一種雞屎藤提取物的制備方法及其應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種雞屎藤提取物的制備方法及其抗腫瘤應用。制備方法包括以下步驟:取雞屎藤干燥根莖粉碎,加入原料4~6倍的70~80%的甲醇溶液,連續(xù)逆流超聲提取1~2次,提取液濃縮后加入到大孔吸附樹脂中吸附,先用2~3BV的蒸餾水洗脫,再用4~6BV的70~80%的甲醇洗脫,收集洗脫液濃縮干燥即得雞屎藤提取物。本發(fā)明具有工藝簡單、得率高??蛇B續(xù)操作等優(yōu)點。經(jīng)藥效學評價,所得雞屎藤提取物對腫瘤細胞的生長具有明顯的抑制作用。將雞屎藤提取物與醫(yī)學上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物,藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域,具體涉及一種雞屎藤提取物的制備方法及其應用。 一種雞屎藤提取物的制備方法及其應用
【背景技術】
[0002] 雞屎藤為茜草科雞屎藤屬蔓生草本植物,藥食兼用,其又名雞矢藤、牛皮凍臭藤 等,其味甘酸、性平,有祛風活血、消食化積、止痛消腫的功效?,F(xiàn)在常用其根、葉、莖和果實 的提取物具有治療類風濕關節(jié)炎、牙痛、胸痛、痔瘡、脾臟感染的作用,并作為利尿劑和催吐 藥使用,雞矢藤新鮮葉還被用于熬湯及其他食物加工中?,F(xiàn)代藥理研究表明,雞矢藤具有鎮(zhèn) 痛、鎮(zhèn)靜、抑菌消炎等作用。
[0003] 通過文獻檢索,國內(nèi)尚未雞屎藤提取物用于制備抗腫瘤藥物。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 為滿足臨床需要,擴大用藥品種,更好地治療腫瘤疾病,本發(fā)明提供一種雞屎藤提 取物的制備方法及其抗腫瘤應用。
[0005] 為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明的技術方案如下: 取雞屎藤干燥根莖粉碎,置于連續(xù)逆流超聲提取器中,加入原料4飛倍的7(Γ80%的甲 醇溶液,控溫5(T60°C,重復提取廣2次,每次9(Tl20min ;提取液濃縮后加入到大孔吸附樹 脂中吸附,先用2~3BV的蒸餾水洗脫,再用4~6BV的7(Γ80%的甲醇洗脫,收集洗脫液濃縮干 燥即得雞屎藤提取物。
[0006] 所述的大孔吸附樹脂可選AB-8、HPD100、D-101中的一種。
[0007] 雞屎藤提取物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
[0008] 通過體外腫瘤細胞體外抑制試驗,觀察雞屎藤提取物的抗腫瘤作用,結(jié)果表明雞 屎藤提取物對腹水型S180、肝癌及黑色素瘤B16均有一定的抑制作用,具有顯著抗癌活性, 且其毒副作用小。
[0009] 本發(fā)明的有益效果通過以下實驗得到了驗證: 實驗方法: 1、 受試提取物:雞屎藤提取物 2、 細胞株:腹水瘤細朐株S180、肝癌細朐株BEL-7404及黑色素瘤細朐株B16。
[0010] 3、給藥劑量和方法 雞屎藤提取物組:l〇mg/kg/天,灌胃給藥,隔一天一次,共五天。
[0011] 陰性對照組:l〇mg/kg/天,生理鹽水肌注給藥,隔一天一次,共五天。
[0012] 陽性對照組:30mg/kg/天,5-氟尿嘧啶肌注給藥,隔一天一次,共五天。
[0013] 灌胃后2h,用HPLC檢測血漿藥物濃度。
[0014] 4、種植瘤模型的建立與給藥 (1)皮下種植:分別將上述細胞培養(yǎng)至90%融合,收集細胞,取2X10 6細胞懸液,注射 至小鼠肋下皮下組織,于術后15天取材,稱量瘤重。另取同樣模型,觀察30天,計算藥物對 模型動物存活率的影響。
[0015] (2)脾內(nèi)種植瘤肝轉(zhuǎn)移模型:取2 X 10 6細胞懸液注射至小鼠脾包膜內(nèi),于術后15 天取脾和肝臟,測量瘤重和肝轉(zhuǎn)移數(shù)。
[0016] (3)給藥方式:種植瘤細胞同時給藥。
[0017] 5、結(jié)果 結(jié)果如表1、表2和表3顯示,雞屎藤提取物組用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn) 移的作用,可延長實驗小鼠的生存期。
[0018] 表1雞屎藤提取物對種植瘤的抑制作用(n=20,
【權(quán)利要求】
1. 一種雞屎藤提取物的制備方法,其特征在于包括以下步驟:取雞屎藤干燥根莖粉 碎,置于連續(xù)逆流超聲提取器中,加入原料4飛倍的7(Γ80%的甲醇溶液,控溫5(T60°C,重復 提取1~2次,每次9(Tl20min ;提取液濃縮后加入到大孔吸附樹脂中吸附,先用2~3BV的蒸 餾水洗脫,再用4~6BV的7(Γ80%的甲醇洗脫,收集洗脫液濃縮干燥即得雞屎藤提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雞屎藤提取物的制備方法,其特征在于,所述的大孔吸 附樹脂可選AB-8、HPD100、D-101中的一種。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1~2所述方法制備的雞屎藤提取物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
【文檔編號】A61K125/00GK104083477SQ201410266337
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司