激。體外實驗證明對結(jié)核桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌等多種細菌均有抑制作用。
[0027]訶子:味苦，酸，澀，性平。入肺、大腸經(jīng)。收斂、止瀉作用。適用于久瀉久痢之癥狀。對各種痢疾桿菌均有抑制作用，對綠膿桿菌、白喉桿菌的作用較強，對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎球菌、溶血性鏈球菌、變形桿菌、鼠傷寒桿菌亦有抑制作用。
[0028]烏梅:酸，澀，平。歸肝、脾、肺、大腸經(jīng)。斂肺，澀腸，生津，驅(qū)蟲。用于久瀉，痢疾，便血等。常與罌嬰殼、訶子等同用。體外實驗表明:對離體有抑制作用如對炭疽桿菌、葡萄球菌、肺炎球菌、對大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒和副傷寒桿菌等均有效抑制作用。
[0029]郁金:辛，苦，寒。歸肝、心、肺經(jīng)。行氣化瘀，清心解郁，利膽退黃。用于胸腹脹痛、黃疸尿赤。郁金多糖具有免疫活性，能增強網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的活性，提高免疫力。
[0030]木香:味辛，微苦，性溫。入脾、胃、大腸、膽經(jīng)。調(diào)氣解郁、和胃止瀉的功能。用于行胃脹氣，故凡消化不良、食欲減退、腹?jié)M脹痛等癥皆有效。藥理研究木香對大腸桿菌、痢疾桿菌和傷寒桿菌有抑制作用。
[0031]黃芪:甘，微溫。歸肺、脾、肝、腎經(jīng)。黃芪有益氣固表、斂汗固脫、托瘡生肌、利水消腫之功效。用于治療氣虛乏力，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，癰疽難潰，久潰不斂，血虛萎黃，內(nèi)熱消渴。與其它藥物配伍有補中益氣作用，治療脾胃虛弱、食欲不振、食少便溏?，F(xiàn)代藥理表明，黃芪能顯著增強非特異性免疫功能和異性免疫功能、增加紅細胞數(shù)，提高免疫力，黃芪對多種實驗性動物胃潰瘍有抑制作用，并可協(xié)同西米替丁對胃黏膜有保護作用。
[0032]山楂:味酸，甘，性微溫。歸脾、胃、肝經(jīng)。消積花滯、收斂止痢、活血化淤等功效。用于開胃消食、化滯消積、活血散瘀、化痰行氣。
[0033]神曲:甘辛，溫。入脾、胃經(jīng)。健脾和胃，消食調(diào)中的功效。治飲食停滯，胸痞腹脹，嘔吐瀉痢，消化不良。
[0034]本發(fā)明的中藥方劑對防治肉雞大腸桿菌病的作用機理為:
[0035]本發(fā)明的中藥組方中黃連、黃芩、大青葉、白頭翁具有清熱解毒、燥濕和涼血功能。藥理研究表明，這些中藥對雞大腸桿菌具有抑菌殺菌的作用，聯(lián)合應(yīng)用效果更佳；黃芪、郁金起到益氣固本、提高機體免疫力，達到抗菌的目的，這在肉雞大腸桿菌病防治中也起很關(guān)鍵作用。
[0036]肉雞大腸桿菌耐藥性是抗生素和化學抗菌藥難以克服的難題，本發(fā)明中藥組方中通過加入黃連、黃芩、大青葉，對大腸桿菌的耐藥質(zhì)粒的清除率較高。如黃連和黃芩配伍、黃芩和白頭翁都能夠明顯增強細菌的耐藥質(zhì)粒消除，如黃連和黃芩配伍后，48h對質(zhì)粒的消除率可達26.1%。從而可以消除耐藥菌株的耐藥性。
[0037]本發(fā)明中藥組分具有抗大腸桿菌內(nèi)毒素的作用。雞大腸桿菌內(nèi)毒素是其致病的重要毒力因子，可造成多種器官的損傷，通過加入黃連、黃芩和大青葉可直接清除大腸桿菌內(nèi)毒素。
[0038]本發(fā)明中藥組分具有澀腸止瀉功能。在中藥組方中加入石榴皮、烏梅和訶子，起澀腸止瀉、生津止渴、收斂和保護胃腸粘膜、防止脫水的作用。同時還具有對大腸桿菌的抑制作用。
[0039]本發(fā)明中藥方劑中通過加入山楂、神曲，具有理氣，健脾和胃的作用，可以促進消化，消除飲食積滯，以防脘腹脹滿，促進雞食欲大增，增加體重的功能。
[0040]相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為:
[0041]該方劑是根據(jù)中獸醫(yī)整體觀念和辨證論治理論研制而成，防治肉雞大腸桿菌病效果顯著，推廣應(yīng)用表明:臨床治療肉雞大腸桿菌病，治愈率達84.5%。對肉雞場進行預(yù)防性用藥，肉雞大腸桿菌病死亡率由9.0%下降到1.89%;無殘留、不易產(chǎn)生耐藥性，肉產(chǎn)品食用安全；該中藥方劑制備方法簡單，使用方便，利于推廣。
【具體實施方式】
[0042]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步詳細說明:
[0043]實施例1本發(fā)明中藥方劑對人工感染肉仔雞大腸桿菌病治療試驗
[0044]實驗材料
[0045]中草藥:黃連、白頭翁、黃芩、大青葉、石榴皮、烏梅、訶子、黃芪、山楂、神曲、郁金、木香，均購自安陽中醫(yī)藥學校附屬醫(yī)院。上述組方中藥符合《中國獸藥典》的相關(guān)規(guī)定。
[0046]抗生素:30%氟苯尼考注射液，規(guī)格IOmg / ml,山東齊魯制藥廠生產(chǎn)。使用時進行10倍稀釋。
[0047]培養(yǎng)基:肉湯培養(yǎng)基按有關(guān)參考文獻方法配制，麥康凱瓊脂培養(yǎng)基為市售商品。
[0048]菌株:由豫北肉雞養(yǎng)殖場病死肉雞體內(nèi)分離的大腸桿菌，經(jīng)本實驗室鑒定，血清型為O1、O2、O74型囷株,在本實驗室保存。
[0049]試驗動物:1日齡817肉雜雞由安陽郊區(qū)孵化場提供，飼養(yǎng)于安陽工學院生物學院實驗動物房。試驗期間其飼料自行配制生產(chǎn)，不含任何抗菌藥的配合飼料，小白鼠購自河南省安陽市制藥廠。
[0050]試驗步驟
[0051]中藥方劑制備:按重量份數(shù)稱取黃連15、白頭翁20、黃芩15、大青葉20、石榴皮12、烏梅10、訶子15、黃芪12、山楂20、神曲10、郁金20和木香15 ;加入蒸餾水8倍量，浸泡35min、煎煮,煮沸后文火煎Ih,用4層紗布過濾；藥洛加入適量沸騰蒸懼水,煎煮30min,過濾；合并兩次藥液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至藥液中生藥含量為0.5g / mL。置于4°C冰箱保存，備用
[0052]試驗菌懸液的制備:將保存的Op 02、O74型菌株分別接種到麥康凱瓊脂平板上，37°C培養(yǎng)24h。選擇呈粉紅色隆起、表面光滑的菌落，接種新鮮肉湯培養(yǎng)基，37°C培養(yǎng)18h，純檢后，接種營養(yǎng)瓊脂，37°C培養(yǎng)20h，置室溫用滅菌生理鹽水浸泡8min，刮下菌苔，再用滅菌沙布過濾到滅菌試管中，按比濁計數(shù)法計數(shù)，配制成菌濃度為109CFU / ml的菌液，然后3株菌液等比例混合，4°C冰箱保存?zhèn)溆谩?br> [0053]試驗菌致病性試驗:取體重為15~17g健康小白鼠8只，隨機分組，4只/組，試驗組小白鼠腹腔接種混合菌液0.2ml /只，對照組同樣方法接種生理鹽水，觀察發(fā)病和死亡情況。
[0054]試驗分組:肉仔雞飼養(yǎng)到21日齡，雞只健康無異常表現(xiàn)，然后隨機分成4組，30只/組。
[0055]除健康對照組外，其余3組肉仔雞胸肌注射混合菌液0.25ml /只攻毒。當肉仔雞出現(xiàn)癥狀后，中藥治療試驗組雞立即灌服1.0ml /只中藥煎液，每天上午、下午各I次，連用5d，氟苯尼考治療組雞立即頸部皮下注射稀釋后的氟苯尼考Iml /只，上午、下午各I次，連用5d，健康對照組和感染對照組給予生理鹽水(Iml /只)。試驗觀察14d。記錄肉仔雞的臨床癥狀變化，對死亡雞進行剖檢，進行細菌分離培養(yǎng)，以確定死因。并計算各組肉仔雞的保護率。
[0056]療效評價①在試驗期間感染對照組肉雞精神遲鈍，垂翅，呆立，食欲減少，拉稀和呼吸困難，病死雞尸體剖檢后，心包膜和肝臟有淡黃色纖維素薄膜，心臟壁變薄、心包液增多，有纖維素滲出、氣囊混濁等典型的特行性病變，并分離出相應(yīng)的大腸桿菌，判斷大腸桿菌感染死亡。②數(shù)據(jù)顯著性檢驗用t檢驗。
[0057]實驗結(jié)果
[0058]試驗菌的致病性試驗結(jié)果:試驗組小白鼠在接種試驗菌混合液3d內(nèi)陸續(xù)全部死亡，剖檢死亡鼠，心外膜出血、肝腫大，發(fā)黑或出血。從死亡小白鼠肝臟、腹水回收到了大腸桿菌。對照組4只小白鼠健康，說明試驗菌混合液有很強的致病性。
[0059]本發(fā)明中藥方劑對人工感染肉雞大腸桿菌病的治療實驗結(jié)果:
[0060]從表1可見，中藥復方制劑和氟苯尼考均能顯著降低人工感染大腸桿菌肉雞的死亡率，中藥治療試驗組的大腸桿菌 保護率為86.6%，氟苯尼考組為83.3 %，感染對照組自然保護率為26.6%。結(jié)果表明該中藥方劑治療效果顯著。
[0061]表1中藥方制劑對試驗性肉雞大腸桿菌病的治療實驗結(jié)果
[0062]
【權(quán)利要求】
1.一種用于防治肉雞大腸桿菌的中藥，由黃連、白頭翁、黃芩、大青葉、石榴皮、烏梅、訶子、黃芪、山楂、神曲、郁金和木香組成。
2.如權(quán)利要求1所述的中藥，其特征在于，各組分按重量份計為:黃連15~20、白頭翁20~24、黃芩15~20、大青葉20~28、石榴皮12~14、烏梅10~12、訶子15~20、黃芪12~15、山楂20~30、神曲10~20、郁金20~22、木香15~18。
3.如權(quán)利要求2所述的中藥，其特征在于，各組分按重量份計為:黃連15、白頭翁20、黃芩15、大青葉20、石榴皮12、烏梅10、訶子15、黃芪12、山楂20、神曲10、郁金20和木香15。
4.如權(quán)利要求1-3任一所述的中藥，其特征在于，所述用于防治肉雞大腸桿菌病的中藥的制備方法為: (1)按重量份數(shù)稱取各組分； (2)加入蒸餾水8倍質(zhì)量，浸泡35min、煎煮，煮沸后文火煎lh，用4層紗布過濾； (3)藥渣加入適量沸騰蒸餾水，煎煮30min，過濾； (4)合并兩次藥液用旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至藥液中生藥含量為0.5g / mL，置于4°C冰箱保存，備用。
5.如權(quán)利要求1-3任一所述的中藥，其特征在于，所述用于防治肉雞大腸桿菌病的中藥的制備方法為: (1)按重量份數(shù)稱取黃連15、白頭翁20、黃芩15、大青葉20、石榴皮12、烏梅10、訶子.15、黃芪12、山楂20、神曲10、郁金20和木香15原料； (2)將上述原料混合，用植物粉碎機粉碎、過80~100目篩，分裝成500g/袋中封口備用。
【文檔編號】A61P31/04GK103585578SQ201310541886
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年11月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月6日
【發(fā)明者】王雙山, 申海燕, 郭玉萍, 石衛(wèi)峰, 侯海鵬, 王建麗, 于東麗 申請人:王雙山