牛大力抗疲勞口服液及牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了牛大力抗疲勞口服液及牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用。牛大力抗疲勞口服液，它是是這樣制備而成：1）取牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡1～3h，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為8～12：1（ml/g），加熱煮沸2～4h，趁熱過濾；2）過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為4～8：1（mL/g），加熱煮沸1～3h，趁熱過濾；3）合并兩次濾液，濃縮，用乙醇沉淀，上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與所述牛大力根莖切片的比例為1:1（mL/g），加適量防腐劑，灌裝，滅菌。本發(fā)明產品按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）中關于抗疲勞評價標準提示牛大力具有顯著的抗疲勞活性。
【專利說明】牛大力抗疲勞口服液及牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥【技術領域】，具體涉及牛大力Radix MillettiaSpeciosae在制備抗疲勞保健品中的用途及牛大力抗疲勞保健品。
【背景技術】
[0002]牛大力(radix mi I Iettiaspeciosae )為豆科崖豆藤屬植物美麗崖豆藤(millettiaSpeciosa Champ)的干燥根,別名大力牛、扒山虎、血藤、金鐘根、倒吊金鐘、甜大力牛等，其性味甘、平，歸肺、脾腎經，有補虛潤肺、強筋活絡之功，用于病后虛弱、陰虛咳嗽、腰肌勞損、遺精、白帶等癥狀。牛大力用藥歷史悠久，《生草藥性備要》記載其:“壯筋活絡，補虛潤肺。治腰腿痛，風濕痹痛，慢性肝炎，肺結核”?！蛾懘ū静荨芬灿涊d其:“清肺止咳，清涼解毒，治咳血，痢疾，溫病身熱口渴，頭暈”。70年代開始作為壯腰健腎丸、強力健身膠囊等的原料用于中成藥生產，在兩廣地區(qū)廣泛應用，作為嶺南地區(qū)藥食兩用植物?，F(xiàn)代藥理研究表明，牛大力具有多種藥理活性，概括起來講，目前已公開的文獻報道的藥理作用如下:
[0003]1、調節(jié)免疫作用(呂世靜，黃槐蓮等，牛大力對抗體及IL-2產生的影響【J】，上海免疫雜志，1997，17 (1):56 ;鄭元升，蒲含林等，牛大力多糖對小鼠T淋巴細胞增值的雙向調節(jié)作用【J】，廣東藥學院學報，2008,24 (1):58-61 ;石焱，弓小雪等，牛大力多糖對免疫抑制小鼠的免疫調節(jié)作用【J】.臨床軍醫(yī)雜志，2008，36 (4) ；530-532 ;魏翠萍，劉丹丹等，牛大力對小鼠免疫功能的影響【J】，廣州中醫(yī)藥大學學報，209，26 (6):539-542 ;鄭元升，牛大力多糖的提取及藥理活性研究【D】，暨南大學碩士學位論文，2009);
[0004]2、抗氧化作用(鄭元升，牛大力多糖的提取及藥理活性研究【D】，暨南大學碩士學位論文，2009)；
`[0005]3、抗腫瘤作用(鄭元升，牛大力多糖提取及藥理活性研究【D】，暨南大學碩士學位論文，2009 ;臧文霞，王箐等，五中藥用植物萃取物對四種組織來源腫瘤細胞體外增殖抑制作用的觀察，山東醫(yī)藥，2012，52 (42):7_10)；
[0006]4、抗炎作用(鄭元升，牛大力多糖的提取及藥理活性研究【D】，暨南大學碩士學位論文，2009)；
[0007]5、祛痰、鎮(zhèn)咳、平喘作用(劉丹丹、唐立海。牛大力多糖祛痰、鎮(zhèn)咳和平喘作用的實驗研究。廣州中醫(yī)藥大學學報。2009,26 (3) ；266-269.)；
[0008]6、保肝作用(周添濃，劉丹丹等，牛大力對四氯化碳及酒精所致小鼠急性肝損傷的保護作用，時珍國醫(yī)國藥，2009，20 (10) ；2585-2587)；
[0009]7、DNA防護作用(陳曉白，王曉平等，彗星實驗評價牛大力對60Co R射線致小鼠DNA損傷的防護[J]，時珍國醫(yī)國藥，2013，24 (1):76-78.);
[0010]8、保鮮作用(張?zhí)K敏，李天略.牛大力氯仿提取物保鮮豇豆研究【J】.安徽農業(yè)科學，2012，40 (36):17714-17715.)。
[0011]以上研究提示，牛大力具有調節(jié)免疫、抗氧化、抗腫瘤、抗炎、祛痰、鎮(zhèn)咳、保肝、DNA防護和保鮮等作用。目前，尚未見牛大力抗疲勞方面在臨床上應用的研究報道。
[0012]疲勞作為一種生理現(xiàn)象，是指機體生理過程不能持續(xù)其機能在某一特定的水平和/或不能維持預定的運動強度。從生物化學角度來看，產生疲勞的原因:一是由于運動時能力體系輸出的最大功率下降:二是由于肌肉力量下降或內臟器官功能下降而不能維持運動強度。據(jù)WHO調查，全球約有35%以上的人處于疲勞狀態(tài)，中年男性人群疲勞狀態(tài)達60.70%,我國有近70%的中年人處于疲勞狀。疲勞的出現(xiàn)，可引起運動能力降低、戰(zhàn)斗力減退、工作效率降低、差錯事故增多。疲勞發(fā)生后如果得不到及時的恢復，逐漸積累，還會導致“過勞”，出現(xiàn)“過度訓練綜合征”、“慢性疲勞綜合癥”等，使機體發(fā)生內分泌紊亂、免疫力下降，甚至出現(xiàn)器質性病變，成為威脅人類健康的重要因素。在社會競爭日益激烈，人們日益講求工作實效而又重視身體保健的今天，從天然植物資源中尋找安全、有效的抗疲勞成為已成為預防醫(yī)學和運動醫(yī)學研究的熱點。
【發(fā)明內容】
[0013]本發(fā)明的目的在于提供牛大力抗疲勞口服液。
[0014]本發(fā)明的第二個目的在于提供牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用。
[0015]為了實現(xiàn)本發(fā)明的第一個目的，本發(fā)明提供了以下技術方案:
[0016]牛大力抗疲勞口服液，它是通過以下方法制備而成的:
[0017](I)取經烘干且水分含量在5以下％的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡lh，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為10:1 (ml/g)，加熱煮沸3h，趁熱過濾；
[0018]所述經烘干的牛大力根莖切片，是這樣制備得到的:
[0019]a)將牛大力原料進行感官檢驗，檢驗指標為:外觀大小一致，分散均勻；色澤為棕黃色；滋味、氣味甘香，不得有異味；無無肉眼可見雜質；
[0020]b)挑選:挑選原料，進一步除去雜質并除去非食用部位，留取根莖部位；挑選后的根莖部位的總黃酮≤105mg/100g,總多糖≤2.2g/100g,水分 ≤10g/100g,總灰分(7g/100g,鉛(Pb) ( 3.0mg/kg,總砷(As) ( 2.0mg/kg,總萊(Hg) ( 0.17mg/kg,鎘(Cd) ( 0.28mg/kg,敵敵畏< 0.2mg/kg,樂果< 0.8mg/kg,六六六總量< 0.2mg/kg,滴滴涕總量< 0.18mg/kg,三氯殺螨醇< 0.2mg/kg,氰戍菊酯< 0.5mg/kg,五氯硝基苯< 0.1mg/kg ；
[0021]c)干燥:采用烘干機，溫度設定50-60°C，優(yōu)選在58.5°C進行干燥，干燥至水分含量在5%以下，水分含量優(yōu)選1-2%;
[0022]d)切片:將牛大力根莖切片；
[0023]e)滅菌:將牛大力根莖切片置于微波滅菌機中滅菌，滅菌后菌落總數(shù)(30000cfu/g,大腸菌群< 40MPN/100g,霉菌< 1000cfu/g,致病菌(沙門氏菌,志賀氏菌，金黃色葡萄球菌)無；
[0024](2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為6:1 (mL/g)，加熱煮沸1.5h,趁熱過濾；
[0025](3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1 (mL/g)，加入適量食用防腐劑，灌裝于聚丙烯包裝材料，每支10ml，滅菌，即得。
[0026]所述牛大力原料為市場上普遍流通的將新鮮牛大力經水洗、除塵、晾曬后用于制備飲片的原材料。
[0027]—種牛大力抗疲勞口服液，它是通過以下方法制備而成:
[0028](I)取經烘干且水分含量在5%以下的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡I~3h，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為8~12:1 (ml/g)，加熱煮沸2~4h,趁熱過濾；
[0029](2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為4~8:1 (mL/g)，加熱煮沸I~3h,趁熱過濾；
[0030](3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1 (mL/g)，加入適量防腐劑，灌裝，每支10ml，滅菌，即得。
[0031]所述牛大力抗疲勞口服液，它是通過以下方法制備而成:
[0032]取取經烘干且水分含量在4以下％的牛大力根莖切片lOOOg，用IOL蒸餾水浸泡lh，加熱煮沸3h，趁熱過濾，過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為6:l(mL/g),加熱煮沸1.5h，合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至1L，加入適量防腐劑，灌裝，每支10或12或15或20ml，滅菌，即得。
[0033]所述牛大力抗疲勞口服液，其包裝材料為聚丙烯材料。
[0034]所述經烘干的牛大力根莖切片，是通過以下方法制備得到的:
[0035]b)將牛大力原料進行感官檢驗，檢驗指標為:外觀大小一致，分散均勻；色澤為棕黃色；滋味、氣味甘香，不得有異味；無無肉眼可見雜質；
[0036]b)挑選:挑選原料，進一步除去雜質并除去非食用部位，留取根莖部位；挑選后的根莖部位的總黃酮≤100mg/100g,總多糖≤2g/100g,水分≤10g/100g,總灰分≤8g/100g,鉛(Pb) ( 3.0mg/kg,總砷(As) ( 2.0mg/kg,總萊(Hg) ( 0.2mg/kg,鎘(Cd) ( 0.3mg/kg,敵敵畏< 0.2mg/kg,樂果< 1.0mg/kg,六六六總量< 0.2mg/kg,滴滴涕總量< 0.2mg/kg,三氯殺螨醇< 0.2mg/kg,氰戍菊酯;^ 0.5mg/kg,五氯硝基苯< 0.lmg/kg ；
[0037]c)干燥:采用烘干機，溫度設定50_60°C，優(yōu)選在58.5°C進行干燥，干燥至水分含量在5%以下，水分含量優(yōu)選1-2%;
[0038]d)切片:將牛大力根莖切片；
[0039]e)滅菌:將牛大力根莖切片置于微波滅菌機中滅菌，滅菌后菌落總數(shù)(30000cfu/g,大腸菌群< 40MPN/100g,霉菌< 1000cfu/g,致病菌(沙門氏菌,志賀氏菌，
金黃色葡萄球菌)無。
[0040]為了實現(xiàn)本發(fā)明的第二個目的，本發(fā)明提供了以下技術方案:
[0041]牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用。
[0042]所述應用，具體是取經烘干水分含量在5%以下的牛大力根莖切片，粉碎成粗粉，過篩，加入適量預糊化淀粉，拌勻，以模具或壓差機制成小方塊，每塊25g，干燥，包裝，即制得抗疲勞保健品牛大力茶塊。
[0043]所述應用，具體是取經烘干水分含量在5%以下的牛大力根莖切片，粉碎成粗粉，過篩，裝袋，每袋重20g，滅菌，即制得抗疲勞保健品牛大力袋裝茶。
[0044]所述應用，具體是取經烘干水分含量在5%以下的牛大力根莖切片，切片，分裝入袋，每袋重20g，滅菌，即制得抗疲勞保健品牛大力煎煮茶。
[0045]所述應用，具體是:
[0046](I)取經烘干且水分含量在5%以下的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡I~3h，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為8~12:1 (ml/g)，加熱煮沸2~4h,趁熱過濾；
[0047](2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為4~8:1 (mL/g)，加熱煮沸I~3h,趁熱過濾；
[0048](3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1 (mL/g)，加入適量防腐劑，灌裝，每支10ml，滅菌，即得。
[0049]進一步的，所述應用進一步優(yōu)選為:
[0050](I)取經烘干且水分含量在3以下％的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡lh，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為10:1 (ml/g)，加熱煮沸3h，趁熱過濾；
[0051](2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為6:1 (mL/g)，加熱煮沸1.5h,趁熱過濾；
[0052](3)合并兩 次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1 (mL/g)，加入適量防腐劑，灌裝，每支10ml，滅菌，即得。
[0053]與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明產品具有抗疲勞活性，涉及通過小鼠負重游泳實驗，爬桿試驗以及相應生化指標的檢測:尿素氮、葡萄糖，肌糖原，乳酸脫氫酶，肌酸磷酸激酶的含量變化，對牛大力的抗疲勞功能作出科學評價。實驗結果表明牛大力可以延長小鼠的力竭游泳時間和爬桿時間，其中以高劑量組最為明顯；可以顯著性增加運動小鼠肌糖原含量，降低血清中尿素氮以及肌酸磷酸激酶含量。同時，有增加血清中葡萄糖和減少乳酸脫氫酶含量的趨勢。按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》(2003版)中關于抗疲勞評價標準顯示牛大力具有明顯的抗疲勞活性。因此牛大力在抗疲勞保健食品上具有很大的開發(fā)應用前景。
【專利附圖】
【附圖說明】:
[0054]圖1為顯示牛大力對小鼠爬桿時間的影響的結果圖。
[0055]圖2為顯示牛大力對小鼠力竭游泳時間的影響的結果圖
[0056]圖3為顯示牛大力對運動后小鼠血漿中葡萄糖含量的影響的結果圖。
[0057]圖4為顯示牛大力對運動后小鼠血漿中尿素氮含量的影響的結果圖
[0058]圖5為顯示牛大力對運動后小鼠血漿中乳酸脫氫酶含量的影響的結果圖
[0059]圖6為顯示牛大力對運動后小鼠血漿中磷酸肌酸酶含量的影響的結果圖
[0060]圖7為顯示牛大 力對運動后小鼠肌肉中肌糖原含量的影響的結果圖。【具體實施方式】
[0061]下面結合實驗例及【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步的詳細描述。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例，凡基于本
【發(fā)明內容】
所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
[0062]實施例1牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用及牛大力茶塊
[0063]取牛大力，粉碎成粗粉，過篩，加入淀粉糊適量，拌勻，以模具或壓差機制成小方塊，每塊20g或25g或28g或30g,干燥，包裝，即得。
[0064]用法:茶塊煎服，一次一塊。
[0065]實施例2牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用及牛大力茶袋
[0066]取牛大力，粉碎成粗粉，過篩，裝袋，每袋重20g，滅菌，即得。茶袋開水泡服，一次I袋。
[0067]實施例3牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用及牛大力煎煮茶
[0068]取經烘干水分含量在5%以下的牛大力根莖切片，切片，分裝入袋，每袋重20g，滅菌，即得。煎煮后取汁當茶飲。一次I袋。
[0069]實施例4牛大力抗疲勞口服液
[0070]取牛大力根莖切片lOOOg，用10倍體積的蒸餾水浸泡lh，加熱煮沸3h，趁熱過濾，殘渣再加6倍體積的蒸餾水，加熱煮沸1.5h，合并2此濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至1000ml，加入適量防腐劑，灌裝，每支IOml，滅菌，即得?？诜?，一次IOml，每天2次。
[0071]實施例5牛大力抗疲勞口服液
[0072]它是通過以下方法制備而成的:
[0073](I)取經烘干且水分含量在5以下％的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡lh，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為10:1 (ml/g)，加熱煮沸3h，趁熱過濾；
[0074]所述經烘干的牛大力根莖切片，是這樣制備得到的:
[0075]c)將牛大力原料進行感官檢驗，檢驗指標為:外觀大小一致，分散均勻；色澤為棕黃色；滋味、氣味甘香，不得有異味；無無肉眼可見雜質；
[0076]b)挑選:挑選原料，進一步除去雜質并除去非食用部位，留取根莖部位；挑選后的根莖部位的總黃酮≤105mg/100g,總多糖≤2.2g/100g,水分≤10g/100g,總灰分(7g/100g,鉛(Pb) ( 3.0mg/kg,總砷(As) ( 2.0mg/kg,總萊(Hg) ( 0.17mg/kg,鎘(Cd) ( 0.28mg/kg,敵敵畏< 0.2mg/kg,樂果< 0.8mg/kg,六六六總量< 0.2mg/kg,滴滴涕總量< 0.18mg/kg,三氯殺螨醇< 0.2mg/kg,氰戍菊酯< 0.5mg/kg,五氯硝基苯< 0.1mg/kg ；
[0077]c)干燥:采用烘干機，溫度設定在58.5°C進行干燥，干燥至水分含量在1-2%;
[0078]d)切片:將牛大力根莖切片；
[0079]e)滅菌:將牛大力根莖切片置于微波滅菌機中滅菌，滅菌后菌落總數(shù)(30000cfu/g,大腸菌群< 40MPN/100g,霉菌< 1000cfu/g,致病菌(沙門氏菌，志賀氏菌，金黃色葡萄球菌)無；
[0080](2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為6:1 (mL/g)，加熱煮沸1.5h,趁熱過濾；
[0081](3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1 (mL/g)，加入適量食用防腐劑，灌裝于聚丙烯包裝材料，每支10ml，滅菌，即得。
[0082]本例牛大力抗疲勞口服液經驗證，抗疲勞效果好，有較好的保健作用；且工藝成本較低，易操作，通過所述方法制備的口服液使牛大力有效藥用成分盡可能的保留，療效較好。
[0083]實施例6—種牛大力抗疲勞口服液
[0084]它是通過以下方法制備而成: [0085](I)取經烘干且水分含量在4以下％的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡lh，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為8:1 (ml/g)，加熱煮沸2h，趁熱過濾；
[0086](2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為4:1 (mL/g)，加熱煮沸I~3h,趁熱過濾；
[0087](3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1 (mL/g)，加入適量防腐劑，灌裝，每支10ml，滅菌，即得。
[0088]實施例7牛大力抗疲勞口服液
[0089]它是通過以下方法制備而成:
[0090]取經烘干且水分含量在2%的牛大力根莖切片lOOOg，用IOL蒸餾水浸泡lh，加熱煮沸3h，趁熱過濾，過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為6:1 (mL/g)，加熱煮沸1.5h，合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至1L，加入適量防腐劑，灌裝，每支20ml，滅菌，即得。
[0091]實驗例:牛大力抗疲勞作用實驗
[0092]I材料與方法
[0093]1.1動物以及給藥方法
[0094]動物:SPF級KM小鼠，體重18_22g，雌雄各半，由廣東省實驗動物中心提供(合格證號:440072000002881)，小鼠飼養(yǎng)前將其稱重，體重無差別的小鼠隨機被分為空白組，高劑量組，中劑量組，低劑量組。動物在動物房飼育室中進行飼養(yǎng)，溫度維持在23+1C.相對濕度維持在40-60%。每天保持12h (早7:00至晚7:00)燈照和黑暗的條件，所有的實驗操作在動物房的操作室中進行，操作時間為9:00至15:00，各組動物在灌胃飼養(yǎng)期間自由飲水和進食。
[0095]給藥方法:每天用灌胃針灌胃I次，每次劑量為高劑量組(20g/kg)，中劑量組(10g、Kg)，低劑量組(5g/kg)，空白組給藥生理鹽水。按照0.2ml/10g體重連續(xù)灌胃20d，并在末次給藥前稱重。
[0096]1.2藥物與制備
[0097]藥物:牛大力(江門市禾盛生物技術有限公司提供)；
[0098]制備方法:取經實施例5制備得到的口服液，具體地在實施例5制備時，合并2次濾液，濃縮至lg/ml ;濃度備用，用時加蒸餾水稀釋至所需濃度。[0099]1.3劑量與儀器
[0100]試劑:肝糖原/肌糖原試劑盒(南京建成生物工程研究所)
[0101]儀器JJ600電子計重秤(高熟市雙杰儀器廠)，微孔板分光光度計(美國賽默飛世爾科技公司)，TG16-WS臺式離心機(湘儀離心機儀器有限公司)，96微孔板(美國costar3599),自動生化儀9cosba8000),游泳箱(40cm*40cm*35cm)、鉛皮(購自漁具店)、解剖器械，溫度計，表鍋，電爐，試管，平皿，濾紙，12.0ml和0，5
[0102]Ml塑料離心管，毛細管(20uL)等
[0103]1.4牛大力對小鼠爬桿時間的影響
[0104]取SPF級KM小鼠40只(分組及給藥方法同1.1),即隨機分別4組:空白組、低劑
量組、中劑量組、高劑量組
[0105]牛大力高、中、低劑量組劑量分別為20105g kg d，各組小鼠在末次灌胃60min后進行爬桿實驗。
[0106]爬桿架 及其規(guī)格為:直徑0.8cm，長50cm的玻璃棒，上端垂直固定于爬桿架上，下端懸空，距地面約40cm，小鼠均從第一周開始予以適應性訓練，每周2次，每次5min，經3周適應性訓練后，無運動功能異常的小鼠進入測試實驗。各組小鼠在末次灌胃60min后，置于已設置好的爬桿下段，記錄從放置開始至小鼠因疲勞無力從上端滑落的時間，為小鼠爬桿時間，連續(xù)滑落3次后將時間累加即為最終爬竿時間。
[0107]1.5牛大力對小鼠力竭游泳時間的影響
[0108]取SPF急KM小鼠48只(分組及給藥方法同1.1),即隨機分為4組:空白組，牛大力高中低劑量組(劑量分別為20、10、5g。kg。d)。各組小鼠在末次灌胃60min后進行力竭游泳時間實驗。
[0109]在小鼠尾根部附以小鼠體重5%的鉛絲，放入水溫為(25.0+0.5)C游泳箱中用秒表記錄自游泳開始至力竭(小鼠沉沒后IOs仍不能浮出水面)的時間作為小鼠力竭游泳時間。
[0110]1.6牛大力對運動后小鼠血液和肌肉生化指標的影響
[0111]取SPF級KM小鼠48只(分組及給藥方法同1.1)，隨機分為4組:空白組、牛大力高、中、低劑量組O。各組小鼠在末次灌胃60min后進行游泳，將小鼠置25+0.5C的游泳箱中游泳90min后取出眼球采血,加肝素抗凝后，以每分鐘3000轉離心15min,取血衆(zhòng),按試劑盒說明用自動生化分析儀測定尿素氮，葡萄糖，磷酸激酶和乳酸脫氫酶的含量。取小鼠后肢肌肉，放入預冷的生理鹽水中清除其血液，用吸水紙吸干，稱取肌肉，按試劑盒說明書測定肌糖原含量。
[0112]1.7統(tǒng)計學處理
[0113]各組實驗數(shù)據(jù)均用均數(shù)+標準差表示，單因素方差分析，P〈0.05he P〈0.01顯示兩組差異有統(tǒng)計學意義。
[0114]2 結果
[0115]2.1牛大力對小鼠體重的影響
[0116]20天后各組小鼠活潑，精神狀態(tài)好，皮毛光滑，未見任何不良反應，牛大力對小鼠體重的影響，結果見表1，與正常對照組相比，各種藥組小鼠試驗開始及結束時體重差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，表明牛大力對小鼠體重增長無明顯影響。
[0117]表1[0118]
【權利要求】
1.牛大力抗疲勞口服液，其特征在于，它是通過以下方法制備而成的: (1)取經烘干且水分含量在5以下％的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡lh，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為10:1 (ml/g)，加熱煮沸3h，趁熱過濾； 所述經烘干的牛大力根莖切片，是這樣制備得到的: a)將牛大力原料進行感官檢驗，檢驗指標為:外觀大小一致，分散均勻；色澤為棕黃色；滋味、氣味甘香，不得有異味；無無肉眼可見雜質； b)挑選:挑選原料，進一步除去雜質并除去非食用部位，留取根莖部位；挑選后的根莖部位的總黃酮≤105mg/100g，總多糖≤2.2g/100g，水分≤10g/100g，總灰分≤7g/100g，鉛(Pb) ( 3.0mg/kg,總砷(As) ( 2.0mg/kg,總萊(Hg) ( 0.17mg/kg,鎘(Cd) ( 0.28mg/kg,敵敵畏≤0.2mg/kg,樂果≤0.8mg/kg,六六六總量≤0.2mg/kg,滴滴涕總量≤0.18mg/kg,三氯殺螨醇< 0.2mg/kg,氰戍菊酯;^ 0.5mg/kg,五氯硝基苯< 0.lmg/kg ； c)干燥:米用烘干機，溫度設定50_60°C,優(yōu)選在58.5°C進行干燥,干燥至水分含量在5%以下，水分含量優(yōu)選1-2%; d)切片:將牛大力根莖切片； e)滅菌:將牛大力根莖切片置于微波滅菌機中滅菌，滅菌后菌落總數(shù)<30000cfU/g，大腸菌群< 40MPN/100g，霉菌< lOOOcfu/g，致病菌(沙門氏菌，志賀氏菌，金黃色葡萄球菌)無； (2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為6:1 (mL/g)，加熱煮沸1.5h，趁熱過濾； (3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1(mL/g)，加入適量食用防腐劑，灌裝于聚丙烯包裝材料，每支10ml，滅菌，即得。
2.一種牛大力抗疲勞口服液，其特征在于，它是通過以下方法制備而成: (1)取經烘干且水分含量在4以下％的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡I~3h，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為8~12:1 (ml/g)，加熱煮沸2~4h，趁熱過濾； (2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為4~8:1 (mL/g)，加熱煮沸I~3h,趁熱過濾； (3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1(mL/g)，加入適量防腐劑，灌裝，每支10ml，滅菌，即得。
3.根據(jù)權利要求2所述的牛大力抗疲勞口服液，其特征在于，它是通過以下方法制備而成: 取經烘干且水分含量在1-2%的牛大力根莖切片lOOOg，用10L蒸餾水浸泡lh，加熱煮沸3h，趁熱過濾，過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為6:1 (mL/g)，加熱煮沸1.5h，合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至1L，加入適量防腐劑，灌裝，每支10或12或15或20ml，滅菌，即得。
4.根據(jù)權利要求2或3所述的牛大力抗疲勞口服液，其特征在于，其包裝材料為聚丙烯材料。
5.牛大力在制備抗疲勞保健品中的應用。
6.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于，取牛大力根莖切片，烘干至水分含量在5%以下，粉碎成粗粉，過篩，加入適量預糊化淀粉，拌勻，以模具或壓差機制成小方塊，每塊20g或25g或28g或30g，干燥，包裝，即制得抗疲勞保健品牛大力茶塊。
7.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于，取經烘干水分含量在5%以下的牛大力根莖切片，粉碎成粗粉，過篩，裝袋，每袋重20g，滅菌，即制得抗疲勞保健品牛大力袋裝茶。
8.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于，取經烘干水分含量在5%以下的牛大力根莖切片，切片，分裝入袋，每袋重20g，滅菌，即制得抗疲勞保健品牛大力煎煮茶。
9.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于， (1)取經烘干且水分含量在5%以下的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡I~3h，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為8~12:1 (ml/g)，加熱煮沸2~4h，趁熱過濾； (2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為4~8:1 (mL/g)，加熱煮沸I~3h,趁熱過濾； (3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1(mL/g)，加入適量防腐劑，灌裝，每支10ml，滅菌，即得。
10.根據(jù)權利要求9所述的應用，其特征在于， (1)取經烘干且水分含量在3以下％的牛大力根莖切片1000重量份，用蒸餾水浸泡lh，所述蒸餾水用量與所述牛大力根莖切片的比例為10:1 (ml/g)，加熱煮沸3h，趁熱過濾； (2)過濾殘渣再加蒸餾水，蒸餾水與過濾殘渣的比例為6:1 (mL/g)，加熱煮沸1.5h，趁熱過濾； (3)合并兩次濾液，濃縮至適量，加乙醇適量使沉淀，取上清液減壓過濾，回收乙醇，加水攪拌，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮至與步驟(1)中牛大力根莖切片之間的比例為1:1(mL/g)，加入適量防腐劑，灌裝，每支10ml，滅菌，即得。
【文檔編號】A61P39/00GK103768137SQ201410040551
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年1月27日 優(yōu)先權日:2014年1月27日
【發(fā)明者】李送南 申請人:江門市禾盛生物技術有限公司