一種梧桐花揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種梧桐花的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用，制備方法包括以下步驟：將梧桐花陰干，粉碎，過20目篩，放入萃取缸進(jìn)行循環(huán)萃取，再通過分離釜減壓解析后收集萃取物，即可得到梧桐花揮發(fā)油。本發(fā)明方法耗時(shí)少，收率高，提取的成分也較多，防止了揮發(fā)油的氧化、熱解以及提高了揮發(fā)油的品質(zhì)。本發(fā)明方法所得到的揮發(fā)油具有較好的抗腫瘤活性，為開發(fā)應(yīng)用新一代天然來源的抗腫瘤藥物開拓了新的途徑。
【專利說明】一種梧桐花揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種梧桐花揮發(fā)油的制備方法及其應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]梧桐，又名青桐，屬梧桐科落葉喬木。其根、皮、葉和花都具有一定的藥用價(jià)值。梧桐花，性味甘平無毒，人肝、腎、肺三經(jīng)，有清熱解毒、祛風(fēng)除濕、利尿消腫等功效。主治水腫、禿瘡、燒燙傷等病癥。目前，國(guó)內(nèi)對(duì)梧桐子、葉和花粉的藥理作用均有研究，但關(guān)于梧桐花中揮發(fā)油的提取方法鮮有報(bào)道。研究表明，梧桐花揮發(fā)油化學(xué)成分較多，含有大量的烷烴類以及血卟啉和紫衫紫素，近些年來，不少學(xué)者對(duì)這兩種化合物進(jìn)行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)血卟啉主要用來治療惡性腫瘤等；紫衫紫素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用。因此，梧桐花揮發(fā)油具有很好的應(yīng)用價(jià)值，可應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品等行業(yè)。
[0003]現(xiàn)有提取梧桐花揮發(fā)油的報(bào)道并不多見，超臨界CO2萃取梧桐花揮發(fā)油成分，耗時(shí)少，收率高，提取的成分也較多，防止了揮發(fā)油的氧化、熱解以及提高了揮發(fā)油的品質(zhì)，且提取的揮發(fā)油無有機(jī)試劑，無毒副作用，可以直接用于食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種梧桐花揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用。
[0005]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種梧桐花揮發(fā)油的制備方法，其特征在于包括以下步驟:
a.將梧桐花陰干、粉碎，過40目篩，得到梧桐花粉末；
b.將梧桐花粉末放入萃取釜中，設(shè)置萃取壓力為25~35MPa、萃取溫度4(T50°C，分離釜I壓力10~15MPa、溫度30~40°C，分離釜II壓力5~lOMPa、溫度20~30°C，CO2流量為20~30kg/h ；
c.經(jīng)過2~3h的萃取，減壓去除CO2后收集萃取物，即可得到梧桐花揮發(fā)油。
[0006]本發(fā)明制備方法制得的梧桐花揮發(fā)油在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明制備方法制得的化合物進(jìn)行抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)表明:該化合物具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性，在天然新藥開發(fā)中具有良好的應(yīng)用前景。
[0008]本發(fā)明制得的梧桐花揮發(fā)油采用MTT法(四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法)進(jìn)行抗腫瘤活性測(cè)試。
[0009]試驗(yàn)用細(xì)胞株:
T-98和U251-SP:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株；HLE:人肝癌細(xì)胞株；^1_CB和HMV-1:人黑色素瘤細(xì)胞株。
[0010]方法:(1)0.25%胰酶消化對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，10%NBS的RPMI 1640調(diào)細(xì)胞濃度50000個(gè)/ml。96孔板10ul/孔。設(shè)溶劑對(duì)照，每組3平行孔。37°C，5%C0 2、95%空氣的培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)24h，棄上清。
[0011] (2)加藥物5個(gè)10倍稀釋的濃度(溶劑為有二甲亞砜和水)，為10 _4 mol/L。
[0012](3)細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)48h，每孔加入10 μ I 5mg/ml的MTT溶液(以無血清培養(yǎng)基配制)，繼續(xù)培養(yǎng)4h。
[0013](4)吸去上清。加入200μ1 DMS0，輕輕振蕩以使甲臜完全溶解。570nm處用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值。
[0014](5)計(jì)算抑制率(%)=(對(duì)照OD-藥物0D) /對(duì)照0D*100%
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:本發(fā)明化合物的抑制率以相對(duì)于對(duì)照(添加DMS0)的結(jié)果如下表1表示。
[0015]表1梧桐花揮發(fā)油的腫瘤細(xì)胞增值抑制率％

【權(quán)利要求】
1.一種梧桐花揮發(fā)油的制備方法，其特征在于包括以下步驟: a.將梧桐花陰干、粉碎，過40目篩，得到梧桐花粉末； b.將梧桐花粉末放入萃取釜中，設(shè)置萃取壓力為25~35MPa、萃取溫度4(T50°C，分離釜I壓力10~15MPa、溫度3(T40°C，分離釜II壓力5~lOMPa、溫度2(T30°C，CO2流量為20~30kg/h ； c.經(jīng)過2~3h的萃取，減壓去除CO2后收集萃取物，即可得到梧桐花揮發(fā)油。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法制得的梧桐花揮發(fā)油在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK104069138SQ201410266749
【公開日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司