含有α連接蛋白C-末端(ACT)肽的局部凝膠的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及局部凝膠藥物產(chǎn)品制劑，該制劑含有組合物，所述組合物包含具有α連接蛋白的羧基末端氨基酸序列的分離多肽(ACT肽)、肽穩(wěn)定劑、賦形劑、緩沖劑等。本發(fā)明公開了用于生產(chǎn)穩(wěn)定、優(yōu)質(zhì)和可傾倒的局部凝膠的制劑和制備步驟。所得到的制劑具有適用于美容和治療應(yīng)用的長期穩(wěn)定性，包括預(yù)防瘢痕形成和加速傷口愈合。
【專利說明】含有Ct連接蛋白C-末端（ACT)肽的局部凝膠
[0001] 相關(guān)專利申請的交叉引用
[0002] 本申請要求2012年3月1日提交的美國臨時專利申請No. 61/605528的優(yōu)先權(quán)， 所述申請以引用的方式全文納入本文。
[0003] 對電子形式提交的文本文件的描述
[0004] 隨本文以電子形式提交的文本文件以引用的方式全文納入本文：計算機(jī)可閱讀形 式的序列表副本（文件名：FIRS_006_01TO_SeqList_ST25.txt，記錄日期：2013年3月1日， 文件大小32千字節(jié)）。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0005] 本發(fā)明涉及用于傷口治療的的組合物，其包含α連接蛋白多肽和穩(wěn)定劑。含有α 連接蛋白多肽和羥乙基纖維素的局部制劑是特別穩(wěn)定的。這些組合物可用于治療包括急性 外科傷口和慢性潰瘍在內(nèi)的多種傷口。

【背景技術(shù)】
[0006] 雖然機(jī)械損傷、疾病過程和其他原因損傷的人體組織能夠愈合，但復(fù)雜的組織結(jié) 構(gòu)和功能，即使能恢復(fù)，也很少能完全恢復(fù)。取而代之的是，人和其他高等脊椎動物中幾乎 所有受過損傷的組織的痊愈主要都是形成瘢痕組織。關(guān)于這一點(diǎn)最常見的實(shí)例為在皮膚割 傷或擦傷痊愈之后持續(xù)存在的變色的和纖維化的瘢痕。還未得到充分認(rèn)識的是，腦部或脊 椎創(chuàng)傷之后神經(jīng)膠質(zhì)瘢痕組織的形成是中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)的主要障礙之 一（SilverandMillerJH, 2004)。目前還沒有在損傷后治療或預(yù)防這類瘢痕形成及促進(jìn) 復(fù)雜組織結(jié)構(gòu)和功能再生的方法。
[0007] -旦發(fā)現(xiàn)上述治療方法，還需要提供可使其含有的活性藥物成分（API)穩(wěn)定的制 齊U。雖然現(xiàn)有很多種潛在的穩(wěn)定劑，但它們在穩(wěn)定特定API方面并非具有同樣良好的作用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明涉及局部凝膠藥物產(chǎn)品制劑，所述制劑含有包含分離的α連接蛋白多肽 的組合物。所述局部制劑可進(jìn)一步包含羥乙基纖維素凝膠，所述羥乙基纖維素凝膠可在 保存期間使所述α連接蛋白多肽穩(wěn)定。在某些實(shí)施方案中，所述α連接蛋白多肽包含 α連接蛋白羧基末端的氨基酸序列（以下稱為"ACT"）。本發(fā)明的α連接蛋白多肽可 包含α連接蛋白或其保守性變體的最靠近羧基末端的4-30個連續(xù)的氨基酸，或由其構(gòu) 成，其中所述至少一種α連接蛋白多肽在其氨基末端連接至細(xì)胞內(nèi)化轉(zhuǎn)運(yùn)體（cellular internalizationtransporter)〇
[0009] 本發(fā)明的目的是制備穩(wěn)定、優(yōu)質(zhì)、可傾倒的含有ACT的局部凝膠載體的制劑，用于 美容和治療應(yīng)用，包括預(yù)防受試者的瘢痕形成和加快受試者的傷口愈合?？山o予所述藥物 產(chǎn)品以用于治療急性外科傷口以減少瘢痕的形成，或者將所述藥物產(chǎn)品長期應(yīng)用于難愈合 的傷口，所述難愈合的傷口包括但不局限于，下肢靜脈性潰瘍（venouslegulcer)、糖尿病 性足潰瘍（diabeticfootulcer)、壓迫性潰瘍（pressureulcer)等。所述藥物產(chǎn)品這樣 的物理化學(xué)、生物化學(xué)和流變性質(zhì)，即所述性質(zhì)使得當(dāng)將其應(yīng)用于所有類型傷口時其能夠 提供治療有效量的ACT肽。
[0010] 在本發(fā)明的一個方面，從多種穩(wěn)定劑中選擇一種或幾種穩(wěn)定劑并將其與ACT 肽進(jìn)行配制以穩(wěn)定所述分離的多肽。優(yōu)選地，所述穩(wěn)定劑是無刺激性的、無污染的 (non-staining)且無免疫原性的。所述穩(wěn)定劑使所述藥物產(chǎn)品可在不同溫度條件（即， 約5°C、約10°C、約15°C、約20°C、約25°C、約30°C、約35°C或約40°C)和一系列相對濕度 (即，0 %的相對濕度、10 %的相對濕度、20 %的相對濕度、30 %的相對濕度、40 %的相對濕 度、50 %的相對濕度、60 %的相對濕度、70 %的相對濕度、80 %的相對濕度、90 %餓相對濕度 或100%的相對濕度）下長期（即，3個月、6個月、9個月、12個月、18個月或24個月）保 存。
[0011] 在本發(fā)明的另一方面中，一種或多種賦形劑選自水溶性致孔劑（porogen)、聚合 物、離子化合物、非離子化合物和溶劑。在另一個實(shí)施方案中，賦形劑作為載體、穩(wěn)定劑和膠 凝劑中的一種或多種。在一個實(shí)施方案中，將至少一種賦形劑與ACT-同配制。優(yōu)選地，所 述賦形劑是無刺激性的、無污染的且無免疫原性的。在一個實(shí)施方案中，所述制劑包含至少 一種聚合物。在另一個實(shí)施方案中，所述制劑包含纖維素的衍生物。在另一個實(shí)施方案中， 所述纖維素的衍生物為羥乙基纖維素。
[0012] 在本發(fā)明的另一方面中，所述局部凝膠的最佳pH范圍為約pH5至約pH7,并通過 加入一種或多種緩沖劑來維持。優(yōu)選地，所述緩沖劑是無刺激性的、無污染的且無免疫原性 的。
[0013] 在本發(fā)明的另一方面中，至少一種賦形劑為膠凝劑。在一個實(shí)施方案中，膠凝劑為 ACT的載體。在一些實(shí)施方案中，所述膠凝劑也作為穩(wěn)定劑。在一些實(shí)施方案中，所述膠凝 劑可與以下至少一種結(jié)合：一種或多種緩沖劑，及一種或多種額外的賦形劑。在一個實(shí)施方 案中，所述膠凝劑為羥乙基纖維素。
[0014] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明包括治療傷口的方法，所述方法包括給予有需要的受 試者包含至少一種α連接蛋白多肽和羥乙基纖維素凝膠的局部制劑。
[0015] 在一個示例性的實(shí)施方案中，本發(fā)明公開了用于制造所述藥物產(chǎn)品的步驟。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0016] 為更完整的理解本發(fā)明的特性和優(yōu)勢，參考以下與附圖相關(guān)的詳細(xì)描述，其中：
[0017] 圖1舉例說明制造過程的流程圖。

【具體實(shí)施方式】
[0018] 在描述本組合物和方法之前，應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明不局限于所描述的具體過程、組合 物或方法，因此這些可以變化。本說明書中使用的術(shù)語僅用于描述特定形式或?qū)嵤┓桨福?非意欲限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的范圍僅由所附權(quán)利要求限定。除非另有定義，本文使用 的所有技術(shù)術(shù)語和科學(xué)術(shù)語具有與本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的相同的含義。本文提到 的所有出版物以引用的方式全文納入。本文所有內(nèi)容都不應(yīng)被解釋為承認(rèn)本發(fā)明因在先發(fā) 明而應(yīng)被認(rèn)為晚于這些公開內(nèi)容。
[0019] 還必須注意的是，除非上下文明確另有說明，用于本文和所附權(quán)利要求中時，單數(shù) 形式"一""一種"和"所述"包括復(fù)數(shù)指代對象。因此，例如，提及"元素"是指一種或多種 元素以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其等價物，等等。
[0020] 術(shù)語"局部"是指在施用處或緊貼施用處的下方給予本發(fā)明藥物產(chǎn)品。本文使用 的"局部施用"指施用到包括角質(zhì)組織（keratinoustissue)的一種或多種表面上，即"局 部應(yīng)用"。局部施用或"局部應(yīng)用"可包括向所述區(qū)域直接施用所需作用物（substrate)。 所述局部制劑和/或組合物若為液體，可通過傾注、滴加或噴霧施用；若為軟膏劑、洗劑、乳 齊?、凝膠等，可通過摩擦施用；若為粉末，可通過噴撒（dusting)施用；若為液體或氣霧劑組 合物，可通過噴霧施用；或通過任何其他適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ┯谩?br> [0021] 用于本文時，詞組"膠凝劑"指使局部制劑更黏稠或黏度更高的試劑。膠凝劑可為 水基或油基的。膠凝劑也可被稱為"增稠劑"。本文使用的"賦形劑"，是作為有效藥物成分 (API)的載體的非活性成分。賦形劑也可作為膠凝劑或增稠劑，或穩(wěn)定劑。
[0022] "受試者"或"哺乳動物"包括人類或非人哺乳動物。非人哺乳動物包括但不限于， 家畜或?qū)櫸?，例如羊、牛、豬、犬、貓和鼠類哺乳動物。在一個實(shí)施方案中，所述受試者或哺乳 動物為人。
[0023] 當(dāng)"給予"與治療方法結(jié)合使用時是指將治療劑直接給予靶組織中或其上，或?qū)⒅?療劑給予患者，通過這種方法所述治療劑有利地影響其所靶向的組織。因此，本文使用的術(shù) 語"給予"，當(dāng)與所述藥物產(chǎn)品結(jié)合使用時，可包括但不局限于，將所述藥物產(chǎn)品和ACT肽提 供至所述目標(biāo)組織中或其上。"給予"組合物可通過注射、局部施用進(jìn)行，或通過任何與其他 已知技術(shù)組合的方法完成。
[0024]除非另有說明，術(shù)語"皮膚"指身體的外皮或表層（表層），其由真皮和表皮構(gòu)成并 位于皮下組織之上。
[0025] 用于本文時，術(shù)語"治療劑（therapeutic) "指用于治療、對抗、減輕、預(yù)防或改善患 者的有害病癥或疾病的試劑。部分地，本發(fā)明的實(shí)施方案涉及治療瘢痕形成和延遲的傷口 愈合。
[0026] 用于本文時，詞組"有效量"或"治療有效量"指用于實(shí)施本發(fā)明的有效地達(dá)到所 需效果（即治療急性和慢性傷口）的ACT多肽的無毒但充分的量。本發(fā)明方法所考慮的活 性包括醫(yī)學(xué)上的治療和/或預(yù)防處理，適當(dāng)?shù)兀?，例如疾病或障礙的征象、癥狀或病因 的降低和/或減輕，或生物系統(tǒng)的任何其他所需變化。當(dāng)然，依據(jù)本發(fā)明給予的用于獲得治 療和/或預(yù)防效果的化合物的特定劑量可通過病例的具體情況決定，包括例如，所給予的 具體多肽和待治療的病癥。本發(fā)明化合物的治療有效量通常為這樣的量，所述量即使得當(dāng) 所述化合物在生理上可耐受的賦形劑組合物中被給予時，其足以組織中達(dá)到有效的細(xì)胞內(nèi) 濃度和局部濃度。
[0027] -般來說，術(shù)語"組織"指聚集起來以行使特定功能的相似分化細(xì)胞的任意聚集 體。本文使用的"組織"，除非另有說明，是指包括彈性蛋白作為其必要的結(jié)構(gòu)和/或功能的 一部分的組織。
[0028] 本文使用的術(shù)語"處理（treat)"指治療性處理和預(yù)防性措施，其中目的是預(yù)防、 緩解有害生理病癥、障礙或疾病的效應(yīng)（effect)或減慢（減輕）有害生理病癥、障礙或疾 病，或得到有利的或需要的臨床結(jié)果。出于本發(fā)明的目的，有利的或需要的臨床結(jié)果包括 但不限于緩解癥狀；減輕病癥、障礙或疾病的程度；降低病癥、障礙或疾病的癥狀的嚴(yán)重程 度；降低病癥、障礙或疾病的癥狀的頻率；使病癥、障礙或疾病的狀況穩(wěn)定（即，不惡化）； 推遲病癥、障礙或疾病的發(fā)生或減慢病癥、障礙或疾病的進(jìn)展；改善病癥、障礙或疾病狀態(tài)； 及病癥、障礙或疾病狀態(tài)的緩和（部分或全部），可檢測或不可檢測的，或者增強(qiáng)或改善。治 療包括引起臨床上顯著的反應(yīng)而不引起過度的副作用。在一些實(shí)施方案中，治療可包括在 損傷后預(yù)防或降低瘢痕形成并且/或者促進(jìn)復(fù)雜組織結(jié)構(gòu)和功能的再生。
[0029] 用于本文時，術(shù)語"肽"、"多肽"或"蛋白質(zhì)"可以互換使用，是指包括由通過肽鍵 共價相連的氨基酸殘基的化合物。蛋白質(zhì)或肽必須含有至少兩個氨基酸，并且不限制構(gòu)成 蛋白質(zhì)或肽序列的氨基酸的最大數(shù)量。多肽包括任何包含由肽鍵相互連接的兩個或更多個 氨基酸的肽或蛋白質(zhì)。用于本文時，所述術(shù)語指短鏈和長鏈，其中短鏈在本領(lǐng)域中也被稱 為例如肽、寡肽和低聚物，長鏈在本領(lǐng)域中通常被稱為蛋白質(zhì)，其具有許多種類。"多肽"包 括，例如，具有生物學(xué)活性的片段、基本上同源的多肽、寡肽、同二聚體、異二聚體、多肽的變 體、修飾的多肽、衍生物、類似物和融合蛋白等。所述多肽包括天然肽、重組肽、合成肽或其 組合物。非環(huán)形的肽具有N-末端和C-末端。N-末端具有氨基，其可以是游離的（即，為 NH2基團(tuán)）或適當(dāng)保護(hù)的（例如，具有BOC或Fmoc基團(tuán)）。C-末端具有羧基、其可以是游離 的（即，為COOH基團(tuán)）或適當(dāng)保護(hù)的（例如，為苯甲酯或甲酯）。由于環(huán)形肽的末端是通 過酰胺鍵共價結(jié)合以形成環(huán)形結(jié)構(gòu)，因此其不具有游離N-或C-末端。氨基酸可通過其全 名（例如，亮氨酸）、三字母縮寫（例如Leu)和單字母縮寫（例如L)表示。氨基酸的結(jié)構(gòu) 及其縮寫可見于化學(xué)文獻(xiàn)，例如Stryer，"Biochemistry"，3rdEd.，W.H.FreemanandCo·， NewYork,1988。
[0030] 用于局部凝膠的賦形劑是本領(lǐng)域公知的，實(shí)例可見于Handbookof PharmaceuticalExcipients(Rowe,R.C.etaI,APhAPublications；5thed. ,2005)〇 不 例性的賦形劑可包括蠟、多種糖和多種類型的淀粉、聚合物、凝膠、潤滑劑、增稠劑、流變改 性劑（rheologymodifier)、潤濕劑、丙三醇、有機(jī)堿性化合物、纖維素衍生物、明膠、植物油、 聚乙二醇和溶劑。流變改性劑的實(shí)例包括卡波姆、羥丙基纖維素、C26_28烷基聚二甲基硅氧 燒、C26_28燒基聚甲基娃氧燒、聚苯基倍半氧燒（polyphenylsisquioxane)、三甲基娃燒氧基 娃酸酯（trimethylsiloxysilicate)、環(huán)戊娃氧燒與聚二甲基娃氧燒/乙烯基三甲基娃燒 氧基硅酸酯的交聯(lián)聚合物、煙霧硅膠（例如，Cab-O-SilM5P)及其混合物。潤滑劑的實(shí)例包 括丙三醇、戊二醇、吡咯烷酮羧酸鈉、羊毛脂、異構(gòu)糖、硬脂氧基聚二甲基硅氧烷（stearoxy dimethicone)、硬脂基聚二甲基娃氧燒（stearyldimethicone)及其混合物。潤滑劑可用于 預(yù)防由于在制劑中使用無水溶劑而發(fā)生的角質(zhì)層脫水。有機(jī)堿的實(shí)例包括2-氨基-2-甲基 丙醇、煙酰胺、甲醇胺、三乙醇胺、三（輕甲基）氨基甲燒（Trisamino)、AMP-95、AmP-Ultra PC2000、三異丙醇胺、二異丙醇胺、NeutrolTE、Ethomeen及其混合物。所述有機(jī)堿可使所 述藥物的pH呈堿性或中性。
[0031] 其他示例性的賦形劑包括水溶性致孔劑。水溶性致孔劑為可輔助水的吸收和擴(kuò)散 到凝膠中的添加劑?？梢允褂萌魏芜m當(dāng)?shù)闹驴讋谝恍?shí)施方案中，所述致孔劑可包括 氯化鈉、氯化鉀、蔗糖、葡萄糖、乳糖、山梨醇、木糖醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇 或其混合物。
[0032] 聚合物也可在局部凝膠中作為賦形劑。示例性的聚合物包括親水的聚氨酯、親 水的聚丙烯酸酯、羧甲基纖維素和丙烯酸的共聚物、N-乙烯基吡咯烷酮、聚（羥基酸）、 聚酐、聚原酸酯、聚酰胺、聚碳酸酯、聚烯（例如聚乙烯和聚丙烯）、聚亞烷基二醇（例 如聚乙二醇）、聚氧化烯（例如聚氧化乙烯）、聚亞烷基對苯二甲酸酯（例如聚對苯二 甲酸乙二酯）、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚乙烯鹵化物（例如聚氯乙烯）、聚乙烯 吡咯烷酮、聚硅氧烷、聚乙烯基乙酸酯、聚苯乙烯、聚氨酯共聚物、纖維素、纖維素衍生物 (例如，羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羧甲 基纖維素或醋酸纖維素）、藻酸鹽、聚丙烯酸、聚丙烯酸衍生物、丙烯酸共聚物、甲基丙烯 酸、甲基丙烯酸衍生物、甲基丙烯酸共聚物、聚丁酸、聚戊酸、聚（丙交酯-Co-己內(nèi)酯） (poly(lactide-co-caprolactone))、其共聚物及其混合物。
[0033] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述聚合物可為超吸收聚合物（SAP)。按照IUPAC 定義，當(dāng)聚合物可吸收并保留相對于其自身質(zhì)量來說非常大量的水時，該聚合物被認(rèn)為是 超強(qiáng)吸收的。SAP可吸收最高達(dá)其自身重量500倍的水并可膨脹最高達(dá)其最初體積的1000 倍。具體的目的SAP包括聚丙烯酸鈉、聚氨酯TecophilicTG-2000及通過使用聚丙烯酰胺 共聚物、乙烯-馬來酸酐共聚物、交聯(lián)羧甲基纖維素、聚乙烯醇共聚物、聚乙烯吡咯烷酮和 交聯(lián)聚乙烯氧化物制備的聚合物。
[0034] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，可使用相對疏水的聚合物?？墒褂萌魏芜m當(dāng)?shù)氖杷?聚合物。盡管如此，示例性的相對疏水的聚合物包括芳香族聚氨酯、硅橡膠、聚硅氧烷、聚己 酸內(nèi)酯、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚乙烯、聚-L-丙交酯、聚-DL-乙交酯、聚醚醚酮（PEEK)、聚酰 胺、聚酰亞胺和聚乙酸乙烯酯。另外，可使用疏水的凝膠基質(zhì)和/或流變改性劑。
[0035] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述聚合物在藥劑中可作用為增稠劑。特別地，所述 凝膠的聚合部分可作為粘彈性物質(zhì)（visco-elasticsubstance)并可將所述凝膠與分散于 其中的α連接蛋白多肽保持在施用部位。
[0036] 在另一些實(shí)施方案中，包含聚合物的凝膠可具有可分散性，使得當(dāng)施用于皮膚表 面時其可形成薄膜。該薄膜可使所包含的α連接蛋白多肽施用于較大面積，并用于將所述 α連接蛋白多肽保持在皮膚的受影響區(qū)域上。
[0037] 其他賦形劑可包括多種離子和非離子化合物以保持所述制劑的穩(wěn)定性，從而保護(hù) 所述制劑成分免于去乳化、沉降、團(tuán)聚或降解，這些會降低其治療或美容價值。
[0038] 離子化合物的實(shí)例可包括鹽例如氯化鈉、氯化鉀；陽離子、陰離子或兩性離子表面 活性劑例如十二烷基硫酸鈉（SDS)、全氟辛酸酯（PFOA)、全氟辛烷磺酸酯（PFOS)、十二烷基 硫酸銨（ALS)、十二烷基醚硫酸鈉（SLES)、烷基苯磺酸酯、十六烷基三甲基溴化銨（CTAB)、 氯化十六烷基吡啶（CPC)、聚乙氧化牛脂胺（POEA)、氯化苯甲烷銨（BAC)、氯化芐乙氧銨、 十二燒基甜菜堿、椰油酰胺丙基甜菜堿和椰油酰兩性甘氨酸（cocoamphoglycine)。
[0039] 可作為賦形劑的非離子化合物的實(shí)例包括非離子表面活性劑例如表面活性劑的 普蘭尼克（Pluronic)、吐溫（Tween)、AMP及芐澤家族；及來自生物來源的表面活性劑，例如 天然或半合成表面活性劑，例如油酸、三油酸山梨坦（sorbitantrioleate)、去水山梨糖醇 單油酸酯（sorbitanmonooleate)、卵磷脂、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA及椰油酰胺丙基甜 菜堿。表面活性劑（離子型和非離子型）可降低界面的表面能并可幫助所述局部制劑在更 大面積上的擴(kuò)散。
[0040] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，溶劑賦形劑可作為α連接蛋白多肽和其他賦形劑 的載體。聚合物鏈可與溶劑相互作用并發(fā)生溶脹以形成可賦予所述局部制劑以粘彈性特性 的網(wǎng)絡(luò)。在所述局部制劑的一些實(shí)施方案中，所述溶劑可在使用時蒸發(fā)，留下聚合物的殘余 薄膜和被包埋的α連接蛋白多肽。
[0041] 可用于親水性制劑的示例性溶劑賦形劑可包括二甲基異山梨醇酯、丙二醇、丙三 醇、異丙醇、乙醇、苯甲醇、乙二醇、聚乙二醇、乙氧基二甘醇或其混合物。可用于疏水性制劑 的示例性溶劑賦形劑可包括癸酸/辛酸甘油三酯、豆蘧酸異丙酯、礦物油、異十二烷、新戊 酸異癸酯、丁二醇、戊二醇、己二醇、甲氧基聚乙二醇、環(huán)戊硅氧烷、環(huán)四硅氧烷、聚二甲基硅 氧燒、辛?；奂谆扪鯚╟aprylylmethicone)或其混合物。
[0042] 除了所述α連接蛋白多肽和賦形劑之外，所述局部制劑還可包含至少一種另外 的治療劑，例如殺菌劑、抗痤瘡劑、抗炎劑、鎮(zhèn)痛劑、麻醉劑、抗組胺劑、防腐劑、免疫抑制劑、 抗出血劑、血管擴(kuò)張劑、傷口愈合劑、抗生物膜劑及其混合物。
[0043] 殺菌劑的實(shí)例包括青霉素和相關(guān)藥物、碳青霉烯、頭孢菌素和相關(guān)藥物、紅霉 素、氨基糖苷、桿菌肽、短桿菌肽、莫匹羅星、氯霉素、甲砜霉素、夫西地酸鈉、林可霉素、 克林霉素、大環(huán)內(nèi)酯、新生霉素、多黏菌素、利福霉素、大觀霉素、四環(huán)素類、萬古霉素、替 考拉寧、鏈陽性菌素，抗葉酸劑包括磺胺、甲氧芐啶及其組合物及乙胺嘧啶，合成的抗菌 藥物包括硝基呋喃、孟德立酸烏洛托品（methenaminemandelate)和馬尿酸烏洛托品 (methenaminehippurate)，硝基咪唑、喹諾酮、氟喹諾酮、異煙肼、乙胺丁醇、批嗪酰胺、 對氨基水楊酸（PAS)、環(huán)絲氨酸、卷曲霉素、乙硫異煙胺、丙硫異煙胺、氨硫脲、紫霉素、扁 枝衣霉素（eveminomycin)、糖肽、甘氨酰四環(huán)素（glyclyclycline)、酮內(nèi)酯、惡唑燒酮 (oxazolidinone);亞胺配南（imipenen)、阿米卡星、奈替米星、磷霉素、慶大霉素、頭孢曲 松、齊拉星、利奈唑胺、共殺素、氨曲南、和甲硝唑、依匹普林、山費(fèi)培南鈉、比阿培南、蒽環(huán)類 抗生素（Dynemicin)、頭孢瑞南、頭孢噻利、山費(fèi)培南西酯（Sanfetrinemcelexetil)、頭孢 匹羅、Mersacidin、利福拉齊、Kosan、來那培南、Veneprim、硫培南、利替培南酯（ritipenam acoxyl)、Cyclothialidine、美加球菌素A(micacocidinA)、卡蘆莫南、頭抱唑蘭和頭抱他 美。
[0044] 局部抗痤瘡劑的實(shí)例包括阿達(dá)帕林、壬二酸、過氧苯甲酰、克林霉素和克林 霉素磷酸酯、多西環(huán)素、紅霉素、角質(zhì)層分離劑（keratolytics)例如水楊酸和視黃酸 (Retin-A")、諾孕酯、有機(jī)過氧化物，視黃酸類例如異維甲酸和維甲酸，磺胺醋酰鈉和他扎 羅汀（tazarotene)。特定抗痤瘡藥包括阿達(dá)帕林、壬二酸、過氧苯甲酰、克林霉素（例如克 林霉素磷酸酯）、多西環(huán)素（例如一水合多西環(huán)素）、紅霉素、異維甲酸、諾孕酮、磺胺醋酰 鈉、他扎羅汀、阿維A酯（etretinate)和阿曲?。╝cetretin)。
[0045] 抗組胺劑的實(shí)例包括鹽酸苯海拉明、水楊酸苯海拉明、苯海拉明、鹽酸氯苯那敏、 馬來酸氯苯那敏、鹽酸氮異丙嗪、鹽酸曲吡那敏、鹽酸異丙嗪、鹽酸甲地嗪等。局部麻醉劑的 實(shí)例包括鹽酸辛可卡因、辛可卡因、鹽酸利多卡因、利多卡因、苯佐卡因、對丁基氨基苯甲酸 2_(二乙基氨基）乙酯鹽酸鹽（p-buthylaminobenzoicacid2-(die_ethylamino)ethyl esterhydrochloride)、鹽酸普魯卡因、丁卡因、鹽酸丁卡因、鹽酸氯普魯卡因、鹽酸輕基普 魯卡因（oxyprocainehydrochloride)、甲哌卡因、鹽酸可卡因、鹽酸哌羅卡因、達(dá)克羅寧和 鹽酸達(dá)克羅寧。
[0046] 防腐劑的實(shí)例包括醇、季銨化合物、硼酸、氯己定和氯己定衍生物、碘、酚、萜、殺細(xì) 菌劑、消毒劑包括硫柳汞、苯酚、百里酚、苯扎氯銨、芐索氯銨、氯己定、聚維酮碘、西吡氯銨、 丁香酚和三甲基溴化銨。
[0047]抗炎劑的實(shí)例包括非固醇類抗炎劑（NSAID);丙酸衍生物例如布洛芬和萘普生； 乙酸衍生物例如吲哚美辛；烯醇酸衍生物例如美洛昔康、醋氨酚；水楊酸甲酯；水楊酸乙二 醇酯；阿司匹林；甲芬那酸；氟芬那酸；Π引哚美辛；雙氯芬酸；阿氯酚酸；雙氯芬酸鈉；布洛 芬；酮洛芬；萘普生；普拉洛芬；非諾洛芬；舒林酸；芬氯酸；環(huán)氯茚酸；氟比洛芬；芬替酸； 丁苯羥酸；吡羅昔康；保泰松；羥基保泰松；氯非宗；噴他佐辛；甲嘧啶唑；鹽酸噻拉米特； 固醇類例如丙酸氯倍他索、二丙酸倍他米松（bethamethasonedipropionate)、丙酸鹵貝他 索酯（halbetasolproprionate)、雙醋二氟拉松、醋酸氟輕松、氯氟舒松、安西奈德、去輕米 松、曲安奈德、糠酸莫米松、丙酸氟替卡松、二丙酸倍他米松、曲安奈德、丙酸氟替卡松、地奈 德、氟輕松、戍酸氫化可的松、潑尼卡酯、曲安奈德、氟輕松、氫化可的松及其它本領(lǐng)域公知 的，氫化潑尼松（predonisolone)、地塞米松、氟輕松、乙酸氫化可的松、乙酸氫化潑尼松、甲 潑尼龍（methylpredonisolone)、乙酸地塞米松、倍他米松、戊酸倍他米松、氟米松、氟米龍、 二丙酸倍氯米松、醋酸氟輕松、局部用皮質(zhì)類固醇，且可為一種較低效力的皮質(zhì)類固醇例如 氫化可的松、氫化可的松-21-單酯（例如氫化可的松-21-乙酸酯、氫化可的松-21- 丁酸 酯、氫化可的松-21-丙酸酯、氫化可的松-21-戊酸酯等）、氫化可的松-17, 21-二酯（例如 氫化可的松-17, 21-二乙酸、氫化可的松-17-乙酸酯-21- 丁酸酯、氫化可的松-17, 21-二 丁酸酯等）、阿氯米松、地塞米松、氟米松、潑尼松龍或甲潑尼龍，或可為高效力的皮質(zhì)類固 醇例如丙酸氯倍他索、苯甲酸倍他米松、二丙酸倍他米松、雙醋二氟拉松、醋酸氟輕松、糠酸 莫米松、曲安奈德。
[0048]鎮(zhèn)痛劑的實(shí)例包括阿芬太尼、苯佐卡因、丁丙諾啡、布托啡諾、氨苯丁酯、辣椒辣 素、可樂定、可待因、地布卡因、腦啡肽、芬太尼、氫可酮、氫嗎啡酮、吲哚美辛、利多卡因、左 啡諾、哌替啶、美沙酮、嗎啡、尼可嗎啡、鴉片、奧布卡因、羥可酮、羥嗎啡酮、噴他佐辛、普莫 卡因、丙對卡因、丙氧芬、丙美卡因、舒芬太尼、丁卡因和曲馬朵。
[0049]麻醉劑的實(shí)例包括醇類例如酚；苯甲酸芐酯；爐甘石；氯二甲酚；達(dá)克羅寧；氯胺 酮；薄荷腦；普莫卡因；間苯二酚；三氯生；普魯卡因藥物例如苯佐卡因、布比卡因、氯普魯 卡因；辛可卡因；可卡因；地昔卡因；二胺卡因；地布卡因；依替卡因；?？丝ㄒ?；左布比卡 因；利多卡因；甲哌卡因；奧昔卡因；丙胺卡因；普魯卡因；丙對卡因；丙氧卡因；批咯卡因； 利索卡因；羅多卡因；羅哌卡因；丁卡因；及衍生物，例如藥學(xué)上可接受的鹽和酯包括鹽酸 布比卡因、鹽酸氯普魯卡因、環(huán)己氨磺酸二胺卡因、鹽酸地布卡因、鹽酸達(dá)克羅寧、鹽酸依替 卡因、鹽酸左布比卡因、鹽酸利多卡因、鹽酸甲哌卡因、鹽酸普莫卡因、鹽酸丙胺卡因、鹽酸 布魯卡因、鹽酸丙對卡因、鹽酸丙氧卡因、鹽酸羅哌卡因及鹽酸丁卡因。
[0050] 抗出血劑的實(shí)例包括凝血酶、植物甲萘醌、硫酸魚精蛋白、氨基己酸、氨甲環(huán)酸、卡 巴克絡(luò)、卡巴克絡(luò)磺酸鈉、蘆?。╮utin)和橙皮苷。
[0051] 除了生物活性多肽成分，本發(fā)明也可含有其他活性劑例如煙酰胺、植三醇 (phytantriol)、法尼醇、紅沒藥醇和水楊酸。預(yù)期某些額外的活性成分會與所述生物活性 肽成分協(xié)同作用，或提高制劑的貯存期。
[0052] 可與本發(fā)明藥物產(chǎn)品一起使用的傷口治療劑的實(shí)例包括纖維蛋白溶解酶例如 溶纖維蛋白酶、脫氧核糖核酸酶、鏈激酶和鏈道酶，含有氯化溶菌酶的尸體解剖組織劑 (necrotomytissueagents)，含有硫酸慶大霉素、磺胺啼陡銀、桿菌肽和硫酸新霉素的殺 菌劑，含有曲夫明、布拉地新鈉、托可維A酸（維A生育醇酯）、前列地爾α環(huán)糊精、血活素 (從幼牛的溶血血液中提?。┖弯X克洛沙的生肉芽劑，含有綿白糖、聚維酮碘和碘的碘制 齊U，及含有芐達(dá)酸、二甲基異丙基甘菊環(huán)（愈創(chuàng)藍(lán)油烴）和腎上腺素作為有效成分的制劑。
[0053] 除了α連接蛋白多肽、賦形劑和其他治療劑之外，所述凝膠也可包含可提高所述 局部制劑的感官特性的其他化合物。
[0054] 這類化合物的實(shí)例包括香料、染料和色素；螯合劑包括但不限于乙二胺四乙酸二 鈉（EDTA)、EGTA、CP94、檸檬酸；防腐劑包括但不限于季銨化合物，例如苯扎氯銨、芐索氯 銨、溴化十六烷基三甲銨（cetrimide)、地喹氯銨和西吡氯銨；汞試劑例如硝酸苯汞、乙酸 苯汞和硫柳汞；醇試劑例如三氯叔丁醇、苯乙醇和苯甲醇；殺細(xì)菌酯，例如，對羥基苯甲酸 的酯；及其他殺菌劑例如氯己定、氯甲酚、苯甲酸和多粘菌素。
[0055] 可用在本發(fā)明制劑中的α連接蛋白多肽記載于美國專利No. 7786074,所述專利 以引用的方式納入本文。在一些實(shí)施方案中，所述α連接蛋白多肽為全長α連接蛋白蛋 白質(zhì)例如連接蛋白37、連接蛋白40、連接蛋白43或連接蛋白45。在一些實(shí)施方案中，所述 多肽不包含所述全長的連接蛋白蛋白質(zhì)。
[0056] 用于本發(fā)明的制劑中的肽包括α連接蛋白多肽。用于本發(fā)明的制劑的α連接蛋 白多肽可包含α連接蛋白或其保守性變體的最靠近羧基末端的4-30個連續(xù)氨基酸，或由 其構(gòu)成。因此，用于所述制劑的多肽可包含所述α連接蛋白的最靠近C末端的4-30個氨基 酸，包括所述α連接蛋白的最靠近C末端的4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30個氨基酸。在一些方面，所提供的多肽還包含缺 失所述α連接蛋白的最靠近C末端的4-30個氨基酸中的一個或多個氨基酸，包括缺失所 述α連接蛋白的最靠近C末端的4-30個氨基酸中的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸。 例如，在一些方面，用于本發(fā)明的制劑的多肽不包含所述α連接蛋白的最靠近C末端的1、 2或3個氨基酸。例如，所述多肽可主要由氨基酸序列SEQIDNO: 92構(gòu)成，或者主要由氨 基酸序列SEQIDNO:92的長度為至少4、5、6、7、8、9、10個氨基酸的羧基末端片段構(gòu)成。
[0057] 在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的α連接蛋白多肽的氨基或羧基末端與細(xì)胞內(nèi)化運(yùn) 載體（transporter)連接。不同的實(shí)施方案包括不與任何細(xì)胞內(nèi)化運(yùn)載體相連接的α連 接蛋白多肽。與所述α連接蛋白多肽連接的細(xì)胞內(nèi)化運(yùn)載體可為任何本領(lǐng)域中已知或新 發(fā)現(xiàn)的內(nèi)化序列，或其保守性變體。細(xì)胞內(nèi)化運(yùn)載體和序列的非限制性實(shí)例包括觸角足 (Antennapedia)序列、TAT、HIV-Tat、Penetratin、Antp_3A(Antp突變體）、BuforinII、 Transportan、MAP(模式兩親肽）、K-FGF、Ku70、朊病毒、pVEC、P印-1、SynBl、P印-7、HN-1、 BGSC(雙-胍鹽-亞精胺-膽固醇）和BGTC(雙-胍鹽-三氨乙基胺-膽固醇）。
[0058] 在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，所述α連接蛋白多肽的氨基酸序列選自SEQIDNO: 1、2、3、4和5,或其保守性變體。在本發(fā)明另一實(shí)施方案中，所述α連接蛋白多肽包含SEQ IDNO:2的氨基酸序列。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，所述多肽包含α連接蛋白多肽和細(xì) 胞內(nèi)化運(yùn)載體。在另一實(shí)施方案中，所述α連接蛋白多肽在其氨基末端與所述細(xì)胞內(nèi)化運(yùn) 載體連接。在另一實(shí)施方案中，與細(xì)胞內(nèi)化運(yùn)載體相連的α連接蛋白多肽的氨基酸序列選 自SEQIDNO:8、9、10、11和12,或其保守性變體。在一個實(shí)施方案中，所述多肽由SEQID NO:9的氨基酸序列即RQPKIWFPNRRKPWKKRPRPDDLEI構(gòu)成，或包含所述序列。
[0059] 當(dāng)本文提到特定蛋白質(zhì)時，考慮到了變體、衍生物和片段。蛋白質(zhì)變體和衍生物對 于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說很好理解并可包含氨基酸序列修飾。例如，氨基酸序列修飾通常落 在以下三類中的一個或多個的范圍內(nèi)：置換、插入或缺失變體。插入包括氨基和/或羧基 末端融合及單個或多個氨基酸殘基的序列內(nèi)插入。通常插入為小于氨基或羧基末端融合的 插入，例如，在一個至四個殘基的水平。缺失表征為從蛋白質(zhì)序列去除一個或多個氨基酸殘 基。所述變體一般是由編碼所述蛋白質(zhì)的DNA中核苷酸的定點(diǎn)突變制備，從而形成編碼所 述變體的DNA，并隨后在重組細(xì)胞培養(yǎng)物中表達(dá)所述DNA。用于在具有已知序列的DNA中的 預(yù)定位點(diǎn)處制備置換突變的技術(shù)是公知的并包括，例如，M13引物誘變和PCR誘變。氨基酸 置換通常為單個殘基，但可一次在多個不同位置發(fā)生；插入通常在約1至10個氨基酸殘基 的水平。缺失或插入可在相鄰的對中進(jìn)行，即缺失兩個殘基或插入兩個殘基?？梢詫⒅脫Q、 缺失、插入或其任意組合進(jìn)行組合以形成最終構(gòu)建體。所述突變必須不能將序列置于閱讀 框之外并優(yōu)選地不形成可產(chǎn)生二級mRNA結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)區(qū)域，除非需要在mRNA的二級結(jié)構(gòu)中 產(chǎn)生變化。置換變體為至少一個殘基被移除并在其位置插入一個不同殘基的那些。這類置 換通常被稱為保守性置換。例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，將一個氨基酸殘基用另一個在生物 學(xué)和/或化學(xué)上相似的氨基酸殘基替換是保守性置換。例如，保守性置換可為將一個疏水 殘基替換為另一個疏水殘基，或?qū)⒁粋€極性殘基置換為另一個極性殘基。本文提供的多肽 包括每個明確公布的序列的保守性置換變體。通常，保守性置換對于所產(chǎn)生的多肽的生物 活性幾乎沒有或沒有影響。在具體實(shí)例中，保守性置換為多肽中基本上不影響所述肽的生 物學(xué)功能的氨基酸置換。肽可包括一個或多個氨基酸置換，例如2-10個保守性置換、2-5 個保守性置換、4-9個保守性置換，例如2、5或10個保守性置換?？赏ㄟ^使用例如標(biāo)準(zhǔn)程 序（如定點(diǎn)誘變或PCR)來操作編碼多肽的核苷酸序列而使所述多肽產(chǎn)生一個或多個保守 性置換。或者，可以使用標(biāo)準(zhǔn)肽合成方法來產(chǎn)生含有一個或多個保守性置換的多肽。丙氨 酸掃描（alaninescan)可用于識別蛋白質(zhì)中哪個氨基酸可以耐受氨基酸置換。在一個實(shí) 例中，當(dāng)用丙氨酸或其他保守氨基酸（例如以下所列的那些）置換一種或多種天然氨基酸， 該蛋白質(zhì)的生物活性的降低不超過25%，例如不超過20%，例如不超過10%。關(guān)于保守性 置換的其他信息可見于其他位置，Ben-Bassatetal·，（J.Bacterial. 169:751-7,1987)， 0'Reganetal.，（Gene77 :237-51,1989),Sahin-Tothetal.，（ProteinSci. 3 :240-7, 1994)，Hochulietal·，（Bio/Technology6 :1321_5,1988)，及遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的標(biāo) 準(zhǔn)教科書中。
[0060] 用于本文時，"分析方法"包括以下用于確定特定制劑中所述ACT肽的種類和含量 的技術(shù)：NMR、HPLC、氨基酸組成和分子量確定（AminoAcidCompositionandMolecular WeightDetermination)及比方寵光度（SpecificOpticalRotation)。
[0061] 本發(fā)明包括包含至少一種α連接蛋白多肽和羥乙基纖維素凝膠的局部制劑，其 中所述羥乙基纖維素凝膠使所述a連接蛋白多肽穩(wěn)定。在某些實(shí)施方案中，所述羥乙基 纖維素凝膠使a連接蛋白多肽穩(wěn)定以使得在5°C下保存3個月后至少 83 %,84 %,85 %,86 %,87 %,88 %,89 %,90 %,91 %,92 %,93 %,94 %,95 %,96 %,97 %, 98%、99%或100%的所述a連接蛋白多肽可通過分析方法檢測到。在一些實(shí)施方案中，所 述ct連接蛋白多肽以以下濃度存在于所述制劑中：約0.0025% (w/w)，約0.005% (w/w)， 約 0.0075% (w/w)，約 0.010% (w/w)，約 0.015% (w/w)，約 0.020% (w/w)，約 0.025% (w/ w)，約 0· 030 % (w/w)，約 0· 035 % (w/w)，約 0· 040 % (w/w)，約 0· 045 % (w/w)，約 0· 050 % (w/w)，約 0· 080% (w/w)，約 0· 085% (w/w)，約 0· 090% (w/w)，約 0· 095% (w/w)，約 0· 100%^/^)340.1505^^/^)340.2005^^/^)340.2505^^/^)340.5005^^/^)340.7501% (界/'\￥)，約1.00(%(￥/\￥)，約1.50(%(￥/\￥)，約2.00 (%(￥/\￥)，約2.50(%(￥/\￥)，或約5.00(￥/ w)。在一個實(shí)施方案中，所述α連接蛋白多肽存在于所述制劑中的濃度介于約0.005% (w/ w)至約 1.00% (w/w)之間。
[0062] 在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物產(chǎn)品為含有0. 0072% (w/w) (20μM)的所述ACT 肽、(λ018 % (w/w) (50μΜ)的所述ACT肽、(λ036 % (w/w) (100μΜ)的所述ACT肽或(λ072 % (w/w)(200yM)的所述ACT肽的澄清無色凝膠。所述ACT肽可溶于半固體劑型中，所述制 劑含有> 〇%水、> 10%水、> 20%水、> 30%水、> 40%水、> 50%水、> 60%水、> 70% 水、>80%水或>90%水以及0.25%膠凝劑（聚合物）、0.55%膠凝劑（聚合物）、0.75% 膠凝劑（聚合物）、1· 00%膠凝劑（聚合物）、1· 25%膠凝劑（聚合物）、1· 50%膠凝劑（聚 合物）、1· 75 %膠凝劑（聚合物）、2. 00 %膠凝劑（聚合物）、2. 25 %膠凝劑（聚合物）或 2. 50%膠凝劑（聚合物）。所述ACT肽可被很好的保存并充分地緩沖至pH6。在所述局部 制劑的一個實(shí)施方案中，定性和定量的組成列于表1.
[0063] 表1 :藥物產(chǎn)品凝膠定性和定量

【權(quán)利要求】
1. 一種局部制劑，其包含至少一種α連接蛋白多肽和羥乙基纖維素凝膠，其中所述羥 乙基纖維素凝膠使所述α連接蛋白多肽穩(wěn)定。
2. 權(quán)利要求1的局部制劑，其中所述羥乙基纖維素凝膠使所述α連接蛋白多肽穩(wěn)定以 使得在5°C下保存3個月后通過分析方法可檢測到至少98%的所述α連接蛋白多肽。
3. 權(quán)利要求1的局部制劑，其中所述羥乙基纖維素凝膠使所述α連接蛋白多肽穩(wěn)定以 使得在5°C下保存3個月后通過分析方法可檢測到至少95%的所述α連接蛋白多肽。
4. 權(quán)利要求1的局部制劑，其中所述羥乙基纖維素以約1. 25% (w/w)的濃度存在。
5. 權(quán)利要求1的局部制劑，其中所述至少一種α連接蛋白多肽以約0.005% (w/w)至 約1.00% (w/w)的濃度存在。
6. 權(quán)利要求1的局部制劑，還包含將所述局部制劑的pH保持在約5-約7的緩沖劑。
7. 權(quán)利要求6的局部制劑，其中所述緩沖劑為磷酸鹽緩沖劑。
8. 權(quán)利要求1的局部制劑，其中所述至少一種α連接蛋白多肽包含α連接蛋白蛋白 質(zhì)或其保守性變體的最靠近羧基末端的4-30個連續(xù)氨基酸。
9. 權(quán)利要求8的局部制劑，其中所述至少一種α連接蛋白多肽在其氨基末端連接至細(xì) 胞內(nèi)化運(yùn)載體。
10. 權(quán)利要求9的局部制劑，其中所述細(xì)胞內(nèi)化運(yùn)載體為觸角足序列。
11. 權(quán)利要求8的局部制劑，其中所述至少一種α連接蛋白多肽包含SEQ ID NO :9的 氨基酸序列。
12. 權(quán)利要求8的局部制劑，其中所述α連接蛋白多肽為連接蛋白37、連接蛋白40、連 接蛋白43或連接蛋白45。
13. -種傷口治療的方法，包括給予有需要的受試者權(quán)利要求1的局部制劑。
14. 權(quán)利要求13的方法，其中所述傷口為急性外科傷口。
15. 權(quán)利要求13的方法，其中所述傷口為慢性的、非感染的、全層皮膚下肢潰瘍。
16. -種生產(chǎn)局部制劑的方法，其包括： a) 混合丙二醇、丙三醇、對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯直至所述對羥基苯甲 酸酯完全溶解； b) 單獨(dú)混合純水、EDTA、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉和D-甘露醇直至獲得澄清溶液； c) 將來自a)的溶液加入至來自b)的溶液中，用純水沖洗所述來自a)的溶液的容器， 將沖洗液加入合并的溶液中，并混合直至所述合并的溶液為目測均相的； d) -邊均化混合，一邊將羥乙基纖維素加入c)的所述合并的溶液中并混合直至聚合 物完全分散、 e) 單獨(dú)混合純水與α連接蛋白多肽直至所述肽完全溶解； f) 將來自e)的溶液加入至d)的溶液中，用純水沖洗所述來自e)的溶液的容器，將所 述沖洗液加入至所述合并的溶液，并混合直至所述合并的溶液為均相的。
【文檔編號】A61K31/74GK104271142SQ201380023492
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2013年3月1日 優(yōu)先權(quán)日:2012年3月1日
【發(fā)明者】G·格哈特尼卡 申請人:福斯特斯特林研究公司