一種氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明揭示了一種氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物及其制備方法。這種氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物是以氧化石墨烯(GO)或者連接有PEG的氧化石墨烯(G-P)作為載體，小檗堿(Ber)通過(guò)π-π作用裝載在GO或者G-P上，分別形成納米級(jí)GO-Ber或者G-P-Ber結(jié)合物。制備的結(jié)合物載藥率高，有緩釋性能，累積釋放高，并具有PH依賴的特點(diǎn)。本發(fā)明在解決小檗堿口服吸收差靶向性差上有巨大的潛力，在抗腫瘤上也具有重大意義。
【專利說(shuō)明】一種氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物及其制備
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種納米材料負(fù)載的藥物及其制備方法和應(yīng)用【背景技術(shù)】
[0002]石墨烯由單層碳原子排列組合而成，是世界上最薄的二維材料。近幾年，石墨烯作為一種新興的研究熱點(diǎn)，其結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、制備方法和應(yīng)用的研究文章紛紛見(jiàn)諸各學(xué)科的高端雜志，對(duì)于探究石墨烯的性質(zhì)及應(yīng)用起到極大的推動(dòng)作用。作為化學(xué)法制備石墨烯的前驅(qū)物——氧化石墨烯，由于表面及邊緣上大量含氧基團(tuán)的引入，易于修飾與功能化，且化學(xué)穩(wěn)定性高。功能化氧化石墨烯和石墨烯衍生物/復(fù)合物成為近年來(lái)科研工作者的熱點(diǎn)。
[0003]對(duì)石墨烯進(jìn)行功能化，引入新的官能團(tuán)之后，會(huì)賦予石墨烯新的性質(zhì)，改善其分散性和水溶性,進(jìn)而拓寬其應(yīng)用領(lǐng)域。聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)具有良好的生物相容性、親水性，被廣泛用來(lái)制備各種片劑、栓劑及滴眼液，和修飾藥物載體。是一種水溶性高分子材料，具備良好的生物相容性。經(jīng)聚7 二醇修飾，氧化石墨烯能穩(wěn)定存在于生理環(huán)境，并可避免網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的攝取，從而發(fā)揮長(zhǎng)循環(huán)作用，可攜帶藥物到達(dá)相應(yīng)的組織和器官。
[0004]小檗堿又稱黃連素。一種常見(jiàn)的異喹啉生物堿，分子式C20H18N04。臨床上主要用于治療治療胃腸炎、細(xì)菌性痢疾等疾病。大量的研究表明，小檗堿在體內(nèi)外均具有一定程度的抗腫瘤活性。
[0005]氧化石墨烯和PEG修飾氧化石墨烯是一種成本低廉的納米載體材料，可以通過(guò)hummers法等方法制備。張帥等利用聚乙二醇修飾的石墨烯材料探究了該材料在細(xì)胞和動(dòng)物體內(nèi)的行為，如細(xì)胞毒性、動(dòng)物體內(nèi)血液循環(huán)及生物分布等，并利用該材料對(duì)小鼠腫瘤進(jìn)行了熒光成像和光熱治療，見(jiàn)文獻(xiàn)(張帥，劉莊。石墨烯基納米材料的合成、表征及在生物中的應(yīng)用。[D]2012，蘇州大學(xué))。程興英等將抗腫瘤藥物鹽酸多柔比星裝載到氧化石墨烯上，載藥率高，并有緩釋性能，見(jiàn)文獻(xiàn)(徐興英，程江峰。氧化石墨烯的制備及其對(duì)鹽酸多柔比星的高效裝載和緩釋性能[J]。2011,`32(5):472-477)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]小檗堿作為一種季銨類化合物，由于口服吸收的阻礙，口服給藥血藥濃度無(wú)法達(dá)到有效濃度，因此將小檗堿進(jìn)行必要的化學(xué)修飾并制成靶向制劑將可以解決血藥濃度問(wèn)題，并且可以克服小檗堿對(duì)正常組織不必要的毒副作用。
[0007]本發(fā)明制備了一種氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物，用GO作為載體材料，鹽酸小檗堿主要通過(guò)J1-Ji作用裝載在GO上，形成納米級(jí)氧化石墨烯-小檗堿(GO-Ber)復(fù)合物。
[0008]這種新型的氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物，也可用G-P作為載體材料，鹽酸小檗堿主要通過(guò)J1-Ji作用裝載在G-P上，形成納米級(jí)PEG修飾的氧化石墨烯-小檗堿(G-P-Ber)復(fù)合物。
[0009]GO-Ber制備方法如下:[0010]將配置好的含 5 % DMSO 的 0.1mg / ml GO 水溶液 3ml 與 5 % DMSO 的 0.8mg /ml Ber的水溶液3ml混合均勻，置于搖床中(搖速:IOOrpm)，于25°C恒溫條件下孵育24h，5000rpm離心lh,沉淀用少量去離子水洗后即得。
[0011 ] G-P-Ber制備方法如下:
[0012]將配置好的0.1mg / ml G-P水溶液3ml與0.8mg / ml Ber的水溶液3ml混合均勻，置于搖床中(搖速:IOOrpm)，于25°C恒溫條件下孵育24h，5000rpm離心lh，沉淀用少量去離子水洗后即得。
[0013]制備得到的GO-Ber和G-P-Ber都是納米級(jí)，載藥率高。在體外釋藥實(shí)驗(yàn)良好，并且有緩釋性能。并且我們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)不同PH下的釋放有差別，這種PH依賴的特點(diǎn)對(duì)于腫瘤治療有重大意義，可以預(yù)見(jiàn)用這種新型的納米制劑，在成功解決小檗堿口服吸收差靶向性差上有巨大的潛力。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0014]圖1是G-P、GO、Ber, GO-Ber和G-P-Ber的紫外可見(jiàn)光譜圖。
[0015]圖2是GO-Ber和G-P-Ber在不同PH下的累積釋放曲線圖。
[0016]圖3a和圖3b分別是GO-Ber和G-P-Ber的TEM圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0017]對(duì)G-P、GO、Ber、GO-Ber 和 G-P-Ber 在 200_800nm進(jìn)行紫外分析，G-P 和 GO 在 350nm處吸收相對(duì)弱，而G-P-Ber、GO-Ber和Ber在350nm均有明顯吸收(如圖1)，證明GO-Ber和G-P-Ber的形成。對(duì)GO-Ber和`G-P-Ber進(jìn)行TEM分析，圖3a和3b明顯可見(jiàn)被氧化的GO邊緣褶皺，GO(GP)陰影表示負(fù)載在其上的Ber.[0018]實(shí)施例1
[0019]GO-Ber制備方法:將配置好的含5% DMSO的0.1mg / ml GO水溶液3ml與5%DMSO的0.8mg / ml Ber的水溶液3ml混合均勻，置于搖床中(搖速:IOOrpm),于25°C恒溫條件下孵育24h，5000rpm離心lh，沉淀用少量去離子水洗后即得GO-Ber復(fù)合物。上清液定容至100mL測(cè)吸光度，得到游離Ber，進(jìn)而求得載藥率92.9%，粒徑249.3±8.9nm。沉淀裝入半透膜中置于PH5.8和7.4的磷酸鹽緩沖液中釋放(如圖2)，累積釋放分別為90.3%和37.7%。
[0020]實(shí)施例2
[0021]G-P-Ber制備方法:將配置好的0.1mg / ml G-P水溶液3ml與0.8mg / ml Ber的水溶液3ml混合均勻，置于搖床中(搖速:100rpm)，于25°C恒溫條件下孵育24h，5000rpm離心lh，沉淀用少量去離子水洗后即得G-P-Ber復(fù)合物。上清液定容至100mL測(cè)吸光度，得到游離Ber，進(jìn)而求得載藥率60.9%，粒徑252.0±8.2nm。沉淀裝入半透膜中置于PH5.8和7.4的磷酸鹽緩沖液中釋放(如圖2)，累積釋放分別為88.4%和54.4%。
【權(quán)利要求】
1.一種氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物，其特征在于:氧化石墨烯(GO)作為載體，小檗堿(Ber)通過(guò)-Ji作用及靜電作用裝載在GO上,形成納米級(jí)GO-Ber結(jié)合物。
2.據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物，其特征在于:氧化石墨烯為連接有PEG的氧化石墨烯(G-P)，G-P作為載體，小檗堿(Ber)通過(guò)π - π作用及靜電作用裝載在G-P上,形成納米級(jí)G-P-Ber結(jié)合物。
3.一種制備如權(quán)利要求1所述的氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物的方法: 將配置好的含5% DMSO的0.1mg / ml GO水溶液3ml與含5% DMSO的0.8mg / ml Ber的水溶液3ml混合均勻，置于搖床中(搖速:IOOrpm)，于25°C恒溫條件下孵育24h，5000rpm離心lh，沉淀用少量去離子水洗后即得。
4.一種制備如權(quán)利要求2所述的氧化石墨烯小檗堿結(jié)合物的方法: 將配置好的0.1mg / ml G-P水溶液3ml與0.8mg / ml Ber的水溶液3ml混合均勻，置于搖床中(搖速:100rpm)，于25°C恒溫條件下孵育24h，5000rpm離心lh，沉淀用少量去離子水洗后即得。`
【文檔編號(hào)】A61P31/04GK103861119SQ201410116563
【公開(kāi)日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2014年3月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月26日
【發(fā)明者】余丹妮, 阮攀, 徐開(kāi)俊, 周建平 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)