清除植物材料上的微生物的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種能有效清除Pseudomonas?syringae?pv.actinidiae（Psa）細(xì)菌細(xì)胞的載菌量的方法，其中，Pseudomonas?syringae?pv.actinidiae是獼猴桃細(xì)菌性潰瘍的病原體，是一種能攻擊所有獼猴桃物種和變種的極端致命的細(xì)菌。本發(fā)明描述的方法適用于獼猴桃屬的不同植物，并且特別地，適用于潛在感染Psa的獼猴桃花粉。該方法需要在同一植物樣品上進(jìn)行涉及抗菌作用的兩個階段處理：階段1）中，使?jié)撛诟腥綪sa的植物樣品在一給定的時間段內(nèi)處于特定的溫度；階段2）中，在階段1）后，在特定的環(huán)境條件（溫度和相對空氣濕度）下，將特定濃度臭氧應(yīng)用于同一植物樣品上。
【專利說明】清除植物材料上的微生物的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種能有效清除 Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa)細(xì)菌 細(xì)胞的載菌量的方法，其中，Pseudomonas syringae pv.actinidiae是稱猴桃細(xì)菌性潰瘍 的病原體，是一種能攻擊所有獼猴桃物種和變種的極端致命的細(xì)菌。
[0002] 所描述的方法適用于不同的獼猴桃屬（Genus Actinidiae)植物，用于防止所述細(xì) 菌出現(xiàn)和蔓延所帶來的嚴(yán)重后果；特別地，本方法可應(yīng)用于潛在地被Psa感染的獼猴桃花 粉。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明技術(shù)涉及不同策略方法的使用，用于防御抵抗Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa),包括單獨和/或聯(lián)合采用以下的策略：
[0004] a)提供適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)，并刺激獼猴桃植物的內(nèi)源性防御(提供氨基酸、腐殖酸 鉀、磷酸、硫酸）（Mazzaglia et al.，2011);b)使用銅鹽來保護(hù)稱猴桃的不同物候 期（Fratarcangeli et al.，2010;Quattrucci et al.，2010);c)通過使用天然拮抗 齊U (解淀粉芽孢桿菌，D747菌株）的方法來防御獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病原體的感染，該 菌株是迄今為止在歐洲共同體中注冊用于防治Psa的唯一農(nóng)作物保護(hù)產(chǎn)品，其能定殖 (colonize)并保護(hù)稱猴桃棺株的器官，抵抗這種細(xì)菌（http://www. intrachem. it/home. cfm?lang=it&section=3&news=15)〇
[0005] 因此，本發(fā)明的目的在于確定一種能用于獼猴桃屬植物以清除Psa細(xì)菌細(xì)胞的載 菌量的方法，該方法通過使用臭氧，結(jié)合殺菌活性，并在隨后使用溫度來進(jìn)行。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0006] 圖1 :圖中顯示了作為本發(fā)明目的方法的應(yīng)用。
[0007] 在該原型中，一潛在感染PSA的獼猴桃花粉樣品放置在容器中，容器裝配有一臭 氧生成器1、冷卻器2、風(fēng)扇3、散熱器（radiator) 4、低溫探針5、高溫探針6、用于阻止花粉 粘在容器內(nèi)突出部分的保護(hù)活板7、用試管進(jìn)行測試的開口 8、加入花粉及處理后收集花粉 的托盤9。
[0008] 在步驟的第一階段，在容器內(nèi)的獼猴桃花粉上吹空氣，花粉經(jīng)受42°C的溫度30分 鐘。在第二階段，用特定濃度（0.05ppm)的臭氧（0 3)處理4小時，溫度5°C，最大相對濕度 35%。

【具體實施方式】
[0009] 用于潛在感染PSA的獼猴桃花粉樣品的步驟。
[0010] 以下將詳細(xì)描述說明本發(fā)明的特征及優(yōu)勢：本方法涉及獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病原體 Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa)細(xì)菌細(xì)胞的載菌量的清除，本方法應(yīng)用于稱 猴桃屬的植物，特別地，應(yīng)用于潛在感染Psa的花粉樣品，這里僅通過示例代表本發(fā)明眾多 不同領(lǐng)域的應(yīng)用。
[0011] 該步驟涉及兩個階段。
[0012] 階段1 :非化學(xué)步驟，在該步驟中使獼猴桃花粉在一給定的時間段（30分鐘）處于 特定的溫度（42°c )，期間在該樣品上方吹空氣。事實上，使獼猴桃花粉處于特定的溫度并保 持一給定的時間，其意義在于在處理過的獼猴桃花粉樣品上實施抑菌作用。
[0013] 階段2 :已經(jīng)經(jīng)歷過階段1，并且在樣品上方繼續(xù)吹空氣，采用無色無味的物質(zhì)(臭 氧）處理該樣品。在一給定時間段（4小時）內(nèi)以及一特定環(huán)境條件下：溫度5°C，相對空氣 濕度不大于35%，使用特定濃度（0. 05ppm)的臭氧。
[0014] 如果單獨應(yīng)用于同一植物樣品上，則兩個階段（1和2)的抑菌效果將減弱。
[0015] 以上的方法中，考慮到其他對于該步驟的成功來說是很重要的參數(shù)(處理時間、在 臭氧中的溫度和％相對濕度)，依次應(yīng)用兩個階段提高了溫度和臭氧的殺菌作用。
[0016] 關(guān)于花粉樣品的處理，可以發(fā)展自組織系統(tǒng)（ad hoc system)，例如，在種植到戶 外前，采用該系統(tǒng)來處理大量的冷凍新鮮的稱猴桃藤（young actinidia vines)。
[0017] 參考文獻(xiàn)
[0018] MAZZAGLIA A., RENZI Μ. , TARATUF0L0 Μ. C. , ROSSETTI A., BALESTRA G. Μ. (2011). Tecniche di campο e nutrizione contro i 1 cancro del kiwi.L'Informatore AgrariolO, 64-66;
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[0020] QUATTRUCCI A, RENZI M, ROSSETTI A, RICCI L, TARATUF0L0 C, MAZZAGLIA A, BALESTRA G. M. (2010). Cancro batterico del kiwi verde:nuove strategie di controllo. Lf informatore agrariol6:53-58. INFORMATORE AGRARI0, vol. 16;p. 53-58, IS SN:0020-0689.
【權(quán)利要求】
1. 一種清除稱猴桃的細(xì)菌性潰瘍病原體Pseudomonas syringae pv. actinidiae(PSA) 細(xì)菌細(xì)胞的載菌量的方法，該方法可應(yīng)用于獼猴桃屬的不同植物，其涉及依次使用兩個階 段來對獼猴桃屬植物進(jìn)行抗菌處理：在第一階段中，使植物樣品在一給定的時間段內(nèi)處于 特定的溫度下；在第二階段中，使同一樣品處于特定濃度的臭氧及特定的環(huán)境參數(shù)(溫度和 相對空氣濕度）下。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中涉及Pseudomonas syringae pv.actinidiae的抗 菌處理，其中，Pseudomonas syringae pv.actinidiae是能導(dǎo)致被稱為稱猴桃潰瘍病的植 物疾病的植物病原細(xì)菌。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的方法，其中涉及依次使用溫度和臭氧來對獼猴桃屬植物 的花粉進(jìn)行抗菌處理。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1、2和3所述的方法，其中使所述獼猴桃屬的植物材料(花粉)處于溫 度42 °C下30分鐘。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1、2、3和4所述的方法，其中使所述獼猴桃屬的植物材料(花粉)在溫 度為5°C且最大相對濕度為35%時，處于0. 05ppm的特定濃度臭氧下4小時。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、4和5所述的方法，其中，如前文所述，依次使用溫度和臭氧，并 且處于上述的參數(shù)中。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、4、5和6所述的方法，其中所述依次應(yīng)用(溫度和臭氧)的處理 在一限定的環(huán)境中進(jìn)行，在該限制的環(huán)境中能控制多個不同的參數(shù)(空氣的％相對濕度、溫 度、臭氧濃度、氣流速度)。
【文檔編號】A61L2/04GK104056288SQ201410067952
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年2月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年3月1日
【發(fā)明者】G·M·巴萊斯特拉 申請人:津金果有限公司